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纤维素含量的测定

纤维素含量的测定
纤维素含量的测定

纤维素的测定比色法

纤维素由葡萄糖基组成,它是组成植物细胞壁的基本成分。其含量的多少关系到植物的机械组织是否发达,作物抗倒伏、抗病虫害的能力是否较强,并且影响到粮食作物、纤维作物和蔬菜作物等的产量和品质。

在各种粮食中纤维素的含量各不相同,与籽粒皮层厚薄成正比。同种粮食中,原粮纤维素

维素含量最高,加工粗加工精度越高,纤维素含呈越少,如小麦标准粉约0. 7% .稻谷约9.0%,糙米

约 1.0%,白米约0 4%。因此,根据纤维素的含量的测定,可以判别籽粒皮层的厚薄,粮食加工精度高低和营养价值评估。

纤维素的测定方法有酸碱醇醚法、酸性洗涤剂法、碘量法及比色法。第一个是国标法,但比较繁琐,后者操作比较简单。

一、方法原理纤维素是由葡萄糖基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖。然后在浓硫酸作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物。利用蒽酮试剂与糠醛类化合物的蓝绿色反应即可进行比色测定。

二、仪器和试剂

1. 主要仪器恒温水浴、冰罐、电炉、玻璃坩埚、漏斗、定时钟、分光光度计等。

2. 试剂60% H2S04 溶液、浓H2S04。

2%蒽酮试剂:2g蒽酮溶解于100rnl乙酸乙酯中,贮置于棕色试剂瓶中。

纤维素标准液:准确称取100mg 纯纤维素,放入100Inl 量瓶中,将量瓶放入冰浴中,然后加冷的

60% H2SO4 60—70ml,在冷的条件下消化处理20—30min,然后用60% H2SO4稀释至刻度,摇匀。吸取此液

5.0ml放入另一50ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加蒸馏水稀释刻度,则每毫升含100⑷纤维素。

三、操作步骤

1 .绘制纤维素标准曲线

(1)取6支小试管,分别放入0、0.40、0.80 1.20 1.60、2.00ml纤维素标准液。然后分别加入 2.00

1.60 1.20、0.80 0.40、0ml 蒸馏,摇匀。则每管依次含纤维素0、40、80、120、160、200?

(2)向每管加0. 5ml%蒽酮试剂,再沿管壁加5. 0ml浓H2SO4,塞上塞子,微微摇动,促使乙酸乙酯水解,当管内出现蒽酮絮状物时,再剧烈摇动促进蒽酮溶解,然后立即放入沸水浴中加热10min , 取出冷却。

( 3)在分光光度计上620urn 波长下比色,测出各管消光值。

(4)以所测得的消光值为纵坐标,以纤维素含量为横坐标,绘制纤维素标准曲线。

2.样品的测定

(1)准确称取风干的样品100mg,放入

100rnl量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加冷的60% H2SO4。60—70ml,在冷的条件下消化处理半小时,然后用60% H2SO4。稀释至刻度,摇匀,用玻璃坩埚漏斗过

滤。

作同纤维素标准液,测出样品在620urn波长下的消光值。

(2)吸取上述滤液5. 0ml,放入5ml量瓶中,将量瓶置于冰浴中,加蒸馏水释至刻度,摇匀。

(3)吸取上液2.0ml,力口0.5ml 2%蒽酮试剂,再沿管壁加5. 0ml浓H2SO4,盖上塞子,以后操

四、结果计算

以样品测定消光值,在标准曲线上查出相应的纤维素含量,然后均按下式计算样品中纤维素含量:

X= A*10-6*C*100 ________

B

式中:A ----------- 在标准曲线上查得的纤维素含量值(卩g);

B ------- 样品重(g)

10-6——将呃换算成g的系数

C——样品稀释倍数

X ——样品中纤维素含量(%)

五、说明 1 ?此法需用纯纤维素样品作标准曲线。

2 ?纤维素加60% H2SO4时,一定要在冰浴条件下进行。

参考文献:作物品质分析农业出版社主编:牛森

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