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2008_2009年江苏省肠道病毒71型分子流行病学研究_单军

文章编号:1002-2694(2010)10-0979-03

2008-2009年江苏省肠道病毒71型分子流行病学研究

单军,李显,唐震,郭喜玲,赵康辰,崔仑标,葛以跃,史智扬

摘要:目的探讨2008-2009年江苏省肠道病毒71型(EV 71)分离株的病毒基因特征。方法选取18份EV71分离株,用一对特异引物进行V P1全基因核苷酸序列扩增,在ABI3130型自动测序仪上测序,序列结果用DN A Star 和M EG A 4软件进行分析,并与各型参考株进行比较。结果 18株病毒与安徽省阜阳市和山东省临沂市分离的C4a 基因型参考株最为相近,核苷酸同源性在96.3%~99.6%之间,氨基酸同源性在99.0%~99.7%之间;而与A 、B 基因型参考株比较差异较大,核苷酸同源性只在81.8%~84.4%之间,氨基酸同源性在94.3%~97.0%之间;说明本文的18株病毒均属于EV 71型C4a 基因型。结论 2008-2009年江苏省分离的18株EV71可能与安徽省和山东省分离的EV 71有相同的起源,均属于C4a 亚型;目前C4a 亚型病毒在中国大陆可能有较广泛的分布和传播。

关键词:EV71;基因型;分子流行病学中图分类号:R 373.2 文献标识码:B

Molecular epidemiology of enterovirus 71in Jiangsu Province from 2008to 2009

SHAN Jun,LI Xian,TANG Zhen,GUO X-i ling,ZHAO Kang -chen,CUI Lun -biao,GE Y-i yue,SH I Zh-i yang

(K ey L abor ator y of E nter ic P athogenic M icr obiology (M inistr y of H ealth),J iangs u P r ovincial Center f or D isease P r ev ention and Contr ol,N anj ing 210009,China)

ABSTRACT:T o analyze the g enetic cha racteristics of enter ov irus 71(EV 71)st rains iso lated fr om Jiang su Pr ov ince in 2008-2009,18EV 71positiv e samples fro m patients w ith hand,foot ,and mouth disease (H FM D)in Jiang su Pr ov ince w ere selected to co nduct VP 1g ene amplificatio n using specific pr imers and sequenced by A BI3130A utomated Sequencing M achine,and then

they w ere analy zed by DN A St ar and M EG A4.Sequence analy sis sho wed that the ho mog eneity o f these 18str ains sha red 96.3%t o 99.6%nucleo tide acid identity ,and 99.0%to 99.7%amino acid identit y between these 18stra ins and the represent a -tiv e st rains of C4a g eno type isolated fr om F uy ang City,A nhui Pr ovince,and L iny i City,Shando ng Pr ovince.T her e w ere only 81.8%to 84.4%nucleo tide acid identity and 94.3%to 97.0%amino acid identity among these 18stra ins and t he represent a -tiv e str ains of g enot ype A and B.T hese r esults sug gested that t hese 18st rains belo ng t o C4a g enot ype.T he strains isolated fr om Jiang su P rov ince in 2008-2009are clo sely related to those isolated fro m A nhui and Shandong and all o f them belong to C4a g eno type.It's indicated that the C4a g enot ype pr obably w idely dist ributes and spr eads in mainland o f China. KEY WORDS:EV 71;g eno type;mo lecular epidemio log y

通讯作者:崔仑标,Email:lbcu i@https://www.wendangku.net/doc/032148852.html,

作者单位:卫生部肠道病原微生物重点实验室,江苏省疾病预防控

制中心病原微生物研究所,南京 210009

手足口病(H and,foot and mouth disease,H FMD)是由肠道病毒(enterovirus,EV )引起的传染病,多发生于婴幼儿,可引起手、足和口腔等部位的疱疹,个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症,甚至危及患儿生命。肠道病毒71型(EV71)是引起手足口病的主要病毒。近几年来,EV71在亚太地区的流行呈逐年上升趋势11-22

,已经越来越受到人们的关注和重视。继2008年3月安徽省阜阳手足口病疫情暴发以来,江苏省大部分地区也陆续出现了手足口病例。为了解江苏省EV71的分子流行病学特征,我们将2008-2009年部分地区具有代表性的EV71阳性的标本进行了病毒分离和VP1基因的扩增,并且进行了核苷酸和氨基酸的

同源性分析与比较。

1 材料与方法

1.1 标本来源 18例手足口病患者咽拭子标本,分别采集于江苏省12个不同的地市。其中盐城4例,宿迁3例,南通2例,常州、连云港,苏州、扬州、无锡、南京、泰州、镇江和徐州各1例。18例均为散发患儿,年龄介于1-12岁之间,其中男性8例,女性10例。患儿均有不同程度的发热、口腔黏膜或手足部位的疱疹,其中2例有高热同时伴有脑膜炎症状。18例患儿预后全部良好。

1.2 病毒分离按照5手足口病预防控制指南6中病毒分离操作规程132进行:标本接种于Ver o 细胞,置于37e ,5%CO 2

条件中培养,每d观察细胞病变(CPE),当CP E达到90%时收获上清液。

1.3病毒RN A的提取采用M inibest V ira l RN A/DN A K it(T A K AR A,Cat.N o:D V818A),取病毒上清液200ul,按照说明书进行操作。

1.4EV71的检测自行设计EV71引物和探针,rea-l t ime P CR扩增采用OneSt ep RT-P CR K it(QI AG EN,Cat.N o: 210212)。

1.5VP1区域核苷酸序列的扩增根据G enBank中收录的V P1基因序列,设计如下引物:EV71V P1F:5.-T A T A-A T A GCA CT AG CGGCA GC-3.;EV71VP1R:5.-A GT A-A GT CGCG AG A GCT GT CT T C-3.。参考株(G enBank: A B482183.1)引物序列对应位置:2356-3455bp。RT-PCR扩增采用O neStep RT-PCR K it(QIA G EN,Cat.No:210212), P CR条件为:50e30min逆转录,95e15min,然后95e 30s,52e45s,72e90s,35个循环,最后72e延伸10min。扩增产物进行1.0%琼脂糖凝胶电泳。

1.6V P1区域的序列测定和分析采用T IA Nquick M ini P ur ification K it(T I AN G EN,Cat.N o:DP203-02)进行P CR 产物的纯化,纯化后的产物采用Big Dye T er minator v3.1 Cycle Sequencing K it(ABI,Cat.No:4336917)进行标记。纯化后的标记产物在A BI3130全自动核酸测序仪上测序,结果用D NA Star和M EGA4等软件进行分析。

