应用CpG-ODN免疫刺激进行慢性淋巴细胞白血病的染色体探究

慢性淋巴细胞白血病施鹏飞

慢性淋巴细胞白血病（CLL） 杭州市第一人民医院血液科施鹏飞 CLL是欧洲和北美最常见的白血病，最主要但不是绝对的发生在老年患者。它的病程多样化，生存期从几个月到几十年不等。最主要的进展是分子和细胞学标记物对CLL病人的预后很有意义。尤其免疫球蛋白基因突变和一些细胞遗传学异常是重要的预后因素。然而这些发现也提出一些新问题，包括关于CLL生物学、预后和治疗等，有些问题我们下面会讨论。理解B细胞受体功能、遗传的自然改变、增殖和凋亡的平衡有利于我们预测和治疗CLL。尽管几乎所有的病人均会复发，但是治疗能使大部分病人缓解，CLL目前仍是个不可治愈的疾病。由于分子生物学进展进，CLL的病理生理学更加清楚，同时一些新的治疗药物的出现，这些都使CLL治疗更加合理和有效。但不幸的是，目前我们还不能阻止CLL的发生。早期发现很重要，但是似乎对病人最终结果没有什么影响。 流行病学 CLL发病率由于人群的年龄和性别比构成不同而有所差别。SEER数据分析美国的发病率在3.5/1000000(男性5.0，女性2.5)。白血病研究机构进行数据收集，这些数据来自于每个血液学专家各自负责的实验室，涵盖了英格兰和威尔士三分之一的人口，在英国CLL的发病率为每年6.15/1000 000,虽然这个数值隐藏了来自各个研究组从1.3到13.7巨大差异，数据取决于每个血液病学家对这个疾病的关注程度。我们的经验是3/4的CLL病人是偶尔一次血液检查被发现的，但是精确的流行病学主要取决于病例收集者的勤奋程度。 CLL在小于50岁的人群中很少见到，但是从这个年龄之后发生率迅速提高。根据SEER 数据，，诊断CLL的中位年龄男性70岁，女性74岁，平均死亡年龄男性76岁，女性81岁。白种美国人的发病率比美国的非洲人要高（3.9vs2.8/1000 000/年），尽管他们是完全美国式生活，但是在美国居住的中国人、日本人和菲律宾人发病率明显低于美国人5倍。早期的数据发现美国的犹太人CLL的发病率是美国非犹太人的2倍。 CLL有家族聚集现象。一级亲属中有患CLL的人发生CLL或者其他淋巴肿瘤风险是普通人的3倍。在一篇关于四色细胞流式计数的文献中，Rawstron和他的同事发现3.5%超过40岁的健康人，在他们的血液中有一些单克隆淋巴细胞，这些细胞的免疫学特点类似于CLL细胞，数量小于3.5×109/L，但是如果一级亲属中有患有CLL的人，他们血液中存在这样细胞的机率为13.5-18%。亚临床的CLL和CLL之间的关系是值得研究的课题。 除了农民和除草工人，现在没有任何证据证明CLL与环境有关，比如放射线和化学药物。2003年1月23日，美国国家医学科学院公布一项研究，有充分证据证明在越南CLL与除草剂有关系。尽管放射线一直排除在CLL致病因素外，但是最近的研究提示放射线不能完全排除。 诊断 CLL临床定义是：成熟淋巴细胞计数至少是5×109/L和适当的免疫表型（表1）。这些特点将CLL与其他类似的套细胞淋巴瘤和脾边缘区淋巴瘤相区别。在一些个例中，肿瘤只限于淋巴结和其他组织，未累及外周血和骨髓，这样被称为小淋巴细胞淋巴瘤，组织学和免疫学和CLL一致，治疗也是一样的。还有一些病人外周血或骨髓存在一些类似于CLL细胞，未累及淋巴结和其他组织，且这些细胞的数目未达到CLL的诊断标准，叫做单克隆B淋巴细胞增多症。 分子和细胞学标记物可以预测疾病进展情况。尤其免疫球蛋白基因突变和一些细胞遗传学异常对预后很有价值。然而这些生物学上的差别不能将CLL分割为两种疾病，它只是有不同遗传学特点的一种疾病。

中国成人急性淋巴细胞白血病诊断与治疗指南(完整版)

中国成人急性淋巴细胞白血病诊断与治疗指南(完整版) 成人急性淋巴细胞白血病(ALL)是最常见的成人急性白血病之一，约占成人急性白血病的20%~ 30%，目前国际上有比较统一的诊断标准和不同研究组报道的系统治疗方案，完全缓解(CR)率可达70%~90%，3~5年无病生存(DFS)率达30%~60%[1]；美国癌症综合网(NCCN)于2012年首次公布了ALL的诊断治疗指南，我国于2012年发表我国第1版成人ALL 诊断与治疗的专家共识[2]，得到了国内同行的认可。最近2016版WHO 造血与淋巴组织肿瘤分类[3]发表，对于ALL的分类有一些更新，提出了一些新概念；NCCN对于成人ALL的临床指南也先后几次修改[4]。基于此，对我国成人ALL诊断与治疗的专家共识进行了更新。 一、诊断分型 (一)概述 ALL诊断应采用MICM(形态学、免疫学、细胞遗传学和分子学)诊断模式[5]，诊断分型采用WHO 2016标准。最低标准应进行细胞形态学、免疫表型检查，以保证诊断的可靠性；骨髓中原始／幼稚淋巴细胞比例≥20％才可以诊断ALL；免疫分型应采用多参数流式细胞术，最低诊断分型可以参考1995年欧洲白血病免疫学分型协作组(EGIL)标准(表1)[6]，疾病分型参照WHO 2016版分类标准[3]。同时应除外混合表型急性白血病，混合表型急性白血病的系列确定建议参照WHO 2008造血及淋巴组织肿瘤分类的标准(表2)，可以同时参考1998 EGIL标准(表3)[7]。

