枇杷仁中苦杏仁苷的HPLC分析
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应用
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应 用 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【关键词】黄芩黄芩苷化学分析含量测定 黄芩苷具有抗菌消炎、降压利尿等作用，是中药黄芩的主要有效成分之一。黄芩苷几乎不溶于水、乙醚、苯、氯仿，难溶于甲醇、乙醇、丙酮，微溶于热冰乙酸、碳酸氢钠，易溶于N，N二甲基甲酸胺、吡咯。本文仅就不同制剂中黄芩苷含量测定方法与应用，介绍如下。 1 方法与应用 陶涛等［1］用薄层紫外分光光度法测定双解口服液中黄芩苷的含量，用硅胶H作固定相，乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水(5∶3∶1∶1)为展开剂，样品液直接点样，刮下斑点后用50%乙醇洗脱，同时做空白，在岛津UV2100，278 nm处测定其吸收度，标准曲线为Y=18.871X+0.437(r=0.9999)，平均回收率为98.2%。该方法受主观因素影响较多，容易造成较大误差，重复性差已较少使用。
孟蕾蕾［2］用双波长紫外分光光度法测定小儿安金丸中黄芩苷含量，在以光束紫外可见分光光度计TU1901下测定,参比波长为250 nm，测定波长为278 nm，平均回收率为99.80%,RSD=1.23%，方法可靠。 颜耀东等［3］采用双波长薄层扫描法测定牛黄清胃丸中黄芩苷的含量，样品用甲醇提取，在聚酰胺板上用醋酸—乙醇(6∶1)，2次展开分离后,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以LR=280 nm，XS=207 nm进行扫描测定，平均回收率为98.19%,RSD=1.47%。应用该方法测定牛黄清胃丸中黄芩苷含量，分离效果好，结果准确。 卢劲伟［4］采用双波长薄层扫描法对凉膈散中黄芩苷含量进行测定,样品用50%乙醇提取,在聚酸胺薄膜上用30%醋酸展开,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以测定波长KS=282 nm;参比波长KR=360 nm,平均回收率为98.9%,RSD=1.03%。本法对黄芩苷分离效果好,不用特殊处理就可将干扰成分与欲测成分分离，方法简便、灵敏。 王增理等［5］采用二阶导数差示脉冲法对药材黄芩中有效成分黄芩苷的含量进行了测定，扫描范围为-0.60～2.40 mg/mL,扫描速度为50 mV/s,电流灵敏度为50 tA/V,脉冲振幅为20mV，结果平均回收率为99.69%,RSD=0.57%，表明该法精密度较高。
苦杏仁苷研究进展综述
苦杏仁苷研究进展 学生：指导老师： 摘要：苦杏仁始载于《神农本草经》, 为山杏P runusarmeniaca L. var. ansuMax im. 的干燥成熟种子, 苦杏仁中含有苦杏仁苷，苦杏仁苷被自身含有的苦杏仁酶水解后, 易产生氢氰酸, 故食入过量或生食可引起氢氰酸中毒, 抑制细胞呼吸, 使细胞内窒息组织缺氧; 本文对苦杏仁苷近年的药理作用，炮制，临床应用等方面的研究进行综述。 关键词：苦杏仁苷；炮制；综述 苦杏仁苷内服后, 可在体内分解为氢氰酸和苯甲醛, 氢氰酸对呼吸中枢可产生一定的抑制作用, 使呼吸运动趋于安静而达到镇咳平喘的作用。祖国医学认为苦杏仁味苦, 性温, 有小毒, 具有降气、止咳、平喘、润肠通便之功效, 为临床常用中药材, 但大量服用会引起中毒。开发利用前景日趋广泛。苦杏仁苷含有两分子的葡萄糖，一分子的氰氢酸（镇咳平喘作用成分）和一分子的苯甲醛(止痛作用成分)。 1 苦杏仁苷的分子结构和毒性 苦杏仁苷也称作维生素B17，广泛存在于杏、桃、李子、苹果、山楂、枇杷等多种蔷薇科植物果实的种子中,尤其在苦杏仁中含量较多,大约在2%～3%。苦杏仁苷是传统中药苦杏仁中的有效成份,它已成为医药上常用的祛痰止咳剂、辅助性抗癌药物。苦杏仁苷分子结构是由一单元苯甲醛、一单元氢氰酸和两单元葡萄糖组成。其分子式为C20 H27NO11，异构体D型和L型。 研究说明，苦杏仁苷口服给药的毒性大于静脉给药的原因是苦杏仁苷被肠道微生物水解会产生较多的氢氰酸。如果处理小鼠使其肠道内微生物抑制,则胃肠给药苦杏仁苷300 mg／kg未出现死亡现象,如未经处理,则相同剂量死亡率为60%。人口服苦杏仁苷每日4 g,持续半个月或静脉注射1个月可见毒性反应,以消化系统较为多见,此外还表现为心电图T波改变、房性早博,停药后以上毒性反应均可消失。如果剂量减为每日口服0.6～1 g ,则可避免毒性。 2 苦杏仁苷的药理作用 2.1 抗肿瘤作用 苦杏仁苷具有良好的抗肿瘤作用,被用作治疗癌症的辅助药物。将苦杏仁苷制剂用于晚期癌症患者的治疗,可使症状改善,存活期延长。将苦杏仁苷用于癌性胸水的治疗,发现苦杏仁苷对癌性胸水有一定程度的控制和缓解作用。苦杏仁苷对子宫颈癌JJC26株的抑制率为50%～70%。苦杏仁苷及其水解所产生的氢氰酸和苯甲醛体外试验均被证明有抗癌作用,癌细胞内硫氢化酶较正常细胞少,因此，对苦杏仁苷水解释放出氢氰酸的解毒能力较差。苦杏仁苷加苯甲醛或苦杏仁苷加β-葡糖苷酶可明显提高抗癌效力,已发现癌细胞无氧酵解占优势,其产物乳酸形成的偏酸性环境有利于提高β-葡糖苷酶的活性, 促使苦杏仁苷在癌细胞中水解出较多的氢氰酸和苯甲醛而发挥更强的抗癌作用。研究发现，将0.1，0.5，1.1 mmol/L 终浓度的苦杏仁苷及终浓度为250 nmol/L的β-葡萄糖苷酶共同作用于LoVo细胞24 h,通过形态学观察发现细胞呈现出凋亡为主的形态改变,少数呈坏死的特征；如果进一步经DNA 凝胶电泳、流式细胞检测均可见到典型的细胞凋亡特征改变,实验说明，苦杏仁苷被β-葡萄糖苷酶特异性激活后具有导致大肠癌LoVo细胞出现以凋亡为主的作用。因此，苦杏仁苷
桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定
的生理作用[3]。黄连素是一种重要的生物碱，是我国应用很久的中药。可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取，具有显著的抑菌作用。黄连素在临床中一直作为非处方药用于治疗腹泻。肠易激综合征临床特点主要是腹痛、腹胀、排便习惯和性状改变，一般持久性存在，间歇发作，患者常有常运动功能紊乱和肠道菌群失调。本研究治疗原则主要从松弛平滑肌、扩充肠容积性、促进肠动力角度出发进行治疗。本研究通过马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征，观察其疗效，结果表明，观察组和对照组组内比较，治疗后临床症状评分均明显低于治疗前（P ＜0.05） ，观察组治疗前临床症状评分与对照组治疗前比较，无显著性差异（P ＞0.05） ；观察组治疗后临床症状评分低于对照组治疗后（P ＜0.05） 。提示马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征对于改善患者的临床症状明显。另外本研究还发现，观察组治疗总有效率明显高于对照组（P ＜0.05） 。因此通过本研究表明，马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征具有明显疗效，值得临床推广使用。参考文献 [1] 斯锞,廖文.马来酸曲美布汀联合双歧杆菌治疗功能性肠胀气疗 效观察[J].四川医学,2009,30(1):19-21. [2] 吴泽生.马来酸曲美布汀联合酪酸菌制剂治疗肠易激综合征的 疗效分析[J].华北煤炭医学院学报,2006,8(3):339-340. [3] 姚凡保,马海生,廖浩峰.双歧杆菌治疗感染后肠易激综合征58例 疗效观察[J].华夏医学,2009,22(1):77-78. 桃仁来源于蔷薇科Prunus 属植物，桃[Prunus persica （L.）Batsch.]或山桃[Prunus daridiana （Carr.）Franch.]的干燥成熟种子。收载于《中国药典》[1]，均含苦杏仁甙（amygdalin ）及苦杏仁酶（emulsin ）等物质[1]。苦杏仁甙含量测定在药典采用间接测定氢氰酸容量法[2]，而桃仁在药典无含量测定项。苦杏仁甙的测定方法还有分光光度法[3] 、HPLC 法[4]等。本实验系统与已报道的HPLC 系统相比，有效地提高了苦杏仁甙的分离度，相关性好，可用于桃仁的质量控制。1 材料 实验所用桃仁为市售品，经中药室鉴定，桃仁为山桃的干燥成熟种子。 岛津LC-10A 高效液相色谱仪，SPD-10A 检测器，C-R6A 数据处理机，甲醇为色谱纯，其他均为分析纯。 苦杏仁甙对照品采用中国药品生物制品检定所产品，批号820-20002，供含量测定用。2 方法和结果2.1 色谱条件 色谱柱Irregular HC 18（4.6mm ×250mm ，10μm ），检测波长210nm ，室温，流动相磷酸盐缓冲液（pH=5.0）∶甲醇（800∶200），流速1mL/min 。2.2 标准曲线 精密称取苦杏仁甙对照品12.50mg 置25mL 量瓶中加ω（甲醇）=0.5溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取此溶液0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 置l 0mL 量瓶中，用ω（甲醇）=0.5的溶液稀释至刻度，以20 μL 定量阀进样，测定峰面积A ，以A 减C 求得回归方程为Y=1.11×103X-1.31×103，r = 0.9999，结果表明浓度为12.5~250.0μg/mL 成良好的线性关系。2.3 精密度和稳定性实验 广州奇星药业有限公司（510310）桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定 赵 耀 【摘要】目的 探讨用HPLC 法定量测定桃仁中苦杏仁甙的含量。方法 IrregularHC 18 (4.6mm ×250mm ，10μm)，流动相为磷酸盐缓冲液 （pH=5.0）-甲醇（800∶200）。结果 苦杏仁甙在0.25~5μg 成线性， r =0.9999，平均回收率100.7%，RSD=1.3%。结论 本方法分离效果好，重现性高，操作简单，可用于质量标准制定。【关键词】桃仁；苦杏仁甙；高效液相色谱法 中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2009）17-0084-02 2.3.1 将同一对照品溶液连续进样5次计算峰面积的RSD 为0.2%。2.3.2 同一样品溶液，在室温条件下，间隔一定时间，在0、2、4、8、12、24、48h 分别测定苦杏仁甙的含量，RSD 为0.5 %，表明样品在48h 内稳定。2.4 加样回收率试验 精密称取已知含量为2.24%的供试品0.2g ，分别加入对照品1~2mg ，按供试液方法制备，测定，计算回收率，结果平均值为100.7%，RSD 为1.3%（表1）。 表1 苦杏仁甙的回收率测定结果（n=5）取样量(g)样品含量(mg) 加入量(mg) 测定量(mg) 回收率(%)0.2139 4.79 1.52 6.33101.30.2106 4.72 2.10 6.8199.50.2033 4.55 1.73 6.2698.80.2100 4.70 1.21 5.94102.50.2221 4.98 1.65 6.65 101.2 2.5 供试品溶液的制备与测定 将供试品粉碎成粗粉，分别精密称取0.2g ，置索氏提取器中，用乙醚提取2h ，弃去乙醚，再用甲醇提取6h ，提取液转移到50mL 量瓶中，用ω（甲醇）= 0.5的溶液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。取0.05mg/mL 的苦杏仁甙对照品溶液，分别进样20μL ，记录峰面积值，用外标法计算，结果见表2，色谱图见图1。3 讨 论 3.1 试验中如样品直接用甲醇超声提取，所得色谱杂质峰较多，干扰苦杏仁甙的测定，改用乙醚脱脂，甲醇回流提取后，杂质峰对苦杏仁甙无干扰。
