显微镜种类及使用方法

显微镜的种类及其使用方法

一、光学显微镜

光学显微镜是一种精密的光学仪器。当前使用的显微镜由一套透镜配合，因而可选择不同的放大倍数对物体的细微结构进行放大观察。普通光学显微镜通常能将物体放大1500～2000 倍(最大的分辨力为0.2μm)。

（一）光学显微镜的基本结构（附图1）

1．光学部分包括目镜、物镜、聚光器和光源等。

（1）目镜通常由两组透镜组成，上端的一组又称为“接目镜”，下端的则称为“场镜”。两者之间或在场镜的下方装有视场光阑（金属环状装置），经物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面上，所以其上可加置目镜测微尺。在目镜上方刻有放大倍数，如10×、20×等。按照视场的大小，目镜可分为普通目镜和广角目镜。有些显微镜的目镜上还附有视度调节机构，操作者可以对左右眼分别进行视度调整。另有照相目镜(NFK)可用于拍摄。

（2）物镜由数组透镜组成，安装于转换器上，又称接物镜。通常每台显微镜配备一套不同倍数的物镜，包括：①低倍物镜：指1×～6×；

②中倍物镜：指6×～25×；

③高倍物镜：指25×～63×；④油浸物镜：指90×～100×。

其中油浸物镜使用时需在物镜的下表面和盖玻片的上表面之间填充折射率为

1.5 左右的液体（如香柏油等），它能显著地提高显微观察的分辨率。其他物镜则直接使用。观察过程中物镜的选择一般遵循由低到高的顺序，因为低倍镜的视野大，便于查找待检的具体部位。显微镜的放大倍数，可粗略视为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。

（3）聚光器由聚光透镜和虹彩光圈组成，位于在载物台下方。聚光透镜的功能是将光线聚焦于视场范围内；透镜组下方的虹彩光圈可开大缩小，以控制聚光器的通光范围，调节光的强度，影响成像的分辨力和反差。使用时应根据观察目的，配合光源强度加以调节，得到最佳成像效果。

（4）光源较早的普通光学显微镜借助镜座上的反光镜，将自然光或灯光反射到聚光器透镜的中央作为镜检光源。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成。不用聚光器或光线较强时用凹面镜，凹面镜能起会聚光线的作用；用聚光器或光较弱时，一般都用平面镜。新近出产的显微镜一般直接在镜座上安装光源，并有电流调节螺旋，用于调节光照强度。光源类型有卤素灯、钨丝灯、汞灯、荧光灯、金属卤化物灯等。

显微镜的光源照明方法分为两种：透射型与反射(落射)型。前者是指光源由下而上通过透明的镜检对象；反射型显微镜则是以物镜上方打光到(落射照明)不透明的物体上。

2. 机械部分包括镜座、镜柱、镜壁、镜筒、物镜转换器、载物台和准焦螺旋等。

（1）镜座基座部分，用于支持整台显微镜的平稳。

（2）镜柱镜座与镜臂之间的直立短柱，起连接和支持的作用。

（3）镜臂显微镜后方的弓形部分，是移动显微镜时握持的部位。有的显微镜在镜臂与镜柱之间有一活动的倾斜关节，可调节镜筒向后倾斜的角度，便于观察。

（4）镜筒安装在镜臂先端的圆筒状结构，上连目镜，下连接物镜转换器。显微镜的国际标准筒长为160 mm，此数字标在物镜的外壳上。

（5）物镜转换器镜筒下端的可自由旋转的圆盘，用于安装物镜。观察时通过转动转换器来调换不同倍数的物镜。

（6）载物台镜筒下方的平台，中央有一圆形的通光孔。用于放置载玻片。载物台上装有固定标本的弹簧夹，一侧有推进器，可移动标本的位置。有些推动器上还附有刻度，可直接计算标本移动的距离以及确定标本的位置。

（7）准焦螺旋装在镜臂或镜柱上的大小两种螺旋，转动时可使镜筒或载物台上下移动，从而调节成像系统的焦距。大的称为粗准焦螺旋，每转动一圈，镜筒升降10mm；小的为细准焦螺旋，转动一圈可使镜筒仅升降0.1mm。一般在低倍镜下观察物体时，以粗准焦螺旋迅速调节物像，使之位于视野中。在此基础上，或在使用高倍镜时，用细准焦螺旋微调。必须注

意，一般显微镜装有左右两套准焦螺旋，作用相同，但切勿两手同时转动两侧的螺旋，防止因双手力量不均产生扭力，导致螺旋滑丝。

（二）普通光学显微镜的基本成像原理

光线→（反光镜）→遮光器→通光孔→镜检样品（透明）→物镜的透镜（第一次放大成倒立实像）→镜筒→目镜（再次放大成虚像）→眼。

（三）普通光学显微镜的使用过程

1．镜检前的准备室内应清洁而干燥，实验台台面水平，稳固无震动，显微镜附近不应放置腐蚀性的试剂。从显微镜柜或镜箱内取出显微镜时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地取出，放置在实验台桌面上，置于操作者左前方，距实验台边缘约10cm，镜臂朝自己，镜筒朝前。实验台右侧放绘图用具。

2．调节光源如需利用外置光源，宜采用散射的自然光或柔和的灯光。直射的太阳光会对观察者的眼睛造成伤害。转动转换器，使低倍镜正对通光孔，将聚光器上的虹彩光圈开到最大，观察目镜中视野亮度，同时调节反光镜角度，使光照达到最明亮最均匀。自带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮来调节光照的强弱。

3．装置待检玻片将待观察的样品制作成临时或永久装片，放在载物台上，用弹簧夹固定，有盖玻片的一面朝上。移动推进器，调节待检样品至通光孔的中心。

4．低倍镜观察将低倍镜对准通光孔，缓缓转动粗准焦螺旋，将物镜与装片的距离调至最近。注意不要压碎盖玻片。通过目镜观察，同时用粗准焦螺旋缓慢调节，直至物像出现，再用细准焦螺旋微调，同时调节光源亮度与虹彩光圈的大小，使物像达到最清晰的程度。并利用推进器把需要进一步放大观察的部分移至视野中央。如果使用双筒目镜，应在观察前先调整双筒距离，使两眼视场合并。

5．高倍镜观察转动转换器，选择较高倍数的物镜，用细准焦螺旋调节焦距，到物像清晰为止。

6．油镜观察油浸物镜的工作距离（指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离）很短，一般在0.2 mm 以内，且一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”，因此使用油浸物镜时，调焦速度必须放慢，避免压碎玻片，并使物镜受损。

（1）在低倍镜下找到观察目标，中、高倍镜下逐步放大，将待观察部位置于视野中央，调节光源和虹彩光圈，使通过聚光器的光亮达到最大。

（2）转动粗准焦螺旋，将镜筒上旋（或将载物台下降）约2 cm，加一小滴香柏油于玻片的镜检部位上。

（3）将粗准焦螺旋缓缓转回，同时注意从侧面观察，直至油镜浸入油滴，镜头几乎与标本接触。

（4）从目镜中观察，用细准焦螺旋微调，直至物象清晰。

（5）镜检结束后，将镜头旋离玻片，立即清洁镜头。一般先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油滴。再用擦镜纸蘸少许乙醚酒精混合液（2：3），擦去残留油迹，最后再用干净的擦镜纸擦净（注意向一个方向擦拭）。

