梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断
梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。
一、显微镜检查法
（一）暗视野显微镜检查
【基本原理】
梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
【仪器材料】
1．暗视野显微镜。
2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。
【标本采集】
1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
【操作步骤】
1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。
2．聚光：将标本玻片臵载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。
3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。
【结果判读】
梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。
【结果报告】
1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。
【临床意义】
1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。
2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。
3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。
【注意事项】
1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。
2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。
3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。
（二）镀银染色检查
【基本原理】
梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。
【仪器材料】
1．显微镜。
2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。
【标本采集】
1. 皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液涂片。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上。
【操作步骤】
1．涂片干燥：将标本涂于干净载玻片作一薄片，于空气中自然干燥。
2．固定：用固定液将涂片固定2～3分钟。
3．洗涤：用无水乙醇洗涤玻片上的油污。
4．媒染：加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
5．银染：水洗，加银染液于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
6．镜检：水洗、待干，用油镜检查。
【结果判读】
显微镜下见到染成棕褐色的梅毒螺旋体为阳性结果。
【结果报告】
1．阳性：见到染成棕褐色梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。
【临床意义】
同暗视野显微镜检查法。
【注意事项】
应注意与其他螺旋体加以鉴别。
二、血清学检测法
（一）非梅毒螺旋体抗原血清试验
非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括性病研究实验室（VDRL）试验、快速血浆反应素（RPR）环状卡片试验、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等。
VDRL试验
【基本原理】
梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体（反应素），与一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物抗原反应，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。
【仪器材料】
1. 水平旋转仪、显微镜。
2. 试剂盒：VDRL抗原原液、VDRL缓冲液、抗原滴管及针头、带直径14mm漆圈的玻璃反应板、VDRL试验结果参照图片。
3. 30mL平底玻璃小瓶、生理盐水。
【标本采集】
1.血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。也可采用冻存的血清。
2.脑脊液：采用腰椎穿刺术获得，应由相关专业人员操作。
【操作步骤】
1.VDRL抗原配制。
2.VDRL玻片定性试验
（1）灭活：血清标本56℃灭活30分钟。
（2）吸样：吸取0.05mL血清放入反应板圈中，将血清涂布到整个圈内。
（3）加抗原：用标准针头加入1滴抗原。
（4）反应：将反应板臵水平旋转仪上旋转4分钟，…(180〒5)次/分钟?，立即臵低倍显微镜下观察。
3.VDRL定量试验
（1）加稀释液：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度）。
（2）样本稀释：吸取0.05mL样本与各圈中盐水作系列稀释并涂布整个圈内。
（3）以下步骤同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】
凝集反应强度分级：
3＋～ 4＋：大的或中等大小的絮状物，液体清亮
2＋：絮状物较小，液体较清亮
1＋：絮状物较小，均匀分布，液体混浊
〒：抗原复合物颗粒稍粗
－：抗原颗粒均匀、细小
【结果报告】
1．定性试验：
（1）阳性：镜下可见1＋～4＋的絮状凝集物。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：
滴度：镜下可见絮状凝集物的血清最高稀释倍数。
【临床意义】
对一期、二期、潜伏期和晚期梅毒患者的敏感性分别为78%、100%、96%和71%。脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义。
【注意事项】
1．VDRL用抗原需当天配制。
2．试验反应完毕，应立即观察结果。
RPR试验
【基本原理】
RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。该法在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭颗粒，与待检血清（浆）中的反应素结合，形成肉眼可见的黑色絮状物。
【仪器材料】
1．水平旋转仪。
2．RPR试剂盒：RPR抗原、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头。
【标本采集】
1．血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。也可采用冻存的血清。
2．血浆：各种抗凝剂制备的血浆。
【操作步骤】
1．定性试验
（1）加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内。
