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谷胱甘肽简介

谷胱甘肽简介
谷胱甘肽简介

谷胱甘肽

1.定义

谷胱甘肽(glutathione GSH)CAS号:70-18-8。谷胱甘肽是一种存在于自然界中的氨基酸复合物,由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸等三种氨基酸组合而成的寡肽。谷胱甘肽在体内以两种形态存在,即还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,简称GSSG)。通常人们所指的谷胱甘肽是还原型谷胱甘肽。还原型谷胱甘肽很容易被氧化,两分子谷胱甘肽的活泼巯基氧化脱氢后以二硫键相连得到的二聚体,即是氧化型谷胱甘肽。其中只有还原型谷胱甘肽才具有生理活性,而生物体内的氧化型谷胱甘肽需经还原后才能发挥生理功能。

2.结构和理化性质

谷胱甘肽是一种白色晶体,化学名为γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,其结构如图1所示。相对分子质量为307.33,熔点是192~195 °C

(分解),等电点为5.93。比旋光度[α]D20为+17.60°(C=0.05,H2O),易溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰氨,不溶于乙醚和丙酮。谷胱甘肽固体较为稳定,而水溶液在空气中易被氧化,谷胱甘肽在高水分活度下不易保存,只有将水分活度控制在0.3以下才能长期稳定保存。

3.生理功能

谷胱甘肽是细胞内存在最丰富的小分子硫醇类化合物,其分子中含有一个特异的γ-肽键,由谷氨酸的γ-羧基与半胱氨酸的α-氨基缩合而成,并且半胱氨酸侧链基团上连有一个活泼巯基,是谷胱甘肽许多重要生理功能的结构基础。

3.1抗氧化作用

还原型谷胱甘肽结构中含有一个活泼的巯基—SH,易被氧化脱氢。它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。同时清除自由基。

机体内新陈代谢产生的许多自由基会损伤细胞膜,毁坏免疫系统,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。由此,谷胱甘肽具有抗衰老和强化免疫系统等作用。

3.2整合解毒作用

谷胱甘肽半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。4. 应用

4.1 谷胱甘肽在临床上的应用

谷胱甘肽在临床上有广泛的作用,对细胞有保护作用,可防止红细胞溶血,从而减少高铁血红蛋白的损失;抑制脂肪肝的形成,改善中毒性肝炎和感染性肝炎的症状;对丙烯腈、氟化物、一氧化碳、有机溶剂、重金属等中毒具有解毒作用;对缺氧血症的不适、恶心、呕

吐、瘙痒等症状以及由于肝脏疾病引起的其它症状具有缓解作用;维持乙酰胆碱,胆碱脂酶的平衡,起到抗过敏作用;对放射性治疗、放射性药物、肿瘤药物引起的白血球减少以及由于放射性治疗或药物引起的骨髓组织发炎等能起到保护作用;可以抑制进行性白内障及控制角膜和视网膜疾病的发展;可以防止皮肤色素沉积,改善皮肤光泽;最近发现谷胱甘肽具有抗艾滋病病毒的功效。

4.2 谷胱甘肽在食品工业中的应用

谷胱甘肽现在已广泛应用于食品加工的各个领域,在调味食品中,谷胱甘肽与L-谷氨酸钠、核酸等腥味物质或它们的混合物共存时,具有很强的肉类风味;将谷胱甘肽用于肉食类、鱼类和海鲜类食品中可抑制核酸分解、强化食品风味、延长保鲜期;在奶制品中添加谷胱甘肽可强化风味、提高奶酪质量,防止酪蛋白的褐变;将谷胱甘肽加入酸奶和婴儿食品中相当于维生素C起稳定作用;由于谷胱甘肽具有氧化还原性,因此将谷胱甘肽加入面制品中,在起到还原作用的同时还能强化氨基酸;利用谷胱甘肽能够防止色素沉积的作用,在水果罐头中加入谷胱甘肽可防止水果的褐变;将它制成不同类型的功能性食品,如将其添加到饮料、嗜好品(糖果)、乳制品、面类制品和发酵食品中作为保健和营养强化剂,还可用于孕妇、哺乳幼儿、病人的口服保健品,在日本,谷胱甘肽被认为是21世纪最有希望的保健食品之一。

4.3 谷胱甘肽在动物生产中的应用

谷胱甘肽在饲料工业应用尚较少,仅有少量报道:GSH用于提

高牛冷冻精液的活力和受胎率;添加蛋氨酸维持血浆中的GSH水平可增强雏鸡抗球虫感染能力,解除黄曲霉毒素B1对雏鸡的毒性;解除水产动物因一些毒素引起的中毒症。GSH具有清除自由基和解毒,促进氨基酸转运,保护胃肠黏膜,提高免疫力,参与蛋白质合成与降解,调节基因的复制、转录,调节细胞生长等多种生物学功能。因而,GSH在动物生产中将具有良好的应用前景。

5.制备

谷胱甘肽的制造方法主要有溶剂萃取法、化学合成法、生物发酵法和酶法。早期谷胱甘肽生产大多采和化学用溶剂萃取法合成法,目前主要以生物发酵法(尤其是酵母发酵法)生产制取。化学合成法和酵母发酵法生产谷胱甘肽现已工业化,酶法生产正在广泛研究,还没有工业化生产。

5.1萃取法

萃取法主要以富含GSH的动、植物组织和酵母为原料,通过添加适当的溶剂或结合淀粉酶、蛋白酶处理,再分离精制而成。植物种子胚芽,动、植物组织,酵母都可作为原料进行提取,但以酵母作原料居多。

萃取法生产谷胱甘肽中所用的酵母一般都未经选育和遗传特性上的改造,谷胱甘肽含量很低,仅为0.5%~1.0%(干重),加上生产步骤繁杂,使得该法总收率很低,若用作药品或试剂,还需离子交换、凝胶过滤等步骤进一步分离纯化。萃取法生产谷胱甘肽已被化学合成法和生物发酵法所替代。

5.2化学合成法

自还原型谷胱甘肽被发现和阐明化学结构以后,就有学者致力于其化学合成的研究,化学合成法制备谷胱甘肽所使用的主要原料有谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。目前谷胱甘肽的化学合成法生产工艺较成熟,但它存在成本高、反应步骤多、反应时间长、操作复杂等缺点,并且产生的消旋体需要光学拆分,分离十分困难,造成产品纯度不同,以及存在着环境污染问题。