苦杏仁苷
苦杏仁苷是传统中药苦杏仁中的有效成分 ,人们对它的研究已有近二百年的历史 ,早在1803 年 Schrader 在研究苦杏仁成分时就发现了此类物质 ,直到 1830 年 Robiquet 等从中分离出苦杏仁苷 ,迄今它已成为医药上常用的祛痰止咳剂、辅助性抗癌药物 ,苦杏仁苷广泛存在于杏、桃、李子、苹果、山楂等多种蔷薇科植物果实的种子中 ,尤其在苦杏仁中含量较多 ,大约在 2 %～3 %。苦杏仁苷20世纪初从杏核中提出，1920年美国首次采用苦杏仁苷治疗肿瘤，Ernest Krebs博士是第一个将其使用于医药的人，并认为是维生素，命名为B17。美国曾将其通过FDA认可，20世纪60年代又删除，至今不允许使用。比利时、意大利、墨西哥、菲律宾等20个国家允许使用与制造苦杏仁苷。对人体的功能存在争议。 苦杏仁苷分子由一单元苯甲醛、一单元氢氰酸和两单元葡萄糖组成。其分子式为 C20 H27NO11 ,结构式： 1.镇咳平 喘作用苦杏仁 苷内服后 ,可在体 内分解为氢氰酸和 苯甲醛 ,氢氰酸对 呼中枢可产生一定 的抑制作用 ,使呼 吸运动趋于安静而 达到镇咳平喘的作 用。苦杏仁苷对油 酸型呼吸窘迫症动 物可促进肺面活性 物质的合成 ,并使 病变得到改善。 2.抗肿瘤作用苦杏仁苷具有良好的抗肿瘤作用 ,被用作治疗癌症的辅助药物。实验表明，苦杏仁苷的化学性质不活跃，对健康组织影响很少，仅侵犯和破坏癌细胞。苦杏仁苷的活性成分是一种天然产生的氰化物，是人体代谢的产物，只能在癌细胞中发挥作用。在健康的肝脏、肾脏、脾脏、和白细胞中，存在的β—葡萄苷酶作用于苦杏仁苷后产生氰化物和苯甲醛，二者协同毒性增强，机体存在硫氰酸酶是一种保护酶可将氰化物转变无毒的硫氰酸盐（降压、协助机体合成B12）。肿瘤细胞无硫氰酸酶，苯甲醛可氧化为安息香酸——抗风湿、防腐、止痛，在发病部位充斥天然止痛剂。氰化物和苯甲醛协同破坏癌细胞。支持苦杏仁苷的学者通过调查与实验认为：古希腊与罗马人2000多年前就使用苦杏仁苷入药，中国人也用苦杏仁治疗癌症。非洲和菲律宾土著人以木薯为主食，很少患肿瘤。将苦杏仁苷制剂用于晚期癌症患者的治疗 ,可使症状改善 ,存活期延长。将苦杏仁苷用于癌性胸水的治疗 ,发现苦杏仁苷对癌性胸水有一定程度的控制和缓解作用。将苦杏仁苷按300mg〃 kg - 1, 400mg· kg - 1,600mg· kg - 1剂量给移植性肝癌小鼠腹腔注射 10～14d ,其肝癌治愈率分别为 72 % ,60. 8 % ,61 %。移植性肝癌小鼠肝脏微粒体细胞色素 P2450 含量比正常小鼠显著下降。当苦杏仁苷给药 10d ,肿瘤生长被抑制的小鼠 P2450 含量达到正常水平。苦杏仁苷对子宫颈癌JJC26 株的抑制率为 50 %～70 %。苦杏仁苷及其水解所产生的氢氰酸和苯甲醛体外试验均被证明有抗癌作用 ,癌细胞内硫氢化酶较正常细胞少 ,因此对苦杏仁苷水解释放出氢氰酸的解毒能力较差 ,苦杏仁苷加苯甲醛或苦杏仁苷加β 2葡糖苷酶可明显提高抗癌效力 ,已发现癌细胞无氧酵解占优势 ,其产物乳酸形成的偏酸性环境有利于提高β 2葡糖苷酶的活性 ,促使苦杏仁苷在癌细胞中水解出较多的氢氰酸和苯甲醛而发挥更强的抗癌作用。
苦杏仁苷(维生素B17)抗癌作用简析
苦杏仁苷（维生素B17）抗癌作用简析 摘要苦杏仁苷为天然糖苷化合物，中医认为苦杏仁具有止咳平喘、润肠通便的作用。近来，有研究表明，苦杏仁苷有抗肿瘤作用，但其抗肿瘤作用并没得到广泛认同。本文就其抗癌作用做了简单的介绍。 关键词苦杏仁苷；维生素B17；抗癌 1.基本知识 “维生素B17“并非B族维生素（因为它的任何组成部分都不能作为辅酶）。它在化学上是两种糖分子，即苯甲醛(benzaldehyde)和氰化物(cy anide)的化合物，名为苦杏仁苷；作为药剂，又称做Nitrilosides；取自于杏仁；在啤酒酵母中没有这种苦杏仁苷；美国大多数的州政府不承认这是治疗癌症的药物(有25个州法定承认)。美国食品及药物管理局不承认的原因是因其含有氰化物而可能有毒性。 2.效用 有人认为苦杏仁苷有控制及预防癌症的作用。 2.1缺乏症 对癌病的抵抗力有减弱的可能性。富含苦杏仁苷的食物杏、苹果、樱桃、桃、李、油桃(nectarines)等的果核中含有苦杏仁苷。 2.2营养补品 一般的摄取量是每天0.5-1.0g 2.3副作用 摄取过量的苦杏仁苷(Laetrile)却可能有危险。虽然一次服用3.0g以上，也可安全地消化，但是最好还是分次少量服用，一次不要超过1．0g以上。 根据《营养年鉴》，若每天将5-30个杏仁分次食用的话(绝对不要一次全部吃完)，可以得到足够的苦杏仁苷。 3.建议 想以苦杏仁苷来预防或治疗癌症的人一定要先和营养医师商量；现在关于苦杏仁苷(Laetrile)的书也出了不少。我建议，在摄取之前对有关的知识稍加涉猎，而且不要忘记和医师商量一下。如果患有癌症，最重要的就是要在短期内尽可能摄取到最大量的苦杏仁苷。这可以在一般正常的治疗后进行，再加上辅助疗法，比如：补血、控制血压或减轻疼痛等。克雷布
(完整版)黄芩苷提取
