生物分析中溶血对检测的影响及其对策

生物分析中溶血对检测的影响及其对策

［摘要］液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术灵敏度高，选择性强，是目前体内药物分析的首选方法，但

LC-MS/MS生物分析中仍面临着溶血样品测定失败的难题。溶血导致的样品测定数据不准确，将直接影响药物的药动学研究，如何进行溶血样品的测定已成为各国监管机构和全球生物分析行业探讨的重点。本文从溶血样品产生的原因进行分析，将溶血对检测的影响和作用方式以及溶血效应的考察方法进行了概述，最后对溶血样品的测定方法和策略进行探讨。

［关键词］溶血；生物分析；串联质谱；色谱法，高压液相液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术是将分离能力强的液相色谱与能够提供结构信息的串联质谱结合在一起，具有灵敏度高、选择性强的特点。LC-MS/MS技术的应用，可获得丰富、有效的化合物结构信息，建立快速、高效的分析研究体系，目前已成为体内药物分析的首选方法。体内药物分析的样品一般为人血浆或血清样品，涉及被测样品少，样品复杂及干扰物质多等问题，在实际测定工作中，采集的血浆或血清样品常出现溶血的现象。一项针对欧洲分析协会的调查显示溶血为方法学验证失败的原因之一，目前也有不少文献报道了溶血样品测定失败的案例，溶血样品测定过程中面临

着溶血样品响应低、样品稳定性差以及基质效应等问题，导致阿托伐他汀、去氧肾上腺素、氟伏沙明等药物的检测失败。可见，溶血对测定的影响成为体内药物分析领域中亟待解决的难题，同时也受到了各国监管机构的广泛关注。中国药典2015版《生物样品定量分析指导原则》指出“除正常基质外，还应关注其他样品的基质效应，例如溶血或高血脂的血浆样品等”。欧洲药品管理局（EMA）同样要求考察溶血样品的基质效应。而巴西国家卫生监督局（ANVISA）的要求则更加明确，基质效应需分析八个不同来源的样品，包括4个正常血浆样品、2个脂血样品以及2个溶血样品。与此同时，美国政府在近年的白皮书中也多次讨论溶血样品的测定问题。然而各国监管机构的要求都相对模糊，缺乏明确的做法和标准，因此溶血样品的检测仍面临着严峻的挑战，广大研究者应引起重视。本文结合溶血样品测定现状，对溶血样品测定失败问题进行全面分析和总结，并探讨了溶血测定失败的解决方案，从而保证生物分析结果的准确性。

溶血样品的产生溶血是指红细胞破裂，血红蛋白逸出释放到血浆或血清中。一项针对18项临床生物等效性（bioequivalency，BE）试验的10640个样品的调查显示，溶血样品为211个，占样品总量的1.98%。溶血会造成血浆或血清颜色和密度的改变，溶血血浆根据溶血程度不同颜色呈粉红色或红色；溶血的血浆中血红蛋白、胆红素、磷脂等生

理成分增加，血浆的密度发生改变。据报道，溶血的血浆中血红蛋白的含量大于200μg·mL-1，远大于非溶血血浆中血红蛋白的量。溶血可发生在体内和体外，造成溶血的因素也十分复杂。溶血的发生可能是患者疾病状态、生理状况等体内因素导致的；也可能是抽血所用针头太小、抽血速度过快、过度震荡以及离心时转速过快等体外因素导致的；转运、储存过程不当也会造成溶血。其中，体外因素是造成溶血的主要原因。临床试验的血浆或血清样品一般是在不同时间点采集的，涉及周期长，影响因素多，溶血样品的产生很难避免，因此研究人员需提前做好人员培训，密切关注血样采集的全过程，减少采集、离心、冻存及转移任一环节可能发生的溶血。

溶血对测定的影响溶血血浆或血清中许多生理成分明显增加，如血红蛋白、胆红素、磷脂等，这些成分可能会影响溶血样品中药物的检测。目前，许多文献就溶血样品检测失败的问题进行了相关报道。HUGHES等采用LC-MS/MS技术测定血浆中卡维地洛及其代谢物的浓度，原型药物卡维地洛可准确测定，而代谢物4-羟基卡维地洛和5-羟基卡维地洛测得的浓度显著降低，只有理论浓度的0.2%；测定奥氮平时，溶血样品较正常血浆样品出现明显的离子抑制现象，奥氮平和内标奥氮平-d3的响应降低约500倍，导致奥氮平和内标均无法测定；而阿托伐他汀的溶血样品内标附近会出现明显

的干扰峰，影响阿托伐他汀低浓度样品的定量。BERUBE等的研究表明，溶血样品中的血红蛋白会造成吗啡的氧化和降解。文献中CARTER等在进行沙丁胺醇方法验证时，发现可准确定量1%和2%溶血的血浆样品，无法准确定量5%溶血的血浆样品（1%溶血指血浆样品中破碎的红细胞的比率为1%，V/V）。可见溶血对药物测定的影响是广泛存在的，研究表明溶血还会影响血浆中肾上腺素、氟伏沙明、水杨酸、阿塞那平等药物的LC-MS/MS分析。通过以上研究发现，溶血可使目标分析物的响应下降，实测浓度偏低，溶血对药物测定的影响程度根据药物的性质及溶血程度的差异而不同，而溶血影响检测的作用方式也会根据药物性质的差异而不同。以下总结了几种溶血影响药物的LC-MS/MS分析的常见方式：（1）影响药物的稳定性，红细胞破裂释放的酶可能造成药物在溶血血浆中不稳定，研究表明激素、维生素、吗啡等在溶血血浆中稳定性受到影响；（2）影响与红细胞有高亲和力的药物，使测定浓度比实际浓度偏高，药物浓度可高数百倍，如轻微的溶血现象可使甲醋唑胺的浓度显著提高；（3）影响血浆结合率高的药物，细胞内液造成药物稀释，测定浓度比实际浓度偏低；（4）溶血使细胞生理成分增加，造成离子抑制或增强，基质效应显著，影响目标分析物的测定。因此，我们将基质中所含破碎红细胞对分析物定量的影响，统称为溶血效应。红细胞破碎导致的基质效应是溶血效应最主

要的表现方式，也是基质效应的一种特殊形式。同时，溶血效应也可表现在影响药物稳定性和响应等方面。溶血效应可能使药物检测的准确度、精密度不符合要求，最终导致研究数据被拒绝。特别是对于cmax和末端点，可能造成的浓度偏移或药物浓度-时间曲线点的缺失，均会严重影响药物药动学研究的数据计算，导致临床研究结果不完整。因此，

LC-MS/MS生物分析中应特别关注溶血样品的测定，在方法验证中应考察溶血效应。

溶血效应的考察在方法验证过程中，应进行溶血试验，考察溶血效应。一般可分为三步，首先考察目标分析物在溶血基质中是否稳定，是否需要更低的存储温度或添加稳定剂；其次进行溶血样品基质效应的考察，确定基质效应的大小；最后进行溶血试验，考察溶血质控样品的精密度、准确度和重现性。药物在溶血基质中是否稳定，应首先进行考察。若药物在溶血基质中不能保持稳定，则检测得到的数据不能反映试验中药物的真实浓度。研究者应考虑造成药物不稳定的因素，若为红细胞破裂释放的酶造成药物的不稳定的情况，可考虑添加酶抑制剂或其他稳定剂；若为溶血基质储存温度不当，也可考虑降低储存温度，从-20℃降到-80℃。该研究情况也应及时告知临床研究中心和生物分析实验室，保证样品采集和存储过程中的稳定性。其次，研究者应关注溶血导致的基质效应。溶血样品的基质效应可能是红细胞破碎释放的