2结果与分析

2.1EV71的确认对18株观察到CPE的标本上清液进行rea-l tim e PCR检测,结果均为阳性。

2.2EV71VP1区域的RT-PCR结果对18株观察到CPE的标本上清液进行RT-PCR扩增,电泳结果均有约1100bp大小的含VP1区域的目的条带。结果见图1。

2.3EV71VP1区域核苷酸和氨基酸序列分析

从GenBank中检索到EV71各基因型和亚型参考株VP1序列,以及中国大陆分离到的EV71VP1序列,将本次测序的18株EV71毒株VP1序列与上述序列进行核苷酸和氨基酸的同源性比较分析后发现:EV71/SU QIAN-1株和其余17株毒株隶属于2个不同的分支,而这17株毒株又可分为2小分支,其中EV71/SU QIAN-2、EV71/YANCH ENG-1和EV71/YANCH EN G-3同属一支,另外的14株毒株与安徽阜阳和山东临沂分离的C4a基因型参考株同属一支,同源性最为接近。这18株毒株与阜阳和临沂参考株的核苷酸同源性在96.3%~99.6%之间,氨基酸同源性在99.0%~99.7%之间;而与A、B基因型代表株差异较大,核苷酸同源性只在81.8%~84.4%之间,氨基酸同源性在94.3%~ 97.0%之间。以上结果说明本次测序的18株病毒均属于EV71型C4a基因型。见图2及表1

。3讨论

EV71分子流行病学研究开始于1984年,它是基于对病毒衣壳多肽(capsid poly peptide)的序列分析。目前对EV71分子流行病学的主要关注在于VP1基因、VP4基因和5.-U TR的变异。其中,VPl

表118株EV71毒株与各亚型代表株之间VP1基因的核苷酸和氨基酸同源性分析(%)

Table1The homogeneity of nucleotide acid and amino acid of VP1gene between18strains and the representative strains of EV71 (%)

核苷酸同源性

C4a C4a Fuyang L inyi C4b C1C2C3C5B A

氨基酸同源性

C4a C4a

Fuyang L inyi

C4b C1C2C3C5B A

CH ANGZH OU97.397.492.788.787.888.187.984.182.299.799.399.399.397.699.099.096.394.6 LIANYUNGANG98.098.192.889.688.489.288.283.482.399.799.399.399.397.699.099.096.394.6 NANJ ING98.998.593.289.088.689.188.383.882.699.799.399.399.397.699.099.096.394.6 NANT ONG-198.298.393.288.888.388.988.484.182.299.799.399.399.397.699.099.096.394.6 NANT ONG-297.998.092.888.987.988.788.284.082.099.799.399.399.397.699.099.096.394.6 SU QIAN-196.396.492.688.988.389.187.784.482.499.099.399.399.397.399.099.097.094.9 SU QIAN-296.697.292.588.687.888.887.484.182.599.399.799.099.097.398.798.796.694.9 SU QIAN-398.498.893.389.188.289.288.284.182.599.399.799.099.097.398.798.796.694.9 SU ZH OU98.298.192.989.288.388.988.083.882.599.799.399.399.397.699.099.096.394.6 T AIZH OU99.198.393.289.088.389.188.084.182.499.799.399.399.397.699.099.096.394.6 W UXI98.198.492.989.088.189.187.984.082.499.099.398.798.797.098.398.396.394.6 XUZHOU98.298.393.089.088.389.388.284.182.099.099.398.798.797.098.398.396.694.6 YANCH ENG-196.596.692.689.688.788.888.084.082.099.399.099.099.097.398.798.796.094.3 YANCH ENG-298.598.492.888.788.089.088.183.582.599.799.399.399.397.699.099.096.394.6 YANCH ENG-396.696.792.488.988.089.788.383.781.898.799.098.398.396.698.798.796.094.3 YANCH ENG-498.398.793.289.288.189.188.184.282.699.399.799.099.097.398.798.796.694.9 YANGZH OU97.697.892.689.188.289.088.184.082.799.799.399.399.397.699.099.096.394.6 ZHE NJIANG99.698.593.488.888.389.188.284.182.299.799.399.399.397.699.099.096.394.6

基因最具研究价值,这是因为:(1)VP1蛋白是主要的病毒中和决定因子,它直接决定病毒的抗原性142;

(2)VP1基因具有与病毒血清型完全对应遗传多样性,它不仅可作为肠道病毒属内不同血清型分类的依据,而且可作为小RNA病毒科内不同属的分类参考。根据VP1编码基因核苷酸序列的系统进化树,将EV71分为3个独立的基因型:A、B和C型。A基因型为EV71的原形毒株,只包含一个单独的病毒株BrCr-U SA-70;B和C型都可进一步分为5个亚型:B1、B2、B3、B4、B5和C1、C2、C3、C4、C5,而C4亚型又可分为C4a和C4b2个亚型152。同一基因型内核苷酸差异[12%,不同基因型之间核苷酸差异为16.5%~19.7%,三型之间氨基酸同源性至少达94%162。有资料显示,在过去的10年间,我国大陆地区流行的EV71型主要分为2个阶段。1998至2004年,广东和上海等地分离到的EV71毒株属于C4b亚型,2004年以后则逐渐被C4a亚型取代。过去的5年间,C4a亚型成为我国大陆地区EV71的主要流行毒株172。将本次实验中分离到的18株EV71与GenBank检索到的相关序列进行同源性比较和系统进化树分析后发现,除2株宿迁株和2株盐城株以外,其它EV71毒株与安徽阜阳和山东临沂分离到的C4a基因型参考株同属一个分支,核苷酸与氨基酸同源性最高可达99.6%和99.7%;2株宿迁株和2株盐城株虽然与安徽株和山东株属于不同的分支,但仍属于C4a亚型。2008年3月份以来,全国大部分地区都有不同程度的手足口病暴发,在浙江和珠海等地分离到的EV71也均属于C4a亚型18-92。这说明2008年以后在中国大陆地区C4a基因亚型可能有较为广泛的分布和流行,而且由于地理位置非常相近,江苏大部分地区分离到的EV71与安徽和山东分离到的EV71病毒可能属于同一起源,而宿迁和盐城等少数地区分离到的EV71病毒可能为本地来源。

EV71感染主要引起手足口病,但其所致的神经系统并发症可导致死亡或永久性肌麻痹,后果十分严重。2008年5月2日,卫生部将手足口病正式纳入法定传染病管理。EV71分子流行病学的研究对手足口病的诊断、预防和控制具有深远的意义。本次实验分离到的18株EV71毒株中,不同年龄和性别的标本毒株其VP1序列的结构差异无统计学意义;重症病例和普通病例相比,未发现VP1区的核苷酸和氨基酸结构有明显差异。由此推断,EV71可能不是引起手足口病重症病例的主要因素,重症病例的发生可能与个体的免疫力有关。由于EV71

