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紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量

紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量

云南省不同产地三七皂苷含量的比较

文山学院学报 Vol. 26 No. 6Dec. 2013 8 第 26 卷第 6 期2013 年 12 月JOURNAL OF WENSHAN UNIVERSITY 云南省不同产地三七皂苷含量的比较 孙玉琴1,向飞军2,曾 江1,刘云芝1,朱云飞1,陈昱君1,王朝梁1* (1.文山学院 文山三七研究院,云南 文山 663000;2.康美药业股份有限公司,广东 普宁515300) 摘要:对云南省不同产区的三七取样,采用HPLC 法测定人参皂苷Rb 1、Rg 1和三七皂苷R 1的含量,从 三七皂苷含量变化角度探索不同产地三七的种植适应性。结果表明,来自不同的8个县,11个地点的三七样品中,皂苷含量(R 1+ Rg 1+ Rb 1)最高的是文山州丘北县腻脚乡,皂苷含量达10.84%,不同产地三七样品之间的皂苷含量有较大差异,统计学分析可以达1%的极显著水平,但11个地点的三七样品皂苷含量均高于国家相关标准的要求。 关键词:三七;不同产地;皂苷含量 中图分类号:R282.71 文献标识码: A 文章编号:1674-9200(2013)06-0008-03收稿日期:2013 - 07 - 04 基金项目:云南省中药现代化科技产业基地项目“三七种植新区评价及栽培技术优化和新型育苗模式研究与示范”(2012CG024)。 作者简介:孙玉琴(1975 -),女,吉林临江人,文山学院文山三七研究院副研究员,硕士,主要从事三七栽培育种研究。通信作者:王朝梁(1965 -),男,云南文山人,文山学院文山三七研究院研究员,主要从事三七栽培及营养研究,E-mail:1010816954@https://www.wendangku.net/doc/0210671567.html,。 三七Panax notoginseng (Bruk.) F. H. Chen 为五加科人参属植物,是我国特有的传统名贵药材。近年来由于三七在心脑血管方面的独特疗效越来越被人们所认可,需求量逐年增加。三七栽培对环境要求比较特殊,分布范围很小,其分布仅局限于北纬23°30′附近的中高海拔地区,主要为云南省文山州境内[1]。文山州是公认的三七道地产区,但是由于受连作障碍的影响,文山州适宜种植三七的土地资源已十分紧缺[2],目前种植户已经难以在文山州内的三七种植适宜区内找到基础条件较好的、成规模的种植地块,三七的种植区开始拓展到文山州周边的昆明、红河、曲靖等地区,最远的甚至到了大理、保山等滇西地区。三七种植外移后,对其有效成分含量影响的相关研究至今未见报导,笔者通过测定云南省境内的11个不同三七栽培地点的三七样品,了解不同种植地点对三七有效成分含量的影响,为云南省合理规划三七种植区域提供依据。 1 材料与方法 1.1 样品来源 在三七收获期收集11个不同地点的三年生三七,每个点收集大小相同的10株样品,清洗后取 主根部分干燥,干燥后的三七规格均为40头三七,粉碎后测定。来自于文山州的样品3个,分别是:1号样品(砚山县者腊乡)、2号样品(马关县仁和乡)、3号样品(丘北县腻脚乡),来自于红河州的样品7个,分别是:4号样品(建水县官厅镇)、5号样品(石屏县牛街镇)、6号样品(建水县普雄乡)、7号样品(屏边县新华乡)、8号样品(蒙自市十里铺乡)、9号样品(个旧市卡房镇)、10号样品(开远市李子凹村),来自玉溪市红塔区的样品1个,为11号样品。1.2 皂苷含量测定 采用HPLC 含量测定方法[3],测定部位为三七主根。仪器:岛津Lc-10AT vp 高效液相色谱仪,Shim-Pack VP-ODS 250×4.6色谱柱,SPD-10A vp 紫外检测器,Class-VP 工作站控制处理,电子分析天平SHIMADZU AX200(日本岛津),CQ-250超声波清洗器(中船七院七二六研究所)。试剂:CH3CH (色谱纯)、CH3CN(色谱纯)均购自sigma 公司,标准品(人参皂苷Rg 1、Rb 1、三七皂苷R 1)均购自中国药品生物制品检定所。样品皂苷含量为Rg 1、Rb 1、R 1之和表示。1.3 数据统计 采用DPS 统计软件处理[4]。