内源性的物质如盐、脂质、磷脂等引起的。如何进行溶血样品基质效应的考察成为探讨的重点。通常通过向血浆中添加不同比例的红细胞破裂的全血来模拟溶血基质，溶血基质的制备方法因实验室而异。有的实验室通过反复冻融破裂红细胞；有的通过机械震荡的方式破碎红细胞；还有通过在-20℃或-70℃冷冻数小时的方式破碎全血中的红细胞。然后将目标分析物在溶血基质中的响应与非溶血基质或工作液的响应进行比较，进行基质效应因子的计算。除关注溶血导致的基质效应，还应关注溶血导致的其他问题，如干扰药物测定的杂质峰的出现，影响药物响应等，研究者可以通过溶血试验进行考察。溶血试验即通过配制目标分析物溶血和非溶血质控（quality control，QC）样品，前处理后进样分析，比较其在溶血样品与非溶血样品中响应或浓度的差异，考察溶血效应。鉴于大于2%溶血的生物样品（即基质含破碎红细胞的量大于2%）是极少见的，建议溶血试验中考察2%溶血的样品即可。研究者可分别配制2%溶血和非溶血的低高浓度QC 样品（n=6），前处理后进样分析，溶血试验的接受标准为每浓度组内的变异系数（coefficient of variation，CV）在15%以内，且溶血样品与非溶血样品的平均响应或浓度差异在15%之内。若开发的方法无法通过溶血试验，可考虑溶血基质和目标分析物是否充分孵育；也可降低溶血程度后再次进行溶血试验；同时分析实际样品中溶血样品的数量及所处药

物浓度-时间曲线的位置，评估重新开发方法的必要性或统计分析中不纳入受溶血影响的数据。

溶血样品测定的建议1 溶血样品的判断建立一个对溶血不“敏感”的LC-MS/MS检测方法，完成方法学的验证是进行溶血样品检测的前提条件，而在实际样品的测定过程中，第一步需完成溶血样品的鉴别和判断。一项研究表明，有74%的研究者通过视觉直观判断，将溶血样品与非溶血样品进行区分；20%通过比色卡进行判断，其余的通过临床仪器进行区分。然而，视觉分析具有一定的主观性且无法将2%及更高程度的溶血样品区分，比色卡尚未有统一的标准，仪器检测过于繁琐，溶血样品的判断面临着严峻的挑战。研究者可通过制备溶血样品，绘制本实验室的溶血比色卡，建立溶血样品判断的标准操作规程，使溶血样品的判断规范化和准确化，并根据样品的溶血程度进行下一步的检测。若测定过程中出现溶血程度远高于方法验证中考察的溶血水平，研究者可将溶血程度高的样品以正常血浆稀释后再进行测定，减少溶血效应。

2 优化分析条件在检测过程中遇到溶血样品检测失败，还可通过优化LC-MS/MS方法，增加灵敏度，减少溶血效应。根据药物的结构、解离常数和极性大小，选择合适的色谱条件和质谱条件。

2.1 优化色谱条件通过改善色谱分离，避免待测物和基质成

分一同出峰，常常可以有效地消除基质效应。在阿托伐他汀的检测中，HUGHES等通过调节流动相中有机相和水相的比例，将溶血样品中的干扰峰和内标物分开。改善色谱分析条件，适当地延长待测组分的保留时间，也有利于减少基质对测定的影响，MATUSZEWSKI等在分析人血浆中的非那雄胺时通过增加待测物的保留时间，从而成功地使待测物与基质分离开来。梯度洗脱是LC-MS/MS分析中最常用的洗脱方式，梯度洗脱通过逐渐改变流动相的洗脱强度，使各组分能很好地被先后洗脱出来。同时，不同的色谱柱分离效果不同，对基质效应产生不同的影响，选择适合类型的色谱柱对样品分析至关重要。

2.2 优化质谱条件研究者通过优化质谱调节，选择合适的离子源及质谱参数，有助于提高灵敏度，避免基质效应。

LC-MS/MS常用的离子源包括大气压光喷雾电离源（APPI）、大气压化学电离源（APCI）、电喷雾电离源（ESI），不同的电离方式对基质效应的影响不同，这3种离子源克服基质效应的能力依次为：APPI＞APCI＞ESI，但并不意味者所有的样品都应选择基质效应小的离子源，卤米松、辛伐他汀等在ACPI模式下的响应则不如ESI。研究者应综合多方面的考虑因素，选择合适的离子源。同时，改变质谱裂解参数也有助于消除基质效应。

2.3 优化样品前处理过程在检测过程中遇到溶血样品检测失

败，可通过优化样品前处理过程，尽可能去除血浆中的生理性成分，减少溶血效应。可优先选择固相萃取（SPE）和液液萃取（LLE）进行前处理，获得更洁净的样品；对于使用蛋白沉淀方法处理的样品，灵敏度高可稀释后再进样分析；可直接减少前处理中基质的体积。文献中采用SPE处理卡维地洛后，无法准确定量溶血样品中卡维地洛代谢物，样品处理后萃取物颜色异常，提示血红蛋白或胆红素被一起提取出来，因此在SPE处理前先进行蛋白沉淀，尽可能去除溶血释放的血红蛋白等，并在SPE处理中多添加一步酸洗，去除残留的溶血成分。通过优化前处理过程，使溶血样品中的目标分析物卡维地洛可被准确定量分析。

2.4 使用同位素内标建议使用同位素标记的内标。文献中测定去氧肾上腺素时，采用结构类似物α-（甲氨甲基）苯甲醇作为内标，去氧肾上腺素的溶血试验结果显示高低浓度的去氧肾上腺素溶血QC样品与非溶血QC样品间的差异均超过了15%，而更换为同位素内标去氧肾上腺素-d3后可满足测定要求。α-（甲氨甲基）苯甲醇与去氧肾上腺素结构只有一个羟基的差异，但其作为内标与同位素内标的试验结果却截然不同，这种差异可能是目标分析物去氧肾上腺素和结果类似物内标α-（甲氨甲基）苯甲醇在溶血基质中的回收率不一致导致的，这种现象提示研究者在分析过程中采用结构类似物作为内标是存在一定风险的。同时，WU等的研究也表明

选用同位素内标可获得更好的测定结果。由于同位素内标与目标分析物的结构性质一致，可修正分析物和内标因基质中回收率的差异而对结果带来的影响。同时，中国药典2015

版《生物样品定量分析指导原则》也指出“当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内标”。

2.5 溶血样品的试验样品再分析（incurred sample reanalysis，ISR）试验试验样品再分析是采用LC方法进行生物体内药物分析的重要环节，由于生物基质的复杂性，药用辅料的多样性和试验样本的特异性，ISR是评估分析方法固有缺陷的关键指标之一。目前，FDA、EMA及中国药典2015版《生物样品定量分析指导原则》均建议进行ISR试验，因为在方法验证中使用的校正标样和QC样品可能无法模拟实际试验样品，例如，蛋白结合、已知和未知代谢物的回复转化、样品均一性或同服药物引起的差异。研究者可通过在不同时间后，用已验证的方法在另外一个分析批次中重新分析试验样品，并与第一次分析结果进行比较，来评价实际样品测定的准确度。而对于溶血样品，基质更为复杂，包含红细胞破碎释放的盐、脂质、磷脂和酶类，方法验证中的QC样品能否模拟实际样品更有待考察。因此建议研究者在ISR试验中，应选择一定比例的溶血样品，评价溶血样品分析的重现性，确保研究结果的真实可信。