表1 急性淋巴细胞白血病(ALL)的免疫学分型(EGIL，1995) 表2 混合表型急性白血病的WHO 2008诊断标准 表3 双表型急性白血病的诊断积分系统(EGIL, 1998)

封闭抗体治疗新技术活化淋巴细胞主动免疫治疗

封闭抗体治疗新技术---活化淋巴细胞主动免疫治疗 l 您是否有封闭抗体经过治疗后仍然长期阴性的烦恼么？ l 您是否仍然为找不到淋巴细胞的第三供者所困扰？ l 您是否在为丈夫无法每次来抽取新鲜血液提取淋巴细胞而忧愁？ 中山大学孙逸仙纪念医院生殖免疫专科和生物治疗技术中心合作提供了一项新技术，为您解决上述问题，这就是活化淋巴细胞主动免疫治疗。这，将带给你新的希望！ 什么是封闭抗体？ 在妊娠过程中，封闭抗体是母体接触父源性抗原所产生的抗体，能与胎盘细胞表面抗原结合，从而阻断母体细胞毒性T细胞对胚胎发动免疫攻击，发挥保护胎儿、维持妊娠的作用。 封闭抗体与习惯性流产的关系 习惯性流产的妇女约80%～90%测不到这种特异性的封闭抗体，其体内存在未被抑制的细胞毒性细胞。这些细胞可直接作用于胎盘，或通过释放炎性介质间接损害胎儿或胎盘，从而导致流产的发生。 什么是淋巴细胞主动免疫治疗？

淋巴细胞主动免疫治疗是用丈夫或第三者的淋巴细胞注入习惯性流产患者的体内，诱导产生同种免疫反应，并获得封闭抗体及微淋巴细胞毒抗体。这样，母体免疫系统就不会对胎儿产生免疫攻击，提高再次妊娠的成功率。 活化淋巴细胞主动免疫治疗比一般的淋巴细胞主动免疫治疗有什么优势？ 1、一次少量抽血，够用全疗程。抽取丈夫或第三者血液40m l分离淋巴细胞，经体外活化增殖，用增殖的淋巴细胞行免疫注射，将剩余的淋巴细胞冻存备用。可以维持1年左右，注射10次以上。 2、疗效更佳。活化的淋巴细胞纯度更高，活性更强，更易激起患者体内的封闭抗体。 3、保证健康的供给。丈夫患有乙肝等传染病不宜供血时，活化淋巴细胞可以解决找不到第三者供血的难题。 什么是活化淋巴细胞主动免疫治疗 活化淋巴细胞是指抽取丈夫或者第三者的血液，分离淋巴细胞，并用细胞因子进行体外刺激，使其活化并增殖。得到纯度更高、活性更强的淋巴细胞，注入患者体内后更容易刺激封闭抗体的产生。 活化淋巴细胞主动免疫治疗的适应人群：

慢性淋巴细胞白血病介绍

慢性淋巴细胞白血病介绍 提要：慢性淋巴细胞白血病简称慢淋，是一种起病缓慢的淋巴细胞系中某些免疫功 能不全的淋巴细胞恶性增生性疾病。慢性淋巴细胞白血病主要死亡原因为感染，尤其是肺炎多见。其他死亡原因有全身衰竭，骨髓造血功能衰竭引起的严重贫血或出血。本文就来对淋巴细胞白血病进行详细的介绍。 一、慢性淋巴细胞白血病概述 慢性淋巴细胞白血病简称慢淋，是一种起病缓慢的淋巴细胞系中某些免疫功能不全的淋巴细胞恶性增生性疾病。本病在我国少见，仅占白血病的3.4%，在欧美白种人中较常见占25－30%。发病年龄大多在50岁以上、30岁以下者很少见。男性比女性多。本病的主要表现是全身淋巴结肿大，脾大，贫血及外周血中淋巴细胞异常增多。本病的病程长短悬殊，短者1－2年，长者10年以上，平均4－6年，主要死亡原因为感染，尤其是肺炎多见。其他死亡原因有全身衰竭，骨髓造血功能衰竭引起的严重贫血或出血。 二、慢性淋巴细胞白血病分类 血液内科，肿瘤科，普通外科 三、慢性淋巴细胞白血病症状体征 肝、脾肿大、腹水、黄疸。 四、慢性淋巴细胞白血病的辅助检查 血象中白细胞增多是本病的特点，最突出的发现是小淋巴细胞增多，白细胞计数大多在15～50×109/L，少数可超过100×109 /L。早期、小淋巴细胞占白细胞的65％～75％，晚期90％～98％，其形态与正常的小淋巴细胞难以区别。中性粒细胞和其他正常白细胞均显著减少。早期，贫血可不存在，以后逐渐加重，晚期贫血可以很严重，网织红细胞增高，血清胆红素增加。晚期血小板计数常减低。骨髓象：早期白血病细胞仅在少数骨髓腔内出现，因此，早期骨髓象可无明显改变；晚期正常的骨髓细胞几乎全部被成熟的小淋巴细胞所代替，原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞仅占5％～10％。另外，50％的病例有丙种球蛋白减少；10％～20％的病人有自身抗体；30％患者有高尿酸血症。 五、慢性淋巴细胞白血病治疗方案 选择性脾切除可在一定程度上缓解病情，但并不能延长存活期。 慢性淋巴细胞白血病术前准备： 1.对门静脉高压患者，术前应改善肝功能，纠正出血倾向。 2.对某些严重贫血者，应反复多次输血后，再行脾切除。 3.对长期使用激素者，应预防性使用抗生素。 4.按普外科腹部手术前准备。 慢性淋巴细胞白血病麻醉要求： 气管内插管麻醉。 慢性淋巴细胞白血病术中注意点： 1.手术可取左侧肋缘下或上腹正中“L”形切口，术野显露充分。 2.切睥前宜先结扎脾动脉。

