菌种的确认标准操作规程

1．目的

建立菌种确认标准操作规程，以减少菌种污染和生长特性的改变，保证实验结果的可靠性和准确性。

2．依据

《中国药典》2010版二部

3．范围

本规程适用于质量控制实验室所用标准储备菌株。

4．责任

质量管理部，质量控制实验室

5．内容

5.1试验菌株

大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B)44 102]

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC(B)26 003]

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B)63 501]

白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)98 001]

黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC(F)98003]

5.1.1标准菌株

5.1.1.1标准菌株应来自认可的国内或国外菌种收藏机构。

5.1.1.2标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备菌株。

5.1.1.3标准储备菌株应进行纯度和特性确认。

5.1.2工作菌株

5.1.2.1标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株

5.1.2.2工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5 代（从菌种收藏机构获得的标准菌

株为第0代），以防止过度的传代增加表型变化的风险。因此必要时，应对工作菌株的纯度和特性进行确认。

5.2菌种确认试验的主要内容

5.2.1菌种的纯度确认

5.2.1.1纯度检测：是指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。

5.2.1.2试验内容

①菌落形态：在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。

②镜检特征：对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜、芽孢等特征应相似。

5.2.2菌种的特性确认

5.2.2.1生化试验：各种微生物具有各自的独特的酶系统，因而在代谢过程中所参与的物质分解和合成代谢的产物也不同，这些代谢产物又具有不同的生化特征。根据此特征，利用生物化学方法来鉴定不同的微生物的试验即为微生物的生化试验。

5.3 菌种的确定方法

用无菌接种环粘取培养物，在相应的培养基平板上划线分离单个菌落，并在适宜条件下培养。培养后观察是否具有典型的菌落形态，然后挑取单一纯菌落，进行革兰氏染色、镜检，观察其染色特性及菌形。再做生化试验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定菌种。

5.3.1大肠埃希菌的确认

5.3.1.1菌落形态

5.3.1.1.1取大肠埃希菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，形成菌膜，管底有粘液状沉淀，培养物有粪臭味。

5.3.1.1.2取上述培养物接种于曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板和麦康凯琼脂平板上，35℃培养18～24h后，观察结果。

①曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板上菌落形态呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑、湿润，常有金属光泽。

②麦康凯琼脂平板上菌落形态呈鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。

5.3.1.2革兰染色、镜检

5.3.1.2.1革兰染色

①以接种环沾取无菌水于洁净载玻片上，取菌落形态（①、②）的培养物少许，制成均匀涂片，自然或微温，再通过火焰2～3次干燥使固定。

②滴加结晶紫染液，染色1min，水洗。

③滴加碘液，媒染1min，水洗，以滤纸吸干余水。

④滴加95﹪乙醇，脱色20～30s，至流出液无色，水洗。

⑤滴加沙黄染液，复染1min，待干后，镜检。

5.3.1.2.2染色结果应是：革兰阳性菌呈蓝紫色：革兰阴性菌呈红色。

5.3.1.2.3镜检结果应是：两端钝圆的短小直杆菌，单个或成对，革兰阴性，无芽孢，多有鞭毛，以周身鞭毛运动或不运动，许多菌株有荚膜和微荚膜。

5.3.1.3生化试验

5.3.1.3.1靛基质试验（I）：取菌落形态（①、②）的培养物接种于蛋白胨水培养基中，培养24-48h，沿管壁加入靛基质试液数滴，轻轻摇动试管，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。

5.3.1.3.2甲基红试验（M）：取菌落形态（①、②）的培养物接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48+2h，于培养液中加入甲基红指示液2～3滴（约1ml培养液加指示液1滴），轻微摇动，立即观察，呈鲜红色或橘红色为阳性，呈黄色为阴性。

5.3.1.3.3乙酰甲基甲醇生成试验（V-P）：取菌落形态（①、②）的培养物接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48+2h，，于2ml培养液中加入α-萘酚乙醇试液1ml，混匀，再加40%氢氧化钾试液0.4ml，充分振摇，在4h（通常在30min）内出现红色应判为阳性，无红色反应为阴性。

5.3.1.3.4枸橼酸盐利用试验（C）：取菌落形态（①、②）的培养物接种于枸橼酸盐培养基斜面上，培养2-4天，培养基斜面有菌苔生成，培养基由绿色变为蓝色时为阳性，培养基颜色无改变、无菌苔生长为阴性。

5.3.1.3.5乳糖发酵试验：取菌落形态（①、②）的培养物接种于乳糖发酵管，培养24-48h，观察产酸（指示剂为酸性品红者为红色：指示剂为溴麝香草酚蓝者为黄色），产气（小倒管内有气泡，气泡无论大小都是产气）。

5.3.2金黄色葡萄球菌的确认

5.3.2.1菌落形态

5.3.2.1.1取金黄色葡萄球菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，呈均匀浑浊生长，繁殖较多时易产生沉淀，沉淀易被摇散。

5.3.2.1.2取上述培养物划线接种于甘露醇氯化钠琼脂平板和卵黄氯化钠琼脂平板上培养24～27h观察结果。

①甘露醇氯化钠琼脂平板上菌落形态金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有黄色环,菌落直径0.7-1mm。

②卵黄氯化钠琼脂平板上菌落形态金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有卵磷脂分解的乳浊圈，菌落直径1-2mm。

5.3.2.2革兰染色、镜检

5.3.2.2.1革兰染色（见大肠埃希菌检查法5.3.1.2）

5.3.2.2.2镜检结果：为革兰阳性球菌，菌体呈球形或略呈椭圆形，菌体较小，菌体大小不一。无芽孢，一般不产生荚膜。排列呈不规则的葡萄状，亦可呈单个、成双或短链状排列。