项目一天然植物有效成分提取 子项目一、黄芩根中黄芩苷的提取 1、【项目目的】 （1）掌握黄芩苷不同提取工艺和操作要点，不同工艺对产品得率和品质的影响； （2）通过黄芩苷含量检测，掌握定性、定量方法在黄酮类物质检测中的应用；（3）通过对黄芩苷的单因素和正交实验优化，掌握正交方法在植物有效成分提取中的应用； （4）通过黄芩苷的提取工艺优化实训，掌握黄酮类物质提取的一般规律。 2、【项目任务】 （1）通过查阅文献，掌握水提法、醇提法在黄芩苷提取中的基本原理； （2）查阅文献设计不同的黄芩苷提取工艺，并结合正交实验进行黄芩苷的提取工艺优化，得到提取得率最大化； （3）查阅文献并结合黄芩苷国标检测方法，对提取中黄芩苷含量进行准确测定； （4）总结黄芩苷提取工艺各环节具体参数，得出最佳工艺条件，并分析存在的问题，各小组以PPT形式作出整体汇报。 3、【项目要求】 （1）能够全面准确采用单因素实验对可能影响提取得率的因素进行测定分析，同时确定主要影响因素； （2）在单因素的基础上进行正交分析，确定合适的因素和水平设计正交实验；（3）通过正交分析确定最佳提取工艺条件 4、【项目背景】 （1）黄芩及黄芩苷简介 黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi ）具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黄芩苷（Baicalin）是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮
类化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用，且具有较强的抗癌反应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线，清除氧自由基，同时，又能抑制黑色素的生成，是一种很好的功能性美容化妆品原料，具有较高的开发利用前景。 黄芩化学成分研究逐渐为药学和化学工作者所重视，目前，国内对黄芩苷提取工艺的研究有较多报道，其提取方法主要有温浸法、煎煮法、微波法、超滤法等，但如何提高黄芩苷收率和纯度一直是实际生产中存在的问题，缺乏对整个工艺条件进行全面研究，因此，有必要对影响黄芩苷提取工艺及其影响因素作一全面探讨。 A、水提法 黄芩粉碎为20-40目，提取2次，物料比为10和5倍，时间为60 min和30 min，分离方式为先用双层细滤布过滤再离心分离，60℃用盐酸调 pH 2—3，再70℃保温60 min，静置3 h，蒸馏水分离洗涤两次，干燥得黄芩苷粗品，测量黄芩苷的含量，计算提取率。 工艺流程 原料选择→粉碎→煎煮→过滤→离心→调节Ph值→保温→静置→洗涤→粗制品→加蒸馏水溶解→调节Ph值→加乙醇→调节Ph值→冷却→过滤→干燥→成品。 B、回流提取法 黄酮苷类(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一水(1：1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂，高浓度的醇(如90％、95％)宜于提取甙元，60％左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取甙类物质。可以采用一定浓度的醇溶剂提取，测量黄芩苷的含量，计算提取率。
欧李种仁中苦杏仁苷的提取及其抗氧化活性
欧李种仁中苦杏仁苷的提取及其抗氧化活性 摘要：采用HPLC法测定欧李（Prunus humilis Bunge）种仁浓缩液中苦杏仁苷的含量，利用DPPH法测定苦杏仁苷的抗氧化性。结果表明，提取液中苦杏仁苷的浓度为7.94 mg/mL；苦杏仁苷清除DPPH的能力随着其浓度的降低而下降，当苦杏仁苷溶液浓度为7.50 mg/mL时清除率最高，为90.9%。欧李种仁浓缩液经氯仿、乙酸乙酯和加热处理均能提高水相中苦杏仁苷的纯度。 关键词：欧李（Prunus humilis Bunge）；种仁；苦杏仁苷；高效液相色谱；抗氧化性 欧李（Prunus humilis Bunge）为蔷薇科樱桃属落叶小灌木，是我国特有的果实和药食兼用树种。其茎叶、果实、根皮具有很高的经济和药用价值。欧李种仁可以入药，具有利尿、助消化等功效，能治疗消化不良、水肿、肠胃停滞等疾病[1-3]。欧李种仁中含有大量的苦杏仁苷，主要用于治疗慢性气管炎、急慢性呼吸道感染和脓疱病[4]，与其他药物合用还可治疗皮肤癌[5]；苦杏仁苷还具有抗凝血和抗氧化性的作用[6]。 苦杏仁苷具有明确的生理、药理活性。关于苦杏仁苷分析检测的方法也比较完善，但国内对欧李苦杏仁苷分离提取工艺的深入研究还较少，所以本试验采用HPLC法测定欧李种仁浓缩液中苦杏仁苷的含量，利用DPPH法测定苦杏仁苷的抗氧化性，以期为欧李苦杏仁苷提取工艺的改进提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 试验于2012年6月在成都大学药食同源植物资源开发重点实验室进行。欧李采自成都大学欧李种植基地。 将风干的欧李果实去果肉得到欧李种子，反复淘洗将果肉和种子分开，把得到的欧李种子放入烘箱中50 ℃干燥24 h。干燥后人工去壳得到欧李种仁，将欧李种仁放入烘箱中50 ℃干燥48 h，备用。 1.2 仪器与试剂 DIONEX-HPCL高效液相色谱仪；UV-1800紫外分光光度计。 苦杏仁苷标准品（纯度大于99.0%，中国药品生物制品检定所）；无水乙醇、甲醇和石油醚（成都市科龙化工试剂厂）；DPPH（成都康普泰科技有限公司），以上试剂均为分析纯。
高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量