免疫分型 基础介绍

近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。早年曾用过的荧光显微镜或APAAP方法基本被废弃。国际上公认的通用的方法是流式细胞术（FCM）。流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体（McAb）作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。 1．流式细胞仪诊断白血病的依据 ⑴FCM能快速，多参数，客观的定性又定量测定细胞膜、浆、核的抗原表达 ⑵至今尚未发现白血病的特异抗原。 ⑶能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说。即白血病细胞基因异常，分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。这群细胞充盈于骨髓。正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。因此，这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。白血病是造血系统的恶性肿瘤，在形态上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。 2．流式细胞仪诊断白血病的意义 ⑴骨髓血细胞是形态学分型的基础，FCM白血病免疫分型是对形态学分型的重要补充和进一步深化，国际白血病MIC分型协作组认为免疫分型对每一例急性白血病都是必不可少的，对下列情况意义更大：①用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。②形态学为急性淋巴细胞白血病（ALL）或急性未分化白血病（AUL）但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记。③混合性白血病。④部分髓系白血病。目前，免疫分型对粒细胞和单核细胞白血病的鉴别尚有一定困难。⑤慢性淋巴细胞白血病。⑥微小残留白血病。 ⑵临床预测；可根据抗原的表达情况预测病情的预后：如白血病患者有CD7+与CD34+共表达，预后不好。 ⑶疾病监测：可监测病程的发展，疗效，可进行微小残留白血病的检测。 二、免疫分型常用的免疫标志及其意义 1．白血病系列分化抗原 T淋巴细胞白血病：CD3、CD5、CD7。 B淋巴细胞白血病：CD10、CD19、CD22。 NK淋巴细胞白血病：CD16、CD56、CD57。 髓系白血病：CD13、CD14、CD33、MPO（髓过氧化物酶）。 红白血病：GlyA（血型糖蛋白A）。 巨核细胞白血病：CD41、CD42、CD61。 2．白血病系列非特异性抗原 CD34、HLA－DR为早期细胞抗原，无系列特异性，可与CD38联合运用于免疫分型。一般而言，干/祖细胞CD34＋、HLA－DR＋、CD38－，原始细胞CD34＋、HLA－DR＋、CD38＋，而幼稚细胞（如早幼粒细胞）CD34－、HLA－DR－、CD38＋。 3．白血病分化阶段抗原 T细胞抗原CD4、CD8。 B细胞抗原：CD10、Cyμ（胞浆μ链）、SmIg（表面膜免疫球蛋白）、CD38和CyIg（胞浆免疫球蛋白）、CD11C。 4．白细胞共同抗原 CD45为白细胞共同抗原，其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞，成熟粒细胞，早期造血细胞（blasts）依次减弱。红细胞（中，晚幼红细胞，成熟红细胞）不表达CD45。用SSC/CD45 PerCP双参数分析可十分容易鉴别骨髓和血液中的原始或成熟细胞。用两个系列或阶段特异性McAb加CD45进行三色免疫荧光染色，经FSC、SSC、McAbl-FITC、McAb2-PE、CD45 PerCP五参数分析，可特异地分析原幼白血病细胞的免疫表型而不受成熟细胞的干扰。

急性非淋巴细胞白血病诊疗方案

急性非淋巴细胞白血病诊疗方案 急性白血病（acute Leukemia，AL）是由于造血干祖细胞恶变，导致某系列白细胞成熟障碍，其幼稚白细胞在骨髓或其它造血组织中恶性增殖，浸润全身组织器官，使正常造血功能受抑，以贫血、发热、出血、肝脾及淋巴结肿大、感染等为主要表现的一组造血系统恶性肿瘤。本病多起病急骤，发展迅速。 急性白血病的发病率全世界平均发病率约3.1/10万，欧美国家发病率较高，国发病率占癌肿发病率的第6～8位，为十大恶性肿瘤之一。男性多于女性，是儿童及青少年最常见的恶性肿瘤。 本病属中医急劳、虚劳、血证、伤发热、温病、症积等围。 【病因病理】 一、西医病因病理 （一）病因及发病机制 急性白血病的病因尚未完全清楚，经近年研究表明，可能与下列因素有关： 1．病毒感染 C型RNA病毒、成人T细胞白血病病毒（HTLV）等，目前被认为可引起白血病。 2．化学物质与环境因素多种具骨髓毒性的化学物质均可能引起白血病，包括苯及其化合物、有机溶剂、杀虫药，某些药物（如氯霉素、保泰松、镇静安眠药、磺胺、烷化剂等抗癌药等），可能引起本病。 3．电离辐射长期接触γ射线、X线等放射线，可诱发白血病。 4．遗传因素某些遗传性疾病或免疫缺陷症患者易发白血病。 急性白血病的发病机制尚未充分阐明。一般认为是上述因素作用下，机体免疫功能失调，或基因变异，使造血干祖细胞恶变，分化、成熟障碍，凋亡减少，原始幼稚血细胞恶性增殖并浸润骨髓及全身组织器官，导致正常造血细胞明显减少，不能发挥正常功能而发生出血和感染等。 （二）病理 1．白血病细胞增生和浸润为本病特异性病理变化，主要发生于造血组织，如骨髓、肝脾、淋巴结，并可累及全身组织器官。 2．出血、组织营养不良及坏死出血可发生于任何部位，程度各异，常见于皮肤、鼻、口腔粘膜、肺、胃及脑等；白血病细胞的浸润、组织出血及梗死可引起局部组织变性、坏死；代障碍可引起全身组织营养不良。 3．继发感染以细菌及真菌感染较常见。感染发生时，局部炎症反应较微，但病灶易扩散，组织变性较严重。 二、中医病因病机 1．素秉不足，复感邪毒先天禀赋不足，后天失于调养，致脏腑功能失调，正虚体弱，复感风寒暑湿燥热或温毒之邪，入里化火成毒，损伤脏腑气血阴阳；