5.3.2.3生化试验

5.3.2.3.1血浆凝固酶试验

试管法：取无菌试管（10mm×10mm）2支，各加入血浆和0.9%无菌氯化钠溶液（1：1）0.5ml，1支加入营养肉汤培养液0.5ml作为阳性对照：另一支加入无菌营养肉汤0.5ml 作为阴性对照。两管同时置37℃水浴或恒温培养箱，3h后开始检查，以后每隔适当时间观察一次，直至24h。检查时，轻轻将试管倾斜（动作勿大），仔细观察。

①阳性对照管：血浆和无菌水混合液加金黄色葡萄球菌营养肉汤培养物，在3h后开始观察直至24h。结果：血浆凝固。

②阴性对照管：血浆和无菌水混合液加稀释液，在3h后开始观察直至24h。结果：血浆流动自如。

5.3.3枯草芽孢杆菌的确认

5.3.3.1菌落形态

5.3.3.1.1取枯草芽孢杆菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，呈浑浊生长。

5.3.3.1.2取上述培养物划线接种于营养琼脂平板上，培养24～27h观察结果：菌落为灰色、干燥、皱缩、无典型卷发状。

5.3.3.2革兰染色、镜检

5.3.3.2.1革兰染色（见大肠埃希菌检查法5.3.1.2）

5.3.3.2.2镜检结果：革兰阳性芽孢杆菌芽孢为椭圆到柱状，位於菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。

5.3.4白色念珠菌的确认

5.3.4.1菌落形态

5.3.4.1.1取白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖肉汤培养基中，经35℃培养24～48h后，呈浑浊生长。

5.3.4.1.2取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，经30～35℃培养24～48h（必要时延长至72 小时）观察结果：呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。

5.3.4.1.3取上述（5.3.4.1.2）培养物接种至白色念珠菌显色培养基平板上，经30～35℃培养24～48h（必要时延长至72 小时）观察结果：平板上为绿色或翠绿色的菌落生长。

5.3.4.2革兰染色、镜检及芽管试验

取上述（5.3.4.1.3）培养物接种至1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基上，培养24～48h。取培养物进行染色，镜检及芽管试验。

5.3.4.2.1革兰染色（见大肠埃希菌检查法5.3.1.2）

5.3.4.2.2芽管试验：挑取1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基上的培养物，接种于加有一滴血清的载玻片上，盖上盖玻片，置湿润的平皿内，置35～37℃培养1～3h，置显微镜下观察，可见到由孢子长出短小芽管。

5.3.4.2.3镜检结果：革兰阳性芽孢杆菌芽孢为厚膜孢子、菌丝、芽管。

5.3.5黑曲霉菌的确认

5.3.5.1镜检：可见孢子，菌丝。

16SrDNA鉴定菌株的标准操作规程

16SrDNA鉴定菌株的标准操作规程 1.适用范围 本标准规定了通过特定引物对细菌的16SrDNA片段进行PCR扩增，然后对扩增片段进行序列分析比对，快速获得细菌种属信息的操作规程。 本标准适用于未知细菌的快速种属分析，以及为细菌的生化鉴定提供指导信息。 2.方法和原理 16SrDNA鉴定是指用利用细菌16SrDNA序列测序的方法对细菌进行种属鉴定。包括细菌基因组DNA提取、16SrDNA特异引物PCR扩增、扩增产物纯化、DNA测序、序列比对等步骤。是一种快速获得细菌种属信息的方法。 细菌rRNA（核糖体RNA）按沉降系数分为3种，分别为5S、16S和23S rRNA。16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA相对应的DNA序列。16S rDNA由于大小适中，约1.5Kb左右，既能体现不同菌属之间的差异，又能利用测序技术较容易地得到其序列，故被细菌学家和分类学家接受。 在16S rRNA分子中，可变区序列因细菌不同而异，恒定区序列基本保守，所以可利用恒定区序列设计引物，将16S rDNA片段扩增出来，利用可变区序列的差异来对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。 16SrDNA序列的前500bp序列变化较大，包含有丰富的细菌种属的特异性信息，所以对于绝大多数菌株来说，只需要第一对引物测前500bp序列即可鉴别出细菌的菌属。针对科学论文发表或是前500bp无法鉴别的情况，需要进行16SrDNA的全序列扩增和测序，得到较为全面的16SrDNA的序列信息。 由于测序仪一次反应最多只能测出700bp的有效序列，为了结果的可靠性，通常将16SrDNA全长序列分成3部分进行测序。 3.设备和材料 3.1器材 移液器（1000μL、200μL 、100μL、10μL）；涡旋振荡器；Eppendorf MixMate；离心机；水浴锅；电泳仪；制冰机；低温冰箱；PCR仪：Veriti 96 Well Thermal

菌种管理规程

1. 目的 规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2. 适用范围 适用于微生物实验用菌种管理，包括菌种的申购、传代、使用及销毁等。 3. 引用/参考文件 ChP2015 实用药品微生物检验检测技术指南 4. 职责 质量控制实验室负责菌种的申购、传代、使用、销毁等工作，QA负责监控和参与OOS调查。 5. 程序 5.1术语和定义 5.1.1 标准菌株 由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌。 5.1.2 传代菌株 用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种，3代后的传代菌株在需要时可以作为工作菌株使用。 5.1.3 工作菌株 用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 5.1.4 菌种的代 将菌种接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 5.2 菌种来源 5.2.1 标准菌株由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心（CMCC）或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌种。 5.2.2质量控制实验室涉及到的菌种种类、代码、保存方法及保存条件如下。

