细胞工程课后思考题答案(杨淑慎主编).
第二章
1、目前，常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特点？
1）MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液。
2）B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3）White培养基其特点是无机盐数量较低，适于生根培养
4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。
5）KM8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合培养。
2、简要说明MS培养基的基本组成。
1）大量元素母液配制
MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。
2）微量元素母液配制
MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。
3）铁盐母液配制
MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。
4）有机母液的配制
MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。
5）激素母液配制
MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素
3、配制培养基时，为什么要先配制母液？如何配制母液？
1）配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。2）基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。
4、常用的灭菌方法有哪些，各有哪些优缺点？
1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）优点：高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡，是一种最有效的灭菌方法。缺点：如果是对培养基或液体溶液灭菌，灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关，时间不足达不到灭菌效果，时间过长培养基内的化学物质遭到破坏，影响培养基成分。
2）过滤除菌优点：
3）干热灭菌缺点：干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题
4）紫外线灭菌缺点：由于紫外线穿透物质的能力很弱，所以只适于空气中和物体表面的灭菌，而且要求距照射物质以不超过1.2m为宜。
5）熏蒸消毒优点：方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。
6）药剂喷雾消毒
5、动物细胞培养常用的培养基组成成分有哪几类，在离体培养过程中有哪些作用？
1）天然培养基对促进细胞生长繁殖、粘附及中和物质的毒性有一定作用。
2）合成培养基血清的加入对培养非常有效，但对培养产物的分离纯化和检测会造成不便。
3）无血清培养基细胞外基质能帮助细胞附着和铁壁；低分子营养成分是细胞生长和代谢所需的；激素与生长因子促进细胞生长繁殖；酶的抑制剂，保护细胞不受培养基内残留酶的损伤。
6、初代培养时，接种的一般程序是什么？
1）在接种前打开超净工作台紫外灯照射20~30min，关闭紫外灯后，打开超净工作台的风机10min以上，开始无菌操作。
2）接种人员先洗净，在缓冲室内换好经过消毒的工作服，带上口罩，并换上拖鞋等。
3）上超净工作台后，用酒精棉球认真擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面及四周，装有培养基的培养器皿和盛外植体的烧杯也要用酒精擦拭消毒后，再放进工作台。
4）先用酒精棉球擦拭接种工具，然后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌或放在接种器械灭菌器中灭菌，灭菌后放在器械架上使其自然冷却。
5）把植物材料放在75%乙醇中浸泡约30s，再用0.1%的升汞中浸泡5~10min，浸泡时刻进行搅动，使植物材料与消毒剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3~5次。
6）接种时培养瓶瓶口要在酒精灯火焰附近，并在接种前后灼烧瓶口。
7）接种结束后，清理和关闭超净工作台。
7、配制培养基时，加入一定量的植物生长调节物质，它们在离体培养过程中有哪些作用？植物激素是植物细胞生长最适宜的调节物质，它能诱导细胞分裂、愈伤组织再分化以及胚状体发育。植物激素主要包括生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类，有时也使用脱落酸、乙烯等物质。
8、什么是生物安全实验室？目前，生物安全实验室的种类有哪些，各有什么特点？
1）生物安全实验室是指对由动物、植物和微生物等生物体给人类健康和自然环境可能造成不安全的防范，主要是针对病原微生物或具有潜在危害的重组DNA等生物危险的方法而建起的安全实验室。
2）BSL-1(P1) 对动、植物和环境危害较低、不会引发疾病
BSL-2(P2) 对动、植物和环境有中等危害或具有潜在危害的致病因子
BSL-3(P3) 可通过气溶胶使人传感上严重的甚至是致命的致病因子，对动、植物和环境有高度危害；通常有预防治疗措施。
BSL-4(P4) 对动、植物和环境有高度危险性；通过气溶胶途径传播途径不明，没有预防措施
第三章
1.基本概念
细胞的全能性：是指细胞具有发育成完整个体的遗传潜能。也可以指个体某个器官或组织已经分化的细胞在适宜的条件下再生成完整个体的遗传潜能。
外植体：是指由活体植物体上提取下来的，接种在培养基上用来进行离体无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
愈伤组织：脱分化后的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团，称之愈伤组织（callus)
极性：通常是指在器官、组织甚至细胞中，在不同的轴向上存在某种形态结构和生理生化上的梯度差异。
细胞分化：是指发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。在细胞水平上，细胞分化是指细胞在形态、结构和功能上发生改变的过程。
去分化：已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程叫脱分化或去分化（dedifferentiation)。
再分化：脱分化细胞失去了分化的特征，但在特定条件下，可再次开始新的分化发育进程，最终形成各种组织、器官或胚状体等，即再分化（rededifferentiation)
体细胞胚： (somatic embry)又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。
人工种子：（artificial seeds）又称合成种子（synthetic seeds）或体细胞种子（somatic seeds）。就是将离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。
2.愈伤组织的形成大致可分为几个时期？各有何特点？
答：可分为三个时期：
（1）启动期 (诱导期)：主要是指细胞准备分裂的时期,需要采用合适的诱导剂,如NAA(萘乙酸)、IAA （吲哚乙酸）、2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）等或细胞分裂素。
特征：距伤口较近的薄壁细胞略有增大，细胞质开始增多，相应的液泡缩小，核变大，呈球形，并由细胞边沿向中央移动；核仁明显变大，RNA含量增加，细胞恢复到具有分裂能力的状态，进入分裂的准备阶段，开始脱分化。
（2）分裂期：进入分裂期就是脱分化的完成，同时也是再分化的开始。