淋巴细胞主动免疫治疗母胎免疫识别低下型反复性流产疗效分析

淋巴细胞主动免疫治疗母-胎免疫识别低下型 反复性流产疗效分析 白 静1,赵 芳1,李 岩1,马红丽2 (1.洛阳市妇女儿童医疗保健中心生殖医学研究所,河南 洛阳 471002;2.洛阳市中心血站) 摘 要:目的 分析淋巴细胞主动免疫疗法治疗母-胎免疫识别低下型反复性流产(RSA)的临床疗效和作用机制。方法 以临床筛查封闭抗体确诊为母-胎免疫识别低下型R S A未孕患者86例为研究对象,采用淋巴细胞主动免疫疗法治疗,将妊娠患者与同期不明原因反复性自然流产(UR S A)已孕患者治疗情况对比观察疗效,对母-胎免疫识别低下型R S A患者治疗后不同归向原因进行对比分析该方法的作用机制。结果 治疗后妊娠56例,妊娠成功51例,成功率91 07%,与对照组比较P<0 01,主动免疫治疗疗效与患者年龄、反复流产次数有相关性,与注射淋巴细胞密度无相关性。结论 母-胎免疫低下型RSA患者宜早期治疗,淋巴细胞主动免疫疗法是治疗母-胎免疫识别低下型RSA的有效方法。 关键词:反复性早期自然流产;主动免疫;母-胎免疫低下型;封闭抗体 中图分类号:R714 21 文献标识码:A 文章编号:1006-9534(2009)10-0067-02 E ff ect ana lysis on m other-f oe t us hypo m i m uno log ic recogn ition recurren t spon t aneous abortion us e l y m phocyt e ac tive m i m un ity me thod.BA I J i ng1,Z H AO Fang1,LI Yan1,M A H ong-li2.(1.Luoyang W o m en and Chil dren H ealt h Car eH osp it al ReproductiveM edicine Unit;2.the B lood Cen ter of Luoyang H enan471002) Abstrac:t Ob j ec ti ve:Ana l ys i s t he curati ve effect and f unction m echanis m about l ymphocyte active i m m un ity t herapy m other-foe-t us hypo i m muno l og ic recognition recu rrent spontaneous abortion(RSA).M ethods:86mo t her-foetus hypo i m m unolog i c recogn ition recurrent spontaneous aborti on through check block i ng anti body as i nvestigate b j ec t,treat w ith ly m pho cy te active i m m un ity,con trast w it h unexp lai ned recurrent spontaneous abortion(UR S A)i n t he sa m e per i od,ana l y si s the function m echanis m t h rough compareing therapeutic resu lt.R esults:A fter treat ment,56person g esta ted,51person gestate conti nuousl y,achiev e m ent ra ti o91 07%,co m-pared w ith contro l g roup P<0 01,the the rapeutic effec t of active i m m un i ty has assoc i a tiv ity on pa ti ent s age、recurrent spontaneous aborti on par ity and unassoc i a tiv ity on l ymphocyte density.C onc l usi on:M othe r-foetus hypo i m muno l og ic recognition recurren t sponta-neous aborti on shou l d be ear l y treated,t he ly m pho cy te acti ve i m mun ity therapy ism odus operandi on it. Key w ords:R ecurren t spontaneous abo rti on;A c tive i m munity;M other-foetus hypo i m m uno l og ic recogn iti on recu rrent spontane-ous abo rti on;B l ocki ng anti body 反复性自然流产(RSA)是一种常见的妊娠并发症,临床发病率约为1%,其病因复杂,80%以上原因不明,约2/3为母-胎免疫识别低下型反复性流产[1]。2006年5月~2008年12月,我们运用配偶淋巴细胞皮内注射法对母-胎免疫识别低下型RSA患者进行治疗,疗效满意,报道如下。 对象与方法 1.对象 以06年5月~08年12月就诊的母-胎免疫识别低下型RSA未妊娠患者为治疗对象,所有患者具备以下条件并签署知情同意书:(1)流产次数 2次;(2)夫妻染色体核型分析正常;(3)系统检查:无生殖道结构异常、内分泌检查正常、抗心磷脂抗体阴性、病毒四项(TORC H)Ig M阴性;(4)封闭抗体阴性;(5)男方精液分析正常。治疗后妊娠56例为治疗组,同期就诊的UR S A患者就诊时已妊娠者(所有患者具备:上述(1)、(2)、(3)、(5)条)57例对照组。 2.方法 以微量淋巴细胞毒理学试验方法判定R S A患者封闭抗体情况,无菌条件下分离配偶血液淋巴细胞。治疗组:将淋巴细胞悬液1m l于患者左右前臂内侧分3点皮内注射。疗程:每隔3~4周一次,3~4次后复查封闭抗体,转阳性者安排怀孕;如未孕4~8周加强一次,同时检查不孕原因;妊娠后治疗间隔同前,同时联合给予黄体支持和中药保胎直至孕5月。对照组:仅给予黄体支持。 3.疗效判断标准及统计学方法 妊娠达16周以上,或分娩正常新生儿为妊娠成功,再次流产、死胎及新生儿畸形作为妊娠失败。采用SPSS10 0软件进行数据分析。 结果 治疗组治疗后妊娠56例,其中分娩29例,妊娠超过16周22例,再次流产5例;对照组57例,两组患者年龄、反复流产次数比较无差异性,治疗组妊娠成功率明显高于对照组。结果见表1。 67 中国优生与遗传杂志2009年第17卷第10期