5.3.1菌种的申购 5.3.1.1 微生物室QC依据菌种的库存及菌种的使用情况，提出采购申请，申请需明确菌种的名称，标准编号以及申购数量等信息。 5.3.1.2 质量部经理对申购计划进行审批，审批后由公司的商务部按要求进行采购，采购过程执行《采购控制程序》。 5.3.1.3 菌种的采购需向法定的业务部门或者认可的机构采购。 5.3.1.4 购买菌种的同时应保留相关证明资料，说明菌种的名称、代数、数量等。 5.3.2 菌种的验收 5.3.2.1 微生物室QC负责对采购回的菌种以及相关的证明资料进行验收； 5.3.2.2 验收应包括菌种外包装的完好性、具体验收的依据为批准后的申购计划。 5.3.2.3 验收符合后签字确认并领回菌种，及时填写《菌种验收、入库记录》，并将菌种的相关证明资料贴在菌种接收登记表当页背面留存。如验收不符合则拒绝签字领用，商务部负责退货处理。 5.3.3 菌种的保存 5.3.3.1验收合格的冷冻干燥菌种，应保存在温度设定为-20℃冰箱中保存，有效期可至1年。 5.3.3.2 验收后的菌种需在验收合格接收后14天内完成转种。

粉料罐清库安全操作规程

粉料罐清库安全操作规程 1 目的 规范员工行为，实现作业标准化，确保人身和设备安全 2范围 适用于水泥、粉煤灰矿等各类粉料储罐的清库安全操作 3 风险辨识 坍塌、高处坠落物体打击触电粉尘 4 防护用品 工作服、安全帽鞋防尘口罩（或正压式空气呼吸器）、防尘风镜手套呼吸器）、防尘风镜手套 5 操作流程 5.1 作业前 5.1.1 人员基本要求 5.1.1.1 清库人员应具有三年以上清库人员应具有三年以上清库或高空作业工经验，年龄在或高空作业工经验，年龄在21 ～50 周岁。清理库壁周岁。清理库壁挂料的清库人员必须持有高空悬作业特种操证。 5.1.1.2 清库人员和监护应身心健康，禁忌高处作业的不得从事。清库人员和监护应身心健康，禁忌高处作业的不得从事。 5.1.1.3 清库人员和监护必须参加操作、安全防紧急救援事故应处理知识的培训，经考核合格后方能从事清库作业。 5.1.2 外包要求 5.1.2.1 清库工作外包时，承方必须具备高空业程专企资质。清库工作外包时，承方必须具备高空业程专企资质。 5.1.2.2 清库前，承包方提交案和符合清库前，承包方提交案和符合AQ/T 9002AQ/T 9002 AQ/T 9002 AQ/T 9002要求的应急预案，报公司书面批准。要求的应急预案，报公司书面批准。要求的应急预案，报公司书面批准。 5.1.2.3 清库前必须与承包方签订外合同和安全协议，明确双责任。清库前必须与承包方签订外合同和安全协议，明确双责任。 58 / 186 5.1.3 安全措施 5.1.3.1 清库前，公司应成立清库工作小组，制定方案和急预并经企业安全生产应成立清库工作小组，制定方案和急预并经企业安全生产管理部门负责人和企业批准。 清库作过程必须实行统一指挥

标准菌种确认标准操作规程完整

一目的 建立标准菌种确认标准操作规程，以减少菌种污染和生长特性的改变，保证实验结果的可靠性和准确性。 二围 本规程适用于质量控制实验室所用标准储备菌株。 三容 1.1 试验菌株 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B)44102] 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC(B)26003] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B)63501] 白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)64941] 黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC(F)98003] 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）[CMCC(B)10104] 生孢梭菌（Clostridium sporogenes）[CMCC(F)98001] 1.1.1 标准菌株 1.1.1.1 标准菌株应来自认可的国或国外菌种收藏机构。 1.1.1.2 标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备菌株。 1.1.1.3 标准储备菌株应进行纯度和特性确认。 1.1.2 工作菌株 1.1. 2.1 标准储备菌株可用于制备每两个月或定期转种的工作菌株。 1.1. 2.2 工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过 5 代（从菌种收藏机构获得的标准菌株为第0代），以防止过度的传代增加表型变化的风险。因此必要时，应对工作菌株的纯度和特性进行确认。 1.2 菌种确认试验的主要容

1.2.1 菌种的纯度确认 1.2.1.1 纯度检测：是指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。 1.2.1.2 试验容 ①菌落形态：在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。 ②镜检特征：对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜、芽孢等特征应相似。 1.2.2 菌种的特性确认 1.2.2.1 生化试验：各种微生物具有各自的独特的酶系统，因而在代过程中所参与的物质分解和合成代的产物也不同，这些代产物又具有不同的生化特征。根据此特征，利用生物化学方法来鉴定不同的微生物的试验即为微生物的生化试验。 1.3 菌种的确定方法 用无菌接种环粘取培养物，在相应的培养基平板上划线分离单个菌落，并在适宜条件下培养。培养后观察是否具有典型的菌落形态，然后挑取单一纯菌落，进行革兰氏染色、镜检，观察其染色特性及菌形。再做生化试验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定菌种。 1.3.1 大肠埃希菌的确认 1.3.1.1 菌落形态 1.3.1.1.1 取大肠埃希菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，形成菌膜，管底有粘液状沉淀，培养物有粪臭味。 1.3.1.1.2 取上述培养物接种于曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板和麦康凯琼脂平板上，35℃培养18～24h后，观察结果。 ①曙红亚甲蓝琼脂(EMB)平板上菌落形态呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑、湿润，常有金属光泽。 ②麦康凯琼脂平板上菌落形态呈鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。 1.3.1.2 革兰染色、镜检 1.3.1. 2.1 革兰染色

