玉米干旱诱导表达基因ZmCKS2的克隆与表达分析
第６期张中保等：玉米干旱诱导表达基因ＺｍＣＫＳ２的克隆与表达分析９４７
ＺｍＣＫＳ２基因上游２．４ｋｂ的序列，以此序列设计多对引物组合，以玉米自交系ＣＮｌ６５基因组ＤＮＡ为模板进行扩增，最终有一对引物在玉米自交系ＣＮｌ６５中扩增出２０４１ｂｐ的序列，所用的引物为ＣＫＳｐ－ＦＰ：５＇－ＧＴＧＧＴＡＧＴＴＧＡＣＡＴＴＧＧＣＧＡＡＧＡＴ－３’和ＣＫＳｐ—ＲＰ：５，．ＧＡＡＧＧＣＧＡＧＧＧＴＴＴＣＡＣＡＴＣＴＡＣ．３’，扩增程序为９４℃预变性５ｍｉｎ；９４℃３０Ｓ，６０℃３０Ｓ，７２℃９０Ｓ，４０个循环；７２＂Ｃ延伸１０ｍｉｎ。将扩增得到的ＰＣＲ产物连接至ｐＭＤｌ８．Ｔ载体，进行序列测定，重复３次。１．６实时荧光定量ＰＣＲ分析
依据ｑＲＴ－ＰＣＲ引物设计要求，使用ｐｒｉｍｅｒｐｒｅｍｉｅｒ５．０设计ＺｍＣＫＳ２特异引物（ｑＦＰ：５＇－ＣＧＡＣＡＣＣＴＡＴＧＡＡＴＡＣＡＧＧＣＡＣＧ一３’和ｑＲＰ：５＇－ＴＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＴＡＧＴＴＧＡＴ．３’），扩增长度为１９８ｂｐ。玉米内参基因ＧＡＰＤＨ（甘油醛．３一磷酸脱氢酶，
ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ－３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）用于数据分析时对不同样品ｃＤＮＡ模板量进行校准，所用引
物为５＇－ＣＣＣＴＴＣＡＴＣＡＣＣＡＣＧＧＡＣＴＡＣ．３’和５’一ＡＡＣＣＴＴＣＴｒＧＧＣＡＣＣＡＣＣＣＴ－３’。２０ｕＬＰＣＲ扩增体系含：１０止２ｘＳＹＢＲＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑ（ＴａＫａＲａ，大连），正反向引物各０．２Ｉ．ｔｍｏｌＬ－１和模板ｃＤＮＡ５０－１００ｎｇ。应用ｑＲＴ－ＰＣＲ专用９６孔板（Ａｘｙｇｅｎ，美国）和高透光率封口膜（Ａｘｙｇｅｎ，美国），荧光定量ＰＣＲ仪ＩｃｙｃｌｅｒＲｅａｌ—ＴｉｍｅＰＣＲＳｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ．Ｒａｄ，美国）和ＡＢｌ７０００（ＡＢＩＰｒｉｓｍ，美国）进行ｑＲＴ－ＰＣＲ分析，每个样品３次重复。ＰＣＲ程序为９５℃２ｍｉｎ；９５℃５Ｓ，５８℃１５Ｓ，７２℃２０Ｓ，共４０个循环；相对表达量Ｆｏｌｄｃｈａｎｇｅ＝２－从ｃ１。，此处△△Ｃｒ＝（ｃＴ锄ｃ艘一ｃＴ．ＧＡＰＤＨ）赴Ｈ一（ｃｒ．ＺｍＣＫＳ２一Ｃｒ一（＇＾ＰＤ日）对照‘训ｏ
１．７生物信息学分析
应用在线工具（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｕｔ－ａｒｌｅｓ．ｕｐ．ｕｎｉｖ—ｍｒｓ。
ｆｒ／ｗ３ｂｂ／ｄ＿ａｂｉｒｎ／ｃｏｍｐｏ．Ｐ．ｈｔｍｌ）分析ＺｍＣＫＳ２蛋白的分子量和等电点；应用ＮＣＢＩ数据库中ＣＤＡＲＴ（ＣｏｎｓｅｒｖｅｄＤｏｍａｉｎＡｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅＲｅｔｒｉｅｖａｌＴｏｏｌ，ｈｔｔｐ：／／ＷＷＷ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ／ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ．ｃｇｉ？ｃｍｄ＝ｒｐｓ）分析保守结构域；应用Ｃｌｕｓｔａｌｘｌ．８３进行多序列比对；应用ＭＥＧＡ４．０进行进化树分析。利用启动子在线分析软件Ｐｒｏｍｏｔｅｒ２．０（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／Ｐｒｏｍｏｔｅｒ／）进行启动子区的预测分析，并利用ＰＬＡＣＥ（ｐｌａｎｔｃｉｓ—ａｃｔｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｏｒｙＤＮＡｅｌｅ—ｍｅｒｉｔｓ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｎａ．ａｆｆｒｃ．ｇｏ．ｊｐ／ＰＬＡＣＥ／）对启动子顺式调控元件进行预测。２结果与分析