比色法测定总皂苷含量

比色法测定总皂苷含量 1、仪器 紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0.8 cm,长20 cm)。 试剂 无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯;大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。 2、方法 2.1 对照品溶液的制备 取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml,制成 1 mg/ml对照品溶液。 2.2供试品溶液的制备 取药材粉末(过4号筛)约0.2 g,准确称定,置于150 ml具塞锥形瓶中。精密加入50 ml 甲醇后,准确称重。浸泡60 min,超声提取30 min,再次称重,补加甲醇至超声前重量。过滤,精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中,水浴蒸发至干,用5 ml水溶解残留物,所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1:5),以水50 ml洗脱,弃去水液,之后再以50 ml 95%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,蒸干。用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中,用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml),合并正丁醇层,减压蒸干。残留物用70%甲醇溶解转移至10 ml量瓶中,定容,摇匀,即得。 2.3测定波长的选择 精密移取1.5 ml的对照品及l ml供试品溶液,于70℃水浴蒸发至干,加入5%香草醛一冰醋酸(临用新配)0.2ml,高氯酸0.8 ml,于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。加冰醋酸5 ml,摇匀。立即在紫外分光光度计于400~800 nm波长下扫描,同时空白溶液作参比。对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm,故选取475 nm为检测波长。 2.4线性关系考察 精密量取对照品溶液0.60,1.50,2.40,3.30,4.20 ml,置具塞试管中,于70℃水浴蒸发至干,加入5%香草醛-冰醋酸(临用新配)O.2 ml,高氯酸0.8 ml,于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。各加冰醋酸5 ml,摇匀,以同法平行处理的空白溶剂为空白,在475 nm处测定吸光度。以对照品质量c(mg)为横坐标,吸光度A为纵坐标,使用软件OriginPro 7.0进行回归分析,得到回归方程为:A=0.007 4+1.120 83c, r=0.999 97。在0.096—0.672 mg内线性关系良好。 2.5精密度试验 精密吸取对照品溶液1.5 ml,依“2.4”项下方法显色测定吸收度,连续测定5次,结果RSD为0.254%,说明仪器的测试性能良好。 2.6稳定性试验 取对照品和样品溶液,依“2.4”项下方法操作,按不同时间测定吸光度,结果见表1。2.7样品含量测定 取供试品溶液6份,每份精密吸取80 μ L,按“2.3”项的方法显色后,在540nm测定吸光度,计算样品含量。 2.8加样回收率试验 取供试品溶液8份,每份精密吸取80μL,加入0.2mg/mL齐墩果酸溶液50 u I。,按“2.3”项的方法显色后,在540hm测定吸光度,计算加样回收率。