02微生物实验室菌种管理规程

1、目的：规范微生物试验用菌种的管理，确保菌种的有效使用。 2、适用范围：微生物试验用菌种的管理。 3、责任者：质检科负责人、微生物试验人员、菌种管理人员 4、正文： 概念 a、标准菌株：由国内或国际菌种保藏机构保藏的，遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。 b、标准储备菌株：由标准菌株经一次传代得到的培养物。 c、商业派生菌株：由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。 d、工作菌株：由标准储备菌株经传代得到的培养物。

e、代：将活的微生物接种到新鲜培养基中进行培养，并希望获取新的微生物培养物。这种操作方式，新培养物对接种培养物而言就称为一代。 菌种的采购和接收 菌种的采购 从药检所或菌种保藏中心等外单位购入菌种斜面或冻干菌种。 根据工作需要对购买国内保藏中心提供的菌种斜面提前1个月填写采购申请单，冻干菌种提前2个月申请购买，国外保藏中心提供的菌种应提前3个月申请购买。 菌种的接收 检定菌应设专人保管，管理人员应接受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、传代代数、数量、有效期等，并调查清楚菌种的保存条件和注意事项。 接收时应填写菌种接收登记表。内容包括：菌种名称、菌种保藏中心编号、传代次数、接收日期、菌种来源等。 对新购入的冻干菌种在使用前应按要求对其进行生物形态确证试验和纯度鉴定，由于新购买的菌种斜面已由菌种提供单位做过生物形态确证试验和纯度鉴定，所以传代5代以内的菌种斜面不需要进行纯度鉴定。 对新购入的斜面菌种应在2～8℃保存，并应在1周内转接。 菌种的复苏 使用人员根据需要应向菌种管理人员领取菌种，仔细核对标签上菌名、编号，并在《菌种接收及领用登记表》上记录菌名、数量、领用人、领用日期等信息。 菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用。 菌种复苏应在生物安全柜内操作。 常用菌种接种用培养基和培养条件表 菌种的传代 每株菌种应建立菌种使用及传代记录，斜面菌种应根据其特性决定传代时间间隔。

电石库安全操作规程(新编版)

The prerequisite for vigorously developing our productivity is that we must be responsible for the safety of our company and our own lives. （安全管理） 单位：___________________ 姓名：___________________ 日期：___________________ 电石库安全操作规程(新编版)

电石库安全操作规程(新编版)导语：建立和健全我们的现代企业制度，是指引我们生产劳动的方向。而大力发展我们生产力的前提，是我们必须对我们企业和我们自己的生命安全负责。可用于实体印刷或电子存档（使用前请详细阅读条款）。 1范围 本规程适用于公司物流中心电石库电石的入库、出库、贮存等操作。 本规程适用于有限责任公司物流中心。 2内容和要求 2.1电石简介 电石化学名称为碳化钙，分子式为CaC2，外观随碳化钙的含量不同而呈灰色、棕色、紫色或黑色的固态物，含碳化钙较高的呈紫色。其新创断面有光泽，有恶臭味，是有机合成化学工业的基本原料,利用电石为原料可以合成一系列的有机化合物,本公司主要用于生产氯丁 橡胶。 工业电石的主要成份是碳化钙其余为游离氧化钙，碳以及硅、镁、铁、铝的化合物及少量的磷化物、硫化物。工业用电石纯度约为 70%-80%，杂质CaO约占24％，碳、硅、铁、磷化钙和硫化钙等约占6％。

工业品密度2.22g/cm3(18℃)，熔点2300℃，能导电，纯度越高，导电性越强。 电石的化学性质非常活泼，属于遇湿易燃物品。电石遇到水和潮湿的空气，分解产生乙炔气和氢氧化钙，并放出大量的热。遇明火或撞击，摩擦时极易燃烧爆炸，与银铜等金属接触，能生成敏感度高的爆炸性化合物，在一定条件下能与氟、氯、硫、磷、乙醇等起化学反应。 由此可见在碳化钙和水产生反应时是极易燃爆（乙炔气燃爆极限2.3%-80%）。若仓内或库内乙炔含量达到燃爆极限，遇火星立即发生燃爆。因此进入电石库人员严禁带入烟火。 2.2电石仓储安全规定 2.2.1电石遇水或在潮湿的环境中产生乙炔气体，从而有可能引起燃爆。故电石的贮存过程中必须无进水或受潮，其环境（料仓）保持干燥，温度≤60℃。 2.2.2贮存电石的密封仓内乙炔气体体积浓度≤1%。若仓内乙炔浓度超标，应及时用氮气置换，直至仓内乙炔浓度达标。 2.2.3电石储存在干燥清洁的电石仓内，远离火种、热源。 2.2.4库内严禁各类火种,禁止吸烟和使用手机,且与明火或火花

