微生物

微生物防制媒介昆虫进展
总结了我国微生物防制蚊、蝇、蜚蠊等媒介昆虫的进展,从20世纪70年代末以来,在细菌、病毒和真菌等媒介昆虫病原的大量分离、筛选、作用机制和安全等研究的基础上,研究了媒介微生物防制剂不同的发酵方法以及适合媒介防制的剂型,开发出孑孓灵、187悬乳剂、BsC3-41乳剂和毒力岛等制剂,经大面积防制蚊、蜚蠊等,不仅虫口密度大幅下降,而且疟疾等疾病的发病率显著降低,为我国大力发展微生物防制媒介奠定了良好的基础。根据保护环境可持续发展等国策的要求,保障人民的健康,提出了我国媒介微生物防制的策略。

苏云金杆菌以色列变种漂浮块剂防制城市小型滋生地中致倦库蚊和白纹伊蚊幼虫效果评价
目的:观察苏云金杆菌以色列变种漂浮块剂的稳定性及防制蚊幼虫效果.方法:生物测定及小型滋生地现场试验.结果:该块剂在水中可持续漂浮14天,且不出现松散现象.其对致倦库蚊的LD50为0.4278mg/ml;现场试验结果显示:在3.4m2水池中,用5、10、20g/m2剂量,24小时时致倦库蚊幼虫下降率分别为94.5%、91.8%和100%,持效分别为11、13、17天.相同剂量24小时白纹伊蚊幼虫死亡率均为100%,持效分别为6、8、12天.


球形芽孢杆菌C3—41地方制剂大面积防制城市致倦库蚊的…
摘 要:本文报告１９９３年６－１０月，在武汉市水果湖地区应用球形芽孢杆菌Ｃ３－４１地方制剂大规模防制致倦库蚊的现场研究。用３ｍｇ／ｍ＾２乳剂处理大面积孳生地（大于２ｍ＾２）每１０ｄ一次，包括水塘，水沟，水槽等；用８ｇ／ｍ＾２的块剂处理小型容器和积水坑，一月一次。结果表明，幼虫密度下降了７０％－１００％，并能成功的控制成蚊季节性高峰。


耐胃肠道环境及肠道病原菌拮抗的猪源乳酸菌的分离与筛选

沈中艳; 赵述淼; 梁运祥;
从健康猪粪便筛选分离到对肠道致病菌有较强抑制特性的3株乳酸菌,分别鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。体外益生特性研究表明:3株乳酸菌能耐受胃肠道环境,能黏附猪小肠表面粘液,对猪源产肠毒素型大肠杆菌(Escherichia coli O139,E. coli O139)、E. coli C83905、E. coli C83524、E. coli C83529、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium O4Hi,ST O4 Hi)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)均有较强的抑制特性。对小白鼠肠道大肠杆菌的数量进行研究,结果证明对照组大肠杆菌数量没有明显降低,而添加乳酸菌组大肠杆菌数量明显降低。对小白鼠腹腔注射E. coliC83905,乳酸菌组死亡率明显小于对照组。结果证明3株乳酸菌在猪饲料添加剂方面有较好的应用前景。






梁运祥
净化水质

的枯草芽孢杆菌、菌剂及固体发酵工艺与应用

本发明涉及一种用于净化水质的枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ），ＣＣＴＣＣ，Ｍ２０２０４５以及用该菌在固体培养基，适当的碳、氮比条件下培养、发酵然后经干燥，生产一种有效净化养殖水质的枯草芽孢杆菌制剂。该菌去除水体ＣＯＤ效率高，能迅速降解有机物，具有一定的反硝化能力、降解残渣能力和较强的降解硫化物的能力，小试结果表明：该菌在２４小时消除ＣＯＤ可达７６％；小试菌剂有效活菌数达３０００亿／克以上；中试菌剂有效活菌数达２００亿／克以上；同时具有耐盐、耐渗透压、维持养殖水体适宜ｐＨ等优良特性。

发明涉及一种发酵法消除豆粕中抗营养因子的方法，属于生物发酵技术领域，其产品特别适于供养殖业作幼年动物饲料。它的工艺步骤包括：a、准备豆粕原料；b、在原料中加入料水；c、接种主要能产蛋白酶菌或/和产乳酸菌及分解大豆低聚糖菌或/和分解大豆凝血素等多种抗营养因子的微生物菌种，所述的微生物菌种主要选自酵母菌、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌的单株菌种或其组合；d、控温发酵，发酵温度为30℃～55℃；e、成品处理。本发明方法易于掌握，工艺稳定，直接得到的产品消除了抗营养因子，是满足幼小动物降成长的、富有营养的、质优价廉的、安全的植物性饲料，能替代骨粉、鱼粉等动物性饲料。