(转第985页)

感染率显著下降,取得了显著的短期和长期干预效果,表明该模式干预血吸虫病重疫区成年女性居民接触疫水行为具有较强的针对性和较好的适用性。许乐为等1102在鄱阳湖区其他重疫区村推广应用本模式干预成年女性居民接触疫水行为,也取得了良好的干预效果,表明该模式同时具有很好的推广应用价值。

尽管本模式干预成年女性主要接触疫水行为和控制血吸虫感染效果显著,但干预后仍有部分目标人群依然在疫水中洗衣物。究其原因,乃因鄱阳湖区地下水含铁量普遍较高,井水洗衣物易致衣物污染之故。因此,她们虽知用疫水洗衣物会致血吸虫感染,但只能无奈使用鄱阳湖水(疫水)洗涤。为此,建议有关部门在此类疫区实施改水工程,使疫区居民饮用安全卫生水,以期更加有效控制此类疫区成年女性居民血吸虫感染。

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收稿日期:2010-08-19;修回日期:2010-09-28

(接第981页)

的变异较大,其不同基因型别或同一基因型别在不同时间、不同地区乃至不同个体均可引起不同的临床表现,EV71众多的病毒基因型别是怎么形成的,其基因组序列的结构差别和病毒功能的关系是什么尚不清楚1102。本实验初步研究了江苏省EV71 VP1区域的分子流行病学特征,为今后进一步测定EV71全基因序列,阐明EV71不同型别之间的进化关系,以及分析EV71在我国的起源、进化和流行状况奠定了基础。

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收稿日期:2010-05-16;修回日期:2010-08-23

肠道病毒71型收获液蛋白成分的分析

中国生物制品学杂志2013年9月第26卷第9期Chin J Biologicals September 2013，Vol.26No.9 手足口病（hand -foot -mouth disease ，HFMD ）是由肠道病毒引起的传染病，多发生于婴幼儿，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜炎等并发症。可引起HFMD 的肠道病毒有20多种（型），其中以柯萨奇病毒A16型（Coxsackie A16virus ，CoxA16）和肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71 ）最为常见，而发病死亡的患儿主要是因为感染了EV71［1-3］。目前，尚无公认的可用于人的有效疫苗可供使用［4］。因此，该疫苗的研制十分紧迫。本实验对EV71疫苗制备过程中病毒收获液的蛋白成分进行初步分析，以期为该类疫苗的研发及质控提供参考。肠道病毒７１型收获液蛋白成分的分析高嵩，李爱灵，黄浩，赵玉秀，苏桂民，王辉北京天坛生物制品股份有限公司，北京100024 摘要：目的分析肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）收获液中的蛋白成分，为该类疫苗的研发及质控提供参考。方法将EV71安徽阜阳株接种于Vero 细胞，病毒培养72h 后，收获病毒液，经蔗糖密度梯度超滤离心、甲醛灭活、DEAE Sephorase FF 介质离子交换层析纯化，获得纯化样品。应用透射电镜分析样品中病毒颗粒的形态；对非还原型SDS -PAGE 检测疑似病毒衣壳抗原蛋白VP1和VP3条带进行N -末端氨基酸序列分析；液相色谱（liquid chromatogra －phy ，LC ）与电喷雾电离质谱（electrospray ionization ，ESI -MS ）结合的方法分析样品中所含的蛋白成分。结果纯化的 EV71样品在透射电镜下可观察到20～30nm 的球形EV71颗粒，呈典型的肠道病毒形态；经SDS -PAGE 分析，第2和第3条带所在位置与文献报道的EV71衣壳蛋白VP1和VP3大小相符，N -末端氨基酸序列与GenBank 报道的安徽阜阳株序列（ACD63039.1）一致；LC ／ESI -MS 质谱分析显示，纯化EV71样品中病毒蛋白成分占绝对优势，包括EV71的蛋白多聚体、VP1、VP2、VP3、VP4蛋白。结论对EV71疫苗制备过程中病毒收获液的蛋白成分进行了初步分析，为该类疫苗的研发及质控提供了参考。关键词：肠道病毒71型；纯化；蛋白成分中图分类号：R373.2+3R392-33文献标识码：A 文章编号：1004-5503（2013）09-1201-05 Analysis of protein component of harvested liquid of enterovirus 71 GAO Song,LI Ai -ling,HUANG Hao,ZHAO Yu -xiu,SU Gui -min,WANG Hui Beijing Tiantan Biological Products Co.Ltd,Beijing 100024,China Corresponding author:WANG Hui,E -mail:wh6247@https://www.wendangku.net/doc/032148852.html, Abstract ：Objective To analyze the protein component in harvested liquid of enterovirus 71（EV71）and provide a ref －erence for development and quality control of EV71vaccine.Methods EV71Anhui Fuyang strain was inoculated to Vero cells and cultured for 72h,and the harvested liquid was concentrated by sucrose density gradient centrifugation combined with ultrafiltration,inactivated with formaldehyde and purified by DEAE Sepharose FF ion exchange chromatog －raphy.The morphology of virus particles in test samples was analyzed by transmission electron microscopy,while the amino acids at N -terminus of suspected virus capsid protein VP1and VP3bands determined by non -reduced SDS -PAGE were sequenced ，and the protein component by liquid chromatography （LC ）and electrospray ionization （ESI -MS ）.Re －sults Spheroidal particles at sizes of 20~30nm were observed in purified EV71samples under transmission electron microscope,which showed typical morphology of enterovirus.SDS -PAGE showed that the locations of the 2nd and 3rd bands were consistent with those of VP1and VP3of EV71reported respectively.The amino acid sequences at N -terminus of the two bands were consistent with that of EV71Anhui Fuyang strain reported in GenBank （ACD63039.1）.LC ／ESI -MS showed that viral protein components were prominent in purified EV71,including polymer,VP1,VP2,VP3and VP4.Conclusion The protein component of virus liquid during preparation of EV71vaccine were preliminarily analyzed,which provided a reference for development and quality control of the vaccine. Key words ：Enterovirus 71（EV71）；Purification ；Protein component ·疫苗研究· 通讯作者：王辉，E -mail ：wh6247@https://www.wendangku.net/doc/032148852.html, 1201·· DOI:10.13200/https://www.wendangku.net/doc/032148852.html,ki.cjb.000140