２．１ＺｍＣＫＳ２基因ｃＤＮＡｓ的克隆和序列分析序列分析表明，ＺｍＣＫＳ２基因ｃＤＮＡ全长（ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＧＵ５５６５６６）６１１ｂｐ（图１），开放阅读框２６７ｂｐ，编码８８个氨基酸，预测分子量为１．０６ｋＤ，等电点ｐＩ９．４１。
图ｌ玉米ＺｍＣＫＳ２基因的扩增结果
Ｆｉｇ．１ＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆＺｍＣＫＳ２
ｌ：ＰＣＲ产物：ＣＫ：阴性对照（ｄｄＨ２０）；Ｍ：分子量标准Ｔｒａｎｓ２Ｋ。
ｌ：ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓ；ＣＫ：ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｆｄｄＨ２０）；Ｍ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｍａｒｋｅｒＴｒａｎｓ２Ｋ．
２．２多序列比对及进化树分析
以ＺｍＣＫＳ２基因氨基酸序列为信息探针，应用ＮＣＢＩ中Ｂｌａｓｔｐ程序比对ＧｅｎＢａｎｋ的ＮＲ（ｎｏｎ—ｒｅｄｕｎｄａｎｔ）数据库及拟南芥、水稻数据库，从拟南芥、水稻、小麦、高粱、大豆及甘薯等植物中筛查出多个ＣＫＳ蛋白，表明ＣＫＳ蛋白普遍存在于高等植物中。将拟南芥两个ＣＫＳ蛋白ＣＫＳｌ、ＣＫＳ２和水稻、小麦、高粱、大豆的ＣＫＳ蛋白与ＺｍＣＫＳ２蛋白进行多序列比对，发现ＣＫＳ结构域在所有比对的蛋白中高度保守，但是在其Ｃ末端保守性较差（图２）。
为了进一步研究ＺｍＣＫＳ２蛋白与其他ＣＫＳ类蛋白的亲缘关系，构建了包含ＺｍＣＫＳ２以及其他ｌＯ个作物共１２个ＣＫＳ蛋白的系统进化树（图３）。结果表明，ＺｍＣＫＳ２与高粱ＣＫＳ及水稻的ＯｓＣＫＳ聚在一个分支，说明它们具有较近的亲缘关系。
２．３ＺｍＣ嬲２基因组ＤＮＡ序列扩增及分析ＺｍＣＫＳ２基因组ＤＮＡ在ＣＮｌ６５中全长４７９ｂｐ
（图４），在Ｂ７３中长度为４９０ｂｐ，均包含３个外显子和２个内含子；２个基因组ＤＮＡ同源性为９６％，在第２个内含子中存在７个碱基的差异。同时Ｂ７３中
ＤＮＡ存在一个２１碱基的ｐｏｌｙ（Ｃ）２Ｉ，而ＣＮｌ６５中为
作物学报第３６卷
图２ＺｍＣＫＳ２与拟南芥、水稻、小麦、高粱和大豆ＣＫＳ蛋白多序列比对
Ｆｉｇ．２ＡｍｉｎｏａｃｉｄａｌｉｇｎｍｅｎｔｏｆＺｍＣＫＳ２ｗｉｔｈＣＫＳｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ，ｒｉｃｅ，ｗｈｅａｔ，ｓｏｒｇｈｕｍ，ａｎｄｓｏｙｂｅａｎ
８２ＣＫＳ２
ｌｐｏｍｏｅａｔｒｉｆｉｄａ
２９ｊＣＫＳｌｌｐｏｍｏｅａｍｆｉｄａ
５１ＩＬ———一ＡｔＣＫＳＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ
厂１广一ｃＫｓｃ绷Ｐ胁ｓ妇脚捃
叫５１Ｈ＝＝。一。椭
ＡｔＣＫＳ２Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ
——ＣＫＳｌ
Ｐｏｐｕｌｕｓｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａ
ＣＫＳｍｆｉｃ柳ｌａｅｓｔｉｖｕｍ
ＯｓＣＫＳＩＯｒｙｚａｓａｔｉｖａ
●ＺｍＣＫＳ２Ｚｅａｍｏｙ￥
６５‘。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。一ＣＫＳＳｏｒｇｈｕｍｂｉｃｏｌｏｒ
