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从动物血液提取SOD的工艺流程及技术

实验动物取血(优质参考)

名称：实验动物的取血关键词：动物,取血,方法目的：规范实验动物(家兔、狗，豚鼠，)取血的方法和途径, 主体内容：（一）家兔 1．耳缘静脉取血法选好耳缘静脉，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夹夹紧耳根部，使血管充血扩张。术者持粗针头从耳尖部血管，逆回流方向刺入静脉内取血，或用刀片切开静脉，血液自动流出，取血后棉球压迫止血，取血量2～3ml。压住侧支静脉，血液更容易流出；取血前耳缘部涂擦液体石蜡，可防止血液凝固。 2．耳中央动脉取血法家兔固定箱内，用手揉擦耳部，使中央动脉扩张。左手固定兔耳，右手持注射器，中央动脉末端进针，与动脉平行，向心方向刺入动脉。一次取血量15ml。取血后棉球压迫止血。注意兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩。抽血前要充分使血管扩张，在痉挛前尽快抽血，抽血时间不宜过长。中央动脉末端抽血比较容易，耳根部组织较厚，抽血难以成功。 3．后肢胫部皮下静脉取血法家兔固定于兔台上，剪去胫部被毛，股部扎止血带，胫外侧皮下静脉充盈。左手固定静脉，右手持注射器，针头与静脉走向平行，刺入血管后回抽针栓即有血液进入注射器。

4．心脏取血法将家兔固定于兔台上，或由助手在坐位将家兔以站立位固定，剪去胸部被毛，常规消毒。术者在胸骨左侧3～4肋间摸到心尖搏动，在心搏最明显处作穿刺点；右手持注射器，将针头插入肋间隙，在左手触摸到心跳的配合下，垂直刺入心脏，当持针手感到心脏搏动时，再稍刺入即到达心腔。每次抽血量20～2 5ml。针头宜直入直出，不可在胸腔内左右探索。拔针后棉球压迫止血。家兔颈动静脉和股动静脉取血法与大鼠相同，均需作相应的血管分离手术。（二）豚鼠 1．心脏取血法豚鼠心脏取血法与家兔基本相同。取血量可根据需要，采集部分血5～7ml，采集全部血15～20ml。 2．背中足静脉取血法助手固定动物，将后肢膝关节拉直。术者可从动物脚背面找到背中足静脉，常规消毒后，左手拉住豚鼠趾端，右手持注射器穿刺，抽血后立即用纱布或棉球压迫止血。反复取血可两后肢交替使用。（三）狗 1．心脏取血法狗心脏取血方法与家兔相同。可抽取较多的血液。 2．小隐静脉和头静脉取血法小隐静脉从后肢外踝后方走向外上侧，头静脉位于前肢脚爪上方背侧正前位。剪去局部背毛。助手握紧腿，使皮下静脉充盈。术者按常规穿刺即可抽出血液。

制药工艺学期末试卷及答案

《制药工艺学》试卷班级：学号：姓名：得分：一、单选题。（每题2分，共30分）是（）。 A.药品生产质量管理规范 B.药品经营质量管理规范 C.新药审批办法 D.标准操作规程 2.药品是特殊商品，特殊性在于（）。 A.按等次定价 B.根据质量分为一、二、三等 C.只有合格品和不合格品 D.清仓在甩卖 3.终点控制方法不包括（）。 A.显色法 B. 计算收率法 C.比重法 D. 沉淀法 4.温度对催化剂活性的影响是（）。 A.温度升高，活性增大 B.温度升高，活性降低 C.温度降低，活性增大 D.开始温度升高，活性增大，到最高速度后，温度升高，活性降低 5.中试一般比小试放大的位数是（）倍。 ~10 ~30 C.30~50 ~100 6.利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过的性质，借以达到分离的一种方法是（）。 A.透析法 B.盐析法 C.离心法 D.萃取法 7.液体在一个大气压下进行的浓缩称为（）A. 高压浓缩 B.减压浓缩 C. 常压浓缩 D.真空浓缩 8.下列不属于氨基酸类药物的是（） A.天冬氨酸 B.多肽 C.半胱氨酸 D.赖氨酸 9.下列不属于多肽、蛋白质含量测定方法的是（） A.抽提法 B.凯氏定氮法 C.紫外分光光度法 D.福林-酚试剂法 10.下列属于脂类药物的是（）。 A.多肽 B. 胆酸类 C.胰脂酶 D 亮氨酸 11.（）抗生素的急性毒性很低，但副作用较多，另外，对胎儿有致畸作用。 A.四环素类 B.大环内酯类 C.氨基糖苷类 D. β-内酰胺类 12.生产抗生素类药物发酵条件不包括（）。 A.培养基及种子 B.培养温度及时间及通气量 D.萃取及过滤 13.下列不属于动物细胞培养方法的是（）。 A.贴壁培养 B.悬浮培养 C.直接培养 D.固定化培养 14.抗生素类药物生产菌种的主要来源是（）。 A.细菌 B.放线菌 C.霉菌 D.酵母菌 15.将霉菌或放线菌接种到灭菌后的大米或小米颗粒上，恒温培养一定时间后产生的分生孢子称为（）。 A. 米孢子 B.种子罐 C.发酵 D. 试管斜面