5.3 酶法

酶法合成谷胱甘肽是以L-谷氨酸、L-半胱氨酸及甘氨酸为底物,需要两个合成酶分步完成,第一步是在谷氨酸的γ-羧基与半胱氨酸的氨基形成肽键,此反应由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHⅠ)催化;第二步反应是在γ-谷氨酰半胱氨酸的半胱氨酸端的羧基与甘氨酸的氨基之间形成肽键,由此得到谷胱甘肽,此反应由谷胱甘肽合成酶(GSHⅡ)催化。这两步反应都需要添加三磷酸腺苷(ATP)即提供能量才可合成谷胱甘肽。其反应过程如图2所示。

每合成1 mol的谷胱甘肽需要消耗2 mol的ATP,因此,ATP的提供或循环再生是固定化酶生产GSH的关键,在谷胱甘肽合成过程中需要一个提供ATP或再生ATP的有效系统。

5.4发酵法

由于生物发酵生产谷胱甘肽与早期萃取法、化学合成法及酶法相比具有明显的优越性,如反应条件温和、反应步骤简单、成本低、转化效率高、生产速率快等,是今后生产谷胱甘肽的主要趋势,因此越来越受到科学家们的重视。生物发酵法生产谷胱甘肽的工艺经过学者们的努力不断得到改进,已成为当今生产谷胱甘肽的主要方法,也是最具潜力的方法。

6.市场前景

目前,谷胱甘肽广泛应用于护肝、护眼医药领域和食品、保健品、化妆品行业,其涉及的终端消费规模超过百亿元,并且因为其生理活性不断被发现,仍然以很快的速度在增长,被市场公认为是下一个疯狂的辅酶Q10。在我国,全国重点城市典型医院用药金额前100位药品排序中,有6种多肽药物榜上有名,其中谷胱甘肽名列第93位。

资料显示,全世界谷胱甘肽的年产量在150吨左右,单价800~1000美元/公斤,年销售额10~15亿美元。主要生产厂家有Roche 、Fluka、J.T.BAKER、BHD、SIGMA、和光纯药、IMMNOTEC RESERCH LTD、KRAFT FOOD LTD、KYOWA等。

国内主要依靠进口,如复华药业、昆明积大制药和重庆药友等,其价格大约在5000~6000元/KG。也有个别厂家采用化学法生产,如浙江东华医药化工有限公司,汕头化工有限公司用合成法少量生产谷胱甘肽。2002年谷胱甘肽国内市场销售额为8.02亿元;2003年谷胱甘肽全国市场销售额为13.55亿元,同比增长69.05%;2004年上

半年谷胱甘肽全国市场销售额为8.39亿元,比上年同期增长43.11%。单纯国内几个制药企业的需求,估计月需求量就在3~4吨左右。

另有资料显示:

1.目前,国内市场上还原型谷光甘肽的原料药价格在4000元/kg以上,而谷胱甘肽的生产成本约1500元/kg左右。

2,进口谷胱甘肽,试剂级46000元/公斤;药用9000元/公斤。

6 结语

尽管谷胱甘肽风光无限,但是其产能发展却受到诸多制约,其中最主要是来自于原料药技术方面的障碍。谷胱甘肽成本低廉的发酵生产技术一直被日本协和发酵所垄断,化工合成技术则很难将成本降低下来,中国国内各大科研机构和生产厂家对这两种工艺路线投入了大量人力物力做开发,收效一直不甚理想,大部分到了中试阶段就达到瓶颈,无法放大到规模生产,巨大的资金缺口也令很多人止步不前。另外,尽管国内萃取法少量生产谷胱甘肽在我国早有成功先例,但生产工艺落后,规模小,产量低,质量差,目前比较流行的超临界萃取技术尚未得到广泛应用。

目前,国内市场几乎全部被日本协和集团垄断,导致国内谷胱甘肽的价格居高不下(作为原料药的价格在250~300美元/kg),也使该产品推广应用受到很大的限制。我国每年花费约4200万美元进口谷胱甘肽。实现GSH的国产化,不仅能填补我国在这一领域的空白,对我国医药工业、临床医学和食品工业均具有重大的社会效益和经济效益。

谷胱甘肽简介

谷胱甘肽 1.定义 谷胱甘肽(glutathione GSH)CAS号:70-18-8。谷胱甘肽是一种存在于自然界中的氨基酸复合物,由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸等三种氨基酸组合而成的寡肽。谷胱甘肽在体内以两种形态存在,即还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,简称GSSG)。通常人们所指的谷胱甘肽是还原型谷胱甘肽。还原型谷胱甘肽很容易被氧化,两分子谷胱甘肽的活泼巯基氧化脱氢后以二硫键相连得到的二聚体,即是氧化型谷胱甘肽。其中只有还原型谷胱甘肽才具有生理活性,而生物体内的氧化型谷胱甘肽需经还原后才能发挥生理功能。 2.结构和理化性质 谷胱甘肽是一种白色晶体,化学名为γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,其结构如图1所示。相对分子质量为307.33,熔点是192~195 °C (分解),等电点为5.93。比旋光度[α]D20为+17.60°(C=0.05,H2O),易溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰氨,不溶于乙醚和丙酮。谷胱甘肽固体较为稳定,而水溶液在空气中易被氧化,谷胱甘肽在高水分活度下不易保存,只有将水分活度控制在0.3以下才能长期稳定保存。 3.生理功能

谷胱甘肽是细胞内存在最丰富的小分子硫醇类化合物,其分子中含有一个特异的γ-肽键,由谷氨酸的γ-羧基与半胱氨酸的α-氨基缩合而成,并且半胱氨酸侧链基团上连有一个活泼巯基,是谷胱甘肽许多重要生理功能的结构基础。 3.1抗氧化作用 还原型谷胱甘肽结构中含有一个活泼的巯基—SH,易被氧化脱氢。它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。同时清除自由基。 机体内新陈代谢产生的许多自由基会损伤细胞膜,毁坏免疫系统,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。由此,谷胱甘肽具有抗衰老和强化免疫系统等作用。 3.2整合解毒作用 谷胱甘肽半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。4. 应用 4.1 谷胱甘肽在临床上的应用 谷胱甘肽在临床上有广泛的作用,对细胞有保护作用,可防止红细胞溶血,从而减少高铁血红蛋白的损失;抑制脂肪肝的形成,改善中毒性肝炎和感染性肝炎的症状;对丙烯腈、氟化物、一氧化碳、有机溶剂、重金属等中毒具有解毒作用;对缺氧血症的不适、恶心、呕

GSH含量的测定.doc

主要目的: ——测定物质还原性谷胱甘肽(GSH)的含量。 主要原理: 参照 GSH检测分析试剂盒说明书, 5,5 ’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸)能和 谷胱甘肽(GSH)反应产生 2–硝基– 5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物( GSSG), 由于 2–硝基– 5–巯基苯甲酸是一黄色产物,通过测定其在412 nm处的最大吸 收可确定样品中谷胱甘肽的含量用纯化的谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制 成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘 肽( GSH)抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在412 nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中谷胱甘肽(GSH)的含量。