特征：被启动的细胞全面地进行活跃分裂。启动分裂的细胞体积变小，细胞内有旺盛的物质合成，并逐渐恢复到分生组织状态。如果此时经常更换培养液，愈伤组织就可以无限制地进行分裂而维持不分化状态。
（3）分化期（形成期）：细胞内部开始发生一系列形态和生理的变化，分化出形态和功能不同的细胞。
特征：这一时期与分裂期没有明显界限，一方面细胞不断分裂增殖，形成愈伤组织，另一方面细胞开始再分化。
3.愈伤组织有何生长特征？
答：（一）生长特性
1、愈伤组织的类型
根据组织学外观特征及其再生方式分为：胚性愈伤组织（EC）：质地较坚实，颜色有乳白或黄色，表面具有球形颗粒，生长缓慢。又可分为：致密型、易碎型。
非胚性愈伤组织（NEC）：松疏易碎，颜色有黄色或褐色，表面粗糙，生长迅速。
一般只有胚性愈伤组织有再生能力。某些植物的非胚性愈伤组织经适当继代培养可转变为胚性愈伤组织。
4.外植体的发育程度对愈伤组织的诱导和继代有何影响？
答：在胚性愈伤组织的诱导中，外植体的发育状态是一个十分重要的因素。外植体在发育过程中，存在一个很短暂的时期，此期外植体内的某些细胞处于未分化或部分分化的状态，这些细胞具有形成胚性愈伤组织的能力，而处于这一发育时期之前或之后的外植体都只能形成非胚性愈伤组织。因此，选择适宜的取材时期可获得理想的培养结果。
5、培养条件下的器官发生有哪些方式？影响其发生的因素有哪些？
答：（1）有直接发生与间接发生两种途径。
（2）影响其发生的因素有：1、外源激素的影响2、物理因素：光照、温度3、外植体的生理状态4、培养物的年龄
6、生理学说、遗传学说和竞争学说各如何解释长期培养物形态发生潜力丧失的现象？
答：1．生理学说
随着不断的培养继代的进行，培养组织或细胞中的内源激素平衡关系可能会发生改变，而导致不能形态发生。在这种情况下，细胞虽然停止了器官和胚胎的分化，但并不一定就丧失了这种分化能力。因而，在这种情况下，如果改变外部培养条件，应该有可能使细胞的这种内在潜力得到恢复。
2．遗传学说
该假说认为，形态发生潜力的丧失是由于在培养细胞中的核的特性发生了改变，即细胞核内的遗传物质在培养继代过程中由于变异等原因而发生了改变或是突变。因此，可以推知，由这种原因所造成的形态发生潜力的丧失是不可逆的。
3．竞争学说
首先，细胞对于生长素（2，4-D）抑制全能性表达的作用变得比较敏感；
其次，随着时间的推移，由于培养细胞在细胞学上的不稳定性，出现了缺乏胚性潜力的新的细胞系，这些细胞学上的变化不一定是染色体数目的变化，而可能只是遗传信息的小的突变、丢失或易位，
按照这种假说，如果非胚性的细胞类型在所用的培养基中具有生长上的选择优势，在反复的继代培养中，非胚性细胞的群体将会逐步增加，而胚性成分则逐渐减少。到了一定时期
之后，在培养物中已不再含有任何胚性细胞，这时若想再恢复它们的胚胎发生能力就不可能了。然而，如果在培养物中存在少量胚性细胞，只是由于处在支配地位的非胚性细胞的抑制作用，这些胚性细胞的全能性无法表达，在这种情况下，通过改变培养基成分，使之有选择地促进全能细胞的增殖，就应当有可能恢复该培养物的形态发生潜力。
7、离体培养条件下，茎、芽和根的再生方式有几种？
答:离体条件下植物细胞全能性实现的途径
? 1、植物体细胞
? 2、植物性细胞可诱导形成完整的植物体
? 3、植物原生质体
4、融合的原生质体→可发育成杂种植物
5、转基因的植物细胞→可发育成具有新性状的植物体
8、影响器官发生的主要因素有哪些？
答:1、外源激素的影响2、物理因素：光照、温度3、外植体的生理状态4、培养物的年龄
9、何谓胚状体？胚状体与合子胚有何异同？
答：胚状体离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物，此现象无论在体细胞培养还是生殖细胞培养中均可以看到，因而统称为体细胞胚或胚状体。
异同细胞胚具有两极性，而器官发生是单极的。细胞胚维管组织分布是独立的Y 字形结构，形成的再生植株遗传性比器官发生的稳定。
10、离体培养条件下，胚状体的产生有几种方式？
答：直接从外植体上产生体细胞胚由愈伤组织产生悬浮培养中由胚性细胞复合体表面产生有悬浮培养中游离的单细胞产生由单倍体细胞产生
11、胚状体的发育大约要经过哪几个时期？
答：一、诱导期二、胚胎发育期
12、影响胚状体发生的主要因素有哪些？
答：因素：氮源生长素组织起源
13、如何区分离体培养条件下的不定芽与胚状体？
答：体细胞经过了胚胎发育过程，具有胚根、胚芽和胚轴的完整结构，并与原外植体的微管组织无联系，是个相对独立的个体，区别于组织培养中以器官发生方式分化的不定芽和不定根。
14、目前研制的人工种子结构是怎样的？
答：人工种子由以下三部分组成：
①具有良好发育的体细胞胚，并能发育成正常完整植株：广义的体细胞胚由组织培养中获得的体细胞胚即胚状体、愈伤组织、原球茎、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体组成。②人工胚乳，一般由含有供应胚状体养分的胶囊组成，养分包括矿质元素、维生素、碳源及激素等。③胶囊之外的包膜称之为人工种皮，有防止机械损伤及水分干燥等保护作用。
15、控制胚性细胞同步化的方法有哪些？
答：①抑制剂法促进细胞同步分裂；②低温处理促进细胞同步分裂；③渗透压控制同步化法；
④同步胚的分段收集筛选法；⑤通气法。
16、人工种子繁殖体如何处理？人工种子的制备要点有哪些？
答：繁殖体的处理：①体细胞胚形成后，需要在无激素培养基上经过一定阶段的后熟培养，然后进行脱水干燥，再将畸形胚选出后才能进行包埋。在脱水之前用ABA处理体细胞胚强迫其进入休眠，更有利于长期储存。②微型变态器官繁殖体不能过度脱水，但亦需要适当干燥，除去表面多余的水分，同时要进行表面消毒处理以防止包被后的感染。为了延长储存时间，需根据使用季节进行适当的休眠处理。③以微芽为繁殖体时，不能进行脱水处理，但必需筛选生长健壮、组织充实的芽进行包埋。
第十二章课后思考题（仅供参考）
1.简述动物细胞培养的特点与营养需求
答：针对动物细胞培养的各种方法，相应的培养特点：
1、转瓶（管）培养系统（特点）优点：结构简单，投资少，技术熟练，重复性好，放大只需要简单地增加转瓶（管）数量。
缺点：劳动强度大，占地空间大，单位体积提供细胞生长的表面积小，细胞生长密度低，培养时监测和控制环境条件受限制。
2、反应器贴壁培养细胞贴附于固定的表面生长，不因为搅拌而跟随培养基一起流动。（特点）优点：比较容易更换培养基，不需要特殊的分离和培养设备。缺点：扩大规模较难，不能直接监控细胞生长情况。
3、悬浮培养法，主要用于非贴壁依赖型细胞的培养。如杂交瘤细胞、
淋巴细胞、和许多肿瘤细胞等。特点：用于实验室的普通悬浮反应器，是一种带有搅拌器的旋转瓶。
4、固定化培养，固定化培养是将动物细胞与非水溶性载体结合起来，在生物反应器中进行大规模培养的方法。特点：具有细胞生长密度高，抗剪应力和抗污染能力强，细胞易与产物分开，利于产物分离和纯化。
针对与植物细胞培养的区别（即思考题7），动物细胞的培养有一下特点：
a.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）
b.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要。
c.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。
d.原理不同：植物组织培养的原理为植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理为细胞的增殖。
营养需求：
①动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为由于动物细胞生活的内环
境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。
②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。
③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH （36.5±0.5℃，7.2~7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。