技术预研

第10章技术预研 (1) 10.1 介绍 (1) 10.2 技术预研规程 (2) 10.2.1目的 (2) 10.2.2角色与职责 (2) 10.2.3启动准则 (2) 10.2.4输入 (2) 10.2.5主要步骤 (2) [Step1] 制定计划 (2) [Step2] 开展技术预研 (2) [Step3] 撰写技术预研报告 (2) [后续活动] (3) 10.2.6输出 (3) 10.2.7结束准则 (3) 10.2.8度量 (3) 10.3 实施建议 (3)

第10章技术预研技术预研（Technical Pre-Research, TPR）是指在立项之后到开发工作完成之前的时间内，对项目将采用的关键技术提前学习和研究，以便尽可能早地发现并解决开发过程中将会遇到的技术障碍。技术预研过程域是SPP模型的重要组成部分。本规范阐述了技术预研的规程，该规程的“目标”、“角色与职责”、“启动准则”、“输入”、“主要步骤”、“输出”、“完成准则”和“度量”均已定义。本规范适用于国内IT企业的软件研发项目。建议用户根据自身情况（如商业目标、研发实力等）适当地修改本规范，然后推广使用。 10.1 介绍在产品开发过程中，技术问题可能会层出不穷。如果一点技术障碍都没有遇到，要么是开发人员的技术水平实在太高了，要么是项目的技术含量实在太低了，这类情况比较少见。一般说来，在设计或实现阶段遇到了技术障碍，才去攻克问题，其代价通常比较高。因为其他人的工作可能会被阻塞，已经投入的不少资源将被闲置。最糟糕的是，如果此技术障碍无法攻克，不得已要改变技术方案、重新设计系统，那么不仅浪费了人力、财力、时间，处理不好还会使开发队伍陷入混乱状态。所以开展技术预研工作至少有两大好处： ?帮助开发人员更好地进行需求开发、系统设计和程序设计。 ?防止开发进程被技术障碍打断，导致大量的相关工作被阻塞。技术预研的流程如图10-1所示。图10-1 技术预研流程技术预研过程中产生的主要文档有： ?《技术预研计划》，模板见[SPP-TEMP-TPR-PLAN]。 ?《技术预研报告》，模板见[SPP-TEMP-TPR-REPORT]。

实验动物采血指南

实验动物采血指南采血方法的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度，必须采取动脉血液。采血时要注意：⑴采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃为宜；⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒；⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 不同动物采血部位与采血量的关系

(一)小鼠、大鼠采血法 1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm，让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查)，可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8～1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。活体