清理各物料库的安全操作规程

清理各物料库的安全操作规程 为确保有效库容量及库内物料流畅，必须要定期和不定期进行清理料库工作。清理料库工作作业必须要做好安全防范措施，各级领导及管理人员应重视并执行有关清库工作作业的安全规程。 1 进入库前的安全准备工作： 1.1 检查安全帽是否完好和正确佩戴好，安全帽必须完好和正确佩戴好。 1.2 检查穿戴好劳动保护用品。 1.3 检查安全带是否完好，必须完好才能使用。 1.4 系好安全带，并经检查合格后才能进入库内工作作业。 1.5 入库工作作业人员必须身体健康，患有高血压、心脏病等禁忌症者，严禁从事进入库内的工作。 1.6 每次清理料库前，应由厂领导或厂级安全部门管理人员对工作作业人员进行一次有关清库安全事项的布置和培训。 1.7 进入清理料库前，现场管理负责人必须对本次参加清库工作作业人员进行一次人数清点，做到心中有数。 2 清理料库工作作业阶段的安全工作：

2.1 首先派一名熟悉清库工作的人员进入库内检查库内情况。 2.2 库内有一名工作人员，在库面必须有两名安全监护人，而安全监护人必须能掌握库内人员的动态，必须能掌握连系库内人员的安全带。库内人员上回库面前，库面安全监护人不得擅自离开。 2.3 同时在库内的工作作业人员，一般不能超过二人。 2.4 清理料库工作作业应采用分批轮换进行，每次轮换时间一般不超过20分钟，不允许连续长时间作业。 2.5 进入物料库内工作作业一般应安排在日班进行，禁止在深夜班安排工作作业，为保证工作作业安全，还必须配备足够的照明。照明电压应采用36伏低压安全电压。 2.6 为确保工作作业安全，在未落实各物料库内原有爬梯是否可靠的情况下，应使用竹梯或绳梯等辅助工具。 2.7 每次工作作业完毕后或中途休息等，现场安全管理负责人均应检查核对作业人数，清查工具物件是否齐全，才能离开。料库清理完毕后，应进行全面检查后，确认符合安全、以及封闭检查人孔盖和通知有关部门恢复生产。

菌种抗生素的抗性检查标准操作规程

菌种抗生素的抗性检查标准操作规程 依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。 范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。 目的：验证该菌种的抗生素抗性是否与原始菌株相符。 原理：该菌种所携带的重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因，在含有氨苄青霉素的LB琼脂培养基上能够生长。 责任：检定人员。 内容： 1 材料 1．1 材料 1．1．1 菌种：PBV 888/DH 5α ，来源于主种子批或工作种子批。 1．1．2 注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版的要求。1．1．3 药品 氯化钠 NaCl 分析纯 琼脂粉分析纯 酵母粉 OXOID 蛋白胨 OXOID 氨苄青霉素 C 16H 19 N 3 O 4 S 分析纯 无水乙醇 CH 3CH 2 OH 分析纯 1．1．4 器皿 三角烧瓶（1L）、量筒（500ml、1000ml）、烧杯（500ml）、平皿、盐水瓶（250ml、500ml、1000ml）。 1．1．5 其它材料 线绳、牛皮纸、硫酸纸、剪刀、接种环、煤气灯、脱脂棉。 1．2 设备 恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂 生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂 扭力天平TN-100B 上海第二天平厂

2 方法 2．1 准备工作 2．1．1 生产环境：在十万级洁净间中进行。场地摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。 2．1．2 器皿的洁净要求 玻璃器皿经本室洗刷组处理后，用二层硫酸纸、一层牛皮纸包好，用线绳系紧，送高压灭菌（121.3℃，60分钟）。脱脂棉用硫酸纸、牛皮纸包好，121.3℃60分钟高压灭菌。 2．1．3．1 确认扭力天平运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．3．2 确认恒温培养箱运行状态良好，已挂有“运行”标志牌。 2．1．3．3确认生物安全台运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．4 配液 2．1．4．1 LB琼脂培养基的配制（500ml） 摘下扭力天平“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌。用扭力天平准确称取酵母粉2.5克，蛋白胨5克，NaCl 5克，琼脂粉10克，倒入500ml烧杯中，加入400ml 注射用水，用玻棒搅匀溶解，定容至500ml，混匀，倒入1L三角瓶中，分别用二层硫酸纸和一层牛皮纸包瓶口，用线绳系紧，115.6℃，30分钟高压灭菌。贴上标签，标明液体名称、批号、配制日期，备用。 2．1．4．2 75%酒精1000ml 用量筒量取750ml无水乙醇，加入250ml无菌注射用水，置1000ml盐水瓶中，摇匀，标明液体名称、批号、浓度、日期，室温备用。 2．1．5 LB琼脂平板培养基的制作 摘下生物安全台“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，用75%酒精棉擦拭台内，接通电源。打开电机，无菌风吹30分钟，待已灭菌LB琼脂培养基500ml冷却到50℃左右，加入25mg氨苄青霉素，轻轻摇匀，倒平板，每皿20-30ml，待培养基冷却后，贴上标签，并注明名称、批号、配制日期，置37℃孵箱中孵育，判定合格后置于4℃冰箱中保存，待用。 2．3 操作步骤 2．3．1 在生物安全台中，将接种环用火焰灭菌并冷却后，用接种环取一环菌

标准菌种管理规程

标准菌种管理规程 目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确 保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 职责： QC 主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员 负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传 代、使用及销毁等。 内容： 1术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理 中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存 的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养 后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即 称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购 买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购

买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制 代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及 每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表 1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种 的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并 储存于 2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过 5 年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中保存。此法仅用于 工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同， 细菌： 1 个月；酵母菌： 2 个月；霉菌及芽胞： 3 个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面 的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到 预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度 20%），