结语溶血对LC-MS/MS分析药物的影响程度和方式根据样品的溶血情况和药物的性质差异而不同，但溶血效应均会造成未知溶血样品测定结果的不准确，进而影响临床试验的质量。因此，建议研究者在方法验证阶段考察溶血效应，关注样品的溶血程度和药物的理化性质，采取必要的措施减少溶血效应。溶血对生物样品检测的影响虽受到各国监管机构以及生物检测分析组织的重视，但仍缺乏具体的做法和要求，溶血样品的判断及溶血样品的测定均面临着严峻的挑战，望各监管机构能够出台更明确的实验设计方案及接受标准，帮助广大研究者建立一个可靠的、符合法规的溶血样品测定方法，确保研究结果的准确性和合规性，促进生物分析行业的进步和发展。

参考文献（略）

标本溶血原因分析

标本溶血原因分析及对策 我院于2004年3～7月份临床科室对采血的血样标本的溶血情况进行了分析，对溶血产生的原因提出了相应的预防措施，现报告如下。 1 临床资料 我院自2004年3～7月份共采集血标本6420例，溶血50例，对每一份标本溶血的原因进行分析，分别对病人的情况、抽血所用器具、抽血操作方法及标本的存放、送检等各方面进行追查。不同原因造成的标本溶血情况，见表1。 表1 不同原因造成的标本溶血50例情况原因略 通过调查发现造成标本溶血的原因主要有以下几点。 2.1 操作不当在发生溶血的50例标本中，大部分与抽血困难有关。其低血容量25例，新生儿10例。（1）给这些病人采集血样标本时，操作者多将止血带扎的时间过长、过紧，再加上用力拍打穿刺部位。（2）将空针一次抽到510ml处，等待血液靠负压进入注射器中。（3）由于针头固定不好，使针头斜面贴于血管壁上，造成血液中混有大量的泡沫。（4）操作者没有按操作规程执行，将血沿血管壁缓慢注入，而是注入速度太快。造成泡沫与血液一同注入试管，从而造成溶血。（5）操作者过于用力晃动标本瓶，造成溶血。 2.2 标本容器不合格空针质量不过关，密封不好，造成溶血。 2.3 标本冻结将标本置于窗台上，没有及时送检，由于温度太低造成冻结。 3 对策 （1）加强操作者的责任心，一定按操作规程操作，将所采血沿血管壁缓慢注入，同时要轻轻摇匀。（2）尽量及时送检，要放在远离气低温的地方。（3）在操作时，尽量减少扎止血带的时间，不要用力拍打所抽部位，如:血管隐藏不清。可用热敷，让病人休息片刻，重新选择穿刺部位。（4）注意加强医药管理，防止劣质空针的采用。

第五章 补体参与的反应

第五章补体参与的反应 内容 一、溶血试验 二、补体结合试验 一、溶血试验 当红细胞与相应抗体相结合，在电解质存在时，可使红细胞产生凝集现象；若同时加入新鲜动物血清，则血清中的补体可与红细胞及其抗体（溶血素）形成的免疫复合物结合，从而激活补体导致红细胞溶解，产生溶血现象。 【材料】 1、抗原：2%绵羊红细胞（简称SRBC）。 2、抗体：溶血素即（SRBC抗体）。 3、补体，新鲜豚鼠血清。 4、生理盐水。 5、小试管、刻度吸管、试管架、37℃水溶箱等。 【方法】 1、取小试管3支，编号后按下表加入各物（容量单位均为ml） 溶血试验加样表（表2—1）单位ml 管号2％红血球溶血素（2单位）补体（2单位）生理盐水结果 1 0.5 0.5 0.5 0.5 2 0.5 0.5 - 1.0 3 0.5 - 0.5 1.0 2、将试管摇匀后置37℃水箱内：15—30分钟，取出观察有无溶血现象； 3、结果观察：管底无血球沉淀，液体红色透明管为溶血。 注意分析结果及其意义，了解补体的性质与作用。 二、补体结合试验 凝集反应和沉淀反应分别是颗粒性抗原、可溶性抗原与特异抗体结合的结果。补体结合试验，则是基于抗原抗体复合物可以结合补体的原理，在补体参与下，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统来检测抗原或抗体是否发生特异性结合的一种抗原抗体反应。 补体结合试验有两个系统共五个成分参加：检测系统的已知抗原（或抗体）与持检抗体（或抗原）、补体、指示系统的绵羊红细胞和溶血素。依次加入检测系统成分与补体作用后再加指示系统，若不出现溶血，即为补体试验阳性，表示检测系统中抗原抗体相对应（待检标本中有相应抗体或抗原），形成抗原体复合物并结合了补体，指示系统因缺乏补体而不发生溶血；反之若出现溶血，则为补体试验阴性，表示检测系统的抗原抗体不对应（持检标本中无相应抗体或抗原），不能结合补体，游离的补体与后加入的指示系统结合，导致绵羊红细胞溶解。 补体结合试验敏感性和特异性均较高，可用于检测梅毒，立克次体病和病毒感染等患者体液中的抗体或抗原以辅助诊断，还可用于某些病毒的分型。但本试验操作繁琐，影响因素甚多，各种参与成分均需适量（在正式试验之前必须通过一系列预备试验来滴定补体、溶血素、抗原或抗体的单位，以确定其使用量），并需设立多种对照和使用洁净试管等，才能保证实验结果的可靠性。因此，近年来其应用日趋减少，而为其它新的免疫学方法所取代。 【材料】 1、抗原：（已知，并已经滴定调定）。 2、灭活的持检血清。阳性血清和阴性血清（56℃×30' 灭活）。 3、补体（2个使用单位）。