7．还原显微镜关闭内置光源并拔下电源插头，或使反光镜与聚光器垂直。旋转物镜转换器，使物镜头呈八字形位置与通光孔相对。再将镜筒与载物台距离调至最近，降下聚光器。罩上防尘罩，将显微镜放回柜内或镜箱中。

二、几种特殊的光学显微镜

（一）暗视野显微镜

暗视野显微镜不具备观察物体内部的细微结构的功能，但可以分辨

0.004μm 以上的微粒的存在和运动。因而常用于观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。暗视野显微镜的基本原理是丁达尔效应。当一束光线透过黑暗的房间，从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”，这种现象即丁达尔效应。暗视野显微镜在普通的光学显微镜上换装暗视野聚光镜后，由于该聚光器内部抛物面结构的遮挡，照射在待检物体表面的光线不能直接进入物镜和目镜，仅散射光能通过，因而视野是黑暗的。操作者通过目镜观察到的，是检物体的衍射光图像（附图12）。

暗视野显微镜的基本使用方法如下：

1．安装暗视野聚光器（或用厚实的黑纸片制成遮光板，放在普通显微镜的聚光器下方，也能得到暗视野效果）。

2．选用强光源，一般用显微镜灯照明，以防止直射光线进入物镜。

3．在聚光器和玻片之间加一滴香柏油，避免照明光线于聚光镜上进行全反射，达不到被检物体，而得不到暗视野照明。

4．进行中心调节，即水平移动聚光器，使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上。升降聚光器，将聚光镜的焦点（图2 中圆锥光束的顶点）对准待检物。

5．选用与聚光器相应的物镜，调节焦距，按普通显微镜的方法操作。

（二）体视显微镜

体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜，其成像为正立三维的空间影像，并具有立体感强、成像清晰宽阔、长工作距离（通常为110 mm）以及连续放大观看等特点。生物学上常用于解剖过程中的实时观察（附图13）。

普通光学显微镜的光源为平行光，因而形成的是二维平面影像；而体视显微镜采用双通道光路，双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角体视角（一般为 12o15o），因而能形成三维

空间的立体图像。体视显微镜与普通光学显微镜的使用方法相近，但更为便捷。二者的主要区别在于：

1.体视显微镜的镜检对象可不必制作成装片。

2.体视显微镜载物台直接固定在镜座上，并配有黑白双面板或玻璃板，操作者可根据镜检的对象和要求加以选择。

3. 体视显微镜的成像是正立的，便于解剖操作。

4. 体视显微镜的物镜仅一只，其放大倍数可通过旋转调节螺旋连续调节。

（三）荧光显微镜

荧光显微镜是利用细胞内物质发射的荧光强度对其进行定性和定量研究的一种光学工具。细胞内的荧光物质物质有两类，一类直接经紫外线照射后即可发荧光，如叶绿素等；另有一些物质本身不具这一性质，但如果以特定的荧光染料或荧光抗体染色，经紫外线照射后亦可发荧光（附图1-4）。

荧光显微镜的原理为利用一个高发光效率的点光源（如超高压汞灯），经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650λ或紫蓝光4200λ)作为激发光，激发标本内的荧光物质发射出各色的荧光后，再通过物镜后面的阻断(或压制)滤光片的过滤，最后经由目镜的放大作用加以观察。阻断滤光片的作用有二：一是吸收和阻挡激发光进入目镜以免干扰荧光和损伤眼睛；二是选择并让特定的荧光透过，表现出专一的荧光色彩。

荧光显微镜按照光路原理可分为两种：

1．透射式荧光显微镜较为旧式的荧光显微镜，其激发光源通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光。其优点是低倍镜时荧光强，而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱。所以它仅适用于观察较大的标本材料。

2．落射式荧光显微镜激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜(附图1-5)。

光路中需加上一个双色束分离器（分色镜），它与光轴呈45o 角，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，返回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片／双色束分离器／阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀，成像清晰，放大倍数愈大荧光愈强。

（四）相差显微镜

相差显微镜是能将光通过物体时产生的相位差（或光程差）转变为振幅（光强度）变化的显微镜。主要用于观察活细胞、不染色的组织切片或缺少反差的染色标本。人眼只能鉴别可见光的波长（颜色）和振幅的变化，不能鉴别相位的变化。而大多数生物标本高度透明，光波通过后振幅基本不变，仅存在相位的变化。相差显微镜基本把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差（见图6）。

从结构上看，相差显微镜与普通光学显微镜不同之处在于：

1．环形光阑具有环形开孔的光阑，安装在光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，聚焦到标本上。

2．相位板相差显微镜在物镜内部增加了涂有氟化镁的相位板，作用是将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。相板上有两个区域，直射光通过的部分叫“共轭面”，衍射光通过的部分叫“补偿面”。相位板按工作效果分为两种类型：

（1）A+相板：将直射光推迟1/4λ，两组光波合轴后光波叠加，振幅加大，标本结构比周围介质更加明亮，形成亮反差（或称负反差）。

（2）B+相板：将衍射光推迟1/4λ，两组光线合轴后光波相减，振幅变小，标本结构比周围介质更加暗淡，形成暗反差（或称正反差）。带有相板的物镜叫相差物镜，常在物镜外壳上标以“Ph”字样。

3．合轴调节望远镜

相差显微镜配备有一个合轴调节望远镜（在外壳上标有“CT”符号），用于调节环状光阑的像与相板共轭面完全吻合，以便实现对直射光和衍射光的特殊处理。使用时拨去一侧目镜，插入合轴调节望远镜，调节合轴调节望远镜的焦点，视野中会呈现两个圆环，分别是明亮的环状光阑圆环与较暗的相板上共轭面圆环。再转动聚光器上的环状光阑的两个调节螺旋，使两环完全重叠。如明亮的光环过小或过大，可调节聚光器的升降旋钮，使两环完全吻合。如果聚光器已升到最高点或降到最低点而仍不能矫正，说明玻片太厚了，应更换。调好后即可取下合轴调节望远镜，换回目镜。

4．绿色滤光片

用于调整光源的波长。照明光线的波长不同，会引起相位的变化，为了获得良好的相差效果，相差显微镜要求使用波长范围比较窄的单色光，通常是用绿色滤光片来调整。相差显微镜的使用步骤如下：

① 根据待检标本的性质及要求，挑选适合的相差物镜。

② 将标本玻片放到载物台上，进行光轴中心的调整。

③ 使用合轴调节望远镜，调整环状光阑与相板上的共轭面圆环完全重叠吻合后，换回目镜。在观察过程中，每次更换物镜倍数时，必须重新进行环状光阑与相板共轭面圆环吻合的调整。

