链球菌属检验

1．概述

链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群（A、B、C、D、F、G等18个群），或根据溶血现象（β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）进行分类。化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌，属A群、β溶血的链球菌。

2. 标本类型

血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3. 鉴定

3.1 形态与染色革兰阳性球菌，固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状排列，肉汤培养基中呈长链状排列，肺炎链球菌呈矛头状，成双或链状排列。

3.2 培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应：α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环；β溶血周围有明显较大的完全透明环；γ溶血（不溶血性）无异常变化。肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色α溶血环。

3.3 生化反应触酶试验阴性，对各种碳水化合物的分解因菌种而异，链球菌不被胆汁溶解。肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感（抑菌环＞14mm）。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。

3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。

A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。

B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。

C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。

D群肠球菌（粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌等）：胆汁七叶苷、6.5%氯化钠耐盐试验均为阳性，45℃生长。现归属于肠球菌属。

C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。

非β溶血链球菌的鉴别见表1。

表1 非β溶血链球菌的鉴别

菌名Optochin试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验

肺炎链球菌+ + -

牛链球菌- - +

其他草绿色链球菌群- - -

3.5 操作步骤

3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。

3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。

3.5.3 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4. 药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。

5. 质量控制

参见《质量管理程序》。

6. 检验结果解释与分析

6.1 草绿色链球菌是人体正常菌群的一部分，通常是不致病的，只有当草绿色链球菌出

现在血液等无菌体液中时，鉴定才有意义。

6.2如果检测出链球菌对青霉素敏感，同时该菌被认为对氨苄西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林、头孢克洛、头孢唑林、头孢地尼、头孢布坦、头孢曲松、头孢吡肟、头孢唑肟、头孢噻肟等头孢类敏感，则不必进行上述抗生素的药敏试验。如果检测出肺炎链球菌苯唑西林抑菌圈≤19mm，应当检测青霉素、头孢噻肟和头孢曲松的MIC，因为可能发生青霉素耐药或中介现象。如果检测出链球菌对红霉素敏感或耐药，则提示该菌对克拉霉素、阿奇霉素、地红霉素敏感或耐药。近年来青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）及多重耐药（MDRSP）菌株的增加，给临床治疗带来一定的困难。

7. 临床意义

化脓性链球菌（A群链球菌）是引起化脓性感染的主要病原菌，致病力最强，可引起痈、蜂窝织炎、急性咽炎、丹毒、脓疱疮、猩红热、医源性伤口感染和产后感染等。此外其感染后也可发生急、慢性风湿热和急性肾小球肾炎等严重变态反应性并发症。无乳链球菌（B群）正常寄居于妇女阴道和人体肠道，带菌率可达30%左右，此菌可引起新生儿感染。肺炎链球菌存在于正常人群的口腔、鼻咽部，属正常菌群，可引起大叶性肺炎或支气管炎。草绿色链球菌是人体上呼吸道正常菌群，通常不致病。如果在血液内或无菌体液中检出草绿色链球菌，有临床意义。

8. 鉴定流程

参考文献

[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008

[2] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007

[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006

[4] Murray PR. Manual of Cinical Microbilogy. 9th ed.Washington:ASM Press,2007

[5] ISO 15189：2007医学实验室-质量和能力认可准则. 2007

肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基

葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养 配方：（g/L） 牛肉粉 氯化钠 蛋白胨 磷酸氢二钾 葡萄糖 pH值7.5 ± 0.1 3.0 5.0 10.0 2.0 10.0 25℃ 原理： 蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾为缓冲剂；葡萄糖提供碳源。 用法： 称取本品 30.0g,煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 在36±1℃培养24小时。 质控菌株ATCC生长情况 溶血性链球菌（10-8）+++ 单增李斯特氏菌27853 （10-8）+++ 大肠杆菌25922 +/- 沙门氏菌14028 +/- 匹克氏肉汤基础A Pick’s Broth BaseA 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养 配方：（g/L） 胰蛋白胨 牛心浸粉 叠氮钠 结晶紫 pH值7.3-7.5 10.0 20.0 0.065 0.002 25℃

原理： 胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；脱纤维兔血（或羊血）为溶血性链球菌提供大量生长因子；结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。 用法： 称取本品 30.0g,加热溶于1000ml 蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌 15 分钟, 冷至 50℃左右时,加入脱纤维羊血,混匀。 质量控制： 在36±1℃培养18-24小时。 质控菌株ATCC生长情况溶血现象 溶血性链球菌+++ +（大） 单增李斯特氏菌27853 ++ +（小） 大肠杆菌25922 - - 沙门氏菌14028 - - 肉浸液肉汤培养基 Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准） 配方：（g/L） 牛肉粉 氯化钠 蛋白胨 磷酸氢二钾 pH值7.5 ± 0.1 3.0 5.0 12.0 2.0 25℃ 原理： 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。 用法： 称取本品 20.0g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 在36±1℃培养18-24小时。 质控菌株菌株编号生长情况其它特征 溶血性链球菌ATCC32210 +++ 浑浊

溶血性链球菌检验

【GB/T 4789.11—1994】 食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。 本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球菌的检验。 2 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 3 设备和材料 3.1 温箱：36±1℃。 3.2 水浴：36±1℃。 3.3 显微镜。 3.4 离心机。 3.5 试管架。 3.6 灭菌平皿。 3.7 灭菌小试管。 3.8 载玻片。 3.9 灭菌吸管：1mL、10mL。 3.10 灭菌镊子。 3.11 均质器。 3.12 酒精灯。 3.13 接种环。 4 培养基和试剂 4.1 葡萄糖肉浸液肉汤：按GB 4789.28中4.1规定，在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。 4.2 肉浸液肉汤：按GB 4789.28中4.1规定。 4.3 匹克氏肉汤：按GB 4789.28中4.62规定。 4.4 血琼脂平板：按GB 4789.28中4.6规定。 4.5 人血浆。 4.6 0.25%氯化钙。 4.7 灭菌生理盐水。 4.8 杆菌肽药敏纸片(含0.04单位)。 5 检验程序 （图略） 6 操作步骤 6.1 样品处理 称取25g固体检样；称取25mL液体检样，加入225mL灭菌生理盐水，研成匀浆制成混悬液。 6.2 一般培养 将上述混悬液吸取5mL，接种于50mL葡萄糖肉浸液肉汤；或直接划线接种