Fusariumsacchari转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分

4 讨论 从上述分析结果可以看出,根皮的脂肪酸量高达83165%,主要以棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸为主,其他16种非脂肪酸成分总量只有8129%,而且各个化合物量均未超过1%。根芯中7种脂肪酸仅占总量的23121%,而且除邻苯二甲酸二丁酯和1,22苯二甲酸二异辛酯2种脂肪酸与根皮中的脂肪酸相同外,其余5种成分也完全不同;22种非脂肪酸成分总量高达51160%,而且与根皮中的非脂肪酸成分完全不同,主要以烃类化合物和醇类为主。以上结果表明巴戟天根皮和根芯中的脂溶性成分差别较大。 医学研究表明,不饱和脂肪酸有明显降低血清胆固醇的作用,进而降低高血压、心脏病及中风等疾病的发病率[9,10]。巴戟天根皮中含有较高的不饱和脂肪酸油酸和亚油酸,具有较高的医疗保健作用,但是根芯中却不含这些不饱和脂肪酸,这表明传统中药巴戟天的根皮部相对具有较高的应用前景和开发价值。因此,在巴戟天的开发和利用中,可根据所需成分考虑通过部位提取来提高提取效率。References: [1] State A dm inistrati on of T raditi onal Ch inese M edicine T raditi onal Ch inese M edicine Board T rad itional Ch inese M ed icine(中华本草)[M]1Shanghai:Shanghai Scientific and T echnical P ress,19991 [2] N ati onal Group p repared Ch inese T raditi onal H erb D rug M edicine Series1N ational Ch inese T rad itional H erb D rug s S eries(全国中草药汇编)[M]1Beijing:Peop le′s M edical P ress,19751 [3] Zhou F X1Studies on the chem ical constituents of M orind a of f icinalis How1[J]1B u ll Ch in M ater M ed(中药通报), 1986,11(9):5541 [4] W ang Y F,W u Z H,Zhou X Y,et al1Chem ical constituents of M orind a of f icinalis How1[J]1A cta B ot S in(植物学报), 1986,28(5):5561 [5] Yo sh ikaw a M,Yam aguch i S,N ish isaka H,et al1Chem ical constituents of Ch inese natural m edicine,O rind ae R ad ix, dried roo ts of M orind a of f icinalis How:structures of mo rindo lide and mo rofficinalo side[J]1Che m P har m B u ll, 1995,43(9):14621 [6] Cui C B,Yang M,Yao Z W,et al1Studies on the antidep ressant active constituents in the roo ts of M orind a of f icinalis How1[J]1Ch ina J Ch in M ater M ed(中国中药杂 志),1995,20(1):361 [7] L i S1Studies on the chem ical constituents of Ch inese m edicine M orind a of f icinalis How1[J]1Ch in T rad it P at M ed(中成药),1988,10(10):331 [8] L iu W W,Gao Y Q,L iu J H,et al1D eterm inati on of chem ical constituents of the vo latile o il from R ad ix M orind ae Of f icinalis[J]1B iotechnology(生物技术),2005,15(6): 592611 [9] W u G X,L i Y X,Chen M Y,et al1D eterm inati on of fatty acid compo siti on in P hy llanthus e m bilica seed o il by GC2M S [J]1J Ch in M ed P har m acol(中医药学报),2003,31(6): 212241 [10] Zheng J X1T he P rod uction of F unctional F ood(功能性食 品)[M]1Beijing:Ch ina L igh t Industry P ress,19951 F usa rium saccha ri转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分 韩 颖1,姜彬慧1,胡筱敏1,赵余庆2Ξ (11东北大学资源与土木工程学院,辽宁沈阳 110004;21沈阳药科大学,辽宁沈阳 110016) 大量现代药理研究证实,五加科植物如人参、三七、西洋参等的摄入对抑制肿瘤的生长具有明显的作用,且这些植物的抗癌活性是通过其体内含有的特殊活性成分——达玛烷型三萜皂苷中的稀有次生皂苷成分实现的[1,2],如人参皂苷R g3、人参皂苷R h2、人参皂苷C2K和原人参二醇等。利用生物转化技术对人参皂苷的结构进行转化,既可以保持原有皂苷母核的结构不变,又可以获得活性更高的次生苷。本研究已经从种植人参的土壤中分离、筛选出一种活性菌株,经鉴定为芽孢杆菌,三七叶皂苷经其转化后可生成人参皂苷C2K和少量的20(S)2原人参二醇[3]。在近期的实验中又获得一种稀有菌种和活性菌株,经中国科学院微生物研究所张向民研究员鉴定为F usa rium saccha ri,其对三七茎叶皂苷具有极强的转化作用。转化后的产物通过硅胶、凝胶及制备液相色谱进行分离,得到4个单体化合物,通过理化常数测定和光谱数据分析,分别鉴定为20(S)2原人参二醇(PPD, )、20(S)2原人参二醇2202O2Β2D2吡喃葡萄糖苷(C2K, )、20(S)2原人参二醇2202O2Β2D2吡喃木糖苷(1→6)2Β2D2吡喃葡萄糖苷(M x, )、20(S)2原人参二醇2202O2Α2L2呋喃阿拉伯糖基(1→6)2Β2D2吡喃葡萄糖苷(M c, ),均为达玛烷型 ? 3 8 ?中草药 Ch i nese Trad itiona l and Herba l D rugs 第38卷第6期2007年6月 Ξ收稿日期:2007201226 基金项目:辽宁省自然科学基金资助项目(20062031,20062069) :(024)23986522:4885@126

