细胞生物学实验课自我测试题
细胞生物学实验课自我测试题
1、显微镜的光学系统主要有哪部分些构成
2、拿到一张固定装片，为了很快找到需要找到的物像，首先应该做什么
3、为避免显微镜的灯泡烧坏，应注意什么
4、在低倍镜下找到物像后，为了看得更仔细，向高倍镜转换过程中需要调整粗调节螺旋
吗为什么
5、如何搬动显微镜
6、推血涂片时，要一次成功。即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重
新开始。为什么
7、使用染色缸时，为避免拿出玻片时找不到涂有细胞的一面，应注意什么
8、如何知道试管中的红细胞溶血了
9、抓取小鼠注射的正确方法是怎样的
10、取蛙血时，从胸腔最先看到的一般是哪个器官如何快速找到心脏
11、细胞生物学实验要求学生掌握的最重要的技能是什么
12、鸡的红细胞和小鼠的巨噬细胞相比，哪个体积大
13、细胞处于高渗或低渗溶液中，如何判断水的运动方向
14、可自由扩散的脂溶性小分子对细胞的影响如何
15、显微镜下口腔粘膜细胞的线粒体的形状是什么样的
16、在细胞吞噬活动观察的实验中，如何在显微镜下快速找到巨噬细胞
17、推蛙血涂片时应注意什么
18、为什么要用派洛宁和甲基绿染的混合染液染色RNA和DNA
19、派洛宁和甲基绿染的混合染液染色细胞，细胞核和细胞质的颜色分别是什么颜色为什
么
20、使用显微镜观察标本时，为什么必须按照从低倍镜到高倍镜，再到油镜的顺序进行
21、使用显微镜时，为什么要先将10倍物镜与标本表面的距离调节到6mm之内
22、如果标本片放反了，可用高倍镜或油镜找到标本吗为什么
23、怎样才能准确而迅速地在高倍镜或油镜下找到目标
24、如果细调焦螺旋已转至极限而物像仍不清晰时，应该怎么办
25、如何判断视野中所见到的污点是在目镜上
26、在对低倍镜进行准焦时，如果视野中出现了随标本片移动而移动的颗粒或斑纹，是否
将标本移至物镜中央，就一定能找到标本的物像为什么
27、动物细胞与植物细胞有哪些重要区别
28、请说明细胞膜具有哪些特点。
29 细胞的吞噬活动对人体有何意义
30、物质跨膜（细胞膜）运输有哪些方式请比较它们的不同点。
31、比较动植物细胞有丝分裂的异同点。
32、开始显微镜使用时，电源接通后灯泡不亮,可能有哪几种原因
33、怎样才能快速在高倍镜下找到洋葱根尖细胞的分裂相
34、高倍镜观察标本时，无论怎么调节微调螺旋，视野都很模糊，可能的原因是什么该怎
么处理
35、动物细胞马蛔虫卵的有丝分裂相的两种图形：染色体直线排列与放射状排列属于什么
时期
36、着丝点的分裂在有丝分裂的那一个时期
37、观察洋葱根尖和马蛔虫卵有丝分裂时，二者都能看到核仁吗
38、显示蟾蜍血液细胞DNA和RNA时，为什么要在纯丙酮中迅速过一下
39、细胞膜的通透性观察实验中溶血的原因是什么
40、NaCl溶液和葡萄糖溶液为什么不能产生溶血
41、蟾蜍心脏取血时，剪开其表皮、打开胸腔时，应注意什么
42、用牙签取自己的颊粘膜上皮细胞时，最先应做什么
43、颈椎脱臼法处死大（小）白鼠时关键要注意什么
44、在鼠肝细胞活体染色显示线粒体的实验操作中，为什么切取肝脏边缘较薄的肝组织一
小块放入盛有染液的小培养皿内（或者凹玻片中）时，染液不可太多
45、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前两天，每天每只小鼠腹腔注射6%
淀粉肉汤1ml（含台酚蓝）
46、观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动时，为什么在实验前先给每只小鼠腹腔注射1%鸡红细
胞悬液1ml
47、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察时，为什么25分钟后再向腹腔注射生理盐水
48、观察蛙血涂片中的细胞形态结构时，甲醇的作用是什么操作时要注意什么
49、人的红细胞有细胞核吗蛙的红细胞有细胞核吗
50、观察动植物细胞分裂时，间期的典型特点是什么
细胞生物学实验课自我测试题答案
1、目镜、物镜、光源、聚光镜。
2、对着光线用肉眼找到固定装片上的被观察物，或者盖玻片的位置，将它放在通光孔的
正中央。
3、一旦不观察或离开座位，应关闭光源开关。
4、不用，只调细调节螺旋。因为所有物镜的焦平面都在一个平面内，秩序用微调螺旋轻
轻调节即可。
5、一手托着镜座，一手握着镜臂。
6、因为推两次必然造成两层涂片，细胞层很厚，细胞堆积在一起，在显微镜下无法清楚
地观察单个血细胞。同时，第二次推片时必然破坏第一次推片涂布的细胞
7、应把所用的玻片正面都朝向一侧，并记下方向。
8、隔着试管可以清晰地看见后面纸上的字，即从不透明变成透明。
9、左手大拇指、食指抓小鼠头颈的上后部毛皮，使其颈部不能活动，其余手指固定其身
体，将其翻转后可直接用右手持注射器对其胸腹部注射。
10、红色泡状的肺。跳动的器官即心脏。
11、非常熟练地使用显微镜，掌握临时装片的基本技术，各种细胞形态的观察。
12、一般说来小鼠的巨噬细胞大一些。
13、细胞处于高渗溶液中则水出细胞，细胞处于低渗溶液中则水进入细胞。
14、如果胞外的脂溶性小分子浓度很大，则会大量进入细胞，导致细胞破裂。
15、颗粒状、棒状、弯曲的线状。
16、细胞内有很多蓝色淀粉小颗粒的细胞，就是巨噬细胞。这是因为实验前向小鼠腹腔注射
了含有台酚兰的淀粉肉汤，巨噬细胞吞噬了台酚兰颗粒。
17、斜角越小，速度越快，涂片越薄。
18、核酸是酸性的，它们对于碱性染料派洛宁和甲基绿具有亲和力。利用这两种染料的混合
液处理细胞，可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色，这种颜色上的差异由DNA 和RNA聚合程度的不同所引起，因为甲基绿分子上有两个相对的正电荷，它与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力，可使DNA分子染成蓝绿色；而派洛宁分子中仅一个正电荷，可与低聚分子RNA相结合使其染成红色。这样细胞中的DNA和RNA可被区别开来。
19、绿色和红色。因为细胞核中主要是DNA，细胞质中主要是RNA，而它们分别被绿色的
甲基绿和红色的派洛宁着色。
20、因为低倍镜观察的表本范围最大，可以更快地找到要观察目标。
21、因为10倍物镜的工作距离为7.63mm，而为了保护物镜不与玻片相撞，应该将目镜与
载玻片的距离调至6mm以内后，再下调载物台，既可找到观察目标，又可保护物镜。
22、不能，因为载玻片的厚度远大于高倍镜或油镜的工作距离。
23、在低倍镜下找到目标后，调至视野正中央，再转换到高倍镜。
24、应该换用粗调节旋钮，轻轻同方向转动一下，在用微调节旋钮调节焦距。
25、轻轻转动目镜，污点随目镜转动，就证明污点在目镜上面。