于血平板，如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经36±1℃培养24h，接种血平板，置36±1℃培养24h，挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。 6.3 形态与染色 本菌呈球形或卵圆形，直径0.5～1μm，链状排列，链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者20～30个，链的长短常与细菌的种类及生长环境有关；液体培养中易呈长链；在固体培养基中常呈短链，不形成芽孢，无鞭毛，不能运动。 6.4 培养特性 该菌营养要求较高，在普通培养基上生长不良，在加有血液、血清培养基中生长较好。溶血性链球菌在血清肉汤中生长时管底呈絮状或颗粒状沉淀。血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.5～0.75mm，为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有2～4mm界限分明、无色透明的溶血圈。 6.5 链激酶试验 致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白。 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入18～ 24h36±1℃培养的链球菌培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL(如氯化钙已潮解，可适当加大至0.3%～0.35%)，振荡摇匀，置于36±1℃水浴中10min，血浆混合物自行凝固(凝固程度至试管倒置，内容物不流动)。然后观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。 草酸钾人血浆配制：草酸钾0.01g放入灭菌小试管中，再加入5mL人血，混匀，经离心沉淀，吸取上清液即为草酸钾人血浆。 6.6 杆菌肤敏感试验 挑取乙型溶血性链球菌液，涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片，放于上述平板上，于36±1℃培养18～24h，如有抑菌带出现即为阳性。同时用已知阳性菌株作为对照。

链球菌属检验

文件页码：1/3 1．概述 链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群（A、B、C、D、F、G等18个群），或根据溶血现象（β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）进行分类。化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌，属A群、β溶血的链球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状排列，肉汤培养基中呈长链状排列，肺炎链球菌呈矛头状，成双或链状排列。 3.2 培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应：α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环；β溶血周围有明显较大的完全透明环；γ溶血（不溶血性）无异常变化。肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色α溶血环。 3.3 生化反应触酶试验阴性，对各种碳水化合物的分解因菌种而异，链球菌不被胆汁溶解。肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感（抑菌环＞14mm）。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。 3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。 A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。 B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。 C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。 D群肠球菌（粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌等）：胆汁七叶苷、6.5%氯化钠耐盐试验均为阳性，45℃生长。现归属于肠球菌属。 C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。 非β溶血链球菌的鉴别见表1。 表1 非β溶血链球菌的鉴别 菌名Optochin试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌+ + - 牛链球菌- - + 其他草绿色链球菌群- - - 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。 5. 质量控制 参见《质量管理程序》。

肠球菌属(新)

第三节肠球菌属 广泛分布在自然界，常栖居人、动物得肠道与女性生殖道，就是引起医院内感染得重要病原菌。 一、分类： 链球菌科，具有D群链球菌得D抗原，过去就是属于链球菌属得D 群，但种系分类法用DNA杂交研究发现，证实粪肠球菌与屎肠球菌不同于链球菌属细菌，与链球菌同源程度低，所以现将其从链球菌属中划分出来，命名为肠球菌属。由16SrRNA序列分析与核酸杂交等，证实有19种肠球菌，分成5群，临床标本分离得多属于群2。 二、临床意义： 最多见于尿路感染，多与尿路器械操作、留置导尿、尿路结构异常有关，就是重要得医院感染病原菌。腹腔与盆腔创伤时肠球菌也就是常见细菌。肠球菌引起得菌血症常发生于有严重基础疾病得老年人、长期住院接受抗生素治疗得免疫功能低下得患者。近年来不断上升得肠球菌感染率与广泛使用抗生素出现得耐药性有关。 三、微生物特性： G+球菌，单个、成双或短链状排列，琼脂平板上生长得细菌呈球杆状，液体培养基中呈卵圆形、链状排列。无芽胞与荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛。 兼性厌氧菌，最适温度35℃，大多数菌株在10℃与45℃均能生长。所有菌株在含6、5%NaCl肉汤中能生长，在40%胆汁培养基中能分解七叶苷。

多数菌种具有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR），氧化酶（-），触酶（-）但某些菌株触酶可出现弱（+）。当粪肠球菌培养于含血得培养基中，可合成细胞色素氧化酶或触酶或两者皆有。 含D群链球菌D抗原。 与链球菌得显著区别： 能在高盐（6、5%NaCl）、高碱（pH9、6）、高胆汁（40%）培养基、10℃与45℃均能生长、对许多抗菌药物表现天然耐药 四、微生物检查： （一）检验程序：图6-3 （二）标本采集： 血、尿、创伤标本等，标本1h内接种完毕。 （三）标本直接检查： G染色镜检 （四）分离培养与鉴定： BAP 若标本中含G-杆菌，可用选择鉴别培养基： ①叠氮胆汁七叶苷琼脂——可抑制G-菌生长，肠球菌分解七叶苷为黑色菌落； ②哥伦比亚多黏菌素-萘啶酸琼脂（CAN）与苯乙基乙醇琼脂（PEA）。35℃、24h形成灰白色、不透明、表面光滑、直径0、5~1mm大小得圆形菌落，羊血平板上为α溶血或不溶血，粪肠球菌得某些菌株在马

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验.