真空静脉采血器造成标本溶血原因分析

真空静脉采血器造成标本溶血原因分析 陈宁1,陈健2 (11兰州医学院第一附属医院门诊,甘肃兰州730000;21甘肃省中医学院附属医院检验科,甘肃兰州730020) 关键词:采血器;标本;溶血 Key Words:hemostix;specimen;erythrocytolysis 中图分类号:R47219文献标识码:B文章编号:1002-0780(2003)12B-0044-01 真空静脉采血器又称自动定量静脉采血器,是目前广泛应用于临床的检验采血产品。其产品种类多样,适用于各种不同标本的采集及化验,其特点为操作简便、使用安全、干净无污染、准确可靠,对临床医务人员及患者都有保护作用。在临床使用过程中,有时出现溶血,影响了血标本的顺利采集,同时也使一些重要的实验结果受到不同程度的影响,尤其是血清(浆)离子的化验结果,为临床疾病诊断带来困难。因此,在分析溶血原因的同时提出相应的防范及改进措施。1真空静脉采血器原理 采血试管口加橡胶塞后经真空处理,管内呈负压状态,由于静脉血管内有一定压力,故采血时静脉内血液通过针头流入采血试管,当静脉血压与试管内压相等时,血液自动停止流出。 2溶血原因 2.1因空置的采血管负压相对较大,血液流入管底速度过快过猛,直接造成红细胞相互撞击,导致细胞破裂,造成标本溶血;在采血过程中,因吸入血量不足,管内仍存有真空而导致溶血。 2.2在标本混匀过程中由于动作过于猛烈,血细胞被破坏而导致溶血;采血针头口径过小,易引起溶血。2.3采血技术。采血过程中静脉穿刺处消毒液(如碘伏或酒精)未干即开始采血,可发生溶血;采血时定位或进针不准确,针尖在静脉中探来探去,造成血肿和血样溶血;采血过程中止血带使用时间过长或过紧,从而干扰血流速度和流向,破坏体液和血细胞间的平衡,造成局部血液浓缩或激活凝血系统,造成标本溶血;如止血带系在伤口、结痂、伤痕处均可造成标本溶血。 3防范及措施 使用国际标准真空采血管,避免用负压过大、吸力过猛的特制真空采血管,以减少溶血机会;在采集血标本时,使采血双向针尾部插入采血管后稍倾斜采血管,使其尾部针面贴近采血管侧壁,血液沿管壁缓慢流下,避免血细胞直接撞击造成破裂;用与检验项目相适宜的采血管,避免因采血量不足而造成管内负压的残留,导致溶血;在使用抗凝采血管时,采血后立即将试管颠倒数次,使血液与抗凝剂充分混匀,但动作要轻柔;采血时选择与患者年龄、体质相适宜和配套的采血针及采血管;同时采血过程中止血带使用时间不宜超过2mi n。 作者简介:陈宁(1972-),女,护师,本科毕业。 收稿日期:2003-06-04;修回日期:2003-08-28 (责任编辑:李长贵) 3讨论 2组患者在治疗前后的运动恢复级对比,差异无显著性,表明2组患者在康复过程中都被施加了主要的干预措施,如PO、O T、针灸、T EN S、生物反馈等;这些措施对运动功能的恢复起主要作用。 肩痛方面,无论是在新发生率还是疗效上,2组均未有明显差异。这是由于肩痛是由多因素所致(半脱位、拉伤、受压、异常姿势、交感神经营养不良、痉挛模式等),不仅仅是血液循环障碍的结果。 实验组的本体感觉障碍改善情况明显优于对照组(P< 0.05);本体感觉是对自身肢体位置的感知,是非常重要的一种深感觉。对脑损伤而言,本体感觉严重障碍的患者其预后不良;同时,本体感觉及障碍也是医疗和康复过程中容易被忽视的一个问题。气压式四肢循环促进装置对肢体能产生较强的压力性刺激,有助于增加肢体的实体觉刺激,因此,可促进本体感觉恢复;尤其在疾病的早期和恢复早期,效果较为理想。实验组有2例患者在观察期内本体感觉障碍有所改善,但仍存在明显的异常,与患者丘脑较大面积的出血,严重影响感觉有关。 在观察期内对照组新发生的手肿、肩手综合征、深静脉血栓等发生率似高于观察组,但由于观察时间偏短,样本偏小,尚不能进行统计学处理,其长期大样本效应有待进一步观察。本研究表明,气压反搏治疗有助于改善患者的本体感觉,减轻患者的手肿及肩手综合征,并有助于预防肩手综合征及深静脉血栓形成,应用于偏瘫患者有一定的价值。 作者简介:祝(1962-),女,吉林长春人,主管护师。 收稿日期:2003-02-08 (责任编辑:李惠敏) # 44 #Chinese Journal of Practical Nursing,December2003,Vol.19,No.12B Total No.234

常州生物制品产业园建设项目可行性报告

常州生物制品产业园建设项目 可行性报告 规划设计/投资方案/产业运营

常州生物制品产业园建设项目可行性报告 茶多酚广泛存在与各类茶之中，可以通过萃取方式、树脂吸附方式和离子沉淀方式从茶叶中提取茶多酚物质。茶多酚因为化学结构中存在大量的酚羟基而具有非常强的抗氧化能力，其抗氧化能力远远超过常见的抗氧化剂，如VC、VE和人工合成抗氧化剂BHT、BHA，并且茶多酚在使用时只需要少量的使用就可以达到很好的效果，另外由于其化学结构的特点，该物质在具有抗氧化能力的同时对食品中的色素和营养物质起到一定的保护作用，能够使食品药品及其他生活用品能够在较长时间内保持新鲜，且不会有潜在的副作用。 该茶多酚项目计划总投资9014.32万元，其中：固定资产投资6592.22万元，占项目总投资的73.13%；流动资金2422.10万元，占项目总投资的26.87%。 达产年营业收入18867.00万元，总成本费用14944.34万元，税金及附加173.14万元，利润总额3922.66万元，利税总额4636.86万元，税后净利润2941.99万元，达产年纳税总额1694.86万元；达产年投资利润率43.52%，投资利税率51.44%，投资回报率32.64%，全部投资回收期4.56年，提供就业职位419个。

项目建设要符合国家“综合利用”的原则。项目承办单位要充分利用 国家对项目产品生产提供的各种有利条件，综合利用企业技术资源，充分 发挥当地社会经济发展优势、人力资源优势，区位发展优势以及配套辅助 设施等有利条件，尽量降低项目建设成本，达到节省投资、缩短工期的目的。 ...... 茶多酚作为一种新型的抗氧化剂，是目前最具应用前景的天然添加剂，广泛应用于医药、医疗保健、食品行业、日用化学品、农业生产等方面。 近几年，茶多酚市场需求愈发强劲，2014年我国茶多酚市场销售总量约为2850吨，到2015年我国茶多酚市场销售总量达到3233吨。其中有60%以 上的茶多酚销往国外市场。

血清标本溶血对血液生化指标的影响

血清标本溶血对血液生化指标的影响 李大磊1，史文华1，刘志峰1,2 1山东省天然药物工程技术研究中心 2烟台大学药学院山东省烟台市 264005 摘要：目的探讨血清标本溶血对血液生化检验结果的影响，为药物安全性评价的长期毒性试验数据的分析提供一定的依据。方法采用全自动生化分析仪检测10份正常大鼠血液标本在溶血前和溶血后血清葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐（Cre）、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、钙（Ca++）、镁（Mg++）、钠（Na+）、钾（K+）、氯（Cl-）的值，并进行了比较和统计分析。结果溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高，具有统计学意义；Cre的值比溶血前的值低，统计差异显著；GLU、TP、ALB、BUN、CHO、ALP 、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值溶血前后未见明显统计学意义的改变。结论溶血对血清AST、TBIL、ALTK+、Cre 有明显的干扰影响，提请在分析测定结果时注意溶血情况。 关键词：溶血；生化检验； The influence of hemolysis on sericem biochemical tests LI Da-lei1，SHI Wen-hua1，LIU Zhi-feng1,2 1．Shandong Engineering Research Center for Natural Drugs, Yantai, Shandong 264003 2．School of Pharmacy, Yantai University, Yantai, Shandong 264005 Abstraet：Aim To observe the influence of hemolysis on the results of biochemical tests. Methods The blood collected from the rat divided into 2 samples, one of which is to process hemolysis serum, the other is to process normal serum. The serum biochemical data were detected respectively, which include glucose(GLU), alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), total protein(TP), albumin(ALB), creatinine(Cre), Blood uric nitrogen (BUN), cholesterol (CHO), alkaline phosphal ase (ALP), total bilinibin(TBIL ), calcium (Ca++), magnesium (Mg++), natrium(Na+), kalium (K+), chlorin(Cl-). The data were treated with paired-test. Resluts The level of serum AST, TBIL, ALT and K+ increased in hemolysis samples than normal. The level of serum Cre in hemolysis samples is lower than normal. There is no significant difference in serum GLU, TP, ALB, BUN, CHO, Ca++, Mg++, Na+ and Cl- . These

