红色诺卡氏菌细胞壁骨架多糖成分的分离纯化

红色诺卡氏菌细胞壁骨架多糖成分的分离纯化

林清强，石颖岚，李 琼，蔡 钒，王正朝

【摘 要】本研究从红色诺卡氏菌细胞壁骨架中分离出具有免疫活性的多糖成分.用盐酸断裂多糖和粘肽之间的化学键后用乙醇从细胞壁骨架中将多糖沉淀出来，利用苯酚-硫酸法测定酸解后的多糖含量，结果表明提取率为5.12%.通过SephadexG-100（1.7cm×20.5cm）凝胶柱层析用pH=7.0，Tris-HCl,洗脱速度为1.0mL/min进行分离纯化，出现8个洗脱峰.洗脱峰的具体成分，有待于进一步测定.

【期刊名称】赤峰学院学报（自然科学版）

【年(卷),期】2015(000)016

【总页数】3

【关键词】红色诺卡氏菌；细胞壁骨架；多糖；分离纯化

红色诺卡氏菌 (Nocardiarubra)是一种放线菌，是目前所发现具有最强细胞毒活性和免疫促进作用的一种微生物.因为一方面红色诺卡氏菌具有最强细胞毒活性，说明这种微生物对肿瘤细胞有最强的毒性，可以直接杀灭肿瘤细胞；另一方面具有免疫促进作用，说明这种微生物可以调节并增强机体的免疫力.研究表明[1]:红色诺卡氏菌细胞壁骨架（以下简称N—CWS）,在增强体内巨噬细胞、T细胞和自然杀伤细胞的活性的同时，还能诱导机体产生LAK细胞等,产生抗癌作用,有效地抑制肿瘤生长.所以N-CWS已经成为治疗肿瘤的有效制剂.它具有提高机体内T辅助性细胞和杀伤细胞的功能,增强巨噬细胞和自然杀伤细胞的免疫活性，抑制肿瘤和增强免疫能力的功效.其主要有效成分为[2]霉菌酸，阿拉伯半乳糖，粘肽.由于N-CWS的组成复杂，使用过程仍然存在一定的副作用,其起主要作用的物质不明确，影响了后续对其作用机制和药用开发.而有关N-CWS的多糖成分分离纯化的报道较少，本文研究了N-CWS的多糖成分的提取及分离纯化，为进一步分析该产品中多糖的成分和结构提供参考,为新药的开发与制备提供基础数据.

1 材料与方法

1.1 实验材料及仪器

1.1.1 主要材料和试剂:

红色诺卡氏菌 (由本实验自行培养传代提供)；SephadexG-100（为Pharmacia公司产品）；葡萄糖(广东汕头西陇化工厂产品，AR);苯酚(广东汕头西陇化工厂产品，AR);硫酸(广东汕头西陇化工厂产品，AR);阿拉伯糖(广东汕头西陇化工厂产品，AR);其他生化试剂均为分析纯.

1.1.2 主要仪器

可见分光光度计（V-1100型，上海美谱达仪器有限公司）；电子天平（AL104，梅特勒-托利多仪器有限公司）；电热恒温振荡水槽；微量离心机（TG16-W型）；电热鼓风干燥箱（101-2型，上