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。 本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球的检验。 2 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 3 设备和材料 3．1 温箱：36±1℃。 3．2 水浴：36±1℃。 3．3 显微镜。 3．4 离心机。 3．5 试管架。 3．6 灭菌平皿。 3．7 灭菌小试管。 3．8 载玻片。 3．9 灭菌吸管：1 mL、10 mL。 3．10 灭菌镊子。 3．11 均质器。 3．12 酒精灯。 3．13 接种环。 4 培养基和试剂 4．1 葡萄糖肉浸液肉汤：按GB 4789.28 中4.1 规定，在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。4．2 肉浸液肉汤：按GB 4789.28 中4.1 规定。 4．3 匹克氏肉汤：按GB 4789.28 中4.62 规定。 4．4 血琼脂平板：按GB 4789.28 中4.6 规定。 4．5 人血浆。 4．6 0.25%氯化钙。 4．7 灭菌生理盐水。 4．8 杆菌肽药敏纸片（含 0.04 单位）。 5 检验程序 6 操作步骤 6．1 样品处理 称取 25 g 固体检样；称取25 mL 液体检样，加入 225 mL 灭菌生理盐水， 研成匀浆制成混悬液。 6．2 一般培养 将上述混悬液吸取 5 mL，接种于 50 mL 葡萄糖肉浸液肉汤；或直接划线接 种于血平板，如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经 36±1℃培 养 24 h，挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血 情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。 6．3 形态与染色 本菌呈球形或卵圆形，直径 0.5～1 μm，链状排列，链长短不一，短者4～8 个细胞组成，长者 20～30 个，链的长短常与细菌的种类及生长环境有关；液体 培养中易呈长链；在固体培养基中常呈短链，不形成芽孢，无鞭毛，不能运动。 6．4 培养特性

溶血性链球菌

1.溶血性链球菌 ①GB4789.11-2014 《食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验》于 2015年05月01日实施，代替GB/T 4789.11-2003 《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》。 注：根据链球菌在血液培养基上生长繁殖后是否溶血及其溶血性质分为三类，α-溶血性链球菌，也称甲型溶血，此类细菌致病力不强，多为条件致病菌。在人类呼吸道及肠道中有α型溶血链球菌正常寄生，但有时也可引起亚急性心内膜炎等症。β-溶血性链球菌，这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。具体用途是用于研究和质量控制。γ-溶血链球菌也称为丙型或不溶血性链球菌，该菌无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔也引起感染。 ②选作项目：链激酶试验：搜索了广东环凯/青岛海博/北京陆桥均没有发现“草酸钾血浆”或者链激酶实验套装在售。 ③生化鉴定：搜索了广东环凯/青岛海博/北京陆桥仅在北京陆桥发现“溶血性链球菌荧光定量PCR检测试剂盒“ 2.根据GB4789.35-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》可进行双歧杆菌计数嗜热链球菌鉴别乳杆菌鉴别如果对标准理解没有错误的情况下，应该问题不大。 3.若根据GB4789.34-2012 进行双歧杆菌的鉴定，需要气相色谱，这个仪器是微生物检验科所不具备的。 4.总之，从实验条件上，药品检验实验室是否可以用于保健食品的检测，尚不明确；从人员看，微生物检验科实验人员均没有上述检验项目的检验经验。从检测标准看，除自学外，微生物检验科检验人员均没有相关标准的学习经历。从仪器设备材料看，溶血性链球菌检验缺少相关试剂及仪器。

β溶血性链球菌

化脓性链球菌: 抗生素选择:A青霉素阿莫西林B第一代头孢菌素红霉素克林霉素 β溶血性链球菌: 抗生素选择:A青霉素B打环内酯类C头孢第一代或第二代类菌素 B组链球菌: 抗生素选择:A氨苄西林B头孢曲松或头孢噻肟 草绿色链球菌: 抗生素选择:A青霉素+氨基糖苷类B头孢噻吩或头孢唑林+氨基糖苷类 肺炎链球菌: 抗生素选择:青霉素敏感:A青霉素B阿莫西林(或+克拉维酸)C头孢第一代或第二代类菌素 青霉素耐药:A头孢第三代B喹诺酮类 流感嗜血杆菌: 抗生素选择:A氨苄西林(或+舒巴坦) 阿莫西林(或+克拉维酸) B头孢第一代或第二代类菌素喹诺酮类卡他莫拉菌: 抗生素选择:A头孢第一代或第二代类菌素B喹诺酮类氨苄西林+舒巴坦阿莫西林+克拉维酸 军团菌: 抗生素选择:A大环内酯类B喹诺酮类 肺炎支原体: 抗生素选择:A大环内酯类B喹诺酮类多西环素 肺炎衣原体: 抗生素选择: A大环内酯类B喹诺酮类多西环素 金葡菌: 抗生素选择:甲氧西林敏感:A苯唑西林氯唑西林B头孢第一代或第二代类菌素克林霉素林可霉素甲氧西林耐药:A万古霉素B磷霉素利福平复方磺胺甲恶唑+万古霉素 腐生葡萄球菌: 抗生素选择:A头孢氨苄头孢拉定头孢唑林B呋喃妥因磷霉素头孢呋辛 肠球菌属: 抗生素选择:A阿莫西林氨苄西林氨基糖苷类B呋喃妥因万古霉素 革兰氏阴性杆菌: 抗生素选择:A头孢第二代或第三代类菌素B喹诺酮类β内酰胺类+β内酰胺酶抑制剂 肠杆菌科细菌: 抗生素选择: A头孢第二代或第三代类菌素(或联用氨基糖苷类) B喹诺酮类β内酰胺酶抑制剂复方 炭青霉烯类 大肠埃希菌: 抗生素选择: A呋喃妥因磷霉素B头孢氨苄头孢拉定喹诺酮类 肺炎克雷伯菌: 抗生素选择: A头孢第二代或第三代类菌素B喹诺酮类头孢第四代菌素 志贺菌属: 抗生素选择: A喹诺酮B阿莫西林、呋喃唑酮、磷霉素、头孢第一代或第二代类菌素 沙门菌属: 抗生素选择: A喹诺酮B氨苄西林、磷霉素 耶尔森菌属: 抗生素选择:A喹诺酮类B氨基糖苷类 变形杆菌属: 抗生素选择:A派拉西林氨苄西林+舒巴坦阿莫西林+克拉维酸 B头孢第二代或第三代类菌素喹诺酮类氨基糖苷类

溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告

溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告 溶血性链球菌所有的实验活动均应在BSL-2实验室操作 一、评估对象及分类等级 1 溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus）细菌又称乙型溶血性链球菌（β- hemolyticus Streptococcus）和化脓性链球菌（Streptococcus pyogrnes），是链球菌按照是否产生溶血和溶血性质分类，在血平板上产生2~4mm宽的透明溶血环的一类链球菌，可引起人类及灵长类动物多种疾病。 2 根据《中华人民共和国传染病防治法》，由溶血性链球菌引起的传染病列为乙类传染病。 3 在卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中溶血性链球菌被列为第三类病原微生物。 二、背景资料 1 一般生物学特性 1．1 形态染色 链球菌呈球形或椭圆形，直径0.6-1.0μm，呈链状排列，长短不一，从4-8个至20-30个菌细胞组成不等，链的长短与细菌的种类及生长环境有关。在液体培养基中易呈长链，固体培养基中常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。 1．2 培养特性 需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表

溶血性链球菌药物治疗

溶血性链球菌药物治疗 1.青霉素：为首选药物，早期应用可缩短病程，减少并发症。 2.无条件注射者可选用先锋霉素Ⅵ、先锋毒素Ⅳ、羟氨苄青霉素、氨苄青霉素等口服。 3.对青霉素过敏者可选用红霉素、交沙霉素、螺旋霉素等口服。或红霉素、洁霉素静脉滴注。 （一）A组溶血性链球菌药物治疗： A组链球菌即化脓性链球菌是人类细菌感染中最重要的病原菌之一，只要引起急性咽峡炎、急性扁桃体炎、丹毒、猩红热、肺部感染、皮肤软组织感染以及全身性感染，也是变态反应性疾病风湿热和急性肾小球肾炎的间接病因。今年来，严重的A组链球菌感染又逐渐增多，大多数患者为健康成人和儿童，感染呈急进性，常发生败血症、深部软组织感染、休克和多脏器功能障碍综合征，病死率高达30%以上。 【病原治疗】 (1)首选青霉素。 (2)肺炎球菌脑膜炎或败血症者，青霉素的剂量可加大，也可联合用药即青霉素或氨苄西林与阿米卡星联用；或头孢曲松或头孢噻肟，分次静脉滴注。疗程均为2周以上。 (3)若为对青霉素中度耐药的菌株，可增加青霉素的剂量即可达到满意的疗效；若为高浓度耐药者，则对其他β-内酰胺类抗生素和许多其他抗生素也会出现耐药，应首选万古霉素、替考拉宁等。 (4)对青霉素过敏者，可选用第一、二代、三代头孢菌素静脉滴注或红霉素静脉滴注，疗程7-10天。一般不选用四环素及喹诺酮类抗生素。 【参考文献】 北京协和医院主编《感染性疾病诊疗常规》，人民卫生出版社，2004，P156； 化脓性链球菌药物治疗 首选药物：青霉素； 可选药物：大环内酯类如红霉素、交沙霉素、螺旋霉素等、林可霉素类、复方磺胺甲基异噁唑。

【参考文献】 刘锡光主编《现代诊断微生物学》人民卫生出版社，2002；（二）B组溶血性链球菌药物治疗 首选药物：青霉素；可选药物：大环内酯类、林可霉素类。【参考文献】 刘锡光主编《现代诊断微生物学》人民卫生出版社，2002；

链球菌属的微生物检验分析

链球菌属的微生物检验分析 摘要】链球菌是临床常见的致病菌，对链球菌属的检查方法试验方法进行分析。采用标本的直接涂片和分离培养方法进行检查。掌握正确的检验方法，科学地分 离鉴定，为临床出作合理的诊断。 【关键词】链球菌属；微生物检验；试验方法 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）16-0391-02 链球菌属，亦属化脓性球菌中的一大类常见菌。为链状、单个或成双排列的 革兰阳性球菌。分布广泛，存在于人及动物肠道和健康人鼻咽部，大多不致病。 少数可引起人类的化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风 湿热、肾小球肾炎等超敏性疾病。 1.一般资料 对微生物实验室接收实验样本70例，其中咽拭子样本6例，痰液样本24例，分泌物16例，穿刺液4例，尿液14例、脑脊液1例，血液培养15例。其中门 诊患者样本4例，住院患者样本64例。细菌培养结果：阳性24例，阳性率 34.2%，其中链球菌属阳性为2例。 2.检查方法 标本的直接涂片，革兰染色后镜检，如符合链球菌形态且无正常菌群污染的 标本可初报。分离培养，血液标本须先增菌培养；其他标本多采用羊血平板，有 利于识别溶血性。初代分离需用5％的CO2、35～37℃环境中孵育24 h观察菌落 性状[1]。 3.试验方法 3.1 溶血性检查 溶血性是鉴定球菌最常用的项目，也是鉴定过程中重要的一步。1919年Brown对溶血性进行了描述。 3.1.1菌种 α溶血或称甲型溶血，在血平板上，菌落周围部分红细胞被破坏，呈现一个 草绿色环。β溶血或称乙型溶血，在血平板上，菌落周围红细胞完全溶解，呈现 一个清楚透明溶血环。γ溶血或称丙型溶血，血平板上，菌落周围无红细胞溶解，因而无溶血环。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过肉眼观察， 也可用显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外，还可用以下方 法确认。 3.1.2材料 羊血平板。 3.1.3方法 将标本接种于羊血平板上，用接种针在已接种过的血平板上扎2～3处，使 细菌被接种到琼脂层深处，35℃环境中孵育过夜。 3.1.4观察结果 在接种针穿刺过处，羊红细胞完全溶解，形成无色透明区，为β溶血。羊红 细胞部分溶解呈草绿色的环，为α溶血。羊红细胞不溶解、无溶血环，为γ溶血。 3.2 Optochin敏感试验 3.2.1材料 Optochin(ethylhydrocupreine HCL)纸片(直径6mm)，每片含5μg。血平板。