关于“生物制品质量控制分析方法验证技术审评一般原则”中几个验证参数的说明

发布日期20050718 栏目生物制品评价>>生物制品质量控制 关于“生物制品质量控制分析方法验证技术审评一般原则”中几个验证参数 标题 的说明 作者常卫红 部门 正文内容 审评五部生物制品室常卫红 摘要：本文对《生物制品质量控制分析方法验证技术审评一般原则》中有关验证参数的问题进行了阐述 质控分析方法的验证就是根据方法的需要测定该方法的专属性、准确性、精密度、线性、范围、检测限度、定量限度、耐用性等几个指标中的一个或 几个，所以上述参数的验证是本技术审评一般原则中的核心内容。本文拟就 该部分内容进行补充说明。 1、精密度 由于各种生物活性测定方法的变异均较大，所以精密度往往不太理想。 对于一些新建立的活性测定方法而言，测定结果不稳定、难以进行定量及无 法准确标示等问题已成为质控中的主要问题。针对上述情况，本技术审评一 般原则拟强调，作为测定有效成分含量水平的生物活性指标，需采用定量的 测定方法，并尽可能减少方法的变异。参照国外的有关标准，对各种测定方 法，提出了一般的可接受标准。 经课题研究组讨论认为，本原则中所提出的可接受标准，一般情况下均可以做到。对于个别难以做到的，可结合制品特性及其临床效应等进行综合 评估，如基本不影响到产品的安全、有效和质量可控，也可考虑适当放宽。 鉴于生物学测定方法的多样性和复杂性，本原则的正文中未对精密度测

定的重复次数作明确要求。从理论上考虑，测定次数主要取决于方法学的误差，变异大的方法应增加测定次数；从可操作性角度考虑，对于复杂、成本高及周期长的方法，重复次数太多，试验难度将很大。所以关于验证次数的设计，需综合考虑，应以基本达到验证的目的为准则。验证设计方案中的重复次数供参考。 2、线性 线性关系一般是指检测结果与样品含量的直线相关性，而且一般情况下线性关系是定量测定的基础，所以应尽可能摸索出存在较好线性关系的测定方法并进行线性验证。但对于某些生物活性测定方法而言，其线性范围较小（如细胞测定中呈S曲线），这时采用曲线拟合的方法应更合理。鉴于目前曲线拟合的方法在生物活性测定中被广泛采用，所以本原则中的线性验证亦包括了有关曲线拟合的内容。 3、专属性和准确性 专属性和准确性不是每个生物学测定方法都需要测定的参数，但同样重要，只是对于不同品种的不同方法应有不同的考虑，所以对于这两个参数进行了较详细的说明，并列举了一些具体情况，提请研制单位在建立方法和进行方法验证过程中能有所考虑。 4、耐用性 由于生物学测定结果对分析条件往往比较敏感，所以方法的耐用性验证是非常重要的。为保证测定结果稳定，研究者应对此项工作给予充分重视。但是考虑到目前国内的相关研究现状，在此项研究工作的起步阶段，为不致使验证工作量过大，暂提出：根据具体情况，可针对一个或几个关键的参数进行验证。今后将视国内相关研究的进展，逐步提高此项验证要求。 5、检测限度和定量限度 这两项是杂质检查中需测定的参数。根据目前国内的实际状况，部分生物制品尚未建立杂质检查项目，但是对于已建立的杂质检测方法，应参照本原则进行验证。 对于生物活性测定而言，精密度、线性和范围是非常重要的验证参数，所以本原则不但提出了一般性的验证要求，而且附上了推荐的验证设计方案（参照WHO的建议），供研制单位参考。 最后需要强调的是，分析方法的验证工作最终是为了保证产品的质量可控，以此为目的，各种质控分析方法之间存在着一定的内在联系，所以在评

体检中心血标本溶血原因及对策

体检中心血标本溶血原因及对策 目的分析总结溶血原因得到的效果。方法通过体检中心采集静脉血液标本1698份，进行溶血原因分析，并且提出预防、改进措施后。结果体检中心抽血溶血率从2%下降到0.2%，保障了体检人员检验结果的精确性和准确性。结论总结溶血原因，及时采取对策，提高了体检人员对体检中心满意度和信任度。 标签：抽血；溶血；原因；对策 1 一般资料 2016年3月～4月，我院体检中心共采集静脉血液标本1698份，其中发生溶血标本34份，溶血率为2%。溶血原因：采血技术欠佳12例占35%，穿刺抽血困难15例占44%，容器不合格5例占15%，采血器使用不当3例占9%，服药及饮食4例占11%。 采取防范措施后，2016年7 月～8月在体检中心采集的血标本2104份，溶血标本4份，溶血率占0.2%，溶血原因为患者血管塌陷，不充盈所致。 2 溶血原因 2.1护士的因素采血过程当中静脉穿刺处消毒液（碘伏或酒精）未干即开始穿刺也会发生溶血[1]；体检工作量大，参检人数多，而且空腹采血时间集中，护士繁忙中往往不仔细选择穿刺血管，采血时定位或进针不准确，针尖在静脉中探来探去，形成局部血肿，标本溶血；含抗凝剂的血常规管、血沉管、凝血管等抽血后没有及时摇匀或是摇匀时用力过大，都会造成红细胞破坏，标本溶血；另外，有的体检者检验项目全，所需的采血管多，止血带束缚时间相对延长，也会造成红细胞破坏，出现标本溶血。 2.2体检者因素由于部分年老体弱者，血管弹性差，血容量不足以及小儿静脉充盈不良、血管细小、不能很好配合，导致穿刺困难，采血时间延长，造成部分血液凝固，使红细胞机械性破坏造成溶血[2]。另外，极少数体检者采血前一直在治疗输液或是应用抗凝类药物，也会出现标本溶血。 2.3抽血器具不合格目前，体检用的抽血器为真空负压管，负压过大或过小，均会造成溶血。负压相对较大，血液速度过快过猛，造成红细胞相互撞击，导致红细胞破裂，标本溶血；反之如果负压不足、漏气或抗凝剂计量不足，使血流速度过缓，血液间断地被吸入负压管内并混有气泡，也会造成溶血。 2.4采血管使用不当血沉、血常规一类加入抗凝剂的抽血管抽入血液后如果放置过久，没有马上均匀摇动同样造成溶血。如1人操作给患者同时抽数管血时，若先抽抗凝管，然后依次抽血清管，待抽血完毕后再来摇动抗凝管，此时血中的纤维蛋白原以凝固，用力的摇動抗凝管可人为造成血球破裂、发生溶血。在标本

生物制品质量控制分析方法验证技术

生物制品质量控制分析方法验证技 术 审评一般原则 药品审评中心 二〇〇五年十二月

目录 一、概述 (2) 二、生物学测定常用方法 (3) 三、方法的来源（种类） (4) 四、分析方法 (5) 五、分析方法的验证 (7) （一）专属性 （二）准确性 （三）精密度 （四）线性 （五）范围 （六）耐用性 （七）检测限度 （八）定量限度

六、综合分析 (13) 七、名词解释 (13) 八、参考文献 (14) 九、附录（推荐的验证方案） (15) 十、起草说明 (16) 十一、著者 (21) 一、概述 质控分析方法验证就是证明采用的方法适合于相应检测要求，具有相当的准确性和可靠性，进而可以达到控制产品质量的目的。只有经过验证的分析方法才能用于控制产品质量，因此方法验证是制定质量标准的基础。 一般情况下，需验证的分析项目有：鉴别试验、杂质检查、原液或制剂中有效成分的含量测定及生物活性测定。其它质控方法，如必要时也应加以验证。 生物制品质控中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方