电石库安全操作规程

电石库安全操作规程 1 范围 本规程适用于我公司电石库电石的入库、出库、贮存等操作。 2 内容和要求 2.1 电石简介 电石化学名称为碳化钙，分子式为CaC2，外观随碳化钙的含量不同而呈灰色、棕色、紫色或黑色的固态物，含碳化钙较高的呈紫色。其新创断面有光泽，有恶臭味，是有机合成化学工业的基本原料,利用电石为原料可以合成一系列的有机化合物,本公司主要用于生产氯丁橡胶。 工业电石的主要成份是碳化钙其余为游离氧化钙，碳以及硅、镁、铁、铝的化合物及少量的磷化物、硫化物。工业用电石纯度约为70%-80%，杂质CaO约占24％，碳、硅、铁、磷化钙和硫化钙等约占6％。工业品密度2.22g/cm3(18℃)，熔点2300℃，能导电，纯度越高，导电性越强。 电石的化学性质非常活泼，属于遇湿易燃物品。电石遇到水和潮湿的空气，分解产生乙炔气和氢氧化钙，并放出大量的热。遇明火或撞击，摩擦时极易燃烧爆炸，与银铜等金属接触，能生成敏感度高的爆炸性化合物，在一定条件下能与氟、氯、硫、磷、乙醇等起化学反应。 由此可见在碳化钙和水产生反应时是极易燃爆（乙炔气燃爆极限

2.3%-80%）。若仓内或库内乙炔含量达到燃爆极限，遇火星立即发生燃爆。因此进入电石库人员严禁带入烟火。 2.2 电石仓储安全规定 2.2.1 电石遇水或在潮湿的环境中产生乙炔气体，从而有可能引起燃爆。故电石的贮存过程中必须无进水或受潮，其环境（料仓）保持干燥，温度≤60℃。 2.2.2 贮存电石的密封仓内乙炔气体体积浓度≤1%。若仓内乙炔浓度超标，应及时用氮气置换，直至仓内乙炔浓度达标。 2.2.3 电石储存在干燥清洁的电石仓内，远离火种、热源。 2.2.4 库内严禁各类火种,禁止吸烟和使用手机, 且与明火或火花地点的防火间距必须大于30米。 2.2.5 电石包装必须密封，切勿受潮。 2.2.6 电石库室内地面高于室外自然地面，以防雨水浸入。库房要充分通风，并保持干燥。 2.2.7 电石应与卤素（氟、氯、溴）、潮湿物品、易燃、可燃物品等分开存放。专仓专储。 2.2.8 电石库内的照明、通风等设施应采用防爆型，开关设在仓外。 2.2.9 电石库应备足适用的消防器材，岗位人员必须会使用。电石发生火灾时应采用干砂、二氧化碳或干粉灭火器扑灭，禁止使用水或泡沫灭火器等灭火。 2.2.10 电石粉尘对皮肤、呼吸道及眼睛有刺激作用。电石粉尘的容许极限浓度为10 mg/m3，电石粉落入眼内，少量时应立即翻开眼皮用流动清水冲洗，大量时应及时送往医院救护。 2.2.11 发现触电时，立即切断电源，如遇有高空触电，应采取防高空

骨料仓清作业安全操作规程示范文本

骨料仓清作业安全操作规 程示范文本 In The Actual Work Production Management, In Order To Ensure The Smooth Progress Of The Process, And Consider The Relationship Between Each Link, The Specific Requirements Of Each Link To Achieve Risk Control And Planning 某某管理中心 XX年XX月

骨料仓清作业安全操作规程示范文本使用指引：此操作规程资料应用在实际工作生产管理中为了保障过程顺利推进，同时考虑各个环节之间的关系，每个环节实现的具体要求而进行的风险控制与规划，并将危害降低到最小，文档经过下载可进行自定义修改，请根据实际需求进行调整与使用。 作业前 5.1.1 作业前进行风险评估，办理相关危许可要有三人 以上并指定专监护； 5.1.2. 与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮 带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上 游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员 联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂 “禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输） 停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料 设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办 理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中 控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手

续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游送料设备（皮带输）停电手续，并挂“禁与中控操作员联系办理相关上游

BJ-SOP-WJ013-A1菌种保存、传代、使 用、销毁标准操作规程

菌种管理制度 1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程，规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。 3、定义 标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏 管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定 保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面 培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发 一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 4、职责 4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。 4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 5、规程 5.1菌种的申购 部门主管根据菌种的使用情况，提出年度购买计划（包括临时检验需要），填写申购流程，经审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌株）或传代用菌种，购买时，需确定菌种的代数，以便控制传代代数。 5.2菌种的接收 菌种到达实验室后，由部门主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《标准菌株库存记录》上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。

5.3菌种的保存 5.3.1工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：每个月转种一次；酵母菌及芽胞：3~6个月转种一次；丝状真菌每年转种一次。 5.3.2传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 5.3.2.1甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度20%），即为10%甘油菌悬液，轻轻振摇，使内容物充分混合，分装于无菌小试管，在-30℃冷冻条件下保存。此甘油冷冻管为第2代（G2）。可以每隔2年转种一代。使用时，取出一支放至室温，转种增菌培养或接种至琼脂斜面复苏，挑取纯菌落传代或工作用。此种方法主要适用于需氧细菌和酵母菌的保藏（如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌）。 5.3.2.2液体石蜡保存法 5.3.2.2.1无菌液体石蜡的制备：选用优质化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，在121℃灭菌30分钟,置40℃恒温箱中蒸发水分，经无菌检查后备用。 5.3.2.2.2液体石蜡管的制备：将菌种穿刺接种于半固体高层培养基中，在适宜条件下培养结束后，在层流台下用无菌吸管吸取上述无菌液体石蜡至培养好的菌种管内，并使石蜡高出菌种表面约1cm使菌体与空气隔绝，并将试管直立，置于-20℃冷冻或2～8℃冰箱中保存。此法主要适用于霉菌、厌氧菌、放线菌、芽孢杆菌的保存（如枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌等）。 5.3.3各菌种的保存方法、条件及期限，见下表1 表1 传代用菌种保存方法、保存温度、保存期限