β溶血性链球菌

抗生素选择:A青霉素阿莫西林 B第一代头孢菌素红霉素克林霉素 β溶血性链球菌: 抗生素选择:A青霉素 B打环内酯类 C头孢第一代或第二代类菌素 B组链球菌: 抗生素选择:A氨苄西林 B头孢曲松或头孢噻肟 草绿色链球菌: 抗生素选择:A青霉素+氨基糖苷类 B头孢噻吩或头孢唑林+氨基糖苷类 肺炎链球菌: 抗生素选择:青霉素敏感:A青霉素 B阿莫西林(或+克拉维酸)C头孢第一代或第二代类菌素 青霉素耐药:A头孢第三代 B喹诺酮类 流感嗜血杆菌: 抗生素选择:A氨苄西林(或+舒巴坦) 阿莫西林(或+克拉维酸) B头孢第一代或第二代类菌素喹诺酮类卡他莫拉菌: 抗生素选择:A头孢第一代或第二代类菌素 B喹诺酮类氨苄西林+舒巴坦阿莫西林+克拉维酸 军团菌: 抗生素选择:A大环内酯类 B喹诺酮类 肺炎支原体: 抗生素选择:A大环内酯类 B喹诺酮类多西环素 肺炎衣原体: 抗生素选择: A大环内酯类 B喹诺酮类多西环素 金葡菌: 抗生素选择:甲氧西林敏感:A苯唑西林氯唑西林 B头孢第一代或第二代类菌素克林霉素林可霉素甲氧西林耐药:A万古霉素 B磷霉素利福平复方磺胺甲恶唑+万古霉素 腐生葡萄球菌: 抗生素选择:A头孢氨苄头孢拉定头孢唑林B呋喃妥因磷霉素头孢呋辛 肠球菌属: 抗生素选择:A阿莫西林氨苄西林氨基糖苷类 B呋喃妥因万古霉素 革兰氏阴性杆菌: 抗生素选择:A头孢第二代或第三代类菌素 B喹诺酮类β内酰胺类+β内酰胺酶抑制剂 肠杆菌科细菌: 抗生素选择: A头孢第二代或第三代类菌素(或联用氨基糖苷类) B喹诺酮类β内酰胺酶抑制剂复方 炭青霉烯类 大肠埃希菌: 抗生素选择: A呋喃妥因磷霉素 B头孢氨苄头孢拉定喹诺酮类 肺炎克雷伯菌: 抗生素选择: A头孢第二代或第三代类菌素 B喹诺酮类头孢第四代菌素 志贺菌属: 抗生素选择: A喹诺酮 B阿莫西林、呋喃唑酮、磷霉素、头孢第一代或第二代类菌素 沙门菌属: 抗生素选择: A喹诺酮 B氨苄西林、磷霉素 耶尔森菌属: 抗生素选择:A喹诺酮类 B氨基糖苷类 变形杆菌属: 抗生素选择:A派拉西林氨苄西林+舒巴坦阿莫西林+克拉维酸 B头孢第二代或第三代类菌素喹诺酮类氨基糖苷类 霍乱弧菌:

什么是乙型溶血性链球菌

什么是乙型溶血性链球菌 你知道什么是乙型溶血性链球菌吗，其实这种链球菌，是属于致病性比较强的一种病菌，对我们健康，自然而然会带来很多的影响和威胁，因此大家必须了解他的各种常识以及致病类型，这样在生活当中才可以有效地预防，下面就为大家具体分析，到底什么是乙型溶血性链球菌。 乙型溶血性链球菌，是链球菌属中的一种，具有致病性强的特点。菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。 乙型溶血性链球菌又称A群溶血性链球菌，是链球菌属中的一种，具有致病性强的特点。菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。

疾病危害： 溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。 病理分类： 溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭性酶有关。 主要有以下几种： 1、链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O为含有-SH的蛋白质，具有抗原性，S为小分子多肽，分子量较小，故无抗原性。 2、致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、周身不适。

3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。 4、链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 只有我们在了解了这些常识介绍之后，才可以有效地避免更多的疾病影响和危害，尤其是在现在的生活当中，关注这些常识，才可以保证我们的健康，因为你越是忽视健康问题，就越容易让一些疾病有机可乘。