从动物血液中提取基因组DNA方法的比较研究_逄洪波

第28卷第4期2005年12月辽宁师范大学学报(自然科学版) Jour nal of Liao ning N ormal U nive rsity(N atural Science Edition) Vo l.28　No.4 Dec.　2005 文章编号:1000-1735(2005)04-0457-04 从动物血液中提取基因组DNA方法的比较研究逄洪波1,2,　陈永燕1,　张恒庆2,　周其兴1 (1.大连大学生物工程学院,辽宁大连　116622;2.辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连　116029) 摘　要:从血液中提取基因组DNA的传统方法是先得到淋巴细胞,再用蛋白酶K、SDS消化,然后用酚、氯仿抽提,乙醇沉淀.CTAB法提取基因组DNA多应用于植物和微生物,从全血中提取基因组DNA报道甚少.采用改良的CTAB 法从全血中提取基因组DNA,并以传统方法和TAKA RA Blood Genome DNA Extraction Kit作对照.结果表明: CT AB法可以得到大量的、较完整的基因组DNA,并且纯度达到1.8～2.0,可以满足PCR扩增和限制酶切等实验的要求. 关键词:血液;CT A B法;DN A提取;PCR分析中图分类号:R3 文献标识码:A 获得基因组DNA是进行后续分子生物学研究的基础,寻找合适的DNA提取方法是开展大多数分子生物学实验所面临的第一个问题.从血液中提取基因组DNA的方法大都是先得到淋巴细胞,再用蛋白酶K、十二烷基硫酸钠(SDS)消化,然后用酚、氯仿抽提,乙醇沉淀.该种方法的不足之处在于程序繁琐、耗时,而且蛋白酶K也比较昂贵.CTAB裂解提取法常用于新鲜植物组织的DNA提取.近年来, C TAB法也逐步应用于动植物标本和化石DNA的提取[1].刘波等[2]用C TAB法分别对稻蝗(Ox ya)的干标本和酒精浸泡标本的DNA进行提取并获得了满意结果.Yang等[3]用3种方法提取了Proboscide-an的化石和馆藏标本的DNA,也认为用C TAB法提取化石DNA的成功率最高.但是用CTAB方法从动物全血中提取基因组DNA报道甚少.本研究的目的在于寻找一种可以获得高质量,但耗费时间少、程序简单、节约药品的血液DNA提取方法. 1　材料和方法采集新鲜的家兔全血(静脉血)[4,5],加入抗凝剂柠檬酸钠(ACD)[6],选用3种不同方法从全血中提取基因组DNA,并经琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收光谱和PCR扩增来检测提取的DNA的纯度和浓度[7]. 1.1　血液标本的采集对同一只健康家兔进行耳缘静脉取血,分装成每管0.5m L,冻存于-20℃. 1.2　DNA提取 1.2.1　试剂　4×C TAB提取液(0.1M Tris-H Cl(pH8.0),0.5M NaCl,0.5M EDTA,4g CTAB,1g PVP);氯仿-异戊醇(24∶1);异丙醇;抗凝剂ACD[8];磷酸盐缓冲液(PBS)[8];抽提缓冲液[8];蛋白酶K; T ris饱和酚等. 1.2.2　仪器　台式冷冻离心机(Biofuge prim o R15000rad/m in);紫外透射分析仪(S TS型,上海长明光学电子仪器厂);稳压稳流电泳仪(DYY—Ⅲ2型,北京六一仪器厂);紫外分光光度计(日本分光株式Jasco公司,V—560型). 1.2.3　方法 1.2.3.1　改良C TAB法　采用4×CTA B(Doy le&Doy le,1987)法并做适当的修改,具体步骤如下:在装有血液的2m L离心管中加入500μL预热的4×C TAB提取液和2μLβ-巯基乙醇,使材料完全分收稿日期:2005-07-11 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30300021) 作者简介:逄洪波(1980-),女,辽宁盖州人,辽宁师范大学硕士研究生. 周其兴(1971-),男,四川资中人,大连大学副教授,博士.E-mail:dlzhqx@https://www.wendangku.net/doc/073518424.html,.

常用实验动物

常用实验动物 1、小鼠喜欢群居，怕热，高温容易中暑雌雄性小鼠交配后10~12小时，在雌性小鼠阴道口会形成白色的阴道栓主要解剖学特性消化系统：食管内壁有角质化鳞状上皮，利于灌胃；有胆囊；胰腺分散，色淡红，似脂肪组织。生殖系统：雌性小鼠为双子宫型，呈“Y”形，卵巢不予腹腔相通，无宫外孕。骨髓为红骨髓，无黄骨髓，终身造血。皮肤无汗腺。小鼠常用品种、品系１. 近交系小鼠 C3H：1975年从美国引进，野生色毛； ? C57BL/6：1975年从日本引进，黑色毛； ? BALB/c：Bagg1913年获得小鼠白化株，经近亲繁殖20代以上育成，毛色为白色； ? DBA：分为DBA/1和DBA/2两个品系，1977年由美国实验动物中心引进，毛色均为浅灰色。 2、封闭群小鼠 ①KM小鼠：我国使用量最大的远交种小鼠，白色，抗病、适应力强，繁殖、成活率高。 ②ICR：1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国，白色，其显著特点是繁殖