（2）加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头[每毫升（60〒1）滴]加1滴抗原。
（3）反应：将卡片臵水平旋转仪旋转8分钟[（100〒5）转/分钟]。立即在亮光下观察结果。
2．定量试验
（1）稀释液准备：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。
（2）加样：吸取0.05mL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
（3）同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】
凝集反应强度分级：
3＋～ 4＋：圆圈内出现中到大的黑色絮状物，液体清亮
2＋：圆圈内出现小到中的黑色絮状物，液体较清亮
1＋：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体混浊
－：圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或均匀分散
【结果报告】
1．定性试验：
（1）阳性：出现1＋～4＋强度的凝集反应。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：
滴度：出现凝集反应的血清最高稀释倍数。
【临床意义】
1．RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查。
2．对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为86%、100%和98%。
【注意事项】
试验应在23～29℃环境中进行。
?TRUST试验
TRUST试验是用甲苯胺红颗粒代替RPR试验中的碳颗粒作为指示物，所以阳性结果为红色絮状物。其基本原理、仪器材料、标本采集、操作步骤、结果判读、结果报告、临床意义及注意事项等与RPR试验基本相同。
（二）梅毒螺旋体抗原血清试验
梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应，用以检测梅毒抗体，常用的方法有梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB）等方法。
?TPPA试验
【基本原理】
TPPA试验是用超声裂解梅毒螺旋体制备的抗原，致敏明胶粒子，其致敏粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。
【仪器材料】
1. 微量震荡器。
2. 试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3．U型反应板。
【标本采集】
同RPR试验。
【操作步骤】
1．试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。
2．加稀释液：每份样本做4孔，加B液至反应孔内，第1孔100μL，第2～4孔各25μL。
3．样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后取25μL至第2孔，连续倍比稀释至第4孔，最后1孔混匀后弃去25μL。
4．加对照液：第3孔加D液25μL，第4孔加C液25μL。
5．混合：将反应板臵震荡器震荡30秒。
6．反应：臵湿盒内，孵育2小时后，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】
观察凝集反应强度，分级如下：
4＋：粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠
3＋：粒子光滑覆盖大部分孔底
2＋：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环
1＋：粒子光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显细胞环
〒：粒子沉集孔底，中央形成一小点
－：粒子紧密沉积孔底中央
【结果报告】
1．阳性：未致敏粒子不出现凝集（第3孔），血清1︰80以上稀释与致敏粒子产生1＋～4＋凝集反应。
2. 阴性：未致敏粒子和致敏粒子均不产生凝集反应。
【临床意义】
1. TPPA可作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。
2．梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA试验仍可阳性，故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。
3．TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
【注意事项】
1. 试验结果为“可疑”时，应选用其他的试验方法进行复验。
2. 如未致敏粒子出现凝集反应，样本进行吸收后再进行试验，或改用其他试验方法。
TPHA试验
【基本原理】
TPHA试验用超声裂解的梅毒螺旋体菌体为抗原，致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，与抗梅毒螺旋体抗体反应，产生肉眼可见的抗原抗体凝集。
【仪器材料】
1. 微量震荡器。
2．TPHA试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3. U型反应板。
【标本采集】
同RPR试验。
【操作步骤】
1．试剂准备：试验前试剂恢复到15～25℃。
2．加稀释液：加B液至反应板，第1孔25μL，第2孔100μL，第3～5孔各加25μL。
3．样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后取25μL至第2孔，混匀后取25μL至第3孔，混匀后弃去25μL，再从第2孔取25μL至第4孔，混匀后取25μL 至第5孔，混匀后弃去25μL。
4．加对照液：第3孔加D液（未致敏细胞）75μL，第4、5孔加C液（致敏细胞）各75μL 。
5．混合：将反应板臵震荡器震荡30秒。
6．反应：臵湿盒内，15～25℃孵育4小时，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】
同TPPA试验。
【结果报告】
同TPPA试验。
【临床意义】
同TPPA试验。
【注意事项】
有些采用禽类红细胞为载体的TPHA试验，血清不用吸收，可直接进行试验。
?FTA-ABS试验
【基本原理】
以完整的梅毒螺旋体作为抗原，与经吸收剂吸收的梅毒血清抗体反应形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FITC）标记的抗人免疫球蛋白，形成带有荧光的抗原抗体复合物，在荧光显微镜下螺旋体显出苹果绿色荧光。
【仪器材料】
1．荧光显微镜。
2．试剂盒：梅毒螺旋体抗原片、吸收剂、荧光素标记抗体、阳性对照血清、PBS 缓冲液、固定剂。
3.血清稀释板。
【标本采集】
同VDRL试验。
【操作步骤】
1. 血清灭活：将血清标本于56℃灭活30分钟，备用。
2. 血清稀释：待检血清用吸收剂1：5稀释，阳性血清及阴性血清分别用PBS缓冲液和吸收剂1:5稀释。臵37℃湿盒内，30分钟。
3. 加样：每次试验必须设PBS缓冲液、吸收剂、PBS液1︰5稀释阳性和阴性血清及吸收剂1：5稀释阳性和阴性血清共6个对照涂片。每个涂片分别加入10μL稀释后的血清或缓冲液，臵37℃湿盒内，30分钟。
