细胞工程复习重点

思考题

1．细胞工程实验室的基本组成与要求是什么？

一、实验室组成

1．基本实验室

①准备室/化学实验室

功能：就是进行一切与实验有关的准备工作

要求：宽敞明亮，通风条件好，地面便于

清洁并应防滑处理。

②接种室/无菌操作室

功能：是进行接种、继代、细胞融合等无

菌操作的场所。

要求：封闭性好，干燥清洁明亮，防止空

气对流。外应设缓冲室、更衣室。

防止微生物感染。

③培养室

功能：是对接种到培养瓶的离体材料进行控制培养的场所。

要求：是要能控制光照和温度，应保持干燥和清洁，2．辅助实验室根据具体的实验需求而定。

细胞学实验室

生化分析室

摄影室及暗室

3. 移栽设施/温室

要求：配置人工光源并且能够控制室内温度，为

试管苗的正常生长提供适宜的环境。

2．外植体消毒的基本方法是什么？

3. 无菌操作在植物离体培养中的作用是什么？

4. 配制培养基时，加入一定量的植物生长调节物质，

它们在离体培养过程中有哪些作用? 激素调控的一般规律是什么？

植物激素或生长调节剂（ growth regulators）包

括：

生长素类（ auxin）

细胞分裂素类(cytokinin,CTK)

赤霉素类 (GA)

乙烯（ Eth)

脱落酸(ABA)

其中前三者为正向激素，后两者则为负向激素。

常用的主要有生长素类和细胞分裂素类两大类。

①生长素类（ auxin）：在作用或结构上

类似于吲哚乙酸的一类物质的统称。生长素

是最早发现的植物激素。

作用：诱导愈伤组织形成，促进细胞的分裂和伸长，诱导根原基的发生和根系的生成，有调运养分的效应。使用浓度0.1～10mg/L。常用的生长素有:

吲哚乙酸 (IAA)、2， 4，二氯苯氧乙酸 (2,4-D) 吲哚丁酸 (IBA) 。

奈乙酸 (NAA)、

②细胞分裂素类(cytokinin,CTK) ：是一类促进细

胞分裂的植物激素，细胞分裂素都为腺嘌呤的衍生物

作用：促进细胞分裂和分化，诱导不定芽的形成，

促进胚状体的发育，延缓组织的衰老，打破顶端

优势，有利于芽的增殖，常用于继代和增殖培养。

使用浓度0.1～10mg/L。

常用的细胞分裂素有：

激动素 (KT)

6-苄基腺嘌呤 (6-BA/BAP)

玉米素（ ZT）

异戊烯氨基嘌呤 (2-ip)

噻重氮苯基脲（ TDZ）

5. 常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特

点?

MS培养基

无机盐含量较高，微量元素种类较全，浓度也高。其养分的数量和比例较合适，离子平衡性较好，具较强的缓冲能力，培养过程中较稳定，可满足植物的营养和生理需要。其中它的硝酸盐含量较其它培养基为高。

广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。

Ｎ6 培养基

ＫＮＯ3和（ＮＨ4） 2ＳＯ4 含量高，VB1含量高，不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花粉和花药培养和组织培养。

Ｂ5培养基

ＫＮＯ3含量高，有机物含量较高，但含有较低的铵，这可能对不少培养物的

生长有抑制作用。从实践得知有些植物在Ｂ5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物

H培养基

大量元素约为1/2MS，微量元素减少但含量增加，维生素种类较多。用于多种植物的花药、胚培养。

Ｗhite 培养基

特点：是无机盐浓度较低，有机成分含量也相对较低。适于生根培养。

ＫＭ-８Ｐ培养基

有机成分较复杂。它包括了所有的单糖和维生素。广泛用于原生质体和融

合体的培养

6．简要说明MS培养基的基本组成。

7. 配制培养基时，为什么要先配母液?如何配制母液?

在组织培养工作中，配制培养基是日常工作，为了简便起见，将培养基配方中的药品配成一定倍数的浓缩液，用时稀释，这种浓缩液就是母液贮备液。

母液储备液可一次称量供一段时间使用，简单方便，不仅可以提高培养基中微量成份称量的准确性，还可以减少工作量，提高效率

母液贮备液的配制要求

①大量元素母液配制： 10x， 20x， 50x

②微量元素母液配制： 1000x

③铁盐母液配制： 100x或200x , 分别溶解

EDTA-Na2 与FeSO4· 4H2O，再充分混匀，贮存

在棕色瓶中

④有机母液配制：可以分别配制100～200X，也可以混在一起配制

⑤肌醇一般单独配置成100x。

⑥生长调节物质配制：分别单独配制成母液，储存于冰箱。一般浓度为0.1～1 mg／ml。并注意不同激素需加入不同助溶剂

8. 如何判断配制好的培养基是否良好？

9. 植物培养基和微生物培养基有什么不同？

第三章1．植物细胞全能性的含义是什么？其实现的途径是什么？

每个植物生活细胞无论是体细胞还是生殖细胞，均具有该物种全部的遗传信息。

每个植物生活细胞均具有发育成完整植株的潜在能力

细胞全能性仅是一种能力或可能性，不是所有具有全能性的细胞都能进行全能性的表达。离体培养条件下，植物体细胞、性细胞、原生质体、经过遗传信息修饰的

细胞都可能实现细胞全能性

2．什么是细胞脱分化和再分化？其实现的条件是什么？

脱分化（dedifferentiation）：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程

再分化（Redifferentiation）：脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新回复细胞分化能力，形成各种不同类型的细胞，并经历器官发生或胚胎发生，进一步发育成完整植物体的过程

细胞脱分化的条件：创伤、外源激素

3．什么是器官发生，器官发生的方式有几种？各有什么特点？直接和间接器官发生的区别是什么？

器官发生：是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定芽（adventitious buds）、不定根（adventitious roots）等器官的过程

5. 器官发生的影响因素有哪些？

1、起始材料

母体植株的遗传基础

外植体的类型

生理状态、取材方式等

2、培养基成分

激素（Skoog-Miller模式）、有机及无机成分

3、培养条件

光照、温度、湿度等

6．体细胞胚的概念、含义及特点是什么？

体细胞胚(somatic embryo)或胚状体（embryoid）：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发生和发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞）体细胞胚的含义：

在离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚；

体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚；

体细胞经过了胚胎发育过程，以区别与离体培养中器官发生形成个体的途径

体细胞胚发生的特点

具有明显的双极性：即在发育的早期阶段，从其方向相反的两端分化出茎端和根端，具有根、芽两极分化的特性；

存在生理隔离现象：胚状体与母体组织或与外植体的维管组织无解剖结构上的直接联系，处于相对独立的状态；

遗传的相对稳定性：单细胞起源；发生数量大，增殖率高：可再生次级胚

7．体细胞胚发育的过程是什么？它和器官发生形成的芽、合子胚有什么区别？

8．什么是胚性和非胚性愈伤组织？

9．外源激素对体细胞胚胎发生有什么影响？

生长素是诱导体细胞胚的主导因子。体细胞胚胎发生中，外源生长素的使用规律，在大多数植物中是相似的。

诱导愈伤组织或胚性愈伤组织，均需要高浓度的生长素；当球型胚形成后，则需要降低生长素水平才能完成体细胞胚的继续发育；生长素的这一应用规律与胚胎发育过程中内源激素的变化是一致的