26、不一定，因为这些斑纹可能位于载玻片的反面（下面）。
27、动物细胞有中心体，植物细胞没有，植物细胞有液泡、细胞壁，动物细胞没有。
28、细胞膜的主要特点是具有不对称性、流动性。
29、细胞的吞噬活动对人体具有保护作用，免受外来微生物、有害物质的侵害。
30、主动运输：消耗能量，从低浓度到高浓度
被动运输：不需要消耗能量，从高浓度一侧向低浓度一侧运输。又可以分为：简单扩散：不需要载体的帮助，物质直接透过细胞膜；帮助扩散：需要载体的帮助。
通道运输：高浓度相低浓度运输，专一性强，运输速度快
31、动物细胞分裂时有星体的形成，而植物细胞因为没中心体，分裂时没有星体。动物细胞
分裂时细胞膜缢缩分裂成两个细胞，而植物细胞因为有坚硬的细胞壁，在赤道板的位置重新形成细胞壁。
32、一是总开关未打开，或者插头接触不良；二是亮度调节旋钮没有打开。
33、先用肉眼对着光线找到切片上的洋葱根尖，然后放在通光孔的正中央，用10倍的物镜，
在生长区找到分裂相，再转换到高倍镜即可。
34、可能的原因主要有：镜头被污染，尤其可能是被镜油污染。应该先用二甲苯清洗，再用
擦镜纸擦去二甲苯。
35、有丝分裂中期，与赤道板垂直的切面和与赤道板平行的切面。
36、有丝分裂后期
37、洋葱根尖的间期能看到核仁一个或者二到三个。动物细马蛔虫卵细胞看不到。
38、在纯丙酮中迅速过一下的目的是为了脱去多余的染料，又不至于脱去已经与DNA和RNA
结合的染料。
39、蒸馏水：水分子可以自由通过细胞膜，低渗溶液中的水分子迅速进入细胞内，使细胞破
裂。乙醇、甘油：可以自由进入细胞，使细胞破裂。乙醇进入的速度慢于甘油。
40、NaCl溶液的浓度高于生理盐水，是高渗溶液，细胞在高渗溶液中，细胞内水分子流出
细胞，钠离子和氯离子都不能通过细胞膜
41、用镊子挑起皮肤，仔细用剪刀剪开皮肤复，再用镊子夹住胸骨。小心剪开，以免直接伤
及内脏，流血过多，不利于取血。
42、漱口。这样可除去口中的食物残渣，便于刮下的大多是细胞。
43、固定头颈部，用力一下子拉直脊椎。
44、要使肝组织的上半部分暴露在空气中，而不可使组织块完全淹没，这样细胞内线粒体的
酶系可被充分氧化而使线粒体易于着色。
45、为了在后续观察实验中清晰地观察到巨噬细胞，含台酚蓝的淀粉肉汤为蓝色，被巨噬细
胞吞噬后可示踪巨噬细胞；此外，腹腔注射的淀粉肉汤作为外来异物，会吸引小鼠体内的巨噬细胞集中到腹腔，便于后续实验得到大量的巨噬细胞。
46、为了观察小鼠腹腔巨噬细胞如何吞噬鸡红细胞
47、使腹腔中的液体多一点，便于收集巨噬细胞和鸡红细胞；生理盐水不会使细胞破裂或变
形。
48、甲醇的作用是使细胞固定。注意用完甲醇后一定要倒回原瓶，予以回收，以免污染环境。
尤其应该严格避免甲醇溅到眼睛和皮肤上，一旦醇溅到眼睛和皮肤上，应立即用清水冲洗。
49、人的红细胞没有细胞核。蛙的红细胞有细胞核。
50、核膜、核仁清晰，染色质呈丝状。
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导
细胞生物学实验指导目录 一．显微镜的使用 实验一、几种光学显微镜的使用 实验二、参观电子显微镜及生物超薄切片标本制备 二．细胞形态结构 实验三、细胞大小的形态观察——测微尺的使用 实验四、细胞活体染色技术 实验五、植物细胞骨架光学显微观察 实验六、胞间连丝观察 三．细胞化学 实验七、鉴定RNA的细胞化学方法——Branchet反应 实验八、DNA显色的观察——Feulgen反应 实验九、固绿染色法鉴定细胞内酸性蛋白与碱性蛋白 实验十、多糖及过氧化酶的显示 实验十一、核仁组成区的银染显示与观察 四．细胞生理 实验十二、细胞膜的通透性 实验十三、细胞电泳 五．细胞和组织培养技术 实验十四、植物原生质体的分离和融合 实验十五、植物细胞的培养与观察 实验十六、动物细胞融合 实验十七、动物细胞的培养与观察 六．细胞化学成分的分离 实验十八、细胞器的分离、纯化——细胞分级分离 实验十九、荧光的细胞化学测定 实验二十、细胞活力的鉴别 实验一几种光学显微镜的使用
一、实验目的 了解几种光学显微镜的结构、工作原理、主要用途和使用方法；掌握使用普通显微镜提高分辨力的方法。 二、实验原理 (一)基本原理 一般实验室经常使用的光学显微镜都是由物镜、目镜、聚光器和光阑组成，普通显微镜它们的放大原理及光路图如下： AB物体．A1B l第一次成像，A2B2第二次成像，O l目镜．O2物镜， F1为O l的前焦点，F2为O2的前焦点 各种光学显微镜的光学放大原理基本相同，各种特殊用途的光镜不过只是在光源、物镜、聚光器等方面作了改动，或在其它方面增设了某些特殊的设备。 (二)几种光学显微镜 l、普通光学显微镜： 普通光学显微镜也叫复式显微镜，是最常见，最简单的显微镜。它适于观察一般固定的，有色的透明度较高的标本。其最大分辨力一般为0.2微米，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。 2、暗视野显微镜： 暗视野显微镜是以丁达尔现象(Tyndall phenomenon)(即光的微粒散射现象)为基础设计的,它使用了特殊的聚光器进行斜射照明,因光源中心束不直入物镜，所以视野黑暗，而被检细胞器因斜射照明发生衍射和反射，所以发亮可见。暗视野显微镜可用增加光照方法增加物体与背景的反差，因而可观察到0．2—0．004微米直径的微小粒子，但它分不清被检物的细微构造，它常用于观察物体的存在与运动。而暗视野显微镜与普通光学显微镜的区别，主要在于聚光器的不同，致使照明方法有别。确切地说，称暗视野显微镜为暗视野照明更为贴切。它是照明光线仅照亮被检样品而不进入物镜。使视野背景暗黑，样品明亮的照明方法。 3、相差显微镜： 相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位是指在某一时间上，光的波动所达到的位置。
(生物科技行业类)细胞生物学习题与实验
《细胞生物学》综合测试题（一） 一、名词解释（每词3分，共30分） 1、细胞 2、分子杂交 3、核体 4、初级溶酶体 5、自由扩散 6、桥粒 7、膜骨架 8、奢侈基因 9、常染色质 10、基本颗粒（F1因子） 二、填空（每空0.5分，共15分） 1、原生质体是指（）。 2、细胞的三要素是指（）、（）和（）。 3、被动运输可分为两类，即（）和（）。 4、流动镶嵌模型的三大特点是（），（）和（）。 5、目前发现最小最简单的细胞是（），直径只有（）。 6、根据是否与消化物作用溶酶体可区分为（）、（）两种形式。 7、原核细胞和真核细胞的核糖体的沉降系数分别是（）和（）。 8、细胞内的能量转化细胞器是指（）和（）。 9、细胞学说的内容包括（）、（）和（）。 10、荧光显微镜以（）为光源，电子显微镜则以（）为光源。 11、细胞有两种膜结构具有分拣作用，一个是（）另一个是（）。 12、弹性蛋白的肽链之间通过（）相互交连形成网络。 13、用（）技术可以在电镜下观察膜蛋白的不对称分布。 14、在转移酶I和T因子的作用下，催化P位上肽酰tRNA的（）与处在A位上氨酰基tRNA的（）之间形成肽键。 15、染色质根据功能状态不同可分为（）和（）两种。 三、简答（每小题5分，共25分） 1、糙面内质网功能。 2、真核细胞的主要特点是什么？ 3、染色体DNA的三个功能元件是什么？ 4、细胞核的组成部分及功能。 5、为什么说线粒体、叶绿体是半自主性细胞器？ 四、论述（每小题10分，共30分） 1、试述动物细胞的连接方式 2、试述蛋白质糖基化的生理作用。 3、试述细胞生物学的主要研究内容。 《细胞生物学》综合测试题（二）