链球菌CLSI

链球菌 CLSI 临床微生物实验室标准解读第二辑 CLSI的链球菌属药敏解读 北京协和医院杨启文王辉 对于链球菌属，CLSI将药敏分为3个部分：肺炎链球菌的药敏解读、b溶血链球菌的药敏解读和草绿色链球菌的药敏解读。不用的菌种CLSI有不同的规定，现对链球菌属的CLSI药敏作逐一解读： 1. 肺炎链球菌： (1) 肺炎链球菌对青霉素和其他b内酰胺类药物的敏感性检测 CLSI对该组合的解释标准按照感染类型和给药途径不同分为三类(表1)，3种情况均有不同的折点。 对于非脑膜炎的青霉素静脉给药治疗，CLSI认为对于青霉素MIC≤2μg/ml的菌株，肾功正常的成年人，应每次至少应用200万单位，每四小时给药一次（每天1200万单位）的方式进行治疗。对于MIC为4μg/ml的菌株则须将剂量提高至每天1800-2400万单位。对于非脑脊液标本中分离出的肺炎链球菌，需同时使用脑膜炎和非脑膜炎的折点来报告青霉素的敏感性。 对于脑膜炎的青霉素静脉给药治疗，CLSI 认为需将青霉素用量提高至最大(如肾功正常的成年人可使用每次300万单位，每四小时一次的给药方式)。对于脑脊液中分离的肺炎链球菌，仅需采用脑膜炎的折点报告青霉素的敏感性。 常规工作中可以用含5%脱纤维羊血的Mueller-Hinton平皿进行苯唑西林的纸片扩散法来检测青霉素的敏感性。苯唑 西林的抑菌圈直径≥20mm时，可以判定青霉素为敏感(相当于青霉素的MIC≤0.06mg/ml)。但纸片扩散法不能用于区分耐药菌株和低耐菌株，因此抑菌圈直径≤19mm的菌株可能是青霉素耐药或中介甚至是敏感的菌株，对于这些菌株应该进行肉汤或琼脂稀释试验测定青霉素的MIC。需要注意的是，苯唑西林纸片扩散法是用来预测青霉素敏感性的，苯唑西林MIC本身无价值，因此无需测定苯唑西林的MIC。 对于非脑膜炎的菌株，青霉素的MIC可以预测下列β内酰胺类药物的敏感性：青霉素MIC≤0.06mg/ml(或苯唑西林 抑菌圈直径≥20mm)提示菌株对氨苄西林(口服或肠外)、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢地尼、头孢妥仑、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢唑肟、头孢呋辛、亚胺培南、氯碳头孢和美罗培南也敏感；青霉素MIC≤2μg/ml提示菌株对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松和厄他培南也敏感。 表1. 青霉素对肺炎链球菌的敏感性判定折点(μg/ml) 必须注意，虽然阿莫西林、氨苄西林、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛、厄他培南、亚胺培南和美罗培南可用于治疗肺炎链球菌感染，但对这些药物尚无可靠的纸片法药敏试验，最好用MIC法测定其体外抗菌活性。 对于脑脊液中分离出的肺炎链球菌，需尽快用可靠方法检测和报告青霉素和头孢噻肟(或头孢曲松或美罗培南)的

链球菌的分类

溶血性链球菌 溶血性链球菌 溶血性链球菌又称沙培林对热和化学清毒剂均敏感,常引起扁桃体、咽部、中耳等感染。亦为肾盂肾炎、产褥热、猩红热的病原体。 目录

溶血性链球菌 常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。 培养特征 需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。 生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气，对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，触酶阴性。 抗原结构 链球菌的抗原构造较复杂，主要有三种： （1）核蛋白抗原或称P抗原，无特异性，各种链球菌均相同。 （2）多糖抗原或称C抗原，系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分，可用稀盐酸等提取。 （3）蛋白质抗原或称表面抗原，具有型特异性，位于C抗原外层，其中可分为M、T、R、S四种不同性质的抗原成分，与致病性有关的是M抗原。 分类

根据链球菌在血液培养基上生长繁殖后是否溶血及其溶血性质分为三类。 溶血性链球菌 （1）α-溶血性链球菌：菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环，也称甲型溶血，这类链球菌多为条件致病菌。 （2）β-溶血性链球菌：菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。 （3）γ-链球菌：不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为丙型或不溶血性链球菌，该菌无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔也引起感染。 抵抗力 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死，对常用消毒剂敏感，在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。青霉素是链球菌感染的首选药物，很少有耐药性。 编辑本段流行病学 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品 溶血性链球菌 污染的污染源。一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品： 1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染； 2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染； 3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。

链球菌感染的血清学检验

抗链球菌溶血素“O"试验 参考范围： 免疫比浊法：0～200 u/ml 临床评价： 1．链球菌溶血素“O”（ASO）是A群链球菌的代谢产物之一，它是一种具有酶活性的蛋白质，能溶解红细胞，也能破坏白细胞和血小板。溶血素“O”具有很强的抗原性，机体受A群链球菌感染后可产生溶血素“O”抗体，这种抗体可以抑制溶血素“O”的溶血作用。通过测定血清中ASO水平，有利于A群链球菌感染的诊断。 2．当ASO试验呈阳性反应，且抗体滴度有逐步增高趋势时，即具有诊断参考价值。主要见于A群链球菌感染后引起的变态反应性疾病，如风湿热、急性肾小球肾炎等，还可见于A群链球菌感染所致的上呼吸道炎症(咽炎或扁桃体炎)。85％～90％的患者感染后2周左右到病愈后数月至年余血清中均可测到ASO。应用ELISA可检测患者血清中的IgM型和IgG 型ASO特异性抗体，IgM-ASO多见于感染的急性期，IgG-ASO见于恢复期。抗体效价逐步下降时为疾病缓解期，抗体恒定在高效价水平多为非活动期。 3．咽拭培养直接分离病原菌是诊断A群链球菌感染的可靠方法，急性风湿热发作时阳性率可高达70％～90％。 进行多项链球菌抗体试验，可提高对A群链球菌感染诊断的准确率。这些试验包括抗链球菌激酶(ASK)，抗脱氧核糖核酸酶B(ADNase B)，抗链球菌二磷酸吡啶核苷酸酶(ADPNase)和抗透明质酸酶(AH)等，其中ASK试验是新近链球菌感染的一个非常敏感的指标。 其它实验室检查还有红细胞沉降率，血清C-反应蛋白试验，血清补体C3、C4成分测定等，上述项目联合应用对A群链球菌感染所致疾病有一定辅助诊断意义。 4．影响本试验结果的因素 (1)单一次试验结果对诊断意义不大。 (2)链球菌溶血素“O”在Ph6.5环境中活性最强，偏酸或偏碱都可影响其活性。 (3)在溶血抑制法中，血清溶血、黄疸、高胆固醇或血清保存过久污染长菌者，皆可致试验结果偏高，胆固醇有抑制溶血素活性的作用。 (4)患者血清中若有类风湿因子，会造成IgM-ASO假阳性，可用含羊抗人IgG30u g／ml 稀释液稀释待测血清。 链球菌感染的血清学试验 参考范围： 抗链激酶(ASK)试验1：40～1：80 抗透明质酸酶试验(AHT) 512～1024 u 抗链球菌脱氧核糖核酸酶B(ADNase B)试验1：250 u 抗链球菌二磷酸吡啶核苷酸酶(ADPNase)试验1：275 u 临床评价： 1．链球菌是人类细菌感染中最常见的病原菌之一，可引起许多种疾病。对人致病者90％属A群溶血性链球菌，急性感染时主要引起上呼吸道炎症(咽炎或扁桃体炎)或皮肤感染；更重要的是，A群链球菌感染后的免疫反应可致急性风湿热、急性肾小球肾炎等疾病。检测患者血清中抗某些毒素和酶类的抗体，对疾病有辅助诊断意义。 2．A群链球菌在生长过程中可产生多种毒素和酶类，如链球菌溶血素O、脱氧核糖核酸酶、透明质酸酶、链激酶和二磷酸吡啶核苷酸酶等。这些毒素和酶在疾病的发生中起了重要作用，它们均具有抗原性，通过联合检测血清中的相应抗体、可提高风湿热、急性肾小球