10．如何进行愈伤组织的继代培养？多次继代培养的愈伤组织其分化能力如何？为什么？

愈伤组织在诱导培养基上生长一段时间后，保持其的旺盛分裂能力、均一的细胞群体，避其死亡，必须进行继代培养。

继代培养时期：旺盛分裂时期；

培养方法：分割成小块，约5mm3大小；

培养方式：固体培养、液体培养。

培养基：与初代培养相同，或适当降低激素浓度

或调控激素比例。

愈伤组织形态发生潜力的丧失

原因：生理学说：培养组织或细胞中的内源激素失衡。

遗传学说：遗传物质在培养继代过程中由于变异等原因而发生了改变或是突变。

竞争学说：细胞对于生长素抑制全能性表达的作用变得比较敏感；反复的继代培养中，非胚性细胞的群体将会逐步增加，而胚性成分则逐渐减少。

11.人工种子的概念及其结构。

人工种子又称合成种子（synthetic seeds）或体细胞种子（somatic seeds）：

是指将植物离体培养中产生的体细胞胚，或能发育成完整植株的分生组织（不定芽、愈伤组织、胚状体、原球茎、小鳞茎、微型薯等）包埋在含有营养物质和具有保护功能的外壳形成的适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。

12.人工种子研制有什么意义？如何看待人工种子的发展前景及面临的困难？

人工种子的研制意义

（1）人工种子能代替试管苗快速繁殖，开创了种苗生产的又一新途径。与试管苗相比是一种高效快速的繁殖方法，避免移栽困难，易于实现机械化操作，便于储运。

（2）对优异杂种种子、自然条件下不结实或制种困难的植物可以不通过有性制种而快速获得大量种子。

（3）在人工种子的包裹材料里加入各种生长调节物质、菌肥、农药等，可人为地影响控制作物生长发育和抗性。

人工种子存在的问题

许多重要植物还不能培养出大量的高质量的体细胞胚。

现有的人工胚乳和种皮还不够理想，不能有效地防止微生物的腐蚀。

人工种子的贮藏有待进一步完善。

人工种子的成本远高于自然种子

发展前景

人工种子的发展前景是客观的

它将是农业中一种革命性的繁殖系统

相信该技术会得到逐步完善，建立多种模式

来研制人工种子，并逐步扩大应用范围。

第四章

1.离体快速繁殖一般可分为哪几个阶段？简述其操作的一般程序。

繁殖过程划分为四个阶段

无菌培养物的建立（stage1）程序：外植体的选择、消毒、接种和培养

增殖培养（stage2）方法：反复进行、连续的培养

试管苗生根（stage3）方法：降低或去除细胞分裂素，增加碳源。植物类型不同，壮苗培养时可以以单个的枝或丛状的芽苗进行。

试管苗的移植（stage4）

移栽的一般步骤：

1）.开瓶锻炼：放在较强光照条件下或温室中，打开瓶

口，锻炼1～2周左右；

2）.试管苗就可以从培养瓶内取出，小心的洗去根上附

着的培养基，移栽进合适的基质中；

3）.精心管理，直至成活；

4）.进一步培育成商品苗。

2. 快速繁殖中，培养物的增殖途径有哪几种?各有何特点？

（1）、腋生枝型

以顶芽和腋芽发育进行增殖的特点：

利用外植体上已有的芽分生组织，促使其萌发形成枝条或芽，方法简单，能高度保持遗传稳定性，繁殖速度较慢。适用于绝大多数植物的繁殖，对具有特殊观赏价值的嵌合体(chimera)园艺植物来说，也是唯一能够保持其原有嵌合特性的繁殖途径。

（2）、不定芽型

不定芽增殖的特直接分化途径产生的不定芽：遗传稳定、繁殖速度较快

间接分化途径产生的不定芽：容易产生变异点：

利用不定芽增殖对于繁殖园艺上的嵌合体（chimera）植物来说，容易引起嵌合体的分离。

3、体细胞胚（somatic embryo）型

特点：

?最理想的繁殖方式，增殖系数高；

?遗传相对稳定；

?具有双极性结构，可以免去生根步骤；

?有利于实行机械化操作。

目前只有少数植物能产生胚状体，再生植株有返幼特性

3.试管苗有什么特点？

试管苗的特点

叶的特点：叶面积较小，功能不全，易失水，合作用能力低。

根的特点：无根或生根率低，根与茎输导组织不相通，根吸收功能低。

茎的特点：有的植物茎的输导组织发育也不完善，木质化程度低。

光合作用能力：增殖阶段，试管苗基本处于异养状态，很少或不进行光合作用；生根阶段，异养兼自养。

4.外植体选择应注意哪些问题？

供体植株的基因型：遗传性状是否优良？培

养难易？实用价值？

外植体类型：取材难易？再生难易？遗传变

异？

增殖类型：诱导的难易？繁殖速度？遗传稳

定性？

5.植物离体快速无性繁殖有什么特点？主要适用于哪些植物类型？

起始材料少，生长周期短、繁殖速度“快”，每年以数万倍乃至数百万倍的速度进行繁殖，不受自然条件干扰，实现工厂化育苗；

生产无病毒种苗，防止品种退化；

体积微小、不携带病原菌，便于储运和种质材料交换，减少病虫害的传播；

能够有效地保持优良品种的特性，使原来难以通过无性繁殖的植株进行无性繁殖。已广泛应用于花卉、蔬菜、果树、药材和林木的种苗生产

6.防治植物病毒病有哪些方法？

物理方法：X射线、紫外线、超短波、高温热处

理等。钝化病毒，从而达到抑制病毒蔓延的目的。

化学方法：采用化学抑制剂，干扰病毒在植物体

内的复制。

生物学方法：选用抗病毒品种、采用种子繁殖或

茎尖培养等方法。

7.简述茎尖分生组织培养脱毒的一般方法。

（1）供体植株的选择和预处理

供体植株的选择：了解植物病毒种类及分布，确定茎尖大小，材料的典型性，外植体健康程度等。

预处理：茎尖培养可与热处理、化学疗法相结合。

（2）茎尖组织的分离

顶芽、侧芽等→表面消毒→解剖镜下无菌操作→去除幼叶、叶原基→切取含1-2个叶原基的生长点（0.1～0.2mm）→即刻转入培养基。

（3）茎尖分生组织的培养

常用的培养基有MS、White、Morel、农事场、革新等配方

8.影响茎尖分生组织培养去除病毒的因素都有哪些?

9.病毒检测的方法？

1、指示植物鉴定法

2、血清学鉴定法

3、电子显微镜检查法

4、分子检测法

10.如何进行无病毒苗的保存和繁殖？

第七章植物花药和花粉培养及单倍体育种

1．通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？

花药培养

花粉培养

未授粉子房/

胚珠培养

2．花药培养中如何选择外植体？

（1）供体材料选择：

供试材料的遗传背景：选择易培养的材料、杂合性的材料。

供试材料的生理状态：开花期的早晚、生长环境、营养状态等

（2）花粉的发育时期选择：

只有花粉发育到一定时期对离体培养最敏感，才可能被诱导产生愈伤或胚状体。

一般情况下，对大多数植物来说，在单核期的花粉比较容易培养成功。

单核中晚期到有丝分裂期是最适培养时期。

3．花药培养与花粉培养有什么不同？

共同点：培养目的相同，获得单倍体植株。

不同点：花药培养属于器官培养；而花粉培养属于细胞培养；花粉培养没有药壁组织干扰，易于观察雄核发育的全过程，技术更复杂

4．花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？

降低了小孢子新陈代谢，延长花粉的寿命,中断正常的配子体发育，促进花药营养成分的转运；

低温能改变纺锤丝的轴向, 破坏纺锤丝的微管蛋白而阻止纺锤丝形成，打破有丝分裂正常过程, 导致细胞分化；

阻止了细胞在预处理时的细胞周期，一旦培养在25度-28度下重新返回有丝分裂；

低温、饥饿胁迫作用。

5．何谓花粉的二型性和E花粉？

天然花粉群体（同一花药）中，存在两类不同的花粉。一类为正常花粉，它们的细胞质较浓，发育较一致，染色较深；另一类为异常花粉，其特征是花粉体积较小，细胞质较淡、染色较浅，发育迟缓(Dunwell，1992)。

