澳大利亚蜂蜜中的羟甲基糠醛与淀粉酶含量
澳大利亚蜂蜜中的羟甲基糠醛与淀粉酶含量
摘要
澳洲蜂蜜样品(加工及未加工)的质量是用来评估HPLC技术。羟甲基糠醛作为主要的质量指标。包括四个经过商业加工的蜂蜜样品（澳大利亚雨林,Beechworth、homebrand和Leabrook)和三个未加工的蜂蜜样品(Banksia、灰盒子和Mallee)。所有样品,除了Leabrook和Beechworth,中的初始羟甲基糠醛(HMF)含量低于法典委员会标准和国际蜂蜜标准(40毫克/公斤)外，其余样品都高出标准。Leabrook和Beechworth中的羟甲基糠醛分别为50.8±1.34毫克/公斤和74.9 ±234毫克/公斤。在85°加热未加工的蜂蜜2分钟造成显著(p≤ 0.05)蓄积的羟甲基糠醛含量。在85°C加热2分钟后Mallee的样品中羟甲基糠醛的量从34.0±0.31增加到42.3±0.37毫克/公斤。所有的蜂蜜淀粉酶活性样品显示超过最低限度(8 Gothes)。蜂蜜成品的理化性质的变化有明显的样品。结果显示,加热也并不是唯一的影响羟甲基糠醛(HMF)在蜂蜜中形成的因素,还有蜂蜜的成分、pH值和植物源可导致这些变化。因此,一定数量的羟甲基糠醛(HMF)可能不是一个唯一的蜂蜜质量指标。
关键词: 羟甲基糠醛;Gothe单位数,淀粉酶活性;加工过的蜂蜜；新鲜蜂蜜。
1．介绍
澳大利亚新西兰食品标准 (FSANZ,2006年)规定了蜂蜜的定义即蜜蜂是从花朵或植物的生命部位所分泌的物质中制造出的自然甜美的物质。它必须包含至少60%的还原糖和不超过21%的水分。蜂蜜成分是高度受到蜂蜜所采的花朵的类型、区域和气候条件的影响(门德斯,Proenca、费雷拉、和费雷拉,1998)。
澳大利亚是世界上第四大蜂蜜出口国。在澳大利亚蜂蜜行业每年至少价值达6500万美元。新南威尔士是蜂蜜的主要生产者,占总产量的45%。制造出的蜂蜜有一半是在国内消费的,而剩下的则出口(澳大利亚蜂蜜工业委员会,2004年)。在澳大利亚桉树代表了生产蜂蜜的主要本土植物(78%)（吉布斯和Muirhead，1998)。约有95%的桉树构成了安大利亚的植被,统治了森林植被中的约550-600个不同类型的物种和品种,还有许多杂交物种(凯莉,1983)。
加热新鲜蜂蜜通常是为了方便加工和保持良好的质量。然而过度热处理会形成羟甲基糠醛(HMF)以及降低蜂蜜质量。羟甲基糠醛的量在新鲜蜂蜜中几乎没有或很低 ,而在加热过的蜂蜜中含量很高,它们储存在不适当的条件,或搀假在逆变糖浆中(Nozal伯纳作了开题报告,Toribio,希门尼斯,马丁,先后,2001)。蜂蜜的理化性质如酸碱度,矿物含量和总酸度也会影响羟甲基糠醛含量。在有机酸存在和低水分活动的情况下,也会影响产品中的羟甲基糠醛含量 (Kalabova ,Borkovcova ,Smutna,和Vecerek,2003)。食品法典(2001)和国际蜂蜜委员会 (2002)设定了最大的羟甲基糠醛浓度：非热带地
区为40毫克/公斤、热带地区为80毫克/公斤。极高的羟甲基糠醛值(> 500毫克/公斤)证明了糖浆
的逆变掺假(Novelli椰子、Valentini,及Ceccon,1996)。
食品法典(2001)提出了蜂蜜的两种质量指标,即羟甲基糠醛值、淀粉酶活性来衡量蜂蜜的新鲜程度。许多国家已经建立了限制蜂蜜中羟甲基糠醛的含量为40毫克/公斤。