三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进

作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@https://www.wendangku.net/doc/0210671567.html, 三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进 冯 亮,蒋学华3,叶利民 (四川大学华西药学院,四川成都610041) 摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三 七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法  T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)~15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。结 果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、 Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准 确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。 关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03 Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponions FE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming (West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China ) Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ?min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC. K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927 Document code :A Article I D :1006-0103(2006)02-0187-03 三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。其中三七总皂苷(Panax noto 2 ginseng saponions )为其主要的有效成分,具有活血化 淤的功效。三七总皂苷含有人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 、R f 、Rg 1、Rg 2、Rh 1和三七皂苷R 1、R 2、R 3、R 4、R 6等20余种皂苷成分,均属达玛烷型(Dammarane type )四环三萜皂苷。其中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参 皂苷Rg 1(Rg 1)是三七总皂苷中含量最高的两个成分,而三七皂苷R 1(R 1)则是三七总皂苷的特征化合物[1]。对于三七总皂苷原料及其口服制剂,文献[2]规定采用比色法测定总皂苷含量。而比色法在操作过程中存在操作烦琐、影响因素多及重复性差等问题[3],尤其是不能分别测定三七总皂苷中各主要成 分的含量。为此,特建立了薄层扫描法(T LSC )测定 三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1和R 1的含量[4];同时建立了HP LC 含量测定法,并与T LSC 法进行比较,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。 1 实验部分 1.1 仪器与试药 LC -9A 高效液相色谱仪,SPD -6AV 紫外检测 器(日本岛津);CS -930薄层扫描仪;Dikma Diam on 2sil C 18色谱柱(200mm ×4.6mm ,5μ m ,美国Dikma 公司);硅胶G 板(大连化物所)。Rb 1、Rg 1和R 1对照 品(中国药品生物制品检定所);三七总皂苷(云南特 安钠制备厂);乙腈(色谱纯,美国Dikma 公司);水(超纯水);其余试剂均为分析纯。1.2 T LSC 法1.2.1 含量测定 取三七总皂苷样品约50mg ,精 华西药学杂志 W C J ?P S 2006,21(2):187~189

HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量_曾荣华

中国医药指南 2010 年 2 月第 8 卷第 6 期Guide of China Medicine, February 2010, V ol.8, No.621 论 著 和预后的辅助指标。 综上所述,采用免疫组织化学SP法检测p53、VEGF、PCNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达,对于判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后有较好的临床应用价值。 参考文献 [1] Lane DP. P53 guanlian of the genoma [J].Nature,1992,358(6381): 15-16. [2] 阎洪涛,龚百生,廖勇,等.膀胱移行细胞癌组织中P53和血管内皮 生长因子表达的关系及临床意义[J].中华泌尿外科杂志,2006, 27(3):178-180.[3] Ferrara N,Henzel WJ. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding. Growth factor. Speci? c for vascular endothelial cells [J]. Biochem Biophys Res Commun,1989,161(2):851-858. [4] 郭雪涛,崔明玉.P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF在膀胱移行 细胞癌组织中的表达及意义[J].现代泌尿外科杂志,2007,14(4): 225-228. [5] Miyachi K,Frilzler MJ,Tan EM,et al. Autoantibody to a nuclear antigen in proliferating cells [J].J Immunol,1978,121(6):2228-2234. [6] 卢童,杨为民,章群. 膀胱移行细胞癌组织中P16、P53和PCNA的 表达及其意义[J].临床泌尿外科杂志,2008,23(1):58-60. 复方丹参片是2005年版《中国药典》一部收载的品种,由丹参、三七和冰片三昧药组成,有活血化瘀、理气止痛之功效,用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉,增加血流量,减少心肌耗氧量,改变血液流变性。同时也能改善糖尿病患者心、脑血管及神经系统并发症的症状及体征。三七是复方丹参片的重要药物组成,国内文献报道[1-3]。对不同厂家生产的本品的含量比较只是针对丹参中主要成分丹参酮ⅡA和丹酚酸B。三七总皂苷含量变化幅度较大,致使药品质量和疗效存在很大的差异。三七中的主要有效成分是人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1,已有文献报道采用HPLC法测定以上成分的含量来控制制剂的质量[4,5]。本文采用HPLC法,同时对复方丹参片中的三七总皂苷3种主要有效成分进行了含量测定,可用于控制复方丹参片的质量,保证其临床用药有效性提供参考。 1 资料与方法 1.1 资料 仪器与试剂:Agilentl100高效液相色谱仪(美国惠普公司); Agilentl100系列可变波长检测器;Diamonsil C18柱(5μm,250mm×4.6mm,迪马公司);BP211D电子分析天平(北京塞多利斯天平有限公1 广东省肇庆市第一人民医院药剂科(526021) 2 广东省肇庆医学专科学校(526021) HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量 曾荣华1邓雪媚1卢慧娴1莫肇江1刘燕2 【摘要】目的建立复方丹参片中三七有效成分的含量测定方法。方法采用HPLC法测定本品中三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为0.850~8.524、0.922~9.013、0.377~3.317μg;平均回收率分别为101.1%、101.2%、103.2%,RSD分别为1.5%、1.6%、1.8%。结论本方法简便可靠,结果稳定,可用于丹心舒胶囊中三七的有效成分的含量测定。 【关键词】复方丹参片;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;三七皂苷R1;含量测定 中图分类号:R927.2 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2010)06-0021-03 Determiation the Contents of Panax Notoginseng Saponins in Compound Danshen Tablets by HPLC ZENG Rong-hua1,DENG Xue-mei1,LU Hui-xian1,MO Zhao-jiang1, LIU Yan2 (1 Department of Pharmacy, The First People' s Hospital of Zhaoqing, Zhaoqing 526021,China; 2 Zhaoqing Medical College, Zhaoqing 526021, China) [Abstract]Objective To analyze the active compounds of Panax notoginseng and Salviae miltiorrhizae in Compound Danshen Tablets. Methods HPLC was used to analyze the contents of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1 and notoginsenoside R1 in Compound Danshen Tablets. Results The linear ranges of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, and notoginsenoside R1 were 0.850~8.524, 0.922~9.013, 0.377~3.317μg. With average recoveries of 101.1%(RSD=1.5%), 101.2% (RSD =1.6%), 103.2% (RSD=1.8%). Conclusion The method is simple, reliable and stable, which could be used for the quality control of Compound Danshen Tablets. [Key words]Compound Danshen Tablets; Ginsenoside Rg1; Ginsenoside Rb1; Notoginsenoside R1; Determination 司);KQ100型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 人参皂苷Rg1(批号:110703-200637)、人参皂苷Rb1(批号: 110704-200634)、三七皂苷R1(批号:110745-200619),对照品均供 含量测定用,由中国药品生物制品检定所提供。实验中乙腈为色谱纯, 水为纯净水,甲醇为分析纯;复方丹参片(广州白云山中药厂)。 1.2 方法 1.2.1 色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18柱(5μm,250mm×4.6mm);以乙腈为 流动相A,0.05%磷酸水溶液为流动相B,进行二元梯度洗脱,洗脱程 序[6]:0→12min流动相A 22%,12→20min流动相A 22%→28%,20→ 60min流动相A 28%→43%;流动相B 81%→64%;流速:1.0mL/min; 柱温:30 ℃;检测波长:203nm,进样量为10μL。 1.2.2 供试品溶液的制备 取复方丹参片20片(除去包衣),研碎,精密称取约0.8g,加乙醚DOI:10.15912/https://www.wendangku.net/doc/0210671567.html,ki.gocm.2010.06.024