实验室签章

一、试剂 ——谷还原性胱甘肽( GSH)测定试剂盒(南京建成生物研究所) 二、仪器设备 —— 96 孔酶标板 —— UV-Vis 可见多功能酶标 仪——旋涡混匀器——离心机 ——移液枪及其相应量程枪头

三、实验方法 根据试剂盒说明书具体操作步骤如下: 1.上清液的制备:取稀释后的血清或组织匀浆液 mL,加试剂一应用液 2 mL 混匀, 4000 rpm 离心 10 分钟,取上清液 1 mL 进行显色反应。 2.显色反应:空白管中加入 1 mL 试剂一,标准管加入 20μmol/LGSH标准 液 1 mL,测定管加入上步骤得到的上清液 1 mL,然后各管中分别加入mL 试剂 二、试剂三、 mL 试剂四。 3.混匀,室温静置 5 分钟后,在 412 nm处将酶标板空板进行扫描,准确吸 取 mL 各管反应液加入到新的 96 孔板中,酶标仪测定各孔吸光度( OD值)。 4.血清中 GSH含量计算公式 GSH含量( mg/L) 测定 OD值 -空白 OD 值 -3 mmol/L) ×标准品浓度( 20×10 标准 OD值-空白 OD值 ×GSH分子量( 307)×样本测试前稀释倍数 组织中 GSH含量公式 测定OD值-空白OD值 -3 GSH含量(mg/gprot )×标准品浓度(20×10 mmol/L) ×GSH分子量( 307)×样本测试前稀释倍数÷待测组织匀浆液蛋白浓度 (gprot/L ) 参考文献 Lapshina E A, Sudnikovich E J, Maksimchik J Z, et al. Antioxidative enzyme and glutathione S-transferase activities in diabetic rats exposed to long-term ASA treatment [J]. Life sciences, 2006, 79(19): 1804-1811.

阿拓莫兰(注射用还原型谷胱甘肽)

阿拓莫兰(注射用还原型谷胱甘肽) 【药品名称】 商品名称:阿拓莫兰 通用名称:注射用还原型谷胱甘肽 英文名称:Reduced Glutathione for Injection 【成份】 主要成分:还原型谷胱甘肽,化学名:N(N-L-r谷氨酰基-L—半胱氨酰基)甘氨酸 【适应症】 用于:①化疗患者:包括用顺氯铵铂、环磷酰胺、阿霉素、红比霉素、博来霉素化疗,尤其是大剂量化疗时;②放射治疗患者;③各种低氧血症:如急性贫血,成人呼吸窘迫综合症,败血症等;④肝脏疾病:包括病毒性、药物毒性、酒精毒性及其它化学物质毒性引起的肝脏损害。⑤亦可用于有机磷、胺基或硝基化合物中毒的辅助治疗。 【用法用量】 1.给药途径①静脉注射:将之溶解于注射用水后,加入100ml生理盐水中静脉滴注,或加入少于20ml的生理盐水中缓慢静脉注射;②肌肉注射给药:将之溶解于注射用水后肌肉注射。2.用量:①化疗患者:给化疗药物前15分钟内将1.5g/m2本品溶解于100ml生理盐水中,于15分钟内静脉输注,第2~5天每天肌注本品600mg。使用环磷酰胺(CTX)时,为预防泌尿系统损害,建议在CTX 注射完后立即静脉注射本品,于15分钟内输注完毕;用顺氯铵铂化疗时,建议本品的用量不宜超过35mg/mg顺氯铵铂,以免影响化疗效果。②肝脏疾病:每天肌肉注射本品300 mg或600mg。③其它疾病:如低氧血症,可将1.5g/m2 本品溶解于100ml生理盐水中静脉输注,病情好转后每天肌肉注射300~600mg维持。3.疗程:肝脏疾病一般30天为一疗程,其它情况根据病情决定。

【不良反应】 偶见脸色苍白,血压下降,脉博异常等类过敏症状,应停药。偶见皮疹等过敏症状,应停药。偶有食欲不振、恶心、呕吐、胃痛等消化道症状,停药后消失。注射局部轻度疼痛。【禁忌】 对本品过敏者禁用。 【注意事项】 ①在医生的监护下,在医院内使用本品。②注射前必须完全溶解,外观澄清、无色;溶解后的本品在室温下可保存2小时,0~5 ℃保存8小时。③放在儿童不易触及的地方。【特殊人群用药】 儿童注意事项: 新生儿、早产儿、婴儿和儿童应谨慎用药,尤其是肌内注射。 妊娠与哺乳期注意事项: 老人注意事项: 老年患者应适当减少用药剂量。并在用药过程中严密监视。 【药物相互作用】 本品不得与维生素B12、甲萘醌、泛酸钙、乳清酸、抗组胺制剂、磺胺药及四环素等混合使用。 【药理作用】 还原型谷胱甘肽(GSH)是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,为维持细胞生物功能已呈有重要作用。它是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环及糖代谢。本品能激活多种酶[如巯基(-SH)酶等],从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢,并

小鼠谷胱甘肽转移酶GST酶联免疫分析ELISA

小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织及相关液体样本中谷胱甘肽S转移酶(GST)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)水平。用纯化的谷胱甘肽S转移酶(GST)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽S转移酶(GST),再与HRP标记的谷胱甘肽S转移酶(GST)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽S转移酶(GST)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠谷胱甘肽S转移酶(GST)浓度。 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:450pg/ml ×1瓶×1瓶2-8℃保存标准品稀释液×1瓶×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

谷胱甘肽的制备

谷胱甘肽的制备 背景 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是由L一谷氨酸、L一半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的一种同时具有1一谷氨酰基和巯基的生物活性三肽化合物?,在生物体内具有多种重要的、独特的生理功能,因此又被称为长寿因子和抗衰老因子。作为一种重要的生理活性物质,GSH在解毒、抗辐射、肿瘤、癌症、氧化衰老和协调内分泌的治疗中效果明显且无副作用,这些同类药物所不具有的优点使得GSH在临床和医药领域有着极为广泛的用途【21。在食品加T中,GSH具有抗氧化、防止褐变、强化风味和营养等功能,已被作为生物活性添加剂应用于保健食品的生产中。但GSH在体内循环周期短、易氧化、不能穿过细胞膜,从而限制了其保健和治疗作用的发挥。据报道,脂质体包埋技术能够有效地提高GSH的保护和治疗作用。 试验步骤 1试验材料 谷胱甘肽(纯度≥98.0%) Amresco公司;乙醇、乙醚、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸(均为分析纯)、吐温一80(化学纯)、卵磷脂、胆固醇国药集团化学试剂有限公司;0.05m01·L。磷酸盐缓冲液(PBS) 自制。