在澳大利亚维多利亚市蜂蜜的生产很大程度上依赖于本土植物和各种作物,比如苹果、梨子、樱桃、浆果、对话、奇异果和蔬菜。特定的植物物种和农作物生产的蜂蜜在颜色和风味上有特定的特点。蜂蜜可以从植物源的甘露或者通过的那个城镇的名字来分类。大多数的澳洲天然蜂蜜使用了一个主要来源特定的植物花蜜。例如,灰盒子蜂蜜是在桉树 (灰色盒子)之后被命名的,这是一种有25米高的中等大小的树。花蕾出现在12月初，开花是在三月初持续到五月底,也有持续到冬季的(Heathmont Honey.开花,2009年)。班克西亚椤的淡红桔黄色的花的是地道的蜂蜜颜色。班克西亚椤是周围170个山龙
眼科的物种之一。它们是澳大利亚标志性的野花和受欢迎的的花园植物,很容易被认可,因为他们独特的锥花刺以及圆锥形的果实，可以从匍匐的灌木到达30米高的树(Banksia Integrifolia.,2009年)。然而,Mallee蜂蜜是以西北部的一座城市命名的,它是澳大利亚维多利亚州的一条狭窄的灌溉土地带, 种植葡萄、柑橘、小麦等,并且生产奶制品以及养殖羊。Mallee据说是来自一个桉树的指示性土著物种,因此我们才有了Mallee蜂蜜,这主要取决于作为蜂蜜来源的桉树家族(《大英百科全书》Encyclopedia.,2009年)。此外,一些商业蜂蜜制品常常来源于混合而成的花，然后被贴上的野花蜂
蜜的标签(澳大利亚雨林)或花园蜂蜜(Beechworth和Leabrook) ,或混合提取后的蜂蜜(Homebrand)。
尽管有很多国际科学组织调查了蜂蜜中的酶以及其物理化学性质,但是关于澳大利亚蜂蜜标准的质量检测方法依旧缺乏。另外, 由于廉价的果糖玉米糖浆的大量生产，纯蜂蜜掺假和合成蜂蜜的现象近年来已更普遍,更难被发现的,。因此,这个项目的开发有助于彻底检查澳洲蜂蜜和确认一个与法典标准相比的羟甲基糠醛(HMF)含量的理化性能。
2材料和方法
2.1实验设计
新鲜的未加工的蜂蜜样本,来自于在东北的维多利亚(Mallee)的第一产业部门(新闻部),包括Mallee和灰色盒子,Banksia蜂蜜。每一个新鲜的未加工的蜂蜜样品重500克,并且是2006年那一季的。2006年7月澳大利亚商业加工过的蜂蜜样品(每份500克)被购买于墨尔本的当地超市,包括澳大利亚雨林,Banksia Leabrook和Beechworth,。原始容器中的样品在室温下被保存在一个黑暗的房间 ,整个分析于2006年11月中旬完成。每个蜂蜜样品被分成了三个地区农业机械化的发展代表, 并重复
3次。所有的分析处理至少3次。
2.2蜂蜜样品的热处理
取蜂蜜样品5克于猎鹰管 (BD生物科学、富兰克林湖泊、台北) 中, 分别置于65°C, 77°C和85°C的水槽(Thermoline，澳大利亚)中保持2分钟后，在冰水浴中冷却4分钟。经过热处理的样品用于分析其淀粉酶活性以及羟甲基糠醛(HMF)值。
2.3材料
羟甲基糠醛(HMF) 的分析标准,来自西格玛奥德里奇(Steinheim、德国)的。
分析级别的硫酸，来自Univar公司(新南威尔士、Sevenhills Univar澳大利亚)。
甲醇的高效液相色谱级，来源于默克公司(Kilsyth,维克,澳大利亚)。
水是采用Milli-Q水系统洁净的，来源于Millipore(MA)贝德福德的新家。
所有其他化学物质被购买从当地的化学品储存在校园里。
2.4蜂蜜的含水量、pH、游离酸度,内酯和总酸度的测定
直接烘干法是确定含水率的一个标准方法。在该方法中,取2.5 g的蜂蜜样品置于铝盘中,混合着2克的分析级别的酸洗砂，在105°C烤箱里干燥,使用该方法的是国际蜂蜜委员会(2002)。pH值的测定是将10克蜂蜜置于含有75ml二氧化碳自由水溶液的250ml烧杯中 (PHM 210标准的pH仪、研究生实验室、辐射计、哥本哈根)。游离酸度和总酸度是用滴定法(国际蜂蜜委员会,2002)来测定,并且按下面方程计算:
游离酸度=(消耗的0.05mol/L的NaOH溶液的毫升数—空白样品的毫升数)×50(样品克数)
内酯=（10.00—消耗的0.05mol/L的HCl溶液的毫升数）×50(样品克数)
总酸度=游离酸度＋内酯
2.5颜色的测量
颜色是用美能达颜色测量仪 (东京,日本)来测定,通过一种具体表现形式以避免蜂蜜样品的变质。将蜂蜜样品(15克)倒进一个一次性小培养皿(55毫米×14毫米)中,盖上盖子,在室温下放置20分钟,然后用颜色测量仪测量(Ajlouni,2006)。在上述三种不同的温度下测出读数,并且计算平均值。
2.6淀粉酶活性的评价
将热处理后的蜂蜜(5克) 溶解在含有15毫升Milli-Q水和5毫升醋酸的缓冲溶液(pH 5.3)中,并转移到一个含有3毫升氯化钠溶液的50ml容量瓶中并稀释至刻度。用立方体加样器取10毫升蜂蜜和10毫升1%的淀粉溶液分别置于两个50ml烧瓶中,然后放置在40°C水浴中。15分钟后,取5毫升
淀粉溶液加入蜂蜜中,混合并定时。在一个周期内,在第一个五分钟后,取0.5毫升的混合物并将其与5毫升稀释碘溶液和22毫升Milli-Q水混合,以水为空白样在波长660nm处测定吸光度。在吸收率为0.235时，用吸光率与时间的关系图确定时间。淀粉酶数量的计算按照国际蜂蜜委员会中提到的方法(2002)。
2.7双糖,葡萄糖和果糖的含量的测定
糖成分主要由一个配有示差折光检测器(HPLC-RI )的高效液相色谱 (Shimadzu,日本东京)在30°C时测定。将1克蜂蜜样品溶解在19毫升的Milli-Q水中,并用0.22μm的尼龙过滤至一个高效液相色谱小瓶,盖好盖子后用针筒取20μl注射进高效液相色谱柱中。色谱柱为C-610H ，
30cm×7.8mm，配有一个C-610H ,4.6 mm×5cmI.D.col:H + 11,855的备用柱。流动相是流量为0.75毫升/分钟的0.005 M的硫酸。外部标准溶液的校准曲线是用来建造量化样品(国际蜂蜜委员会,2002年)中糖含量的。结果表现为每100克蜂蜜中含有1g糖。
2.8 HMF的定量
将蜂蜜样品（5克）溶于约25毫升Milli - Q水并转移至50毫升容量瓶中。为了澄清蜂蜜样品，并阻止羟甲基糠醛分解，将0.5ml 15％亚铁氰化钾溶液和0.5ml的30％脱水乙酸锌溶液加入上述溶液中并用Milli - Q水定容到50毫升。通过瓦特曼滤纸过滤后，丢弃前10毫升的滤液。在高效液相色谱分析前，将滤液通过0.22μm微孔滤膜过滤（国际蜂蜜委员会，2002年）。高效液相色谱柱是由一个SCL- 10A的系统控制器，一个LC - 10AT的液相色谱仪，一个FCV- 10AL的泵，一个DGU - 14A的脱气装置和来自南港岛津（东京，日本）的SIL 10AD自动注射器组成。高效液相色谱柱用的是型号为Supelcosil LC - 18，反相是不锈钢柱（(Supelco,Bellefonte, PA）（25厘米× 4.6 mm内径;薄膜厚度5微米），并连同型号为C18的保护柱在30 ° C时操作。流动相是流速为0.75毫升/微升的甲醇水溶液（水和甲醇的体积比为90:10），注射量为20μL。HMF（1-50毫克/升）的校准曲线是在285 nm测定的，且空白样品为在Milli - Q水。
2.9 统计分析
Minitab 14被用来获得数据的统计分析。方差分析（单因素方差分析）用来研究不同温度对羟甲基糠醛、淀粉酶活性及糖类含量的影响。 F -检验（α= 0.05）来检验蜂蜜样品中有无明显的差别。这之间的差异，决定了在5％水平上使用杜克测试的意义。
3 结果与讨论
3.1蜂蜜的pH值