高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量 作者：钱平,贾云,刘志辉,钱芳 【摘要】目的建立高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量的方法。方法色谱柱：Supelco ODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(20∶80)；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm。结果苦杏仁苷峰分离良好,苦杏仁苷浓度在0.066 13～4.232 μg间线性关系良好,r＝1.000 0,平均回收率为95.91%(RSD＝2.29%)。结论本方法准确、可靠,可用于郁李仁中苦杏仁苷的含量测定。 【关键词】郁李仁；苦杏仁苷；高效液相色谱法；含量测定 Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of amygdalin in Semen Pruni. Methods The analytical column was Su pelco ODS C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm), with methanol-water (20∶80) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min, and the detection wavelength was 210 nm. Results The linear range for amygdalin was 0.066 13～4.232 μg (r＝ 1.000 0). The average recovery was 95.91% (RSD＝ 2.29%). Conclusion The method is accurate and reliable, and can be used in the determination of amygdalin in Semen Pruni. Key words：Semen Pruni；amygdalin；HPLC；content determination 郁李仁为蔷薇科植物欧李Prunus humilis Bge.、郁李Prunus japonica Thunb.或长柄扁桃Prunus pedunculata Maxim.的干燥成熟种子,前二者习称“小李仁”,后者习称“大李仁”,具有润 燥滑肠、下气、利水的功效[1]。苦杏仁苷为郁李仁的主要成分之一,2005年版《中华人民共和国药典》在该药材含量测定项下采用银量法测定,但银量法属于间接测定方法,影响因素多,而目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定的报道较少。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法直接测定郁李仁中苦杏仁苷的含量,方法准确、可靠,为郁李仁中苦杏仁苷的含量测定提供了依据和参考。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Waters 515泵高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,ZW色谱柱,恒温箱(中国科学院大连化物所),Empower色谱工作站,Agilent手动进样器(20 μL)；十万分之一电子分析天平(BP- 211D型,德国Sartorius)；Cary50紫外分光光度计(美国瓦里安)。 1.2 试药 苦杏仁苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110820- 200403)；郁李仁药材购自安徽亳州药材市场,经鉴定分别为蔷薇科植物郁李和长柄扁桃的干燥成熟种子。乙腈为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
苦杏仁苷中毒
苦杏仁苷中毒 文章目录*一、苦杏仁苷中毒的概述*二、苦杏仁苷中毒的原因*三、苦杏仁苷中毒的主症*四、苦杏仁苷中毒的急救措施*五、苦杏仁苷中毒的护理知识*六、如何预防苦杏仁苷中毒 苦杏仁苷中毒的概述杏仁是食品也是一味中药,过量服用苦杏仁,可发生中毒,表现为眩晕,突然晕倒、心悸、头疼、恶心呕吐、惊厥、昏迷、紫绀、瞳孔散大、对光反应消失、脉搏弱慢、呼吸急促或缓慢而不规则。若不及时抢救,可因呼吸衰竭而死亡。 苦杏仁苷中毒的原因小儿误食苦杏仁10一20粒,成人眼 20~60粒(相当于6~ 18g)即可引起中毒。如成人服50一120粒.可导致死亡。大剂量的苦杏仁内取后约在30分钟至5小时发病,在此期间苦杏仁忒在酶的作用下,通水及胃酸即慢慢分解放出氢氨酸而致中毒。 氢氨酸是毒性剧烈、活性高、作用快的细胞原桨毒,氰离子进入人体后,能抑制大约4Q种酶的活性,但受毒深的是细胞色素氧化酶,由于氢氰酸迅速与细胞色素氧化酶相结合,阻断了其中 三价铁还原成二价铁的受递电子作用,使通过细胞色素A和C进行的80一90%的生物氧化还原作用于停止,致使组织细胞无法利用红细胞所携带的氧,引起组织窒息,产生细胞中毒性缺氧症,对中枢神经系统的作用是先兴奋后麻痹,呼吸麻痹是氢氰酸中毒致
死的主要原因。 苦杏仁苷中毒的主症中毒症状中毒后首先有粘膜刺激甚至腐蚀症状,目中苦涩、咽喉疾痒、有烧灼感、流诞、恶心呕吐、腹泻,常为水样便,头痛眩晕、乏力、心跳加快,血压升高。 神志不清、口唇发组I中毒较重时呼吸急促,而后变慢且不规则,时可闻到苦杏仁味,有恐惧感,胸上部疼痛有压迫感,更重时意识丧失,大小便失禁,瞳孔散大呈、昏迷,对光反应消失,强度痉挛及紫绀,常发生尖叫,牙关紧闭,体温上升,肝大,呼吸显著变慢,反射消失或减弱,后呼吸变浅极不规则,呈潮式呼吸,四肢厥冷,深度昏迷,休克,死于呼吸麻痹和细胞窒息,呼吸常先于心跳停止,中毒病人血呈鲜红色,不凝固。 苦杏仁苷中毒的急救措施发现中毒后应立即设法催吐,可用筷子、勺子或手指刺激咽后壁,促使病人吐出毒物,有条件者可用1:1000的高锰酸钾水,让病人喝下去再吐出,以洗出胃内残留的毒物;用甘草、黑大枣各120克煎服,或新鲜萝卜3～4斤洗净,捣烂取汁内服,也可用绿豆煎汤或用绿豆粉冲服。经上述处理后,症状不见减轻,应尽快送往医院抢救。 苦杏仁苷中毒的护理知识大自然造物之神奇,杏仁有毒不可乱吃,但是杏树的根却是解杏毒的良药,在吃苦杏仁出现中毒症
燀苦杏仁检验方法确认方案