淋巴细胞主动免疫治疗反复性流产的步骤及原理

淋巴细胞主动免疫治疗反复性流产的步骤及原 理 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT

淋巴细胞主动免疫治疗反复性流产的步骤及原理 步骤：抽取丈夫静脉血20ml,用淋巴细胞分离液分离提取出淋巴细胞。用生理盐水洗涤2次后,加生理盐水1ml稀释,于妻子前臀内侧处作皮内放射状6～8点接种,淋巴细胞数为2～×10(7)/ml。注射后24～72小时局部出现直径3～10mm不等红润硬结,每疗程注射4次,每次间隔3周。第一疗程结束后鼓励怀孕,怀孕后再注射2次。对孕期治疗2次后仍有先兆流产症状的患者,再增强治疗2～4次。 原理：从现代生殖免疫观点来看,原发性习惯性流产,可能是由于患者对胚胎父系抗原的免疫低反应性所致。基于该理论国内外学者采用丈夫或无关个体白细胞、淋巴细胞等对母体进行免疫治疗。目的是诱导母体对胚胎抗原或相关同种异体抗原产生免疫反应性。 妊娠是成功的半同种异体移植过程,胚胎所携带的夫源性HLA抗原能刺激母体免疫系统,并产生一类IgG型抗体,称之为封闭抗体,它存在妊娠妇女血清中,可抑制针对丈夫HLA特异性抗体的淋巴细胞毒活性,并可抑制异体移植物的排斥,原因不明的习惯性流产妇女血清中缺乏该封闭抗体,但通过注射丈夫的淋巴细胞可获得。 注射部位皮肤反应与疗效的关系,皮肤反应的轻重可判断免疫疗法的效果非常有用的观察指标之一,第1次注射后皮肤反应重,即24～48小时局部出现红润硬结直径为3～10mm,而几次注射皮肤反应逐渐减轻者妊娠预后良好。免疫疗法治疗习惯性流产的疗效肯定且安全简

便。但由于治疗后并非所有患者封闭抗体都转阳性,而正常妊娠妇女封闭抗体也可能为阴性,作用机理尚待进一步研究。

急性非淋巴细胞白血病介绍

急性非淋巴细胞白血病介绍 提要：急性非淋巴细胞白血病约占小儿急性白血病的25％左右，可发生于任何年 龄，无明显年龄的发病高峰，男女之间无差异。本文将从概述、分型、症状等方面对急性非淋巴细胞白血病进行详细介绍。 一、急性非淋巴细胞白血病的概述 急性非淋巴细胞白血病(acute nonlymphocytic leukemia，ANLL)约占小儿急性白血病的25％左右，可发生于任何年龄，无明显年龄的发病高峰，男女之间无差异。二、急性非淋巴细胞白血病的分型 １．形态学分型１９８６年天津召开的白血病分类分型讨论会，将ＡＮＬＬ分为七型，诊断标准如下： (１)急性粒细胞白血病未分化型(Ｍ1)骨髓中原粒细胞(Ｉ+Ⅱ型)≥90％(非红系细胞)，早幼粒细胞很少，中性中幼粒细胞以下阶段不见或罕见。 (２)急性粒细胞白血病部分分化型(Ｍ2)分两个亚型，①Ｍ2a:骨髓中原粒细胞(Ｉ+Ⅱ型)＞30～＜90％(非红系细胞)，单核细胞＜20％，早幼粒细胞以下阶段＞１０％； ②Ｍ2b:骨髓中异常原始及早幼粒细胞明显增多，以异常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常有核仁，有明显的核浆发育不平衡，此类细胞＞30％。 (３)急性颗粒增多的早幼粒细胞白血病(Ｍ3)骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，＞30％(非红系细胞)，其胞核大小不一，胞浆中有大小不等的颗粒。可分两个亚型，①粗颗粒型(Ｍ3a)：嗜苯胺蓝颗粒粗大，密集甚或融合；②细颗粒型(Ｍ3b)：嗜苯胺蓝颗粒密集而细小。 (４)急性粒-单核细胞白血病(Ｍ4)依原粒和单核细胞系形态不同，可包括下列四种亚型：①Ｍ4a:原始和早幼粒细胞增生为主，原幼单和单核细胞＞20％(非红系细胞)；②Ｍ4b:原、幼单核细胞增生为主，原始和早幼粒细胞＞20％(非红系细胞)；③Ｍ4c:原始细胞既具粒系，又具单核细胞系形态特征者＞30％；④Ｍ4ED：除上述特点外，有粗大而圆的，嗜酸颗粒着色较深的嗜酸粒细胞，占５～30%。