肠道病毒71型简介

第二节肠道病毒71型（EV71）作者：李兰娟出版社：浙江科学技术出版社肠道病毒71型（EV71）属于小RNA病毒科（Picornaradae）肠道病毒属（Enterovirus）的成员，归属于人类肠道病毒A。1974年Schmidt等人首次报道从美国加利福尼亚暴发的表现为神经系统症状疾病（1969～1973年）的患者中分离到EV71，随后，世界上许多国家相继报道了EV71病毒在不同地区的流行情况，EV71病毒已在世界范围内引起多次暴发与流行，人们逐渐认识到EV71病毒是手足口病的主要病原。目前已知EV71的感染可以导致手足口病、疱疹性咽峡炎、无菌性脑膜炎（asepic meningitis）、脑炎（encephalitis）和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病（poliomyelitis-like paralysis）等多种与神经系统相关的疾病。EV71可导致大范围的暴发流行，可伴有严重的CNS并发症或致死性肺水肿。近年来，EV71病毒的流行在亚太地区呈上升趋势，1975年保加利亚大流行,共有705名患儿感染，死亡44例；1997年马来西亚大流行感染2628人，死亡30多人；1998年，台湾地区暴发EV71的大流行，约有12万以上的人被感染，死亡78人。因此，有关EV71的病毒生物学特性、致病机理、诊断和预防等的研究日益受到人们的重视。一、病毒的一般特征（一）病毒颗粒结构该病毒的颗粒为二十面体立体对称的球形结构，无包膜和突出，直径约24～30nm，核酸为单股正链RNA。如同其他肠道病毒属成员一样，EV71型病毒基因组编码的分子量分别为34KD、30 KD、26 KD和7KD的多肽VP1(α)、VP2（β）、VP3（γ）、VP4（δ），构成原聚体，后者再拼装成具有五聚体样结构的亚单位（pentameric unit），60个亚单位通过各自的结构域相互连接，最终形成病毒的外壳。VP1 、VP2和VP3三个多肽暴露在病毒外壳的表面，而VP4包埋在病毒外壳的内侧与病毒核心紧密连接，因而抗原决定簇基本上位于VP1-VP3上。EV71病毒由于没有类脂膜，所以它对乙醚、脱氧胆酸盐、去污剂以及弱酸有抵抗性。此外，该病毒还能抵抗70％乙醇和5％甲酚皂溶液等常见的消毒剂，但是高温（56℃，30min）处理和紫外线照射可以很快将病毒灭活，它对各种氧化剂如高锰酸钾、双氧水、漂白粉等也很敏感。（二）基因组结构 EV71病毒的基因组为含有大约7411个核苷酸（7423/MS/87株）的单股正链RNA，腺嘌呤核苷酸和尿嘧啶核苷酸丰富（A+U=52.8）。RNA中仅有一个开放阅读框（ORF），编码含2194个氨基酸的多聚蛋白，在其两侧为5′和3′非编码区（UTRs），它与其他肠道RNA病毒一样，在3′末端有多聚腺苷酸（poly A）尾，而其5′末端共价结合有一个小分子量的蛋白（VPg）。病毒的单链RNA具有感染性（病毒裸露RNA的感染性仅为病毒颗粒的百万分之一），如果去除3′末端的多聚腺苷酸尾或基因组出现断裂，感染性便消失。相对而言，其5′末端连接的蛋白质对病毒的感染性没有明显的影响。 EV71基因结构图 (中国疾病预防控制中心提供)

肠道病毒71型(EV71)感染重症病例临床救治专家共识(2011年版)

肠道病毒71型（EV71）感染重症病例临床救治专家共识（2011年版）手足口病是由肠道病毒引起的急性传染病。重症病例多由肠道病毒71型（EV71）感染引起，病情凶险，病死率高。2010年4月，卫生部印发了《手足口病诊疗指南（2010年版）》，指导医疗机构开展手足口病医疗救治工作。现卫生部手足口病临床专家组制定了《肠道病毒71型（EV71）感染重症病例临床救治专家共识（2011年版）》，作为《手足口病诊疗指南（2010版）》的补充，供医疗机构和医务人员参考使用。一、临床分期根据发病机制和临床表现，将EV71感染分为5期。第1期（手足口出疹期）：主要表现为发热，手、足、口、臀等部位出疹（斑丘疹、丘疹、小疱疹），可伴有咳嗽、流涕、食欲不振等症状。部分病例仅表现为皮疹或疱疹性咽峡炎，个别病例可无皮疹。此期病例属于手足口病普通病例，绝大多数病例在此期痊愈。第2期（神经系统受累期）：少数EV71感染病例可出现中枢神经系统损害，多发生在病程1-5天内，表现为精神差、嗜睡、易惊、头痛、呕吐、烦躁、肢体抖动、急性肢体无力、颈项强直等脑膜炎、脑炎、脊髓灰质炎样综合征、脑脊髓炎症状体征。脑

脊液检查为无菌性脑膜炎改变。脑脊髓CT扫描可无阳性发现，MRI检查可见异常。此期病例属于手足口病重症病例重型，大多数病例可痊愈。第3期（心肺功能衰竭前期）：多发生在病程5天内。目前认为可能与脑干炎症后植物神经功能失调或交感神经功能亢进有关，亦有认为EV71感染后免疫性损伤是发病机制之一。本期病例表现为心率、呼吸增快，出冷汗、皮肤花纹、四肢发凉，血压升高，血糖升高，外周血白细胞（WBC）升高，心脏射血分数可异常。此期病例属于手足口病重症病例危重型。及时发现上述表现并正确治疗，是降低病死率的关键。第4期（心肺功能衰竭期）：病情继续发展，会出现心肺功能衰竭，可能与脑干脑炎所致神经源性肺水肿、循环功能衰竭有关。多发生在病程5天内，年龄以0-3岁为主。临床表现为心动过速（个别患儿心动过缓）,呼吸急促，口唇紫绀，咳粉红色泡沫痰或血性液体，持续血压降低或休克。亦有病例以严重脑功能衰竭为主要表现，肺水肿不明显，出现频繁抽搐、严重意识障碍及中枢性呼吸循环衰竭等。此期病例属于手足口病重症病例危重型，病死率较高。第5期（恢复期）：体温逐渐恢复正常，对血管活性药物的依赖逐渐减少，神经系统受累症状和心肺功能逐渐恢复，少数可遗留神经系统后遗症状。二、重症病例早期识别