风湿是由溶血性链球菌感染引起的感染性疾病

风湿是由溶血性链球菌感染引起的感染性疾病，而类风湿是属于自身免疫性疾病主要由变性的IGM沉积引起，两者的发病机制不一样治疗上也不一样前者主要是抗微生物治疗后都是免疫疗法 风湿病即风湿热是一种与A组乙型溶血性链球菌感染有关的变态反应性疾病，属于结缔组织病，也称胶原病。病变主要累及全身结缔组织，最常侵犯心脏、关节和血管等处，以心脏病变最为严重。风湿病的急性期有发热、心脏和关节损害、环形红斑、皮下节结等症状和体征。可以血液检查：抗链球菌溶血素抗体O滴度增高，血沉加快，白细胞增高，心电图示P-R捡起延长等表现可诊断。一般发病年龄是5-15岁，6-9岁为高峰期，出现心瓣膜变形常在20-40岁之间。 风湿性疾病是一组以内科治疗为主的肌肉骨骼系统疾病，包括弥漫性结缔组织病及各种病因引起的关节和关节周围软组织，包括肌肉、肌腱、韧带等的疾病。常用的治疗方法： 1.风湿病常常侵犯关节、肌肉、骨骼以及软组织，疼痛、肿胀、关节功能障碍、发热这些症状比较突出，解热镇痛消炎，缓解症状是治疗这组疾病的首要目的，因此往往选用非甾体抗炎药，如扶他林、莫比可、乐松、天新利德、西乐葆、万洛等，而且新型的非甾体类抗炎药作用好、疗效高，使得副作用明显减少。 2.如果风湿性疾病得不到正确合理的治疗，关节，肌肉，骨骼等病变会导致功能障碍和畸形，留下终身残疾，影响生活和劳动，给个人和社会带来经济损失。从风湿性疾病侵犯的组织看，以往称之结缔组织病的系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，硬皮病，多发性肌炎，坏死性血管炎、强直性脊柱炎都有自身免疫的紊乱，属于自身免疫紊乱的一组疾病。痛风性关节炎已明确是嘌呤代谢紊乱而导致尿酸盐结晶在关节内沉积，往往有关节腔，骨骼，韧带受累。因此风湿病的治疗除了对症治疗缓解症状外，还需进行病因治疗，自身免疫紊乱性的疾病需要免疫调节，例如使用皮质激素以及免疫抑制剂，免疫抑制疗法有了很大的进步，新药物不断发现，用于临床，如骁息、爱诺华、帕夫林，新疗法不断发现，如①对轻型的系统性红斑狼疮采用小剂量强的松、氯喹、MTX的联合治疗，可以明显减轻副作用； ②类风湿性关节炎采用联合治疗，一线药与二线药的联合治疗，二线药之间的联合治疗。③大剂量丙种球蛋白治疗重症风湿病。 3.生物治疗及骨髓移植治疗也已试用于临床。 4.对于关节病变还可以采用关节镜治疗，大大提高疗效，改观了疾病的预后，致残率明显下降，患者的生活质量得到了改善。

什么是溶血性链球菌

什么是溶血性链球菌 你知道什么是溶血性链球菌吗？说到溶血性链球菌，大家应该不认识，但溶血性链球菌一旦感染，危害却很大，那么你知道什么是溶血性链球菌吗？由小编为你介绍。 文章目录 一、什么是溶血性链球菌 二、溶血性链球菌的致病性 三、溶血性链球菌的控制 什么是溶血性链球菌 1、什么是溶血性链球菌 溶血性链球菌又叫做沙培林,是一种比较常见的引发炎症的细菌,它通常存在于空气、灰尘、水等物体以及人体的口腔、粪便以及化脓的伤口中。这些细菌一旦遇到了可以入侵的伤口,就会乘虚而入造成人体的感染,不仅会引起呼吸道感染还会诱发一些比较严重的脏器感染例如肾小球肾炎等。那么它是怎么来的呢?通常情况之下,这些病菌主要是通过伤口、口腔黏膜、不洁食品等入侵人体。而食品中的细菌可能又是由于在包装或者生产过程中卫生情况不达标而导

致的污染。一些有伤口死亡的家禽肉和牛羊肉也是传播途径之一。在日常生活中要避免它的侵袭,就要注意饮食的卫生以及勤洗手等细节。对于生产食品的工厂来说,一定要注意食品卫生情况的检测,保证食品不受外界细菌的污染,工作 人员应当佩戴口罩和手套,在患病或者受伤的情况下不应接触食品。 2、溶血性链球菌与肺炎球菌的关系 溶血性链球菌和肺炎球菌,二者均为G(+)球菌,链球菌根据溶血能力可分甲型溶血性链球菌(又称草绿色链球菌),乙型溶血性链球菌和丙型链球菌。丙型不溶血。Lancefield根据抗原结构将乙型溶血性链球菌又分为A～T18个族,每个族又因表面抗原不同可分多个不同型,以A族对人致病的多,可引起扁桃体炎、猩红热、皮肤感染、肾小球肾炎及风湿热等。