4. 洗涤：用PBS- Tween-80液洗玻片2次，每次5分钟，最后用蒸馏水洗一次，冷风干燥。
5. 加荧光抗体：每个涂片加10μL按要求稀释的荧光抗体,臵37℃湿盒内30分钟。
6. 洗涤：同步骤4。
7. 封片镜检：用固定剂封片，读片。
【结果判读】
1. 阳性对照：无论PBS缓冲液还是吸附剂稀释，荧光强度应相同。
2. 阴性对照和空白对照：不产生荧光。
【结果报告】
1. 阳性：荧光镜下见到不同程度发绿色荧光的螺旋体。
2. 阴性：无荧光或密螺旋体微显淡绿色。
【临床意义】
1.FTA-ABS是梅毒螺旋体抗原血清学试验的“金标准”。
2．对未经治疗的一期、二期、潜伏梅毒和晚期梅毒患者的敏感性分别为84%、100%、100%和96%，特异性均可达97%。
3. 其他同TPPA试验。
【注意事项】
1. 抗原片每次洗涤要干净，避免其他杂质影响判读结果。
2. 试验需有高质量荧光显微镜和技术熟练的操作人员。
?TP-ELISA试验
【基本原理】
TP-ELISA试验是用包被在固相板条上经超声裂解、纯化处理或重组的梅毒螺旋体抗原，与待检血清中的梅毒特异性抗体结合，再与酶标记的抗人免疫球蛋白单克隆抗体反应，形成抗原抗体复合物而使底物显色。
【仪器材料】
1. 酶标仪、洗板机。
2．试剂盒组成：96孔反应板、标本稀释液、洗涤液、酶结合物、底物液、终止液、阳性对照、阴性对照。
【标本采集】
同RPR试验
【操作步骤】
1.加稀释液：取标本稀释液加到反应板孔内。
2.孵育：分别加入阳性、阴性对照和待检血清，臵37℃孵育一定时间, 洗板。
3.加酶结合物：加酶结合物，臵37℃孵育一定时间, 洗板。
4.加显色剂：加底物，37℃避光孵育。
5.终止反应：加终止液，酶标仪测OD（光密度）值。
【结果判读】
1．每次试验的阳性、阴性对照应在规定的数值范围内
2．根据阳性、阴性OD值设定阈值（cut-off值）。
【结果报告】
1．阳性：标本OD值大于或等于cut-off值。
2．阴性：标本OD值小于cut-off值。
【临床意义】
（1）适用于流行病学调查或大样本量标本的检测。
（2）ELISA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)结果进行诊断。
【注意事项】
1.不同批号试剂不能混用。
2.温度和时间必须严格控制。
■ TP-WB试验
【基本原理】
用超声粉碎的梅毒螺旋体或梅毒螺旋体重组的不同抗原，印迹至硝酸纤维膜条上。通过酶联反应，可检测梅毒血清中多种特异抗原成分的抗体。
【仪器材料】
1. 水平摇床。
2. 试剂盒:硝酸纤维膜条、酶标抗体、阳性质控血清、阴性质控血清、底物液、终止液、标准阳性反应带结果参比图谱。
【标本采集】
同RPR试验
【操作步骤】
1．反应：每反应槽加2.0mL工作缓冲液，浸湿膜条5分钟，加入0.02mL待检样本，臵水平摇床上(50转/分)，18～25℃反应45分钟。
2．洗涤：弃去反应槽中液体，加入 2.0mL工作缓冲液，臵水平摇床洗涤3次，每次5分钟。
3．加酶结合物：加入酶标抗体，臵水平摇床反应30分钟。
4．洗涤：同步骤2。
5．显色：每槽加2.0mL底物，臵水平摇床上反应8～10分钟。
6．终止: 待阳性对照带显色清晰，加入1.0 mL终止剂2分钟后弃去槽中液体，用蒸馏水洗2次，用镊子取出反应条，臵滤纸上。
【结果判读】
1．根据阳性结果参比图谱判定结果。
2. 将试验的硝酸纤维膜条上端标记线与参比标记线对齐。
3．观察45KD、17KD及15.5KD带区显色带。
【结果报告】
1．阳性： 45KD、17KD及15.5KD带区均出现显色带。
2．阴性： 45KD、17KD及15.5KD三个条带均未显色。
【临床意义】
1．同TPPA试验
2．可以用于检测IgM或IgG抗体。
【注意事项】
1．洗涤要充分，否则易造成试验膜条带背景的颜色偏深。
2．硝酸纤维膜条有对照反应条带，在试验中应显示，如未显示，则试验无效。
3．当45KD、17KD及15.5KD中只有一个或两个条带出现明显色带为可疑结果，需重新试验。
快速免疫层析法
【基本原理】
利用免疫层析原理，采用吸附有显色标记的梅毒螺旋体重组抗原的滤纸条，快速检测标本中的梅毒螺旋体抗体。
【仪器材料】
试剂盒：测试板、一次性滴管。
【标本采集】
同RPR试验，可用全血。
【操作步骤】
1．加样：用一次性滴管滴加一定量标本于加样孔中。
2．加缓冲液：立即加入一定量的缓冲液。
3．观察结果：规定时间内判读结果。
【结果判读】
1. 观察质控条带,判断试验有效性，如没有出现质控条带，说明试验无效，需重复试验。
2．观察标本条带。
【结果报告】
1．阳性: 出现标本条带和质控条带。
2．阴性：无标本条带，出现质控条带。
【临床意义】
1．可以用于标本的快速筛查。
2．快速检测阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)结果进行诊断。
【注意事项】
1．试剂盒从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后方可使用。
2．本试验方法存在一定的假阳性和假阴性。
三、其它方法
（一）梅毒IgM抗体的检测
与其它细菌及病毒感染一样，在梅毒中特异性IgM抗体的合成是第一次感染后的体液免疫应答。在梅毒中螺旋体IgM抗体出现在早期梅毒患者中，在潜伏期及晚期患者也能发现。在自发痊愈的患者中IgM水平下降的速度比治疗痊愈的患者慢。IgM分子大使其不能通过胎盘屏障及完整无损的血脑屏障。因此若在新生儿血中检测到IgM抗体是儿童产前感染的诊断标志；如在患者的完整无损的血脑屏障的脑脊液（CSF）中出现，则表示患有活动性神经梅毒。在最近未接受治疗的患者血液中或CSF 中出现抗梅毒IgM抗体均表示需要治疗。
测定IgM抗体方法的基本原理是采用分离柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分离过程中的沉降速度不同，将IgM和IgG分别收集，再进行FTA-ABS等试验。亦可采用抗IgM单克隆抗体的酶标法、蛋白质印迹法等进行检测。目前测定IgM抗体的方法的敏感性还很不理想，但是检查到IgM抗体则有助于对以下病例中的试验结果更可靠的解释：先天性梅毒、早期一期梅毒、晚期梅毒、非梅毒螺旋体试验的血清阳转前的早期感染患者的判愈试验及有梅毒史或其它螺旋体感染史患者的再感染。
（二）胎传梅毒(或先天梅毒)的实验室诊断
具有下列实验室四个指标之一，可诊断为胎传梅毒(或先天梅毒)：①暗视野检查梅毒螺旋体阳性；②患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升；③患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母亲高4倍（低于或等于该值并不排除胎传梅毒）；④患儿检出19S-IgM抗体。
（三）神经梅毒的实验室诊断
1．神经梅毒的实验室诊断标准包括：①梅毒血清学检查阳性；②脑脊液细胞计数或蛋白测定结果异常；③脑脊液VDRL试验阳性。
2．脑脊液VDRL试验是神经梅毒的标准试验，阳性结果可诊断为神经梅毒，但该试验存在假阴性。
3．脑脊液的FTA－ABS试验阴性可排除神经梅毒，但特异性不高，可能产生假阳性。
4．脑脊液检查内容
（1）细胞计数：正常时白细胞数应小于3〓106/L，若白细胞数大于10〓106/L，提示中枢神经系统有炎症现象。
（2）蛋白质量测定：总蛋白质量正常为0.1～0.4g/L，神经梅毒可稍升高，或高达1.0～2.0g/L。
梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 （一）暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1．暗视野显微镜。 2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2．聚光：将标本玻片臵载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。 2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。 2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。 （二）镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1．显微镜。 2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】
(推荐)梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 （一）一期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA 或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。 （二）二期梅毒的诊断标准 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。 3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，
未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现：病期2年以上。有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 （四）隐性梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期，病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者阳性，滴度
梅毒实验室测试题
梅毒实验室测试题 一、单选题 梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法: 1 、 A 革兰染色 2 、 3、 4、 5、 6、 7、 9、 10、 11、 12、 C 镀银染色 非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR TPPA 只能检测到: A IgA D FTA-ABS B igG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本: A 皮肤溃疡组织液 C 血液 D IgM RPR 检测不能采用下列标本: A 血清 C 全血 ELISA 检测不能采用下列标本: A 血清 C 全血 梅毒螺旋体病原学检测方法不包括: A 暗视野显微镜检查 C 培养基培养 RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的转速是: A （ 100 土 2）转 / 分 C （ 120± 2）转 / 分 RPR/TRUST 佥测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25 ± 2mm C 20 ± 2mm B 18 D 30 RPR/TRUS 试验在水平旋转仪上旋转反应时间 5分钟 10分钟 D 12 TRUST 式验时每个反应孔滴加的抗原量 是: B 30 D 17 前带现象主要出现在下列哪一种方法中: 美兰染色 伊红染色 羊水 脑脊液 血浆 脑脊液 血浆 脑脊液 镀银染色 核酸检测 (100 ± 10)转 / 分 (120± 10)转 / 分 ± 2mm ± 2mm 分钟 分钟 (11 (11
A ELISA C TPPA D FTA-ABS RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50 卩l B 30 C25 卩 l D 17 下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST TPPA 式验结果判读孔的血清稀释倍数是： A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 ELISA 法采用的抗原是： A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D TPPA 法采用的抗原是： A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D RPR 法采用的抗原是： A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D 梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是： A 一级 B C 三级 D 室间质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B C 检测结果准确性 D 室内质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B C 检测结果准确性 D RPF 只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 D IgM 特异性梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法： A TRUST 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 完整的梅毒螺旋体 类脂质 完整的梅毒螺旋体 类脂质 完整的梅毒螺旋体 类脂质 二级 四级 检测结果精确性 检测方法可行性 检测结果精确性 检测方法可行性 B RPR B ELISA
梅毒诊断标准：WS 273
WS 273-2007梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒 Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称?为quot;前带现象"。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。 4.1.3.2 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应
梅毒实验室测试题.docx
梅毒实验室测试题 一、单选题 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法： A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本： A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本： A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是： A （100±2）转/分B（100±10）转/分 C （120±2）转/分 D （120±10）转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是： A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm
10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间 A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中： A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是： A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、ELISA法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、TPPA法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、RPR法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是：
梅毒的诊断标准是什么
梅毒的诊断标准是什么? 梅毒病程长，症状复杂，与很多非梅毒性疾病的表现有相似之处，因此必须结合病史、临床表现及实验室检查结果，进行综合分析，必要时还须进行家属调查，追踪观察和试验治疗，以便作出正确诊断。 （一）病史有无婚外性乱史（包括时间、性伴侣性病情况）。现病史及既往曾否患过硬下疳、二期、三期梅毒，或患过其它性传播疾病。配偶有无梅毒及性传播病史。有无早产、死产史、疑为先天梅毒应询问其父母的性病史及兄弟姊妹的健康状况。是否接受过抗梅毒治疗（药物及剂量）。 （二）体检应作系统全面检查，早期应注意检查皮肤、粘膜，特别是掌跖、阴部、肛门等处。晚期除注意皮肤粘膜外，还应注意心血管和神经系统。 （三）实验室检查 1．梅毒螺旋体检查适用于早期梅毒皮肤粘膜损害，如硬下疳、湿丘疹、扁平湿疣等。其中硬下疳尤为重要，因梅毒血清反应在硬下疳出现2～3周始呈阳性。 （1）暗视野检查：为最常应用的螺旋体检查方法，其原理为在装有暗视野集光器的显微镜下，视野中无直接光线，光只能从四周透入，当接物镜下无物体存在时，视野始终保持黑色，当有物体时，则从四周透人的光线射到物体上，物体将光线折射在目镜方向而发生光亮，从而观察到螺旋体的形态及运动特征。 （2）直接荧光抗体检查法：取患者皮损疮面血清，干燥后加兔抗人梅毒螺旋体荧光抗体，其原理为疮面血清中梅毒螺旋体与兔抗人梅毒螺旋体发生特异性结合，在荧光显微镜下观察，可见梅毒螺旋体呈亮绿色荧光，其它种类螺旋体不发光，此法特异性高，也可用于口腔梅毒损害的检查，但缺点为敏感性差。 （3）涂片染色检查法：可用镀银染色法，螺旋体染成棕黑色，背景为黄色。 2．梅毒血清学试验为诊断梅毒必需的检查方法，对潜伏梅毒，患者血清学的诊断尤为重要。梅毒螺旋体感染人体后，可产生两种抗体。非特异性的抗心脂质抗体，可用牛心脂质检测出，称非梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体蛋白+人脂质抗原一抗心脂质抗原一抗心脂质抗体十心脂质抗原一非螺旋体抗原梅毒血清反应）；抗梅毒螺旋体抗体可用梅毒螺旋体（活的或死的梅毒螺旋体或其成分）检测出来，称梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体特异抗原-一刺激机体一抗梅毒螺旋体抗体十梅毒螺旋体抗原一螺旋体抗原梅毒血
梅毒实验室测试题
(11 梅毒实验室测试题 一、单选题 梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B C 镀银染色 D 非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS TPPA 只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+lgA 等混合抗体 D IgM 梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B C 血液 D RPR 检测不能采用下列标本： A 血清 B C 全血 D ELISA 检测不能采用下列标本： A 血清 B C 全血 D 梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B C 培养基培养 D RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的转速是： A ( 100± 2)转 / 分 B C ( 120± 2)转 / 分 D RPR/TRUST 佥测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25 ± 2mm B 18 C 20 ± 2mm RPR/TRUS 试验在水平旋转仪上旋转反应时间 A 5分钟 B 8 C 10分钟 D 12 TRUST 式验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50 卩 l B 30 C25 卩l D17 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8 9、 10、 11、 12、 美兰染色 伊红染色 羊水 脑脊液 血浆 脑脊液 血浆 脑脊液 镀银染色 核酸检测 (100 ± 10)转 / 分 (120± 10)转 / 分 ± 2mm ± 2mm 分钟 分钟 D 30
前带现象主要出现在下列哪一种方法中: (11
A ELISA B RPR A TRUST B ELISA C TPPA D FTA-ABS 13、 RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50 卩 l B 30 3 l C 25 卩 l D 17 3 l 14、 下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、 TPPA 式验结果判读孔的血清稀释倍数是： A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、 ELISA 法米用的抗原是: A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、 TPPA 法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、 RPR 法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、 梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是： A 一级 B 二级 C 三级 D 四级 20、 室间质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 21、 室内质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 22、 RPF 只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 D IgM 23、 特异性梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法：
梅毒诊断标准