2.试述动物细胞培养在生物技术中的应用潜力
答：a.生物制品的生产，（酶、生长因子、疫苗和单抗）
b.转基因动物的培养（转基因鱼、转基因小鼠）
c.检测有毒物质
d.医学研究
3、简述动物细胞工程技术应用的两面性。
答：
4、举例说明动物细胞培养的目的与用途。
答：
5、简述细胞冷冻的原理和方法。
答：主要冻存方法：超低温保存。
细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。快冻慢溶
6、接触抑制与密度抑制有什么异同。
答：接触抑制:细胞从接种到长满容器表面后，由于细胞繁殖数量增多相互接触后，不再增加——接触抑制。
密度抑制: 细胞接触汇合成片后，只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂，但当细胞密度达到一定程度后，营养相对缺乏，代谢产物增多，发生密度抑制现象。
8、试举一例说明细胞建系的全过程（列出主要方法、步骤及所需的仪器设备）。
答：
9、试述动物细胞生物反应器的发展趋势。
答：
第四章
名词概念：
微繁殖：是指在离体培养条件下，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行无菌培养，经过不断地切割和重复培养，使其增殖并再生形成完整植株，在短期内获得大量遗传性均一的个体的方法。
繁殖系数：经一次增值培养或在一定时间段内由一个繁殖体所增殖获得的总繁殖体数或苗
数。
玻璃化：也称超水化作用，是离体培养过程中试管苗发生形态、生理和代谢异常的现象。褐变：是指组织培养中，由于材料被切割而使多酚氧化酶活化将组织中的酚类物质氧化形成棕褐色的醌类物质，并向培养基中扩散，抑制培养物生长甚至导致其死亡的现象。
原球茎：兰科植物的种子在萌发初期并不出现胚根，只是胚逐渐膨大，以后种皮的一端破裂，膨大的胚呈小圆锥状，称作原球茎。
茎尖分生组织：指茎尖最幼龄叶原基上方的由2或3层分生细胞组成的很小区域，一般最大直径不超过0.1mm,长度0.25mm，最小的茎尖长度仅有几十微米，有时也称顶端分生组织。不定芽：相对于顶芽和腋芽，由植物的其他部位或器官、组织上通过器官发生重新形成的、无固定着生位置的芽统称为不定芽。
2、植物离体无性繁殖主要适用于哪些植物？与常规无性繁殖相比有什么优势？
植物离体无性繁殖主要适用于园艺观赏植物、农作物、药用植物及经济林木的种苗生产。
1周期短，便于控制培养条件。繁殖速度快，经济效益高。（2）占用空间小，不受地区、季节限制。（3）繁殖珍稀、濒临苗木和突变体，是优良品种培养的有效途径。（4）利物保持原来品种的特性。
3、离体无性繁殖中,培养物的增殖方式有哪几种？各有何特点？
离体无性繁殖中,培养物的增殖方式有 4种。
1腋生枝型
特点（1）繁殖率高（2）能保持植物遗传稳定性（3）可缩短林木繁殖周期。
2不定芽型
特点：（1）繁殖率非常高，但繁殖速度较慢；（2）遗传性稳定。
3胚状体发生型
特点：（1）胚状体发生数量多，速度快，结构完整，繁殖系数高；（2）遗传性稳定。
4原球茎型是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官，可萌发成苗
4、离体无性繁殖一般可分为哪几个阶段？简述其操作的一般程序。
离体无性繁殖一般可分为5个阶段。
1、植株的准备：供体植株应生长旺盛、健壮、不病虫害，并尽可能生长在干净的环境中。
2、无菌培养物的建立：获得无菌材料并诱导外植体生长和发育。包括从供体植株上采取外植体进行消毒、接种及启动外植体生长等程序。
3、培养物的增殖：通过反复培养使第一阶段获得的数量有限的嫩枝、芽苗、胚状体或原球
茎等培养物的总量增加。
4、生根培养：将增殖阶段形成的无根芽苗转移到生根培养基上诱导产生不定根，获得健壮
的具有根、芽、茎的完整小植株。
5、试管苗的移栽及鉴定：移栽是将具根试管苗转移到土壤中的过程，是试管苗从离体培养
逐步适应温室或田间生长环境的过程
5 离体繁殖时外植体选择应注意哪些方面？
生理状态和基因型其中生理状态包括年龄、取材、季节、生长、环境部位
6 离体繁殖中常见得技术问题有哪些? 如何克服或防止其发生？
污染问题和褐变、玻璃化
污染问题预防措施１）通风２）去湿３）光照４）防霉5）改进外植体消毒方法或使用抗生素
褐变防治措施1）选择合适的外植体：一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体。
2）合适的培养条件：无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度和光照、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。3）使用抗氧化剂：在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。
（4）使用吸附剂：使用聚乙烯基吡咯烷酮、0.1%-0.5％的活性炭对防止褐变也有较为明显的效果
玻璃化防治措施1）降低细胞分裂素的浓度，调节激素配合2）增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的渗透势3）降低氨态氮，提高硝态氮的含量；4）增加容器的气体交换，降低容器内相对湿度5）降低培养温度，增加自然光照。6）在培养基中添加间苯三酚、根皮苷或生长抑制剂等物质。
7 要提高某种植物离体快繁的效率，可以采取哪些措施？
8 试管苗与一般的种子苗相比有什么特点？
试管苗的特点
①试管苗生长细弱，茎、叶表面角质层不发达。
②试管苗茎、叶虽呈绿色，但叶绿体的光合作用较差。
③试管苗的叶片气孔数目少，活性差。
④试管苗根的吸收功能弱。
9、脱除植物病毒病有哪些方法？其原理是什么？
物理方法
（1）、高温处理又称热疗法
原理:一些病毒对热不稳定,在高于常温的温度下(35-40 ℃)即钝化失活,繁殖力下降,失去侵染能力,而植物基本不受伤害.
(2)、低温处理又称冷冻疗法
原理：降低温度能使病毒活力下降。
化学处理
(1).病毒抗血清预处理：用齿舌兰环斑病毒（ORV）的血清处理兰属离体分生组织，提高了再生株中无ORV的植株频率。
(2).RNA抑制剂处理：烟草愈伤组织培养基中加入2-硫脲嘧啶，可除去组织中马铃薯Y 病毒（PVY）。放线菌D和放线菌酮能抑制原生质体中病毒的复制。
（3）.三氯唑核苷：病毒唑，化学名称1,2,4-3唑-3-酰胺-1-β-D-呋喃核苷，防治动物RNA
病毒和DNA病毒病的广谱性抗病毒制剂。
生物脱毒方法（原理：培养材料中通常不含病毒，可通过植物组织培养就行脱毒）（1）、茎尖分生组织培养
（2）、微体嫁接脱毒
（3）、愈伤组织培养脱毒
（4）、珠心胚培养脱毒
（5）、花药培养脱毒
10、简述通过茎尖分生组织培养脱除植物病毒的一般程序
选取感病程度轻的植株→分离大小合适的茎尖分生组织→茎尖分生组织培养→病毒检验11、影响茎尖分生组织培养去除病毒的因素都有哪些？
（1）、供体的生理状态和部位
（2）、适当大小的茎尖分生组织的分离
（3）、茎尖分生组织培养基的类型和培养条件
12、无病毒植物的检测方法有哪些？
（1）、直接检测法:直接观察
（2）、电镜检测法
（3 ）、指示植物法
（4）、血清学检测法
（5）、分子检测技术：PCR技术、探针杂交技术
13.结合本章及前面所学的知识，你认为试管苗商业性生产中需要注意什么问题？
答：进行试管苗商业性生产的企业在具备试管苗快繁生产技术、人员及相应的生产场地和设施等基本条件下，还应注意以下几点：
（一）建立一套科学的试管苗生产管理体系
（二）试管苗生产要以市场为导向
（三）注重新产品、新技术的研发和创新、做好技术储备
14.利用假期，实际了解当地植物快繁企业的生茶经营情况。
答：此题不考。
第五章
1.分离植物单细胞的方法有哪些？
答：有以下三种：
(一)机械法:主要通过机械磨碎、切割植物体从而获得游离的单细胞。
(二)酶解法：主要是根据植物细胞壁的组成特点选用某一专一性水解酶，在温和条件下将壁物质分解掉，从而释放出细胞。
(三)愈伤组织诱导法。
2.植物单细胞培养的方法有哪些？各有何特点？
答：1、平板培养法
特点：单细胞在培养基中分布均匀，便于定点观察，易筛选；通气差，排泄物易积累造成细胞毒害
2、看护培养
特点：简便、成功率高；不能在显微镜下直接观察.