Sunderland等在研究花药培养的发育途径中发现后一类花粉具有雄核发育能力，形成花粉胚，因此称为胚性花粉或E花粉

6．花粉植株的发生主要有哪些途径？

（1）培养初期小孢子的发育途径

1、小孢子的发育途径

2.营养核发育途径

3.生殖核发育途径

4.由生殖核、营养核共同发育途径

（2、）培养晚期小孢子的发育过程

①通过胚状体形成花粉植株

②通过愈伤组织分化形成花粉植株

7. 单倍体的特点是什么？

体细胞染色体数减半；

生长发育弱，体形小、各器官明显减小；

雌、雄配子严重败育，有的不能进入有性世代。

8. 花药培养的一般程序？

1.材料准备

2.花药接种及诱导培养

3.分化培养

4.生根、壮苗培养及驯化移植

5.单倍体植株的鉴定及其二倍化

第八章、植物胚胎培养

1．胚胎培养、胚培养、“胚挽救”的概念。

胚培养（embryo culture）：指在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分

离出来，置于培养基上进行培养的技术。

一些植物由于胚发育不良或中途败育等生殖障碍，导致种子不能萌发；在远缘杂交中，杂种的不亲和性，使杂种胚在发育过程中途败育等；可以利用胚胎培养技术，分离发育不良的种子，或即将败育前的种胚进行培养，促使胚继续发育至成熟，使杂交育种或远缘杂交获得成功，这种技术称为“胚挽救”技术

胚胎培养：对植物胚及胚器官（胚乳、胚珠、子房）的离体培养。

2. 胚培养的类型有哪两种？离体胚培养有什么意义？

胚培养一般包括幼胚培养和成熟胚培养两种方式。

植物胚培养的意义

1、用于胚的挽救

2、打破种子的休眠，提早结实，缩短育种年限

3、使生活力低下或无活力的种子萌发

4、克服珠心胚的干扰，使植物合子胚正常发育

5、种子活力的快速测定

6、诱导胚性愈伤及建立高频再生体系

7、用于理论研究

3. 幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？

1、胚性发育(embryonal development)/合子胚发育

幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚，再按种子萌发途径出苗形成完整植株。

2、早熟萌发(precocious germination)幼胚接种后，离体胚不继续其胚性生长，而

是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称之为早熟萌发。

3、脱分化形成愈伤组织(callus)

幼胚在离体培养中首先发生细胞增殖，形成愈伤组织。愈伤组织可分化为胚状体或不定芽。

4．什么是早熟萌发？如何克服？

幼胚早熟萌发：

在含有无机盐、有机物和蔗糖的培养基上，离体培养的幼胚越过正常胚胎发育阶段，在未达到生理和形态成熟的情况下，萌发长成幼苗，称早熟萌发。早熟萌发成的幼苗往往畸形、细弱，甚至不能存活

防止幼胚早熟萌发的方法：提高培养基渗透压

胚龄越小要求的渗透压（糖浓度）越高；

提高无机盐浓度，可加入适量的NaCl以提高渗透压，浓度一般为0．2％－0．4％，超过0．8％对胚有毒害作用；

加人1．l％－5．5％甘露醇提高渗透压，甘露醇可以部分地代替蔗糖，使幼胚在等渗条件下继续胚性发育

5．在实际操作中如何确定胚囊的发育时期？

最好的办法是根据胚囊发育时期和花粉发育时期的相关性来确定胚囊发育时期

6．植物胚乳有哪些类型？胚乳培养的最适宜时期是什么时间？胚乳培养有什么作用和意义？

被子植物胚乳按发育初期是否形成细胞壁可

三种类型：A、核型胚乳（nuclear type）

B、细胞型胚乳（cellular type）

C、沼生目型胚乳（helobial type）

胚乳发育时期可分为：早期、旺盛生长期和成熟期，旺盛生长期是取材的最佳时期。再生植株多为三倍体，产生无籽果实；

可以从胚乳愈伤中分离和筛选各种类型的非整倍体植株；

研究胚和胚乳的关系及胚乳组织的功能；

胚乳细胞是研究淀粉、蛋白质和脂类天然产物代谢途径的理想系统；

胚乳培养再生植株证明了全能性理论

7．离体授粉、受精的意义是什么？简述其一般方法。

①克服远源杂交不孕

②克服自交不亲和性

③诱导单倍体植株

④用于花粉生理和受精生理的研究

胚珠授粉方法

哺育法：将胚珠表面先蘸满有助于花粉发然后撒上花粉进行培养。该法是解决胚珠存活率和花粉发芽、花粉发生矛盾时的做法。

柱头接近法：将花粉撒在本种植物的柱头上，切下柱头接种在培养基上，然后在柱头周围接种异种植物裸露胚珠，花粉在本种植物的柱头哺育下发芽，花粉管伸长并进入胚珠受精。该法使解决花粉发芽和胚珠培养在培养基组成上发生矛盾时所采用的方法

子房授粉方法：

花粉涂抹法：毛笔粘取花粉，涂抹于柱头，或在剥离子房时用柱头直接粘取花粉后培养。花粉悬液注射或引入法：在子房壁或顶端切开一个小口，把花粉悬液用无菌微量注射器注入，或引入子房，进行培养。

花粉悬液：10-20％mg/L硼酸+5％蔗糖，每滴悬液含花粉100-300粒

第九章植物体细胞无性系变异及突变体筛选

1．体细胞培养物的遗传变异有何特点？

2．哪些因素会影响培养物的遗传变异？

3．从细胞学和分子生物学机制上理解体细胞无性系变异的机制。

4．体细胞无性系变异的诱导和选择方法。5．体细胞无性系变异的应用途径。

生物选修三植物细胞工程知识点清单(自主整理适合学生识记)

植物细胞工程知识点清单 （一）植物组织培养 1.理论基础（原理）：细胞全能性 2.全能性概念：具有某生物发育所需全部遗传信息的细胞，都具有发育成完整个体的潜能。 3、过程：外植体—脱分化—愈伤组织—再分化—丛芽、不定根—新植株 4、相关概念及实验注意事项 ①外植体：离体植物器官、组织、细胞 ②愈伤组织：高度液泡化，无固定形态的薄壁细胞。全能性高，分化程度低 ③外植体消毒：70%酒精30s—无菌水冲洗—次氯酸钠30min—无菌水冲洗 ④取材：选取形成层部位 ⑤脱分化：23~26o C，避光 ⑥再分化：将愈伤组织转接到分化培养基，光照下培养 ⑦生长素/ 细胞分裂素：比值高—促进生根；比值低—促进发芽 5、植物组织培养概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官，组织，细胞培养在人工配置的培养基上，诱导其产生愈伤组织，丛芽，最终形成完整的植株。 6、地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 （二）植物体细胞杂交 1、植物体细胞杂交概念：将不同种的植物细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的过程。 2、过程及注意事项： ①去除细胞壁：酶解法（纤维素酶、果胶酶），获得原生质体 ②原生质体融合方法：物理法（离心、震荡、电刺激）；化学法：聚乙二醇 ③细胞融合成功的标志：杂种细胞再生细胞壁 3、融合结果：获得杂种细胞，进而获得杂种植株。 A细胞+B细胞所得杂种植株遗传物质=A+B 4、成功例子：番茄—马铃薯；烟草—海岛烟草；胡萝卜—羊角芹；白菜—甘蓝 5、优点：克服远缘杂交不亲和障碍 6、局限性：不能按照人的要求表达性状 （三）植物细胞工程应用 1、微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖（观赏植物，经济林木，无性繁殖作物） 2、作物脱毒：采用茎尖等分生区组织培养来除去病毒（因为分生区附近的病毒极少或没有） 如：马铃薯；草莓；甘蔗；菠萝、香蕉等经济作物 3、人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输 4、作物新品种培育：单倍体育种 5、突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体） 6、细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。 如：生产人参皂甙，三七，紫草，银杏等。 （定向诱导愈伤组织细胞分化为产生特定物质的细胞，提纯产物）

动物细胞工程知识点

动物细胞工程12月20日 动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程 分散成单个细胞， 制成细胞悬液 注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。 思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?

