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氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管在血糖中的应用评价

氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管在血糖中的应用评价
氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管在血糖中的应用评价

氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管在血糖中的应用评价

血糖检测在工作中越来越受到临床医生的重视,真空采血管但在实际操作过程中,不管是住院患者、门诊患者或是体检者,血糖离体后如果没有及时送检,血细胞仍会进行糖酵解而引起血糖偏低,尤其是新生儿和白血病患者下降速度更快,从而不能准确反映受检者的情况。本文对健康体检者分别以氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管采集静脉血,连续测定即时及24、48、72、96、120、144h的血糖浓度,了解其保存标本血糖浓度的稳定性,现报道如下。1资料与方法

1.1一般资料

健康体检者75例,其中男29例,女46例;年龄为19~48岁,平均年龄31岁;每人分别抽取氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管各1支。标本采集后室温3000r/min离心10min,1h内完成即时血糖测定,检测完成后原管保留标本置4℃冰箱保存。

1.2采血管来源氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管由广州阳普医疗有限公司提供,批号分别为110707与120216,有效期2年。氟化钠抗凝管由氟化钠与EDTA-K2组成,浓度分别为3.5%与3%;分离胶真空采血管内含促凝剂。

1.3仪器与试剂测定仪器为日立7180,采用已糖激酶法测定,试剂由上海丰汇医学科技有限公司提供,批号为110667;质控品由美国伯乐公司提供,水平1批号为14191,水平2批号为14192。

1.4统计学处理检测数据用SPSS17.0统计软件进行t检验,同时对即时与144h的血糖浓度进行比较,显著性检验水准为α=0.05。

2结果

2.1不同时间段血糖检测结果连续检测即时及24、48、72、96、120、144h氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管中血糖结果见表1,配对t检验显示2种采血管之间结果差异无统计学意义(P>0.05);同时分别对2种采血管即时血糖结果与144h结果进行

2.22种采血管血糖测定的稳定性用氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管检测后原管保留标本,密封置4℃冰箱保存,在144h内血糖的结果并没有随时间延长出现明显变化,见图1。3讨论

血糖作为反映糖代谢紊乱的重要指标,其结果准确性直接影响到患者的诊断与治疗,一般对离体血糖进行立即检测才能较准确地反映个体情况。有资料显示,全血标本在普通真空管中放置1h,葡萄糖浓度可大约降低5%,而当天血糖浓度平均下降达到18%。因此,对离体血液标本血糖必须进行有效地保护。分离胶真空采血管是一种含有惰性的触变性聚合胶的采血管,分离胶的比重介于血清与血细胞之间,标本离心后可在血清与血细胞之间形成屏障隔离层,使细胞与血清完全隔离,保证血清化学成分不受细胞成分的影响。氟化钠是一种较理想的抗糖酵解剂,其主要作用是抑制参与糖酵解的酶的活性,通过阻断烯醇化酶作用而抑制糖酵解。在日常工作中,保存标本时间一般为7d。为了解血糖在氟化钠抗凝管与分离胶真

空采血管中保存的稳定性,连续监测了氟化钠抗凝管与分离胶真空采血管即时及24、48、72、96、120、144h的血糖浓度,结果显示两种采血管之间差异无统计学意义(P>0.05);同时分别对两种采血管即时与144h血糖浓度进行比较,结果显示二者差异无统计学意义(P>0.05),用这两种采血管对血糖进行保存并没有随着时间的延长而出

现明显变化,对保持血糖浓度的稳定起到了良好的作用。曾有报道分离胶真空采血管中血糖在96h无明显下降,本次实验表明在144h内,无论是氟化钠抗凝管还是分离胶真空采血管,其血糖浓度都无明显变化,表明这两种采血管能在日常标本保存期内保持血糖浓度的稳定。氟化钠抗凝管一般采用与草酸钾或EDTA-K2联合使用,本次实验采用氟化钠与EDTA-K2抗凝管。采集标本后直接摇匀,就能达到抑制糖酵解的效果,但因其通过抑制烯醇化酶来阻断糖酵解,对部分酶类检测项目有抑制作用,如淀粉酶、氨基转移酶、磷酸酶等,对酶法测定胆固醇和脲酶法测尿素氮也有干扰,同时随着放置延长血清钾离子显著升高。分离胶真空采血管分离的标本分3层,从上至下依次为血清层、分离胶层和血细胞层,使血清与血细胞完全隔离,从而使血糖浓度稳定。分离胶采血管不仅可保持血糖浓度稳定,而且对临床化学的其他检测项目和疫学检测项目均无影响,具有比氟化钠抗凝管更大的优势。

综上所述,氟化抗凝管与分离胶真空采血管利用不同原理均可保持保存标本的血糖浓度稳定性,且二者保存标本检测结果差异无统计学意义。但由于临床实际操作中经常并非单一检测血糖浓度,而是联合检测多个项目,这让分离胶真空采血管在日常工作中有了更大的应用空间。