力强。 ③LACA ：1973年由英国实验动物中心引入我国，白色。其实是小鼠改名而成。 ④NIH ：由美国国立卫生研究院培育，白色，繁殖力强，幼仔成活率高，雄性好斗 3、突变系 1、裸鼠：第11对染色体上的裸基因（nu）导致无毛裸体、无胸腺 2、SCID小鼠：第16对染色体上的Scid隐性基因突变基因导致T、B淋巴细胞联合免疫缺陷．外观与普通小鼠差别不大，被毛白色，体重发育正常 3、快速老化模型小鼠：4~6月龄以前与普通小鼠的生长一样，4~6月龄以后迅速出现老化症状。如心、肺、脑、皮肤等器官老化，出现骨质疏松和老化淀粉样变。侏儒症：比正常小鼠体型小，缺少生长素和促甲状腺素，用于内分泌研究。小鼠在医学、生物学的应用 1、重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生一系列的子系，是遗传分析的重要依据，用作基因定位及其连锁关系的研究 2、提供自然的动物模型 2、大鼠染色体数2n=42 喜独居，喜啃咬，性情较凶猛、抗病力强，对新环境适应力强，但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起食仔或抽搐；湿度低于40%易发生环尾巴症。行为表现多样，情绪反应敏感，易接受通过正负强化进行的多种感觉指令的训练雌性2.5月龄达到性成熟，具有产后发情、产后妊娠的特点。寿命2.5～3年。解剖学特征

产品预研流程(谷风文书)

定义产品预研：产品在市场前景尚不明确、技术难度较大且暂无良好解决方案、较难发挥公司总体营销研发能力或以上原因任居其一，但同时该产品与公司战略相符且有可能成为市场新的增长点，此时产品进入预研究阶段，即为产品预研。技术预研：为增强公司产品竞争力，充实技术货架，解决现有产品中的关键技术或以技术突破来孵化新产品而进行的关键技术研究。概念受理阶段公司鼓励员工根据公司的产品策略、产品路标规划和市场需求，以及行业动态等提出产品或技术新概念。

调研阶段所提出的概念受理后，选择和落实为完成该调研阶段任务所需的组成员，调研组的工作以周为单位向预研相关负责人进行汇报，必要时需要抄送给相关领导。预研相关负责人对调研组的工作进行监控，在必要的时候进行调整。调研的成果，以书面或电子档文件的方式输出评审材料（可行性报告，预计的研发投入，市场背景分析结果等）。研究阶段预研立项评审通过后，预研部和资源部门一起组建项目组，确定项目开发所需的项目成员。跟项目组签定预研项目合同，并安排项目总体计划，项目组根据预研项目合同和计划开展项目活动，保证合同规定任务的保时保质保量完成。成果发布阶段预研成果发布后，进行初步的成果转化的讨论，比如新产品规划中是否可以采用，是否需要调整产品路标等，并制定出可行的转化策略。 1、开发和预研工作的异同。产品开发产品预研技术开发目的根据项目任务书中要求，保证产品包在财务和市场上取得成功验证或引导客户的潜在需求，把握正确的市场方向和抓住市场机会开发公共技术和平台，之符合用户产品的业务目标

市场针对公司近期的目标市场和客户，有明确的市场需求着眼公司未来发展和未来市场，一般在一年内不产生大量销售，市场前景不明确满足公司当前产品对技术的需求技术难度和风险相对较小技术难度较大风险较大相对较小质量达到商用要求关注核心功能不作商用要求达到商用要求客户有明确的客户可能还没有明确客户产品对技术有明确的需求从上表，我们能够清晰的了解到它们之间的差异，就不再赘述了。 2、预研项目的生命周期预研项目的生命周期分为：概念阶段、计划阶段、开发阶段和验收阶段。与产品开发项目的阶段划分，在后期有着显著的差异。因此，切不可以开发项目的生命周期来套用到预研项目上，否则将大大增加研究费用，并且无法使预研任务得到聚焦。