3、饲养层培养
特点：操作简便；不能在显微镜下追踪细胞的分裂和细胞团的形成
4、微室培养法
特点：在培养过程中可连续进行显微镜观察；由于培养基少，水分难以保持，培养基的成分及pH等也易于变动，细胞短期培养后往往不能再生长。
5、液体浅层静置培养法
特点: 易于补加新鲜培养基、可以镜检
3简述植物细胞大规模培养反应器的类型及原理？
分批培养、半连续培养、连续培养
4什么是细胞的悬浮培养？分批培养和连续培养各有什么特点？
悬浮培养:是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
5 在细胞悬浮培养中如何进行细胞生长量的计量？
细胞生长量的测定一般方法有：
（1）细胞计数：在显微镜下记数，以cells/ml 表示单位体积里的细胞浓度
（2）细胞密实体积（PCV）：以每毫升培养液中细胞总体积的毫升数表示。测定时，将细胞离心于离心管内，测定细胞层所占的体积。
（3）细胞鲜重或干重：过滤后直接称重为鲜重，干燥后再称得到的是干重。
（4）有丝分裂指数（MI）：是指在一个细胞群体中，处于有丝分裂的细胞占总细胞的百分数。
对于愈伤组织有丝分裂指数的测定一般采用富尔根染色法。对于悬浮培养的细胞则先离心，然后置于载玻片上用乙酸洋红染色并镜检。
6悬浮培养细胞同步化得方法有哪些？
1、物理方法
(1)体积选择法: 将培养一段时间的细胞经过一定大小的筛网过滤,收集筛网上层的细胞;再经过较小孔径筛网上面的细胞.选择每一孔径筛网过滤得到的细胞分别再进行培养.
(2)冷处理法: 收集细胞,在4℃温度下处理数天,添加新鲜培养液培养.
2、化学方法
(1) 饥饿法：先对细胞断绝供应一种进行细胞分裂所必需的营养成分或激素，使细胞停滞在G1期或G2期，经过一段时间的饥饿之后，当重新在培养基中加入这种限制因子时，静止细胞就会同步进入分裂。
(2)抑制法：通过向培养基中添加尿苷(1μg/ml),5-氟脱氧尿苷(2 μg/ml)等化学抑制剂抑
制细胞分裂,可使培养细胞同步化。
(3)有丝分裂抑制法:在指数生长期的细胞悬浮培养物中加入一定浓度的秋水
7、简述细胞固定化的几种方法。
答：1、包埋法其中包埋法包括：（1）海藻酸盐包埋法 (2)k-卡拉胶包埋法 (3)琼脂糖包埋法 (4)膜包埋法
2、吸附法吸附法包括：（1）聚氨酯泡沫吸附法（2）尼龙网膜固定法（3）壳聚糖吸附法
8、在植物细胞培养中如何提高植物次生代谢产物的产量？
答：（一）筛选得到高产细胞系（株）常用方法有：
1、克隆选择（有相同遗传基因的细胞群）
指通过单细胞克隆技术和细胞团克隆技术，将培养细胞中能够积累较多次生代谢物且具有相同遗传基因的细胞群挑选出来，并加以适当的培养形成高产细胞系。
2、抗性选择
指在选择压力下，通过直接或间接的方法得到抗性变异的细胞系。
3、诱导选择
是通过化学诱变或紫外线照射等各种物理化学方法诱变产生比原亲本细胞全成能力高的细胞系（株）
（二）培养条件
1适宜温度
2、不断调节PH
3、营养成分：一方面要满足植物细胞的生长所需，另一方面要使每个细胞都能合成和积累次生代谢产物。
4、光：包括光强、光质和光照时间对细胞生长和次生代谢产物合成都有一定影响。
5、通气量和搅拌转速
6、前体饲喂
7、诱导子的应用：诱导子是指能引起植物细胞某些代谢强度或代谢途径的物质，可分为生物诱导子和非生物诱导子。不同诱导子作用于不同植物可以产生多种多样的次生代谢产物。
9、简述细胞活力鉴定的方法。
答：1、相差显微镜观察法 2、FDA染色法 3、伊凡蓝染色法
10、简述细胞计数的方法。
答：细胞生长量的测定一般方法有：
（1）细胞计数：在显微镜下记数，以cells/ml 表示单位体积里的细胞浓度。
（2）细胞密实体积（PCV）：以每毫升培养液中细胞总体积的毫升数表示。测定时，将细胞离心于离心管内，测定细胞层所占的体积。
（3）细胞鲜重或干重：过滤后直接称重为鲜重，干燥后再称得到的是干重。
（4）有丝分裂指数（MI）：是指在一个细胞群体中，处于有丝分裂的细胞占总细胞的百分数。
对于愈伤组织有丝分裂指数的测定一般采用富尔根染色法。对于悬浮培养的细胞则先离心，然后置于载玻片上用乙酸洋红染色并镜检。
第六章
1，目前用做原生质体分离的材料主要有哪些？它们各自有什么有优点？
答：原生质体的来源：(1) 来自各种植物的幼嫩的叶片、根尖，其中叶片由于取材容易而广泛采用。
（2）来自花粉，尤其是适合制备单倍体的原生质体。
（3）从组织培养产生的愈伤组织中获得
2、试述原生质体分离的方法和步骤
答：(1)机械法：在细胞质壁分离的状态下，用利刀切割细胞壁,使原生质体流出或释放出来(2)酶解法：常用的制备原生质体的酶包括；果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。实际应用中需要根据不同的细胞来源选择合适的酶。
酶解法分：
顺序法（两步法）：先用果胶酶预处理，再用纤维素酶
直接法（一步法）：直接用果胶酶和纤维素酶
优点：获得量大，适用广泛。
缺点：商品酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。会影响所获原生质体的活力。
3、影响原生质体分离效果的因素有哪些？试做分析
答：供试材料的基因型和外植体
酶解条件：酶质量、组合、浓度、pH、光照和温度、渗透压稳定剂
质膜稳定剂
分离条件：离心次数、离心速度、纯化方法、分离纯化持续时间、分离用具
4、原生质体纯化主要有哪些方法？
答：1、过滤-离心法
2、漂浮法：原生质体比重较小,能在具有一定渗透压的溶液(如25%的蔗糖溶液)中漂浮，然后用吸管收集。转入另一管中，如此反复离心、悬浮2~3次，即可获得纯原生质体。优点:制备的原生质体较纯净.。缺点:丢失的较多
3、界面法：又称不连续梯度法，采用两种密度不同的溶液形成不连续梯度，通过离心使原生质体与破损细胞分别处于不同液相中，从而纯化原生质体的方法。
优点：可以收集到数量较大的纯净原生质体，同时保持着相同的渗透强度使原生质体免受渗透冲击而受损。
5、为什么原生质体要培养在等渗培养基中？
答：只有培养在等渗培养基中植物才能正常生长如果植物的原生质体培养在非等渗培养液中植物有可能会因为浓度差而吸水或是失水从而导致植物的死亡，所以植物的原生质体要培养在等渗培养基中。
6、原生质体培养中如何稳定培养基的PH？
答：分离原生质体时，酶液的pH值是值得注意的问题。因为降解酶的活力和细胞活力最适pH值是不一致的。为了维持酶液的PH恒定，常用0.05-0.1mol/L的磷酸盐溶液来配制酶液。此外，MES对保持酶解物的酸碱环境也有缓冲作用。
7、试分析影响原生质体培养的主要因素
⑴供试材料的基因型和外植体
⑵酶解条件：酶质量、组合、浓度、pH、光照和温度
⑶渗透压稳定剂
⑷质膜稳定剂
⑸分离条件：离心次数、离心速度、纯化方法、分离纯化持续时间。
⑹分离用具
8、原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点？
⑴液体浅层培养法：
优点：
原生质体在液体环境中有较强的吸收营养物质的能力，表现出较强的细胞分裂能力。操作简单，对原生质体的损伤小，且易于添加新鲜培养基和转移培养物。
缺点：
原生质体分布不均匀，常常发生原生质体之间的粘连现象而影响其进一步的生长和发育。此外，难以跟踪观察某一个细胞的发育情况。