各种真空采血管的使用及注意事项

真空采血管的分类、添加剂原理及作用真空采血装置具有采血量准确、安全性能好、分离血清/血浆效果好、操作使用方便及可一针采多管血样等特点,是临床上替代一次性注射器进行采集血 标本的最佳选择。真空采血器由真空采血管、采血针组成。真空采血管是其主要组成部分,主要用于血液的采集和保存,在生产过程上预置了一定量的负压,当采血针穿刺进入血管后,由于采血管内的负压作用,血液自动流入采血管内;同时采血管内预置了各种添加剂,完全能够满足临床的多项综合的血液检测,安全、封闭、转运方便,现在厂家生产的各种采血管利用不同颜色的头盖加以区分。 真空采血管一般分为以下几种: 1.红色头盖管(无添加剂的干燥真空管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。 2.橘红色头盖管(促凝管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白多聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果时,可采用促凝管,一般5分钟内可使采集的血液凝固。一般用于急诊生化。 3.金黄色头盖管(含有惰性分离胶及促凝剂的采血管):管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有分离胶,分离胶管具有很好的亲和性,起到隔离作用,一般即使在普通离心机上,分离胶能将血液中的液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分开并积聚在试管中形成屏障。离心后血清中不产生油滴,因此不会堵塞机器。主要用于血清生化(肝功、

SDS-PAGE分离胶配方表-及其原理

SDS-PAGE电泳原理: 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N,N’—亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂作用下,聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带,如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质,蛋白质样品电泳后,就应只分离出一条区带。 SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移率,不再受原有电荷和分子形状的影响,而只是棒长的函数。这种电泳方法称为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS—PAGE)。由于SDS-PAGE 可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE 后,就只出现一条蛋白质区带。 TEMED:通过催化过硫酸铵形成自由基而加速丙烯酰胺与双丙烯酰胺的聚合。 过硫酸铵(AP):提供驱动丙烯酰胺与双丙烯酰胺所必须的自由基。 SDS—PAGE 可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系统。本实验采用垂直板状不连续系统。所谓“不连续”是指电泳体系由两种或两种以上的缓冲液、pH 和凝胶孔径等所组成。 1.蛋白样品浓缩效应 在不连续电泳系统中,含有上、下槽缓冲液(Tris—Gly,、浓缩胶缓冲液(Tris—HCl,、分离胶缓冲液(Tris—HCl,,两种凝胶的浓度(即孔径)也不相同。在这种条件下,缓冲系统中的HCl 几乎全部解离成Cl-,两槽中的Gly (pI=,pK a=只有很少部分解离成Gly 的负离子,而酸性蛋白质也可解离出负离子。这些离子在电泳时都向正极移动。C1—速度最快(先导离子),其次为蛋白质,Gly 负离子最慢(尾随离子)。由于C1—很快超过蛋白离子,因此在其后面形成一个电导较低、电位梯度较陡的区域,该区电位梯度最高,这是在电泳过程中形成的电位梯度的不连续性,导致蛋白质和Gly 离子加快移动,结果使蛋白质在进入分离胶之前,快、慢离子之间浓缩成一薄层,有利于提高电泳的分辨率。 2.分子筛效应 蛋白质离子进入分离胶后,条件有很大变化。由于其pH 升高(电泳进行时常超过,使Gly 解 离成负离子的效应增加;同时因凝胶的浓度升高,蛋白质的泳动受到影响,迁移率急剧下降。此两项变化,使Gly 的移动超过蛋白质,上述的高电压梯度不复存在,蛋白质便在一个较均一的pH 和电压梯度环境中,按其分子的大小移动。分离胶的孔径有一定的大小,对不同相对分子质量的蛋白质来说,通过时受到的阻滞程度不同,即使净电荷相等的颗粒,也会由于这种分子筛的效应,把不同大小的蛋白质相互分开。 SDS-PAGE电泳胶配制:

血清分离胶介绍技术特征详解 [兼容模式]

血清分离胶技术特征详解解清分离胶技术特征详 成都众睿达科技有限公司王德永

血清分离胶 血清分离胶应用于真空采血管中,是用于临床血清或血浆检验样本制备时隔离血凝块与血清,或者隔离血细胞与血浆,使离心分离后的样本保持稳定,便于样本保存并确保检查结果的准确性。

? 血清分离胶应具有的特点血清样本表面无油珠,无析出物。长期使用不会堵塞吸样针;无爬杆(蹿胶)。分离胶加胶完成,静止小时(或℃烘烤小时)后无爬杆现象; 惰性。最大程度地减小对检测结果的干扰。性能稳定。老化和实时实验均应表明,年内存放稳定,不会影响分离效果。优良的耐辐照灭菌性。可以耐受的辐照灭菌。分离效果好,离心力适中,易于离心。最小离心力不大于,离心时间只需要分钟,无需二次离心。 运输储存过程中低于℃时不会发生倒流。高性价比。进口分离胶的效果,接近国产分离胶的价格。血清分离胶 l l l l l l l l 724524225kGy 1300g 555

血清分离胶 技术特征详解密度离心力与离心时间分隔效果堵针与油珠爬杆(蹿胶)稳定性耐辐射性检测结果可靠性高温储运时防倒流? l l l l l l l l l

血清分离胶 技术特征详解 密度 ±℃ 介于血清和血凝块之间。 、积水和众睿达的血清分离 胶密度均在该范围内。 。?l 1.05 0.005 25 1.02 1.08BD