良好的实验动物给药和采血规范指南

A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood,Including Routes and Volumes 良好的实验动物给药与采血(包括途径与体积)规范指南 Karl-Heinz Diehl1, Robin Hull2, David Morton3, Rudolf Pfister4, Yvon Rabemampianina5, David Smith6,*, Jean-Marc Vidal7 and Cor van de V orstenbosch 8 1Aventis, PO Box 1140, D35001 Marburg, Germany 德国马尔堡市35001区1140信箱安万特公司 2N I B S C, Blanch Lane, South Miimms, Potters Bar, Hertfordshire EN6 3QG 英国赫特福德郡EN6 3QG波特斯巴镇South Miimms布兰奇道英国国家生物制品检定所 3The University of Birmingham, Medical School, Edgbaston, Birmingham B15 2TT 英国伯明翰市B15 2TT艾吉马斯顿伯明翰大学医学院 4Novartis Pharma AG, CH-4002 Basel, Switzerland 瑞士巴塞尔CH-4002诺华制药公司 5Centre de Recherche Pfizer, Etablissement d’Amboise, Z1 Poce′-sur-Cisse-BP 159 37401 Amboise Cedex, France 法国Amboise Cedex Z1 Poce′-sur-Cisse-BP 159 37401 Etablissement d’Amboise 辉瑞研究中心 6AstraZeneca R&D Charnwood, Bakewell Road, Loughborough, Leics LE11 5RH 英国莱斯特郡LE11 5RH拉夫堡市贝克韦尔路Charnwood阿斯利康研究中心 7Aventis, 102 Route de Noisy, 95235 Romainville Ce′dex, France 法国Romainville Ce′dex 95235 Noisy路102号安万特公司 8N V Organon, PO Box 20, 5340 BH Oss, Netherlands 荷兰BH Oss5340 20号信箱欧加农公司 Key words: blood volumes; blood removal; administration substances; laboratory animals; refinement、关键词:血容量;采血;给药;实验动物;简化 This article is the result of an initiative between the European Federation of Pharmaceutical Industries Associations (EFPIA) and the European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECV AM)、Its objectives are to provide the researcher in the safety evaluation laboratory with an up-to-date, easyto-use set of data sheets to aid in the study design process whilst at the same time affording maximum welfare considerations to the experimental animals、该文章为欧盟制药工业协会(EFPIA)与欧洲替代动物实验方法验证中心(ECV AM)之间的初步结果。其目的在于为安全性评价实验室的研究者提供最新的易于使用的数据库以帮助研究设计过程,同时最大可能地考虑到实验动物的福利。 Although this article is targeted at researchers in the European Pharmaceutical Industry, it is considered that the principles underpinning the data sets and refinement proposals are equally applicable to all those who use these techniques on animals in their research, whether in research institutes,universities or other sectors of industry、The

动物血中超氧化物歧化酶的提取和活性测定

动物血中超氧化物歧化酶的提取和活性测定原理超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，简称SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。它作为生物体内重要的自由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离子，在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。离子(02-)是人体氧代谢产物，它在体内过量积累会引起炎症、肿瘤、色斑沉淀、衰老等疾病，超氧阴离子与生物体内许多疾病的发生和形成有关。由于SOD能专一消除超氧阴离子(O2 -)而起到保护细胞的作用，SOD作为一种药用酶，具有广阔的应用前景，并引起了国内外医药界、生物界和食品界的极大关注。按金属辅基成分的不同可分成3种类型。最常见的一种含有铜锌金属辅基(CuZn-SOD)，主要存在于真核细胞的细胞质中，在高等植物的叶绿体基质、类囊体内以及线粒体膜间隙也有存在，CuZn-S0D 酶蛋白的分子量约为3.2×104，纯品呈蓝绿色，每个酶分子由2个亚基通过非共价键的疏水基相互作用缔合成二聚体。每个亚基(肽链)含有铜、锌原子各一个，活性中心的核心是铜。第二种含有锰离子(Mn-SOD)，主要存在于真核细胞的线粒体和原核细胞中，在植物的叶绿体基质和类囊体膜上也有存在，纯品呈粉红色，由4条或2条肽链组成。第三种是Fe-S0D，过去一直认为只存在于原核细胞中，近来发现有一些真核藻类甚至某些高等植物中也有存在。Fe-SOD纯品呈黄色或黄褐色，由2条肽链组成，多数情况下每一个二聚体中含有一个Fe原子。 l969年，McCord和Fridovich第一次从牛血中提纯到超氧化物岐化酶。自然界中SOD分布极广，其含量随生物体的不同而不同，即使同一种生物的不同组织或同一组织的不同部位，其SOD的种类和含量也有很大差别。迄今为止人们已从细菌，真菌、原生动物。藻类、昆虫、鱼类、植物和动物等各种生物体内分离得到SOD。为拓宽提取SOD的原料，筛选或基因过程开发产SOD量较高的菌株。目前，研究开发最多的资源还是从动物血液、动物组织中制备提纯SOD。 SOD的活力测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -，利用SOD分解而间接推算酶活力。在化学方法中，最常用的有黄嘌呤氧化酶法，邻苯三酚法，化学发光法，肾上腺素法，NBT-还原法，光化学扩增法，Cyte 还原法等。其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD，但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。Cyte还原法用于Mn-SOD活力测定结果稳定，重复性好。但专一性和灵敏度不够理想，而且需要特殊仪器，实际应用受到限制。