细胞生物学实验
1. 什么是细胞培养？ 细胞生物学实验 指从动物活体体内取出组织，并将其分散为单个细胞（机械或酶消化），在体外模拟体内的生理环境，使其在人工培养条件下保持生长、分裂繁殖、细胞的接触性抑制以及细胞衰老过程等生命现象。 最常见的细胞一般有两种，一种是原代细胞，另一种是传代细胞。 原代细胞是指动物组织经过胰酶或胶原酶等酶类的消化，使其分散，从而获得单个细胞，再使这些单个细胞生长于培养容器中的过程。大多数组织可以制备原代细胞，但制备的方法略有不同，制备的细胞生长快慢及难易程度也不相同。 不同的原代细胞，其形态也不尽相同。一般将10代以内的细胞称之为原代细胞。 传代细胞一般指无限繁殖的细胞系，理论上这类细胞可以无限次的传代。做实验的时候也会经常使用这类细胞，如Hela、293、Vero 等细胞。 2. 细胞的生长周期 游离期：细胞刚接种到新的培养容器中到贴壁前的一段时期，这个时期的长短由细胞类型决定，从几分钟到几个小时不等。 贴壁期：细胞从游离状态变为贴附到培养器皿表面并展现出一定细胞形态的时期。 潜伏期：细胞在完成贴壁后，并不会马上进行增殖，会进行增殖所必须的物质和能量的储备，这个时候称之为潜伏期。
对数生长期：细胞在完成物质和能量储备后，开始大量的增殖的时期。这个时期的细胞活力旺盛，且状态稳定，我们所做的绝大多数实验都是在这个时期开展的。 停止期：随着细胞的生长，细胞密度越来越大，由于营养物质的消耗、细胞间的接触抑制等因素，细胞生长缓慢，甚至停止生长。这个时候，我们就要给细胞进行传代了，使细胞可以继续进行增殖，保持旺盛的活力。 3. 细胞生长所需要营养条件 细胞的培养所需要的营养成份一般来自于基础培养基（比如DMEM培养基）和血清。 基础培养基：主要是提供细胞生长所需要的氨基酸（组成蛋白质的基本单位）、维生素（细胞代谢中辅酶的组成成分）、无机离子（K+，Na+等）、碳水化合物（碳源和能量来源）和一些激素等营养物质。 血清：主要是提供一些基础培养基不能提供的生长因子和低分子的营养物质，此外它还有促进细胞的贴壁、中和有害重金属离子等作用。如果只提供基础培养基而不提供血清，绝大多数细胞是无法生长的。血清对于我们实验的重要性就不言而喻了，那么什么样的血清才算是合格的血清呢？ 合格的血清需要通过各种检测，包括无细菌，无真菌，无支原体检测，无病毒污染。血清一般呈现为淡黄色，透明状液体，由于含有大量的蛋白质等成分，会略有黏稠。以全式金公司的TransSerum EQ Fetal Bovine Serum (FS201-02)为例，它通过了牛腹泻病毒、牛副
(复试) 细胞生物学专业 分子细胞生物学
湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题考试大纲考试科目代码：考试科目名称：分子细胞生物学 一、考试形式与试卷结构一 1)试卷成绩及考试时间 本试卷满分为100分，考试时间为180分钟。 2)答题方式 答题方式为闭卷、笔试。 3)试卷内容结构 各部分内容所占分值为： 细胞生物学基本概述、细胞基本特性及研究方法约15分 细胞膜, 内膜系统及各细胞器约25分 基因表达及调控约30分 细胞增殖、分化、衰老、凋亡及其社会联系与信号转导约30分 4)题型结构 论述题：4小题，每小题15-30分，共100分 二、考试内容与考试要求 （一）细胞生物学基本概述、细胞基本特性及研究方法 考试内容： 细胞生物学研究的内容与现状；细胞学与细胞生物学发展简史；细胞的基本概念；原核细胞与古核细胞；真核细胞；非细胞形态的生命体－病毒与细胞的关系；细胞形态结构的观察方法；细胞组分的分析方法；细胞培养、细胞工程与显微操作技术。 考试要求： 1、了解细胞生物学研究的内容、现状及发展。 2、掌握细胞的基本概念、基本共性及理解细胞是生命活动的基本单位；掌握病毒的基 本分类及特征，理解病毒及其与细胞的关系；掌握真核细胞、原核细胞的结构
特征及进化上的关系；细胞生命活动的基本含义。 3、了解和掌握细胞生物学研究领域所使用的实验技术的基本原理和应用；理解细胞组 分的分析方法；掌握细胞培养类型和方法及细胞工程的主要成就。 （二）细胞膜及细胞的内膜系统及各细胞器 考试内容： 细胞质膜的结构模型；生物膜基本特征与功能；细胞骨架；膜转运蛋白与物质的跨膜运输；离子泵和协同转运；胞吞与胞吐作用。细胞质基质的涵义与功能；细胞内膜系统及其功能；细胞内蛋白质的分选与膜泡运输；线粒体与氧化磷酸化；叶绿体与光合作用；线粒体和叶绿体是半自主性细胞器；线粒体和叶绿体的增殖与起源；微丝与细胞运动；微管及其功能；中间丝；核被膜与核孔复合体；染色质；染色质结构与基因活化；染色体；核仁；核糖体的类型与结构；多聚核糖体与蛋白质的合成。 考试要求： 1、了解生物膜的结构模型、组成与功能等基本知识。 2、掌握物质的跨膜运输的方式、特点、作用机理及生物学意义。 3、掌握细胞质基质的涵义、功能及细胞质基质与胞质溶胶概念；掌握内质网的基本类型、 功能及与基因表达的调控的关系；掌握高尔基复合体的形态结构和高尔基体的极性特征、膜泡运输的分子机制高尔基体的功能以及它和内质网在功能上关系、高尔基体与细胞内的膜泡运输及内膜系统在结构、功能上的相互关系；掌握溶酶体与过氧化物酶体的差异以及后者的功能发生；了解细胞内蛋白质的分选与细胞结构的装配。 4、掌握真核细胞内两种重要的产能细胞器——线粒体和叶绿体的基本结构特征与功能机 制。 5、掌握各种细胞骨架的动态结构和功能特征。 6、掌握细胞核的结构组成及其生理功能；掌握染色质、染色体的关系及中期染色体的形态 结构和染色体DNA的三种功能元件；了解核仁的功能与周期；了解染色质的结构和基因转录。 7、掌握核糖体的结构特征和功能，蛋白质的生物合成和多聚核糖体的概念。 （三）基因表达及调控
(完整版)细胞生物学实验测试题