料仓清库安全操作规程通用版

操作规程编号：YTO-FS-PD112 料仓清库安全操作规程通用版 In Order T o Standardize The Management Of Daily Behavior, The Activities And T asks Are Controlled By The Determined Terms, So As T o Achieve The Effect Of Safe Production And Reduce Hidden Dangers. 标准/ 权威/ 规范/ 实用 Authoritative And Practical Standards

料仓清库安全操作规程通用版 使用提示：本操作规程文件可用于工作中为规范日常行为与作业运行过程的管理，通过对确定的条款对活动和任务实施控制,使活动和任务在受控状态，从而达到安全生产和减少隐患的效果。文件下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用。 1 目的 规范员工行为，实现设备操作标准化，确保人身和设备安全。 2 适用范围 本规程适用于生产线料仓清理及清堵作业。 3.引用标准 《劳动安全卫生国家标准》 4.安全技术要求 4.1本岗位存在物体打击、高空坠落、坍塌的危险和粉尘等危害。 4.2清库（仓）单位在作业前，应按规定办理《料库清仓工作票》，经批准后方可实施。 4.3清库作业应在白天进行，应成立清库工作小组，制定清库方案，清库过程中，必须实行统一指挥。 4.4作业前必须按规定穿戴好劳动保护用品，准备并检查安全带、安全绳、操作工具及行灯是否良好。 4.5清库前，将库内料位放至最低限度，关住库顶进料

菌种生化反应检查标准操作规程

菌种生化反应检查标准操作规程 依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。 范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。 目的：通过生化试验鉴定所用的菌种是否为标准的大肠杆菌。 原理：枸椽酸盐利用试验原理：枸椽酸盐培养基中仅含一种氮源（铵盐）和唯一碳源（枸椽酸钠）一般细菌能利用磷酸二氢铵作为氮源，但不一定能分解枸椽酸盐而取得碳源，因此可否利用该盐，能将不同细菌鉴别。 吲哚试验原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚，吲哚本身没有颜色，不能直接观察，所以加入二甲基氨基苯甲醛试剂，使之与吲哚作用形成红色的玫瑰吲哚。 甲基红试验原理：大肠杆菌和产气杆菌在糖代谢中都能分解葡萄糖产生丙酮酸。产气杆菌能将两个分子丙酮酸脱羧生成一个分子中性乙酰甲基甲醇，故培养物中形成酸类较少，使酸碱度PH可在5.4以上，因此加入甲基红指示剂后呈桔黄色，是为甲基红试验阴性，而大肠杆菌能进一步分解丙酮酸，产生酸类较多，使培养物的酸碱度在PH4.5或更低，故甲基红指示剂呈红色，是为甲基红试验阳性。 V-P试验原理：测定细菌分解葡萄糖后能否产生乙酰甲基甲醇，产气杆菌可使丙酮酸脱羧变为中性的乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被空气中的氧气氧化成二乙酰，后者又与培养基蛋白胨中精氨酸所含胍基起作用，生成红色化合物，称为U-P试验阳性。 内容： 1 材料、设备 1．1 材料： 1．1．1 菌种：PBV 888/DH 5α ，来源于主种子批或工作种子批。 1．1．2注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。

1．1．3 试剂 蛋白胨 氯化钠 NaCl 分析纯 葡萄糖 C 6H 12 O 6 分析纯 溴麝香草酚兰 C 27H 28 Br 2 O 5 S 分析纯 对二甲基氨基苯甲醛 C 9H 11 NO 分析纯 戊醇 C 5H 15 O 分析纯 浓盐酸 HCl 分析纯 甲基红 C 15H 15 N 3 O 2 分析纯 无水乙醇 CH 3CH 2 OH 分析纯 氢氧化钠 NaOH 分析纯氢氧化钾 KOH 分析纯α-萘酚 C10H7OH 分析纯 硫酸镁 MgSO 4?7H 2 O分析纯 磷酸氢二钾 K 2HPO 4 分析纯 磷酸二氢铵 NH 4H 2 PO 4 分析纯 枸椽酸钠 C 6H 5 Na 3 O 7 ·2H 2 O 分析纯 琼脂粉分析纯 1．2 器皿 盐水瓶、中试管、胶头滴管、烧杯、量筒（100ml、500ml、1000ml）、吸管（10ml）、试剂瓶（250ml、500ml）。 1．3 仪器、设备 PH计 PHC-3C型上海大中分析仪器厂 电子秤 ES-200A型沈阳腾龙电子仪器公司 电子天平 ACS 太原 恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂 水浴箱 6 Liter LKB 生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂 1．4 其它材料 硫酸纸、牛皮纸、片带、橡皮膏、吸球（1ml及10ml）玻棒、接种环、透气栓。

标准菌种管理规程

标准菌种管理规程目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。职责：QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 内容： 1 术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购

买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并储存于2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过5年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2~ 8C冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度