④ 加绿色滤光片，按普通光学显微镜的操作步骤进行观察。

（五）倒置显微镜

倒置显微镜的结构和普通显微镜基本相同，只不过物镜与照明系统位置交换，前者在载物台之下，后者在载物台之上。主要用于观察培养的活细胞，需配制相差物镜。

（六）偏光显微镜

偏光显微镜可用于检测具有双折射性的物质，如染色体、胶原、纤维丝等（附图1-7）

和普通显微镜不同的是：

① 偏光显微镜光源前配备偏振镜（起偏器），使进入显微镜的光线为偏振光。

② 镜筒中有检偏振镜（检偏器，一个偏振方向与起偏器垂直的的起偏器）。

③ 使用旋转载物台。当载物台上放入单折射的物质时，无论如何旋转载物台，由于两个偏振片是垂直的，显微镜里看不到光线，而放入双折射性物质时，由于光线通过这类物质时发生偏转，因此旋转载物台便能检测到这种物体。

④ 配备补偿器或相位片；

⑤ 使用专用无应力物镜。

三、电子显微镜

电子显微镜是利用高速运动的电子束来代替光波的一种显微镜。光学显微镜下只能清楚地观察大于0.2 μm 的结构。而小于0.2 μm 的结构称为亚显微结构（submicroscopic structures）或超微结构（ultramicroscopic structures；ultrastructures）。要想看清这些更为细微的结构，就必须选择波长更短的光源，以提高显微镜的分辨率。电子束的波长要比可见光和紫外光短得多，并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比，也就是说电压越高波长越短。因此电子显微镜的分辨率远高于光学显微镜，目前可达0.2 nm，放大倍数可达80 万倍。电子显微镜的基本要结构包括镜筒、真空系统和电源柜三部分。镜筒主要由电子枪、电子透镜、样品架、荧光屏和照相机构等部件，自上而下地装配成一个柱体；真空系统包括机械真空泵、扩散泵和真空阀门三部分，并通过抽气管道与镜筒相联接；电源柜由高压发生器、励磁电流稳流器和各种调节控制单元组成。电子透镜是电子显微镜镜筒中的关键部件。现代电子显微镜大多采用电磁透镜，由稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。电子枪的作用是发射并形成速度均匀的电子束，由灯丝（阴极）、栅极和阳极（加速极）构成。阴极管发射的电子通过栅极上的小孔形成射线束，经阳极电压加速后射向聚光镜，起到对电子束加速、加压的作用。使用中加速电压的稳定度要求不低于万分之一。电子显微镜按结构和用途可分为透射式电子显微镜、扫描式电子显微镜、反射式电子显微镜和发射式电子显微镜等。其中生物学研究中使用最为广泛的是透射式和扫描式电子显微镜。前者常用于观察那些用普通显微镜所不能分辨的细微物质结构；后者主要用于观察固体表面的形貌。

（一）透射式电子显微镜

透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）的组件包括：

1. 电子枪发射电子，由阴极、栅极、阳极组成。

2. 聚光透镜即电子透镜，将电子束聚集，可用于控制照明强度和孔径角。

3. 样品室放置待观察的样品，并装有旋转台，用以改变试样的角度，还有装配加热、冷却等设备。

4. 物镜为放大率很高的短距透镜，作用是放大电子像。物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像质量的关键。

5. 中间镜为可变倍的弱透镜，作用是对电子像进行二次放大。通过调节中间镜的电流，可选择物体的像或电子衍射图来进行放大。

6. 透射镜为高倍的强透镜，用将二次放大后的中间像进一步放大后在荧光屏上成像。

7. 二级真空泵对样品室抽真空。

8．照相装置用以记录影像。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100 nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。通常用薄切片法或冷冻蚀刻法制备：

（1）薄切片法通常以锇酸和戊二醛固定样品，以环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片，切片厚度20～50 nm，采用重金属盐染色，以增大反差。

（2）冷冻蚀刻法亦称冰冻断裂法。将标本置于100?C 的干冰或196?C 的液氮中冰冻后，以冷刀急速断开标本。断裂的标本升温后，冰在真空条件下迅即升华，暴露出断面结构，称为蚀刻。蚀刻完成后，向断面以45o 角喷涂一层蒸气铂，再以90o 角喷涂一层碳，加强反差和强度。然后用次氯酸钠溶液消化样品，剥下碳和铂的膜，称为复膜，能显示标本蚀刻面的形态。在电镜下观察得到的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。

（二）扫描式电子显微镜

扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM）于20 世纪60 年代问世，目前分辨力可达6～10 nm。其工作原理是由电子枪发射的精细聚焦电子束经两级聚光镜、偏转线圈和物镜射到样品上，扫描样品表面并激发出次级电子，次级电子的产生量与电子束入射角有关，即与样品的表面结构有关。次级电子经探测体收集后，由闪烁器转换为光信号，再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象，反映了标本的表面结构。扫描电镜的标本在检验前，需进行固定、脱水处理，再喷涂上一层重金属微粒，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。

光学显微镜的结构与使用方法

光学显微镜的结构与使用方法 【目的要求】 1、熟悉光学显微镜的主要构造及其性能。 2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。 3、初步掌握油镜的使用方法。 4、了解光学显微镜的维护方法。 【实验原理】 光学显微镜(light microscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器，它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途，是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。 光学显微镜简称光镜，是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。目前使用的光镜种类繁多，外形和结构差别较大，有些类型的光镜有其特殊的用途，如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜，倒置显微镜等，但其基本的构造和工作原理是相似的。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成，而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。 光镜是如何使微小物体放大的呢？物镜和目镜的结构虽然比较复杂，但它们的作用都是相当于一个凸透镜，由于被检标本是放在物镜下方的1～2倍焦距之间的，上方形成一倒立的放大实相，该实相正好位于目镜的下焦点（焦平面）之内，目镜进一步将它放大成一个虚像，通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处，在视网膜上形成一个直立的实像。显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的，该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。 分辨力是光镜的主要性能指示。所谓分辨力(resolving power)也称为辨率或分辨本领，是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力，即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。据测定，人眼的分辨力约为100 μm。显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定，物镜的分辨力就是显微镜的分辨力，而目镜与显微镜的分辨力无关。光镜的分辨力（R）（R值越小，分辨率越高）可以下式计算： 这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率（空气为1、油为1.5）； 为标本对物镜镜口张角的半角，sin的最大值为1； 为照明光源的波长（白光约为0.5m）。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数，一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 一、光学显微镜的基本构造及功能 （一）机械部分 1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。根据镜筒的数目，光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角，在其镜筒中装有能使光线折转45度的棱镜。