血清分离胶 技术特征详解离心力与离心时间 ≥,离心时间; 推荐离心力:,离心时间不少于。市场上的离心力稍大,大概要—,。众睿达和积水的一般在—离心中即可。 注意:当选择小的离心力时,应选用较长的离心时间。 ? l 1300g 5min 1300g-2000g 5min BD 15001800g 10min 13001500g 5min

SDS-PAGE凝胶配方表

浓缩胶(5% Acrylamide) 各种组分名称1ml 2ml 3ml 4ml 5ml 6ml 8ml 10ml 双蒸水0.68 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5 6.8 30%Acrylamide 0.17 0.38 0.5 0.67 0.83 1.0 1.3 1.7 1.0M Tris-HCl(PH 6.8) 0.13 0.25 0.38 0.5 0.63 0.75 1.0 1.25 10%过硫酸铵(AP) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08 0.1 10% SDS 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08 0.1 TEMED 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.008 0.01 分离胶 (3) 10%Gel 各种组分名称5ml 10ml 15ml 20ml 25ml 30ml 40ml 50ml 双蒸水 1.8 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30%Acrylamide 1.7 3.3 7.9 6.7 8.3 10.0 13.3 16.7 1.5M Tris-HCl(PH 8.8) 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10.0 12.5 10%过硫酸铵(AP) 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 (4) 12%Gel 各种组分名称5ml 10ml 15ml 20ml 25ml 30ml 40ml 50ml 双蒸水 1.6 3.8 4.9 6,6 8.2 9.9 13.2 16.5 30%Acrylamide 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 16.0 20.0

采血管系统

谈真空采血管的相关知识 字体大小:大| 中| 小2010-12-29 07:47 阅读(474) 评论(0)分类:真空采血管在国内外的历史发展以及现状: 本世纪40年代初,真空采血技术被发明,它省略了抽拉针管和推血入试管等不必要的步骤,利用真空管中预先制造的真空自动吸血入管,很大程度上减少了溶血的可能。40年代美国BD公司率先推出商品真空型采血系统,其它医疗器械公司也先后推出自己的真空采血产品,至80年代,一种称为安全管盖(HEMOGARDTM)的全新管盖问世。安全管盖由套在真空管外的特殊塑料罩和新设计的橡胶管塞组成。二者结合在一起,减少了医疗工作者与管中内容物接触的可能,也减少了管盖拔出后内容物外溅的机会。塑料罩形成一个双井形凹陷结构,防止手指与管塞顶端及尾端残留血液的接触。这种带有安全管盖的真空采血管极大地减少了医疗工作者从采血到血样处理的全过程中沾染血样的可能,当年安全管盖荣获全美最佳工业设计大奖。真空采血系统由于其干净安全、简单可靠的特点已在世界范围内被广泛采用,并被NCCLS推荐,成为采血的标准器械。 真空采血管90年代中期开始在我国部分医院使用。目前,大多数大中城市中型以上的医院已普遍接受了真空采血方式。作为临床血液采集和检测的新方式,真空采血器是对传统采血、储血方式的一场革命。 真空采血系统主要由三部分构成:(1)双向无菌针头:一端连接真空管,另一端进行皮肤穿刺。由于双向无菌针头专为采血特别设计而成,与注射用针头不同,针尖斜面成15度,表面特殊润滑,更锋利、进针方便。一次静脉穿刺后,可以抽取单个或多个血样。(2)持针器:持针器内径13 mm。配合规格统一的采血管使用,一端连接双向针头,另一端接真空管。持针器可以重复使用. (3)真空管:真空采血管标准直径13 mm,长75 mm或100 mm,由高质量玻璃或塑料制成。虽然大小恒定,但由于管内真空度不同,可以抽取不同体积。管内含各种添加剂(抗凝剂和促凝剂等),无需自己配制、添加,减少了工序,方便、快捷;避免了自行配备添加剂的不准确,并且可以满足各种检验对血样的要求;新型PET材质的真空采血管避免了玻璃试管破损后血液外溢的不安全。 真空采血管分类和制作原理 目前医院使用的真空采血管主要有以下几个类别: 1.无添加剂的干燥空管(白头管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅酮),避免血细胞附壁,防止离心时细胞破碎,释放细胞内物质至细胞外,影响试验结果。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、

真空采血管使用及原理

真空采血管使用及原理 红色 临床用途:血清生化血库试验 所制备标本类型:血清 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀5次---静置30分---离心 添加剂:促凝剂:纤维蛋白酶 采血量(ml) :3ml 5ml 金黄色 临床用途:快速血清分离生化免疫 所制备标本类型:血清 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀5次---静置30分---离心 添加剂:惰性胶体+促凝剂 采血量(ml) :3ml 5ml 金黄色长管 临床用途:血铜,血锌 所制备标本类型:血清 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀5次---静置30分---离心 添加剂:惰性胶体+促凝剂 紫色 临床用途:血液血常规试验、血型鉴定、糖化血红蛋白 所制备标本类型:全血 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀8次--实验前混匀标本 添加剂抗凝剂:K2-EDTA 或K3-EDTA 采血量(ml): 1ml 2ml 浅兰色 临床用途:血液凝血试验 PT,TT,凝血因子试验 所制备标本类型:血浆 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀8次 --离心 添加剂抗凝剂:枸橼酸钠与血样比为1:9 采血量(ml) :1.8ml 2.7ml 黑色