2 实验方法 1.2.1脂质体的分离方法 1.2.1.1凝胶柱过滤法选用Sephadex G一25凝胶柱,取lmL脂质体混悬液进行上样分离,采用一定的洗脱剂洗脱,洗脱速度控制在0.5—1.0mL-min~,进行分部收集,测定游离的谷胱甘肽总量,计算包封率。 1.2.1.2洗脱剂的选择取1mg·mL“的谷胱甘肽溶液1mL上柱分离,分别选用去离子水、NaCI、乙醇、PBS、乙酸和PBS(NaCl)为洗脱剂进行洗脱,洗脱速度控制在0.5~1.0mL·min~,进行分部收集,。测定洗脱液中的谷胱甘肽总量,计算回收率。1.2.2脂质体包封率的测定方法 1.2.2.1 游离GSH的测定方法采用优化的Ellman?s测定法”1。 1.2.2.2包封率的计算方法将脂质体与游离谷胱甘肽分离,测定游离的谷胱甘肽量,根据下式计算脂质体包埋率:EE(%)=(1一Cf/Ct)×100%。其中:EE—GSH脂质体包封率;Cf一游离GSH含鼍;Ct一总GSH含量。 1.2.3 pH梯度法制备谷胱甘肽脂质体称取一定量的卵磷脂、胆固醇和叶温一80,溶于乙醚,得到类脂溶液;将类脂溶液置于圆底烧瓶中,在40'(2水浴中旋转蒸发除去乙醚,待类脂物在烧瓶壁上成膜后,加入一定pH的0.3tool·L。1柠檬酸10mL,继续旋转蒸发水合30min,得空白脂质体溶液;将谷胱甘肽加入空白脂质体溶液中,用0.5mol·L。1的磷酸氢二钠溶液调节pH,使pH增加3,将上述混合液在冰浴中短时超声(间歇超声,1s/1s),静置2h,即得脂质体p。 1.2.4脂质体平均粒径和粒度分布吸取少量脂质体悬液,稀释至卵磷脂的含量在0.025%(W/W),装入预处理过的透明小瓶中。用丙酮擦拭瓶外部并吹干。放人激光散射仪中进行检测旧?。激光散射测试条4r牛-:温度:25±0.1℃;角度:90。(即垂直照射);波长:632.8nm;扫描时间:300s/样 2结果与讨论 2.1 脂质体分离方法的确定 2.1.1 分离方法的选择测定包封率的前提是将未包封的游离GSH与脂质体分开,凝胶

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书 【阿拓莫兰药品名称】 通用名:还原型谷胱甘肽片 商品名:阿拓莫兰 英文名:Reduced glutathione Tablets 汉语拼音:Huanyuanxing Guguanggantai Pian 【阿拓莫兰成份】 阿拓莫兰主要成份为还原型谷胱甘肽,其化学名为N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸。 【阿拓莫兰性状】 阿拓莫兰为薄膜衣片,除去包衣后显白色。 【阿拓莫兰产品介绍】 阿拓莫兰的主要成分是还原型谷胱甘肽(GSH),GSH是哺乳动物细胞内含量丰富的低分子量多肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸残基组成,对人体具有十分重要的生理功能:解酒精毒性、保护肝脏; 解药物毒性(抗肿瘤药、抗结核药、中枢神经药物、对乙酰氨基酚等中毒),防止抗癌药物的副作用,预防和治疗放射线损害;对抗自由基,抗氧化;提高机体免疫力。 人体在许多状态下都可以使细胞内GSH生物合成能力降低,含量下降,尤其是在病理状态下。外源性GSH的补充,可以预防、减轻、中止、组织细胞的损伤,改变病理生理过程。药理毒理研究表明: 阿拓莫兰的主要成分(还原型谷胱甘肽)是含有巯基(SH)的三肽类化合物,在人体内具有活化氧化还原系统,激活SH酶、解毒作用等重要生理活性。参与体内三羧酸循环和糖代谢,促进体内产生高能量,起到辅酶作用。还原型谷胱甘肽是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氢酶的辅酶。还原型谷胱甘肽能激活体内SH酶等,促进碳水化合物、脂肪及蛋白质的代谢,以调节细胞膜的代谢过程。还原型谷胱甘肽参与多种外源性、内源性有毒物质结合生成减毒物质。 【阿拓莫兰适应症】 1)肝损伤:病毒性肝病,药物性肝病,中毒性肝损伤,脂肪肝,肝硬化等; 2)肾损伤:急性药物性肾损伤,尿毒症; 3)化放疗保护; 4)糖尿病:并发症,神经病变; 5)缺血缺氧性脑病;各种低氧血症。 【阿拓莫兰用法用量】 成人常用量为每次口服400mg(4片),每日三次。疗程12周。 【阿拓莫兰不良反应】 1、过敏症:偶有皮疹等过敏症状,应停药。