答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养： 成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。 培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。

专题二植物细胞工程知识点

专题二细胞工程知识点梳理填空 概念：应用__________ 和__________ 的原理和方法，通过___________ 或__________ 上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的___________ 或获得____________ 的一门综合科学技术。 分类：根据操作对象不同，可分为___________________ 、________________ 。 一、植物细胞工程 理论基础（原理）____________________ 。 1、概念：具有某种生物____________ 的任何一个细胞，都具有发育成_____________ 的潜能。 全能性表达的难易程度： ____________ > 生殖细胞〉__________________ ; ______________ >动物细胞； 2.在理论上，生物的任何一个细胞都具有__________________________________ ，但在生物的生长发育过程中，细胞并不表现___________ ，而是分化成各种_____________________ 。 3.特定的____________ 条件下，细胞中的基因会有 ________ 地表达出各种 _________ ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同________________ 。 （一）植物组织培养技术 植物组织培养：在________ 和________ 的条件下，将_________ 的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的_______ 上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 ____________ 、丛芽，最终形成完整植株。 1.操作过程： ①② 外植体---- > A - > B—植物体 图中①_________ ，②_______ , A表示 ______ , B表示 ________ 。 2 .细胞脱分化：已__________ 的细胞经过______ 后，失去其特有的________________ 而转变成未分化细胞的过程。 3.胡萝卜的组织培养实验 1 ）实验原理 植物体的根、茎、叶细胞都具有 ___________ ，在一定的______ 和_____ 等条件下，可以脱分化形成______________ 。将愈伤组织转接到含有不同_______ 成分的培养基上，就可以诱导其再分化生 成胚状体或丛芽，进而发育成_____________________________ 。证明了分化的植物细胞仍具 有_________________________ 。 2）实验步骤 ①将__________ 用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手 ______________ 。

机械工程基础知识点汇总

第一章常用机构 一、零件、构件、部件 零件，是指机器中每一个最基本的制造单元体。 在机器中，由一个或几个零件所构成的运动单元体，称为构件。 部件，指机器中由若干零件所组成的装配单元体。 二、机器、机构、机械 机器具有以下特征： （一）它是由许多构件经人工组合而成的； （二）构件之间具有确定的相对运动； （三）用来代替人的劳动去转换产生机械能或完成有用的机械功。 具有机器前两个特征的多构件组合体，称为机构。 机器和机构一般总称为机械。 三、运动副 使两构件直接接触而又能产生一定相对运动的联接称为运动副。 四、铰链四杆机构 由四个构件相互用铰销联接而成的机构，这种机构称为铰链四杆机构。 四杆机构的基本型式有以下三种： （一）曲柄摇杆机构 两个特点：具有急回特性，存在死点位置。 （二）双曲柄机构 （三）双摇杆机构 铰链四杆机构基本形式的判别： ａ＋ｄ≤ｂ＋ｃａ＋ｄ＞ｂ双曲柄机构曲柄摇杆机构双摇杆机构双摇杆机构 最短杆固定与最短杆相邻的杆固 定 与最短杆相对的杆固 定 任意杆固定 注：ａ—最短杆长度；ｄ—最长杆长度；ｂ、ｃ—其余两杆长度。 五、曲柄滑块机构 曲柄滑块机构是由曲柄、连杆、滑块及机架组成的另一种平面连杆机构。 六、凸轮机构 （一）按凸轮的形状分：盘形凸轮机构，移动凸轮机构，圆柱凸轮机构。 （二）按从动杆的型式分：尖顶从动杆凸轮机构，滚子从动杆凸轮机构，平底从动杆凸轮机构。 七、螺旋机构 螺旋机构的基本工作特性是将回转运动变为直线移动。 螺纹的导程和升角：螺纹的导程Ｌ与螺距Ｐ及线数ｎ的关系是 L = nＰ 根据从动件运动状况的不同，螺旋机构有单速式、差速式和增速式三种基本型式。

高中生物选修三训练《植物细胞工程》

专题2细胞工程 2.1植物细胞工程 2.1.1植物细胞工程的基本技术 课时训练5植物细胞工程的基本技术 1.植物细胞表现出全能性的必要条件是()。 A.给予适宜的营养和外界条件 B.导入其他植物细胞的基因 C.脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件 D.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 解析:植物细胞全能性是指具有细胞核的高度分化的植物细胞,在离开母体后,在适宜的营养和外界条件下,细胞首先发生脱分化,然后恢复细胞分裂形成愈伤组织,再在一定的诱导因素作用下发生分化,最后形成具有根、茎、叶的完整植株。高度分化的植物细胞的全能性只有在离开母体后才能表现出来。成熟筛管细胞无细胞核,D项错误。B项中,导入其他植物细胞的基因属于基因工程,与细胞的全能性没有必然的联系。 答案:C 2.可以成为植物组织培养条件的是()。 ①CO2②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素 A.①③⑤⑥ B.②③⑤⑥ C.②③④⑤⑥ D.①②⑤⑥ 解析:植物组织培养的条件是营养物质、激素和其他适宜条件,在愈伤组织形成之前不能进行光合作用,不需要CO2。 答案:C 3.植物体细胞杂交是利用不同物种的两个细胞融合成一个杂种细胞的过程。该过程是指()。 A.不同植物的精子与卵子的融合 B.不同植物原生质体的融合 C.完整的两个体细胞的融合 D.植物花粉细胞的两两融合 解析:植物体细胞杂交是不同植物的原生质体融合为一个杂种细胞的过程。精、卵结合过程为受精作用,花粉细胞不是体细胞。 答案:B 4.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的?() A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 解析:形成愈伤组织,需要在消毒灭菌条件下进行是肯定的,因为只有在消毒灭菌条件下,才能保证培养出的组织细胞不被感染,否则培养基内将长出许多霉菌,与离体细胞争夺营养与生存空间,不能形成愈伤组织。由于此阶段形成的是愈伤组织,并没有形成具有根、茎、叶的植物体,因此不需要光照。 答案:C 5.不能用于人工诱导原生质体融合的方法是()。

工程光学Ι复习要点--基本概念汇总

工程光学Ι复习要点 基本概念汇总 一、四大定律；光路可逆；全反射； 二、光轴；符号规则；如射角；孔径角；视场角；物距；像距；物高；像高； 近轴光线；近轴区域；共轭关系；垂轴放大率；轴向方法率；角放大率；拉赫不变量； 三、基点基面（焦点、主点、节点、焦面、主面）；焦距；光焦度；牛顿公 式；高斯公式；焦物距；焦像距；等效光组（组合光组）；

四、平面镜；双面镜；反射棱镜；折射棱镜；光楔；主截面；屋脊棱镜；等 效空气层；偏向角；色散； 五、孔径光阑；入瞳；出瞳；视场光阑；入窗；出窗；孔径角；孔径高度； 视场角；视场高度（物高、像高）；渐晕；渐晕系数（线渐晕）；渐晕光阑； 场镜；景深；焦深；理想像；清晰像； 六、像差；球差；彗差；像散场曲；畸变；位置色差；倍率色差；二级光谱； 色球差；像差曲线；子午面；弧矢面；