项目二十七常用实验动物的接种和采血方法

项目二十七常用实验动物的接种和采血方法一、接种方法 (一) 皮下注射皮下组织疏松的部位都可皮下注射。一般小鼠在腹部两侧，豚鼠在腹部或大腿内侧，家兔取背部，大腿内侧或耳根部皮下注射。注射部位消毒后，左手提起皮肤，右手持注射器将针头水平刺入皮下，针头摆动无阻力，说明已进入皮下，慢慢注入，注射部位随即隆起。注射完毕，用棉球压住针刺处，再拔出针头。小鼠注入量一般为0.2～0.5ml。家兔或豚鼠注入量为0.5～1.0ml． (二) 皮内注射先将动物注射部位的毛剪去，消毒，然后左手绷紧皮肢，针头斜面向上，紧贴皮肤表层刺入，然后向上挑起再稍刺入，缓慢注射。若注入皮内，注射部位马上有小泡隆起。皮内注射量一般为0.1～0.2ml。 (三) 肌内注射应选择肌肉发达、无大血管通过的部位。一般多选臀部、大腿内侧或外侧。针头直接刺入肌肉，回抽针栓如无回血即可注射。家兔等大动物注射量不超过2ml。 (四) 腹腔注射小白鼠腹腔注射时，用右手拉鼠尾，左手食指和拇指捏住脑背部皮肤，翻转鼠体，把鼠尾和一侧的后腿夹于小指和无名指之间，使动物处于头低位，使内脏移向上腹，右手持注射器在下腹部左侧或右侧刺入皮下，沿皮下朝头部方向进针0.5～1.0cm，再以45°角刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液，尿液或血液即可缓缓注入。家兔等较大动物注射，应先固定，于腹部腹中线旁侧1cm处进针。小鼠注射量一般为0.5～1.0ml，家兔或豚鼠为5ml。 (五) 静脉注射 1．家兔将家兔固定，用酒精棉球轻轻按摩耳翼，压迫耳根部静脉，使耳缘静脉扩张。用左手拇指与中、食指抓住耳尖部，从耳尖部边缘静脉平行进针，试推进少量注射液，如果觉得没有阻力，局部也没有隆起，表示已进入静脉，将注射液缓缓注入。若失败，再逐步向耳根部移位重新注射。注射完毕，用棉球压住针眼处，拔出针头。注射部位一般选用耳外缘静脉，易固定，表浅；耳内缘静脉深，不易固定，故不常用。 2．小鼠于尾部两侧静脉注射。固定小鼠使尾巴露出，置45℃～50℃温水浸泡1～2min，使尾部静脉扩张。取出尾巴，擦干消毒，在末端1/3或1/4处用左手捏住尾巴，右手持注射器，针头与静脉平行缓慢进针，试注入少许注射液，如无阻力，皮肤不发白，表示针头刺入静脉，否则应更换部位重扎。注射时多选用4 1/2# 针头。最大注射量为0.5ml。二、采血方法 (一) 小鼠采血方法 1．断尾采血将小鼠固定，露出尾巴，用手轻揉或浸泡于45℃温水中数分钟或用酒精棉球涂擦，使尾血管充血。将鼠尾擦干，用剪刀剪去尾尖1～2mm。然后用手指从尾根部向尾尖捋，血即从断端流出。采血结束后消毒止血。此法采血每只小鼠可采十余次，每次可采血约0.1ml。 2．眼眶后静脉丛采血左手抓注鼠耳间头部皮肤，将头按在桌面或鼠笼上，轻压颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难，使眼球充分突出，眶后静脉丛充血。右手持长为7～10cm 玻璃滴管(毛细管端内径1～1.5mm，长约1cm)或7# 针头的1ml 注射器，在内眼角与眼球之