临床用途:血细胞沉降率试验 所制备标本类型:全血 制备标本步骤采血后立即颠倒混匀8次 --实验前混匀标本 添加剂:抗凝剂:枸橼酸钠与血样比为1:4 采血量(ml): 1.6ml 2.4ml 灰色 临床用途:血液葡萄糖试验 所制备标本类型:血清 制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀8次---离心 添加剂:抗凝剂:氟化钠+草酸钾 采血量(ml): 2ml 紫红色 临床用途: PCR试验 所制备标本类型:血清 制备标本步骤采血后立即颠倒混匀5 次 --静置30分---离心 添加剂:抗凝剂:K2-EDTA 采血量(ml): 3ml 5ml 绿色长管 临床用途:血流变的检测 所制备标本类型:全血 添加剂:肝素钠或肝素锂 绿色 临床用途:血铅 所制备标本类型:全血 添加剂:肝素钠或肝素锂 真空采血管的分类、添加剂原理及作用

采血管分类及用途说明

采血管分类及说明 1. 普通血清管红色头盖,采血管不含添加剂,用于常规血清生化,血库和血清学相关检验。 2. 快速血清管橘红色头盖,采血管内有促凝剂,加速凝血过程。快速血清管可在5分钟内使采集的血液凝固,适用于急诊血清系列化试验。 3. 惰性分离胶促凝管金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液体成分(血清或血浆)和固体成分(红细胞,白细胞,血小板,纤维蛋白等)彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障,标本在48小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制,加速凝血过程,适用于急诊血清生化试验。 4. 肝素抗凝管绿色头盖,采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。 5. 血浆分离管浅绿色头盖,在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂,可达到快速分离血浆的目的,是电解质检测的最佳选择,也可用于常规血浆生化测定和ICU等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48小时稳定。 6. EDTA抗凝管紫色头盖,乙二胺四乙酸(EDTA,分子量292)及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标本中钙离子,螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子,钾离子,钠离子,铁离子,碱性磷酸酶,肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。 7. 枸橼酸钠凝血试验管浅蓝头盖,枸橼酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验,国家临订实验室标准化委员会推荐的抗凝剂浓度是3.2%或3.8%(相当于

真空采血管的分类

真空采血管的分类 真空采血器由真空采血管、采血针(包括直针和头皮采血针)、持针器三个部分组成。真空采血管是其主要组成部分,主要用于血液的采集和保存,在生产过程上预置了一定量的负压,当采血针穿刺进入血管后,由于采血管内的负压作用,血液自动流入采血管内;同时采血管内预置了各种添加剂,完全能够满足临床的多项综合的血液检测,安全、封闭、转运方便。 真空采血管一般分为以下几种: 1.无添加剂的干燥空管:采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。 2.促凝管:采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果时,可采用促凝管。一般用于急诊生化。 3.含有分离胶及促凝剂的采血管:管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有分离胶,分离胶与PET管具有很好的亲和性,确实起到隔离作用,一般即使在普通离心机上,分离胶能将血液中的液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分开并积聚在试管中形成屏障。离心后血清中不产生油滴,因此不会堵塞机器。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。 4.管内含有抗凝剂的采血管: 1)含有肝素钠或肝素锂的采血管:,肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,带有强大的负电荷,具有加强抗凝血酶III灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。肝素管一般用于急诊生化及血流变的检测,是电解质检测的最佳选择,检验血标本中的钠离子时,不能使用肝素钠,以免影响检测结果。也不能用于白细胞计数和分类,因肝素会引起白细胞聚集。 2)含有乙二胺四乙酸以及其盐(EDTA—)的采血管:乙二胺四乙酸是一种氨基多羧基酸,可以有效地鳌合血液中的钙离子,鳌合钙会将钙从反应点移走将阻止和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液凝固,与其他抗凝剂比较而言,其对血球的凝集及血细胞的形态影响较小,故通常使用EDTA盐(2K、3K、2Na)作为抗凝剂。用于一般血液学检查,不能用于血凝、微量元素及PCR检查。

血清分离胶

血清分离胶 血清分离胶是一种粘性流体,其结构中含有大量氢键,由于氢键的缔合作用形成网状结构。在离心力的作用下,网状结构被破坏,变成粘度低的流体。当离心力消失之后又重新形成网状结构.恢复成粘度高的流体.这种性质被称为触变性(thixotropy).利用这一特性可制成一种血清分离胶。当分离胶与凝固后的血液在同一试管中离心时,分离胶便在血清和血块之间形成胶状的隔离层将血清和血块隔开。从而提高了血清的收得率,并在原状态下保存血清,简化了临床检验过程,提高了工作效率。现今医学检验技术已步入全自动化,微机管理的新时代.在临床检验领域内,不论临床化学.血清学,免疫学等检测中。所甩标本大都需要分离血清。如何船快速、足量地分离血清、并能简化操作,就是一个医学检验界迫切需要解决的课题。血清分离胶的应用为这一问题的解决提到希望日程。血清分离胶是一种疏水性的有机化合物,其作用原理是:一般血清比重约1.02、血块比重约1.08、分离胶比重维持在1.05。在离心力的作用下,分离胶在血清和血块间形成隔离层.早期的分离胶是往硅油中加入硅石粉.再调整比重而制成.1973年美国PECTON公司以硅油和硅石为原料树成凝胶并装入玻璃试管中投放市场.1982年日本积水化学工业及其同行用塑料试管代替玻璃试管实现商品化。1991年中国科学院大连化学物理研究所和大连临床检验中心遁力协作,在国内首次研制出国产的血清分离胶。并受到卫生部临床检验中心的重视,投入临床应用后,证明完全达到分离胶标准要求。现今的分离胶采血管其原料为聚酯或聚丙烯。分离胶原料为聚烯烃、聚酯和丙烯。促凝剂为硅石粉、硅石炭素及蛇毒等喷徐于管壁.分离胶置于试管底部,注入血样待血液凝固后置离心机中离心,分离胶即在血清、血块之间形成隔离层。并使血清保持原状,无改变。此隔离层紧密地粘附在试管璧上,可在原状态下由自动分析仪直接吸取血清,或冷藏保存,远途运输均不影响检测结果,也避免了纤维蛋白和溶血的影响。此外,自血样注入采血管、血清分离、分析仪直取血清、血样保存,废弃物处理的全过程都在同一支管中进行,避免血样沾沾污操作者,防止血液中病毒的感染,减少了医疗废物,提高了工作效率。所以,血液分离胶的应用是医学检验的一项重要发展。