梅毒诊断标准 1 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗、疾病预防控制机构及其工作人员对梅毒的诊断和报 告。 2 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒syphilis 梅毒是苍白螺旋体( Treponema pallidum )（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例 不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3 3 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL venereal disease research laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验）
FTA-ABS fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ELISA enzyme-linked immuno-sorbent assay 酶联免疫吸附试验 4 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为；或性伴有梅毒感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2周～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭 圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体(见附录A)。 4.1.3.2
梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 (一)一期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查:硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性与TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查)或结果为阴性的为疑似病例。 (二)二期梅毒的诊断标准 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现:病期2年内,多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损,尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹,也可出现其它损害(关节、眼、内脏等)。 3、实验室检查:皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未
做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)的为疑似病例。 (三)三期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现:病期2年以上。有如下特征中的任一项表现,包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿,上腭、鼻中隔等穿孔性损害;骨、眼损害,其它内脏损害;神经梅毒;心血管梅毒。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性;或脑脊液检查:WBC≥10×106/L,蛋白>500mg/L,并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 (四)隐性梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期,病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性(无梅毒史者阳性,
WS-273梅毒诊断标准
WS 273-2007 梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，
梅毒实验室检测汇总
张国军（首都医科大学附属北京天坛医院实验诊断中心） 写在课前的话 梅毒是一种慢性、系统性疾病。学员通过本课件的学习，要熟悉梅毒的定义、传播途径及临床分期；掌握不同时期梅毒的治疗方法；掌握梅毒实验室检测方法和梅毒免疫学反应；掌握梅毒血清学实验的原理、特点及各自优缺点；掌握先天性梅毒和神经梅毒的诊断方法。 一．梅毒概况及临床分期 梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病。人体受感染后，螺旋 体很快播散到全身，可侵犯全身各组织与器官，临床表现多样，且时隐时显，病程较长。梅毒早期主要侵犯皮肤及粘膜，晚期除侵犯皮肤、粘膜外，还可侵犯心脏血管系 统及中枢神经系统等全身各个系统；另一方面，梅毒又可多年无症状而呈潜伏状态。 主要传播途径:性接触传染是最主要的传播方式；其次是垂直传播。随着梅毒在人 群中流行率升高，母婴垂直传播发生率日益上升，并伴随着包括诊断、治疗、阻断等 在内的一系列问题；第三，输血传播。输血传播曾经是梅毒重要的传播方式。但随着 血液筛查的广泛开展及输血的减少，梅毒经输血传播已很少发生。但近年来，由于艾 滋病的流行，梅毒仍然是输血安全的威胁。 临床分期：一期梅毒：主要表现为单个、无痛性的硬下疳，通常在感染梅毒螺旋 体后3 - 4 周出现；二期梅毒：一期梅毒不经治疗，梅毒螺旋体在几周到几个月后会 播散到血液中，引起二期梅毒。二期梅毒的临床表现多样，常见发热、淋巴结病、弥 漫性皮疹、生殖道或会阴湿疣等。一、二期梅毒统称为早期梅毒； 三期或晚期梅毒：在最初感染的数年至十数年后发生，可累及任何器官，常见梅 毒瘤性梅毒、心血管梅毒以及神经梅毒。隐性梅毒：无症状但梅毒血清学试验呈阳性。 分为早期隐性梅毒（病程一般在一年以内）和晚期隐性梅毒（病程一般在一年以上）。 二．梅毒的治疗
梅毒诊断标准(WS273—2007)修订版
WS 273--2007梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。 4.1.3.2 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应于感染4周后复查（见附录A）。 4.1.3.3 梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性（见附录A）。 4.2 二期梅毒 4.2.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史，或有输血史（早期梅毒病人为供血者）。 4.2.2 临床表现： 可有一期梅毒史，病期在2年以内。 4.2.2.1 皮损呈多形性，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮损、毛囊疹及脓疱疹等，常泛发对称。掌跖部易见暗红斑及脱屑性斑丘疹。外阴及肛周皮损多为湿丘疹及扁平湿疣。皮损
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术 市疾控中心白志永 艾滋病抗体检测及样品保存、运送 一、HIV抗体检测筛查方法 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT） （建议配备合格的快速检测试剂，灰区。） 二、筛查程序 初筛和复检流程（图1） 样品 筛查试剂 初筛试验 阳性反应阴性反应 原有试剂+另一不同原理 （或厂家）试剂或另外两种 不同原理（或厂家）试剂 复检试验 均阳性反应一阴一阳均阴性反应 确证试验报告阴性 图1 HIV抗体筛查检测流程 三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例） HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。