蜂蜜样品的pH值的变化范围为4.02至4.69。这些值在Chandler, Fenwick, Orlova, and Reynolds (1974)所报道的3.81-6.32的范围内。班克西亚蜂蜜被发现具有最高的pH值4.69（见表1）。然而，这
个高pH值仍低于澳大利亚蜂蜜的最高值pH值6.32（Chandler等人，1974）。pH值是统计了所有样品（p≤0.05），以及Leabrook和Banksia分别从4.02 ± 0.01 至4.69 ±0.01的不同pH值。蜂蜜的pH值在提取和存储时非常重要，因为酸性能影响蜂蜜的质感，稳定，保质期 (Terrab,Diez, & Heredia, 2003).。
3.2蜂蜜的总酸度
Homebrand and Banksia蜂蜜的总酸度分别介于33.5 ± 0.35至53.5 ± 0.18 毫当量酸/公斤。这些数值均大于由Mossel（2003）报道的那些13.1-31.9毫当量酸/公斤，并且小于由Bath and Singh (1999)所报道的桉树蜂蜜的60毫当量酸/公斤。蜂蜜的酸度是由于有机酸特别是葡萄糖酸内酯及其酯，无机离子如磷酸盐，氯化物均衡的存在所形成的。El- Sherbiny和Rizk（1979）报告说，在棉花中蜂蜜总酸度高于三叶草蜂蜜。此外，Fallico, Zappala, Arena, and Verzara (2004)发现，桉树蜂蜜有最高的游离酸，内酯含量，比橘子，板栗，和苏拉蜂蜜中的总酸度含量高。这些数据表明在蜂蜜中的总酸度受花香的影响。不同蜂蜜总酸度的不同也可能是由于由于收获季节的变化(Singh &
Bath,1996).。
3.3 蜂蜜的游离酸度
七个样品中的游离酸度都在食品法典（2001年）规定的50毫当量酸/公斤的允许范围内。在这项研究中Grey box和Banksia蜂蜜的所有样品的游离酸度分别介于10.25± 0.01至20.34 ± 0.18毫当量酸/公斤（见表1）。高游离酸度值可能表明蜂蜜中的糖分在发酵。众所周知，在发酵时，葡萄糖和果糖是转化为二氧化碳和酒精。进一步水解酒精产生氧气，并转化为乙酸，从而有助于维持蜂蜜中的游离酸度水平。在Leabrook,Beechworth 和 Mallee蜂蜜中的游离酸度值无显著差异（P> 0.05）。
3.4 内酯含量
除Homebrand（18.5毫当量 /公斤）的所有蜂蜜样品中的内酯含量有大于30 毫当量/公斤的。这些值是类似于Bath和Singh（1999）报道的的35 毫当量酸/公斤。内酯和总酸含量的简单比较发现，有最低内酯含量（Homebrand）的蜂蜜样品也有最低的总酸度（见表1）。这些研究表明了内酯是蜂蜜中总酸的主要贡献者。
3.5 水分含量
所有样品的水分值均在食品标准局（2006年）规定的21％的限制范围内。该研究中的蜂蜜样品水分含量为10.6％至17.8％（见表1）。正如文献显示的酸度一样，蜂蜜中水分含量差异很大。Chandler 等人（1974）报道了澳大利亚蜂蜜水分含量的范围为13.6-17.4％。这些数值均小于Gidamis，Chove，Shayo，Nnko和Bangu（2004）报道的坦桑尼亚蜂蜜的21.6-22.8％，和Joshi, Pechhacker,William,和Ohe (2000)报道的菲律宾蜂蜜的22.0-23.1％。这些发现连同本研究结果清楚地表明，蜂蜜中水分含量是受植物源，地理和气候条件和季节所影响的。Fallico等人（2004）报道，澳大利亚桉树花源的蜂蜜一般水分含量较低。高水分则（大于21％）表示蜂蜜被过早提取或是在高湿度条件下提取的。
3.6 颜色分析