七、近视；远视；近点；远点；屈光度；分辨力；视放大率；有效放大率； 数值孔径；相对孔径；光圈数（F数）；出瞳距； 系统工作原理汇总 远摄系统；反远距系统；望远系统；焦距测量系统；物方远心光路；像方远心光路；景深产生的原理；焦深产生的原理；人眼成像系统（正常、近视、远视）；近视眼校正系统；远视眼校正系统；放大镜工作原理；显微镜工作原理；望远镜工作原理；目镜视度调节原理；临界照明；克拉照明；照相系统的调焦原理

方法汇总 全反射；单球面成像；共轴球面成像；反射球面成像（反射镜成像）；理想光组成像；薄透镜成像；组合光组、厚透镜成像及焦距主面计算；透镜组成像；平行平板成像；光楔的偏向角计算；孔径光阑的判断；入瞳、出瞳的计算；入窗、出窗的计算；视场大小的判断和计算；渐晕光阑的计算；棱镜大小的计算；景深、焦深的计算；视放大率的计算（放大镜、显微镜、望远镜）；有效放大率的计算；出瞳距的计算；通光口径的计算（物镜、目镜、分划板、棱镜、场镜） 作图汇总 作图求像；棱镜展开；棱镜坐标的判断；各种系统工作原理的光路图；

人教版高中生物选修3[知识点整理及重点题型梳理]植物细胞工程 (植物克隆技术)

精品文档用心整理 人教版高中生物选修三 知识点梳理 ）巩固练习 重点题型（ 常考知识点 植物细胞工程（植物克隆技术） 【学习目标】 1、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 2、体验植物组织培养技术。 3、列举植物细胞工程的实际应用。 【要点梳理】 要点一：克隆——无性繁殖系【植物细胞工程（植物克隆技术）369167克隆】 1.分子水平的克隆: DNA复制很多碱基序列相同的DNA 2.细胞水平的克隆 细胞细胞分裂很多遗传物质相同的细胞 3.个体水平的克隆 组织、器官细胞分裂遗传背景相同的新个体 要点二：植物细胞工程的基本技术 1.细胞的全能性 （1）遗传基础 生物体细胞一般都是由受精卵经有丝分裂形成的，因而都含有生物体的一整套遗传物质，都具有发育成完整 个体的潜能。 （2）不能表现的原因 在生物体上不能表现出其全能性，只能通过细胞分化形成不同的组织、器官，这是因为在特定的环境、激素等的影响下基因选择性表达的结果。 2.植物细胞表现其全能性的条件 （1）脱离母体。 （2）植物组织培养时，培养基中除含有一定的水分、无机盐外，还要添加一定的植物激素（如生长素、细胞分裂素），这有助于愈伤组织分化为不同组织和器官。 （3）在植物组织培养的前期对光照无需求，在后期需要光照条件，这有利于细胞生长、分化。 3．植物组织培养 （1）过程： 在无菌条件下，将植物体的器官或组织片段（如芽、根尖或花药）切下来，放在适当的人工培养基上进行离体培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。这种组织的细胞排列疏松而无规则，是一团无定形的薄壁细胞——愈伤组织。原来已经分化，并且具有一定功能的体细胞（或性细胞）丧失了原有的结构和功能，又重新恢复了分裂功能，叫做细胞的脱分化。将处于脱分化状态的愈伤组织，移植到合适的培养基上继续培养（在适当的光照、温度等条件下）愈伤组织就会重新进行分化，产生出植物的各种组织和器官（如根、茎、叶等），进而发育成一棵完整的植株，这个过程叫做植物细胞的再分化。

细胞工程复习重点

思考题 1．细胞工程实验室的基本组成与要求是什么？ 一、实验室组成 1．基本实验室 ①准备室/化学实验室 功能：就是进行一切与实验有关的准备工作 要求：宽敞明亮，通风条件好，地面便于 清洁并应防滑处理。 ②接种室/无菌操作室 功能：是进行接种、继代、细胞融合等无 菌操作的场所。 要求：封闭性好，干燥清洁明亮，防止空 气对流。外应设缓冲室、更衣室。 防止微生物感染。 ③培养室 功能：是对接种到培养瓶的离体材料进行控制培养的场所。 要求：是要能控制光照和温度，应保持干燥和清洁，2．辅助实验室根据具体的实验需求而定。 细胞学实验室 生化分析室 摄影室及暗室 3. 移栽设施/温室 要求：配置人工光源并且能够控制室内温度，为 试管苗的正常生长提供适宜的环境。 2．外植体消毒的基本方法是什么？

3. 无菌操作在植物离体培养中的作用是什么？ 4. 配制培养基时，加入一定量的植物生长调节物质， 它们在离体培养过程中有哪些作用? 激素调控的一般规律是什么？ 植物激素或生长调节剂（ growth regulators）包 括： 生长素类（ auxin） 细胞分裂素类(cytokinin,CTK) 赤霉素类 (GA) 乙烯（ Eth) 脱落酸(ABA) 其中前三者为正向激素，后两者则为负向激素。 常用的主要有生长素类和细胞分裂素类两大类。 ①生长素类（ auxin）：在作用或结构上 类似于吲哚乙酸的一类物质的统称。生长素 是最早发现的植物激素。 作用：诱导愈伤组织形成，促进细胞的分裂和伸长，诱导根原基的发生和根系的生成，有调运养分的效应。使用浓度0.1～10mg/L。常用的生长素有: 吲哚乙酸 (IAA)、2， 4，二氯苯氧乙酸 (2,4-D) 吲哚丁酸 (IBA) 。 奈乙酸 (NAA)、 ②细胞分裂素类(cytokinin,CTK) ：是一类促进细 胞分裂的植物激素，细胞分裂素都为腺嘌呤的衍生物 作用：促进细胞分裂和分化，诱导不定芽的形成， 促进胚状体的发育，延缓组织的衰老，打破顶端 优势，有利于芽的增殖，常用于继代和增殖培养。 使用浓度0.1～10mg/L。 常用的细胞分裂素有： 激动素 (KT) 6-苄基腺嘌呤 (6-BA/BAP) 玉米素（ ZT） 异戊烯氨基嘌呤 (2-ip) 噻重氮苯基脲（ TDZ） 5. 常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特 点? MS培养基 无机盐含量较高，微量元素种类较全，浓度也高。其养分的数量和比例较合适，离子平衡性较好，具较强的缓冲能力，培养过程中较稳定，可满足植物的营养和生理需要。其中它的硝酸盐含量较其它培养基为高。 广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 Ｎ6 培养基 ＫＮＯ3和（ＮＨ4） 2ＳＯ4 含量高，VB1含量高，不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花粉和花药培养和组织培养。 Ｂ5培养基 ＫＮＯ3含量高，有机物含量较高，但含有较低的铵，这可能对不少培养物的