憚苦杏仁检验方法确认方案 一、简介 憚苦杏仁取净苦杏仁，照憚法去皮。用时捣碎。主要用于降气止咳平喘，润肠通便＜用于咳嗽气喘，胸满痰多，肠燥便秘。 二、验证目的： 憚苦杏仁检验质量标准收载在《中国药典》2010版一部P187,为保证生产出的成品符合检验标准的要求，确认该检测方法是否适用于本公司生产的成品检验。现对质量标准分析方法进行验证，确保检验结果的准确可靠。 三、验证范围 ①、鉴别 ②、含量测定 四、验证小组成员及职责 4.1验证小组成员 4.2人员职责 表1: 五、验证实施步骤 1.为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施 1.1仪器：己经过校正并在有效期内 1.2人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器 1.3对照品：均购自江西省药品检验所 1.4材料：均符合检验要求 1.5参考资料： 《中国药典》2010年版一部 《药品生产验证指南》（2003版）
2.鉴别 2.1试验A:取本品粉末2g，置索氏提取器中，加二氯甲烷适量，加热回流2小时，弃 去二氯甲烷液，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法(附录W B)试验，吸取上述两种溶液各3卩l，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40: 22: 10)5?10C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，立即用0.8 %磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液浸板，在105C加热至斑点显 色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2.2试验B:取二氯甲烷适量，置索氏提取器中，加热回流2小时，弃去二氯甲烷液， 药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录切B)试验，吸取上述两种溶液各3卩l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷- 乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40: 22: 10)5?10°C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，立即用0.8 %磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液浸板，在105C加热至斑点显色清晰。 2.3检测结果： 表 2 2.4验证标准：试验A供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点。试验B供试品溶液在与对照品色谱相应的位置上未显相同颜色的斑点。 2.5检验结果评价 3.含量测定 照高效液相色谱法测定。 仪器：L-3000高效液相色谱仪 3.1专属性 3.1.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1 % 磷酸溶液(8 : 92)为流动相；检测波长为207nm理论板数按苦杏仁苷峰计算应不低于7000。 3.1.2对照品溶液的制备取苦杏仁苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含
清热解毒片中黄芩苷的含量测定
清热解毒片中黄芩苷的含量测定 目的采用高效液相色谱法测定清热解毒片中黄芩苷的含量。方法用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，用甲醇-0.2%磷酸溶液（48：52）为流动相，流速1.0 ml·min-1，检测波长280nm。结果该试验的结果为清热解毒片中黄芩苷进样量在0.13～0.95μg范围中线性关系良好（该区间中r=0.9996），精密度试验RSD 为1.11%，重复性试验RSD为1.16%，平均回收率为100.13%，RSD为1.30%（n=6 ）。结论本方法操作比较简便，精密度好，结果准确可靠，适用于清热解毒片中黄芩含量的测定。 标签：高效液相色谱法；黄芩苷；清热解毒片 清热解毒片收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二十册。该药的功效主要为清热解毒，临床中流感，上感及各种发热性质的疾病首选该药。这种药物的主要成分是金银花、生石膏、黄芩、龙胆、玄参、地黄、金银花等12味中药组成。原标准中未对黄芩进行含量检测，在本实验中应用的较为先进的高效液相色谱法，通过该种方法测定黄芩在该成药中的含量，该法由于仪器可靠，方法和操作较为简单，因此结果相对的准确可靠。 1 资料与方法 1.1一般资料LC2010A型高效液相色谱仪，黄芩苷对照品，自中国食品药品检定研究院购得（含量测定用，批号：110715-201117）；样品来源于陕西盘龙制药集团有限公司，水为重蒸馏水，甲醇在色谱中是色谱纯，乙醇、磷酸在色谱中是分析纯。 1.2方法 1.2.1色谱的条件该试验的填充剂是用的十八烷基硅烷键合硅胶，试验中的色谱柱是VP-ODSC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；用甲醇-0.2%的磷酸溶液（48︰52）做流动相；该实验中设置的流速为10ml/min；检测的波长为280nm；温度检测设置为35℃；理论塔板数以黄芩苷计算，不能低于3000。 1.2.2制备对照品溶液用精密的方法称取60℃下已经减压干燥时间为4h的黄芩苷对照品适量，加入甲醇溶解该制剂，制成的溶液为每1ml含60μg的黄芩苷做对照品，即能够得到。 1.2.3制备供试品溶液从该成品中随机取10片，除去包裹着的糖衣，通过精密工具称重，然后研磨成粉末状。取出大约0.5g左右，放入带有塞子的锥形瓶里，加入甲醇（浓度为60%）25ml，称得重量之后，通过超声振荡20min（功率250W，频率35kHz），冷却之后，再测取其重量，减少的重量用甲醇补足（浓度为60%），然后摇匀，后滤过，测出滤出的液体5ml，放入25ml的量瓶中，用甲醇（浓度为60%）补至刻度，充分混匀，通过大小为0.22μm微孔滤膜，获取