真空采血管的正确使用

真空采血管的正确使用 一、临床检验标本采集 1.病人准备 标本采集前病人的状态对检测结果会有一定的影响,因此,各种不同检测项目对标本采集前病人的状态有不同的要求。如,血脂测定须病人禁食12-14h后采血,否则出现脂血,,情绪紧张会使血糖升高,吗啡、可待因可使淀粉酶,AMS,升高,吃香蕉能使尿液5-羟吲哚乙酸升高等。所以,在病人要做某些化验检查之前,必须嘱咐病人做好相应的准备。 实验室接受标本后的处理应注意以下事项, ,1,时间,实验室接受标本后应尽快予以分类和离心。?促凝标本采血后5-15min 尽早处理,?抗凝标本可采血后立即离心,?非抗凝,无促凝,标本采血30-60min后离心,?抗凝全血标本,测Li、Zn、原卟啉、原孢菌素,可以不离心。 ,2,温度,一般标本为室温,最好是22-25oC,放置,冷藏标本,对温度依赖性分析物,应保持2-8oC直到温度控制离心。 ,3,采血管放置,应管口,盖管塞,向上,保持垂直立位放置。 ,4,采血管必须封口,管塞移去后会使血PH改变,影响结果,如可使PH、Ca2+增高,使ACP减低,封口可以减少污染、蒸发、喷溅和溢出等。 二、临床常用检验项目的标本 ,一, 血常规检验标本 一般用EDTA-2K,EDTA-K2-2H2O,1.5,2.2mg/ml抗凝,EDTA抗凝管,采血。采血注意事项为, 1. 采血后立即上下颠倒混匀,5-10次,不可用力震荡,,

2. 应按抗凝管刻度准确采血, 3. 采血后应尽快送检,需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2h WBC形态会发生改变,。 ,二,红细胞沉降率,血沉,ESR,测定标本 静脉采集枸橼酸钠,109mmol/L,即32.06g/L,抗凝血,枸橼酸钠抗凝管采血,。采血注意事项, 1.采血后立即上下颠倒混合5-10次, 2.准确采血至刻度线,抗凝剂,全血 = 1,4,, 3.采血后应尽快送检,必须2h内检测,。 ,三,凝血检测, PT、APTT 、 TT 、 FBG 、 DD ,标本 静脉采集抗凝血,最好真空负压系统采血,,抗凝剂用枸橼酸钠,109mmol/L,即32.06g/L,抗凝剂:全血 = 1,9 ,。 采血注意事项, 1.空腹采静脉血,餐后脂血影响检测结果,使因子?活化,导致PT延长,, 2.采血时患者应保持平静状态30min以上,剧烈活动可使因 子?活化,APTT明显缩短,, 3.必须准确采血至刻度线, 4.采血后应立即上下颠倒混匀5-10次,不可有凝块, 5.采血后应尽快送检,必须2h内检测,。 ,四,血型与血交叉标本 一般采用EDTA-2K抗凝血。 采血注意事项, 1.最好血型与血交叉各采1管血,要求保留血样,, 2.采血量分别为1.0ml和1.0,2.0ml, 3.采血后立即上下颠倒混匀,5,10次,。