法。生物制品的理化分析方法验证原则与化学药品基本相同，可参照《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》进行，同时需结合生物制品的特点考虑。本技术审评一般原则主要针对生物学测定方法的验证进行讨论。生物学测定方法可广泛用于各种检测目的，包括鉴别、生物活性和杂质检测等，其中最主要的是生物活性（或效价、效力）测定。 相对于理化分析方法而言，生物学测定具有更大的可变性，一般要使用动物、细胞或生物分子，因此对于生物学测定的判断标准可适当灵活掌握，但是对于定量测定方法应尽可能减少方法的变异，验证的结果仍应能证明该方法具有相当的准确性和可靠性，并应以能够有效控制产品质量为基本标准。如未经必要的质控分析方法验证或由拟定质控分析方法构成的制造及检定规程难以控制产品质量，则对于所申报品种的质量可控性将无法评价。本文在某些关键参数上提出一些原则性的建议或要求，拟作为技术审评的一般原则，同时也可供申报单位在进行相关研究工作时参考。 生物制品具有多样性和复杂性的特点，质控分析方法也会各有特色，所以本技术审评一般原则不可能适用于每一个生物制品。这里只提出一些基本的原则，具体的验证方案可根据这些原则制定。如进行的相关研究工作与本原则（不包括推荐的验证设计方案）不符，应提供相应的理由和依据。 生物制品质控分析方法的验证工作应起始于研发工作之初，并贯穿于研发过程（包括临床前及临床研究）的始终。

检验标本差错原因分析及其预防措施

检验标本差错原因分析及其预防措施 检验科每天承担包括病区、门急诊、各类体检以及科研等大量标本的检测工作，每一项检验过程要经历从标本采集到出报告的诸多环节，稍有不慎，就会发生差错，造成不良后果。为提高检测质量及工作效率，有效降低差错发生率和医疗风险，现就检验标本差错原因及预防性应对措施作一些分析，供参考。 一、标本差错概念及分类 1、标本差错的概念：标本差错指某标本在实验室检测前、检测中、检测后的整个过程中，由诸多人为或其它原因导致被检标本信息或检测结果与该被检测人真实信息或实际结果不符的差错行为。涉及标本差错的科室主要包括临床、护理、后勤、实验室四个部门。 2、标本差错的分类：标本差错按差错性质分为标本信息差错、标本质量差错。 二、医生诊疗过程所致标本差错及其原因 1、标本信息与实际信息不符，如医生给某患者做了HPV取材及开单，但拿来的标本却为TCT瓶子，检测标本放错了瓶。 2、标本信息与检测标本不符，一种是患者拿错别人的标本，另一种是患者未听懂或听懂医生的吩咐，做阴道分泌物检测的标本到实验室变成了尿液标本。 3、标本质量差错，主要是需要医生取样的标本达不到要求，如TCT取材过少、病毒检测未在宫颈“鳞柱”交界处规范取样、标本保

存液瓶或袋发生渗漏等，严重影响检测质量。 4、原因主要是操作人员的工作责任心问题。 三、护理操作过程所致标本差错及其原因 1、标本信息差错，主要为采血时未核对标本管信息，错拿了贴了其他患者信息的标本管，或者采完血后再贴了错误的条码信息。 2、标本质量差错，主要存在几种情况，采血项目先后次序不正确、采集血液有凝集或溶血现象、采血量不正确、采血的真空管与所检测项目要求的真空管不符、采血时间不符合检测要求、采血部位选择不当、采集后血标本未在规定时间送检等。例如抽血时，由于抽血速度太快等原因，致使血液红细胞变形破裂，或采血后抗凝管未充分摇匀、在挂盐水的一侧静脉采血等情况，标本质量差错严重影响检测项目结果，是影响实验室报告正确的主要原因之一。 3、原因主要是操作人员的工作责任心问题，其次是平时岗位工作中缺少规范化操作培训或未执行规范化操作所致。 四、后勤传送过程所致标本差错及其原因 主要是标本质量方面的差错，未在规定时间内把检测标本送到实验室检测，导致送检标本发生成分含量的下降或上升，严重影响了检测结果的正确性。如民政部门的婚检标本，疾控中心送检标本，病区漏送检标本等。 原因主要是工作责任心问题、操作程序不规范或未执行操作规程。 五、检验检测过程所致标本差错及其原因

南宁生物制品项目投资建议书

南宁生物制品项目投资建议书 泓域咨询

报告说明 随着基因工程、微生物工程、细胞工程、酶工程等基础学科技术 的不断进步，生物合成法已逐渐取代传统化学合成工艺，成为食品营 养强化剂行业的主流生产方式。生物合成具有绿色、安全的优势，能 够减少对自然资源的依赖，以更小的环境代价获得更高经济产出，缓 解资源、能源、健康、环境、安全等重大问题。 本期项目总投资包括建设投资、建设期利息和流动资金。根据谨 慎财务估算，项目总投资45036.24万元，其中：建设投资37582.34 万元，占项目总投资的83.45%；建设期利息323.40万元，占项目总投资的0.72%；流动资金7130.50万元，占项目总投资的15.83%。 根据谨慎财务测算，项目正常运营每年营业收入77300.00万元， 综合总成本费用60833.95万元，净利润10261.65万元，财务内部收 益率18.67%，财务净现值4273.71万元，全部投资回收期5.15年。本期项目具有较强的财务盈利能力，其财务净现值良好，投资回收期合理。 本期项目技术上可行、经济上合理，投资方向正确，资本结构合理，技术方案设计优良。本期项目的投资建设和实施无论是经济效益、社会效益等方面都是积极可行的。

“十三五”时期是我国全面建成小康社会的决胜期，也是南宁贯 彻“四个全面”战略布局、落实“三大定位”新使命、勇当广西“两 个建成”排头兵的关键期。必须深刻认识国内外环境的新变化，准确 把握发展的历史方位和阶段特征，抓住用好重大战略机遇，促进经济 社会持续健康发展。 报告深入进行项目建设方案设计，包括：项目的建设规模与产品 方案、工程选址、工艺技术方案和主要设备方案、主要材料辅助材料、环境影响问题、项目建成投产及生产经营的组织机构与人力资源配置、项目进度计划、所需投资进行详细估算、融资分析、财务分析、国民 经济评价、社会评价、项目不确定性分析、风险分析、综合评价等。 本报告为模板参考范文，不作为投资建议，仅供参考。报告产业 背景、市场分析、技术方案、风险评估等内容基于公开信息；项目建 设方案、投资估算、经济效益分析等内容基于行业研究模型。本报告 可用于学习交流或模板参考应用。

生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则

【S】GPH1-1 生物制品质量控制分析方法验证技术 审评一般原则 药品审评中心 2005年12月

目 录 一、概述 (2) 二、生物学测定常用方法 (3) 三、方法的来源（种类） (4) 四、分析方法 (5) 五、分析方法的验证 (7) （一）专属性 （二）准确性 （三）精密度 （四）线性 （五）范围 （六）耐用性 （七）检测限度 （八）定量限度 六、综合分析 (13) 七、名词解释 (13) 八、参考文献 (14) 九、附录（推荐的验证方案） (15) 十、起草说明 (16) 十一、著者 (21)

一、概述 质控分析方法验证就是证明采用的方法适合于相应检测要求，具有相当的准确性和可靠性，进而可以达到控制产品质量的目的。只有经过验证的分析方法才能用于控制产品质量，因此方法验证是制定质量标准的基础。 一般情况下，需验证的分析项目有：鉴别试验、杂质检查、原液或制剂中有效成分的含量测定及生物活性测定。其它质控方法，如必要时也应加以验证。 生物制品质控中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方法。生物制品的理化分析方法验证原则与化学药品基本相同，可参照《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》进行，同时需结合生物制品的特点考虑。本技术审评一般原则主要针对生物学测定方法的验证进行讨论。生物学测定方法可广泛用于各种检测目的，包括鉴别、生物活性和杂质检测等，其中最主要的是生物活性（或效价、效力）测定。 相对于理化分析方法而言，生物学测定具有更大的可变性，一般要使用动物、细胞或生物分子，因此对于生物学测定的判断标准可适当灵活掌握，但是对于定量测定方法应尽可能减少方法的变异，验证的结果仍应能证明该方法具有相当的准确性和可靠性，并应以能够有效控制产品质量为基本标准。如未经必要的质控分析方法验证或由拟定质控分析方法构成的制造及检定规程难以控制产品质量，则对于所申报品种的质量可控性将无法评价。本文在某些关键参数上提出一