肠道病毒EV71简述

肠道病毒EV71感染性疾病肠道病毒EV71是人肠道病毒的一种，简称为EV71，常引起儿童手足口病、病毒性咽峡炎，重症患儿可出现为肺水肿、脑炎等，统称为肠道病毒EV71感染疾病。哪些人容易患这种疾病？三岁以下婴幼儿多发，成人也可感染。环境卫生、食品卫生差，不良个人卫生习惯易发病。大部分病例病情较轻，可治愈。少数患者可出现脑炎及脑脊髓炎、肺水肿、循环衰竭等，严重时可危及生命。发病特点：年龄段普遍偏小，最大的患者11岁，最小的才1岁左右，其中2―3岁的居多；其次，发病地区分散，且主要在农村地区。这种病什么季节最容易发生？该病一年四季都可发生，常见于4～9月份。该病通过什么途径传播？ 1．人群密切接触是重要的传播方式，儿童通过接触被病毒污染的手、毛巾、手绢、牙杯、玩具、食具、奶具以及床上用品、内衣等引起感染。 2．患者咽喉分泌物及唾液中的病毒可通过空气（飞沫）传播，故与生病的患儿近距离接触可造成感染。 3．饮用或食入被病毒污染的水、食物，也可发生感染。这种病开始有哪些表现？患儿感染肠道病毒EV71后，多以发热起病，一般为38℃左右。部分病人早期有咳嗽流涕和流口水等类似上呼吸道感染的症状，有的孩子可能有恶心、呕吐等反应。

发热1～2天后开始出现皮疹，通常在手足、臀部出现，或出现口腔粘膜疱疹。有的患儿不发热，只表现为手、足、臀部皮疹或疱疹性咽峡炎，病情较轻。大多数患儿在一周以内体温下降、皮疹消退，病情恢复。如果孩子出现发热、有皮疹等症状，家长该怎么办？发现孩子发烧、有皮疹等症状，尽快到正规医院就诊。孩子患病后应暂停去幼儿园和学校，避免传染给他人，防止再感染其他疾病。根据医生建议，决定是否留院观察或住院治疗。患儿的家庭应使用肥皂、消毒液对日常用品、玩具、尿布进行消毒，对奶具、餐具煮沸消毒。患儿粪便及其他排泄物可用消毒剂或漂白粉消毒；将衣被阳光曝晒，室内保持通风换气。家庭如何预防这种病？春夏是肠道病毒感染容易发生的季节，要讲究环境、食品卫生和个人卫生。不喝生水、不吃生冷食物，饭前便后洗手，保持室内空气流通。尽量不要带婴幼儿去人群密集场所。哺乳的母亲要勤洗澡、勤换衣服，喂奶前要清洗奶头。幼儿园、托儿所如何预防这种病？托幼机构等儿童集体生活、学习的场所，要做好晨间体检，发现有发热、皮疹的孩子，要立即要求家长带小孩去医院就诊，同时报告相关部门。患儿应在家中休息，不宜继续上学。发现有发热、皮疹的孩子后，要立即对玩具、被褥、桌椅等进行消毒；同时做好食堂、卫生间、教室等的消毒处理。保持教室和寝室等活动场所通风换气。发现保育员、教师和其他工作人员有发热伴皮疹的，应立即暂停工作。小学如何预防这种病？答：小学要做好每日晨间体检。发现有发热、皮疹的孩子，要立即要求家长带去医院就诊，同时报告相关部门。患病学生不应继续上学，要在家中休息。

肠道病毒71型(EV71)感染重症病例临床救治专家共识1.0

肠道病毒７１型（ＥＶ７１）感染重症病例临床救治专家共识卫生部手足口病临床专家组手足口病是由肠道病毒引起的急性传染病。重症病例多由肠道病毒７１型（　ＥＶ７１）感染引起，病情凶险，病死率高［１－３７］。２０１０年４月，卫生部印发了《手足口病诊疗指南（２０１０年版）》，指导医疗机构开展手足口病医疗救治工作。现卫生部手足口病临床专家组制定了《肠道病毒７１型（　ＥＶ７１）感染重症病例临床救治专家共识（２０１１年版）》，作为《手足口病诊疗指南（２０１０版）》的补充，供医疗机构和医务人员参考使用。１０．　３７６０／ｃｍａ．　ｊ．　ｉｓｓｎ．　０５７８－１３１０．　２０１１．　０９．００７万方数据