细胞生物学实验测试题 1、试述荧光显微镜的原理和用途。（并操作） 原理：荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 （滤光镜片：获得所需波长的激发光；光源：高压汞灯） 用途：荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光； 另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研 究的工具之一。 2、试述酸性磷酸酶显示法的原理及主要步骤。 原理：酸性磷酸酶（ACP）是溶酶体的标志酶，通常酸性磷酸酶在pH 为5左右时发挥作用能水解磷酸酯而释放出磷酸基，PO43-与底物中硝酸 铅反应生成磷酸铅沉淀物。由于这些沉淀物是无色的，需再与黄色的硫化 铵反应，生成棕黄色到棕黑色的硫化铅沉淀而被显示出来。其反应过程如 下： β-甘油磷酸钠+酸性磷酸酶→甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色) 主要步骤： 1、前处理：获取小白鼠或大白兔腹腔液（猪肝） 2、制片： （1）、将腹腔液（肝细胞悬液）滴一滴于冰冻的干净载玻片上，用牙签涂开，自然干燥。 （2）、放入10%中性福尔马林固定液中固定30min。 （3）、蒸馏水中漂洗,3-5次。（洗去固定液） （4）、磷酸酶作用液，37°C，30Min。 （5）、蒸馏水中漂洗3次，5min一次。（洗去游离铅离子） （6）、1%硫化铵处理（3-5min）; （7）、吉姆沙染液复染15min;（使细胞核、轮廓显示出来） （8）、制片观察。 结果：阳性细胞内有大小不等的棕色或棕黑色的颗粒即为酸性磷酸酶。 对照实验：标本放入作用液前先用高温（50℃）处理 30min，使酶失去活 性，做好标记，其他步骤相同。 3、试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 原理：DNA经稀盐酸（1mol/L HCL溶液）处理后，可使嘌呤碱与脱氧
细胞生物学实验期末考试试题答案
。 细胞生物学实验试题参考答案及评分标准 一、填空题（本题共 22 空，每空 1 分，共22分） 1．分辨率；放大倍数，镜口率（数值孔径）。 2．激活巨噬细胞（数量增加、吞噬活性增强），台盼兰作为指示剂。 3．差速、密度梯度；细胞核，叶绿体。 4．中性红；核仁。 5．柠檬酸钠。 6．网格（笼形）蛋白；微丝。 7．SDS；Triton X-100；微粒体。 8．PEG；粉末。 9．0.9％。10．接触抑制。 11．戊二醛；甲醇：冰醋酸（3：1）。 二、判断改错题（本题共8小题,每小题2分，其中判断0.5分，改错1.5分，共16分）1．×也可能会 2．×微管 3．×整合蛋白 4．×不同物种的细胞 5．√ 6．×光学显微镜 7．×微丝 8．×浓度偏低 三、简答题（本题共_5_小题，共46分） 1．移动载物台，动则在玻片上（2分）；转动目镜镜头，动则在目镜上（2分）；否则在物镜上（2分）。（本题共6分） 2．含红细胞的吞噬泡与巨噬细胞内的初级溶酶体融合，进行消化；（8分） 3．一种糖蛋白（2分）；内质网合成、糖基化，高尔基体内进一步加工、分选，以分泌泡形式与膜融合，胞吐（8分）；它能与鸡红细胞膜表面的糖链专一性结合（2分）（本题共12分） 4．⑴ Giemsa染色前，细胞须固定（染死细胞），主要染的是核、染色质（5分）；⑵ Janas Green B 染的是活细胞（染色前不用固定），主要染的是线粒体（5分）。（本题10分） 5．⑴测量溶血时间（2分）；⑵主要取决于分子的大小和极性（4分）；小分子比大分子容易穿膜，非极性分子比极性分子易穿膜，而带电荷的离子跨膜运动则通常需要转运蛋白的协助（4分）。（本题共10分）四、论述题（本题共_1_小题,每小题 16 分，共 16 分） （0401、0402班同学请回答）答：外周血培养（2分）－秋水仙素处理（2分）－离心收集细胞（2分）－低渗处理（2分）－固定（2分）－制片（2分）－染色（2分）－镜检及显微摄影－核型分析（2分）（原理略）（本题共16分） （0403班同学请回答）答：外周血培养（2分）－秋水仙素处理（2分）－离心收集细胞（2分）－低渗处理（2分）－固定（2分）－制片－老化（2分）－显带处理－染色（2分）－镜检及显微摄影－带型分析（2分）（原理略）（本题共16分）
细胞生物学考试及研究生考试题库
一、细胞生物学题库 1、组织培养：使离体细胞在实验室人工模拟机体内的条件下生长发育、分裂增殖的一项重要的细胞生物学研究技术。 2、膜相结构：指真核细胞中以生物为基础的所有结构，包括细胞膜和细胞内的所有膜性细胞器。如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、核膜等。 3、单克隆抗体：由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。 4、细胞株：具有有限分裂潜能适合于进行培养，并在培养过程中保持其特性和标志的细胞群。其分裂次数通常为25～50次，最后死亡。 5、细胞识别：指细胞与细胞之间通过细胞表面的信息分子相互作用，从而引起细胞反应的现象。 6、奢侈基因：即组织特异性表达基因，指特定类型细胞中为其执行特定功能蛋白质编码的基因。 7、G蛋白：具有GTP酶活性，在细胞信号通路中起信号转换器或分子开关作用的蛋白质。有三聚体G蛋白、低分子量的单体小G蛋白和高分子量的其他G蛋白三类。 8、G蛋白偶联受体：一种与三聚体G蛋白偶联的细胞表面受体。含有7个穿膜区，是迄今发现的最大的受体超家族，其成员有1000多个。与配体结合后通过激活所偶联的G蛋白，启动不同的信号转导通路并导致各种生物效应。 9、细胞系：原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。 10、细胞通讯：指一个细胞发出的信息通过介质（配体）传递到另一个细胞并与靶细胞相应的受体相互作用，然后通过细胞信号转导产生胞内一系列生理生化反应，最终表现为细胞整体的生物学效应的过程，是多细胞生物必需的。 11、第一信使：由细胞产生，可被细胞表面或胞内受体接受、穿膜转导，产生特定的胞内信号的细胞外信使。如激素、神经递质等。 12、Hayflick界限：即细胞最大分裂次数。细胞增殖次数与端粒DNA长度有关。DNA 复制一次端粒DNA就缩短一段，当缩短到Hayflick点时，细胞停止复制，走向衰亡。 13、细胞决定:细胞分化具有严格的方向性，细胞在未出现分化细胞的特征之前，分化的方向就已经由细胞内部的变化及受周围环境的影响而决定的现象。 14、信号肽：是由mRNA上特定的信号顺序首先编码合成的一段短肽，含15-30个氨基酸残基，它作为与粗面内质网膜结合的“引导者”指引核糖体与糙面内质网膜结合，并决定新生肽链插入膜内或进入内腔。
细胞生物学实验课自我测试题