Ｆ———叫
０．０ｌ
图３不同植物中ＣＫＳ蛋白与ＺｍＣＫＳ２的聚类分析
Ｆｉｇ．３ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣＫＳｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｓａｎｄＺｍＣＫＳ２
应用ＭＥＧＡ４．Ｏ软件分析植物中ＣＫＳ蛋白的亲源关系。
ＴｈｅＭＥＧＡ４．０ｐｒｏｇｒａｍｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｈｏｗｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｍｅｍｂｅｒｓｏｆｔｈｅＣＫＳｉｎｐｌａｎｔｓ
图４玉米ＺｍＣＫＳ２基因组ＤＮＡ扩增结果Ｆ－ｇ．４ＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆＺｍＣＫＳ２ｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡ１－２：ＰＣＲ产物；Ｍ：分子量标准Ｔｒａｎｓ２Ｋ。
ｌ—２：ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓ；Ｍ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒＴｒａｎｓ２Ｋ．
ｐｏｌｙ（Ｃ）６（Ｔ）３，缺少该ｐｏｌｙ（Ｃ）２１（图５）。经ＭａｉｚｅＧＤＢ比对分析，ＺｍＣＫＳ２基因位于玉米第一染色体ｂｉｎｌ．０１。
２．４ＺｍＣＫＳ２基因启动子的获得和反式作用元件的分析
ＺｍＣＫＳ２基因启动子序列的ＰＣＲ产物电泳结果见图６，测序结果表明，扩增片段为２０４１ｂｐ，与预测序列一致。应用植物启动子及其反式元件在线数据库ＰＬＡＣＥ对ＺｍＣＫＳ２启动子顺式作用元件进行预测。分析结果显示，ＺｍＣＫＳ２基因启动子存在典型的ＴＡＴＡ．ｂｏｘ和ＣＡＡ．Ｔ－ｂｏｘ（表１）。同时发现ＺｍＣＫＳ２启动子存在早期应答脱水胁迫顺式作用元件ＡＢＲＥＬＡＴＥＲＤｌ以及响应高盐、冷等非生物胁迫的顺式元件ＤＲＥＣＲＴＣＯＲＥＡＴ和ｗＢＯＸＮＴＥＲＦ３等。还有与水杨酸、氧化胁迫以及铜离子胁迫相关的顺式作用元件ＡＳＦｌＭＯＴＩＦＣＡＭＶ和ＣＵＲＥＣＯＲＥＣＲ等。此外。还发现与胚、胚乳及种子发育相关的调控元件ＣＡＮＢＮＮＡＰＡ以及光诱导、昼夜节律调节的典型顺式作用元件．１０ＰＥＨＶＰＳＢＤ。
２．５ＺｍＣＫＳ２基因在玉米不同器官中的表达分析应用实时荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测Ｚ锄Ｃ硒２基因在玉米幼叶、幼根、开花期根、穗位叶、花丝、幼穗、雄穗及幼胚中ｍＲＮＡ水平的表达。结果表明，ＺｍＣＫＳ２基因在玉米幼穗中的表达远高于幼根中。此外，ＺｍＣＫＳ２基因在玉米幼胚中的表达量也较高，但在幼叶中的表达量相对较低（图７），说明ＺｍＣＫＳ２
基因可能与幼穗的生长与发育及幼胚发育密切相关。
第６期张中保等：玉米干旱诱导表达基因ＺｍＣＫＳ２的克隆与表达分析９４９
图５自交系Ｂ７３与ＣＮｌ６５中ＺｍＣＫＳ２基因组ＤＮＡ比较分析
Ｆｉｇ．５ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＺｍＣＫＳ２ｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｉｎｍａｉｚｅｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅｓＢ７３ａｎｄＣＮｌ６５
图６玉米Ｚｍａ龉２启动子扩增结果
Ｆｉｇ．６ＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｏｔｚｍｃＫｓ２ｐｒｏｍｏｔｅｒ