土建工程基础 知识点总结

. 根据材料的1.化学成分，可分为有机材料、无机材料以及复合材料三大类。 墙体材料和功能材料大体上可分为结构材料，根据建筑材料在建筑物中的部位或使用功能，三类。与质量有关的物理性质：实际密度，表观密度，体积密度，堆积密度，材料的密实度与空2. 。隙率（密实率，孔隙率）与水有关的物理性质：3. 吸水性：材料在水中吸收水分的性质称为吸水性，其大小用吸水率表示。 表示：材料所吸湿性：材料在潮湿空气中吸收水分的性质称为吸湿性，其大小用含水率W b含水的质量占材料干燥质量的百分率，称为材料的含水率。用软化其强度也不显著降低的性质称为耐水性，耐水性：材料在长期饱和水作用下不破坏，表示：系数K 以单位面积上所受的力来表示：材料在外力4.（荷载）作用下抵抗破坏的能力称强度， 产生的变形不因外力的消除而消失的性质称为塑形 5.材料在外力作用下产生的变形可随外力的消除而完全消失的性质称弹性 无明显的变形特征而突然破坏的性质称脆性 在冲击、振动荷载作用下，材料能吸收较多的能量，产生一定的变形而不致被破坏的性能称韧性。 6.影响材料长期使用的破坏因素复杂多样，可分为物理作用、化学作用及生物作用等。 7.水泥按其用途和性能可分为通用水泥、专用水泥、特性水泥三类。 水泥强度是评定其力学性能的重要指标。 8.混凝土通常是由胶凝材料、粗、细骨料、水以及其他材料，按适当比例搅拌配制并经一定时间硬化而成的具有所需的形体、强度和耐久性的人造石材。 9.混凝土用粗骨料的最大粒径的选用原则：质量相同的石子，粒径越大，总表面积越小，越节约水泥，故尽量选用大粒径石子。 10.和易性是一项综合技术性能，包括以下三方面的性质：流动性、黏聚性、保水性。 11.提高混凝土强度的措施： （1）采用高强度等级水泥或早强型水泥。 （2）采用低水胶比的干硬性混凝土。 （3）采用湿热处理——蒸汽养护和蒸压养护混凝土 （4）掺加混凝土外加剂（早强剂、减水剂）、掺合料（如硅粉、优质粉煤灰、超细磨矿渣等）。（5）采用机械搅拌和振捣。 12建筑砂浆按用途分为砌筑砂浆、抹面砂浆（如装饰砂浆、普通抹面砂浆、防水砂浆等）及特种砂浆（如绝热砂浆、耐酸砂浆等）。 13.建筑砂浆按胶结材料不同，可分为水泥砂浆、水泥混合砂浆、非水泥砂浆。 14.砂浆的和易性： . .

(完整版)2.1.1植物细胞工程的基本技术知识点汇总

2.1.1植物细胞工程的基本技术知识点 一、细胞工程的含义及分类： 1、含义：应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合性科学技术。 （1）原理和方法： 。 （2）操作水平： 水平或 水平 （3）目的：改变细胞内的 或 。 2、种类： 根据操作对象分： 细胞工程和 细胞工程 植物细胞工程包括：植物组织培养、植物体细胞杂交。 动物细胞工程包括：动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植、单克隆抗体技术 二、细胞的全能性： 1、概念：已经分化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能。 2、细胞全能性的原因：一般生物体的每一个细胞都包含该种生物的 。 3、现实表现：在生物的生长发育的过程中，细胞 全能性，而是 。 原因：在特定时间和空间条件下，细胞中的基因会 表达出各种 ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同组织和器官。 4、全能性的高低： ①受精卵＞配子＞体细胞 ②植物细胞＞动物细胞（动物细胞核具有全能性） ③具有分裂能力的细胞＞不分裂的细胞 ④分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞。 三、植物组织培养技术 （一）过程： 1、原理： 的原理 2、条件：①离体的植物细胞、组织、器官（外植体）。②无菌。③人工配置的培养基（固体培养基，含有琼脂）。④适宜的条件：水、矿物质、有机物。⑤植物激素：生长素（诱导细胞分裂和根的分化）和细胞分裂素（促进细胞分裂和不定芽的分化）。⑥早期避光，后期光照。 3、愈伤组织：由排列疏松、无一定形态、高度液泡化的薄壁细胞组成。 4、脱分化：让 的细胞，经过诱导后，失去其 而转变成 细胞的过程。 5、再分化：愈伤组织在一定的培养条件下，分化出 ，形成完整的小植株。 一定的营养、激素 （ ） 离 体的植物细胞、 组织、器官 愈伤 组 织 完整 植 新植株

细胞工程知识点

细胞工程知识点 1、细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 2、细胞工程的应用： 1)动植物快速繁殖技术：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物 2)新品种的培育：细胞融合、细胞水平的重组 3)细胞工程生物制品：单克隆抗体制备、疫苗生产 4)细胞疗法与组织修复： 2细胞工程理论基础 1、细胞全能性：每个活的体细胞都具有像胚性细胞那样，经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力，并且具有母体的全部的遗传信息。 2、细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。 3、细胞的脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。 3细胞工程技术 1、实验室条件：组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室。 2、无菌技术、显微技术、细胞观察与分析、细胞分离、细胞保存与复苏 （1）细胞保存方法传代培养保存法低温冷冻保存法(低温、超低温保存) 液体固化的方式（形成冰晶、形成无定型的玻璃化状态） 玻璃化指液体转变为非晶态（玻璃态）的固定化过程，在此状态时，水分子没有发生重排，不产生结构和体积的变化，因此不会由于机械或溶液效应造成组织和细胞伤害，化冻后的细胞仍有活力。 冷冻方法（缓慢冷冻法、快速冷冻法预冷冻法包括逐级冷冻和两部冷冻） 细胞复苏按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温的过程。 复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。 细胞培养和代谢调控：

基础工程课程总结

基础工程 专业道路桥梁与渡河工程姓名秦富中学号20120460114

《基础工程》课程总结 《基础工程》课程主要包括土力学和及基础工程两大部分内容，土力学所包含的知识既是土木工程专业学生必须掌握的专业知识，又是为后面的专业课程学习所必须的基础知识。下面对本课程的授课情况总结如下： 1、本课程的主要讲述的内容和要求： 土力学部分主要阐述土的性质及工程分类、地基的应力和沉降计算、土的抗剪强度、土压力及边破稳定等问题。基础工程主要讲授常见的地基基础的设计理论和计算方法方面的内容，包括地基基础设计原则、浅基础、桩基础、复合地基、挡土墙、基坑工程、地基处理、特殊土地基以及动力机器基础和地基基础抗震，其中浅基础、桩基础、挡土墙、地基处理等是应当重点讲述的内容。通过本课程的学习，应当使学生了解土的成因和分类方法，熟悉土的基本物理力学性质，掌握地基沉降、地基承载力、土压力计算方法和土坡稳定分析方法，掌握一般土工试验方法，掌握地基基础设计的基本原理，具有进行一般工程基础设计规划的能力和从事基础工程施工管理的能力，并能对于常见的基础工程事故作出合理的评价。

2、本课程与前后续课程的关系 土力学和地基基础是一门包含内容十分广泛的课程，涉及到工程地质学、土力学、结构设计和施工等几个学科领域，综合性、理论性和实践性很强，学生要系统掌握土力学和地基基础内容，一定要处理好前续课程和后续课程的关系，掌握必要的工程地质、混凝土结构、材料力学、弹性力学等方面的知识，并能灵活运用到土力学课程当中。在本课程讲授的内容当中，有很多地方与其它课程内容有些重复，如地基处理部分内容和后续课程《地基处理》重复，土的工程性质和土的力学性质指标与《岩土工程》课程部分内容重复，桩基础部分内容与《建筑施工》部分内容重复等等，因此讲课过程中一定要注意到和这些课程的关系问题，要和这些课程的授课教师相互沟通，注意主次关系，既要避免不必要的重复，又要避免遗漏内容。 3、理论授课与实践的关系 土力学是一门理论与实践结合十分紧密的课程，授课过程中应充分注意理论与实践的结合，一方面要在授课过程中不断给学生充实工程实例，配合工程图片给学生讲解工程处理方法、工程经验和工程出现的问题，另一方面经常带领学生参观工地，使学生对实际工程有一个直观认识，及早培养学生的工程意识。此外，要重视土工实验，土力学课程中土工实验为10个学时5个实验，是培养学生动手能力，掌握