急性淋巴细胞白血病诊疗常规

急性淋巴细胞白血病诊疗常规 一、急性淋巴细胞白血病(ALL) 的诊断及分型 (一) ALL 基本诊断依据 1、临床症状、体征:有发热、苍白、乏力、出血、骨关节疼痛,有肝、脾、淋巴结肿大 等浸润灶表现。 2、血象改变:血红蛋白及红细胞计数降低,血小板减少,白细胞计数增高、正常或减低, 分类可发现不等数量的原、幼淋巴细胞或未见原、幼淋巴细胞。 3、骨髓形态学改变: 是确诊本病的主要依据。骨髓涂片中有核细胞大多呈明显增生或极度增生,仅少数呈增生低下,均以淋巴细胞增生为主,原始+幼稚淋巴细胞必须≥30% 才可确诊为ALL 。除了对骨髓涂片作瑞氏染色分类计数并观察细胞形态改变外,应该做过氧 化酶(POX) 、糖原(PAS) 、非特异性酯酶(NSE)等细胞化学染色检查,以进一步确定异常细胞性质并与其他类型的白血病鉴别。 (二) ALL 的M IC 分型 除了临床及细胞形态学(M) 诊断以外,还应该用单克隆抗体作免疫分型(I) 及细胞遗传 学C) 检查,即M I C 分型诊断,尽可能作分子遗传学/融合基因(molecular genetics,M ) 检测, 即M ICM 分型。 1、细胞形态学分型:淋巴细胞型按FAB 分型标准分为L1、 2 和L3 型,但L1、2 型之间已不具有明显的预后意义。 2、免疫分型:分为T、B型二大系列: (1) T系急性淋巴细胞白血病(T-ALL) :具有阳性的T 淋巴细胞标志,如CD1 、CD2、CyCD3 、CD4 、CD5 、CD7 、CD8 以及TdT 等。(2) B 系急性淋巴细胞白血病(B 系ALL) :根据其对 B 系淋巴细胞特异的单克隆抗体标志反应的表现临床分为 3 个亚型: ①早期前 B 型急性淋巴细胞白血病(early Pre B2ALL) , CD79a、CD19 和(或) CyCD22 、CD10 及HLA2DR 阳性, Sm Ig、CyIg 阴性; ②前 B 型急性淋巴细胞白血病(Pre B2ALL) , CyIg 阳性, Sm Ig 阴性,其他 B 系标志CD79a 、CD19 、CD20 、CD10 、CyCD22 以及HLA2DR 常为阳性; ③成熟 B 型急性淋巴细胞白血病(B2ALL) , Sm Ig 阳性, 其他 B 系标志CD79a 、CD19、CD22 、CD10、CD20 以及HLA2DR 常为阳性。 此外,尚可见伴有髓系标志的ALL (My 2ALL) : 具淋巴系的形态学特征表现,以淋巴系特 异的抗原标志表达为主,但伴有个别、次要的髓系特征的抗原标志(CD13、CD33 或CD14等) 。 3、细胞遗传学改变: (1)染色体数量改变:有≤45 条染色体的低二倍体和≥47条染色体的高二倍体。(2) 染色体核型改变: 与ALL 预后有利的核型异常有: t (12; 21) / AML12TEL (ETV62CBFA2) 融合基因; 与ALL 预后不利的核型异常有: t(9; 22) /BCR2ABL 融合基因; t(4; 11) /MLL2AF4 融合基因及其他MLL 基因重排。 (三)临床危险度分型 1、与儿童ALL 预后确切相关的危险因素: (1) 年龄在< 12 个月的婴儿白血病或≥10 岁的年长儿童。 (2) 诊断时外周血白细胞计数≥50 ×10 /L。 (3) 诊断时已发生中枢神经系统白血病(CNSL)或睾丸白血病(TL) 者。 (4) 免疫表型为T 细胞白血病。 (5) 不利的细胞遗传学特征:染色体数目为<45 的低二倍体, t (4; 11) /MLL2AF4 融合 基因或其他MLL 基因重排,或t (9; 22) /BCR2ABL 融合基因异常。 (6) 早期治疗反应不佳者:泼尼松诱导试验60 mg/ (m ·d) , ×7 d，第8 天外周血幼 稚淋巴细胞≥1 ×10 /L (1000/ μl) ,定为泼尼松不良效应者(PPR) ,和(或) 标准方案联

