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应用PCRRFLP方法检测新生儿HIE患儿的ACE基因多态性

一432一文章编号:10Cr7—4287(20c15)03—0432—03

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患儿的ACE基因多态性

赵宏霞,李丽红,孙利炜,焦立新,赵含章

(长春市儿童医院,吉林长春130061)

摘要:目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病与血管紧张素转换酶基因多态性的相关性。方法设新生儿缺氧缺性

脑病患儿为观察组,正常新生儿为对照组。分别提取外周血白细胞DNA,然后用ACE引物进行聚合酶链反应(PcR),对产物进行电泳,根据限制性片段长度多态性(RI础。)所致不同的迁移率判断基因型。结果检测出ACE基因分为DD、ID、Ⅱ三种类型。观察组与对照组ACE基因型分布频率不同,观察组ACE基因型以DD型为主,与对照组比较,P<0.01,差异非常显著。结论新生儿缺氧缺血性脑病与血管紧张索转换酶基因多态性具有密切相关性,DD型基因可能为新生儿缺氧缺血性脑病的易患基因型。

关键词:聚合酶链反应;限制性片段长度多态性;新生儿;缺氧缺血性脑病;血管紧张素转换酶基因;多态性

中图分类号:R722文献标识码:A枷溅tbec0删硝∞ofb啦isc蛐曲伐phalop利时ofthene州蛔and础崎m眦洳oftbe锄垂吨蛐删n-i119eII础ge腿哪峨me蝴0fP僳andRFLP嬲O胁睁砌,Ⅱ西b昭,.s洲球撕,以以.(优妣n’s融-

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Keywords:P(噩;R兀P;new妇l;11yp∞ic-ischeIllicene印halopathy;arlgiote璐inconve而119en劲啪gene;polyIIl0II雌锄

(凸梳-,肠脚l,2005,9:432)随着分子生物学和遗传学的发展,对新生儿缺氧缺血性脑病发病机制的分子水平研究逐渐深入,我们通过应用PCR—RnP分析方法检测新生儿缺氧缺血性脑病患儿血管紧张素转换酶基因多态性报道如下。1资料与方法1.1研究对象观察组选自2001年9月至2003年2月在长春市儿童医院新生儿科住院治疗的新生儿缺氧缺血性脑病患儿51例,均为足月儿,其中男27例,女24例。日龄1~4天,平均2天。本组患儿轻度7例,中度38例,重度6例。对照组选取门诊体检的正常新生儿53例,均为足月儿,其中男27例,女26例。日龄l~5天,平均3天,出生史正常。诊断及分度标准依照第五版儿科学。1.2实验方法

1.2.1主要试剂嘲DNA聚合酶、姗均为上海复生生物公司产品DNAlll£咄er为北京鼎国生物工程公司产品。引物为北京赛百胜公司合成,引物序列为:

ACE—F。5’一CTGGAGACCACI℃CCA代CTrI℃T.3’ACE-R,5’一GAⅡ翔GI:CCA_代ACATI℃G玎Q~Gf姐乙31.2.2DNA的提取抽取外周静脉血l111l,用2%乙二胺四乙酸100出抗凝,应用饱和酚一氯仿法提取白细胞DNA。

1.2.3ACE基因的体外扩增采用PCR技术扩增ACE基因,反应体系为50越,组成如下:10×Bu&r5出,M乎+(3M)4弘l,椰5皿,PriIner2出,TaqDNA聚

合酶2出,模板DNA2一。