１－２：ＰＣＲ产物（２０４１ｂｐ）；ＣＫ：阴性对照（ｄｄＨ２０）；Ｍ：分子量标
准Ｔｒａｎｓ２Ｋ。
Ｉ一２：ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｓ（２０４１ｂｐ）；ＣＫ：ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ（ｄｄＨ２０）；
Ｍ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒＴｒａｎｓ２Ｋ．２．６Ｚｍ删基因应答逆境胁迫表达分析我们从前期构建的ＳＳＨ文库１９ｉ，发现ＺｍＣＫＳ２基因受土壤干旱胁迫诱导上调表达，为了进一步研究该基因在逆境胁迫应答中的表达模式，用脱水干旱、低温（４℃）、ＮａＣｌ（２５０ｍｍｏｌＬ．１）、ＡＢＡ（１００ｔｔｍｏｌＬ＿１）和ＭｅＪＡ（１００ｇｍｏｌＬ－１）处理玉米自交系ＣＮｌ６５三叶期幼苗，分别研究ＺｍＣＫＳ２基因在ＣＮｌ６５地上部分和地下部分的表达模式（ＡＢＡ和ＭｅＪＡ处理只研究地上部分）。结果表明，在脱水处理下，ＺｍＣＫＳ２基因在地上部分和地下部分均表现上调表达趋势。地上部分在处理２ｈ后上调表达２倍（上调表达２倍为显著上调表达；下调表达０．５倍为显著下调表达），至１０ｈ上调表达３．５倍；而在地下部分，处理至２４ｈ时，上调倍数达到２．１（图８．Ａ）。
在ＮａＣｌ处理条件下，无论是地上部分还是地下部分，均未达到显著的上调或下调表达趋势（图８．Ｂ）。在４＂Ｃ低温处理条件下，地下部分无显著变化，而地上部分表现下调表达的趋势，处理１ｈ后，下调表达即达对照的Ｏ．２５倍，处理至１０ｈ和２４ｈ时，下调表达倍数分别为０．１６和０．３０（图８．Ｃ）。
ＺｍＣＫＳ２基因在应答ＡＢＡ和ＭｅＪＡ两个外源激素处理时表现出不同的表达模式，在ＡＢＡ处理下为下调表达，而在ＭｅＪＡ处理下为上调表达。ＡＢＡ处理ｌ、２、５和１０ｈ，ＺｍＣＫＳ２下调表达倍数分别为０．４３、０．８７、０．７ｌ和０．４６（图８．Ｄ）。ＭｅＪＡ处理５ｈ时上调表达至２．１倍（图８．Ｅ）。
本结果表明ＺｍＣＫＳ２基因在应答干旱胁迫和ＭｅＪＡ时表现上调表达趋势，而在低温处理时表现下调表达趋势。而且这些应答过程可能是通过不依赖ＡＢＡ途径进行的。
３讨论
干旱是影响植物生长发育最重要、最普遍的逆境因子【１０１。植物主要通过两类基因对其进行反应，一是启动参与信号转导和调节代谢途径的基因，二是启动编码胁迫耐受蛋白以及参与结构和功能代谢相关酶的基因【ｎ－１２］。本研究从玉米中克隆了一个受干旱胁迫诱导的ＣＫＳ家族基因，其编码产物与拟南芥ＡｔＣＫＳ２相似性很高，被命名为ＺｍＣＫＳ２基因。多序列比对及进化树分析表明，该基因编码蛋白与高粱和水稻的ＣＫＳ蛋白相似性最高，分别为８２％和８１％；与拟南芥ＡｔＣＫＳｌ和ＡｔＣＫＳ２蛋白相似性分别
是７８％和７７％。
９５２
作物学报
第３６卷
Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１。２５：加２—４０８
【９】Ｉ．ｉＨ—Ｙ（李会勇），ＨｕａｎｇＳ－Ｈ（黄素华），ＺｈａｏＪ－Ｒ（赵久然），Ｗａｎｇ
Ｆ－Ｇ（王风格），珏柚ｇＺ－Ｂ（张中保），ＭａｏＹ—Ｈ（毛毅辉），Ｗａｎｇ
Ｘ－Ｔ（王秀堂）＇ＳｈｉＹ—Ｓ（石云素），ＳｏｎｇＹ?ｃ（宋燕春），ＷａｎｇＧ—Ｙ（王国英），ＬｉＹ（黎裕），ＷａｎｇＴ－Ｙ（王天宇）．Ｉｓｏｌａｔｉｎｇｓｏｉｌ
ｄｒｏｕｇｈｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅｓｆｒｏｍｍａｉｚｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｌｅａｖｅｓｔｈｒｏｕｇｈｓｕｐ－ｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｅｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ．Ｓｃｉ