淋巴细胞主动免疫治疗对反复自然流产的疗效分析及其护理策略

·论著·淋巴细胞主动免疫治疗对反复自然流产的 疗效分析及其护理策略 黄华英　孙鸿燕　廖运梅 【摘要】　目的　探讨采用淋巴细胞主动免疫治疗对反复自然流产（ＲＳＡ）的疗效及其护理策略。方法 　选择２０１０年４月至２０１１年９月于本院确诊为ＲＳＡ后完成淋巴细胞主动免疫治疗，并成功随访的１５４ 例患者为研究对象。淋巴细胞主动免疫治疗方法为：采集配偶（健康）淋巴细胞，若配偶不宜作为免疫原提 供者，则选用无关健康个体的淋巴细胞。外周血淋巴细胞治疗方法：患者治疗前应严格避孕。将淋巴细胞 悬液１ｍＬ于患者前臂内侧分６～８点皮内注射，治疗１个疗程后检测抗磷脂抗体（ＡＰＬＡ），每隔３～４周皮 内注射１次，４次为１个疗程。治疗１个疗程结束后，医师指导下妊娠，妊娠后继续巩固治疗１个疗程。疗 效判断标准：维持妊娠至２０孕周后者判断为治愈。对接受采用淋巴细胞主动免疫治疗患者的护理策略包 括：健全登记管理制度、良好的心理疏导、严格护理操作规范（本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会 所制定的伦理学标准，得到该委员会批准，征得受试对象本人的知情同意，并与之签署临床研究知情同意 书）。结果　①１５４例ＲＳＡ患者接受免疫治疗２个疗程后，ＡＰＬＡ呈阳性为１４６例（９４．８１％），与治疗前 比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。②１５４例患者中，１３６例再次妊娠，妊娠率为８８．３１％；妊娠至２０周 后为９８例，２８例在妊娠后治疗疗程中，４９例足月分娩，２例早产，所产婴儿体格、智力发育正常。实施护理 策略后，患者满意度提高。结论　淋巴细胞主动免疫治疗对治疗ＲＳＡ安全有效，但是否值得临床推广应 用，尚需进一步研究证实。健全登记管理制度、良好的心理疏导、严格护理操作规范、适时的健康指导等护 理策略，可提高对本病患者护理质量。 【关键词】　自然流产；　反复自然流产；　淋巴细胞免疫治疗；　护理 Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　Ａｃｔｉｖｅ　Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｎ　Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　Ａｂｏｒｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　Ｎｕｒｓｉｎｇ　Ｍｅａｓｕｒｅｓ　 ＨＵＡＮＧ　Ｈｕａ－ｙｉｎｇ，ＳＵＮ　Ｈｏｎｇ－ｙａｎ，ＬＩＡＯ　Ｙｕｎ－ｍｅｉ．　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｌｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｕｚｈｏｕ６４６０００，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ．（Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ： ＨＵＡＮＧ　Ｈｕａ－ｙｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：５９２３７２８２７＠ｑｑ．ｃｏｍ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｎ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ａｂｏｒｔｉｏｎ（ＲＳＡ）ａｎｄ　ｉｔｓ　ｎｕｒｓｉｎｇ　ｍｅａｓｕｒｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｒｏｍ　Ａｐｒｉｌ　２０１０ｔｏ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　２０１１，ａ ｔｏｔａｌ　ｏｆ　１５４ＲＳＡ　ｃａｓｅｓ　ｗｈｏ　ｕｎｄｅｒｗｅｎｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ，ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ　ｈｕｓｂａｎｄ （ｈｅａｌｔｈｙ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ）ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ｉｆ　ｔｈｅ　ｓｐｏｕｓｅ　ｓｈｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎ，ｔｈｅｎ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｕｎｒｅｌａｔｅｄ ｈｅａｌｔｈｙ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ　ｏｆ　ｐｒｅｇｎａｎｃｙ　ｔｏ　２０ ｇｅｓｔａｔｉｏｎ　ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ　ｎｕｒｓｉｎｇ　ｍｅａｓｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ：ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｓｙｓｔｅｍ，ｇｏｏｄ ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｔｒｉｃｔ　ｃａｒｅ　ｐｒａｃｔｉｃｅｓ．Ａｌｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　１５４ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ　ｔｈｅ　ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ．Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ　ｐｒｏｔｏｃｏｌ　ｗａｓ　ａｐｐｒｏｖｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｅｔｈｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗ　Ｂｏａｒｄ　ｏｆ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｂｅｉｎｇ　ｏｆ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｌｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ．Ｉｎｆｏｒｍｅｄ　ｃｏｎｓｅｎｔ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｅａｃｈ　ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　 ①Ａｆｔｅｒ　ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ　ｔｗｏ　ｃｏｕｒｓｅｓ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｈｅｒａｐｙ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ－ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ　ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＡＰＬＡ）ｗａｓ　１４６ ｃａｓｅｓ（９４．８１％），ｔｈｅｒｅ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（Ｐ＜０．０１）． ②Ａｍｏｎｇ　１５４ｐａｔｉｅｎｔｓ，１３６ｃａｓｅｓ（８８．３１％）ｗｅｒｅ　ｒｅ－ｐｒｅｇｎａｎｃｙ；ｐｒｅｇｎａｎｃｙ　ｔｏ　２０ｗｅｅｋｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　９８ｃａｓｅｓ， ２８ｃａｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｕｒｓｅ　ｏｆ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｉｎ　ｐｒｅｇｎａｎｃｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｉｓ　ｓａｆｅ ａｎｄ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ．Ｂｕｔ　ｗｈｅｔｈｅｒ　ｉｔ　ｉｓ　ｗｏｒｔｈｙ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ａｒｅ　ｎｅｅｄｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｆｉｒｍ．Ｔｈｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｓｙｓｔｅｍ，ｇｏｏｄ　ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ，ｓｔｒｉｃｔ　ｃａｒｅ ｐｒａｃｔｉｃｅｓ　ａｎｄ　ｔｉｍｅｌｙ　ｇｕｉｄａｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｅａｌｔｈ　ｃａｒｅ　ｓｔｒａｔｅｇｙ　ｃａｎ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　ｃａｒｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】　ａｂｏｒｔｉｏｎ；　ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ａｂｏｒｔｉｏｎ；　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｈｅｒａｐｙ；　ｎｕｒｓｉｎｇ ＤＯＩ：１０．３８７７／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－５２５０．２０１２．０３．０１４ 作者单位：６４６０００四川泸州，泸州医学院附属医院生殖部通讯作者黄华英（Ｅｍａｉｌ：５９２３７２８２７＠ｑｑ．ｃｏｍ） 对妊娠２８孕周前连续发生自然流产≥３次，称为反复自然流产（ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ａｂｏｒｔｉｏｎ，ＲＳＡ），与母体缺乏抗磷脂抗体（ａｎｔｉ－ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡＰＬＡ）有关，可分为免疫性ＲＳＡ和非免疫 · １ ０ ３ · 中华妇幼临床医学杂志（电子版）２０１２年６月第８卷第３期