⑵双层培养法——液体-固体双层培养法：
●优点：
固体培养基中的营养物质可以缓慢放到液体培养基中，如果在下层固体培养基中添加一定量的活性炭，则还可能吸附培养物产生的一些有害物质，促进原生质体的分裂和细胞团的形成。
●缺点：
不易观察细胞的发育过程。
⑶固体薄层培养法
优点：
使原生质体处于固定位置，避免了原生质体的漂浮游动，有利于对单个原生质体的细胞壁再生及细胞团形成的全过程进行定点观察。
缺点：
培养基温度对薄层质量和原生质体分布有一定影响；另外，固体中单细胞生活能力弱，通气状况不良，第一次细胞分裂时间会推迟2d左右。
9、为什么说原生质体培养系统是现代生物技术的载体？
（1）原生质体培养可在遗传学方面进行基因互补，不亲和性，连锁群和基因鉴定，分析基因的激活和失活水平的研究。在研究分化问题时，用一个均一的原生质体群体可以筛选数以千计的不同。营养和激素条件，探索诱导单细胞的分化条件等。
（2）用于远缘体细胞融合，进行体细胞杂交。这是一种新的远缘杂交方法，为人们提供新的育种方法。两个亲缘关系较远的植株用一般杂交方法是不容易成功的，而用细胞融合的方法却成为可能。首先，两个原生质体融合形成异核体，异核体再再生细胞壁，进行有丝分裂，发生核融合，产生杂种细胞，由此可培养新的杂种。
10、原生质体融合要经过哪些过程？
1选择亲株为了获得高产优质的融合子，首先应该选择遗传性状稳定且具有优势互补的两个亲株。
2原生质体制备去除细胞壁是制备原生质体的关键。一般都采用酶解法去壁。根据微生物细胞壁组成和结构的不同，需分别采用不同的酶，如溶菌酶，纤维素酶，蜗牛酶等。
3原生质体融合早期的原生质体融合实验中，曾采用离心力作用使两种细胞的原生质体紧紧挤在一起以帮助融合，或者在冷的渗透稳定剂中使原生质体密集凝聚，但这些方法的效果不佳。
4 原生质体再生原生质体再生就是使原生质体重新长出细胞壁，恢复完整的细胞形态结构。
11、PEG融合与电融合各有何特点？电融合的原理是什么？
PEG法特点：融合频率高；诱发融合无特异性；毒性较低
电融合特点：(1)融合率高、重复性强、对原生质体伤害小。
(2)装置精巧、方便简单、可在显微镜下观察或录像融合过程。
(3)免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控制性强等。
电融合的原理：①交流电场使原生质体表面电荷偶极化，沿着电极排列，形成串珠。②施加直流电场后，形成串珠的原生质体在质膜接触处发生穿孔，开始遗传物质的交流。
12、PEG融合法的技术关键是什么？电融合的关键技术是什么？
13、对称融合与非对称融合的细胞杂交有何异同？
14、体细胞杂交有哪些遗传特征？如何进行鉴定？
15.原生质体融合产物有哪些类型？
答：自发融合、诱发融合
16.试述杂种细胞的选择方法？
答：一、互补选择法：（1）生长互补选择法（2）营养缺陷型互补选择法
（3）抗性互补选择法（4）细胞代谢互补选择法
二、机械选择法：（1）利用融合亲本的形态色泽上的差异筛选杂种细胞
（2）利用荧光素标记分离杂种细胞
（3）应用荧光激活细胞分选仪自动分离杂种细胞
17.如何用分子生物学方法鉴定杂种植株？
答：（1）RAPD检测，是在DNA水平上迅速、有效的鉴定体细胞杂种的简便方法。
（2）RFLP检测，具有种的特异性和遗传稳定性，能直接发现同源染色体上核苷酸碱基序列的差异。
18.体细胞杂交有何意义？
答：（1）实现远缘杂交，形成新的物种。
（2）创造细胞质杂种。
（3）培育作物新种质和新品种。
19、体细胞杂交技术的应用现状及存在问题是什么？
第七章
1、花药培养中如何选择外植体？
2、花药培养和花粉培养的区别是什么？
花药培养指用植物组织培养技术将发育到一定阶段的花药剥离下来（切去花丝部分），接种在培养基上进行培养，最终形成完整植株的技术
花粉培养：又称小孢子培养，或游离小孢子培养，指在无菌条件下，将花粉从花药中分离出来使其成为分散或游离态，发育成单倍体植株的过程。
就培养材料而言，花药培养属于器官培养，花粉培养属于细胞培养。
3、花药培养过程中低温预处理的原理是什么?
低温处理的作用机理：
3、低温可改变花粉粒第一次有丝分裂纺锤体的轴向，形成两个均等细胞，使得花粉朝着胚胎方向发育；
4、低温使花粉保持较长时间的活力，使营养细胞得以完成细胞质的改组而转向胚胎发生。
4、花药培养时蔗糖和激素浓度如何选择？依据是什么？
5、花药（或花粉）培养过程中决定再生植株倍性的因素有哪些?
6、单倍体育种的方法有哪些？P159
单倍体育种
①原理：染色体变异
②方法：花药离体培养获得单倍体植株，人工诱导染色体数目加倍。
7.影响花药培养的因素有哪些？
答：一、基因型二、植株的生理状态三、培养基四、预处理五、培养条件六、接种密度
8.单倍体育种的意义是什么？
答：一、良好的遗传研究材料二、加速育种进程三、提高选育效率四、突变体选育五、遗传转化受体六、利用单倍体育种对栽培品种进行纯化
9.离体培养条件下小孢子是如何发育成完整植株的？
答：小孢子进行早期分裂，经多次分裂后形成多细胞花粉，其中，经胚胎发生的花粉粒最终会形成多细胞的球胚，并进一步发育成植株（如颠茄、芸薹、曼陀罗、天仙子、烟草等）。而不经胚胎发生的花粉粒则会经由器官发生途径分化出芽和跟，最终形成完整植株（如拟南芥、芦笋和黑小麦等）。
10.如何对获得的花粉植株进行倍性鉴定？染色体加倍的方法有哪些？
答：倍性鉴定有直接鉴定法和间接鉴定法两大类，其中间接鉴定法分为 1.植株形态观察法2.细胞形态鉴定法 3.DNA含量测定 4.核体积测量法 5.生化与分子标记鉴定，染色体加倍的方法有1.小苗处理法 2.茎尖处理法 3.培养基处理法
11、植物胚胎培养
1.幼胚培养的关键技术是什么?
答:幼胚剥离（关键）
必须把胚从周围的组织中剥离出来。因为胚剥离的成功与否是幼胚能否成功的关键。
幼胚是一种半透明、高黏稠状组织，剥离过程中极易失水干缩，因此在剥离时一定要注意保湿，无菌，且操作要迅速。
胚柄的存在对于幼胚培养能否成活及成苗率有重要影响。所以幼胚剥离时应带胚柄一同取出。
2.幼胚培养时胚的发育方式有哪几种?各有何特点?
答:幼胚培养时，生长方式有三种：
a、胚性发育：幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子），然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。这种途径发育的幼胚，一般一个幼胚将来发育成一个植株。
b、早熟萌发：幼胚接种后，不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，这种现象即称为早熟萌发。这种方式形成的幼苗往往细弱、畸形，难以成活。因此在幼胚培养中应防
止早熟萌发。
c、产生愈伤组织：在幼胚培养中常能在追加生长调节剂时诱发愈伤组织产生、进而分化形成胚状体或不定芽。
3.在实际操作中如何确定胚囊的发育时期?
答:
4.影响胚珠培养成功的因素有哪些?
答:1)材料选择 2)发育时期:已授粉具球形或此期以后胚的胚珠容易培养成种子。
未授粉胚珠培养以接近成熟期的八核囊或成熟胚囊为佳。
3)胎座组织 4)培养基
5.未授粉子房培养与授粉后子房培养有何不同?
答: 传粉和受精后的子房,仍需进行表面消毒后再接种
未授粉的子房可将花被表面消毒后,在无菌条件下直接剥取子房接种
6.植物胚乳有哪些类型?