细胞生物学实验课自我测试题 1、显微镜的光学系统主要有哪部分些构成 2、拿到一张固定装片，为了很快找到需要找到的物像，首先应该做什么 3、为避免显微镜的灯泡烧坏，应注意什么 4、在低倍镜下找到物像后，为了看得更仔细，向高倍镜转换过程中需要调整粗调节螺旋 吗为什么 5、如何搬动显微镜 6、推血涂片时，要一次成功。即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重 新开始。为什么 7、使用染色缸时，为避免拿出玻片时找不到涂有细胞的一面，应注意什么 8、如何知道试管中的红细胞溶血了 9、抓取小鼠注射的正确方法是怎样的 10、取蛙血时，从胸腔最先看到的一般是哪个器官如何快速找到心脏 11、细胞生物学实验要求学生掌握的最重要的技能是什么 12、鸡的红细胞和小鼠的巨噬细胞相比，哪个体积大 13、细胞处于高渗或低渗溶液中，如何判断水的运动方向 14、可自由扩散的脂溶性小分子对细胞的影响如何 15、显微镜下口腔粘膜细胞的线粒体的形状是什么样的 16、在细胞吞噬活动观察的实验中，如何在显微镜下快速找到巨噬细胞 17、推蛙血涂片时应注意什么 18、为什么要用派洛宁和甲基绿染的混合染液染色RNA和DNA 19、派洛宁和甲基绿染的混合染液染色细胞，细胞核和细胞质的颜色分别是什么颜色为什 么 20、使用显微镜观察标本时，为什么必须按照从低倍镜到高倍镜，再到油镜的顺序进行 21、使用显微镜时，为什么要先将10倍物镜与标本表面的距离调节到6mm之内 22、如果标本片放反了，可用高倍镜或油镜找到标本吗为什么 23、怎样才能准确而迅速地在高倍镜或油镜下找到目标 24、如果细调焦螺旋已转至极限而物像仍不清晰时，应该怎么办 25、如何判断视野中所见到的污点是在目镜上 26、在对低倍镜进行准焦时，如果视野中出现了随标本片移动而移动的颗粒或斑纹，是否
细胞生物学实验
实验室规则和要求 一般规定 1.上课第一天请先熟悉环境，牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。 2.在实验室内请穿著实验衣（最好长及膝盖下），避免穿著凉鞋、拖鞋（脚 趾不要裸露）。留有长发者，需以橡皮圈束于后，以防止引火危险或污染实验。 3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食 物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外 套及杂物等。 4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得携出实验室外。每 组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管，课程结束后如数 清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后，请把工作区域清理擦 拭，并随时保持环境清洁。 5.实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作，注意上课所告知的 注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实 验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，适切记下 自己的结果，严禁抄袭，确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。 6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。 实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验 室。 7.实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气，离开实验 室前记得洗手。 8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员，并应熟知相关之应变 措施。
药品 1.使用任何药品，请先看清楚标示说明、注意事项，翻阅物质安全资料， 查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。 2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期，为避免 污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。 3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、 -巯基乙醇、甲醛、酚等）要在排烟柜中戴手套量取配制，取用完应随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。 4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺（神经毒）、溴化乙啶（突变剂）、SDS（粉 尘）请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，养成洗手的好 习惯。 5.使用后的实验试剂和材料，应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂 糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。 6.使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或吸耳球。 仪器 1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸， 勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。 2.使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，离心机未停下不得打开 盖子。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。 3.电源供应器有高电压，切勿触摸电极或电泳槽内溶液，手湿切勿开启电 源。
细胞生物学实验复习题