还原型谷胱甘肽的稳定性研究

919 还原型谷胱甘肽的稳定性研究 朱义福 (星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆 526040) 摘要:本文研究了pH 、温度、光照以及外加抗氧化剂等因素对还原型谷胱甘肽(GSH)纯品溶液稳定性的影响。结果表明,GSH 水溶液在pH=2.0~4.0范围内最为稳定;在30 ℃以下,24 h 内自身氧化较少;应避光处理或保存;外加抗氧化剂在pH=6.0时,保护作用明显。 关键词:谷胱甘肽;稳定性;抗氧化剂 文章篇号:1673-9078(2011)8-919-923 Stability of Reduced Glutathione under Different Conditions ZHU Yi-fu (Star Lake Bioscience Co., Inc., Zhaoqing 526040, China) Abstract: The effects of pH, temperature, sunlight and antioxidant on the stability of reduced glutathione (GSH) solution were studied in this paper. Results indicated that GSH solution was relative stabile under the following conditions: pH 2.0~4.0 and temperature <30℃. And it should be kept in dark place. Besides, the GSH solution showed the highest stability in the presence of antioxidant at pH 6.0. Key words: glutathione; stability; antioxidant 谷胱甘肽(Glutathione ,GSH ),即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的生物活性三肽化合物。GSH 是许多酶反应的辅基,在生物体内具有清除体内自由基、解毒等多种重要的生理功能,特别是对于维持生物体内适宜的氧化还原环境具有重要意义[1]。国内外关于GSH 的研究主要集中在菌种选育[2]、培养条件优化[3]、分离纯化[4]和临床应用上[5],其工业化生产技术一直被国外极少数发达国家所垄断,国内尚未实现工业化生产,从而造成GSH 的市场价格居高不下,影响了GSH 的推广和应用。 GSH 易溶于水、稀醇、液氨和N,N-2甲基甲酰胺,而微溶于或不溶于醇、醚和酮。GSH 的固体较稳定,而水溶液在外界环境中受温度、pH 、光照等条件影响,易氧化,产生氧化型谷胱甘肽(即GSSG ),GSSG 是由两分子GSH 脱氢后通过二硫键相连的二聚体,其反应如下: 氧化型GSSG 不具有生理活性,只有还原型GSH 才能发挥重要的生理功能。GSH 的不稳定性是造成较难分离纯化、产品纯度不高的重要原因。因此,本文通过大量的试验对GSH 稳定性进行研究,为国内GSH 的工业化生产提供参考。 收稿日期:2011-03-26 作者简介:朱义福(1976-),男,工程师,研究方向:生物医药分离纯化技术 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 GSH 纯品(纯度>98%):日本Kyowa 公司。四氧嘧啶(Alloxan ):美国sigma ; 二硫苏糖醇(DTT ):上海生工所;抗坏血酸(Vc ):广州化学试验厂;保险粉(Na 2S 2O 4):上海国药集团化学试剂公司;其它试剂为国产分析纯。 1.2 主要仪器 SC-15数控超级恒温槽:宁波新芝生物科技公司;CR21G 高速冷冻离心机:日本Hitachi 公司;752型紫外可见光分光光度计:南京第四分析仪器公司;S40 pH 精密测量仪,AB54-S 分析天平:瑞士METTLER TOLEDO 公司;RW20D 搅拌器:德国IKA 公司;Agilent LC1100液相色谱仪:美国HP 公司。 1.3 分析方法 GSH 含量测定采用四氧嘧啶Alloxan 试剂法 [6]:(1)标准曲线的制作:准确称取6.146 mg 的GSH 标准品,用40%乙醇溶解,定容至100 mL ,得到浓度为200 μmol/L 的标准液。取0 mL 、0.2 mL 、0.4 mL 、0.6 mL 、0.8 mL 、1.0 mL 上述标准液于试管中,补加去离子水至1.0 mL ,配成浓度为0 μmol/L 、40 μmol/L 、80 μmol/L 、120 μmol/L 、160 μmol/L 、200 μmol/L 的GSH 溶液。然后依次加入pH 7.6的磷酸缓冲液2.5 mL ,0.1 mol/L 的甘氨酸溶液0.5 mL ,以及Alloxan 试剂1.0 mL ,反应20

谷胱甘肽的化学与医疗作用

谷胱甘肽的化学与医疗作用 卢 薇 (江苏职工医科大学 南京 210029) 摘要 谷胱甘肽(glutathione,GSH)在体内以氧化型(GSSG)和还原型(GSH)2种形式 存在。GSH分子中的巯基容易失氢氧化,因而可以消除体内的活性氧,具有保护酶和蛋白 质免受氧化,保护脏器免受损伤的功效。人工合成的GSH已广泛用于临床。 关键词 谷胱甘肽 活性氧 酶 解毒作用 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是体内最早发现的天然的游离三肽,普遍存在于动物组织中,如肝、肾、心肌、脾、肠、脑和红细胞等,细胞内浓度为0.5mmol/L~10mmol/L;血浆内浓度仅1μmol/L~5μmol/L,约为细胞内浓度的千分之一。 GSH是由谷氨酸(G lu)、半胱酸(Cys)和甘氨酸(G ly)组成的非蛋白巯基化合物,含有γ-羧基形成的酰胺键,其化学结构及合成反应如图1。 2分子GSH脱氢氧化成为GSSG,后者又可通过磷酸戊糖代谢通路中所产生的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和GSH还原酶的作用,还原成GSH。 还原型谷胱甘肽分子中最重要的结构是巯基(-SH),-SH容易失氢发生氧化,因此,GSH可以保护一些含-SH的蛋白质及酶免受氧化剂的损害;同时,-SH中的氢容易被自由基提取,如下式所示: -SH+?R-S?+HR 因而具有清除自由基的能力。 还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽在细胞内维持一定的比值(GSH/GSSG=100/1),GSH的含量随年龄、营养状况及内分泌的不同而变化,如甲状腺机能低下或肝脏疾病、药物中毒等情况下会引起GSH水平降低。GSH/GSSG保持稳态关系对维护组织细胞、多种蛋白质、酶的结构及其功能有重要意义。 1 谷胱甘肽的生理功能 1.1 清除体内的过氧化物及自由基 GSH可在含硒过氧化物酶(GSHpx)的催化下将体内有害的过氧化物、自由基(O2-?、HO?)加以化解和清除,如下式所示: 2GSH+ROOH GSHpx GSSG+2ROH ROOH和自由基不仅氧化某些具有重要生理作用的含巯基的酶和蛋白质,使之丧失活力,而且还将细胞膜磷脂分子中多不饱和脂肪酸氧化生成过氧化物;而生成的过氧化脂质又通过自身的催化连续生成大量过氧化物,因此GSH通过自身氧化能中止脂质过氧化的连锁反应。

谷胱甘肽

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抗氧化剂和自由基清除剂谷胱甘肽具有环保护作用的有害影响,包括细菌,病毒污染物和自由基. 调节其他抗氧化剂-谷胱甘肽其他重要的抗氧化剂如维生素C和E不能做好他们的工作,充分保护您的身体免受疾病. 解毒剂- 另一个主要功能是谷胱甘肽的解毒外国化合物等致癌物和有害代谢物. 谷胱甘肽是人体的#1防御细胞的损伤. 维他命A,C,E及贝他胡萝卜素,"抗氧化的"维生素,帮助保护细胞免受损伤. 但主要研究者发现,我们的第一道防线是一种肽(片蛋白),称为谷胱甘肽最重要的抗氧化剂和detoxifier于人体. 优秀的科学家,在史丹福大学研究的影响谷胱甘肽缺乏对人类细胞. "他们指出,如果没有适当的水平谷胱甘肽我们从字面上细胞"自杀"的"经历一个过程称为程序性细胞死亡" 殊死搏斗,在每一个细胞在你身上. 我们的细胞是在打一场仗不断地生存下去.科学家们相信,每一个细胞在体内是攻击000次,一天中的氧和氢分子(freeradicals),企图毁灭我们的身体,结束自己的生命. 这些分子撕裂孔,在我们的细胞,破坏了蛋白质,脂肪,即使是我们的基因.它们可造成的细胞发生变异,成为病害的其他方式,或者干脆停止运转和模具. 破坏氧化自由基牵连的原因是心脏病,中风,阿尔茨海默病,parkenson的疾病,癌症,白内障以及其他健康问题. 这些破坏分子所产生的身体的副产品身体的正常功能. 他们因暴露于太阳X射线和辐射,污染,压力大,体力消耗和因各种疾病. 口服谷胱甘肽(+142%谷胱甘肽)抑制酪氨酸酶活性.一旦酪氨酸酶活性的代谢一直被抑制,然后逆转的时候去合成光色素称为褐色素(phaeomelanin)而非造成皮肤黑、黯淡的合成色素称为真黑素(eumelanin). 循环不断地流,只要存在左旋谷胱甘肽并存代谢黑色素.最后,轻易将你的皮肤迅速改变为白嫩细腻. 经过美国国家食品药品管理局验证和麻萨诸州州总医院的成分及效果检测,亚当森大学的化验室分析数据材料这一切证明我们的超级全身美白胶囊,是一个最安全的,纯净,有效的口服皮肤增白剂在当今市场.