(完整word版)高中生物选修3细胞工程知识点

细胞工程 考点一植物细胞工程1.细胞工程 (1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。 2.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 3.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 4.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (3)过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。 5.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 ②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。 ③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种 a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。 b.流程：花药单倍体幼苗――――――――→ 秋水仙素诱导 染色体数目加倍 纯合子。 c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。 ②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。 (3)细胞产物的工厂化生产 1.植物组织培养的关键 (1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。

植物细胞工程的实际应用学案(附答案)

专题2细胞工程 2.1.2植物细胞工程的实际应用 寄语：世事洞明皆学问，人情练达即文章。 【学习目标】1、理解微型繁殖技术的应用。 2、了解单倍体育种过程和优点。 【课题重点】植物细胞工程应用的实例。 【课题难点】列举植物细胞工程的实际应用。 【学习过程】 一、植物繁殖的新途径 1.微型繁殖 （1）微型繁殖技术：用于优良品种的技术。 （2）特点：①保持优良品种的。 ②高效快速地实现种苗。 （3）实例：20世纪60年代，荷兰的科学家就成功地实现了利用 来培育兰花。 2.作物脱毒 （1）材料：植物的（如）。分生区附近的病毒极少，甚至。 （2）脱毒苗：切取（例如茎尖）进行组织培养获得的。 （3）优点：使农作物。 3.人工种子 （1）概念：一植物组织培养得到的、、顶芽和等为材料，经过人工包装得到的种子。（2）特点：①后代无。 ②不受、和限制。 (3)人工种子的制备，如图人工种子主要由三部分组成，一是胚状体 (分生组织)，它相当于天然种子的胚，是有生命的物质结构；二是 供胚状体维持生命力和保证其在适宜的环境条件下生长发育的人工胚乳； 三是具有保护作用的“人工种皮”。 二、作为新品种的培育 1.单倍体育种 染色体加倍 （1）方法：离体培养植株纯合子植株。 （2）优点：①后代是纯合子，能。②明显缩短了。 2.突变体的利用 （1）产生原因：在植物的组织培养过程中，易受和

（如、等）的影响而。 （2）利用：筛选出对人们有用的，进而培育成。 三、细胞产物的工厂化生产 1.细胞产物种类：、脂肪、糖类、、香料、生物碱等。 2.技术：植物技术。 3.实例：我国利用植物组织培养技术实现了大量生产；另外，三七、紫草和银杏的也都已经实现了工厂化生产。 课堂小结 1.微型繁殖技术 微型繁殖是快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，实际上是无性生殖的一种。在繁殖的过程中，细胞进行有丝分裂，因此亲、子代细胞内DNA相同，具有相同的基因，因此能保证亲、子代遗传特性不变。利用这种技术能高效快速实现种苗的大量繁殖。 优点：选材少、培养周期短，繁殖率高，便于自动化管理。 组织培养（微型繁殖）主要是一种无性繁殖。如果培养的是体细胞，得到的植株同亲代基因型完全相同，所得个体能保持母体的一切性状；但如果培养的是生殖细胞，如花药，得到的植株是单倍体，应为有性生殖中的单性生殖。 2.作物脱毒、人工种子与单倍体育种 作物脱毒主要是强调微型繁殖的取材一定是无毒的（如茎尖、根尖），才能繁殖出无毒的幼苗。 人工种子采用的也是微型繁殖的技术，但是只需培育得到胚状体、不定芽、顶芽和腋芽，包上人工种皮就可以形成人工种子。人工种子与微型繁殖得到的幼苗一样能保持亲本的优良性状，另外还可不受气候、季节和地域的限制。胚状体的获取途径：①由已脱分化的外植体直接产生②由愈伤组织产生③由悬浮细胞培养产生。 单倍体育种的优点是后代无性状分离，后代都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短育种年限。应用染色体变异的原理。 【习题巩固A级】 1．植物的微型繁殖技术，是指( ) A．植物体细胞杂交技术B．嫁接C．营养繁殖D．植物组织培养 2．下列育种措施，可以增加植物突变体出现的是( ) A．采用嫁接方法培育苹果新品种 B．将鱼的抗冻蛋白基因导入烟草受精卵中，培育抗冻烟草 C．用紫外线对组织培养中的愈伤组织进行照射

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基础工程重点总结

精品文档 1.基础与地基的概念：为了保证建筑物的安全与稳定性，需要将建筑物与地层接触部分的断面尺寸适当地扩大，以减小接触面上的应力分布，建筑物地步扩大的那一部分称为基础，而受建筑物荷载影响的那一部分地层称为地基。 2.持力层与下卧层：当地基由多层土组成时，直接与基础底面相接触且承受主要荷载的那部分土层称为持力层，持力层一下的部分称为下卧层 3.地基与基础是建筑物的根本，统称基础工程。研究内容：研究在各种可能荷载作用下以及各种工程地质条件下的地基基础问题。 4.基础的分类：浅基础和深基础地基的分类：天然地基和人工地基 （浅基础：通常埋置深度小于5m，只需经过简单的挖槽、排水等施工工序就可以建造起来。深基础：基础埋置深度较深，要借助于特殊的施工方法才能建造的。天然地基：不加处理就能满足设计要求、可直接在上面进行修建的天然土层。人工地基：是经过处理后才满足要求的土层） 5.地基与基础设计必须满足三个基本条件:a 强度要求作用于地基上的荷载效应不得超过地基容许承载力 b 变形要求基础沉降不得超过地基变形容许值 c 上部基本结构的其他要求基础应具有足够的强度、刚度和稳定性。 6.地基基础设计包括地基设计和基础设计两部分 7.基础工程特点：隐蔽性复杂性风险性时效性综合性 8.浅基础设计内容：a 基础材料类型的选择 b 基础的平面布置 c 持力层（基础埋深）的选择d确定地基承载力特征值 e 确定基础底面尺寸，按规范要求进行必要的变形和稳定性验算 f 进行基础的结构设计 g 绘制施工图纸 9.刚性基础与柔性基础的比较：刚性基础具有就地取材，造价不高，设计简单，不需要复杂内力分析计算等优点。缺点：强度不高，截面尺寸较大，埋深受限制和载荷较大时难以采用，某些材料的耐久性较差。柔性基础：由于采用的是钢筋混凝土材料，其抗弯和抗剪性能得到极大的提高，可在竖向荷载较大，地基承载力不高，有水平力和力矩等情况下发挥其特点，并能适应基础埋深受限时对截面高度的限制要求。 10.基础的底面到天然地面的距离称为基础的埋置深度，简称埋深，一般用符号d来表示影响因素：工程地质条件场地环境条件建筑物功能与结构条件水文地质条件地基冻融条件11.文克尔地基模型：其基本假设是土介质表面每一点所受的压力强度p(x,y)成正比，而与土和基础界面上其他点完全无关。P(x,y)=ks(x,y)缺陷：a 按照文克尔模型，地基的沉降只发生在基底范围内，与实际不符。B 在同一压力作用下，基床系数k不是常数，不仅与土的性质、类别有关，还与基础底面积的大小，形状以及基础的埋置深度等有关。 12.为保证设计的基础及地基的安全，经济可行，基础工程设计计算的原则有:1）基础底面的压力小于地基承载力容许值2）地基及基础的变形值小于建筑物要求的沉降值3）地基及基础的整体稳定性有足够保证4）基础本身的强度耐久性满足要求- 13.地基基础设计等级：甲级、乙级和丙级。 14.倒梁法：倒梁法认为上部结构是刚性的，各柱之间没有差异沉降，因而可把柱脚视为条形基础的支座，支座间不存在相对竖向位移，基础的绕曲变形不会改变地基压力，并假定基底净反力Pjb呈线性分布，且除柱的竖向集中力外各种荷载作用（包括柱传来的力矩）均为已知，按倒置的普通连续梁计算梁的纵向内力，例如力矩分配法，力法位移法等。用倒梁法求得的支座反力，不等于愿柱作用的竖向荷载。 15. 地基承载力：为满足地基强度和稳定性要求，基础工程设计时，必须控制基础底面上最大压力不超过某一限值，此限值称为地基承载力。其满足的要求：（1）要有一定的安全储备（2）地基变形要满足建筑物限值的要求。 16.上部结构传到基础顶面处的荷载可以分为两种情况：中心荷载和偏心荷载。 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除