制药工艺期末试卷带答案

《制药工艺学》试卷(A卷) 班级：学号：姓名：得分：一、单选题。（每题2分，共30分） 1.GMP是（）。 A.药品生产质量管理规范 B.药品经营质量管理规范 C.新药审批办法 D.标准操作规程 2.药品是特殊商品，特殊性在于（）。 A.按等次定价 B.根据质量分为一、二、三等 C.只有合格品和不合格品 D.清仓在甩卖 3.终点控制方法不包括（）。 A.显色法 B. 计算收率法 C.比重法 D. 沉淀法 4.温度对催化剂活性的影响是（）。 A.温度升高，活性增大 B.温度升高，活性降低 C.温度降低，活性增大 D.开始温度升高，活性增大，到最高速度后，温度升高，活性降低 5.中试一般比小试放大的位数是（）倍。 A.5~10 B.10~30 C.30~50 D.50~100 6.利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过的性质，借以达到分离的一种方法是（）。 A.透析法 B.盐析法 C.离心法 D.萃取法 7.液体在一个大气压下进行的浓缩称为（） A. 高压浓缩 B.减压浓缩 C. 常压浓缩 D.真空浓缩 8.下列不属于氨基酸类药物的是（） A.天冬氨酸 B.多肽 C.半胱氨酸 D.赖氨酸 9.下列不属于多肽、蛋白质含量测定方法的是（） A.抽提法 B.凯氏定氮法 C.紫外分光光度法 D.福林-酚试剂法 10.下列属于脂类药物的是（）。 A.多肽 B. 胆酸类 C.胰脂酶 D 亮氨酸11.（）抗生素的急性毒性很低，但副作用较多，另外，对胎儿有致畸作用。 A.四环素类 B.大环内酯类 C.氨基糖苷类 D. β-内酰胺类 12.生产抗生素类药物发酵条件不包括（）。 A.培养基及种子 B.培养温度及时间 C.PH及通气量 D.萃取及过滤 13.下列不属于动物细胞培养方法的是（）。 A.贴壁培养 B.悬浮培养 C.直接培养 D.固定化培养 14.抗生素类药物生产菌种的主要来源是（）。 A.细菌 B.放线菌 C.霉菌 D.酵母菌 15.将霉菌或放线菌接种到灭菌后的大米或小米颗粒上，恒温培养一定时间后产生的分生孢子称为（）。 A. 米孢子 B.种子罐 C.发酵 D. 试管斜面二、多选题（每题3分，共45分） 1.世界化学制药工业发展趋向为（） A.高技术 B.高投入和高效率 C.高产量 D.高质量 E.高速度 2.下列属于化学制药生产工艺路线改革的有（） A.原料的改革 B.寻找反应薄弱环节 C.反应后处理方法的影响 D.新技术的应用 3.下列哪些是搅拌的作用（） A.加速传质 B.加速传热 C.加速反应速度 D.增加副反应 4.中试放大的基本方法包括（） A.经验放大法 B.相似放大法 C.数学模拟法 D.理论计算法 5.化学灭菌法有（）灭菌法。 A.环氧乙烷 B.湿热 C.表面 D.热空气 6.常用的分离方法有（）。 A.离心法 B.沉淀法 C.回流法 D.过滤法 7.生物药物的主要来源有（） A.动物脏器和植物 B.血液、分泌物和其他代谢产物 C.海洋生物 D.微生物