保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究

保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究 发表时间:2014-08-26T15:20:35.077Z 来源:《医药前沿》2014年第20期供稿作者:张高飞于玥邬晓鸥李军 [导读] 本文建立的方法简单、便捷,准确性、重复性好,可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 张高飞于玥邬晓鸥李军 (深圳市药品检验所 518057) 【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分,经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后,试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应,产生特征的紫红色,在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722~0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系,平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷,准确性、重复性好,可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法 【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)20-0217-02 皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮,增强免疫,抗疲劳的功效[1],常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等,均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6],在实际应用中,主要存在以下问题:1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾,部分样品存在柱容量超载的情况,测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后,仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范,导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究,建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。 1 仪器、材料与试药 岛津UV2450紫外分光光度计;瑞士梅特勒XS105DU电子天平;上海一恒电热恒温水浴锅;人参皂苷Re(中检所,批号110754-200822,含量88.8%);儿童装高丽红参液,舒灵胶囊,舒慰快牌胃肠液均购自市场;水为蒸馏水,其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1供试品溶液的制备 固体试样:称取1 g样品,置100 mL容量瓶中,加水80 mL,超声提取30 min,放冷至室温,用水定容至刻度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25 mL,进行萃取。 液体试样:吸取试样10 mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品,水浴挥尽乙醇),加水至约25 mL,进行萃取。 在已处理好的试样中加入20 mL水饱和正丁醇,振摇萃取3次,取正丁醇层(必要时可离心),合并提取液,用20 mL氨试液洗涤3次,置蒸发皿中100℃水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中,甲醇定容,即得。 2.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL具塞比色管中,水浴挥干溶剂,加入0.2 mL 5%香草醛冰乙酸溶液,再加入0.8 mL高氯酸,使残渣溶解,于60℃水浴加热10 min,冰浴冷却后,精密加入冰乙酸5 mL,摇匀,于560 nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1 mL于10 mL具塞比色管中,自“水浴挥干溶剂”起操作。 3 方法学考察 3.1线性关系 取人参皂苷Re对照品0.01804 g,置100 mL量瓶中,加甲醇溶解稀释至刻度,作为标准溶液,精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、 1.0、1.2 mL分别置10 mL比色管中,水浴蒸干,显色,以对照品的质量(mg)为横坐标,吸光度为纵坐标,得回归方程:y=4.4807x- 0.0886,r=0.9997。结果表明,人参皂苷Re对照品质量在0.0722~0.2165 mg之间与吸光度呈良好的线性关系。 3.2 萃取次数 取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液,按2.1制备样品水提取液,用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次,结果表明,萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。 表1 萃取次数比较结果 3.3热稳定性考察 由于正丁醇沸点较高,为此对人参皂苷的热稳定性进行考察,以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6 mL,分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30 min处理,测定结果分别为0.663、0.658、0.653,表明人参皂苷的热稳定性良好,因此水浴温度选为100℃。 3.4显色稳定性 取人参皂苷Re标准溶液0.3 mL,显色后每隔10 min测定其吸光度,结果表明,显色后的紫红色溶液不稳定,吸光度呈下降趋势,因此显色完成后需在10 min内完成测定。 3.5重复性试验 取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液,分别测定,结果表明本方法重复性良好(表2)。