蜂蜜样品L*、a*和b *值见表2。L *值表示的轻盈度，阳性a*表示红色成分，阴性a*表示绿色成分，阳性b *表示黄色成分，阴性b *值表示蓝色成分。利布鲁克蜂蜜含有了绿色和黄色成分，而澳大利亚热带雨林和Grey box两种蜂蜜含有红色和蓝色成分。Beechworth, Homebrand,Banksia and Mallee蜂蜜被发现有些发红，发黄。这些结果与发现印度品牌的蜂蜜有红色和黄色成分的Anupama,Bhat, and Sapna (2003)一致。澳大利亚热带雨林蜂蜜从L *值（101.27 ± 0.34）来看展示了最大程度的亮度，而Grey box 的蜂蜜样品展示了80.81 ± 0.06以上的亮度。一般桉树蜂蜜比其他蜂蜜颜色深（Chandler等人，1974）。
3.7 含糖量
除班克西亚的所有蜂蜜样品，范围有从82.4％的Grey box至86.0%的利布鲁克样品的总糖量。班克西亚具有最低总糖含量68.1％（见表3）。类似的结果也反映在班克西亚的果糖和葡萄糖含量。然而，分析结果显示在加工和未加工的蜂蜜样品中总糖含量无显著性的差异（P>0.05）。除班克西亚蜂蜜中的果糖含量为30.8％外，结果与发现15种澳大利亚蜂蜜中的果糖平均浓度从32.6至41.7 g/100g的Mossel报告（2003年）的一样。果糖与葡萄糖的比例介于Homebrand 的1.1至Beechworth的1.27（见表3）。这种对不同来源的蜂蜜高果糖比例的总趋势是有据可查的。White（1980）报道，果糖：葡萄糖的平均比例为1:2，这与这项研究中获得的平均值（1.17）类似。高果糖比例的蜂蜜将保持较长时间的液体状态，由于果糖的量较大时饱和葡萄糖溶液存在的时间较长(White, Kushnir, & Subers, 1964)。蜂蜜中果糖与葡萄糖的实际比例在很大程度上取决于花蜜（Anklam，1998年）的来源。果糖与葡萄糖的比例也有可能影响蜂蜜的味道，因为果糖比葡萄糖的更甜。
与各种加工和未加工的蜂蜜样品中单糖含量所不同的是，量化糖含量则较低，范围从10.1％的Mallee样品到15.2%的Leabrook样品。这些结果与Terrab等（2003年）报道的结果一致。Terrab 等人是发现果糖和葡萄糖含量占总糖含量的92％，而占量化糖含量的73％。
3.8 淀粉酶活性分析
淀粉酶的活性通常表示为淀粉编号，符号为DN，单位也被称为酶活力。酶活力单位定义为在40℃下，在一小时内由1克蜂蜜的酶液能水解的1％淀粉溶液的毫升数（蜂蜜国际委员会，2002年）。商用蜂蜜最初的淀粉酶活性介于9.43±0.30至22.1±1.09之间，而未加工的蜂蜜介于从17.6±0.35至25.4±0.54之间（见表4）。这些值是与澳大利亚蜂蜜Chandler et al. (1974)报道的结果一致。
两种商用蜂蜜样品（澳大利亚雨林和Homebrand）与新鲜样品相比有较高的初始DN值，而Leabrook 和 Beechworth含有最低初始DN值（分别为9.43 ± 0.3和10.6 ± 1.05）。这些商用蜂蜜样品DN 值低可能表明，热处理会造成淀粉酶含量显着下降。未处理的Mallee样品具有最高的初始DN（25.4 ± 0.54），其次是班克西亚样品（18.4 ± 0.13）和Grey box样品（17.6 ± 0.35）。
在65 ℃，77 ° C和85 ° C水浴下将蜂蜜样品加热2分钟，揭示了温度和淀粉酶破坏程度呈正相关。85 ℃会导致淀粉酶活性最大程度的下降（表4）。然而，最初的DN值并不会影响淀粉酶失