细胞生物学实验复习题（动物部分） 1.细胞生物学实验绘图有哪些要求？ 2.细胞中的酶定位有哪些方法？酸性磷酸酶定位的原理是什么？ 3.试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 4.叙述“细胞膜的渗透性”实验的原理、主要步骤和应注意的问题。 5、细胞膜的通透性观察实验中溶血的原因是什么？NaCl溶液和葡萄糖溶 液为什么不能产生溶血？ 6、推血涂片时，要一次成功，即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重 新开始，为什么？ 7、如何知道试管中的红细胞溶血了？ 8、动物细胞和植物细胞相比，有哪些重要区别？ 9、骨髓细胞染色体标本制备过程中，为了保证得到较理想的实验结果，哪些因素是你认为 最重要的？ 10、你所完成的动物细胞试验共观察到几种动物细胞？根据你观察的结果，哪种细胞体积 或者直径最大？哪个最小？判断依据是什么？ 11、细胞核、细胞质、线粒体、染色体、细胞骨架、酶、细胞中的DNA都分别用什么方法 可以得到，用什么方法可以观察到？ 12、利用PEG介导的动物细胞融合，实验原理是什么？ 细胞生物学实验复习题（植物部分） 1. 倒置显微镜的特点及其用途如何？ 2. 相差显微镜与普通光镜相比有哪些特殊结构？ 3. 试述荧光显微镜的原理和用途。 4. 固定液的作用是什么？说出我们实验中所用过的几种不同的固定
液及它们的实用范围。 5. 常用的组织破碎方法有哪些？各自的适用范围如何？ 6. 什么是差速离心法、密度梯度离心法？各自的用途如何？ 7. 染色法有哪些方式？各如何进行？ 8. 显示染色体的实验，其材料往往要作什么预处理？取材部位如何选择？ 9. 如何进行细胞核的分离和鉴定？叙述细胞核的结构与功能。 10. 试述用考马斯亮蓝R250来显示细胞微丝骨架的原理及其应注意的事项。 11. 如何证明不同分化状态的组织细胞主要是由于基因的选择性表达而不是由于基因的丢失所造成的？ 12. 如何进行线粒体的分离和鉴定（并说明原理）？ 13. 在分离出线粒体后，若要对其进行深入研究，技术路线如何？ 14. 在使用高速离心机时，要注意那些问题？ 15. 试述叶绿体的分离和荧光观察的过程。在分离叶绿体时，如果发现分离出来的叶绿体很小，如何验证其是不是由于分离时所造成的叶绿体破碎的结果？
细胞生物学试验指导
细胞生物学实验指导 细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步,所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。 实验一普通显微镜及其使用（装片观察） 一、目的要求： 1、掌握显微镜的构造、油浸系的原理、使用方法、保护要点。 2、参观了解其他各类显微镜。 二、材料：普通光学显微镜及其他显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸。 三、方法和步骤： 1、介绍普通光学显微镜的构造 机械部分：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、调焦螺旋。 光学部分：接目镜、物镜、反光镜、聚光器。 2、油镜的原理及使用方法 原理：油镜头的晶片细小，进入镜中的光线亦少，光线经聚光器，通过载玻片进油镜时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射而损失，使视野更暗。在载玻片和油镜之间加上和玻璃折光系数相同的香柏油，光线直接进入镜头，不发生折射，视野明亮，便于观察。 3、如何维护显微镜：机械部分的维护，光学部分的维护。 4、注意事项： （1）观察油镜载片时，先在载片上有菌影的地方滴1-2滴香柏油，然后放载物台中央，眼侧面看，慢慢降低油镜浸入香柏油中，镜头几乎接触标本。再用左眼在接目镜观察，同时慢慢旋动粗螺旋提起镜筒至能模糊看到物象时，再转动微调螺旋，直至看清晰为止。注意镜头离开油，就不能看清，重新按刚才的步骤进行。 （2）油镜使用过后，立即用擦镜纸擦拭镜头，如油渍已干，则可用香柏油粘二甲苯擦拭镜
头，再用干净擦镜纸擦去二甲苯。 5、观察几种细菌标本片。 6、示教看相差显微镜和荧光显微镜。 四、作业及思考题： 1、油镜的原理是什么？ 2、光线强弱如何调节？与哪些部件有关？ 实验二、细胞膜的渗透性 实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 实验原理 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血，由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。 实验用品 一、器材 50ml烧杯, 试管（1～10cm）, 10ml移液管, 试管架。 二、材料 羊血。 三、试剂0.17mol/L氯化钠，0.17mol/L氯化胺，0.17mol/L醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠，0.12mol/草酸胺，0.12mol/硫酸钠，0.32mol/葡萄糖，0.32mol/甘油，0.32mol/乙醇，0.32mol/丙酮。 实验方法 一、羊血细胞悬液 取50ml小烧杯一个，加1份羊血和10份0.17mol/L氯化钠，形成一种不透 明的红色液体，此即稀释的羊血。
(完整版)分子生物学实验技术考试题库
一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。 11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的一种层析技术。)
细胞生物学实验
细胞培养基本理论 一细胞培养概述 细胞培养（cell culture）模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。 群体培养（mass culture）将大量细胞置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，形成均匀的单层细胞或单细胞悬液。 克隆培养（clone culture）即将少数的细胞加入培养瓶中，贴壁后彼此间隔距离较远，经过繁殖每一个细胞形成一个集落，称为克隆。 组织培养（tissue culture）指把活体的组织取出，分成小块，直接置于培养瓶底或通过胶原纤维血浆支持物的培养瓶底来进行培养。 特点：1.，组织不失散，细胞保持原有的组织关系。2，形成生长(cut growth)或形成由扁薄细胞构成的单层细胞培养物。3，在体外生长时，细胞间呈相互依存、互相影响的关系。 器官培养（organ culture）将活体中器官或器官一部分取出，在体外生长、生存，并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养。 特点：1，培养的器官在合适的条件下能生长和分化，存活数周或1 年。2，观察受限，只能用组织切片的方法观察或用透射电镜、扫描电镜观察。 细胞培养优点：.1．活细胞：同时、大量、均一性、重复性；2．可控制：各种物理、化学、生物等因素可调控；3．