(完整版)各动物采血方法

各种动物采血方法及注意事项 1牛的静脉采血 1.1牛颈外静脉采血颈外静脉位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间凹窝处的颈静脉沟内。牛站立，助手保定好头部，使头部稍前伸上仰并稍偏向对侧，颈部稍有弯曲，颈静脉暴露出来，局部剪毛，消毒，术者稍弓腰蹲于颈静脉暴露的一侧，用左手拇指或食指与中指在颈静脉沟稍下方（近心端）压迫静脉管，使颈静脉充盈怒张，部分牛由于膘肥看不清，此时就要用左手食指和中指点击颈静脉沟，有跳动，再按压，用右手食指和中指探摸跳动的部位，有波动和弹性的管状物，颈为颈外静脉。右手拇指、食指、中指夹住16号针头，对准颈外静脉，并使针头与皮肤接近垂直（75°角），用腕力迅速将针头扎进皮肤，穿入血管，血液会喷射出来，即可采血，停止采血后先松左手，后拔针头，用消毒棉球压迫采血部位1min。 1.2牛尾静脉采血牛自然站立保定，术者站于牛的正后方，左手抓住牛尾中段用力抬起，使之与地面平行，右手触摸尾椎前段腹侧凹陷沟（大约在尾后下方4-5cm处），消毒后持12号针头与尾椎纵轴成垂直方向，依靠腕力快进针0.5-1cm后血液即喷射出来。 2马的静脉采血马的颈静脉比较浅显，位于静脉沟内，术者用左手拇指或食指和中指横压颈下1/3与颈中1/3处的颈静脉沟，使脉管充盈怒张，右手持16号针头沿颈静脉在压迫点前方与皮肤成45°角用腕力迅速刺入皮肤血管内，感到空虚无阻力即见回血后，再沿脉管向前进针使针头

靠近皮肤靠近皮肤以减小其间的角度，近似平行地将针头再伸入血管内1-2cm，血液流出，即可采血。停止采血后，先松左手，后拔出针头，并用消毒棉球压迫采血点2min止血消毒。 3猪静脉采血 3.1耳静脉采血用捕猪器将猪站立保定，耳静脉局部常规消毒处理，助手用手指捏压耳根部静脉管处或用胶带于耳根部结扎，使静脉充盈，怒张，也可用酒精棉球反复擦静脉血管使之充血，血管怒张，或用手指弹叩引起血管充盈。术者用左手拇指和食指把持耳尖，将耳拉直托平，用中指、无名指和小指在耳下面向上托，使采血进针部位稍高，右手持一次性血样采集针沿静脉管使针头与皮肤呈30°角，向远心端刺入血管，有空虚感无阻力时即进入血管。回血，立即插入负压管采血。采血结束后，先松开握耳根的手，再拔针头，干棉球压迫采血处1min，伤口不出血为止。 3.2前腔静脉采血：前腔静脉由左右两侧的颈静脉与腋静脉在第一对肋骨的胸腔入口的气管腹侧面汇合而成。采血部位在第一肋骨与胸骨柄结合处的前方，由于左侧靠近膈神经，易损伤，故多于右侧进行采血，针头刺入方向呈近似垂直稍向中央及胸腔倾斜，刺入深度依猪体大小2-6cm，针头7-12号。站立保定时进针部位在右侧，于耳根至胸骨柄的连线上，距胸骨端1-3cm处，术者拿连接针头的注射器，稍斜向中央刺向第1肋骨间胸腔入口处，边刺边抽动注射器活塞，见回血即可采血，仰卧保定时胸骨柄向前突出，并于两侧第1肋骨结合处的直前侧方呈两个明显的凹陷窝称为前腔窝：是第1肋骨与胸骨柄

常用的五种动物细胞培养方式

?一、半连续式培养 1.半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。采用机械搅拌式生物反应器系统，悬浮培养形式。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，从中取出部分培养物，再用新的培养液补足到原有体积，使反应器内的总体积不变。这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基，让其生长至一定的密度，在细胞生长至最大密度之前，用新鲜的培养基稀释培养物，每次稀释反应器培养体积的1/2~3/4，以维持细胞的指数生长状态，随着稀释率的增加培养体积逐步增加。或者在细胞增长和产物形成过程中，每隔一定时间，定期取出部分培养物，或是条件培养基，或是连同细胞、载体一起取出，然后补加细胞或载体，或是新鲜的培养基继续进行培养的一种操作模式。剩余的培养物可作为种子，继续培养，从而可维持反复培养，而无需反应器的清洗、消毒等一系列复杂的操作。在半连续式操作中由于细胞适应了生物反应器的培养环境和相当高的接种量，经过几次的稀释、换液培养过程，细胞密度常常会提高。 2.半连续式特点： ·培养物的体积逐步增加； ·可进行多次收获； ·细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在一较高的浓度水平，培养过程可延续到很长时间。该操作方式的优点是操作简便，生产效率高，可长时期进行生产，反复收获产品，可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的水平。在动物细胞培养和药品生产中被广泛应用。二、连续式培养 1.连续式培养是一种常见的悬浮培养模式，采用机械搅拌式生物反应器系统。该模式是将细胞接种与一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基；同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。理论上讲，该过程可无限延续下去。