一种主要由糖厂废液废渣和腐熟发酵剂组成的有机肥料及其生产方法
本发明涉及一种主要由糖厂废液废渣和腐熟发酵剂组成的有机肥料及其生产方法，特别适用于以甘蔗为原料的制糖业综合处理的废弃物、如糖蜜酒精废液、冲灰水及蔗渣、滤泥等生产有机肥料。所述有机肥料，由发酵物料和腐熟发酵剂组成；发酵物料的组份和重量比为：糖蜜酒精废液或／和冲灰水为１０～８２％，蔗渣或／口滤泥为１８～９０％，其余为秸秆、草炭土、动物粪便、无机肥、土壤其中的一种或多种组合，重量为０～１５％；腐熟发酵剂含有纤维素分解菌，半纤维素分解菌、蛋白质分解菌、淀粉分解菌的菌种，由种曲混合而成；腐熟发酵剂重量为小于等于２％发酵物料重量。所述方法包括下述步骤：１）确定供腐熟发酵处理的发酵物料；２）确定腐熟发酵剂；３）堆垄发酵；４）除去水份；５）筛分包装。其优点在于：有效地解决了糖厂废液废渣的综合治理和有效利用，其有机肥料的肥效高，有利作物生长，其方法简便，成本低，产品质量稳定。

本发明涉及一种用于工业有机废液废渣处理与利用的腐

熟发酵剂及其生产方法，适用于要求发酵起温快，周期短，分解纤维素、半纤维素、木质素、蛋白质等能力强，物料腐熟程度高的场合，特别适用于甘蔗制糖业对糖蜜酒精废液及蔗髓、滤泥等废液废渣的综合处理与生产有机肥料中作专用腐熟发酵剂。所述腐熟发酵剂由纤维素分解菌、半纤维素分解菌、蛋白质分解菌、淀粉分解菌的菌种种曲之一或其组合而成；所述菌种优先选自下述菌种或它们的组合：黑曲霉，绿色木霉，扣囊拟孢霉，枯草芽孢杆菌，啤酒酵母；菌种分解能力为下述之一或相应组合：CMC酶活50～1000毫克葡萄糖/克·小时，木聚糖酶活500～5000毫克木糖/克·小时，中性蛋白酶活50～500微克酪氨酸/克·小时，糖化酶活100～1000毫克葡萄糖/克·小时。所述腐熟发酵剂的生产方法首先收集和培养纤维素酶及半纤维素酶的生菌株，然后在所收集的菌株中筛选高活性的分解菌株，最后按照腐熟发酵剂的组成和技术参数要求配制成腐熟发酵剂，它包括制取菌种种曲和配制腐熟发酵剂两个步骤，该方法发酵起温快，周期短，工艺简单，生产成本低，产品质量稳定。
主权项
1.用于工业有机废液废渣处理与利用的腐熟发酵剂，其特征在于，它由纤维素分解菌、半纤维素分解菌、蛋白质分解菌、淀粉分解菌这些菌菌种种曲之一或其组合而成；所述菌种优先选自下述菌种或它们的组合：黑曲霉(Aspergillusniger)，绿色木霉(Trichodermaviride)，扣囊拟孢霉(Endomycopsisfibnliger)，枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)，啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)；菌种分解能力为下述之一或相应组合：CMC酶活50～1000毫克葡萄糖/克·小时，木聚糖酶活500～5000 毫克木糖/克·小时，中性蛋白酶活50～500微克酪氨酸/克·小时，糖化酶活 100～1000毫克葡萄糖/克·小时。

净化水质的枯草芽孢杆菌、菌剂及固体发酵工艺与应用
本发明涉及一种用于净化水质的枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ），ＣＣＴＣＣ，Ｍ２０２０４５以及用该菌在固体培养基，适当的碳、氮比条件下培养、发酵然后经干燥，生产一种有效净化养殖水质的枯草芽孢杆菌制剂。该菌去除水体ＣＯＤ效率高，能迅速降解有机物，具有一定的反硝化能力、降解残渣能力和较强的降解硫化物的能力，小试结果表明：该菌在２４小时消除ＣＯＤ可达７６％；小试菌剂有效活菌数达３０００亿／克以上；中试菌剂有效活菌数达２００亿／克以上；同时具有耐盐、耐渗透压、维持养殖水体适宜ｐＨ等优良特性。