苦杏仁苷提取工艺优化
苦杏仁苷溶剂提取工艺优化 西安源森生物公司苦杏仁苷提取自苦杏仁，其活性成分是一种天然产生的氰化物，是人类的代谢产物，只能在癌细胞中发挥作用，因此常被用作抗癌辅助药物，在医学领域具有十分广阔的发展空间。 一般企业的苦杏仁苷提取方法为柱色谱分析法和溶剂提取法，这两种方法分别具有洗脱剂耗费量大、成本高和产物纯度较低、工艺路线长等缺点。本次实验，西安源森生物实验室针对以上问题采用溶剂提取法进行提取，制订了较短的工艺路线，并且采用正交试验将工艺条件进行优化，确保所得苦杏仁苷纯度在95%以上。 一、苦杏仁苷溶剂提取仪器与试药 HP1100型高效液相色谱仪及色谱工作站； TG328B型电光分析天平； 对照品； 苦杏仁（陕西产）。 二、方苦杏仁苷溶剂提取方法与结果 （一）苦杏仁苷的提取工艺 1. 取苦杏仁1kg→除杂、粉碎后→加去离子水5000ml煮沸1h→浸提液用乙醚除脂→于95℃水浴下浓缩的密度为1.13g/ml的浸膏11 2.3g。 2. 精密称取浸膏适量（约11.3g）→移至三颈瓶→加入95%乙醇适量进行萃取→完毕后萃取液冷至室温→加入定量的乙醚→移至锥形瓶→静置24h。 3. 过滤→滤纸与结晶于60℃干燥2h→得结晶。 （二）苦杏仁苷含量的HPLC检测法 色谱条件：色谱柱（4.6mmx200mm，5μm）； 流动相甲醇-水（74：26）； 柱温1.2min/ml； 检测波长252nm。 标准曲线：精密称取苦杏仁苷 对照品23.7mg置50ml量瓶中，用甲醇溶解定容。 精密量取2、4、6、8ml，分别置于各10ml量瓶中，加甲醇定容，摇匀，得系列标准溶液。 依次用HPLC进行测定，以浓度（C）为横坐标，色谱峰面积（A）为纵坐标，求得回归方程为：A=129.8601C-25.6334，r=0.9997。 以上结果表明浓度在0.1~0.5mg/ml范围内与峰面积线性关系良好。 （三）苦杏仁苷提取收率的计算 将结晶连同滤纸一起转移到烧杯里，用甲醇少量多次洗涤滤纸，将溶液和洗液完全转移至25ml量瓶中，以甲醇定容，稀释50倍后测定含量，计算提取收率： （四）苦杏仁苷萃取正交试验及结果 根据萃取和结晶原理，本试验选取萃取时间（A）、萃取温度（B）、萃取剂用量（C）、结晶液（乙醇-乙醚溶液）配比（D）为影响因素，各因素取3水平，采用L9（34）正交表设计实验，以提取收率为考察指标，对萃取、结晶的工艺条件进行优化，结果见表1。
苦杏仁
杏仁功效及分布 王芳 蔷薇科（Rosaceae）植物杏prunus armeniaca L.,其干燥成熟的种子入药。中药名苦杏仁。李属(prunus)植物全世界约200种，分布于北温带。中国产约140种{4}，本属现供药用者31种，本种中国各地均产，多数为栽培，尤以华北、西北和华东地区种植较多，世界各地均有栽植。{1} “杏仁”药用之名，始见于《本草纲目》，列为下品。据古代本草文献记载，杏仁入药有甜仁和苦仁两种，明代以前以苦杏仁入药为主流，及至清代，以杏仁入药为主。近代栽培品种很多，也是以苦杏仁为主的商品。《中国药典》（2005年版）收载本种为中药苦杏仁的法定原植物来源种之一，主产于中国北方各省，以内蒙古的东部、吉林、辽宁、河北、陕西、陕西等省区产量最大。药理研究表明，杏的种子具有镇咳平喘、润肠通便等功效。苦杏仁为中医的临床用药。功能：止咳平喘，润肠通便。主治：咳嗽气喘，胸满痰多；肠燥便秘。现代临床还用于慢性支气管炎及呼吸道感染等病的治疗。{1} 杏仁有南杏仁和北杏仁之分，北杏较小，微有苦味；南杏较大，略扁，不苦反稍甜。故俗称北杏为苦杏仁，南杏为甜杏仁。北杏能润肺止咳化痰，南杏仅供糖果饼饵之用。苦杏仁和甜杏仁均为中国卫生部规定的药食同源品种。大量的口服苦杏仁，苦杏仁苷均易产生严重中毒。中毒机理主要是所含的苦杏仁苷在体内分解产生氢氰酸，后者与细胞线粒体内的细胞色素氧化酶三价铁起反应，抑制酶活性，从而引起组织细胞呼吸抑制，导致死亡。一般成人口服苦杏仁55枚约60g,含苦杏仁苷1.8g(约0.024g/kg)，可致死。因此，苦杏仁在服用时应注意剂量，切不可过量。{2}
中华人民共和国药典记载： 苦杏仁为蔷薇科植物山杏prunus armeniaca L.var.ansu Maxim.、西伯利亚杏Prunus sibirica L、东北杏Prunus mandsurica(Maxim.)Koehne或杏Prunus armeniaca L. 的干燥成熟的种子。夏季采收成熟的果实，除去果肉和核壳，取出种子，晒干。【性状】呈扁心形，长1~1.9cm,宽0.8~1.5cm,厚0.5~0.8cm。表面黄棕色至深褐色，一端尖，另端钝圆，肥厚，左右不对称，尖端一侧有短线形种脐，圆端合点处向上具多数深棕色的脉纹。种皮薄，子叶2，乳白色，富油。气微，味苦。用时捣碎。【炮制】炒苦杏仁和燀苦杏仁。【形状与归经】苦，微温；有小毒。归肺、大肠经。【功能与主治】降气止咳平喘，润肠通便。用于咳嗽气喘，胸满痰多，肠燥便秘。【用法与用量】5~10g,生品入煎剂后下。【注意】内服不宜过量，以免中毒。【贮藏】置阴凉干燥处，防蛀。{3} 2017年5月我跟同事在内蒙古境内扎兰屯市洼堤乡色吉啦呼村出差期间，在市里至目的地途中，发现山头有大片粉红色花卉，多处分布呈片状集中生长，花色粉红，很漂亮。后问当地的司机采才知道此花为杜鹃花。经分析鉴定内蒙古扎兰屯杜鹃花的叶子就是中药材满山红。 从市郊向市外乘车20分钟处，有山岭，山体呈雪白色，其面积延绵数十里。山体上生长一种植物，据本地人口述，其植物为“野杏”，野生，味苦而不能食用。经我观察，在5月上半旬，扎兰屯市近郊山岭，树木无叶，而盛开大量花朵，仅为杜鹃花与“野杏”。花多，场面宏大。后经查阅资料确定“野杏”为蔷薇科植物山杏或者东北杏。取二十颗杏仁，经比对性状跟药典描述的苦杏仁吻合。这么多树每年苦杏仁的产量一定很多，这真是大自然馈赠的中药材宝库。
