毒死蜱人工抗原的合成及多克隆抗体制备
第７卷第５期现代农药Ｖ０１．７Ｎｏ．５２００８年１０月ＭｏｄｅｒｎＡｇｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｓＯｃｔ２００８
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毒死蜱人工抗原的合成及多克隆抗体制备
刘冰，魏松红’，李兴海，尹晓东，何智勇，白莹莹
（沈阳农业大学植物保护学院，沈阳１１０１６１）
摘要：由毒死蜱与３．巯基丙酸在碱性条件下反应，合成了毒死蜱半抗原。然后通过碳二亚胺法将毒死蜱半抗原分别与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清白蛋白（ＯＶＡ）共价偶联，得到了免疫抗原和包被抗原．用免疫抗原免疫兔子获得了高效价的多克隆抗体，抗血清效价达到了１：１６００００。
通过试验确立了毒死蜱标准曲线，检测限为０．５ｐｇ?Ｌ．１，抑制中浓度１５０为１８．２煺?Ｌ＿ｌ，检测缌｝生范围为１．８＂－，１０００ｌａｇ?Ｌ一．
关键词：毒死蜱；半抗原；人工抗原；多克隆抗体
中图分类号：ＴＱ４５３．２＋２文献标识码：Ａ文章编号：１６７Ｉ．５２８４（２００８）０５．００２９．０３
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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ；ｈａｐｔｅｎ；ａｎｔｉｇｅｎ；ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ
毒死蜱【ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ，Ｏ．Ｏ?二乙基一Ｏ一（３，５，６一三氯一２．吡啶基）硫逐磷酸酯】是有机磷类杀虫剂，主要应用于粮食、蔬菜、水果及经济作物的害虫防治【１１。它对哺乳动物毒性中等，但对非靶标水生生物毒性较高１２。】。随着毒死蜱广泛地应用于农业生产上，环境样品中发现毒死蜱残留的情况也日趋严重，对人的健康存在着潜在威胁【４。Ｊ。传统的检测方法不仅需要昂贵的仪器，而且前处理繁琐，很难达到快速、简便的检测要求。农药残留免疫分析技术具有方便快捷、分析容量大、分析费用低、仪器化要求不高等特点，迄今为止，国内外已有用酶联免疫吸附测定法（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ
收稿日期
基金项目
作者简介
通讯作者ａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）检测毒死蜱残留的报道‘６。０１。本文研究了毒死蜱半抗原、免疫抗原、包被抗原的合成，并制备出了效价较高的抗毒死蜱多克隆抗体，用于ＥＬＩＳＡ检测。
１材料与方法
１．１材料与仪器
１．１．１试验材料
毒死蜱原药（纯度＞９５％，山东华阳农药化工有限公司）；３．巯基丙酸（纯度Ｉ＞９８％，Ｆｌｕｋａ公司）；ＭⅣ一二环己基碳二亚胺（ＤＣＣ，上海共价化学科技有限公司）；弗氏完全佐剂（ｓｉｇｍａ公司）；弗氏不完
２００８—０５—２６
沈阳农业大学中、青年硕士生导师项目资助。
刘冰（１９８２—）。男，辽宁锦州人，硕士研究生。研究方向：农药学。Ｔｅｌ：０２４—８８４９３４５０；Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｕｂｉｎ９１２３＠１６３．ｃｏｍ魏松红。博士，副教授，硕士生导师。Ｔｅｌ：０２４—８８４９２６７３；Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｏｎｇｈｏｎｇｗｌ２５＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
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