三七的成分

三七的成分 目前国家批准实验的保健品共有24种功能中三七就占19种功能。三七的成分为三七皂苷、黄酮类化合物、三七的糖类成分、三七中的挥发油、三七中的氨基酸成分、三七中的微量 元素、植物油脂、淄醇和炔、烯、烃类化合物等 临床研究目前所发现的三七有效成分为 前人对三七的化学成分进行了较为系统的研究。到目前为止,从三七中分离得到的化学成分主要有皂苷、黄酮、挥发油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白质等以及部分无机化学成分如氮、磷、钾等大量元素和钴、钼、铯等微量元素。 三七的成分-三七皂苷 三七皂苷皂苷(Saponins)是三七主要有效活性成分,也是目前研究较为系统的化学物质。20世纪30年代起,我国学者与日本学者相继开展了对三七皂苷的研究,通过对三七粉、三七花、三七叶、三七梗茎、三七果实等的深入细致研究,迄今共分离得到了24种达玛烷型皂苷。70年代以后,随着现代分离手段及测试仪器的广泛应用,三七皂苷类化学成分的研究才取得显著的进展。迄今为止,已从三七的不同部位分离得到50种单体皂苷成分,这些单体皂苷成分大多数为达玛烷型的20(S)一原人参二醇型20(S)一rotopanaxdiol和20一(S)原人参三醇型[20(s)一protopanaxtriol],但未发现含有齐墩果酸型皂苷。这与同属植物人参和西洋参有着显著区别。这些单体皂苷中也有很多与人参和西洋参中所含皂苷成分相同, 如人参皂苷(ginsenoside)Rb1,Rb2,Rb1,Rc,F2,Rg1,Rg2等,其中,尤以人参皂苷Rg1,和Rb1。含量最高。除此以外,也有一些是三七所独有的皂苷类成分,如三七皂苷(notoginoside)R1,R2,R4,R5,Fa,Fc,Fe等。三七的地下部分既有20(S)一原人参二醇型皂苷,也含20(S)原人参三醇型皂苷。20世纪90年代以来,赵平和马伟光等从三七根中分离到了3个微量皂苷,命名为三七皂苷(notoginsenoside)R7,R8和R9。而后,1997年,Yoshikawa(系川秀志)等人从三七的根中分离出新的10种三七皂苷,命名为Notoginsenoside A,B,C,D,E,G,H,I,J,K;2001年Yoshikawa等人又从三七的根中分离出3种新的三七皂苷,命名为Notoginoside L,M,N。最近李海舟等又从三七根中 分离到了1种微量皂苷,命名为三七皂苷R10。主根和根茎中皂苷均以Rg1和Rb1为主要成分。以前的化学研究多集中在对三七主根、绒根、茎叶、花等部位。对三七根茎的化学成分研究较少。杨崇仁等从中分离到了9个皂苷,分别是人参皂苷Rb1,Rd,Re,Rg1,Rg2及三七皂苷R1,R2,R4。并发现各单体皂苷

总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法-实验流程图-李熙灿-XicanLi

总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法(香草醛法):实验流程图2017.10 【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16. 【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中,而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。为了测定这些皂苷的总含量,便建立了总皂苷的检测方法。总皂苷的检测多使用分光光度法,并以某种标准品绘制工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。 【溶液配制】 1.香草醛-冰醋酸溶液(测试液)配制:精密称取25mg香草醛,加冰醋酸定容至5mL。即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。 2.样品液配制:将待检测的样品用甲醇溶解,配成约5mg/mL的样品液。具体浓度视样品的溶解度而定, 但是必须有精确的数据。 3.齐墩果酸标准品溶液配制:精密称取齐墩果酸1mg,加甲醇定容至5mL,配成0.2mg/mL齐墩果酸标 准品溶液。(也可以使用其他的皂苷物质,如人参皂苷Rg3。但必须是纯的化合物) 4. 高氯酸:分析纯试剂。 5. 冰醋酸:即纯的无水乙酸(分析纯) 【检测方法与实验流程图】 【标准曲线绘制】(齐墩果酸) 取上述齐墩果酸溶液x μL (x=0,40,80,120,160,200),依“实验流程图”,在70℃水浴15mim 后呈桃红色。以第一份溶液(x=0)作为空白对照,测A540nm值。以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量,为横坐标,A540nm值为纵坐标,绘制标准曲线。以此标准曲线计算,得线性回归方程。 【样品液的测定】 将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液,进行实验,并测定其A540nm值。将此A540nm代入线性回归方程,即可计算出其总皂苷的含量(以齐墩果酸计)。 【说明】 1.此法是以齐墩果酸为标准品测得总皂苷的含量。所以,其结果应表示为,如:“某某提取物中含 有0.12mg/g的总皂苷(以齐墩果酸计)”。这并不意味着该提取物中真的就含有齐墩果酸。 2.“实验流程图”中,在“彻底挥干溶剂”一步中,如果溶剂挥干不彻底,哪怕是有一点点,都 会干扰。水也要彻底挥干。 1