一显微镜的构造及使用方法

实验一显微镜的构造及使用方法 一、目的要求 1.了解显微镜的构造、性能及成像原理。 2.掌握显微镜的正确适用及维护方法。 二、实验器材 1.显微镜、纱布、绸布 2.酵母菌示教标本 三、普通光学显微镜简介 微生物的最显著的特点就是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。 显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括：明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同，只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。 图1-1 显微镜构造 1.目镜 2.镜筒 3. 转换器 4. 物镜 5. 载物台 6. 聚光器 7. 虹彩光圈 8. 聚光镜调节钮9.反光镜10. 底座11. 镜臂12. 标本片移动钮 13. 细调焦旋钮14. 粗调焦旋钮15.电源开关16.光亮调节钮17.光源 1.机械系统： （1）镜座Base：在显微镜的底部，呈马蹄形、长方形、三角形等。 （2）镜臂Arm：连接镜座和镜筒之间的部分，呈圆弧形，作为移动显微镜时的握持部分。 （3）镜筒Tube：位于镜臂上端的空心圆筒，是光线的通道。镜筒的上端可插入接目镜，下面可与转换器相连接。镜筒的长度一般为160mm。显微镜分为直筒式和斜筒式； 有单筒式的，也有双筒式的。 （4）旋转器Nosepiece：位于镜筒下端，是一个可以旋转的圆盘。有3~4个孔，用于安

(完整word版)初中显微镜结构及使用

显微镜的结构： 1.目镜 a.显微镜的光学部分 b.作用：放大物象 c.镜头上标有放大倍数 注：目镜越短,放大倍数越大。 2. 物镜 a.显微镜的光学部分 b.作用：放大物象 c.镜头上标有放大倍数 d.有低倍物镜、高倍物镜两种 注：物镜越长,放大倍数越大。 放大倍数=物镜倍数×目镜倍数 3. 反光镜 a.显微镜的照明部分 b.作用：反射光线 c.有平面镜、凹面镜两种 注：光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜。 4. 遮光器 a.显微镜的照明部分 b.作用：调节通光量 注：光圈越大，视野会变得越亮 5. 粗准焦螺旋 a.显微镜的机械部分 b.作用：升降镜筒，升降幅度较大 注：向内(后)旋转时镜筒大幅度上升，向外(前)旋转时镜筒大幅度下降 6. 细准焦螺旋 a.显微镜的机械部分 b.作用：升降镜筒，升降幅度较小 注：向内(后)旋转时镜筒小幅度上升，向外(前)旋转时镜筒小幅度下降 找象用粗准焦螺旋，找清晰的象用细准焦螺旋。

显微镜的使用： 1、安放 将显微镜放在接近光源、靠体前略偏左的地方，镜筒在前，镜臂在后。 2、对光 ①转动物镜转换器，使低倍镜正对通光孔，距载物台约1-2厘米的距离。 ②转动遮光器，让一个较大光圈对准通光孔。 ③让左眼朝目镜里注视，同时调节反光镜，直至从目镜里看到一个白色明亮的圆形视野。 3、放片 将载玻片标本放在载物台上，标本正对通光孔中心，使用压片夹压住载玻片两端。 4、调焦 ①两眼从侧面注视物镜，向前转动粗准焦螺旋,将物镜降至靠近标本左右时停止。 ②用左眼朝目镜里观察，同时向后转动粗准焦螺旋，缓慢上升镜筒，直到视野中出现物象，再用细准焦螺旋调节。 5、观察 ①先将低倍镜下找到所观察的物象，移到视野正中央。 ②后高倍镜观察。转动转换器，使高配镜对准通光孔。调节反光镜和光圈，使光照明亮，再微微调节细准焦螺旋，直到物象清晰。 注：物像的移动方向与载玻片(物)的移动方向相反。象与物体上下左右都相反（倒像）。6、整理 （1）上升镜筒，物镜呈“八”字形朝前下降镜筒 （2）关掉集光器，垂直反光镜。 （3）装入箱子，放在桌子左边。 使用注意事项： 1、取送显微镜时，应右手握住镜臂，左手托住镜座，轻拿轻放。切勿用一只手斜提，前后摆动，防止目镜滑出跌落。 2、揩试目镜、物镜和反光镜上的灰尘或污物，必须使用专用的擦镜纸。切勿用手指、手帕、纱布和普通纸擦。 3、镜头的切换一定要使用转换器，以免使光轴发生弯曲或弄脏镜头。 4、镜检时，如有必要使镜筒倾斜，注意倾斜角度不能超过45，以免整个镜体重心不稳而翻倒。 5、转动粗、细准焦螺旋时，不要用力过猛，以防止机件损伤，调节失灵。 6、镜检时，坐姿端正，一般用左眼观察物象，用右眼看着实验报告纸画图。两眼须同时睁开，以减少疲劳。 7、切忌一面从目镜进行观察，一面使镜筒下降，这样容易使物镜与玻片标本碰撞而损坏；也不能持续转动粗准焦螺旋，使镜筒一直上升，这样会使镜筒内的齿板和齿轮脱钩，以致镜筒跌出。

必修一显微镜的结构和使用方法

显微镜的结构和使用方法 普通光学显微镜简介 显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括：明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同，只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。 一、显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。 (斜筒式光学显微镜) 1.物镜转换器 2. 接物镜 3.游标卡尺 4.载物台 5.聚光器 6. 彩虹光阑 7.光源 8. 镜座 9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器11.粗调螺旋 12. 微调螺旋 13. 镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋 1、机械系统 （1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。 （2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。 （3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。 （4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。 （5）物镜转换器(旋转器)简称“旋转器”：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行 观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。转换物镜后，不允许使用粗调节器，只能用细调节器，使像清晰。 （6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。 （7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。 ①粗调节器(粗准焦螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物像呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物像。 ②细调节器(细准焦螺旋)：小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物像，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。 2、光学系统 显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光器四个部件。 （一）物镜：物镜是决定显微镜性能的最重要部件，安装在物镜转换器上，接近被观察的物体，故叫做物镜或接物镜。 1．物镜的分类 ① 物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜；其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜（常用放大倍数为90—100倍）。 ② 根据放大倍数的不同可分为 低倍物镜（10倍以下）、中倍物镜（20倍左右）高倍物镜（40—65倍） 。 2、物镜的主要参数：放大倍数、数值孔径和工作距离。 ①、 放大倍数是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。例：放大倍数为100×，指的是长度是1μm 的标本，放大后像的长度是100μm ，要是以面积计算，则放大了10,000倍。物镜的长度越长，放大倍数越大，反之亦然。 ②、数值孔径也叫镜口率，简写NA 或A ，是物镜和聚光器的主要参数，与显微镜的分辨力成正比。干燥物镜的数值孔径为0.05-0.95，油浸物镜（香柏油）的数值孔径为1.25。 ③、工作距离是指当所观察的标本最清楚时物镜的前端透镜下面到标本的盖玻片上面的距离。物镜的工作距离与物镜的焦距有关，物镜的焦距越长，放大倍数越低，其工作距离越长。例：10倍物镜上标有10/0.25和160/0.17，其中10为物镜的放大倍数；0.25为数值孔径；160为镜筒长度（单位mm ）；0.17为盖玻片的标准厚度（单位 mm ）。10倍物镜有效工作距离为6.5mm ，40倍物镜有效工作距离为0.48mm 。 （二）目镜：因为它靠近观察者的眼睛，因此也叫接目镜。安装在镜筒的上端。 1．目镜的结构 通常目镜由上下两组透镜组成，上面的透镜叫做接目透镜，下面的透镜叫做会聚透镜或场镜。上下透镜之间或场镜下面装有一个光阑（它的大小决定了视场的大小），因为标本正 直筒式光学显微镜 斜筒式光学显微镜