万方数据

＠＠［１］陆国平，李兴旺，吕勇，等．危重症手足口病（ＥＶ７１感染）诊治体会．中国小儿急救医学，２００８，　１５：２１７－２２０．＠＠［２　］　Ｃｈａｎｇ　ＬＹ．　Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎ　Ｔａｉｗａｎ．　Ｐｅｄｉａｔｒ　Ｎｅｏｎａｔｏｌ，２００８，４９　：１０３－１１２．＠＠［３］吴亦栋，尚世强，陈志敏，等．手足口病病原体流行特征分析及临床意义．中华儿科杂志，２０１０，４８：５３５－５３９．＠＠［４］　Ｃｈｏ　ＨＫ，　Ｌｅｅ　ＮＹ，　Ｌｅｅ　Ｈ．　Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｈａｎｄ，　ｆｏｏｔ　ａｎｄ　ｍｏｕｔｈ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｗｉｔｈ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ，　ａ　ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ　ｉｎ　Ｋｏｒｅａ，　２００９．　Ｋｏｒｅａｎ　Ｊ　Ｐｅｄｉａｔｒ，２０１０，５３：６３９－６４３．＠＠［５］曾健生，钱素云．重症手足口病的特点与诊治．中国急救医学，２００８，２８：７５２－７５３．＠＠　［６］　Ｋｏｒｏｌｅｖａ　ＧＡ，　Ｌｕｋａｓｈｅｖ　ＡＮ，　Ｋｈｕｄｉａｋｏｖａ　ＬＶ．　Ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　７１　ｉｎ　ｃｈｉｌｄｒｅｎ．　Ｖｏｐｒ　Ｖｉｒｕｓｏ１，２０１０，５５　：４－１０．＠＠　［７］　Ｃｈａｎｇ　ＬＹ，　Ｌｅｅ　ＣＹ，　Ｋａｏ　ＣＬ．　Ｈａｎｄ，　ｆｏｏｔ　ａｎｄ　ｍｏｕｔｈ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｎｅｒｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ　ｉｎ　Ｔａｉｗａｎ　ｉｎ　１９８０－１９８１　．　Ｊ　Ｆｏｒｍｏｓ　Ｍｅｄ　Ａｓｓｏｃ，２００７，１０６：１７３－１７６．＠＠　［　８　］　Ｗｉｎｔｅｒｇｅｒｓｔ　ＫＡ，　Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍ　Ｂ，　Ｇａｎｄｒｕｄ　Ｌ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ，ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ，ａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｗｉｔｈ　ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ　ａｎｄｄｅａｔｈｉｎｔｈｅｐｅｄｉａｔｒｉｃｉｎｔｅｎｓｉｖｅｃａｒｅ　ｕｎｉｔ．　Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，　２００６，　１　１８　：　１７３－１７９．＠＠　［９］　Ｐｒｅｉｓｓｉｇ　ＣＭ，　Ｒｉｇｂｙ　ＭＲ．Ｈｙｐｅｒｇｌｙｅａｅｍｉａ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｆｒｏｍ　ｂｅｔａ－ｃｅｌｌ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｃｒｉｔｉｃａｌｌｙｉｌｌｃｈｉｌｄｒｅｎｗｉｔｈｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｎｄ　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｆａｉｌｕｒｅ：　ａ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ　ｓｔｕｄｙ．　Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｃａｒｅ，２００９，　１３　：　Ｒ２７．＠＠［１０］　Ｏｏｉ　ＭＨ，　Ｗｏｎｇ　ＳＣ，　Ｌｅｗｔｈｗａｉｔｅ　Ｐ，　ｅｔ　ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ，　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，　ａｎｄ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　．　Ｌａｎｃｅｔ　Ｎｅｕｒｏ１，　２０１０，９　：　１０９７－１１１５．＠＠［１１］张育才，李兴旺，朱晓东，等．儿童危重肠道病毒７１型脑炎及神经源性肺水肿的救治．中华急诊医学杂志，２００８，１７：１２５０－１２５４．＠＠［１２］　Ｗｅｎｇ　ＫＦ，　Ｃｈｅｎ　ＬＬ，　Ｈｕａｎｇ　ＰＮ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｎｅｕｒａｌ　ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　．　Ｍｉｃｒｏｂｅｓ　ａｎｄ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，２０１０，　１２：５０５－５１０．＠＠［　１３　］　Ｈｕａｎｇ　ＣＣ，　Ｌｉｕ　ＣＣ，　Ｃｈａｎｇ　ＹＣ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｗｉｔｈ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　．　Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ，　１９９９，　３４１：９３６－９４２．＠＠［　１４］　Ｙａｎ　ＪＪ，　Ｗａｎｇ　ＪＲ，　Ｌｉｎ　ＣＣ，　ｅｔ　ａｌ．　Ａｎ　ｏｕｔｂｒｅａｋ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎＴａｉｗａｎ１９９８　：ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ，　Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃ，　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ａ　ｃａｓｅ　ｏｆ　ｆｕｌｍｉｎａｎｔ　ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ．　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｖｉｒｏｌ，　２０００，１７：１３－２２．＠＠［１５］　Ｗａｎｇ　ＳＭ，　Ｌｉｕ　ＣＣ，　Ｔｓｅｎｇ　ＨＷ，　ｅｔ　ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｌｄｒｅｎ　ｉｎ　ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｔａｉｗａｎ，　ｗｉｔｈ　ａｎ　ｅｍｐｈａｓｉｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｃｌｉｎ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ，　１９９９，２９：１８４－１９０．＠＠［１６］　Ｔｈｅｏｄｏｒｅ　Ｊ，　Ｒｏｂｉｎ　ＥＤ．Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｇｅｎｉｃ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｅｄｅｍａ．　Ｌａｎｃｅｔ，　１９７５，２：７４９－７５１．＠＠［１７］　ＷｕＪＭ，ＷａｎｇＪＮ，ＴｓａｉＹＣ，ｅｔａｌ．Ｃａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｆｕｌｍｉｎａｎｔ　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　．　Ｐａｄｉａｔｒｉｃａ，　２００２，１０９　：　Ｅ２６．＠＠［　１８　］　Ｌｉｎ　ＴＹ，　Ｃｈａｎｇ　ＬＹ，　Ｈｓｉａ　ＳＨ．　Ｔｈｅ　１９９８　ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ　７１　ｏｕｔｂｒｅａｋ　ｉｎ　Ｔａｉｗａｎ：　ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　．　Ｃｌｉｎ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ，　２００２，３４　：ｓ５２－ｓ５７．万方数据