活的水平。最小初始DN值（9.43，Leabrook）蜂蜜样品和最大初始DN值（25.4，Mallee）在在85℃下加热2分钟损失的淀粉酶活性比例（19-19.5％）类似。同样的数据还显示，所有被测样品除Leabrook 蜂蜜外，可加热至85 ℃，而其余的DN值高于最低限额（8 DN）。因此，其他质量指标如转化活性，比淀粉酶热敏性高应被使用(Oddo, Piazza, & Pulcini 2006)。Tosi,Re, Lucero, 和 Bulacio (2004)的研究表明，在80℃下加热1.2小时可以摧毁淀粉酶活性，而目前只用8.6分钟灭活。
3.9商业蜂蜜样品的HMF含量
澳大利亚热带雨林和Homebrand蜂蜜揭示了HMF的初始含量分别为2.22和17.7毫克/公斤，这都在低于40毫克/公斤的国际标准范围（见表5）。这两个样品较Leabrook和Beechworth（表4）具有较大的淀粉酶的活性。因此，澳大利亚热带雨林和Homebrand蜂蜜样品在适当的温度条件下进行了处理和储存。
相反，Beachworth和Leabrook含有过高的初始HMF值（50.8和74.9mg/kg）和羟甲基糠醛的水平分别超过国际限量标准。此外，还发现这两个蜂蜜淀粉酶活性较低（见表4）。由于无论是美拉德反应还是在酸性条件下脱水（加热减少蛋白质糖）都可形成羟甲基糠醛，可以得出结论，Leabrook 和Beachworth两种样品高含量羟甲基糠醛与低酶活可能是由于不恰当的热处理和储存条件。此外，作为全国蜂蜜大部分来源的桉树，由于维多利亚在过去数年中经历了干旱，这可能会影响到各种桉树开花的能力，从而导致蜜蜂养殖人用廉价的果糖玉米糖浆喂养蜜蜂。蜜蜂可以喂各种食物，以补充蜂蜜花粉的供应不足。Kerkvliet和Meijer（2000）报告说，掺假50％便宜的果糖糖浆会使得蜂蜜中的HMF值比纯蜂蜜中的HMF高两倍。初春，在花粉和花蜜产生前或在年中时，这些材料供应不足，补充饲料可以有助于养蜂人的生存和生产(Ozcan, Arslan, &Ceylan, 2006) 。另一个影响蜂蜜的HMF含量的因素是热带气候。炎热的天气会增加蜜蜂蜂巢的蜂蜜HMF的水平。因此，食品法典委员会（2001年）和国际蜂蜜委员会（2002年），加大了热带地区蜂蜜中羟甲基糠醛的值到80毫克/公斤。
3.10 新鲜的（未加工）蜂蜜的HMF含量
正如预期的那样，所有的新鲜蜂蜜样品中羟甲基糠醛含量都限制在食品管理局所规定的范围（40毫克/公斤）内。Grey box和班克西亚样品分别含有1.35和1.12毫克/公斤的低羟甲基糠醛含量（见表5）。这些结果与Airborne Hoeney（2001年）所揭示的在新鲜蜂蜜中HMF值低于10mg/kg相一致。相反，在Mallee样品中，羟甲基糠醛值为34mg/kg，但仍低于国际标准限值（40mg/kg）。考虑到Mallee 样品（25.4 DN），这比Grey box和班克西亚蜂蜜中的淀粉酶活性大（表四），清楚地表明，羟甲基糠醛在Mallee样品的高HMF值与热无关，否则会大大降低淀粉酶活性。因此，高羟甲基糠醛含量在未处理的Mallee蜂蜜中可能是由于不同的花源。
这些结果清楚地表明，50％（四分之二）的商业蜂蜜样品，在市场上可随时不符合国际标准的HMF 含量（40mg/kg）。通常本地或进口的加工食品到澳大利亚必须符合食品标准局的食品标准代码。然而，由于目前食品标准局代码没有一个具体的蜂蜜中羟甲基糠醛值，所以蜂蜜行业已通过了国际标准并将40mg/kg作为一个标准(CapilanoHoney, 2005)。
3.11 加热对羟甲基糠醛含量的影响