撬库、清库安全操作规程正式版

Guide operators to deal with the process of things, and require them to be familiar with the details of safety technology and be able to complete things after special training.撬库、清库安全操作规程 正式版

撬库、清库安全操作规程正式版 下载提示：此操作规程资料适用于指导操作人员处理某件事情的流程和主要的行动方向，并要求参加施工的人员，熟知本工种的安全技术细节和经过专门训练，合格的情况下完成列表中的每个操作事项。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 1、撬库、清库工作由使用部门负责，部门内部派人或通过行政部包给小工，但清库的安全工作由使用部门负责。 2、撬库、清库人员配备不得少于4人，其中二人负责安全监护和相关协调工作。 3、必须配备安全带、软梯、粗麻绳、防尘口罩、电瓶灯及撬库、清库需用工具。 4、撬库、清库前必须同上、下道工序联系好，杜绝清库时进料、放料或充气等不安全因素。

5、入库前必须系好安全带，安全带应固定好位置，系牢。 6、撬库、清库前必须检查库内扶梯是否完好、牢固，如不好应及时汇报改用软梯。 7、如果库内潮湿、闷热、通风不畅，在库顶凿孔或增加通风设施。 8、在库内清理时，严禁吸烟和使用明火。 9、撬库、清库过程中，要随时观察塌料、陷料情况，一旦遇到此类情况，应采取紧急避让措施，并与外界取得联系。 10、撬库、清库完毕应及时吊出库内所有工具和杂物。 ——此位置可填写公司或团队名字——

菌种的确认标准操作规程

1．目的 建立菌种确认标准操作规程，以减少菌种污染和生长特性的改变，保证实验结果的可靠性和准确性。 2．依据 《中国药典》2010版二部 3．范围 本规程适用于质量控制实验室所用标准储备菌株。 4．责任 质量管理部，质量控制实验室 5．内容 5.1试验菌株 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B)44 102] 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC(B)26 003] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B)63 501] 白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)98 001] 黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC(F)98003] 5.1.1标准菌株 5.1.1.1标准菌株应来自认可的国内或国外菌种收藏机构。 5.1.1.2标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备菌株。 5.1.1.3标准储备菌株应进行纯度和特性确认。 5.1.2工作菌株 5.1.2.1标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株 5.1.2.2工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5 代（从菌种收藏机构获得的标准菌

株为第0代），以防止过度的传代增加表型变化的风险。因此必要时，应对工作菌株的纯度和特性进行确认。 5.2菌种确认试验的主要内容 5.2.1菌种的纯度确认 5.2.1.1纯度检测：是指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。 5.2.1.2试验内容 ①菌落形态：在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。 ②镜检特征：对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜、芽孢等特征应相似。 5.2.2菌种的特性确认 5.2.2.1生化试验：各种微生物具有各自的独特的酶系统，因而在代谢过程中所参与的物质分解和合成代谢的产物也不同，这些代谢产物又具有不同的生化特征。根据此特征，利用生物化学方法来鉴定不同的微生物的试验即为微生物的生化试验。 5.3 菌种的确定方法 用无菌接种环粘取培养物，在相应的培养基平板上划线分离单个菌落，并在适宜条件下培养。培养后观察是否具有典型的菌落形态，然后挑取单一纯菌落，进行革兰氏染色、镜检，观察其染色特性及菌形。再做生化试验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定菌种。 5.3.1大肠埃希菌的确认 5.3.1.1菌落形态 5.3.1.1.1取大肠埃希菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，形成菌膜，管底有粘液状沉淀，培养物有粪臭味。 5.3.1.1.2取上述培养物接种于曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板和麦康凯琼脂平板上，35℃培养18～24h后，观察结果。 ①曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板上菌落形态呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑、湿润，常有金属光泽。 ②麦康凯琼脂平板上菌落形态呈鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。

清理料仓安全操作规程(正式)

编订：__________________ 单位：__________________ 时间：__________________ 清理料仓安全操作规程 (正式) Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号：KG-AO-8545-51 清理料仓安全操作规程(正式) 使用备注：本文档可用在日常工作场景，通过对管理机制、管理原则、管理方法以及管理机构进行设置固定的规范，从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作，使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 1.目的保障清理料仓人员的生命安全。 2.操作程序 2.1进入料仓前应通知公司安全员或部门主管,值班长,中控操作员,其中公司安全员,部门主管,值班长必须到现场进行安全监督和指导； 2.2进入料仓作业应有三人以上配合,仓外应留有专人进行安全监护； 2.3进入料仓前应正确穿戴劳保用品,佩带防尘口罩,身系安全带,准备好安全绳和软梯,并携带对讲机及必要的工器具； 2.4进入料仓前要将料仓顶进料闸板关闭,电动阀断电,仓料位计断电,关闭仓底助流空气系统气源,关闭料仓底下料出口闸板及其气源,并挂警示牌； 2.5作业前先检查安全带、安全绳、软梯是否系

牢可靠,进仓维修必须使用36V以下的低压安全照明灯； 2.6在仓内清料作业时,严格执行从上向下清料的原则； 2.7同一个人在料仓内不可久留,要轮换作业,如出现不适,应立即回到仓外,仓外配合人员与进仓人员要保持紧密联系,防止出现意外； 2.8在开启料仓下料装置外排料时,作业人员不应在仓内滞留，必须人员先上来后再开启下料装置工作； 2.9作业完成后应检查工具是否遗留在仓内，严禁遗留工器具在料仓内，以免影响料仓正常工作。 请在这里输入公司或组织的名字 Enter The Name Of The Company Or Organization Here