四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程 1、适用围 HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 2、检测程序 图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程 五、样品的保存、运送 1、样品的保存 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。 2、样品的运送（例） （1）应符合生物安全要求； (2)应采用三层容器对样品进行包装。
第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。 (3) 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。 质量控制 一、艾滋病抗体检测的统计学室质量控制 1、试剂盒部对照 即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。用于判断实验的有效性，不能作为室质控品使用，部对照结果无效，必须重新试验。 2、室质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室质控品，其结果无效，必须重新试验。
孕产妇梅毒诊断治疗标准
孕产妇梅毒诊断标准 注：梅毒的实验室血清学检测方法有梅毒特异抗体试验（如ELISA 或TPPA或胶体金）和梅毒非特异抗体试验（如RPR或TRUST）两大类。采用其中一类试验对孕产妇进行梅毒筛查，对筛查结果阳性者，需用另一类试验进行复检，确定其是否为梅毒感染。 梅毒感染孕产妇治疗及所生儿童治疗方案
一、梅毒感染孕产妇治疗方案 （一）推荐方案 苄星青霉素240万单位，分两侧臀部肌内注射，每周1次，共3次。（二）替代方案 1.若没有青霉素、可用头孢曲松，1克/日，肌内注射或静脉给药，连续10天； 2.青霉素过敏者：可用红霉素治疗（禁用四环素、多西环素），红霉素500mg,每日4次，口服，连服15天。 （三）疗程：对于孕早期发现的梅毒感染孕妇，应在孕早期与孕晚期各提供1个疗程的抗梅毒治疗；对于在孕中、晚期发现的感染孕产妇，应立即给予2个疗程的抗梅毒治疗，2个治疗疗程之间需间隔4周以上（最少间隔2周），第2个疗程应在孕晚期进行。对于临产时发现的梅毒感染产妇也应立即给予治疗。在孕妇治疗梅毒期间应每月复查一次RPR或TRUST滴度，判断疗效，若发现其再次感染或复发，应立即再开始一个疗程的治疗。 二、梅毒感染母亲所生新生儿的预防性治疗方案 出生后应用苄星青霉素G,5万单位/公斤体重，分双臀肌肉注射。对孕期未接受规范治疗的孕产妇或出生时梅毒螺旋体抗体试验和非梅毒螺旋体抗体试验均阳性，但后者滴度不高于母亲分娩前滴度的4倍和没有临床表现的婴儿进行预防性治疗。 三、先天梅毒患儿的治疗 （一）脑脊液正常者 苄星青霉素G，5万单位/公斤，1次注射（分两侧臀肌）。（二）脑脊液异常者 水剂青霉素G，每日5万单位/公斤，分2次静脉滴注，连续10-14天；或普鲁卡因青霉素G，每日5万单位/公斤，肌注，连续10-14天。如无条件检查脑脊液者，可按脑脊液异常者治疗。
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术
艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术岳阳市疾控中心白志永 艾滋病抗体检测及样品保存、运送 一、HIV抗体检测筛查方法 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT） （建议配备合格的快速检测试剂，灰区。） 二、筛查程序 初筛和复检流程（图1） 图1 HIV抗体筛查检测流程 三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例） HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。
四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程 1、适用范围 HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现H IV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 2、检测程序 图4 艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程 五、样品的保存、运送 1、样品的保存 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。 2、样品的运送（例） （1）应符合生物安全要求； (2)应采用三层容器对样品进行包装。
第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。 (3)用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。 质量控制 一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制 1、试剂盒内部对照 即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。 2、室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。
梅毒的实验室诊断
梅毒的实验室诊断 引言：梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(TP)感染所引起的一种慢性全身性性传播疾病，在中国，梅毒在大约50年前已经基本被消灭[1]。同其他国家一样，近年来中国梅毒螺旋体感染的发病率呈逐年上升趋势，是目前中国主要的性传播疾病之一。[2]。早期主要表现为皮肤黏膜损伤，晚期将累及心血管中枢神经骨骼及眼部等重要脏器。目前为了控制梅毒的医院感染，现已规定凡是手术、输血( 供、受血者) 及各种创伤性检查的患者，均进行梅毒螺旋体的相关血清学检查。[3] 一，梅毒螺旋体 梅毒的病原体为梅毒螺旋体苍白密螺旋体苍白亚种，属于螺旋体体目、螺旋体科、密螺旋体属。本属包括４种人的病原体和至少６种对人不致病的密螺旋体［4］。其形态呈柔软纤细的螺旋状，体长６～２０μｍ，宽０．１５～０．２５μｍ，螺旋有８～２０个，运动特征为弯曲移动、绕轴转动和前后伸缩运动［5］。其外膜厚４６ｎｍ，具有抗原性，抗外膜抗体在补体参与的条件下能杀灭梅毒螺旋体或使梅毒螺旋体制动。梅毒螺旋体抗原还包括特异性耐热的多糖抗原（多糖－ＲＮＡ复合物）、特异性不耐热蛋白质、非特异性心磷脂抗原和类脂抗原。梅毒的诊断要依据患者有无疾病接触史、实验室结果、症状和体征等综合判断。 二、梅毒流行病学 据世界卫生组织估测，全世界每年新发梅毒感染者大约有