答:①被子植物胚乳：双受精产物，属三倍体组织
②裸子植物胚乳：很特殊，在受精前就形成，是配子体的一部分，由大孢子直接分裂发育而成，因而是单倍体组织。
7.胚乳培养取材的最佳时期是何时?
答:旺盛生长期是取材的最佳时期,在该期最容易产生愈伤组织,而且诱导率也较高.
(胚乳发展进程大致分为早期,旺盛生长期和成熟期)
8.试述离体授粉的操作步骤?
答: a 采集花粉:开花前一天或当天取花蕾或花药，表面消毒后，无菌收集花粉
b 剥离子房或胚珠:开花前1~3天对用做母本的花蕾去雄并套袋。七花当天或第二天采集花蕾、表面消母，无菌下去掉柱头和花柱，肃取胚珠或子房
c 授粉
9.离体受精有何意义?
答:离体授粉与离体受精的意义:
1、克服远缘杂交不亲合性
2、克服自交不亲和性
3、诱导孤雌生殖
4、双受精及胚胎早期发育机理的研究
10.离体授粉与离体受精有何区别?
答:离体授粉是指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉管进入胚珠完成受精而结实的过程。由于从花粉萌发、到精卵细胞融合形成种子，直至种子萌发产生幼苗都是在试管内完成的，所以也称其为试管受精。
离体受精是指离体及人工控制的环境下，精卵细胞融合形成合子的过程。它包括配子的分离、雌雄配子融合和合子培养三个阶段。
第9章课后习题答案
1、什么是植物体细胞无性系变异？引起或影响植物体细胞无性系变异的因素有哪些？
植物细胞、组织、器官在无菌条件下进行离体人工培养，经过脱分化和再分化过程，重新形成愈伤组织和完整植株时所产生的变异称为植物体细胞无性系变异
因素：（1）自发突变，与培养物的遗传背景、外植体类型及培养类型有关，同时也受培养时间、培养及成分等因素的影响
（2）人工诱变，包括物理诱变和化学诱变。物理诱变就是利用X射线、γ射线、β射线、中子、激光、电子束、离子束、紫外线等物理因素辐射诱发变异。化学诱变是利用化学试剂诱发的变异。诱变剂包括碱基类似物，烷化剂，DNA分子结构插入物三大类。
2、试述植物体细胞无性系变异的遗传学基础？
体细胞无性系变异的遗传基础：
（1）染色体组型变异，如出现多倍体和非整倍体。
（2）染色体结构变异，由染色体重排造成的基因丢失，或“关闭”一个能使其相应隐性基因产生表现型效应的显性等位基因等。
（3）基因突变
（4）DNA总量变异和DNA重复序列拷贝数的变异
（5）基因丢失
（6）DNA碱基修饰
（7）转座子的激活，由转座引起突变。
（8）基因重排
3、何谓生理适应性变异和后生遗传变异？
答：生理适应性变异是指由于某种外界条件存在而引起的性状变异，这种变异会随着特定外界因素的消失而消失。
后生遗传变异是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，并最终导致了表型的变化，即指在细胞的发育和分化过程中，由于基因表达调控发生变化而引起的表型变异，并不涉及基因结构的变化。
4、植物体细胞无性系突变体筛选的方法有哪些？
答：（一）从再生植株中直接帅选有用突变株
（二）对离体培养物的帅选1.直接帅选法（1）正选择法(2)负选择法
2.间接帅选法
（三）绿岛法
5、植物体细胞无性系突变体筛选的一般程序和原则是什么？
答：体细胞无性系突变体筛选的程序：材料选择、预处理、预培养、诱发突变、突变细胞的筛选、细胞增殖与器官建成、突变细胞的遗传分析和鉴定。突变体筛选的一般原则：多种检测手段相结合，初筛与复筛相结合、离体筛选与常规育种相结合。
6、植物体细胞无性系突变体筛选有哪些应用价值？
答：1.在农业上的应用。在农业领域，体细胞突变体筛选主要集中在直接筛选与高产相关的农艺性状（如株型、干粒重、穗长、株型）、特定的农艺性状（如高蛋白、优质蛋白）和抗性品种（如抗病、抗旱、抗盐、抗除草剂等以及筛选间接的常规育种材料（如远缘杂种体细胞易位体系）等方面。2.在植物细胞大规模培养生产次生代谢物中的应用。植物细胞大规模培养是植物生产次生代谢物如药用成分、香料成分、花青苷或黄酮等色素的一条重要途径。
第十章
14.试述常温限制生长保存的概念及常用的方法
常温限制生长保存的概念就是使培养物处于无生长或缓慢生长状态下抑制植物的生长，限制植物的生长，是转移继代的间隔时间延长。
常用方法有：高渗保存法、生长抑制剂保存法、低压保存法、饥饿法、干燥保存法、
15.简述低温保存的方法及其原理
低温保存的方法就是正确的选择适宜低温。
原理：植物要生长必须有适宜的温度，温度降低以后，植物的生长速度就会受到抑制而减慢，老化程度缓慢，因而延长了继代的时间间隔而达到保存种质的目的。
16.试述超低温保存的基本原理，常用的超低温保存方法有哪些？
超低温保存的基本原理：在超低温（液氮）保存过程中，植物细胞内自由水被固化或企划，仅剩下不能被利用的束缚水，酶促反应停止，几乎所有的细胞代谢活动。生长都停止了，当解冻后，又能够恢复再生能力。
超低温保存的方法有：传统的降温冷冻方法、玻璃化保存法、包埋脱水超低温保存、包埋玻璃化法超低温保存。其中，降温冷冻方法包含了快速冷冻法、慢速冷冻法、两步冷冻法、逐级冷冻法。
4、冷冻防护剂的主要种类有哪些？它们的生理作用如何？
答：冷冻防护剂有渗透型和非渗透型。
渗透型生理作用：渗透型冷冻保护剂多属低分子中性物质，在溶液中易结合水分子，发生水合作用，使溶液的粘性增加，从而弱化了水的结晶过程，打到保护的目的。
非渗透型生理作用：非渗透型冷冻保护剂能溶于水，但不能进入细胞，它使溶液呈过冷状态，可在特定温度下降低溶质浓度，从而起到保护作用。
5、简述超低温冷冻保存种质资源的基本程序。
细胞工程试题及答案
专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化
植物细胞工程练习题及(附答案)
植物细胞工程测试题 一、单选题： 1．植物组织培养是指（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D．愈伤组织形成高度液泡化组织2．植物体细胞杂交的结果是（） A.产生杂种植株B．产生杂种细胞C．原生质体融合D．形成愈伤组织 3．如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B．愈伤组织有叶绿体，代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是细胞全能性表达的结果 4．不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂D．重压 5．植物细胞表现出全能性的必要条件是（） A.给予适宜的营养和外界条件 B.脱离母体后给予适宜营养和外界条件 C.导入其他植物细胞的基因 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内 6．植物组织培养过程中的脱分化是指（） A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 7.下列植物细胞全能性最高的是（） A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 8．植物组织培养过程的顺序是（） ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织 ④脱分化⑤再分化⑥植物体 A．①④③⑤②⑥B．①④③②⑤⑥C．①⑤④③②⑥D．⑥①④③⑤②
9．下列有关细胞工程的叙述不正确的是（） A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质B．在细胞器水平上定向改变遗传物质 C．在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D．在细胞整体水平上获得细胞产品 10．对人工种子正确的解释是（） A．通过科学手段人工合成的种子B．利用植物组织培养技术获得的种子 C．种皮能自我生成的种子D．人工种子发芽率低 11．有关全能性的叙述，不正确的是( ) A．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B．生物体内细胞由于分化，全能性不能表达 C．卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 12．马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是（） A．选择优良品种进行杂交B．进行远缘植物体细胞杂交 C．利有芽尖进行组织培养D．人工诱导基因突变 13．用植物组织培养技术，可以培养或生产出（） A．食品添加剂B．无病毒植物 C.人工种子D．前三项都是 14．科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是（） A．彼此性状相似B．变异频率较高C．单倍体D．都是纯合子 15．植物的微型繁殖技术是指（） A．植物体细胞杂交技术B．嫁接C．营养繁殖D．植物组织培养 16．胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（） A．愈伤组织B．再分化C．形成完整植株D．取离体组织 17．运用植物组织培养技术，可以培育或生产出（） A．细胞产物——生物碱B．无病毒植物C．人工种子D．以上都是 18．植物的微型繁殖的优点是（） A．取材少B．培养周期短C．繁殖率高D．以上都是 19．（08江苏高考）下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 20.（08天津）为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。
高中生物《细胞工程》练习题(含答案解析)
高中生物《细胞工程》练习题 题号一二三四总分 得分 一、单选题（本大题共19小题，共19.0分） 1.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A. 为了提供营养和调节渗透压，培养基中应添加蔗糖 B. 培养基中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织的生长和分化 C. 器官、组织的细胞在离体的情况下通过再分化形成愈伤组织 D. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的植株的基因型可能不同 2.如图表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述正确的是（） A. 此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体 B. ①阶段体现了细胞的全能性，②阶段需要细胞分裂素 C. ①阶段有细胞增殖，但无细胞分化 D. ②过程为脱分化，③过程为再分化 3.利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝(均为二倍体)培育成“白菜—甘蓝”杂种植株(如下图所 示)。下列说法正确的是（） A. 图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B. 植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞 C. 上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D. “白菜—甘蓝”杂种植株所具有的性状是基因选择性表达的结果 4.某植物的基因型为AaBB,通过下列技术可以分别将其转变为以下基因型的植物:①AABB ②aB ③AaBBC ④AAaaBBBB。则以下排列正确的是( )
A. 诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B. 杂交育种、单倍体育种、基因拼接技术、多倍体育种 C. 花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基国技术 D. 单倍体育种、花药离体培养、基因工程育种、多倍体育种 5.下面为利用玉米(2N=20)的幼苗芽尖细胞(基因型BbTt)进行实验的流程示意图。下列有关分析不 正确的是( ) A. 基因重组发生在图中②过程，过程③中能够在显微镜下看到染色单体的时期是前期和中期 B. 秋水仙素用于培育多倍体的原理是其能够抑制纺锤体的形成，着丝点不能分裂 C. 植株a为二倍体，植株c属于单倍体，其发育起点为配子 D. 利用幼苗2进行育种的最大优点是明显缩短育种年限，植株b纯合的概率为100% 6.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（） A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B. 植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C. 植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 7.下列关于植物组织培养和动物克隆的说法不正确的是（） A. 植物组织培养获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子；可能为单倍体，也可能为二 倍体 B. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同 C. 动物克隆的技术基础是动物细胞培养 D. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 8.芦笋是雌雄异株植物，雄株性染色体为XY，雌株为XX；其幼茎可食用，雄株产量高。以下为 两种培育雄株的技术路线。有关叙述正确的是（）
细胞工程课后思考题答案(杨淑慎主编).