除Leabrook（p = 0.187）和Beachworth（p = 0.588）外，将蜂蜜样品在65℃，77℃和85℃下分别加热2分钟可以造成HMF的含量（见表5）显著增加（p＜0.05）。Beachworth和Leabrook样品都含有最大的初始HMF水平（分别为50.8和74.9mg/kg）。此外，从淀粉酶分析（表4）的数据显示，这些蜂蜜样品同样有最低的初始淀粉酶活性。这些研究结果可能表明，这些蜂蜜样品已被加热，大多数淀粉酶活性和美拉德反应的底物已经耗尽。另一个可能的解释是加热对Leabrook和Beachworth 蜂蜜中的羟甲基糠醛含量影响并不显著。Fallico等人（2004年）报告说，将桉树蜂蜜加热至70 ℃的前24h里羟甲基糠醛含量没有多大的改变。
有趣的是，Beachworth和Leabrook这两个样品有最高HMF值，也有最低的pH值（分别为4.04和4.02）（见表1）。这些结果与Bath and Singh (1999)的一致，他们证明了低pH值的蜂蜜通常含有高HMF值。
考虑到在所有新鲜的（未加工）蜂蜜和两种商业用的蜂蜜（澳大利亚热带雨林和Homebrand）中，热处理和羟甲基糠醛含量呈正相关，则羟甲基糠醛可作为一个指标来判断蜂蜜的质量。
4 结论
蜂蜜样品中淀粉编号（淀粉酶活性）不同，没有统一的出发点，加热时也不是很敏感（见表4）。因此，许多研究者提出建议，淀粉酶转化不应作为质量指标考虑。据研究报道，转化成为热量比淀粉酶敏感。Bonvehi, Manzanares, 和Vilar (2004)指出，在21个蜂蜜样品中至少有80％的酶转化比加热（≥77℃，20秒）所引起的要多。
新鲜蜂蜜的HMF含量非常低，如Grey box 和班克西亚样品可以看出。然而，蜂蜜HMF含量高达
40mg/kg仍可以被视为新鲜（未经加工）的样品，如Mallee样品,含有34mg/kg的初始HMF的含量。很明
显，加热是不是影响蜂蜜中羟甲基糠醛的形成的唯一因素，还有蜂蜜组成，pH值和花源都可以作出贡献。因此，Fallico（2004年）等人报告说HMF含量独立于蜂蜜的种类和组成可能会产生误导。本实验发现，40mg/kg的标准过于严格而对其他比较松。例如，这个限制对于Mallee蜂蜜被认为太过严格，在77℃下加热2分钟后HMF值为42.8mg/kg。
此限制对澳大利亚热带雨林，Homebrand，Grey box和班克西亚蜂蜜这四个样品太过于宽松。这些蜂蜜可能过热（≥77℃2分钟）没有达到限制的40mg/kg。因此，建议进一步研究，探讨HMF的形成和蜂蜜花源的关系。
MSDS 5-甲基糠醛
5-METHYL FURFURAL SECTION 1-PRODUCT AND COMPANY INFORMATION PRODUCT NAME 5-METHYL FURFURAL PRODUCT CODE TS3004 COMPANY TEL FAX SECTION 2-COMPOSITION/INFORMATION ON INGREDIENTS CAS NO 620-02-0 EG/EC NO. 210-622-6 FEMA 2702 FORMULA C6H6O2 MOLECULAR WEIGHT 110.11 SECTION 3-HAZARDS IDENTIFICATION SEPCIAL INDICATION OF HAZARDS TO HUMAN AND THE ENVIRONMENT Irritating. Irritating to eyes,respiratory system and skin. SECTION 4-FIRST AID MEASURES INHALATION EXPOSURE If inhaled,remove to fresh