高中生物选修3植物细胞工程知识点

高中生物选修3植物细胞工程知识点 1.细胞脱分化：就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去特有的结构和功能而 转变成未分化细胞的过程。 2.愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的成无定形状态的薄壁细胞 团。 3.外植体：用于植物组织培养的离体器官组织或细胞。 4.具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜 能，也就是说，每个细胞都具有全能性的特点。 5.全能性的原理：细胞具有发育成完整个体所必需的全套基因，而不是全部基 因。 6.全能性表达的标志：已分化的细胞形成完整的个体，若只是形成某种组织器 官，则不能体现全能性。 7.全能性的高低比较： （1）受精卵>生殖细胞>体细胞 （2）体细胞:植物细胞>动物细胞 （3）分化程度低的细胞>分化程度高的细胞 （4）幼嫩细胞>衰老细胞 （5）分裂能力强的细胞>分裂能力弱的细胞 8.外植体经过脱分化形成愈伤组织;愈伤组织经过再分化形成芽和根;芽和根进 而形成植株。 9.脱分化过程进行有丝分裂；再分化过程进行有丝分裂的同时也进行分化。 10.植物组织培养：就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、 细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 11.植物细胞杂交：就是将不同的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞， 并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。目的：获得杂种植物体。用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；杂交过程的关键：原生质体间的融合；人工诱导的方法：包括物理法和化学法，物理法包括：离心、振动、电激；化学法包括：聚乙二醇。 12.植物细胞杂交的优点： （1）打破了物种之间的生殖隔离，实现了远源杂交。 （2）扩大了遗传重组的范围。 13.微型繁殖技术：把用于繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型 繁殖技术。 14.人工种子：就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材 料，经过人工薄膜包装得到的种子。 15.作物新品种的培育： （1）单倍体育种（有性生殖）优点：极大地缩短了育种的年限。 （2）突变体的利用优点：能够产生新性状。

细胞工程重点总结

细胞工程 （1）绪论 1．根据研究对象的不同，细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程。 2．克隆羊多莉的诞生证明了动物细胞核具有全能性。 （2）第一章基本技术 1. 培养基基本成分 大量元素培养基的大量元素使用量一般在每升几十毫克到几千克。 ①无机盐类包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素微量元素的用量一般低于10-5-10-7克分子浓度。植物所的 微量元素有Fe、Cu、Zn、B、Mn、Mo、Co ②有机成分：糖、维生素、肌醇、氨基酸、其他 ③植物激素：生长素、细胞分裂素 ④水：不同实验室要求使用不同级别的纯化水 ⑤其它附加成分：琼脂、活性炭、附加复合成分 2. 外植体(explant)：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。 外植体的三种来源：①生长在自然环境下的植物 ②在温室控制环境条件下生长的植物 ③无菌环境下培养的植物 3. 外植体取材总体原则:①根据培养需求选择植物部位 ②多年生植物注意树龄和季节 ③在不影响培养目的的前提下尽可能选择自然繁殖器官作为外 植体 4. 外植体灭菌顺序：外植体→清洗整理→杀菌剂灭菌→无菌水清洗 外植体灭菌后应及时接种培养 5. 外植体培养条件的控制 ①光照光照时间影响外植体再生状态；光照强度因植物类型不同而异；光质 研究报道较少 ②温度适温有利于细胞分裂，而在一定范围内降低培养温度则使细胞的质量 增加。 ③pH 通常使用的pH值范围是5.5—6.5。pH在4.0以下或者7.0以上培养 物就不能正常生长。由于外植体的吸收，引起培养过程中的pH变化； 高压灭菌引起pH值变化 ④气体生长量与气体含量关系呈现倒“V”形，折点处的气体含量对应最大生 长量

专题二植物细胞工程知识点

专题二 细胞工程知识点梳理填空 概念：应用 和 的原理和方法，通过 或 上的操作， 按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 的一门综合科学技术。 分类：根据操作对象不同，可分为 、 。 一、植物细胞工程 理论基础（原理） 。 1、概念：具有某种生物 的任何一个细胞，都具有发育成 的潜能。 全能性表达的难易程度： ＞ 生殖细胞＞ ； ＞ 动物细胞； 2．在理论上，生物的任何一个细胞都具有 ，但在生物的生 长发育过程中，细胞并不表现 ，而是分化成各种 。 3．特定的___________条件下，细胞中的基因会有 地表达出各种 ，分化形成不 同的细胞，从而构成生物体的不同 。 （一）植物组织培养技术 植物组织培养：在 和 的条件下，将 的植物器官、组织、细胞， 培养在人工配制的 上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完 整植株。 1.操作过程： 外植体――→①A ――→② B ―→植物体 图中① ，② ，A 表示 ，B 表示 。 2．细胞脱分化：已 的细胞经过 后，失去其特有的 而转变成未 分化细胞的过程。 3.胡萝卜的组织培养实验 1）实验原理 植物体的根、茎、叶细胞都具有 ，在一定的 和 等条件下，可以脱分化 形成 。将愈伤组织转接到含有不同 成分的培养基上，就可以诱导其再分化 生成胚状体或丛芽，进而发育成 。证明了分化的植物细胞仍具

有。 2）实验步骤 ①将用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手。 ②在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用消毒30s后，立即用清洗2～3次，再用处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次。 ③用的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。然后，在瓷砖上，用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成1 cm厚的横切片，再选取有的部位，切取1 cm3左右的小块。 ④将接种到培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。然后，在培养瓶上贴上标签，写明材料名称、接种日期和小组号。 ⑤将接种后的胡萝卜组织块，23~26℃恒温条件下培养。4d后，检查培养材料的污染情况；14d后，观察愈伤组织的生长状况。然后，在恒温箱中继续培养。在培养过程中，注意定期观察和记录愈伤组织的生长情况。 ⑥培养一段时间后，将生长良好的转接到培养基上，培养一段时间后，胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出。然后将试管苗移栽到大田，培养成。※注意事项：培养基的物理性质是，由成分、成分、、四部分组成。 生长素与细胞分裂素的协同调控作用在组织培养中非常重要，人们常把它们称为。例如，当生长素与细胞分裂素的比例适中，且生长素含量细胞分裂素素时，主要诱导植物组织脱分化和的形成；而当细胞分裂素的效应生长素时，则主要诱导植物组织和的形成。 （二）植物体细胞杂交技术 1．概念：不同种植物的，在一定条件下融合成，并把杂种细胞培育成新的的技术。生殖方式为。 2．过程 离体的细胞-→不同细胞-→融合→细胞→杂种植株。 3．目前最常用的去细胞壁的方法是，也就是在温和条件下用酶、酶去除植物细胞的细胞壁，获得具有活力的___________。利用酶作用的性特点。 诱导植物体细胞原生质体融合，物理方法有：、、等促使原生质体融合。化学法是用( )作为诱导剂来诱导融合。完成融合的标志 是。