谷胱甘肽含量测定

【实验目的】 了解植物组中中抗坏血酸-谷胱甘肽循环代谢过程,学习还原型谷胱甘肽含量的测定原理和方法。 【实验原理】 谷胱甘肽是有谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Gly)组成的天然三肽,是一种含巯基(—SH)的化合物,广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG)。2-硝基-5-巯基苯甲酸为一黄色产物,在波长412nm处具有最大光吸收。因此,利用分光光度计法可测定样品中谷胱甘肽的含量。 【器材与试剂】 1.实验仪器与用具 研钵、高速离心机、移液管、离心管、试管、分光光度计 2.实验试剂 还原型谷胱甘肽标准液;偏磷酸溶液;磷酸溶液缓冲液(pH7);二硫代硝基苯甲酸(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)溶液;蒸馏水。 3.实验材料 小麦叶片 【实验步骤】 1.标准曲线制作 取7支试管,编号,按照下表加入各种试剂,混匀,25℃保温反应10min。以1号管为参比调零,测定显色液在412nm处的吸光度。以吸光度为纵坐标,还原型谷胱甘肽物质的量(μmol)为横坐标,绘制标准曲线。 试管号 试剂(ml) 1 2 3 4 5 6 7 10μg/ml GSH标准液0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

蒸馏水 2.0 1.9 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 pH7磷酸缓冲液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 DTNB试剂0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 GSH浓度μg/2ml 0 1 2 4 6 8 10 2.提取 取材后,称取0.2g样品置于研钵中,加入少量5%偏磷酸研磨成匀浆后,定容至6ml, 8000转离心10min。收集上清液来测定谷胱甘肽含量,测量提取液体积。 3.测定 取上清液2ml,显色,操作同标准曲线。重复3次。 显色反应后,分别记录样品管混合液的吸光度和空白对照管反应混合液的吸光度。根据吸光度差值,从标准曲线上查出相应的还原型谷胱甘肽量,计算还原型谷胱甘肽含量(μmol/g)。 4.计算 GSH含量(μmol/g)=(C x×V t)/ (FW×V S) 式中,C x为2ml样品中GSH的含量(μg);V t为样品提取液总体积(ml);V s为显色时样品液体积(ml);FW为样品质量(g)。 【实验结果】 1.标准曲线 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 GSH浓度(μg/2ml)0 1 2 4 6 8 10 吸光度值A 0 0.067 0.134 0.314 0.452 0.579 0.723 以GSH浓度(μg/2ml)为横坐标,吸光度值为纵坐标,建立标准曲线。

还原型谷胱甘肽的作用机制

还原型谷胱甘肽的作用机制 ( 摘要)肝脏疾病是临床常见疾病,研究还原型谷胱甘肽( Glutathione,GSH) 在 肝细胞中的作用机制,进而描述氧化应激在肝细胞损伤中的作用,着重讨论了还原型谷胱甘肽的本质及其作用机制。结果表明GSH作为抗氧化剂和细胞代谢剂,成为临床中重要的治疗和辅助治疗药物。 (关键词) 氧化应激还原型谷胱甘肽肝损伤 (Abstract) liver disease is common clinical disease of reduced glutathione (Glutathione, GSH) in the mechanism of liver cells, and then describe the oxidative stress in the liver cell injury, focusing on the prototype of glutathione also glycylglycine nature of its mechanism. The results showed that GSH as an antioxidant and cell metabolism of drugs, to become an important clinical treatment and adjuvant drugs. (Key words) oxidative stress; reduced glutathione; liver injury 还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成的一种三肽,广泛存在于哺乳动物体内,参与体内三羧酸循环及糖代谢,使人体获得高能量,是细胞内主要的巯基(—S H)和含量最丰富的低分子多肽,是细胞内主要的代谢调节物质,其对生物体氧化还原系统和巯基酶有活化作用,可清除组织中的氧自由基。肝脏是体内GSH主要的合成和消耗场所,其受有毒物质或射线等损害时,可诱导产生大量氧自由基;GSH可提供活性巯基或在酶催化下直与自由基结合,保护和恢复肝细胞功能。GSH能激活多种酶。如巯基(—SH) 酶一辅酶等,从而促进糖类、脂肪及蛋白质代谢。并能影响细胞的代谢过程,是一种细胞内重要的调节代谢物质。GSH由于其广泛的生物效应。临床上除应用于肝脏疾病外,还应用于恶性肿瘤、神经、泌尿、消化、等多种疾病。 现将G S H的作用机制及临床应用综述如下。 一氧化应激损伤肝细胞的机制 肝细胞损伤是各种肝病共同的病理基础,其中氧化应激在肝细胞损伤中占有很重要地位。因此,对氧化应激导致肝细胞损伤的研究便成为治疗肝脏疾病的一个重要途径。机体存在着正常的自由基清除体系。生理情况下,活性氧簇( Reactive Oxygen Species ROS ) 的产生与清除保持平衡,不出现细胞损伤;病理情况下,体内ROS产生过多或抗氧化体系不足,即出现促氧化物与抗氧化物之间的动态平衡失调,过多的ROS 可引起肝细胞膜、线粒体膜、微粒体膜及溶酶体膜发生的脂质过氧化,产生脂质过氧化物( 1ipoperoxides,LPO) 及其降解产物( 如丙二醛MDA等),LPO不仅使ROS增加,毒性增强,而且可抑制抗氧化系统,削弱细胞防御机制,增加其对外源性过氧化物毒害的敏感性。因此,体内ROS 的过渡激活、脂质过氧化反应的引发和持续是肝细胞损伤的重要病理基础之一。 二GSH的作用机制 还原型谷胱甘肽(GSH)广泛存在于正常细胞,谷胱甘肽作为一种抗氧化剂,能活跃肝脏代谢,保护肝细胞膜,增强肝脏解毒功能,通过外源性补充谷胱甘肽,可增强肝细胞的解毒功能,促进损伤的肝细胞修复、再生,防止胆汁瘀积,促进黄疸消退及肝功能恢复。GSH是非酶性抗氧化剂。通过其巯基氧化一还原态的转换,作为可逆的供氢体。其分子特点是具有活性巯基(-SH)和y-谷氨酰键。其中巯基是GSH最重要的功能基团。巯基参与机体内多种重要生化反应,保护体内重要酶蛋白巯基不被氧化、灭活而保证能量代谢和细胞利用。在GSH代谢途径中,在GSH转移酶( GST )、谷氨酰转肽酶( Y-GTP )、GSH-过氧化