研究方法多样：倒置、荧光、电子、激光共焦显微镜、流式细胞术、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记；4．应用广：不同物种、年龄、组织，正常或异常缺点：人工所模拟的条件与体内实际情况仍不完全相同；当细胞被置于体外培养后， 生活在缺乏动态平衡的环境中，时间久了，必然发生变化。 三细胞的形态和类型由不同生长方式造成的差异 呈悬浮生长时，因生长在液体环境中，胞内渗透压高于周围液体环境，因此胞体基本呈圆形。呈贴附于支持物上生长的细胞，开始为圆形，很快过渡成扁平形，并逐渐恢复至原先的细胞形态. 细胞来源：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型 细胞按生长方式：贴壁型细胞（Monolayer cells）；悬浮型细胞（Suspension cells）绝大多数有机体细胞属贴壁型细胞，只有少数细胞类型如某些肿瘤细胞和白细胞可在悬浮状态下生长。 按细胞形态(贴壁细胞）：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型 贴壁型生长细胞或锚着依存性细胞 处于体外培养状态下的贴附生长型细胞在形态上表现单一而失去了在体内原有的某些特征。形态各异反映其胚层起源。如来源于内外胚层的细胞多呈上皮型；来自中胚层的则易呈成纤维细胞型。分为成纤维型细胞；皮型细胞；游走型细胞；多形型细胞 贴壁型细胞形态比较 成纤维型细胞：梭形或不规则三角形；中央有卵圆形核；胞质向外伸出长短不同的突起；中胚层间质起源 上皮型细胞：扁平不规则多角形；细胞中央有圆形核；紧密相连单层膜样生长；内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等 游走型细胞：散在生长，一般不连成片；细胞质经常伸出伪足或突起；活跃的游走或变形运动；羊水细胞培养的早期 多形细胞型：难以确定规律和稳定的形态；如神经组织的细胞等
细胞生物学实验教案大全
细胞生物学实验教案 【经典学习资料，收藏必备】
实验一、细胞形态结构与几种细胞器的观察 【实验目的】 在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构，掌握生物绘图的方法。 【实验原理】 细胞在形态上是多种多样的，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点，都由细胞膜（动物）、细胞壁（植物）、细胞质和细胞核组成。细胞中的各种细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等，一般经过一定固定染色处理后，大多数在光学显微镜下是可以看见的（图）。细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。 （自拍图） （a）（b） （c）（d） 图 1 细胞形态结构 a. 柿胚乳细胞示胞间连丝； b. 马蛔虫受精卵分裂中期示中心粒； c. 兔的神经细胞中高尔基体； d.小鼠肝细胞线粒体 【实验仪器、材料和试剂】 1. 仪器：复式显微镜、擦镜纸 2．材料：洋葱根尖切片、小白鼠肝切片、兔神经节切片、马蛔虫受精卵切片3．香柏油或石蜡油、二甲苯 【方法与步骤】
一、洋葱根尖切片细胞的观察 先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，然后再仔细观察细胞的形态结构，特别注意细胞的形状、大小，以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。 二、兔神经节细胞切片高尔基体的观察 先在低倍镜下找到兔神经节细胞，然后转用高倍镜观察，可看到细胞内淡黄色的背景上有黄褐色的细胞核，核的周围分布着许多深褐色的（硝酸银镀染）高尔基体，呈弯曲的线状，颗粒状，少量分散在细胞质。 三、小白鼠肝细胞切片线粒体的观察 先用低倍镜后用高倍镜观察，可见到许多肝小叶，每小叶有许多紧密排列成索状的多角形的肝细胞，细胞中央有大而圆的细胞核。这时，转用油镜观察，可见到细胞质内分布着许多被苏木精染成深紫色的线粒体，呈颗粒状和线状。 四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察 1．取马蛔虫受精卵切片，在显微镜下找到充满子宫腔的受精卵，每个马蛔虫受精卵外围有一层较厚的卵膜，膜内有宽大的围卵腔，各围卵腔内有处在不同分裂期的卵细胞。找到分裂中期的细胞，在细胞中央被染成蓝色条状或棒状的结构，这就是染色体。在染色体两侧可见各有一个较小的，亦被染成蓝色的小粒，称中心粒。在中心粒的周围可见呈放射状的星丝。 实验一、细胞的显微测量 【实验目的】 掌握显微测微计的基本原理及使用方法。 【实验原理】 细胞长度、面积、体积的测量是研究正常的或病理组织细胞的基本方法之一。在显微镜下用来测量细胞长度的工具叫显微测量计，由目镜测微尺（ocular micrometer）和镜台测微尺（stage micrometer）组成，两尺要配合使用。目镜测微尺是放在目镜内的一直径为2cm圆形玻片上，里面有100等分格的刻度尺。每一小格表示的实际长度随不同的显微镜、不同放大倍数的物镜而不同。镜台测微尺是一块特制的载玻片，在它的中央由一片圆形盖片封固着一具有精细刻度的标尺，标尺全长为lmm，分为100等份的小格，每小格的长度为0.01 mm（10μm），标尺的外围有一小黑环，便于找到标尺的位置。显微测量时，先用镜台测微尺标定目镜测微尺每小格所表示的实际长度。在测量细胞时，移去镜台测微尺，换上被测标本，用目镜测微尺即可测得观察标本的实际长度。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、解剖剪、解剖镊、注射器、载玻片、盖玻片、试管、无菌采血针 （二）材料：血涂片 （三）试剂：生理盐水、瑞氏（Wright）染色液 【方法与步骤】
最新细胞生物学实验习题
细胞生物学实验习题 实验一利用各种显微镜观察细胞形态、结构 1.简述显微镜的主要结构和操作要领。 2.分析在使用低倍镜、高倍镜和油镜时，对光亮度的要求。 3.分析聚光镜在成像质量中的作用。 实验二显微摄影 1.要想得到一张完美的显微摄影照片，应注意哪些方面的问题，主要关键是什 么？ 2.结合数码互动显微镜摄影操作，写出操作工程、拍摄关键点以及注意事项。 实验三细胞的亚显微结构观察 1.比较光镜与电镜工作原理的区别。 2.分析扫描电镜与透射电镜的主要异同点。 实验四细胞膜的渗透性 1.讨论溶血实验在研究中应用的可能性。 实验五动物细胞培养及其生长特性的观察分析 1.哪些物品适合于高压灭菌，并说明理由。 2.紫外线消毒的适用范围和目的是什么？ 3.血清在细胞培养中有何作用？ 4.为什么配制培养基之前要反复处理配制用水并要事先高压处理？ 5.配制培养基时调节pH值的目的是什么？ 6.细胞传代培养的目的是什么？ 7.贴壁细胞和悬浮细胞传代方法上有什么不同？ 8.如何防止传代过程中不被微生物污染？ 9.悬浮细胞和贴壁细胞在计数时有何不同？