光学显微镜的使用步骤和维护保养

光学显微镜的使用步骤和维护保养 一、操作步骤和注意事项 （一）正置显微镜 1、安放右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧，距离桌边3～4厘米处。 2、清洁检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。 3、对光镜筒升至距载物台1～2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。 4、安装标本将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。 5、调焦调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。若使用双筒显微镜，如观察者双眼视度有差异，可靠视度调节圈调节。另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。 6、观察若使用单筒显微镜，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外，虹彩光圈的调节也十分重要。 （1）低倍镜观察观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。 （2）高倍镜观察从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。转动物镜转换器时，不可用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，转换器螺纹受力不均匀而破坏，最后导致转换器就会报废。（3）油镜的观察先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。 7、结束操作观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，反光镜要竖立，降下镜筒，擦抹干净，并套上镜套。若使用的是带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯。 （二）倒置显微镜倒置显微镜与正置显微镜的主要区别在于物镜位于载物台下方，这样有利于观察时在上方对样品进行一些实时操作。 倒置显微镜操作过程基本与双筒的正置显微镜相似，需注意以下几点：观察时可调节铰链式双目目镜至舒适的位置。组织培养液或水溅到载物台上、物镜上或显微镜镜架上可能会损伤设备。如果溅上后，应该立即从墙上插座拔下电源线，擦去溅出液或水。一定要轻柔转动光强调节钮，不要试图将旋钮转过终点位置。使用后一定要先将灯的强度调至最小再关电源。使用后要旋转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。 （三）实体显微镜又称体视显微镜或解剖显微镜。操作步骤基本和双筒正置显微镜类似：取用解剖镜时，移动需用双手，保持稳重。若需连镜箱搬动，应将镜箱锁好，同时镜箱的钥匙必须拔除。镜管上若有防尘罩，应取下并换上目镜及眼罩。将样品置于玻片上或蜡盘中再放到载物盘上待观察。拧开锁紧螺丝，把镜

显微镜结构及使用方法

显微镜的结构图和使用方法 2016-02-23 发布者：admin 高倍率或复合式显微镜比立体或低倍率显微镜的放大倍率达到更高的水平。它是用来查看不能被看见的放大倍率在较低的水平，更小的标本，如细胞结构。从本质上讲，一个复合式显微镜的结构和光学组件的组成。然而，在这两个基本制度，也有一些每个显微镜的重要组成部分，应该知道和理解。这些关键的显微镜配件图示说明如下。 显微镜的结构组件 这三种基本结构部件的复合显微镜观察头、底座和镜臂。 ?观察头/体安置在显 微镜上部的光学部件 ?显微镜底座支持显微 镜，并设有照明 ?镜臂的基极和连接到 支持的显微镜观察头。 它也可以用来进行观察 显微镜。 当背着一个复合式显微 镜来抬它由两个臂和底 座，同时始终照顾。 显微镜的结构图和使用 方法 显微镜的结构 光学元件 有两种复式显微镜目镜和物镜的光学系统： 目镜或眼先看你是什么，通过在显微镜的顶部。通常情况下，标准的目镜有10倍放

大镜权力。可选目镜不同权力，通常是从5X-30X。 目镜筒持有目镜物镜以上的地方。双目显微镜头通常集成了屈光度调节环，允许在一个或两个眼睛的视力，我们可能不一致。单眼（单眼使用）显微镜不需要屈光度。旋转双目显微镜（瞳距调节）允许不同的个人的眼睛之间的距离不同。 物镜的显微镜的的主光学透镜上。它们的范围从4倍到100倍，通常包括三个，四个或五个镜片上大多数显微镜。物镜可以向前或后面对。 消防水枪安置的物镜。物镜是暴露的，被安装在一个旋转的转塔，所以可以很方便地选择不同的物镜。标准的物镜包括：4X，10X，40X和100X，虽然不同功率的物镜是。 粗微调焦旋钮用于聚焦显微镜。越来越多，他们是同轴旋钮 - 也就是说它们都是建立在同一轴线上的微调旋钮在外面。同轴调焦旋钮都比较方便，因为观看者不一定要摸索不同的旋钮。 载物台是被放置在要观看的试样。的标本幻灯片需要细腻的动作放大倍率越高，工作时所使用的机械载物台。 使用时，有没有机械载物台，载物台夹片器。观众需要手动移动幻灯片查看不同部分标本。 光圈中的孔，通过该阶段的基极（传送）的光到达的阶段。 照明灯是在显微镜的光源，通常位于显微镜底座。大多数光学显微镜使用低电压卤素灯泡与连续可变照明控制的位于基地内。 聚光镜是用来收集从所述照射器的光聚焦在试样上。它位于下阶段，常在结合有可变光圈。 可变光阑控制到达试样的光的量。它位于上方的聚光镜级以下的级。大多数高品质的显微镜包括阿贝聚光镜有可变光圈。使用时，它们控制的重点和施加在试样上的光的数量。 聚光镜对焦旋钮移动向上或向下的聚光镜对试样来控制照明的重点。 放大 你的显微镜具有3种放大：聚焦，低和高。每一个物镜将写入放大倍率。除了这个， 显微镜的结构图和使用方法 显微镜的使用方法 一般步骤

显微镜的结构和使用教学设计

第一节显微镜的结构和使用教学设计 连云港海头初级中学朱文娟 一、教学目标 1．通过学习显微镜各部件的名称、作用和方法，认识显微镜的结构。 2.学会正确规范使用显微镜的步骤、方法，发展实验能力。 3．通过对本节内容的学习，在科学态度、科学方法的熏陶中，树立初步的科学意识。 二、教学重难点 1. 重点：认识显微镜的结构，掌握显微镜的使用步骤。 2. 难点：规范使用显微镜，并能观察到清晰的物象。 三．学情分析 本次授课对象是刚接触生物实验的七年级学生,本节课内容学习显微镜的结构和使用。由于本节课内容涉及较深的动手能力，故在教学中，通过启发式教学，设置大量的问题情境，来激发学生的学习兴趣和进一步培养他们的实验能力和科学意识。 四、教学过程 1、导入新课 教师活动：地球上的生物虽然种类繁多，但是除病毒以外，生物体都是由细胞构成的。可是，细胞的体积很小，我们怎样才能观察到它呢？聪明的人类为了解决这个问题，而发明创造了显微镜这种专门用来观察细胞结构和功能的仪器。我们这节课就来认识一下显微镜及其使用方法。 2、讲授新课 活动一：显微镜的结构 通过挂图和实物相结合的方法对显微镜的结构进行细致的讲授。具体从机械部分、照明部分和光学部分三方面讲述各部分结构和功能。 活动二：显微镜的使用 通过具体实验来讲授显微镜的实验步骤，在讲述各步骤时以启发学生思考为主，强调个步骤中需要注意的事项。

a．取镜和放置：取出时，右手紧握镜臂，左手托住镜座，将显微镜放在左肩前方的位置。（学生思考原因） b．对光：用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使用低倍镜对准镜台的通光孔（听到碰扣声时以对准）。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼观察（右眼打开），同时调节反光镜方向，直到视野中光线均匀明亮为止。（学生思考为什么是先用低倍镜观察） c．放置装片：取装片于载物台上（切记是有盖玻片的一面朝上），用推片器弹簧夹住，然后旋转退片器螺旋，将索要观察的部分调到通光孔中央。 d．低倍镜观察：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着载物台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使载物台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动装片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，载物台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升载物台。 e．高倍镜观察：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。 转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞装片)，如高倍镜头碰到装片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 调节焦距，转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!) 如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换装片标本时，必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使载物台下降，方可取下装片标本。想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些，像变小则反之…… f．收镜：下降载物台至最低，去下装片；转动螺旋器使物镜呈“八”字朝向学生；最后竖起反光镜以免停灰（学生思考原因）。

