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百合多糖的提取及含量测定方法

百合多糖的提取及含量测定方法

惠秋沙

(山东中医药大学,山东济南250014)

摘要:百合多糖是百合主要的有效成分,在药用和食用方面有着广泛的应用前景,综述了百合多糖的提取和含量测

定方法。

关键词:百合;多糖;提取;含量测定

中图分类号:TS241

文献标志码:A doi :10.3969/jissn.1671-9646(X ).2011.08.026Extraction and Content Determination of Lily Polysaccharide

Hui Qiusha

(Shandong University of Traditional Chinese M edicin ,Ji'nan ,Shandong 250014,China )

Abstract :The lily polysaccharide is the main effective component in lily,it has the widespread application prospect in for medicinal purposes and the edible aspect.This paper makes a summary to the lily polysaccharide extraction and the content determination method.

Key words :lilium brownii ;polysaccharides ;extraction ;content determination

百合是百合科百合属的多年生草本球根植物,百合品种很多,大多供观赏,少数品种可作为蔬菜食用和药用。百合味甘、微苦,性微寒,入心肺经,化学成分有淀粉、蛋白质、脂肪和活性多糖等,具有润肺止咳、清心安神的作用。水溶性成分多糖还能够作用于机体的细胞免疫系统,促进细胞免疫功能[1-2]。百合多糖的提取与测定已有很多报道,现对其进行下归纳总结。1

百合多糖的提取方法

1.1回流提取

热水回流提取法是目前最常用的方法。一般可将百合破碎后置于热水中浸渍,采用回流等辅助提取,然后经乙醇沉淀离心获取,提取的最佳工艺为:温浸温度65℃,溶剂体积15倍量,浸提3次,浸提时间4h [3]。该法在提取中方法简便、设备要求低、成本低廉,但操作时间长且提取效率低。1.2超声提取法

超声波提取过程是一个物理过程,利用超声波产生的强烈振动、高加速度、强烈的空化效应和搅拌作用等加速药物有效成分进入溶剂,从而提高了提取效率,缩短了提取时间,节约了溶剂,低温提取有利于有效成分的保护,是提取天然产物有效成

分的较好手段。超声波法提取百合:称取一定量的百合粉末,加入蒸馏水在沸水浴中回流提取3次,滤去百合渣,合并提取液,减压浓缩至原溶液的25%,加入5倍量无水乙醇沉淀,得到多糖粗品。将多糖粗品溶解,采用Sevag 法除去蛋白质,得到百合多糖[4]。利用此方法对多糖进行提取,可以提高产率,是值得推广的方法。1.3酶法

滕利荣等人[5]研究了复合酶法提取百合多糖的最佳条件,发现复合酶法能显著提高百合多糖的提取率,可达31.03%。酶法选用纤维素酶、果胶酶、胰酶按2∶2∶1组成的复合酶系,提取百合多糖的最佳条件为:浸提液pH 值7.0,浸提温度50℃,酶促反应时间90min 。复合酶法提取百合多糖具有条件温和、杂质易除、提取率高和生物活性高等特点。利用酶法提取百合的研究很少,该方法虽然提取率高,但因为酶的特点具有很多局限性。如提取条件易受酶的种类、温度、pH 值等的影响。2

百合多糖的含量测定

2.1滴定法

由于多糖易分解为还原性单糖,故可采用滴定法对其进行定量测定。一般地可通过将多糖水解为

收稿日期:2011-05-25

作者简介:惠秋沙(1952-),女,江苏人,副教授,研究方向:药物分析、中药复方及保健食品。

文章编号:1671-9646(2011)08-0100-02

第8期(总第253期)农产品加工·学刊

No.82011年8月Academic Periodical of Farm Products Processing Aug.

2011年第8期单糖后以次甲级蓝为指示剂,滴定碱性酒石酸铜溶液,经计算得到其含量。近年来,也有学者[6]采用间接碘量法测定药物中总多糖的含量,试验证明,该法与苯酚硫酸法所得的结果基本一致,且操作简单合理,适合用于常量分析。但多糖在百合中含量较少,提取率也不高,此法只适用于理论研究。2.2紫外分光光度法

紫外分光光度法是目前测定百合多糖最常用的方法,且回收率高、误差较小、灵敏度和准确度较高。该法以葡萄糖为对照品,样品被水解为单糖后经显色剂显色,并在一定波长下测定其含量,常用的测定方法有苯酚硫酸法[7]、蒽酮硫酸法[8]和DNS [9]法,其中蒽酮硫酸法最易受蛋白的影响,在测多糖时需要进行脱蛋白处理,所以在操作过程中相对苯酚硫酸法繁琐。

2.3高效液相色谱法

高效液相色谱法具有高效、高灵敏度、应用范围广、分析速度快及载液流速快等特点,目前,高效液相色谱法已经被广泛的运用到中药中多糖的含量测定。

2.4薄层色谱法

薄层色谱法可用于测定多糖的含量[10],该法对仪器要求不高,操作方便,但近年来已被测定更准确的紫外分光光度法和操作更简单的高效液相色谱法所代替。

2.5毛细管电泳法

毛细管电泳法是一种新兴的测定药物多糖含量的方法[11]。现代试验证明,该法用于多糖的组成分析,精密度高,操作方便,可有效提高其分析效率及成果。3

结论与展望

(1)在百合多糖的提取中,沸水回流提取法是

传统的方法,超声辅助提取和酶提取法是最近刚兴

起的方法,因其提取效率高,不会破坏天然产物的有效成分,将会被越来越多地运用。在酶提取法中,对于百合多糖的提取,酶还可以加入其他的酶,或是改变酶的比例来进行有效提取。超声辅助提取可以将超声波提取与微波辅助提取结合起来,这样能更进一步地提高提取率。

(2)测定多糖含量的方法亦有很多种,其中应用最为广泛的是紫外分光光度法,也是最常用的测定方法。近年来,高效液相色谱法、毛细管电泳法在测定过程中的优点也逐渐显露出来。这些新兴的方法将会被用于百合多糖含量的测定实验与研究中来,应用前景十分广阔。参考文献:

张继敏,匡永清,吴少华,等.百合多糖对小鼠免疫功能的影响[J].中国中医药科技,1996(增刊):15-17.苗明三,杨林莎.百合多糖免疫兴奋作用[J].中药药理

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[2][3][4][5][6][7][8][9][10][11]惠秋沙:百合多糖的提取及含量测定方法

2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会,拟定于2011年9月23-25日在重庆举行,届时来自全国农产品加工行业管理的各级领导,中外著名专家学者,科研院所、大专院校,龙头企业负责人将参加大会。

大会将举办主题报告、专题研讨、博士论坛、论文交流、院企互动、成果推介、机械设备及产品展览,充分展示全国农产品贮藏加工科技与食品安全新理念、新技术、新装备和现代物流等新成果,为行业交流、产学研结合和科技推广搭

建重要的舞台。

主办单位:中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会、西南大学研究生部。

承办单位:西南大学食品科学学院、企业集团。

支持单位:重庆市科

委、重庆市农委、重庆市商委、重庆市技术监督局、重庆市食品与药品监督管理局、重庆市卫生监督所、重庆出入境检验检疫局。

联系人:赵竹娟、雷德君邮箱:yflaiyi822@http://www.wendangku.net/doc/07ca172684254b35effd34be.html 电话:023-********

传真:023-*******

2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛

9月23日—25日

重庆

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