溶血素与补体激活实验报告

实验报告

4. 补体结合反应实验原理 补体结合反应是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应。参与本反应的五种成分可分为两个系统： 一为待检系统，即为已知抗原（或抗体）和待检抗体（或抗原）； 另一个为指示系统，即绵羊红细胞和其相应的溶血素。待检抗原、抗体和补体作用后，再加入指示系统。若待检系统中的抗原和抗体相对应，两者特异性结合后激活补体，补体被消耗。再加入的指示系统无补体结合，不出现溶血；若待检系统中的抗原与抗体不对应或缺少一方，补体不被激活，当指示系统加入后，绵羊红细胞和溶血素复合物激活补体，产生溶血现象。 5. 空斑形成实验 是一种体外检测IgM、IgG类型抗体产生细胞的实验方法，又称空斑形成细胞（PFC)测定。可作为评估药物影响抗体产生水平以及临床筛选抗肿瘤新药的重要依据。 经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合后，抗体形成细胞产生的抗体与绵羊红细胞结合；在补体参与下，绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑。一个空斑即代表一个抗体形成细胞。

一、SRBC的制备 （一）无菌抽取绵羊血 1.手术剪减去绵羊颈部毛发备皮，止血带扎住颈部，碘酒消毒，酒精棉球再擦拭。 2.抽取一定量的绵羊血，注入无菌玻璃瓶，轻轻摇晃获得抗凝绵羊血，摇晃时不能用力过猛，防止SRBC破裂。 （二）绵羊红细胞的制备 1.在无菌实验室中，用移液枪吸取5ml抗凝绵羊血于试管中，共4支试管。 2.配平后对称放入离心机中2000rpm离心10分钟。 3.4支试管，胶头滴管吸去上清液，加入适量的灭菌生理盐水后轻轻摇晃混匀。 4.再次配平后，2000rpm离心10分钟，2-3次。 5.吸去上清液，获得绵羊红细胞。 （三）绵羊红细胞悬液制备 1.20%绵羊红细胞悬液制备 在无菌实验室中，用移液枪吸取2ml绵羊红细胞于锥形瓶中，用移液管再加入8ml灭菌生理盐水，混合均匀。 2.2%绵羊红细胞悬液制备 在无菌实验室中，用移液枪吸取1ml绵羊红细胞于锥形瓶中，量筒量取49ml无菌生理盐水加入锥形瓶，混合均匀。 二、溶血素的制备 （一）免疫接种程序

石家庄生物制品产业园建设项目可行性研究报告

石家庄生物制品产业园建设项目可行性研究报告 投资分析/实施方案

报告摘要说明 我国对茶多酚的研究开始于五六十年代，而专业研究开始于七十年代，目前我国对茶多酚的研究在国际上处与领先水平。国内生产的茶多酚含量 大于89%，咖啡碱小于2%。 茶多酚广泛存在与各类茶之中，可以通过萃取方式、树脂吸附方式和 离子沉淀方式从茶叶中提取茶多酚物质。茶多酚因为化学结构中存在大量 的酚羟基而具有非常强的抗氧化能力，其抗氧化能力远远超过常见的抗氧 化剂，如VC、VE和人工合成抗氧化剂BHT、BHA，并且茶多酚在使用时只需要少量的使用就可以达到很好的效果，另外由于其化学结构的特点，该物 质在具有抗氧化能力的同时对食品中的色素和营养物质起到一定的保护作用，能够使食品药品及其他生活用品能够在较长时间内保持新鲜，且不会 有潜在的副作用。 该茶多酚项目计划总投资4592.80万元，其中：固定资产投资3336.13万元，占项目总投资的72.64%；流动资金1256.67万元，占 项目总投资的27.36%。 本期项目达产年营业收入10305.00万元，总成本费用8196.62万元，税金及附加88.23万元，利润总额2108.38万元，利税总额 2487.42万元，税后净利润1581.29万元，达产年纳税总额906.14万

元；达产年投资利润率45.91%，投资利税率54.16%，投资回报率 34.43%，全部投资回收期4.40年，提供就业职位158个。 茶多酚作为一种新型的抗氧化剂，是目前最具应用前景的天然添加剂，广泛应用于医药、医疗保健、食品行业、日用化学品、农业生产等方面。 近几年，茶多酚市场需求愈发强劲，2014年我国茶多酚市场销售总量约为2850吨，到2015年我国茶多酚市场销售总量达到3233吨。其中有60%以 上的茶多酚销往国外市场。 茶多酚是由茶叶中多种酚类组成的物质，其衍生物被称之为“茶多酚”。茶多酚拥有调节血脂、预防心脑血管疾病、清除自由基、延缓衰老、抗辐射、美容祛斑等功效，有较高的保健价值，市场需求量较高。随着市 场需求量的持续攀升，茶多酚行业对于茶多酚研究的不断加深，茶多酚使 用领域持续扩大，行业发展前景广阔。