发酵法消除豆粕中抗营养因子及其产品应用的研究
完成单位:
华中农业大学
登记号:
EK080277

成果名称:
发酵法消除豆粕中抗营养因子及其产品应用的研究
主要完成人员:
梁运祥　葛向阳　王绩　胡咏梅　陈正军　梅余霞　李学雄　李绍章　左剑兵　康立新　石慧　阎淳泰　
鉴定单位:
农业部科技教育司
鉴定时间:
2003.12.19
研究起止时间:
2000.09 至2003.11
推荐单位:
华中农业大学
公报内容:
①课题来源与背景、研究目的与意义
本项目是华中农业大学生命科学技术学院发酵工程室自选项目。
在养殖领域，幼小动物需要大量添加与母体来源相近的或易于消化吸收的营养成份，如乳粉、乳精粉、鱼粉、血粉、肉骨粉等动物性饲料原料。但近年来，出于安全和资源保护因素，动物源蛋白质原料的品质问题和资源的缺乏已成为限制饲料发展的重要因素，为此人们把目光放到了成为了动物蛋白替代品的豆粕上。豆粕是是一种廉价优质的植物蛋白源。但是豆粕中还存在有胰蛋白酶抑制剂、植酸、大豆凝血素、脲酶、低聚糖、脂肪氧化酶、大豆抗原蛋白（致敏因子）及致甲状腺肿素等多种抗营养因子，阻碍动物对它的消化吸收。用物理、化学、生物育种等方法消除，存在或成本高、或残留化学试剂、或破坏某些营养成分、或残留较多抗营养因子等缺点，因此，未能很好应用。

②主要论点与论据、创见与创新、技术原理及性能指标、技术的创造性与先进性、技术的成熟程度、适用范围和安全性、应用情况
1、在国内首次提出了一种发酵法消除豆粕中抗营养因子的方法。筛选得到对豆粕中抗营养因子有明显降解作用的4支优良菌株，采用多菌种间歇通风发酵工艺发酵，经小试、中试和工厂化生产，工艺稳定性好。成果具有创新性，达到国际先进水平。
2、应用该技术发酵后豆粕的抗营养因子含量完全被分解或大幅度下降，发酵后豆粕的营养价值有很大提高，产生多种功能小肽。
3、在国内首次建立了间接竞争ELISA和单向免疫扩散检测法，检测大豆豆粕及其深加工产品中11S和7S抗原蛋白的含量。
4、以检测7S、11S抗原蛋白含量、胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子活性、蛋白质降解度、有益菌数和蛋白酶活力等为主要指标，以外观、粘度、酸度和SDS-PAGE电泳图谱为辅助指标，在国内率先建立了发酵豆粕产品质量评价体系。
5、在国内首次提出了植物小肽（蛋白质浓缩饲料）的企业标准。建立了无抗营养因子豆粕在猪、鸡、鸭及鱼、虾、甲鱼等动物饲料中的应用方法，产品应用效果显著。产品经华中、东北、华南数地区在乳猪、仔鸡和对虾前期的养殖试验表明，应用该产品替代部分豆粕和鱼粉，可以提高动物的生长效果、减少腹泻、提高成活率、

提高饲料消化利用率、降低环境污染、提高饲料安全性、可取代饲料中鱼粉、血粉、肉骨粉及乳清粉等动物源蛋白原料。

③社会经济效益，存在的问题。
该技术成果自2002年起，在武汉邦之德牧业科技有限公司、北京金肽得生物科技有限公司、湖南唐人神集团等近10家企业推广应用，六年来累计生产产品近25万吨，实现工业产值近12亿元人民币，利税近2亿元人民币，为饲料产业节支约1亿元人民币。发酵豆粕产品在饲料中使用量一般为5％，每吨添加有发酵豆粕的饲料代替鱼粉等动物性蛋白平均可降低饲料成本约20元，为我国饲料产业节约1亿元人民币。