第二章 1、目前，常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特点？ 1）MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液。 2）B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3）White培养基其特点是无机盐数量较低，适于生根培养 4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。 5）KM8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合培养。 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 3、配制培养基时，为什么要先配制母液？如何配制母液？ 1）配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。2）基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。 4、常用的灭菌方法有哪些，各有哪些优缺点？ 1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）优点：高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡，是一种最有效的灭菌方法。缺点：如果是对培养基或液体溶液灭菌，灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关，时间不足达不到灭菌效果，时间过长培养基内的化学物质遭到破坏，影响培养基成分。 2）过滤除菌优点： 3）干热灭菌缺点：干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题 4）紫外线灭菌缺点：由于紫外线穿透物质的能力很弱，所以只适于空气中和物体表面的灭菌，而且要求距照射物质以不超过1.2m为宜。 5）熏蒸消毒优点：方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
(完整版)细胞工程练习题(附答案)
细胞工程练习题 一．选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件 是不需要的 A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素 2. (08江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3．下列选项中能正确说明生物工程技术的是（） A．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B．动物克隆的技术的基础是动物的细胞培养 C．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D．动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物 4．下图是“白菜 —甘蓝”杂种植 株的培育过程。 下列说法正确的 是 A．所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织是已高度分化的细胞 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5．下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，相关叙述中正确的是 A．②阶段会发生减数分裂过程B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C．此过程体现植物细胞具有全能性D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6．右图为将胡萝卜的离体组织在一定条 件下培育形成试管苗的过程示意图。 有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是 A．通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B．通过多倍体育种培育无子西瓜 C．通过单倍体育种培育优质小麦 D．通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. （09浙江卷）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性D．植物体细胞杂交过程中，需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种体细胞 9. 动物细胞培养必需条件的是 A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和pH C.O2等气体环境 D.适宜的光照条件 10. 物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是 A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分 11. (08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④12. 能有效打破物种界限，定向改造生物的遗传性状，培育新的优良品种的生物技术是A.基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术13. 某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料， 通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为 A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞14. (08理综Ⅰ)下列关于细胞工程的叙述，错误 ．．的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株
细胞工程复习题
细胞工程复习题 一、名词解释（每小题3分，共21分）1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面
2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别 7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类 9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节 10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求
14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程 2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L，问其/ mol L （分子量） 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+%琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度ml，NAA母液浓度ml。要配制800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的 NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml（NaOH分子量40，HCl分子量，浓HCl含量38%，比重） 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同
细胞工程复习题 (2)
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞
细胞工程练习题(解析版)
细胞工程练习题 1．在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是() ①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株②利用花药离体培养得到的单倍体植株③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株⑤无子西瓜的大量繁殖A．①②③B．③④⑤ C．①②④⑤D．②③④⑤ 答案D 解析利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，①错误；利用花药离体培养得到的单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，②正确；利用基因工程培养抗棉铃虫的植株，需要采用植物组织培养技术，③正确；利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术，④正确；无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，⑤正确。所以②③④⑤正确。2．科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下。 细胞核的供体细胞类型妊娠数/受体母羊数 乳腺上皮细胞1/13 胚胎成纤维细胞4/10 早期胚胎细胞14/27 据此分析不正确的是() A．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高 B．克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同 C．体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植 D．重组细胞发育与去核卵母细胞的细胞质有关 答案B 解析分析表格数据可知，早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，A正确；克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移植技术，克隆羊的细胞核遗传信息来自细胞核的供体，细胞质的遗传信息来自卵细胞，B错误；对比表格中的数据可知：体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植，C正确；核移植中做受体细胞的都是去核卵母细胞，可见重组细胞发育与去核卵细胞的细胞质有关，D正确。
高中生物细胞工程试题
阶段质量检测(二) 细胞工程 (时间:45分钟,满分:100分) 一、选择题(每小题3分,共45分) 1.下列生物工程技术中,不属于细胞工程得就是( ) A.通过试管动物大量繁殖优良动物 B.利用含有人胰岛素基因得大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D.将某人得肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系 2.下列关于植物体细胞杂交技术得叙述,错误得就是( ) A.获得原生质体得过程需要用到纤维素酶与果胶酶 B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 C.植物体细胞杂交过程就就是原生质体融合得过程 D.可根据细胞中染色体数目与形态得差异来鉴定杂种细胞 3.植物体细胞杂交制备原生质体与动物细胞培养配制一定浓度得细胞悬浮液,所需要得酶依次就是( ) A.淀粉酶与磷脂酶 B.纤维素酶与胰蛋白酶 C.脂肪酶与二肽酶 D.过氧化氢酶与半乳糖苷酶 4.下列有关单克隆抗体制备得叙述,正确得就是( ) A.先利用特定得抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞 B.为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞与已免疫得B淋巴细胞融合 C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清与抗生素 D.经过选择培养基初次筛选得杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养 5.(全国高考)关于动物细胞培养与植物组织培养得叙述,错误得就是( ) A.动物细胞培养与植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养与植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒 6.细胞工程中,选择合适得生物材料就是成功得关键。下列选择不合理得就是( ) A.选择高度分化得动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞 B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物得成功率 C.选择一定大小得植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
2018年高考生物-基因工程与细胞工程-专题练习及答案解析
2018年高考生物专题练习 基因工程与细胞工程 1．(2017东北三省三校一联,38)马铃薯是重要的经济作物,人类在(马铃薯的)基因育种方面取得丰硕成果。（1）马铃薯是双子叶植物,常用__________法将目的基因导入马铃薯体细胞中。构建好的基因表达载体包括目的基因、__________、__________、__________、复制原点五部分。 （2）马铃薯得病会导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为__________(写一种即可)。 （3）科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计： ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂__________,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前__________。 （4）将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行__________。 2．(2017湖北武汉一模,38)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下： 第一步,从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”;第二步,构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neo R(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位置; 第三步,将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造; 第四步,基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如图所示。 请根据上述资料,回答下列问题。 （1）实施基因工程的核心步骤是__________,基因表达载体中的__________是位于基因首端的有特殊结构的DNA片段;在构建的过程中所需要的工具酶是__________。 （2）如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是__________,原因是__________。 （3）上述资料中neo R基因的作用最可能是__________。为了鉴定目的基因是否成功表达,有时进行抗原—抗体杂交,目的蛋白相当于__________。 （4）该项技术具有广阔的应用前景,请试举一例：__________。 3．(2017河北衡水中学一模,38)科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。