肠道病毒71型感染防治知识

肠道病毒71型感染防治知识 1、肠道病毒71型（EV71）感染的认识肠道病毒感染顾名思义是由肠道病毒引起的一大类感染性疾病，肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒及新型肠道病毒的71个血清型等，肠道病毒71型为新型肠道病毒的一个血清型，是引起小儿手足口病等的常见病原体。该病多发生于学龄前儿童，尤其是3岁以下婴幼儿多发，少数病情较重，甚至会引起死亡。该病四季均可发病，以夏秋季多见。 2、肠道病毒71型感染后的症状肠道病毒71型感染后没有明显的前驱症状或仅有轻度不适，多数患儿突然起病，约半数患儿于发病前1～2天或发病同时出现发热症状，多在38℃左右。在患儿手、足、口腔粘膜以及臀部出现皮疹，皮疹通常不痛、不痒、不结痂、不结疤；由于口腔溃疡会伴有疼痛，患儿往往会流涎、拒食，皮疹通常会在一周内自行消退，同时体温也会下降。肠道病毒71型感染往往会伴有较为严重的合并症，如肺水肿、无菌性脑膜炎、暴发性心肌炎等，这类患儿大多持续高热，病情发展迅速，以2岁以内患儿多见，多在发病后3－5天内出现中枢神经系统、呼吸系统、循环系统严重并发症，并可引起死亡。 3、肠道病毒71型（EV71）感染的传播肠道病毒71型感染主要是通过人群间的密切接触进行传播的。患儿咽喉分泌物及唾液中的病毒可通过空气飞沫传播；被患儿唾液、疱疹液、粪便污染的手、毛巾、手绢、牙杯、玩具、食具、奶具以及床上用品、内衣等可通过日常接触传播，接触被病毒污染的食品或水源，可经口感染；门诊交叉感染和口腔器械消毒不严也可造成感染。 4、小儿肠道病毒71型感染的预防目前该病尚无特殊的预防方法，但做到以下几点可以有效降低被肠道病毒感染的可能。 ①教育孩子养成良好的个人卫生习惯和饮食习惯，如饭前便后洗手、勤洗澡等，要饮开水，不喝生水，不吃生冷食物，剩饭剩菜要完全加热后再食用。 ②家长要经常对孩子居住的房间进行通风换气，尽量少带孩子去拥挤的公共场所，特别是尽量避免与其他有发热、出疹性疾病的儿童接触，减少被感染的机会。 ③注意孩子营养的合理搭配，还要让孩子休息好，适当晒晒太阳，增强自身的免疫力。 ④家长要注意家庭室内外的清洁卫生，家庭成员的衣服、被褥要在阳光下曝晒。家禽、家畜要圈养，避免人、畜混住一处，尤其要减少儿童与家禽、家畜的直接接触。 5、一旦出现发热、皮疹等症状采取的措施平时要多注意观察孩子身体状况的变化，一旦发现有发热、出疹等表现，应尽早到医院就诊，并积极配合医生的治疗。如孩子是幼儿园小朋友或学校学生，还应及早告诉班级老师。孩子未彻底治好前，不要着急让孩子去幼儿园、学校上学，防止传染给别的儿童肠道病毒71型感染防治知识 1、肠道病毒71型（EV71）感染的认识肠道病毒感染顾名思义是由肠道病毒引起的一大类感染性疾病，肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒及新型肠道病毒的71个血清型等，肠道病毒71型为新型肠道病毒的一个血清型，是引起小儿手足口病等的常见病原体。该病多发生于学龄前儿童，尤其是3岁以下婴幼儿多发，少数病情较重，甚至会引起死亡。该病四季均可发病，以夏秋季多见。 2、肠道病毒71型感染后的症状肠道病毒71型感染后没有明显的前驱症状或仅有轻度不适，多数患儿突然起病，约半数患儿于发病前1～2天或发病同时出现发热症状，多在38℃左右。在患儿手、足、口腔粘膜以及臀部出现皮疹，皮疹通常不痛、不痒、不结痂、不结疤；由于口腔溃疡会伴有疼痛，患儿往往会流涎、拒食，皮疹通常会在一周内自行消退，同时体温也会下降。肠道病毒71型感染往往会伴有较为严重的合并症，如肺水肿、无菌性脑膜炎、暴发性心肌炎等，这类患儿大多持续高热，病情发展迅速，以2岁以内患儿多见，多在发病后3－5天内出现中枢神经系统、呼吸系统、循环系统严重并发症，并可引起死亡。 3、肠道病毒71型（EV71）感染的传播肠道病毒71型感染主要是通过人群间的密切接触进行传播的。患儿咽喉分泌物及唾液中的病毒可通过空气飞沫传播；被患儿唾液、疱疹液、粪便污染的手、毛巾、手绢、牙杯、玩具、食具、奶具以及床上用品、内衣等可通过日常接触传播，接触被病毒污染的食品或水源，可经口感染；门诊交叉感染和口腔器械消毒不严也可造成感染。 4、小儿肠道病毒71型感染的预防目前该病尚无特殊的预防方法，但做到以下几点可以有效降低被肠道病毒感染的可能。 ①教育孩子养成良好的个人卫生习惯和饮食习惯，如饭前便后洗手、勤洗澡等，要饮开水，不喝生水，不吃生冷食物，剩饭剩菜要完全加热后再食用。 ②家长要经常对孩子居住的房间进行通风换气，尽量少带孩子去拥挤的公共场所，特别是尽量避免与其他有发热、出疹性疾病的儿童接触，减少被感染的机会。 ③注意孩子营养的合理搭配，还要让孩子休息好，适当晒晒太阳，增强自身的免疫力。 ④家长要注意家庭室内外的清洁卫生，家庭成员的衣服、被褥要在阳光下曝晒。家禽、家畜要圈养，避免人、畜混住一处，尤其要减少儿童与家禽、家畜的直接接触。 5、一旦出现发热、皮疹等症状采取的措施

肠道病毒71型引起手足口病的发病机制

综　　述肠道病毒71型引起手足口病的发病机制尤俊斌，苏郑明综述，陈讳莹审校［摘要］　手足口病（hand ，foot and mouth disease ，HFMD ）是由肠道病毒引起的传染病。其中肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）属于人类肠道病毒。近30年来EV71感染在亚太地区每2~3年暴发1次。EV71是手足口病的主要病原体，其详尽发病机制目前尚不清楚。文中综述EV71感染累及中Q 神经系统，引起心肌炎和肺水肿的发病机制研究现状。［关键词］　手足口病；肠道病毒71型；发病机制［中图分类号］　Q935 ［文献标志码］　A ［文章编号］　1008?8199（2012）08?0876?03 基金项目：广东省大学生创新实验项目（20105709）；R 头大学医学院杰出大学生科研基金（20105709）作者单位：515041R 头，R 头大学医学院生物化学与分子生物学教研室（尤俊斌、苏郑明、陈纬莹）通讯作者：陈纬莹， E -mail ：wychen@https://www.wendangku.net/doc/032148852.html, Pathogenesis of hand ，foot and mouth disease caused by Enterovirus 71 YOU Jun?bin ，SU Zheng?ming reviewing ，CHEN Wei?ying checking （Department of Medical College of Shantou University ，Shantou 515041，Guangdong ，China ）［Abstract ］　Hand ，foot and mouth disease （HFMD ）is an infectious disease caused by intestinal virus.Enterovirus 71（EV71）is one of the most common strains of human enterovirus.In recent 30years ，EV71infection outbreaks every 2to 3years in the Asia?Pacific Regions ，and EV71is the main pathogen causing HFMD.The pathogenesis is still less understood.The studies on pathogenesis of EV71infection that involves in central nervous system ，leads to myocarditis or pulmonary edema are reviewed. ［Key words ］　Hand ，Foot and Mouth Disease ；Enterovirus 71；Pathogenesis 0　引言 HFMD 是由肠道病毒引起的传染病，多发生于 5岁以下儿童。其主要特征是发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疤疹，重症可引起无茵性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹（acute flaccid paralysis ， AFP ）［1］、急性肺水肿和心肌炎等［2］。引发手足口病的肠道病毒有20余种（型）。柯萨奇病毒A 组的4、5、9、10、16型，B 组的2、5型以及EV71均为手足口病较常见的病原体。其中以柯萨奇病毒A16型（Cox A16）和EV71最为常见［3-4 〗。人类感染EV71后，在小肠远端形成原发感染灶，病毒侵入肠壁固有层集合淋巴结（Peyer′spatch ）后大量复制，约第3天即有少量病毒逸入血流，播散，即“小病毒血症”，遍及网状内皮系统和其他靶组织。大多数感染者由于机体的兔疫防御机制可控制病毒感染而使病毒在体内播散停止，成为无症状感染。少数感染者由于病毒在网状内皮组织继续复制，约在第5天出现持续性重度病毒血症，大量病毒播散至脑膜、脑、脊髓、心脏、皮肤、釉膜等靶组织并继续复制，引发炎症性病变，成为“大病毒血症”患者。其中多数患者亦可在自身兔疫防御机制的作用下迅速中止 “大病毒血症”，使病毒在靶器官的复制停止，临床表现为轻症 HFMD 。仅有极少数患者病毒在靶器官广泛复制，成为重症感染患者［5］。个别重症患者病情进展快可致死亡。值得重视的是， 50%成人感染病毒后并无症状，但可传染家人尤其是学龄前儿童而致发病［6］。EV71与神经性并发症密切相关，在最近东甫亚和东亚地区的由EV71引起的大型HFMD 流行中尤为明显［7-8 〗。 1　EV71导致中枢神经系统、心肌、肺损害的机制1.1　中枢神经系统损害　感染EV71的住院儿童中约有10%~30%伴有中枢神经系统并发症［9］。EV71是一种高度嗜神经病毒，EV71的衣壳蛋白VP1与人类脑组织内表达的3种蛋白有亲和力，即鸟氨酸脱竣酶、基因捕捉锚蛋白重复序列和KIAA0697。在EV71感染时VP1大量合成，作用于上述蛋白而引起神经系统后遗症，如AFP 和脑炎［10］。脑干是最易被EV71感染的部位［11］。实验研究发现，给动物灌喂接种EV71后早期可引起万方数据