不同方法提取谷胱甘肽的比较

实验一不同方法提取谷胱甘肽的比较 一、实验目的 1、掌握从干酵母中粗提谷胱甘肽的各种方法。 2、掌握还原型谷胱甘肽定量的方法。 二、实验原理 谷胱甘肽是种重要的三肽,以还原型(GSH)和氧化型(GSSG)广泛的存在于动、植物及微生物。在生物体内起作用的主要是GSH,是细胞内主要的还原性物质,能保护细胞免受氧化性、毒害性化合物和辐射的伤害,还是酶的辅因子。GSH在临床上是重要的解毒药物。 谷胱甘肽是小分子物质,水中溶解度较大,细胞表面出现裂缝就能分散到溶剂中,故可用一些温和的方法提取。 本实验采用热处理、冰冻处理、酸处理、有机溶剂处理等方法提取酵母细胞中的谷胱甘肽,比较最后的得率,探讨各种提取方法的优点和缺点。 三、实验器材、材料和试剂 1、器材 冰箱,离心机,水浴锅,电炉,滴定管,烧杯,玻棒,研钵。 2、实验材料 活性干酵母,2%偏磷酸,5%碘化钾,0.0001mol/l碘酸钾溶液,淀粉指示剂, 乙酸:乙醇(2:1),36%乙酸溶液。 四、实验步骤 1、热水抽提: 1g干酵母与5ml水混合,加15ml沸水,置100℃水浴保温10min,立即放入冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V1。 2、冷冻研磨后有机酸搅拌提取: 1g干酵母先在研钵中研细,与10ml水混合,-20℃冷冻成半固体状,研磨5min转入小烧杯,加10ml 36%乙酸搅拌15min,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V2。 3、酸热处理: 1g干酵母加20ml 2%偏磷酸,60℃水浴中搅拌抽提15min,置冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V3。 4、有机混合液处理: 1g干酵母加20ml有机混合液(甲酸:乙醇=2:1),室温搅拌抽提15min,置冰水速冷,取10ml离心,取5ml上清滴定,得滴定体积V4。 5、碘量法测定: 取5ml待测样品,置于250ml锥形瓶中,加入5ml2%偏磷酸溶液、1ml5%碘化钾溶液和2滴淀粉指示剂,用0.0001mol/L的碘酸钾滴定至溶液由无色变为蓝色为止。 KIO3+5KI+6HPO3→3I2 +6KPO3 +3H2O 五、结果及分析 1.将各种方法所消耗的碘酸钾的体积数添入下表 2.比较本实验四种提取酵母中谷胱甘肽的方法的优缺点。 六、注意事项 1、待测定的谷胱甘肽提取液置4℃冰箱保存,防止氧化。 2、酸性溶液中,淀粉会水解,使滴定终点的颜色发生变化,故滴定操作要快速完成。

还原型谷胱甘肽的研究及应用进展

还原型谷胱甘肽的研究及应用 王嘉怿 (教师教育学院生物师范 22120907) 摘要:谷胱甘肽(glutathione,GSH)是人类细胞中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,其中还原型谷胱甘肽是主要的活性状态。近年来,随着对GSH的不断了解,GSH的临床应用也日益广泛。在当前的研究基础上,对GSH的研究继续深入,其应用必将取得进一步的发展。 关键词:谷胱甘肽还原型临床应用 1.引言 谷胱甘肽是哺乳动物细胞中重要的非蛋白硫氢化合物,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基。其中还原型谷胱甘肽是主要的活性状态,具有许多重要的生理功能。其巯基在对内源性和外源性化合物的排毒和抗氧化过程中起着非常重要的作用,从而维持细胞内的氧化还原状态。人体内的许多生化反应都是酶催化反应,这些酶大部分以巯基作为活性基团,巯基的状态决定了酶活性的激活与抑制。GSH是这些酶在体内的天然激活剂,在自由基的反应中,GSH更多的是作为细胞内的自然抗氧化剂发挥作用。国外在GSH治疗肝、肾损害及糖尿病辅助治疗的报道较多,近年随着国内对GSH研究的不断深入,应用也日益广泛。 2. GSH的作用机制 GSH作为一种细胞内重要的调节代谢物质,其既是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环及糖代谢,并能激活多种酶,从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢,能影响细胞的代谢过程,可通过巯基与体内的自由基结合,使之转化成容易代谢的酸类物质从而加速自由基的排泄,同时还可对抗自由基对重要脏器的损害。对于贫血、中毒或组织炎症造成的全身或局部低氧血症患者,可减轻细胞损伤,促进修复。通过转甲基及转丙氨基反应,GSH还能保护肝脏的合成作用,有解毒、灭活激素等功能,并促进胆酸代谢,有利于消化道吸收脂肪及脂溶性维生素。GSH是非酶性抗氧化剂,通过巯基氧化—还原态的转换,作为可逆的供氧体,主要在细胞内的水相提供氧化保护。Haddad等研究发现,GSH参与了脂多糖诱导的细胞因子转录的调节及I-KB/NF-KB 信号通路的调节。Armstrong等发现GSH含量的降低是一种潜在的凋亡早期激活信号,随后产生的氧自由基促使细胞发生凋亡。 3. GSH的临床应用 3.1 在肝损害中的应用 病毒性肝炎、药物性肝损伤、脂肪肝、手术损伤等因素,可导致肝细胞内GSH耗竭或合成减少,各种氧化自由基增加。当体内GSH的浓度低于临界值,各类GSH依赖酶系失活,对氧化自由基的防护减弱,自由基通过生物膜的脂质过氧化作用,引起肝细胞膜、线粒体膜、溶酶体膜损害,并直接造成肝细胞巯基酶类