显微镜的结构和使用

显微镜的结构和使用 一、背景说明 显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜是人类这个时期最宏伟的发明物之一。在它发明出来之前，人类关于周围世界的观念局限在用肉眼，或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。随着科学的发展，人们进行科学研究已经离不开显微镜的帮助了。 因此，我制作了本微课，试图让学生通过自学微课能了解显微镜这一宏伟发明的基本结构，学习它的使用方法，让学生感受到显微镜下不一样的世界，促进学生学习科学的兴趣。 二、策划设计 显微镜在生活中不多见，大部分学生也是第一次接触，所以我以还原课堂的形式来设计本节微课，用PPT讲授和演示实验的方式，让学生更直观地学习显微镜的有关知识，并能学以致用。 1、内容分析 显微镜的相关内容的学习在教科版小学科学六年级下册第一单元。尽管是第一次接触，但六年级的学生已经养成了一定的科学素养，具备了一定的接受新事物的学习能力，通过学习，学生能很快掌握使用显微镜这项技能。因此本微课的重点是让学生知道显微镜的结构及使用方法，难点是让学生明白在使用的时候一些要注意的地方。 2、适用对象 教师教学学生自学家长学习 3、类型选择 选择的表现形式：演示式 采用的技术手段：录屏式录音式录像式

4、组织构思 （1）知识思维导图 （2）微课环节流程 PPT讲授显微镜的结构→显微镜使用的演示实验 5、技术环境 课件版本：Microsoft Powerpoint 2013 录屏、录音、视频合成软件：会声会色X5 录制时台式电脑和笔记本电脑均可，要求网络流通，有麦克风，有条件的在专门的录播室内录制，也可在安静无噪音的室内录制。 三、过程实录 1、第一部分：片头 动态呈现微课课200题“显微镜的结构和使用”，使学生快速进入学习状态。 2、第二部分：了解显微镜的结构 镜座：是显微镜的底座，用于支持整个镜体。 镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。 镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。 镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。 物镜转换器：可解放转动，盘上有3-4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换例外倍数的物镜。 载物台：在镜筒下方，用以放置玻片标本，中央有一个通光孔。载物台上有压片夹，用以不变玻片。

显微镜的原理和使用方法

显微镜的原理和使用方法-装片的制作 显微镜的结构和使用 （2）显微镜的成像 ①光源（天然光或人工光源）→反光镜→光圈→物体→物镜（凸透镜）→在镜筒形成物体放大的实像→目镜→把经物镜形成放大的实像进一步放大 ②显微镜放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数 （3）高倍显微镜的使用 ①用低倍显微镜观察 取镜与安放： a. 右手握镜臂，左手托镜座。 b. 显微镜放在实验台的前方稍偏左。 对光： a. 转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。 b. 选一较大的光圈对准通光孔，左眼注视目境，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒，通过目镜，可能看到自亮的视野。 低倍镜观察： a. 把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。 b. 转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时实验者的眼睛应当看物镜镜头与标本之间，以免物镜与标本相撞）。 c. 左眼看目镜，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物像为止，再稍稍转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 ②高倍镜观察 a. 移动装片，在低倍镜下使需要放大观察的部分移动到视野中央。

b. 转动转换器，移走低倍物镜，转换为高倍物镜。 c. 调节光圈，使视野亮度适宜。 d. 缓缓调节细准焦螺旋，使物像清晰 ③注意事项 a. 使用显微镜一定要严格按照取镜→安放→对光→压片→观察的程序进行。 b. 下降镜筒时，一定要用双眼从侧面注视物镜，使之接近装片，但又要防止镜头触及装片。否则会压碎装片和损坏物镜（l0x物镜的工作距离为0. 5-1 cm）。 c. 有必要使用高倍物镜时，必须先在低倍物镜下将目标移到视野的中心，然后换用高倍物镜。因为在低倍物镜下看到的物像放大倍数小，但看到的标本实际面积大，容易找到目标；与低倍物镜相比，高倍物镜下看到的物像人，同样的视野面积看到的标本的实际面积小，在装片不动的情况下，高倍物镜看到的只是低倍物镜视野的中心部分。 d. 换高倍物镜时，千万不可将镜筒升高，正确的做法是直接转动转换器，换上高倍物镜即可。 e. 使用高倍物镜之后，透镜与装片之间的距离很近，使用粗准焦螺旋容易压碎玻片和损坏透镜，或者由于物像一闪而过，找不到要观察的目标．因此，必须用细准焦螺旋调焦，细准焦螺旋只在调节图像清晰度时使用。 ④原理说明 1. 识别镜头：（1）目镜：装在镜筒的上端，通常备有2－3个，上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数，一般装的是10×的目镜。放大倍数越大镜筒越短。（2）物镜：装在镜筒下端的转换器上，一般有2-3个物镜，其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜，较长的刻有“40×”符号的为高倍镜，放大倍数越大镜筒越长 2. 放大倍数：显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10×，目镜为10×，其放大倍数就为10×10=100。放大的是物体的直线长度和宽度而不是面积。 3. 工作距离：是指显微镜处于工作状态（物象调节清楚）时物镜的下表面与盖玻片（盖玻片的厚度一般为0.17mm）上表面之间的距离，物镜的放大倍数愈大，它的工作距离愈小。如物镜是10×的工作距离比物镜是40×的工作距离大。 4. 明暗程度：（1）显微镜用光源，自然光和灯光都可以，以灯光较好，因光色和强度都容易控制。（2）反光镜它有平、凹两面，再经通光孔照至标本。可向任意方向转动，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱时使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。（3）光圈或遮光器在通光孔下方，光圈由十几金属薄片组成，其外侧伸出一柄，推动它可调节其开孔的大小，以调节进光量；遮光器由几个直径大小不同的孔组成，选择某一孔以确定进光量。 5. 物像：镜下见到的是完全的倒像，即标本位于玻片右上角时在镜下的左下角位置出现，移动的规律是物象在镜下的左下角时将玻片向左下角移动可以将物象移到视野的中央来。但是物体的运动方向不变，即标本中细胞质是顺时针方向流动的，镜下仍为顺时针流动。 6. 污物的位置：在视野中常看到污物，要明确污物不会在反光镜上，因为反光镜的作用是将光源光线反射到玻片标本上；确定污物的位置首先移动玻片如污物随之移动即污物在玻片上；如污物不动，再转动目镜污物也随之转动即污物在目镜上；否则在物镜上。 7. 普通光学显微镜下可以见到的细胞结构有：细胞壁、细胞核、液泡、叶绿体、线粒体、核仁，在质壁分离时可见到细胞膜，有丝分裂时可见到染色体。 8. 玻片标本：必须是透明的，要使光线能透过标本部。常用的种类有切片（洋葱根尖纵切片）；装片（洋葱表皮临时装片）；压片（洋葱根尖临时压片观察有丝分裂）；涂片（血涂片、自生固氮菌的临时涂片）。 ⑤相关原理例析