Ａｇｒｉｃ
Ｓｉｎ（中国农业科
学），２００７，４０（５）：８８２—８８８（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅｗｉｔｈＥｎｇｌｉｓｈａｂｓｔｒａｃｔ）【１０】Ｌｊ乙Ｌ（李智念），ＷａｎｇＧ—Ｍ（王光明），Ｚｅｎｇｚ－ｗ（曾之文）．１ｋ
ｓｔｕｄｙｏｎＡＢＡｉｎｐｌａｎｔｕｎｄｅｒ
ｄｒｏｕ【ｇｈｔＳｆｆｅＳＳ．ＡｇｒｉｃＲｅｓｉｎｔｈｅＡｒｉｄ
Ａｒｅａｓ（干旱地区农业研究），２００３，２１（２）：９９—１０４（ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｗｉｔｈＥｎｇｌｉｓｈａｂｓｔｒａｃｔ）
【ｌ１】ＳｅｋｉＭ，ＫａｍｅｉＡ，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ－Ｓｈｉｎｏｚａｋｉｌ【’ＳｈｉｎｏｚａｋｉＫ．Ｍｏ－
ｌｅｅｕｌａｒｒｅｓｐｏｎｓｅｓ
ｔｏ
ｄｒｏｕｇｈｔ，ｓａｌｉｎｉｔｙａｎｄｆｒｏｓｔ：ｃｏｍｎｌｏｎａｎｄｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔｐａｔｈｓｆｏｒｐｌａｎｔｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．ＣｕｒｒＯｐｉｎＢｉｏｔｅｃｈ，２００３。１４：１９４一１９９
《进化》
ＳｈｉｎｏｚａｋｉＫ，Ｙａｍａｇｕｃｈｉ－Ｓｈｉｎｏｚａｋｉｌ（＇ＳｅｋｉＭ．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ｎｅｔ－
ｗｏｒｋｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅｄｒｏｕｇｈｔａｎｄｃｏｌｄ
ｓｔｒｅｓｓ
ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．
ＣｕｒｔＯｐｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌ，２００３，６：４１０＿４１７
ＶａｎｄｅｐｏｅｌｅＫ，ＲａｇｓＪ，ＤｅＶｅｙｌｄｅｒＬ，Ｒｏｕｚ６ＥＲｏｍｂａｕｔｓＳ，Ｉｎｚ６
Ｄ．Ｇｅｎｏｍｅ—ｗｉｄｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆ
ｃｏｒｃ
ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｇｅｎｅｓｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ．
ＰｋｎｔＣｅｌｌ。２００２，１４：９０３—９１６
ＤｉｌｌＲ
Ｆ’ＫｅｒｒＦＫｄｅ
Ｆｉｇｕｅｉｒｅｄｏ只ＤｅｌｒｏｗＪ，ＣｏｍａＬ，ＮｅｓｔｅｒＥ
Ｗ．ＴｈｅＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｔＯＡｇｒｏ?
ｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ．ＭｏｌＰｌａｎｔ－ＭｉｃｒｏｂｅＩｎｔｅｒａｃｔ。２００６。１９：
６６５—６８ｌ
ＧｕａｎＹ．ＮｏｔｈｎａｇｅｌＥＡ．ＢｉｎｄｉｎｇｏｆａｒａｂｉｎｏｇａｌａｅｔａｎｐｒｏｔｅｉｎｓｂｙＹａｒｉｖ
ｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｏｓｉｄｅｔｒｉｇｇｅｒｓｗｏｕｎｄ?－ｌｉｋｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎＡｒａｂｉ??