血清分离胶促凝采血管的理论基础及临床应用

血清分离胶促凝采血管的理论基础及临床应用 当今分析仪器的自动系列集约化或条型码的运用,增加了系列化项目直接上机检测量。但就是由于过去采血后血液自然凝固,血液从离心到测定放置时间长,影响了分析仪的多种功能的充分发挥。为了迅速推进检测技术的快速化,往采血管中添加分离胶、促凝剂缩短了血液凝固时间。分离胶促凝采血管的应用,就是采血初级阶段重要质量控制,同时也制备了高品质的血清标本。从保护室内外环境角度考虑,血清分离胶采血管的应用,减少血清杯及塑料试管的用量。目前国内许多公司提供的真空系列采血试管,规范了检验科采血技术,减少了多种多样交叉感染。但就是,分离胶促凝采血管的临床实践应用中,出现了涉及到分离胶、促凝剂的基础理论及值得注意的有关问题。必须从基础理论上去理解才能解决实践中出现的问题。本文就血清分离胶促凝管基础理论及临床应用讨论如下。 1 分离胶分离血清、血块的机理 血清分离胶就是由疏水有机化合物与硅石粉组成,具有触变性的粘液胶体,其结构中含有大量氢键,由于氢键的缔合作用形成网状结构,在离心力的作用下用网状结构被破坏变为粘度低的流体,当离心力消失之后又重新形成网状结构这种性质被称为触变性(thizotropy)。即在温度不变的情况下,对这种粘液胶体施加一定的机械力,可从高粘度的凝胶状态变为低粘度的溶胶状态,如果机械力消失又恢复原来高粘度的凝胶状态。由机械力作用产生的凝胶与溶胶的互变现象首先由Freundlich 与Petrifi 命名。为什么由机械力的作用会产生凝胶与溶胶的互变现象呢?触变性就是因为分离胶的结构内部含有大量氢键网状结构之故。在常温下氢键比较容易被切断引起再结合。硅石表面具有硅羟基(SiOH),形成SiO 分子凝聚体(初级粒子),在这种初级粒子间以氢键连结成链状结合粒子。这种链状硅石粒子与构成分离胶的疏水有机化合物的粒子间更进一步形成氢键而产生网状结构,构成具有触变性的凝胶状分子。分离胶比重维持在1、05,血清比重约1、02,血块比重约1、08,当分离胶与凝固后的血液在同一试管中离心时,由于对分离胶施加离心力而引起硅石凝聚体中的氢键网状结构被破坏变成链状结构,分离胶就成为粘度低的物质,比分离胶重的血块就移到管的底部,分离胶发生返转现象,形成管底部血块/分离胶/血清三层。当离心机停止转动失去离心力后,分离胶中硅石凝聚体的链状粒子间再次由氢键构成网状结构,恢复初始高粘度凝胶状态,在血清与血块间形成隔离层。另外,检验医学实验室广泛采用了一次性疏水性塑料试管,延长了凝血时间。其塑料试管在与Ⅺ、Ⅻ凝血因子接触时,被激活能力非常弱,采血后2~4h血液还没有完全凝固,为此要在塑料试管内壁喷涂促凝剂加速血液凝固,能得到高品质的血清标本。 2 血清分离胶促凝管、血浆分离胶抗凝管 血液促凝剂就是为了临床检验中快速分离血清标本而研制的促凝剂,一般常用硅石粉、玻璃粉、炭素粉末及蛇毒等促凝成分,特殊加工成粉剂与球型。粉剂制成无水乙醇悬浮液,喷涂在血清分离胶真空试管内壁上,放鼓风干燥箱中(35℃)使无水乙醇蒸发干。如果血清分离胶返转性不好,会出现分离胶隔层与血清、血块之间分离不完全,其原因往往就是离心前血液没有完全凝固所致,因为血液凝固不完全可使纤维蛋白混杂在隔离层。要使血液完全凝固,必须按说明书正确使用血清分离胶促凝管,才能制备高品质的血清标本。血浆分离胶抗凝管就是为了快速血浆生化急诊检验所需,即在分离胶采血管内壁喷涂肝素锂。

一次性使用真空采血管产品说明.

一次性使用真空采血管产品说明 一次性使用真空采血管,是一种新型的医用采血器具。它与一次性使用采血针配套使用。 它是医疗临床、卫生防疫、血站(库、血防及血液病的研究和生物制品等部门进行血液检验的静脉采血器具。 该产品有以下特点: 1、是取代注射器采血的换代产品。目前大多数医疗部门均采用注射器采血,采血后仍须注 入事先已准备好的试管内,在大数量[如血站(库卫生防疫部门]的采血过程中,由于操作人员需要使用较大力量频繁地抽动注射器将会使手受到损伤,给操作的灵活、速度、准确带来一定的困难。同时,注射器抽和吸,转移对血细胞会造成一定的破坏作用,并有可能会缩短血样的保存时间。而采血器是将注射器的采、注两道程序“合二为一”。 对血细胞无破坏,检验结果更加准确。 2、结构合理,使用方便。一次性采血器结构较为合理。能较快而准确的掌握和使用。 3、安全可靠,无交叉感染及污染隐患。采血器采集后的血液是全封闭送检的。特别适用于 在户外采集和临床采集、无血液的渗漏和外界污染的可能。对操作人员的心理感觉良好,在检验上能获得更满意的结果。 4、一针采多管血样。在临床应用中,对特殊病人需采集不同量的多管血液进行多项检验时,

本采血器能做到一次采集多管血液的要求。 5、属系列型产品。根据不同部门的要求及血液检验不同的要求。本产品有以下规格: 1普通管:适用于生化、免疫等血清学检验。 2EDTA–K2、EDTA–K3抗凝管:适用于血细胞分析(血常规,最适用于血小板计数。 3肝素钠抗凝管:用于临床生化、急诊生化、血流变、血气分析(动脉血红细胞 比积(PVC等的检验。 4肝素锂抗凝管:用于临床生化、急诊生化、血流变、血气分析(动脉血红细胞 比积(PVC等的检验。 5枸橼酸钠抗凝管:①(1:4用于血沉、血型等检验。 ②(1:9用于凝血机制(PT、APTT、血凝因子的检验。 6双草酸盐抗凝管:适用于红细胞比积的检测。 7促凝管:用于生化、免疫等血清学检验。 8分离胶管:用于生化、免疫等血清学检验。 一次性使用真空采血管使用说明书 【产品名称】一次性使用真空采血管 【型号】A型(普通管、B型(抗凝管、C型(促凝管、D型(分离胶管 【规格】1.6ml、1.8ml、2ml、2.7ml、3ml、4ml、5ml 【主要结构、性能】