肺炎球菌过去称肺炎双球菌,其外面的多糖荚膜层,可保护细菌免受机体吞噬细胞的吞噬和体液中一些杀菌因素的影响。 3、溶血性黄疸的临床表现 溶血性黄疸一般分为两种类型:急性和慢性两类。 3.1、急性溶血性黄疸的症状有寒战、高热、恶心呕吐、头痛腹痛腰痛、全身不适、血红蛋白尿休克及尿少等迅速出现黄疸贫血及肝脾肿大的症状。 3.2、慢性溶血性黄疸的症状较轻,主要是黄疸和贫血部

β型溶血性链球菌的测定

一、编制目的 为规范本单位β型溶血性链球菌的检测编制本作业指导书。 二、适用范围 本指导书适用于食品中β型溶血性链球菌的测定。 三、编制依据 GB/T 4789.11-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验》 四、设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a)恒温培养箱：36℃±1℃； b)冰箱：2℃~5℃； c)厌氧培养装置； d)天平：感量0.1g； e)均质器与配套均质袋； f)显微镜：10×～100×； g)无菌吸管：1ml（具0.01ml刻度）、10ml（具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头 h) 三角烧瓶； i)无菌培养皿：直径90mm； j)pH计或pH比色管或精密pH试纸；

k)水浴装置：36℃±1℃； l)微生物生化鉴定系统。 五、培养基和试剂 5.1.改良胰蛋白胨大豆肉汤 5.2 哥伦比亚CNA血琼脂 5.3 哥伦比亚血琼脂 5.4 革兰氏染色液 5.5 胰蛋白胨大豆肉汤 5.6 草酸钾血浆 5.7 0.25%氯化钙（CaCl2）溶液 5.8 3%过氧化氢（H2O2）溶液 5.9生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡 六、检验程序 溶血性链球菌检验程序见图1

图1溶血性链球菌检验程序 七、操作步骤 7.1样品处理及增菌 以无菌操作取样25g（ml），加入装有灭菌225mlmTSB的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min～10000 r/min均质；或加入装有225ml mTSB

的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min～2min，液体样品振荡混匀即可。于36℃±1℃，厌氧培养18h～24h。 7.2 分离 将增菌液划线接种于哥伦比亚CNA血琼脂，36℃±1℃，厌氧培养18h～24h，观察菌落形态。溶血性链球在哥伦比亚CNA血琼脂平板上的典型菌落形态为直径约2mm~3mm,灰白色、半透明、光滑、表面凸起、圆形、边缘整齐，并产生β型溶血。 7.3 鉴定 7.3.1分纯培养 挑取5个（如小于5个则全选）可疑菌落分别接种哥伦比亚血琼脂平板和TSB增菌液，36℃±1℃，培养18h～24h。 7.3.2革兰氏染色镜检 挑取可疑菌落染色镜检。β型溶血性链球菌为格兰氏染色阳性，球形或卵圆形，常排列成短链状。 7.3.3 触酶试验 挑取可疑菌落于洁净的载玻片上，滴加适量3%氧化氢溶液，立即产生气泡者为阳性。β型溶血性链球菌为阴性 7.3.4 其他检验 使用生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡对可疑菌落进行鉴定。 八、结果与报告 综合以上试验结果，报告每25g(ml)检样中检出或未检出溶血性链球菌。

致病菌检验

致病菌检验

9.2检测方法 9.2.1有害物质的检测方法 9.2.1.1产品中砷含量的检测 方法：按照GB/T 5009.76—2003中的第一法：二乙氨基二硫代甲酸银比色法 原理：在碘化钾和氯化亚锡存在下，将样液中的高价砷还原为三价砷，三价砷与锌粒和酸产生的新生态氢作用，生成砷化氢气体，经乙酸铅棉花除去硫化氢干扰后，被溶于三乙醇胺一三氯甲烷中或吡啶中的二乙氨基二硫代甲酸银溶液吸收 并作用，生成紫红色络和物，与标准比较定量。试剂 硝酸 硫酸【（1+1）、（1mol/L）、65％浓硫酸】盐酸 20％氢氧化钠溶液 15％碘化钾溶液，贮于棕色瓶内（临用前配制）40%氯化亚锡溶液：称取20g氯化亚锡 （Sncl2·2H20)，溶于50ml盐酸 乙酸铅棉花：将脱脂棉浸于10％乙酸铅溶液中，2h后取出晾干 无砷金属锌

三氯甲烷 吸收液A：称取25g二乙氨基二硫代甲酸银，研碎后用适量三氯甲烷溶解。加人1.0mL一三乙醇胺，再用三氯甲烷稀释至100mL。静置后过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内备用。 酚酞：1％乙醇溶液。 仪器分光光度计。 试样处理 干灰化法：本法适合于含有有机物的试样。 取5.0g试样于瓷坩埚中，加10ml 15％硝酸镁溶液，加入1g氧化镁粉末，混匀，浸泡4h，于低温或水浴上蒸干，用小火加热置炭化完全，将坩埚移至高温炉中，在550℃以下灼烧至灰化完全，冷却后取出，加适量水湿润灰分，加人酚酞溶液数滴，再缓缓加人盐酸（(1十1)溶液至酚酞红色褪去，然后将溶液移人50mL容量瓶中（必要时过滤），用少量水洗涤增祸3次，洗液并人容量瓶中，加水至刻度，混匀。每10mL试样液相当于1. 0 g试样。取相同量的氧化镁、硝酸镁，按上述方法做试剂空白试验。 测定 定量测定