血液标本溶血原因分析及防范措施

血液标本溶血原因分析及防范措施 发表时间：2012-03-19T16:55:30.153Z 来源：《中外健康文摘》2012年第2期供稿作者：杨培琴刘敏[导读] 针对以上各种原因引起的标本溶血，我们经过一年的规范和防范，取得了长足的进步。 杨培琴刘敏（十堰市中心血站湖北十堰 442000）【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）2-0089-02 近年来，机采血小板的采集成了血站成分制备中重要的日常工作之一，为了及时满足临床病人的需要又不致血小板因为效期短而报废，对于血小板的供应，我站基本上是采取临床病人预约后采集，机采科接到预约单，及时通知献血员，进行采前抽样初筛，但所抽取的样本时有溶血现象的发生，给检验科的工作带来了诸多的不便，为了解决这一难题，笔者通过近两年的观察分析和反复实践，总结了血标本溶血的原因并提出了防范措施，为检验科提供了合格的血标本。现将2009.1.1-2010.12.31的溶血标本情况统计分析如下： 1 材料与方法 1.1采集标本使用的器具与设备一次性使用自动定量静脉采血管5ml、2ml，一次性使用静脉血样采集针，0.5%合力碘，TDZ4-WS台式低速自动平衡离心机（长沙湘智离心机仪器有限公司）。 1.2方法皮肤消毒后，将双向采血针刺入静脉，见回血后刺穿采血管，采血完毕，将血样做完初筛项目后送检验科。 2 结果（表1） 表1 血标本溶血原因情况分析 表1示，09年血标本溶血原因因器具不合格引起所占比例最大，其次是因为血管情况不是太好，比如有血管太细，血液循环不好，选择血管不当，静脉穿刺技术不好，止血带扎得时间过紧过长，过度拍打血管，采血管内的负压过高或过低造成的等等。再就是未及时混匀抗凝剂试管，消毒剂未待干就进行穿刺等操作原因引起的血标本溶血。还有些不明原因的血标本溶血需要我们提出并进一步分析讨论，并采取有效方法给检验科留取合格的血标本。2011年经过我们近一年的规范和防范，出现4例不明原因的标本溶血，溶血标本所占比例由09年的4.62%下降至010年的0.19%，防范效果好。 3 讨论 通过我们近两年的观察、分析和总结发现，引起标本溶血的原因是多方面的，除器具质量不合格外，更多的是我们操作过程中，在选择血管方面不够仔细，操作不规范如未及时混匀抗凝管，消毒剂未干就进行穿刺等等。 3.1血标本溶血原因 3.1.1穿刺困难和采血操作不当①献血者血管太细，静脉充盈不良，血管弹性差致穿刺困难，使采血时间延长，部分血液凝固，使红细胞机械性破坏，造成溶血[1]。②操作人员抽血时将止血带扎得太紧，时间过长，血液注入试管时速度过快，红细胞撞击试管壁导致破裂溶血[2]。③采血定位不准或进针不准，针尖在静脉中反复进出，造成局部血肿和血样溶血。 3.1.2抽血器具不合格①我们使用的采血针为一次性塑料制品，某些产品的增型稳定剂不合格，并因聚合不完全而有毒性，可引起标本溶血。刘贤等[3]报道1998年6-7月抽血器具不合格引起标本溶血多达37例。②抽血试管质量不合格，抗凝管中抗凝剂偏少或有水分导致溶血；抗凝管内有絮状物产生；抗凝管有裂隙、瓶塞有松动现象；抗凝管内负压过高或过低，负压相对较大时，血液流入管底速度快，红细胞相互撞击而破裂溶血；负压不够时，相对管中的抗凝剂来说采血量不足，采血管内剩余负压造成血细胞被压迫而破裂溶血。③一次性使用静脉血样采集针包装有漏气，针套有脱落、针尖有毛刺、弯钩现象等。 3.1.3操作不规范①抽取抗凝标本，在混匀过程中动作过猛，引起红细胞破裂而溶血。②采血完毕未及时混匀血标本，使纤维蛋白原凝固，此时再用力摇动试管可人为造成红细胞破裂发生溶血。③采血过程中，静脉穿刺处消毒液未干即开始采血。 3.1.4试管离心操作不当离心过程速度过高，时间过长引起溶血。 3.1.5血标本存放和运送不当①血标本采集好后未及时送检，放在温度过高或过低处造成溶血。②运送途中剧烈振荡造成溶血。 3.1.6其它不明原因的血标本溶血。 3.2血标本溶血的防范措施 3.2.1掌握采集标本的正确方法：通常我们机采科会把肘正中静脉或贵要静脉等充盈良好的血管留在采集血小板时用，而抽血样本时，我们会选择手臂侧边较细的血管，此时我们一定要定位准确和进针准确，实在没有合适的血管，我们不能盲目进针，可以在肘窝以下重新选择血管，甚至可以在手腕和手背部寻找合适的血管进针，经过观察，我们这种选择血管的方法是正确的，进针率≥99.9%，采集血标本顺利，所以静脉穿刺，选择血管这一关非常重要。最后，采血前常规消毒，待消毒液干燥后进针，采血时止血带不要结扎得时间过长，遇抽血困难时不要进行强烈挤压，亦不要反复拍打穿刺部位，以防机械性刺激造成溶血。 3.2.2抽血器具的质量控制①我站总务科从源头上实施一次性使用无菌医疗器材的准入制度，建立合格产品供方目录，索取合格产品供方的资格文件，对国内生产企业进行实际考查；②站质管科对所购进产品按照《血站质量管理规范》进行抽检，合格后方可投入使用；③机采科工作人员要从产品外观和产品标识上进行质量控制，采血针塑化的导管均匀无气泡、有弹性、透明，无明显的机械性杂质异物、扭结等；采血针的针尖锋利、无毛边、毛刺、平头、弯钩等缺陷；抗凝管无裂隙、瓶塞无松动、脱落，管内无絮状物等；另外要看产品包装的标识，标识要明显、清晰、牢固，不应因经受所采用的灭菌、运输和贮存而脱落或模糊不清等；如发现有如上述不符现象，立即停止使用该批器材，和总务科进行沟通，直接退货，更换新的批号或更换生产厂家，杜绝使用不合格产品。 3.2.3严格遵守操作规程留取标本过程，要及时混匀标本，均匀摇动，摇动时避免上下暴力振动引起溶血。 3.2.4注意离心的速度和离心时间机采科在初筛时，离心分离血清时速度不宜太快，时间适宜。我们机采科做初筛时离心速度通常是3000r/min，时间3min，离心效果好。

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华兰生物（002007）投资分析 公司简介： 法定名称：华兰生物工程股份有限公司 地址：河南新乡 所属行业：医药 经营范围：生物制品、血液制品 主营产品:人血白蛋白、静注丙球、肌注丙球等血液制品。 投资要点（概念）： 凭借民营企业的管理优势、营销实力、规模优势、成本控制力和研发实力，华兰生物 在行业中的龙头地位已逐步确立，并有望继续保持“产品有定价能力”的利润上涨。从市场占有率和增速看，白蛋白、丙种球蛋白、破伤风免疫球蛋白多种产品的状况已远远超出其他企业。 一、宏观分析： ——经济增长与经济周期分析 1、GDP的增长，从2000年到2009年，我国GDP一直保持着8%以上的 高增长率，预示着宏观经济形势的向好 2、通货膨胀 继10月份CPI上涨4.4%之后，11月份，我国CPI又创新高，同比上涨5.1%，通胀压力明显加大 央行决定，2010年12月26日，金融机构一年期存贷款基准利率分别上调0.25个百分点，这是央行年内第二次加息，预示着货币政策转向稳健，最重要的方面是管理通胀预期众多经济学家和分析人士普遍认为，在通胀的初期和中期，股票市场会出现一次趋势性的上涨，而在这一时期投资股市也是抗通胀的最佳手段之一。华兰生物，属于增长性行业，抗通胀能力强 ——金融市场形势分析 1、货币供应量

2、利率 3、汇率: 人民币的不断升值，使得国外热钱不断流入，部分流入了股市，推动了中国股市行情的上涨 宏观因素影响： 医药生物行业未来5年增速有望加快，据交银国际证券预测：由于新医改的推动和新一轮产业政策支持，医药生物行业2011年收入增长将会达到25.3%,2011~2015年收入复合增长23.9% 第一,社会因素上，医改持续深化,居民用药需求释放 第二,政策因素上，十二五规划营造较爲良好的政策环境： 1、在《战略性新兴产业发展规划》中，生物产业已经列为七大战略性新兴产业之一,属于国家大量扶持的朝阳产业，在“十二五”规划中，创新药和创新産品生産企业享受政策 2、医药流通行业十二五规划将鼓励流通企业幷购重组 第三,法律法规上，新版GMP标准明年有望颁布幷实施,行业集中度将逐步提高。政府医药産业结构的规划将促进行业整合和集约化,促进优势资源向龙头企业聚集, 二、行业分析 I．血液制品产业分析：华兰生物属于经济增长型行业、朝阳产业，且处于初创期，受政府扶持，抗经济周期性强， i.行业壁垒高、监控严格，政策因素为企业的发展提供了强大助力 血制品业属限制外商投资的产业。政府监控的严格，市场之外的政策因素为 这一特殊行业的发展提供了很大的助力，因为没有新的加入者，规模小和不能达标的企业会逐步退出市场。 ii.欧美市场介绍：严格监管和重组兼并导致寡头垄断 30余年前刚起步时，全球最早的血液制品行业有102家企业，随着各国陆续发生了血液制品安全事件后，各国政府加强了监管，加上企业的兼并重组行动升级，目前全球仅剩下不到20家企业，其中美国5家，欧洲8家，前5家企业的产品就占了血液制品市场份额的80%～85%，寡头垄断明显。