ｄｏｐｓ妇ｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓ．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，２００４，１３５：１３４６一１３６６
ＸｉｅＸ－ｚ（谢先芝）．ＷｕＮ－Ｈ（吴乃虎）．Ｉｎｔｒｏｎｉｎｈｉｇｈｐｌａｎｔ．ＣｈｉｎＳｃｉ
Ｂｕｌｌ（科学通报），２００２，４７（１７）：７３１—７３７（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅｗｉｔｈ
Ｅｎｇｌｉｓｈ
ａｂｓｔｒａｃｔ）
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ｍ
ｍ
畔
吣
嘶
玉米干旱诱导表达基因ZmCKS2的克隆与表达分析
作者：黎裕， 张中保， 卢敏， 李会勇， 张登峰， 刘颖慧， 石云素， 宋燕春， 王天宇，ZHANG Zhong-Bao， LU Min， LI Hui-Yong， ZHANG Deng-Feng， LIU Ying-Hui， SHI
Yun-Su， SONG Yan-Chun， WANG Tian-Yu， LI Yu
作者单位：黎裕,张中保,卢敏,张登峰,石云素,宋燕春,王天宇,ZHANG Zhong-Bao,LU Min,LI Hui-
Yong,LIU Ying-Hui,SONG Yan-Chun,WANG Tian-Yu,LI Yu(中国农业科学院作物科学研究所
,北京,100081)， 李会勇,ZHANG Deng-Feng(中国农业科学院作物科学研究所,北京
,100081;河南省农业科学院粮食作物研究所,河南郑州,450002)， 刘颖慧,SHI Yun-Su(中国
农业科学院作物科学研究所,北京,100081;河北北方学院,河北张家口,075000)
刊名：
作物学报
英文刊名：ACTA AGRONOMICA SINICA
年，卷(期)：2010,36(6)
参考文献(16条)
1.Huntley R P.Murray J A H The plant cell cycle 1999
2.Dewitte W.Murray J A H The plant cell cycle 2003
3.Reynard G J.Reynolds W.Verma R.Deshaies R J Cksl is required for Gl cyclin-cyclin-dependent kinase activity in budding yeast 2000
4.Martinsson-Ablzen H.Liberal V.Grilnenfelder B.Chaves S R Spruck C H Reed S I Cyclin-dependent kinase-associated proteins Cksl and Cks2 are essential during early embryogenesis and for cell cycle progression in somatic cells 2008
5.De Veylder L.Segers G.Glab N.Casteels P Van Montagu M Inze D The Arabidopsis Cksl At protein binds the cyclin-dependent kinases Cdc2aAt and Cdc2bAt 1997
6.Jacqtnard A.De Veylder L.Segers G.de Almeida Engler J Bernier G Montagu M V Inze D Expression of CKSlAt in Arabidopsis thaliana indicates a role for the protein in both the mitotic and the endoreduplication cycle 1999
7.Vandepoele K.Raes J.De Veylder L.Rouze P Rombauts S Inze D Genome-wide analysis of core cell cycle genes in Arabidopsis 2002
8.Livak K J.Schmittgen T D Analysis of relative gene expression data using Real-time quantitative PCR and the 2-△△CT method 2001
9.李会勇.黄素华.赵久然.王凤格.张中保.毛毅辉.王秀堂.石云素.宋燕春.王国英.黎裕.王天宇Isolating soil drought-induced genes from maize seedlings leaves through suppression subtractive hybridization 2007(5)
10.李智念.王光明.曾之文The study on ABA in plant under drought stress 2003(2)
11.Seki M.Kamei A.Yamaguchi-Shinozaki K.Shinozaki K Molecular responses to drought,salinity and frost:common and different paths for plant protection 2003
12.Shinozaki K.Yamaguchi-Shinozaki K.Seki M Regulatory network of gene expression in the drought and cold stress responses 2003
13.Vandepoele K.Raes J.De Veylder L.Rouze P Rombauts S Inz(e) D Genome-wide analysis of core cell cycle genes in Arabidopsis 2002
14.Ditt R F.Kerr F K.de Figueiredo P.Delrow J Coma L Nester E W The Arabidopsis thaliana
15.Guan Y.Nothnagel E A Binding of arabinogalactan proteins by Yariv phenylglycoside triggers wound-like responses in Arabidopsis cell cultures 2004
16.谢先芝.吴乃虎Intron in high plant 2002(17)
本文链接：https://www.wendangku.net/doc/195061797.html,/Periodical_zuowxb201006008.aspx