陈雯莉

利用绿色荧光蛋白基因(gfp)标记研究了土壤中Cd2+胁迫对饭豆(Vignaumbellate L.)根瘤菌JMC1402G腐生存活的影响,同时也探讨了Cd2+胁迫对其共生固氮能力的影响.结果表明,YMA培养基平板培养时,Cd2+对JMC1402G的LC50为8.15μg·mL-1.不管土壤灭菌与否,当土壤中Cd2+添加量为3 mg·kg-1时,向土壤接种的37 d内对JMC1402G的腐生存活无影响,当Cd2+添加量为20mg·kg-1时,土壤中JMC1402G的数量明显低于对照,随着Cd2+添加量的进一步增大,土壤中JMC1402G的数量迅速落于104cfu·g-1以下.饭豆盆栽试验结果表明,Cd2+添加量在0～20 mg·kg-1范围内对JMC1402G共生固氮能力的影响不大,当土壤中Cd2+添加量达到50 mg·kg-1时,对JMC1402G产生较明显的生理毒性,当Cd2+添加量达到100 mg·kg-1,饭豆根瘤菌-饭豆体系失去结瘤能力.JMC1402G质粒快检结果表明,JMC1402G在Cd2+添加量为0、3、20、50、100 mg·kg-1的土壤中营腐生生活37 d,未出现质粒丢失情况.


埃苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry7Ba1溶解性分子改良朱自敏 孙明
【摘要】：正苏云金芽胞杆菌华中亚种YBT978产生大分子量晶体蛋白Cry7Ba1,与其它典型晶体蛋白不同的是Cry7Ba1需要在强碱性缓冲液中(pH12.5)才能溶解,常规杀虫晶体蛋白在弱碱性缓冲液中就能溶解,并且之前相关研究表明只有溶解后的Cry7Ba1才能表现出



利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白为载体在细胞表面展示目标蛋白的方法及应用
摘要
本发明属于分子生物学领域，具体涉及利用来源于苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S-层蛋白在细胞表面展示目标蛋白的方法，本发明用以改善细胞表面结构或增强目标蛋白生物学功能，在众多领域都具有应用潜力。发明的具体步骤包括：将所说的目标蛋白基因置于S-层蛋白N-末端第210个氨基酸对应的核苷酸序列下游；融合蛋白基因在宿主菌如苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis B.t中表达，实现方式可以将其置于载体上。与已有技术比较，本发明不仅克服了现有技术安全性方面的隐患，而且拓宽了苏云金芽胞杆菌的应用领域，例如

在抗病方面，在重金属的吸附方面，具有重要的研究与应用前景。
主权项
1、一种利用S-层蛋白在细胞表面展示目标蛋白的方法，按如下步骤实现： 1)S-层蛋白来源于苏云金芽胞杆菌Bacillusthuringiensis，B.t，菌株编号CTC； 2)融合蛋白基因的构建：将所说的目标蛋白基因置于S-层蛋白N-末端第210个氨基酸对应的核苷酸序列下游； 3)融合蛋白基因在宿主菌中表达，实现方式可以将其置于载体上； 4)所说的宿主菌为苏云金芽胞杆菌Bacillusthuringiensis，B.t。


苏云金芽胞杆菌高毒力基因工程菌WG001及生产工艺与产品 (27-Feb-2002)
High-toxicity gene engineering bacteria WG001 of Bacillus thuringiensis and its production process and product
Front Page First Page ImageDescriptionMain Claim
Options
More Like This
Download
Find Patent
Find Translation
Share
PRC Invention Application Publication (Source: SIPO)
Publication No. CN 1337461 published on 27-Feb-2002
Application No. CN 01128475.7 filed on 19-Sep-2001
Inventors
喻子牛 [+7] [-7]
刘子铎
陈守文
孙明
何晓青
徐世瑾
喻晓辉
操时树
Applicants
华中农业大学
430070湖北省武汉市洪山区狮子山街
Abstract (Chinese)
本发明属于微生物农药技术领域，涉及苏云金芽胞杆菌基因工程菌的构建、生产工艺及产品。特征是，将含有crylAa10－P20基因的重组质粒pBMB1808转入对棉铃虫高毒力菌株YBT－1520中，获得一株适合生产微生物杀虫剂的高毒力基因工程菌WG001(一种苏云金芽胞杆菌，Bacillus thuringiensis，保藏在CCTCC，保藏日：2001年9月13日，保藏号：M201033)。该菌株带有crylAa、crylAb和crylAc杀虫晶体蛋白基因。与天然菌株相比，WG001的杀虫晶体蛋白产量提高一倍以上，伴胞晶体增大2.1倍，对小菜蛾和棉铃虫均具有良好的防效。