肠道病毒71型分子生物学研究

肠道病毒71型分子生物学研究【摘要】就有关EV71病毒生物学特征、病毒的复制、诊断技术、EV型别鉴定及分子流行病学等方面作一综述。【关键词】肠道病毒71型基因型分子流行病学 Molecular Biological Research on 7I Intestinal Virus Lin Xin, Han Guangen Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou(310053) Abstract: It makes review on EV 71 intestinal virus about its biological characteristic, replication, diagnosis technology, EV type identification and molecular epidemic science. Key words: intestinal virus; EV 71; gene type; molecular epidemic science 近年，肠道病毒71型(EV71)感染在世界各地不断出现爆发流行的报道。EV7I感染主要引起手足口病，但所致的神经系统并发症可导致死亡或永久性肌麻痹。本文从有关EV71病毒生物学特征、病毒的复制、诊断技术、EV型别鉴定及分子流行病学等方面作一综述。 1 病毒的一般特征 1.1 病毒颗粒结构及理化性质肠道病毒71型(EV71)属于小RNA病毒科(Picornaradae)肠道病毒属(Enterovirus)的成员［1］。EV71的病毒颗粒为二十面体立体对称的球形结构，无包膜和突起，直径大约在24～30nrn，核酸为单股正链RNA。病毒粒子的衣壳组成非常复杂，首先由VPI、VPZ、VP3和VP4四种外壳蛋白构成原聚体(Protomer)，再由5个原聚体拼装成具有五聚体样结构的亚单位(Pentamer)。四种结构蛋白中，除VP4包埋在病毒粒子外壳的内侧与病毒核心紧密连接以外，其他三种结构蛋白均暴露在病毒颗粒的表面，因而抗原决定簇基本上位于VPI.VP3上（见图1）。由于病毒颗粒没有类脂性的包膜，所以对去污剂、乙醚、脱氧胆酸盐以及弱酸有抵抗力，此外，该病毒还能抵抗70%乙醇和5%甲酚皂溶液等常见的消毒剂，这些都决定了该病毒较强的野外生存能力。EV71病毒对高温(50℃以上)及紫外线的抵抗能力较差。图1 肠道病毒粒子及外壳蛋白的结构（略） 1.2 基因组结构［2］EV71基因组为7408个核苷酸的单股正链RNA，腺嗓吟核苷酸和尿嘧啶核苷酸丰富(A+U=5 2.8)，病毒的的单链具有侵染性。基因组中仅有一个开放阅读框(ORF)，编码含2193个氨基酸的多聚蛋白(Polyrotein)，在其两侧分别为746个核苷酸的5’-非编码区(UTRs)和83个核苷酸的3’-非编码区。在3’-非编码区的末端含有一个长度可变的多聚腺苷酸尾巴(poly A)，而其5’末端共价结合有一个小分子量的蛋白(VPg)。该多聚蛋白可进一步被水解成P1、P2、P3三个前体蛋白，Pl前体蛋白编码IA(多肽VP4)、IB(多肽VP2)、IC(多肽VP3)、ID(多肽VP4)四个病毒外壳蛋白;P2前体蛋白编码ZA(特异性蛋白酶)、2B、2C;P3前体蛋白编码3A、VPg(5’末端结合蛋白)、3C(特异性蛋白酶)、3D(RNA 多聚酶组份)。病毒的单链RNA具有感染性。病毒RNA正链和负链的5’末端和3’末端非编

肠道病毒EV71最新研究进展

综述肠道病毒EV71最新研究进展 2007级生物技术黄琼肠道病毒71（Enterovirus 71, EV71）是1969年Schmidt等首次从加利福尼亚患有中枢神经系统疾病的婴儿粪便标本中分离出来的[1]。EV71感染主要引起手足口病（Hand-food-mouth disease, HFMD），在临床上与柯萨奇病毒A16（Coxsakie A16, CA16）感染所引起的手足口病难以区别。EV71感染严重者还能引起无菌性脑炎、脑膜脑炎、脑干脑炎、脊髓灰质炎样麻痹、心肌炎和肺水肿等多种与神经系统相关的疾病[2]。自1974年首次报道[3]以来，EV71在世界范围内已引起十多次暴发流行，特别是近几年在亚太地区，EV71的流行呈上升趋势，已引起人们的广泛关注。本文对EV71的结构特征、致病机制、检测技术、型别鉴定、流行病学、研究方向等作一综述。 1 EV71的结构特征肠道病毒71型(EV71)属于小RNA病毒科(Picornaradae)肠道病毒属(Enterovirus)的成员。EV71的病毒颗粒为二十面体立体对称的球形结构，无包膜和突起，直径大约在24～30nrn，核酸为单股正链RNA。病毒粒子的衣壳组成非常复杂，首先由VP1、VP2、VP3和VP4四种外壳蛋白构成原聚体(Protomer)，再由5个原聚体拼装成具有五聚体样结构的亚单位(Pentamer)。4种结构蛋白中，除VP4包埋在病毒粒子外壳的内侧与病毒核心紧密连接以外，其他3种结构蛋白均暴露在病毒颗粒的表面，因而抗原决定簇基本上位于VP1～VP3上[4]。由于病毒颗粒没有类脂性的包膜，所以对去污剂、乙醚、脱氧胆酸盐以及弱酸有抵抗力，此外，该病毒还能抵抗70%乙醇和5%甲酚皂溶液等常见的消毒剂，这些都决定了该病毒较强的野外生存能力。EV71病毒对高温(50℃以上)及紫外线的抵抗能力较差。