急性淋巴细胞白血病的症状有哪些

急性淋巴细胞白血病的症状有哪些 急性白血病起病一般比较急，但也有缓慢起病者。起病急者急性淋巴细胞白血病（简称急淋）多于急性非淋巴细胞白血病（简称急非淋），急淋罕见有白血病前期表现；缓慢起病者主要见于急非淋。各种类型的急性白血病常有共同的临床表现。因正常的血细胞减少，导致贫血、出血、继发性感染和发热；因白血病细胞广泛浸润各组织脏器，导致肝、脾淋巴肿大及其它器官功能障碍。 （1）贫血： 急性白血病患者贫血的症状常出现得早而且严重，呈进行性发展，确诊时约60％以上患有血红蛋白低于60g／L。贫血发生的机理和以下因素有关：1）红细胞生成减少：白血病细胞可抑制正常多能干细胞和红系祖细胞，并可破坏红系诱导微环境，导致红细胞生成减少；2）无效性红细胞生成：DiGuglielmo 综合征和某些急非淋白血病可见幼红细胞增生，其发生贫血机理与无效性红细胞生成有关；3）溶血：某些急性白血病可存在隐性溶血，DiGuglielmo综合征的红细胞寿命缩短，由于造血代偿能力降低，也会发生溶血性贫血；4）失血；5）化疗药物引起的贫血包括抗代谢药产生药物性巨幼红细胞性贫血。 总之，急性白血病发生贫血的原因是综合的，但主要原因是红细胞生成减少。 （2）出血： 以出血为早期表现者占成人急性白血病的38.6％。急性白血病的死因分析中，62.24%死于出血，其中87%为颅内出血。血小板减少是急性白血病出血的最重要原因。 （3）感染和发热： 成人急性白血病以发热为早期表现者占52％，发热常伴有感染。其中以口腔炎最多见，齿龈炎或咽峡炎严重时可发生溃疡，甚至坏死。肛周炎或肛旁脓肿及肺部感染也甚常见，严重感染常导致败血病和菌血症。 （4）淋巴结和肝脾肿大： 淋巴结肿大以急淋发生率最高，初诊时可达80％，尤见于T细胞、B细胞和前B细胞型急淋，常有淋巴结显著肿大。 （5）骨和关节表现： 骨痛以急淋多见，初诊时有骨、关节症状者急淋11％，急非淋占2％。慢性粒细胞白血病急变有显著骨痛，剧烈者可呈持续性有炸裂感。胸骨下端压痛也甚常见。伴骨髓坏死者也不少见，易发生于儿童急淋。以关节肿为起病症状者多见于小儿。 （6）眼部表现： 白血病的眼部表现常由浸润或出血引起，白血病细胞可直接浸润视神经、

淋巴细胞培养后主动免疫治疗反复自然流产疗效评价

#生殖医学# 淋巴细胞培养后主动免疫治疗反复自然流产疗效评价 武美丽 柳肃芬 作者单位:730050 甘肃,甘肃省妇幼保健院生殖免疫诊疗 反复自然流产(recurrent sp i n taneous abo rtion,RSA )是妇科常见病之一,除遗传、内分泌、感染、自身免疫、解剖因素外,80%以上原因不明 [1] ,成为临床难治性不育症。近年来国内外学 者根据Beer 等[2] 在1981年创立的淋巴细胞主动免疫疗法,对原因不明的反复自然流产(unexpla i n ed recurrent spontaneous aborti o n ,URSA )患者大胆采用丈夫和无关个体淋巴细胞进行主动免疫治疗,大大提高了URSA 的临床诊治水平。2006年3月~2007年6月,我们运用配偶淋巴细胞培养后皮内注射法对40例URSA 患者进行治疗,并观察妊娠预后,取得了较好的治疗效果,现报道如下。 对象与方法 11对象:2006年3月至2007年6月,就诊本院生殖免疫诊疗中心门诊的RSA 患者。详细询问病史、经妇科检查、子宫输卵管造影或宫腔镜检查证实无生殖器器质性病变,内分泌化验正常,体温双相,黄体期不少于12d,且较平稳,夫妻染色体核型正常,TORC H 常规检查无异常,排除血型不合,自身免疫无异常(抗心磷脂抗体、抗核抗体、抗精子抗体、抗透明带抗体等阴性),配偶精液常规在正常范围者诊断为URSA 。对其符合条件的66例URSA,经征求意见表示愿意参加研究,并签知情同意书,根据患者的自愿分为3组,孕前实行主动免疫治疗(孕前治疗组)20例,确诊妊娠后实行主动免疫治疗(孕后治疗组)20例,对照组26例。对照组采用黄体酮保守治疗。3组年龄(23~35岁,平均年龄29岁)、健康状况、流产次数(既往曾发生自然流产2~10次,平均流产次数314次)及流产时间(流产时孕周为5~12周,平均孕周7周),差异无统计学意义(P >0105)。 21淋巴细胞的培养:全部采用RSA 患者配偶 为供血对象,身体健康,传染病4项正常(甲肝病毒、乙肝病毒、梅毒螺旋体、爱滋病病毒检测阴性)。无菌技术抽取配偶外周抗凝全血30m ,l 常规肝素抗凝,与等量磷酸缓冲液(phosphate ba-l anced so l u ti o n ,PBS)混合,使用Fico ll-H ypaque 法密度离心分离外周血单个核细胞(periphera l b l o od m ononuc lear cel,l PB M C)。用RP M I 1640培养液洗涤离心2次,加入培养液后置于培养瓶中于37e 5%CO 2培养箱内。培养液配制,每1m l 含RP M I 1640为0173m ,l 其中含重组人C -干扰素0105万U /m ,l 植物血凝素(phytohe m agg l u ti n i n ,P HA )0102m g /m ,l 5%小牛血清(012m l)。培养细胞内毒素和细菌培养阴性,酚红染色细胞活率\85%,培养72h 后的细胞再用019%氯化钠溶液洗涤2次,调整至细胞数为20~30@106 /m l 方可用于治疗。 31免疫治疗方法:孕前治疗组20例孕前治疗3次后嘱其妊娠,如3月内未受孕,行输卵管通液,并在排除不育症的情况下重新加强1次主动免疫治疗。妊娠35d 加强免疫1次,此后每3周治疗1次。孕后治疗组20例在确定怀孕后开始主动免疫治疗。2组均每3周给患者双侧前臂皮内多点免疫注射1次,每次每点为013~015m ,l 直至妊娠14周。课题组人员固定,接受本免疫疗法者不接受对该病的其它治疗。对照组26例URSA 患者再次妊娠后仅以黄体酮常规保胎药物治疗到妊娠12周停药。 41疗效判断标准:妊娠达28周以上,或分娩正常新生儿为成功妊娠,再次流产、死胎及新生儿畸形作为妊娠失败。 51统计学处理:采用SPSS 1010软件进行数据 分析,分析方法为V 2 检验,P <0105判定差异有统计学意义。 结果 40例URSA 患者经配偶淋巴细胞免疫治疗后,