1200万。近年来，在淋病等性病的发病率有所下降的情况下，各期各类梅毒在许多发达和发展中国家出现不断上升的趋势，甚至在部分人群中发生暴发现象，其中特别是男性同性性行为者。大部分发生在那些缺少有效检测手段的国家和地区。在发展中国家，孕妇感染梅毒是造成不良妊娠的主要原因，其中大约30%为死胎，30%左右为先天性梅毒[3]。近年来许多国家，特别是发展中国家，先天梅毒的报告发病率不断上升，是不容忽视的公共卫生问题。 近年来，世界各地梅毒发病率呈上升趋势，我国梅毒发患者数也快速增长，据报道，２０１０年全国报告梅毒病例３５８５３４例，２０１０年发病率２６．８６／１０万，比２００９年增加１７．０２％，居全国乙类传染病的第３位。本病危害大，可侵犯皮肤黏膜、心血管、神经、骨骼等造成多系统损害，也可使妊娠期妇女发生流产、死胎和分娩先天梅毒儿。在性传播疾病中，梅毒致死性仅次于艾滋病，其与艾滋病的传播途径相似，同时，梅毒作为一种溃疡性性病，可大大增加感染ＨＩＶ的风险，有报道称生殖器溃疡患者较健康人感染ＨＩＶ的危险性增加４～５倍［１］，因此，梅毒的流行在客观上促进了ＨＩＶ的传播，控制梅毒等相关的生殖器溃疡疾病，能有效控制ＨＩＶ的传播和艾滋病的发生。目前，国内外学者也越来越重视梅毒螺旋体的研究。二，梅毒的检测方法 梅毒的实验室检查包括病原学检查、用聚合酶链反应ＰＣＲ检测
梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断 梅毒得实验室诊断方法主要有显微镜检查法与血清学检测法。 一、显微镜检查法 (一)暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损得渗出液涂片,以及淋巴结穿刺液涂片等,在暗视野显微镜下,光线从聚光器得边缘斜射到涂片上得梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据其特殊形态与运动方式进行检测。 【仪器材料】 1.暗视野显微镜。 2.钝刀(刮勺)、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1.皮肤黏膜组织液:无菌生理盐水浸湿得棉拭子擦去皮损表面得污物,钝刀轻刮、挤压皮损表层,取渗出液与预先滴加在载玻片上得生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2.淋巴液:无菌操作下穿刺淋巴结,注入生理盐水并反复抽吸2～3次,取少量得淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1.加镜油:在暗视野显微镜得聚光器上滴加镜油。 2.聚光:将标本玻片置载物台上,上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3.镜检:在镜下观察,寻找有特征形态与运动方式得梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光得螺旋状微生物,长5～20μm,直径小于0.2μm,有6～12个螺旋,具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性得运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征得螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1.阳性:见到上述特征得梅毒螺旋体。 2.阴性:未见到上述特征得梅毒螺旋体。 【临床意义】 1.暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2.螺旋体检查就是诊断早期现症梅毒得最好方法,世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3.如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒得可能性,应复查与血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血,以免影响镜下观察。 2.取材后应立即置暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其她螺旋体相鉴别。 (二)镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染色,从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1.显微镜。 2.罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】 1、皮肤黏膜组织液:无菌生理盐水浸湿得棉拭子擦去皮损表面得污物,钝刀轻刮、挤压皮损表层,取渗出液涂片。
梅毒诊断标准详解
梅毒诊断标准W 273-2007） 1范围本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。 2.1梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起 的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生 多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2前带现象P rozo ne phe no me non 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR 试验） 中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型 或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学 试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象"。 3缩略语下列缩略语适用于本标准。 VDRL Ven ereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试 验） USR Un heated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidi ne red un heated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Ra pid p lasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluoresce nt trepon emal an tibody-absor pti on 收（试验） TPHA Trepon ema p allidum hemaggluti nati on assay TPPA Trepon ema p allidum p article agglut in ati on assay 集试验 4诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2临床表现： 硬下疳：潜伏期一般为2?4周。一般为单发，但也可多发；直径约 圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触 浸润明显，呈软骨样的硬 度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器 部位。 荧光螺旋体抗体吸 梅毒螺旋体血凝试验 梅毒螺旋体颗粒凝 1cm ?2cm , 诊基底坚实、 4.121