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卵磷脂提取与鉴定

1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理?
2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作
何解释?
3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么?
4.为什么实验中要进行减压过滤?
操作时应注意哪些地方?

卵磷脂提取与鉴定

【实验目的及要求】 了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法。

【实验原理】
卵磷脂是甘油磷脂的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱组成。广泛存在于动植物中,在植物种子和动物的脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多;蛋黄中含量最丰富,高达8—10%,因而得名。

卵磷脂易溶于醇、乙醚等脂溶剂,可利用这些脂溶剂提取。本实验以95%乙醇作为溶剂提取鸡蛋黄中的卵磷脂。新提取的卵磷脂为白色蜡状物,遇空气可氧化成为黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲胺,三甲胺有特殊的鱼腥味,以此鉴别之。

蛋黄中的主要成分为水5 0 %,蛋白质2 0 %, 脂肪2 0 %,卵磷脂8 %和少量的脑磷脂,各组分在不同溶剂中溶解情况不同


蛋白质
脂肪
卵磷脂
脑磷脂

乙醇
不溶


不溶

氯仿
不溶




丙酮
不溶

不溶
不溶


【实验材料和仪器及用品】

实验器材:烧杯 量筒 蒸发皿 试管 吸管 天平 水浴锅 电炉

实验试剂:95%乙醇 、10%氢氧化钠、丙酮

实验材料:鸡蛋黄

【实验内容及步骤】

1、 卵磷脂的提取

法1、于小烧杯内置蛋黄约2g,加入95%乙醇15ml,边加边搅,冷却,过滤,将滤液置于蒸发皿内,蒸汽浴上蒸干,残留物即为卵磷脂。
2、 卵磷脂的鉴定

取以上提取物约少许,于试管内加入10%NaOH溶液2毫升,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否卵磷脂。
3、另取少许溶于乙醇中,添加约1ml丙酮,观察现象

【实验结果与分析】
1、记录实验现象并解释
2、如何得到纯的卵磷脂

other基本原理:卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中含量较高,约8%。可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。卵磷脂可在碱性溶液中加热水解,得到甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱
20%NaOH溶液 10%Pb(AC)2 1%CuSO4溶液 硫酸 95%乙醇 氯仿 丙酮 碘化铋钾溶液
研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花
脂肪酸的检查:取所得沉淀少许,加1滴20%氢氧化钠溶液与5ml水,用玻棒搅拌使其溶解,在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液,以硝酸酸化后加入10%醋酸铅2滴,观察溶液的变化
甘油的检查:取试管一支,加入1%硫酸铜溶液1ml(二十滴),2滴
20%氢氧化钠溶液,振摇,有氢氧

化铜沉淀生成,再加入1ml水解液
振摇,观察所得结果。
胆碱的检查:取水解液1ml,滴加硫酸使其酸化(以pH试纸试之)加入1滴克劳特试剂(碘化铋钾溶液),有砖红色沉淀生成。
1. 第一次减压过滤,因刚析出的醇中不溶物很细以及有少许水份,
滤出物浑浊,放置后继续有沉淀析出,需合并滤液后,以原布氏
漏 斗(不换滤纸)反复滤清。
2. 蒸去乙醇时,可能最后有少许水份,需搅动加速蒸发,务使蒸干。
3. 黄色油状物干后,蒸发皿壁上沾的油状物一定要使其溶于氯仿中,否则会带入杂质。
4. 搅动时,析出的卵磷脂可粘附于玻棒上,成团状。
5. 加热时,会促使胆碱分解,产生三甲胺的臭味。
6. 加硝酸酸化,脂肪酸析出,溶液变浑浊,加醋酸铅有脂肪酸铅盐生成,浑浊进一步增强。
7. 生成的氢氧化铜沉淀.因水解液中的甘油与之反应,生成甘油铜,沉淀逐步溶解。
8. 克劳特试剂为含有KI-BiI3复盐的有色溶液,与含氮碱性化合物如胆碱生成砖红色的沉淀。
9.PO43-+3Ag+=Ag3PO4↓(黄色沉淀)