专题2-细胞工程练习题(含答案解析)
第I卷（选择题） 1．利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要 A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜”——一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（） A．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A．基因工程技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎分割技术 D．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（） A．皱缩 B．胀破 C．呈球形 D．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（） A．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
细胞生物学试题整理(含答案)
细胞生物学与细胞工程试题 一：填空题（共40小题，每小题0.5分，共20分） 1：现在生物学“三大基石”是：＿，＿＿。 2：细胞的物质组成中，＿，＿，＿，＿四种。 3：膜脂主要包括：＿，＿，＿三种类型。 4：膜蛋白的分子流动主要有＿扩散和＿扩散两种运动方式。 5：细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的＿基因，又称发色基因。6：受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的＿。 7：信号肽一般位于新合成肽链的＿端，有的可位于中部。 8：次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体，可分为＿，＿，及＿。 9狭义的细胞骨架（指细胞质骨架）包括＿，＿，＿，＿及＿。 10：高等动物中，根据等电点分为3类：α肌动蛋白分布于＿；β和γ肌动蛋白分布于所有的＿和＿。 11：染色质的化学组成＿，＿，＿，少量＿。 12：随体是指位于染色体末端的球形染色体节段，通过＿与＿相连。 13：弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域：富含＿，＿，＿区段。 14：细胞周期可分为G1期，S期，G2期，G2期主要合成＿，＿，＿等。 二：名词解释（每个1分，共20小题） 1：支原体 2：组成型胞吐作用 3：多肽核糖体 4：信号斑 5：溶酶体 6：微管 7：染色单体 8：细胞表面 9：锚定连接 10：信号分子 11：荧光漂白技术
12：离子载体 13：受体 14：细胞凋亡 15：全能性 16：常染色质 17：联会复合体 18组织干细胞 19：分子伴侣 20：E位点 三：选择题（每题一分，共20小题） 1：细胞中含有DNA的细胞器有（） A：线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2：细细胞核主要由（）组成 A：核纤层与核骨架B：核小体C：染色质和核仁 3：在内质网上合成的蛋白质主要有（） A：需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B：膜蛋白C：分泌性蛋白 D：需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有（） A：线粒体 B：叶绿体 C：内质网 D：高尔基体5微体中含有（） A：氧化酶 B：酸性磷酸酶 C：琥珀酸脱氢酶 D：过氧化氢酶6：各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有（）A：M6P标志 B：导肽 C：信号肽 D：特殊氨基序列7：溶酶体的功能有（） A：细胞内消化 B：细胞自溶 C：细胞防御 D：自体吞噬8：线粒体内膜的标志酶是（） A：苹果酸脱氢酶 B：细胞色素 C：氧化酶 D：单胺氧化酶9：染色质由以下成分构成（） A：组蛋白 B：非组蛋白 C：DNA D：少量RNA
细胞工程练习题及答案
第39讲细胞工程练习题（一） 下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程，请回答： (1)过程①中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割的优点是________，此外还要用到_______酶。 (2)过程②中首先需要用__________处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为__________。 (3)与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用_________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是__________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体__________(是、不是)单克隆抗体。 (4)图示过程应用的生物技术有 _____(至少答出三种)。 2、玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家做了大量的研究工作．如 图是关于玉米培养的过程，请据图回答： （1）取玉米幼苗的茎尖进行如图A→C 培育，发育成植株D，该过程所用技术叫______，依据的理论基础是______；培育无毒苗常取茎尖进行培养，原因是______．（2）取D的花药培养成幼苗F称为______，若玉米种子基因型为AaBbcc（自由组合），则F的类型有______种，需经______处理后才能发育成可育植株G． （3）从生殖方式上分析，A→D属于______生殖；从细胞分裂方式上分析，E→F过程中进行了______分裂． （4）B→C过程中，若愈伤组织在培养基中未形成根，先分化出了芽，其原因可能是__________________________________． （5）若想通过上述过程培育出一种新的玉米品种，可以采用______育种方式；若想培育出一种能抗虫的玉米新品种，可以采用______育种． 第39讲细胞工程练习题（二） 1、甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。
(完整版)细胞工程测试题(1)
绝密★启用前 2015-2016学年度???学校3月月考卷 试卷副标题 xxx 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I 卷（选择题） 请点击修改第I 卷的文字说明 一、选择题（题型注释） 1．下列关于植物组织培养的叙述，正确的是 A 、愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B 、二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C. 用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 2．动物细胞融合技术最重要的应用是（ ） A ．制备单克隆抗体 B ．制备大量的动物细胞 C ．制备胚胎 D ．进行细胞核移植 3．运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是（ ）。 ①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A ．①②③ B ．①②④ C ．①③④ D ．①②③④ 4．在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（ ）。 A ．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B ．将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B 淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C ．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D ．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 5．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ） A ．可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B ．可以在生物体内生产，不能体外生产 C ．制备过程中一个重要的环节是细胞融合。 D ．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 6．植物组培与动物细胞培养的相同点是 A.都需要一定的气体环境 B.都存在脱分化现象 C.都存在细胞的接触抑制现象 D.都需要对培养材料进行细胞分散处理 7．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
细胞工程复习题及答案
细胞工程复习题 一、名词解释 1.细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。 2.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料 3.植物组织培养：将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。 4.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 5．离体无性繁殖:简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。 6．继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。 7.体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 8 细胞分化：即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。 9 细胞脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。 10 细胞再分化：即脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整植物体，这一过程成为细胞再分化。 11 人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。 12 植物细胞全能性：指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。 13 胚状体：在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
大学细胞工程试题及答案
大学细胞工程试题及答 案 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】
细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成， 根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不 均一细胞群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方 法，由单细胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自 稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的 微生物又不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核 融合几个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续 发育，获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药 培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价 格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程 2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中 D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用 合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的(C) A．平衡盐溶液B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制(A) A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育