三七茎、叶中皂苷类成分的含量测定

三七茎、叶中皂苷类成分的含量测定 实习学生:杨正丹 2009级中药3班 指导老师:* * 摘要目的:建立三七茎、叶中皂苷类成分的比色测定方法,分析三七茎、叶中皂苷类成分的含量,为三七茎叶原料的质量评价提供依据。方法:采用香草醛-高氯酸比色法分别测定三七茎、叶中皂苷类成分含量。结果:测得三七茎和叶中皂苷类成分的含量分别为2.71%和12.79%,含量差异较大,三七叶中皂苷类成分含量为三七茎的5倍。结论:本法可用于对三七茎叶的质量控制,为三七茎叶原料的质量评价及开发利用提供实验依据。 关键词三七茎叶;含量测定;三七茎叶皂苷;人参皂苷Rb 1 Abstract:To establish an analysis method of colorimetry of PnGL from the stalks and leaves of Panax notoginseng,and The results could provide the basis for rational development and utilization of resourcesof the stalks and leaves of Panax notoginseng. Methods:Determine theegnoside of the content of PnGL through colorimetry with vanillin and perchlorate respectively. Results: The contents of PnGL in Panpax Notoginseng stalks and leaves were 2.71% and 12. 79%. The contents of total saponins in Panax notoginseng stalks and leaves vary significantly.The contents of PnGL in Panpax Notoginseng leaves is 5 times more than the stalks. Conclusion:This method can be used for quality evaluation of Panax notoginseng stalks and leaves. Key Words:Panax notoginseng stalks and leaves; content determination; Panax notoginsegnoside of the leaves; ginsenoside Rb 1. 三七( Panax Notoginseng (Burk. ) F. H. chen)为五加科人参属多年生草本植物,是传统的名贵中药材,主产于我国云南、广西。三七的干燥根,《本草纲目》中记载有散瘀止血、消肿定痛、补益气血等功效。大量研究证明,三七根对血液和造血系统、心脑血管系统、中枢神经系统、免疫系统等都具有显著的作用,其主要有效成分为总皂苷( total saponins of Panax Notoginseng, PNS) 、三

三七总皂苷工艺方法

三七总皂昔工艺方法 【摘要】目的研究氧化铝柱层析精制三七总皂昔工艺。方法采用HPLCfe测定三七总皂昔的含量,考察洗脱剂的浓度、洗脱剂的用量和吸附剂用量对工艺的影响。结果确 定最佳精制工艺为:洗脱剂的浓度为55%乙醇,洗脱剂的用量为10倍吸附剂的用量,吸附剂用量为5倍三七总皂昔的用量。结论通过氧化铝柱层析精制后,三七总皂昔的收率大于70%含量大于80%说明此精制工艺是可行的。 【关键词】三七总皂昔氧化铝高效液相法 三七为五加科植物三七的干燥根及根茎[1],三七总皂昔是中药三七的有效部位,主要含有三七皂昔R1,人参皂昔Rg1和人参皂昔Rb1等达玛烷型三站皂昔类化合物[2] c 现代药理研究证明:三七总皂昔具有多方面的生物活性,主要表现在扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、

抗凝、钙拮抗等方面[3]。 目前三七总皂昔的富集与纯化一般采 用大孔吸附树脂来完成[4],纯化后二七总 皂昔的含量达到60%U 上。为了提高药物的 安全性和有效性,提高其成药原料药的纯度 本实验拟米用氧化铝柱层析对三七总皂昔 的纯化物进行精制[5],并对工艺进行了考 察,为进一步的制剂学研究打下基础。 1仪器与试药 仪器与设备 RE52-99旋转蒸器;DK-S22型电热恒温 水浴锅;JA-1003型电子分析天平;电热鼓 风干燥箱;美国Tsp 高效液相色谱仪; TspP-2000 泵、 TspUV-1000UV-VIS 检测 TspPC100咱谱工作站; 材料与试剂 三七总皂昔提取物; 三七皂昔R1、人参皂昔 对照品;乙月青为色谱纯,水 为二次蒸偕水。 2方法与结果 色谱条件 色谱柱:ODSC1魁;流动相:A 为乙月青, 犯? 希; 色谱柱:ODSC1三七总皂昔对照品: Rg1、人参皂昔Rb1

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