10.讨论细胞存活率在研究中的应用和意义。 实验六细胞器的分离与观察 1. 线粒体提取分离过程中，为什么要在0～4℃进行？ 2. 将线粒体沉淀作一涂片，用姬姆萨染色，检查是否混杂细胞核和胞质碎片，估计分离所得线粒体的纯度。要获得高活性的线粒体，在线粒体提取、分离和活性鉴定的过程中需注意哪些问题？根据你的实际体会，写出操作注意事项及改进方法。 3. 分离介质0.25mol/L 及0.34mol/L 缓冲蔗糖溶液哪一种在下层? 有什么作用? 实验七细胞骨架的观察 1.微丝观察实验中，1% Triton X -100 处理细胞的作用是什么？ 2.微丝观察实验（考马斯亮蓝R 250 染色法观察微丝）中，是否能看到微管、 中间纤维？为什么？ 3.M –缓冲液的作用是什么？ 4.说明细胞中由微丝组成的结构及其功能。 实验八细胞凋亡的诱导和细胞凋亡的形态特征的观察 1.总结凋亡细胞的形态特征。 2.试述本实验鉴别凋亡细胞、坏死细胞核正常细胞的原理。 3.试述凋亡细胞的生化特征。
细胞生物学实验步骤
冻存细胞的复苏 1、于液氮罐中取出冻存管。 2、37℃水浴锅中摇动，使之快速融化。 3、超净台内酒精棉球擦拭，打开冻存管，吸出细胞悬液，注入离心管中，再滴加2倍培养液，混匀。 4、离心：1500转/分，3分钟，弃上清。 5、吸取2-3ml培养液加入到离心管中，吹打制悬，接种到培养瓶中，37℃培养。 组织块法培养骨骼肌细胞 1、将新生大鼠处死，再用酒精棉球擦拭其全身消毒，带入超净台内于肩关节和髋关节处剪取四肢（去爪），置培养皿中。 2、PBS液中，清理血污，剥去皮肤。 3、用PBS液洗涤两次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。 4、用将肌组织从骨骼上剪切下来，PBS液清洗后转移至干净培养皿中。 5、加少量培养液，将组织剪成1mm3小块，用吸管将其转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃培养箱静置0.5-1小时，轻轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。 贴壁细胞的传代和冻存 1、超净台中打开细胞培养瓶，用吸管将培养液吸出。 2、加入PBS液，使其覆盖培养瓶底部，轻轻摇动后倒掉。 3、加入消化液，以覆盖整个培养瓶底部，盖好瓶盖，于倒置显微镜下观察，待 见到细胞质回缩、细胞间隙增大后于超净台内倒掉消化液。 4、加培养液终止消化。 5、用吸管吸取培养瓶中的培养液，反复吹打瓶壁，制备细胞悬液。 6、将细胞悬液吸入离心管中，离心1500转/分，3分钟，倒掉上清。 7、加入3ml培养液于离心管中，吹打制悬。 8、取2ml细胞悬液进行接种后，剩余细胞悬液继续离心1500转/分，3分钟。 9、去上清，加入1ml冻存液，制悬，转移到冻存管，再按照-4℃1小时→-20℃ 2小时→-80℃2小时→液氮的顺序进行冻存。 细胞计数
细胞生物学实验汇总
细胞生物学实验汇总
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实验一、二：细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察 【基本原理】 细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。可选择性地让某些物质进出细胞，各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，以至于在高渗环境中，动物细胞会失水而收缩；在低渗环境中，动物细胞会吸水膨胀直至破裂。 本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差很大，有些溶质甚至不能透入细胞。当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高，水分子随即进入细胞，使细胞膨胀，当膨胀到一定程度时，红细胞膜会发生破裂，血红素溢出，此时，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为红细胞溶血。由于各种溶质进入细胞的速度不同，所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同，相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。 【方法步骤】 1．制备土豆凝集素液和红细胞悬浮液，制备无血清的鸡红细胞悬液，使凝集素液和红细胞悬液混合，静置后，在光镜（低倍）下观察凝集素使红细胞凝集的现象。（以PBS 缓冲液加2％血细胞作对照实验）[土豆凝集素的制备：称取土豆去皮块茎2g , 加10 mL PBS 缓冲液，浸泡2h（浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素） , 载玻片上滴一滴土豆凝集素,再滴一滴2％红细胞液,充分混匀静置20 min , 低倍显微镜下观察血球凝集现象。] 2．观察10%的鸡红细胞悬液，可见该悬液为一种不透明的红色液体 3．观察溶血现象取一支试管，再加入4ml 蒸馏水，加入0.4ml 鸡红细胞悬液，混匀后注意观察溶液颜色的变化，可见溶液由不透明的红色变成透明的红色液体（可将试管贴靠在书上，隔着试管看书中的字，如发现溶血则文字可被看清）。 4．观察鸡红细胞对不同物质的通透性 （1）取一支试管，和0.17M 的Nacl 溶液4ml，加入0.4ml 鸡红细胞悬液，轻轻摇匀，用上述方法观察是否出现溶血现象，如出现溶血，记下发生溶血所需要的时间（从加入4ml 溶液算起） （2）按上述方法分别加入下列9种溶液是否导致红细胞溶血并记录实验结果。 ①0.17M 氯化铵②0.17M 硝酸钠③0.17M 硫酸钠④0.17M 醋酸胺 ⑤0.17M 草酸铵⑥0.17M 葡萄糖⑦0.17M 甘油⑧0.17M 乙醇 ⑨0.17M 丙酮 【实验结果】 1、土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，PBS 对照液中红细胞分散均匀。对照组未凝血，实验组凝血。 2、氯化钠、硝酸钠、硫酸钠溶液不溶。醋酸铵>草酸铵>氯化铵>乙醇>甘油>丙酮>葡萄糖。膜通透性大小主要取决于分子大小和分子极性。小分子比大分子容易通过，非极性比极性易通过，带电荷离子高度不透。