实验三-普通光学显微镜的使用方法及细菌的革兰氏染色法

实验三-普通光学显微镜的使用方法及细菌的革兰氏染色法

实验三普通光学显微镜的使用及细菌的简单染色、革兰氏染色法 生科15.2 周罡201500181104 【实验目的】 1.复习光学显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。 2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。 3.掌握利用显微镜观察不同微生物的基本技能，了解球菌、杆菌、放线菌、酵母、真菌在光学显微镜下的基本形态特征。 4.学习并掌握微生物的制片及简单染色的基本要求。 5.学习并掌握革兰氏染色法。 6.了解革兰氏染色原理。 7.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。【实验原理】 （一）普通显微镜的基本原理 1.基本原理 现代普通光学显 微镜利用目镜和物镜 两组透镜系统来昂达 成像，故又称为复式显 微镜。它们包括机械部

分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈（虹采）、聚光镜（集光器）等。 显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的 乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。 2.油镜微生物学使用的显微镜的物镜通 常有低倍镜（10×）、高倍镜（40×）和油镜（100×），油镜是三者中放大倍数最大的，油镜的焦距和工作距离最短，油镜与其他物镜不同的是载玻片与

显微镜的结构和使用(教案)

显微镜的结构和使用（教案） 授课人：江枫渔火 一．教学目标 1.知识目标：掌握显微镜的结构以及各部件的名称和功能。 2.能力目标：能独立、规范地使用显微镜并观察到清晰的物象。 3.情感目标：通过学习养成规范实验的良好习惯和科学意识。 二．教学重难点 1.重点：认识显微镜的结构，掌握显微镜的使用步骤。 2.难点：规范使用显微镜，并能观察到清晰的物象。 三．学情分析 本次授课对象是刚接触生物实验的七年级学生,本节课内容学习显微镜的结构和使用。 由于本节课内容涉及较深的动手能力，故在教学中，通过启发式教学，设置大量的问题情境，来激发学生的学习兴趣和进一步培养他们的实验能力和科学意识。 四．教学过程设计 1.导入新课 本节课直接导出显微镜，因为本节课是学生从宏观生物到微观生物认识的转折点，在以后的学习中离不开显微镜的使用。 2.新课讲授 （1）显微镜的结构 通过挂图和实物相结合的方法对显微镜的结构进行细致的讲

授。具体从机械部分、照明部分和光学部分三方面讲述各部分结构和功能。 (2)显微镜的使用 通过具体实验来讲授显微镜的实验步骤，在讲述各步骤时以启发学生思考为主，强调个步骤中需要注意的事项。 a．取镜和放置：取出时，右手紧握镜臂，左手托住镜座，将显微镜放在左肩前方的位置。（学生思考原因） b．对光：用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使用低倍镜对准镜台的通光孔（听到碰扣声时以对准）。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼观察（右眼打开），同时调节反光

镜方向，直到视野中光线均匀明亮为止。（学生思考为什么是先用低倍镜观察） c．放置装片：取装片于载物台上（切记是有盖玻片的一面朝上），用推片器弹簧夹住，然后旋转退片器螺旋，将索要观察的部分调到通光孔中央。 d．低倍镜观察：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着载物台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使载物台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。 如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动装片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，载物台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升载物台。 e．高倍镜观察：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。 转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞装片)，如高倍镜头碰到装片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 调节焦距，转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见

荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程

发布时间:2011-06-15 荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程 荧光显微镜是光学显微镜中的一种。 关键字： 荧光显微镜使用方法 荧光显微镜操作规程 荧光显微镜使用 荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程 1. 用窗帘遮蔽光线，关闭房间内的灯光，除去显微镜的防尘罩，确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱，并转动灯箱卡圈上的拨杆，将灯箱与镜臂连接。 2. 将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座，再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。 3. 打开电源开关，电压表显示出电源电压，如电源电压波动不大于额定电压值的±5%，即可按下启动开关点燃汞灯，如因天气太冷或电压不稳定等原因，一次启动未点燃汞灯，可以多揿动几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率，即可开始工作。 4. 灯泡的调中： （1）任选一块标本放在载物台上. （2）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路，转动滤色片组转换手轮，将紫光（Ｖ）或蓝光（Ｂ）或绿光（Ｇ）激发滤色片组转入光路，并将10×荧光物镜转入光路。 （3）调节粗微调手轮，将标本像调焦清晰。 （4）前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆，使视场光栏成像清晰，转动视场光栏拨杆将视场光栏收小，调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中，然后再将视场光栏开至最大。

（5）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路，前后调节灯箱上的聚光镜拨杆，使汞灯的弧光在视场内成像清晰。 （6）调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使汞灯的弧光居中。 （7）调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使光源的反射像与汞灯的弧光分开。 （8）转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路，此时视场照明均匀。 5. 荧光观察： （1）将荧光染色标本放到载物台上。 （2）将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路，调节载物台纵横移动手轮，将标本移入光路。 （3）转动滤光片转换拨轮，将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。 滤光片选择正确与否，是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时，必须遵守斯托克斯定律：激发滤光片的透射波长＜双色束分离器的透射波长＜阻断滤光片的透射波长。 由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片，出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配，在观察和摄影时，只需选择滤光片组即可。

光学显微镜的结构与使用方法

光学显微镜的结构与使 用方法 文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-

光学显微镜的结构与使用方法 【目的要求】 1、熟悉光学显微镜的主要构造及其性能。 2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。 3、初步掌握油镜的使用方法。 4、了解光学显微镜的维护方法。 【实验原理】 光学显微镜(light microscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器，它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途，是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。 光学显微镜简称光镜，是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。目前使用的光镜种类繁多，外形和结构差别较大，有些类型的光镜有其特殊的用途，如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜，倒置显微镜等，但其基本的构造和工作原理是相似的。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成，而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。 光镜是如何使微小物体放大的呢物镜和目镜的结构虽然比较复杂，但它们的作用都是相当于一个凸透镜，由于被检标本是放在物镜下方的1～2倍焦距之间的，上方形成一倒立的放大实相，该实相正好位于目镜的下焦点（焦平面）之内，目镜进一步将它放大成一个虚像，通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处，在视网膜上形成一个直立的实像。显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的，该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。