含谷胱甘肽最多的食物

含谷胱甘肽最多的食物 谷胱甘肽是一种对人的身体特别有好处的物质,因为在延缓衰老解读美白抗肿瘤形成等方面都可以发挥出谷胱甘肽的作用。同时临床医学上也发明出了含有大量谷胱甘肽的药物,这些药物可以用于治疗结膜炎肝炎等疾病。在日常生活中含有谷胱甘肽的食物也有非常多,什么食物含的谷胱甘肽是最多的呢? 在很多水果中都含有谷胱甘肽,如番茄(俗称西红柿)、樱桃、圣女果(俗称小西红柿)等。所以,在日常生活中多吃些水果,是有益于延缓衰老、延年益寿的。 应用 谷胱甘肽具有广谱解毒作用,不仅可用于药物,更可作为功能性食品的基料,在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。 临床药物 已人工研制开发出了谷胱甘肽药物,广泛应用于临床,除利用其巯基以螯合重金属、氟化物、芥子气等毒素中毒外,还用在肝炎、溶血性疾病以及角膜炎、白内障和视网膜疾病等,作为治疗或辅助治疗的药物。近年来,西方科学家,尤其是日本学者发现谷胱甘肽具有抑制艾滋病毒的功能。 最新研究还表明,GSH能够纠正乙酰胆碱、胆碱酯酶的不平衡,起到抗过敏作用,还可防止皮肤老化及色素沉着,减少黑色素的形成,改善皮肤抗氧化能力并使皮肤产生光泽,另外,GSH在治疗

眼角膜病及改善性功能方面也有很好作用。 与维生素C 另外,维生素C也是体内一种重要的抗氧化剂。由于维生素C 能可逆地加氢或脱氢,故维生素C在体内许多氧化还原反应中有重要作用。例如,许多酶的活性基团是巯基(-SH),维生素C能够维持-SH处于还原状态而保持酶的活性;维生素C可以使氧化型谷胱甘肽转变为还原型谷胱甘肽(GSH),使机体代谢产生的过氧化氢(H2O2)还原;维生素C还可保护维生素A、E及某些B族维生素免受氧化。因此,运用谷胱甘肽时,与维生素C并用,能够提高其功效。 食品 添加谷胱甘肽可起到意想不到的作用 1、加入到面制品中,可起到还原作用。不仅使制造面包的时间缩短至原来的二分之一或三分之一,劳动条件大幅度改善,并起到食品营养的强化作用及其他功能。 2、将其加入到酸奶和婴幼儿食品中,相当于维生素C,可起到稳定剂的作用。 3、将其拌到鱼糕中,可防止色泽加深。 4、加到肉制品和干酪等食品中,具有强化风味的效果。

谷胱甘肽还原酶检测试剂盒简介

谷胱甘肽还原酶检测试剂简介 谷胱甘肽还原酶的作用: 一、谷胱甘肽还原酶(GR)在人类细胞中具有极其重要的生理功能,广泛存在于人体肝、肾、心红细胞、单核巨噬细胞等组织细胞中。它可及时地清除人体代谢过程中产生的氧自由基(OFR),是维持细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)含量的主要黄素酶。对保护肝细胞膜完整具有非常重要的作用意义。 在《临床肝病实验诊断学》和《临床检验诊断解析》中明确标示,血清谷胱甘肽还原酶活性测定可用于协助诊断肝脏疾病,血清谷胱甘肽还原酶活性上升可以辅助诊断肝炎、肝硬化、梗阻性黄疸及相当数量引发的肝肿瘤。原发性肝细胞癌和广泛转移性肝肿瘤时,血清谷胱甘肽还原酶活性明显升高,急性病毒性肝炎或中毒性肝炎中度升高,而肝硬化是血清GR轻度升高。 二:检测谷胱甘肽还原酶的临床意义 1、急性肝炎早期阶段,血清谷胱甘肽还原酶敏感性最高,可用于肝损的早期检测; 2、急性肝炎患者GR比转氨酶更早增加达到峰值,早早期肝脏损伤判断的首选指标; 3、GR有助于判断亚临床DILI,提高临床DILI的诊断率 4、不同于ALT和AST在肝细胞膜破裂和线粒体破裂时才能检测出来,GR填补肝细胞受损早期自我修复阶段至破裂进程中诊断的空白,将更有利于早期肝炎的诊断和治疗

三、临床解读: 谷胱甘肽和谷丙、谷草在化验单上的具体解读,谷胱甘肽的血清血浆正常值是33-73U/L,共有四种情况。 1、谷胱甘肽指标升高,谷丙和谷草指标正常,提示有肝损伤的风险,建议加强对肝脏的检测频率,有利于发现早期肝损伤。 2、谷胱与谷丙,谷草同时升高,提示进入肝损伤爆发期,建议临床治疗措施干预。 3、谷胱甘肽升高,谷丙、谷草下降,提示正在进行肝损伤修复,可以结合三者评估临床治疗情况。 4、当三者都出现下降,情况有两种极端提示:(1)是修复完成,临床好转。(2)是重型肝炎出现严重情况,出现胆酶分离现象。 另外一种是红细胞的检测,正常值4.7-13.2U/gHb 红细胞主要针对“蚕豆病”和遗传性伯氨喹溶血病人,谷胱甘肽还原酶降低,红细胞的细胞膜容易被氧化和分解,导致溶血性贫血和溶血性黄疸。

总谷胱甘肽检测试剂盒(DTNB速率比色法)

总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB 速率比色法) 简介: 谷胱甘肽(glutathione ,GSH)存在于几乎身体的每一个细胞,参与细胞许多功能活动,是一种氧自由基消除剂。还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成,能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG),其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。 总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)(T otal Glutathione Assay Kit)是一种简单易行的检测总谷胱甘肽(T-GSH)的试剂盒,其检测原理是谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH),由GSSG 还原成的GSH 和样品本身含有的GSH 都与发色底物DTNB 反应,生成黄色的TNB 和GSSG 。该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。该试剂盒仅用于科研,不用于临床诊断或其他用途。 组成: 操作步骤(仅供参考): 1、 配制GSH 标准储存液:取10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH 2O ,溶 解并混匀,即为还原型GSH 标准储存液(10mM)。一部分立即使用,其余适当分装后-20℃保存。 2、 配制50×GSH 还原酶:按GSH 还原酶原液:GSH assay buffer =1:49的比例混合, 即为50×GSH 还原酶。-20℃保存,3个月有效。 3、 配制T-GSH 检测工作液:按下表配制T-GSH 检测工作液。 1个样品 10个样品 50个样品 GSH assay buffer 1.6ml 16ml 80ml DTNB 储存液 5μl 50μl 250μl 编号 名称 TO1049 100T Storage 试剂(A): 还原型谷胱甘肽(GSH)标准 10mg 4℃ 避光 试剂(B): GSH assay buffer 250ml RT 试剂(D): 蛋白沉淀剂 4g RT 避光 试剂(E): NADPH 10mg -20℃ 避光 试剂(F): DMSO 1.5ml RT 避光 试剂(G): ddH 2O 50ml RT 避光 使用说明书 1份

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