SDS-PAGE分离胶-浓缩胶配方

SDS-PAGE 1、SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、DDW:超轻水 5、SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10% 7、TEMED:四甲基乙二胺,促凝剂 8、Tris-Hcl:3羟基氨基甲烷盐酸缓冲液,配胶时(分离胶ph=8.8,浓缩胶ph=6.8) 9、DTT:二硫苏糖醇,DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的 半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。 10、IMA:碘乙酰胺,碘代乙酰胺用于有机合成,在蛋白组学中组氨酸和半胱氨酸的烷 基化试剂,用于多肽测序以及酶抑制剂等,蛋白组学级试剂。CH>2ICONH>2,是和碘乙酸一样,可通过下列反应不可逆地抑制SH酶类的物质。

1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的 分离胶(即下层胶):

注:如果配制非变性胶,参考上述配方,不加10%SDS即可配制成非变性PAGE胶。 1)按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶): TBST 缓冲液 每2L体积中含: 1)抗体去除液 每50mL抗体去除液中含:

SDS-PAGE电泳的基本原理: SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

血清分离胶试管在临床检验中的应用

血清分离胶试管在临床检验中的应用 新疆和静县人民医院,陈巍,841300 【摘要】:血液标本的采取用真空采血管系列已成为主流,由于过去采血后血液自然凝固,血液从离心到测定时间长,影响分析结果和速度。为了迅速推进检测技术的快速化,往采血管中添加分离胶、促凝剂缩短了血液凝固时间,血清(血浆)分离胶抗凝采血管的应用,为急诊干化学分析提供了更快速的检测标本并在最短时间报告结果。同时减少了交叉感染等生物安全隐患,规范了检验科采血技术,提高了检测标本的质量,方便了就诊患者。但是,随着分离胶促凝采血管等在临床实践应用不断增加,出现许多误区及使用中值得注意的有关问题,有必要作一介绍。 【关键词】:血清分离胶试管血清使用注意问题 Blood serum separation rubber test tube,s in clinical examination application 【Abstract】:Blood preparation,s adopting picks the blood vessel series with the vacuum to become the mainstream,because after the past picked the blood,the blood natural coagulation,the blood was long from the offcenter to the survey time,the impact analysis result and the speed.To advance the examination technology fast rapidly,toward picked in the blood vessel to increase the separation rubber,the ulant agent to reduce the blood coagulation time,the blood serum (blood plasma)has separated the rubber antifreeze to pick blood vessel’s application,analyzed for the emergency medical treatment desiccation school grades has provided the faster examination specimen and in the shortest time report result.Simultaneously reduced biological safe hidden dangers and so on cross infection,the standard inspection department has picked the blood technology,improved the examination specimen quality,has facilitated the seeing a doctor patient.But,presses along with the separation rubber to congeal picks the blood vessel and so on to increase unceasingly in the clinical practice application,has related problem which in many erroneous zones and the use are noteworthy,it is necessary to make an introduction. 【Keywords】:The blood serum separation rubber test tube Blood serum Use Pays attention to the question

2.1SDS-PAGE配制表

SDS-PAGE浓缩胶/堆积胶/上层胶配方表 成分配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)5%胶235681015 蒸馏水 1.4 2.1 3.5 4.1 5.5 6.810.3 30% ACR-Bis(29:1)0.330.50.831 1.3 1.7 2.53 1M Tris Buf.,pH6.80.250.380.630.751 1.25 1.88 10% SDS0.020.030.050.060.080.10.15 10% AP(过硫酸铵)0.020.030.050.060.080.10.15 TEMED0.0020.0030.0050.0060.0080.010.015 SDS-PAGE分离胶配方表 成分配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)6%胶5101520253050 蒸馏水2468101220 30% ACR-Bis(29:1)12345610 1M Tris Buf.,pH8.8 1.9 3.8 5.77.69.511.419 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.5 10% AP(过硫酸铵)0.050.10.150.20.250.30.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.03成分配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)8%胶5101520253050 蒸馏水 1.7 3.35 6.78.31016.7 30% ACR-Bis(29:1) 1.3 2.74 5.3 6.7813.3 1M Tris Buf.,pH8.8 1.9 3.8 5.77.69.511.419 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.5 10% AP(过硫酸铵)0.050.10.150.20.250.30.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.03成分配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)10%胶5101520253050 蒸馏水 1.3 2.74 5.3 6.7813.3 30% ACR-Bis(29:1) 1.7 3.35 6.78.31016.7 1M Tris Buf.,pH8.8 1.9 3.8 5.77.69.511.419 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.5 10% AP(过硫酸铵)0.050.10.150.20.250.30.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.03成分配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)12%胶5101520253050 蒸馏水12345610 30% ACR-Bis(29:1)2468101220 1M Tris Buf.,pH8.8 1.9 3.8 5.77.69.511.419 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.5 10% AP(过硫酸铵)0.050.10.150.20.250.30.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.03成分配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)15%胶5101520253050 蒸馏水0.51 1.52 2.535 30% ACR-Bis(29:1) 2.557.51012.51525 1M Tris Buf.,pH8.8 1.9 3.8 5.77.69.511.419 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.5 10% AP(过硫酸铵)0.050.10.150.20.250.30.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.03 备注:如配制非变性胶,参考上述配方不加10% SDS即可。