分辨力是光镜的主要性能指示。所谓分辨力(resolving power)也称为辨率或分辨本领，是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力，即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。据测定，人眼的分辨力约为100 μm。显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定，物镜的分辨力就是显微镜的分辨力，而目镜与显微镜的分辨力无关。光镜的分辨力（R）（R值越小，分辨率越高）可以下式计算： 这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率（空气为1、油为1.5）；? 为标本对物镜镜口张角的半角，sin的最大值为1；? 为照明光源的波长（白光约为0.5m）。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数，一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 一、光学显微镜的基本构造及功能 （一）机械部分 1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。根据镜筒的数目，光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角，在其镜筒中装有能使光线折转45度的棱镜。 2、物镜转换器：又称物镜转换盘。是安装在镜筒下方的一圆盘状构造，可以按顺时针或反时针方向自由旋转。其上均匀分布有3～4个圆孔，用以装载不同放大倍数的物镜。转动物镜转换盘可使不同的物镜到达工作位置（即与光路合轴）。使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。 3、镜臂：为支持镜筒和镜台的弯曲状构造，是取用显微镜时握拿的部位。镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节，可使镜筒向后倾斜一定角度以

显微镜的结构和使用教学案例

显微镜的结构和使用教学案例 一、教案背景 1，面向学生：中学2，学科：生物 2，课时：1 3，学生课前准备： A、预习课文，1.明确显微镜各部分的名称和作用。 2.初步了解显微镜的使用步骤和方法。 B、完成课前延伸案的问题。 C、完成预习检测。 二、教学课题 通过学习使学生明确显微镜在中学生物学探索学习中的重要作用，学会使用显微镜并爱护显微镜，培养严谨的科学探究精神和养成良好的实验习惯。 1．识别显微镜各部分的名称和叙述各部件作用。 2．初步学会规范操作显微镜，爱护显微镜。 3．尝试使用显微镜观察生物玻片标本。 三、教材分析 《显微镜的构造和使用》是济南版七年级上册第一单元第二第一节的内容，通过对显微镜的介绍，使学生了解显微镜在生物实验中的作用和使用方法，为今后实验教学打下基础。本节课是学生步入中学后的第一节实验课，要充分利用本节课培养学生对生物学的学习兴趣，同时认真组织上好起始实验课，培养学生严谨的科学态度和良好的实验纪律，对于加强基础知识的学习，有效地培养学生的观察能力、实验能力和思维能力，具有重要意义。 【教学重点】显微镜的结构和使用方法。 【教学难点】用低倍镜、高倍镜进行观察。 教学之前用百度在网上搜索《显微镜》的相关教学材料，找了很多教案和材料作参考，了解到教学的重点和难点，确定课堂教学形式和方法。然后根据课堂教学需要，利用百度搜索关于显微镜的视频，课堂放给学生观看，加深印象。通过百度在网上搜索一些关于显微镜的文字资料和图片资料，做成PPT课堂给同学们演示，给让学生直观的感受显微镜的结构和成像特点等。 四、教学方法 讲授法、自学释疑法、分组讨论法、实验法 这节实验课是学生进入中学学习生物学的第一节实验课，因此，开始实验操作前，应进行实验室规则、爱护实验设施的教育，注意将实验过程组织好。在学习过程中，不必对显微镜的原理进行过多的深入了解，而应让学生通过不断的练习，达到熟练使用显微镜的目的。 这一节课的重点要放在学习显微镜的结构和使用上。在观察写有“e”字母的玻片标本的基础上，结合观察人血涂片，归纳总结形成知识结构。可以通过以下几点达到教学目标： （1）让学生参看课本上的插图，对照显微镜实物，自己来认识显微镜的结构并进行显微镜的使用操作训练，然后经过学生对导学案中的提示内容进行归纳、概括，及时反馈检查教学效果。要留出较多的时间，让学生进行练习使用显微镜的探索。教师应强调的是在显微镜使用过程中，学生出现的错误及有关的注意事项，最后总

显微镜结构和使用方法

显微镜结构和使用方法

显微镜的结构图和使用方法 2016-02-23 发布者：admin 高倍率或复合式显微镜比立体或低倍率显微镜的放大倍率达到更高的水平。它是用来查看不能被看见的放大倍率在较低的水平，更小的标本，如细胞结构。从本质上讲，一个复合式显微镜的结构和光学组件的组成。然而，在这两个基本制度，也有一些每个显微镜的重要组成部分，应该知道和理解。这些关键的显微镜配件图示说明如下。 显微镜的结构组件 这三种基本结构部件的复合显微镜观察头、底座和镜臂。 ?观察头/体安置在显 微镜上部的光学部件 ?显微镜底座支持显微 镜，并设有照明 ?镜臂的基极和连接到 支持的显微镜观察头。 它也可以用来进行观察 显微镜。 当背着一个复合式显微 镜来抬它由两个臂和底 座，同时始终照顾。 显微镜的结构图和使用方法 显微镜的结构

光学元件 有两种复式显微镜目镜和物镜的光学系统： 目镜或眼先看你是什么，通过在显微镜的顶部。通常情况下，标准的目镜有10倍放大镜权力。可选目镜不同权力，通常是从5X-30X。 目镜筒持有目镜物镜以上的地方。双目显微镜头通常集成了屈光度调节环，允许在一个或两个眼睛的视力，我们可能不一致。单眼（单眼使用）显微镜不需要屈光度。旋转双目显微镜（瞳距调节）允许不同的个人的眼睛之间的距离不同。 物镜的显微镜的的主光学透镜上。它们的范围从4倍到100倍，通常包括三个，四个或五个镜片上大多数显微镜。物镜可以向前或后面对。 消防水枪安置的物镜。物镜是暴露的，被安装在一个旋转的转塔，所以可以很方便地选择不同的物镜。标准的物镜包括：4X，10X，40X和100X，虽然不同功率的物镜是。 粗微调焦旋钮用于聚焦显微镜。越来越多，他们是同轴旋钮 - 也就是说它们都是建立在同一轴线上的微调旋钮在外面。同轴调焦旋钮都比较方便，因为观看者不一定要摸索不同的旋钮。 载物台是被放置在要观看的试样。的标本幻灯片需要细腻的动作放大倍率越高，工作时所使用的机械载物台。 使用时，有没有机械载物台，载物台夹片器。观众需要手动移动幻灯片查看不 同部分标本。 光圈中的孔，通过该阶段的基极（传送）的光到达的阶段。 照明灯是在显微镜的光源，通常位于显微镜底座。大多数光学显微镜使用低电压卤素灯泡与连续可变照明控制的位于基地内。 聚光镜是用来收集从所述照射器的光聚焦在试样上。它位于下阶段，常在结合有可变光圈。 可变光阑控制到达试样的光的量。它位于上方的聚光镜级以下的级。大多数高品质的显微镜包括阿贝聚光镜有可变光圈。使用时，它们控制的重点和施加在试样上的光的数量。 聚光镜对焦旋钮移动向上或向下的聚光镜对试样来控制照明的重点。 放大 你的显微镜具有3种放大：聚焦，低和高。每一个物镜将写入放大倍率。除了这个， 物镜目镜 总放大 倍率 聚焦4倍（红色圈）10倍40倍低倍率10倍（黄色圈）10倍100X 高倍率40倍（蓝色圈）10倍400X