提取方法论文：生桃仁中苦杏仁苷提取方法比较
提取方法论文：生桃仁中苦杏仁苷提取方法比较 [摘要] 目的比较3种生桃仁提取方法中苦杏仁苷提取率。方法以硝酸银滴定法测量3种生桃仁提取工艺中苦杏仁苷的含量并计算提取率。结果 3种提取方法提取率，分别为95.77%、64.88%、55.61%。结论3种提取方法中蒸馏生桃仁水法最高。 [关键词] 提取方法；苦杏仁苷 桃仁为蔷薇科植物桃prunus persica（l.）batsch的干燥成熟种子。具有活血祛瘀，润肠通便，止咳平喘的功效,其中苦杏仁苷是止咳平喘的药效成分。目前生桃仁的提取方法有3种，回流煎煮法、醇提苦杏仁苷法、蒸馏生桃仁水法。前两种方法以提取苦杏仁苷为主，后一种以提取苯甲醛和氢氰酸为主。本文以硝酸银滴定法测定生桃仁3种提取工艺中苦杏仁苷的含量并计算提取率。 1 仪器与试药 样品经鉴定生桃仁为蔷薇科植物桃prunus persica（l.）batsch的干燥成熟种子。其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 生桃仁中苦杏仁苷的测定 精密称取生桃仁粗粉15g，置凯氏烧瓶中，加水150ml，立即密塞，置37℃水浴中保温2h，连接冷凝管，通水，蒸
气蒸馏，馏出液导入水10ml、氨试液2ml的吸收液中，接收瓶置冰水浴中冷却至馏出液60ml时停止蒸馏，馏出液中加碘化钾试液（16.5%）2ml。用硝酸银滴定液（0.010mol/l）缓慢滴定，至溶液显出黄的浑浊色不消失。1ml硝酸银液（0.010mol/l）相当于9.45mg苦杏仁苷，作为苦杏仁苷的含量，如表1。 表1生桃仁中苦杏仁苷含量表 2.23种提取方法的苦杏仁苷含量及提取率 2.2.1 回流煎煮法：取生桃仁150g，水上蒸馏30mins，去皮，烘干，压榨去油，饼渣粉碎并过2号筛，加水1000ml，煎煮60mins，收集滤液，再次加入800ml水，煎煮60mins，收集滤液，合并。沉降，上清液精滤，称取提取液质量。精密移取所得提取液150ml，置圆底烧瓶中，精密称重约2g生桃仁粉，作为分解酶（计算时减去约2g生桃仁所含的苦杏仁苷量）加入，密塞，37℃水浴2h，连接冷凝管，电热套加热。馏出液导入氨试液2ml的吸收液中，接收瓶置冰浴中冷却，置馏出液达60ml时停止蒸馏，馏出液中加碘化钾试液2ml，供硝酸银滴定法滴定，如表2 2.2.2 醇提苦杏仁苷法：取生桃仁150g，水上蒸馏 30mins，压榨去油，饼渣粉碎过2号筛，加入索氏提取器，加乙醇600ml，提取5h。趁热抽滤提取液，回收浓缩，两次
测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法
测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法 1.薄层色谱法定性鉴别 薄层色谱法是将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比,用于中药制剂的鉴别。该法是黄芩苷常用的定性分析方法,一般采用吸附薄层鉴定,常用硅胶和聚酞胺作为吸附剂。 1.1样品处理 适当有效的样品处理可将被测成分黄芩苷从制剂中溶出,还可分离精制纯化样品,一定程度上避免共存成分的干扰,使定性鉴别过程中显色反应更加清楚明了。常用甲醇、乙醇进行提取或萃取。 1.2固定相 固定相通常用硅胶和聚酞胺。在硅胶薄层色谱中,硅胶除对黄芩苷产生物理吸附外,还与黄芩苷的游离酚轻基产生氢键吸附,故易出现拖尾现象,采用氢氧化钠或醋酸钠制备的硅胶G板可有效改善拖尾现象。聚酞胺薄层色谱法利用聚酞胺与黄答普的酚轻基产生氢键吸附的原理进行分离。 1.3展开剂 用硅胶薄层色谱鉴定时，根据黄芩苷的极性,展开剂常含酸或水。聚酞胺对黄芩苷的吸附能力较大，需用具有较强极性的展开剂，常用醋酸。 1.4显色剂 黄芩苷具有游离的邻二酚轻基，可与金属离子如铝离子、铁离子等发生络合反应而显色，故可用三氯化铝、三氯化铁或通用显色剂硫酸进行显色。显色反应可采用在紫外光下观察斑点和喷显色剂相配合的方法。 2.高效液相色谱法定量分析 高效液相色谱法与紫外分光光度法和薄层扫描法相比，具有高效的分离,灵敏的检测和快速的分析的特点，既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，是中药成分研究中一种非常重要的分析手段，现在HPLC已成为测定黄芩及其制剂中黄芩苷的主要方法。 2.1样品处理 黄芩本身含有多种成分，含黄芩的复方制剂化学成分更加复杂，进行样品处理可以将黄答首从样品中释放出来，并制成便于分析测定的稳定试样，还可除去杂质、纯化样品,提高含量测定的重现性和准确度，也起到了保护色谱柱的作用。通常用甲醇或乙醇作提取或萃取液，经过一系列分离、纯化，最后用0.45um微孔滤膜滤过。如在小儿清肺口服液的质量标准研究，精密吸取样品溶液5.0ml，加甲醇稀释至50ml,混匀，过滤，续滤液作为供试品溶液。用HPLC法测定小儿感冒片中黄芩苷的含量。样品用70%乙醇超声提取,滤过,滤液置50ml 容量瓶中，加70%乙醇至刻度作为供试品。 2,2固定相 黄芩苷具有羟基，在硅胶柱上直接进行高效液相色谱分离效果不太好，而用RP一HPLC法分离效果较好。现常用固定相是烷基键合相如C8,Cl8键合相,其中又以Cl8最常用。 2.3流动相 流动相通常以水为基础溶剂，加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，常用甲醇、乙腈，因黄芩苷呈弱酸性,为抑制解离在流动相加入少量的酸如磷酸、醋酸等,能改善峰形更加尖锐利于分析。亦有将离子对试剂加入含水的流动相中,用反相离子对色谱法来分析。 2.4检测方法 黄芩苷有紫外吸收，常用紫外检测器，又以光电二极阵列检测器最常用。因黄芩苷在280nm 处有最大吸收,通常在280nm左右进行检测。