血清分离胶常见问题及原因分析

血清分离胶常见问题及原因分析 血清分离胶是采血管分离血液常用的试剂,杰安生物根据采血管厂家在分离胶使用常见的问题进行分析解答,常见问题有以下几点: 一、检测值不准:血清钾离子等偏高 可能原因: 1.溶血(离心或其它); 2.间壁稳定性不好; 3.分离胶的油滴堵塞影响吸样导致。 解决方案: 1.相对离心力或离心时间适当缩短; 2.提高分离胶的粘度; 3.和前面相同。 二、分离胶残胶在管壁上 可能原因: 1.分离胶配方或工艺原因; 2.分离胶发生老化,触变性能下降; 3.分离胶的初始离心力过大; 4.离心力过小,离心时间过短。 解决方案: 1.定义分离胶翻转标准和检验和检验方法--优化分离胶 配方--严格控制分离胶合成工艺; 2.验证和确认在有效期内分离胶的触变性符合要求; 3.提高分离胶的触变性能,选择合适的供应商; 4.按照制造商推荐的离心要求进行操作。

三、分离胶不翻转或翻转不良 可能原因: 1.分离胶配方或工艺原因; 2.分离胶发生老化,触变性能下降; 3.分离胶的初始离心力过大; 4.离心力过小,离心时间过短; 5.分离胶的最低反转离心力过高。 解决方案: 1.定义分离胶翻转标准和检验和检验方法--优化分离胶配方--严格控制分离胶合成工艺; 2.验证和确认在有效期内分离胶的触变性符合要求; 3.提高分离胶的触变性能,选择合适的供应商; 4.按照制造商推荐的离心要求进行操作; 5.提高触变性。 四、分离胶流动 可能原因: 1.分离胶配方或工艺原因; 2.储存温度过高; 3.不当的运输转运颠簸,触发分离胶的触变性; 4.分离胶供应商质量不稳定。 解决方案: 1.定义分离胶流动性标准和检验方法; 2.避免运输和储存高温; 3.避免剧烈的抛掷和颠簸; 4.选择合格的供应商并进行监控。

真空采血管及采血处理

真空采血管在国内外的历史发展以及现状本世纪40年代初,真空采血技术被发明,它省略了抽拉针管和推血入试管等不必要的步骤,利用真空管中预先制造的真空自动吸血入管,很大程度上减少了溶血的可能。40年代美国BD公司率先推出商品真空型采血系统,其它医疗器械公司也先后推出自己的真空采血产品,至80年代,一种称为安全管盖(HEMOGARDTM)的全新管盖问世。安全管盖由套在真空管外的特殊塑料罩和新设计的橡胶管塞组成。二者结合在一起,减少了医疗工作者与管中内容物接触的可能,也减少了管盖拔出后内容物外溅的机会。塑料罩形成一个双井形凹陷结构,防止手指与管塞顶端及尾端残留血液的接触。这种带有安全管盖的真空采血管极大地减少了医疗工作者从采血到血样处理的全过程中沾染血样的可能,当年安全管盖荣获全美最佳工业设计大奖。真空采血系统由于其干净安全、简单可靠的特点已在世界范围内被广泛采用,并被NCCLS推荐,成为采血的标准器械。 真空采血管90年代中期开始在我国部分医院使用。目前,大多数大中城市中型以上的医院已普遍接受了真空采血方式。作为临床血液采集和检测的新方式,真空采血器是对传统采血、储血方式的一场革命。 1真空采血系统主要由三部分构成 1.双向无菌针头:一端连接真空管,另一端进行皮肤穿刺。由于双向无菌针头专为采血特别设计而成,与注射用针头不同,针尖斜面成15度,表面特殊润滑,更锋利、进针方便。一次静脉穿刺后,可以抽取单个或多个血样。 2.持针器:持针器内径13 mm。配合规格统一的采血管使用,一端连接双向针头,另一端接真空管。持针器可以重复使用. 3.真空管:真空采血管标准直径13 mm,长75 mm或100 mm,由高质量玻璃或塑料制成。虽然大小恒定,但由于管内真空度不同,可以抽取不同体积。管内含各种添加剂(抗凝剂和促凝剂等),无需自己配制、添加,减少了工序,方便、快捷;避免了自行配备添加剂的不准确,并且可以满足各种检验对血样的要求;新型PET材质的真空采血管避免了玻璃试管破损后血液外溢的不安全。 2真空采血管分类和制作原理 目前医院使用的真空采血管主要有以下几个类别: 1.无添加剂的干燥空管(白头管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅酮),避免血细胞附壁,防止离心时细胞破碎,释放细胞内物质至细胞外,影响试验结果。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。 2.促凝管(红头管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅酮,同时添加了

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