air.,If not breathing give If not breathing give artifical respiration,If breathing is difficult ,give oxygen. DERMAL EXPOSURE In case of contact,immediately wash skin with soap and copious amounts of water. EYE EXPOSURE In case of contact,immediately flush eyes with copious amounts of water for at least 15 minutes. ORAL EXPOSURE If swallowed,wash out mouth with water provided person is conscious.Call a physician. SECTION 5-FIRE FIGHTING MEASURES EXTINGUISHING MEDIA Suitable：For small(incipient)fires,use media such as “alcohol”foam,dry chemical ,or carbon dioxide,For large fires,apply water from as far as https://www.wendangku.net/doc/178260854.html,e very large quantities of water applied as a mist or spray,solid stream of water may be ineffective.Cool all affected containers with flooding quantities of water. FIREFLIGHTING Protective equipment：Wear self-contained breathing apparatus and protective Address： Web site：E-mail：
5-羟甲基糠醛的相关研究报告
5-羟甲基糠醛的相关研究 摘要 5-羟甲基糠醛(5-HMF)具有高活性的呋喃环、芳醇、芳醛结构，其衍生物被广泛的用作真菌剂、腐蚀抑制剂、香料，也可以代替由石油加工得到的苯系化合物作为合成高分子材料的原料；因而，以生物质资源的糖类化合物为原料合成精细化工产品5-HMF的研究备受关注。 本课题主要从5-羟甲基糠醛(5-HMF)的性质、制备、用途、检测等方面，展示近年来对5-羟甲基糠醛(5-HMF)的研究成果。 关键词：5-羟甲基糠醛(5-HMF) 果糖葡萄糖紫外-分光光度法（UV） 1、5-羟甲基糠醛的性质 5-羟甲基糠醛(又名5-羟甲基-2糠醛，羟甲基糠醛，5-羟甲基呋喃甲醛或5-羟甲基-2-呋喃甲醛)，英文名5-hydroxymethyl-2-furfural，可简写为5-HMF。它是一种暗黄色针状结晶，具有甘菊花味，有吸湿性，易液化，需避光低温密封保存。其物化性质如下[1]。 分子式: C6H6O3 分子量: 126.116 英文简写：5-HMF 结构式：[2] 5-HMF不能与强碱、强氧化剂、强还原剂共存。加热时放出干燥刺激性的
烟雾，燃烧和分解时释放一氧化碳和二氧化碳。5-HMF易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、甲基异丁基甲酮、二甲基甲酰胺等，可溶于乙醚、苯、氯仿等，微溶于四氯化物，难溶于石油醚。 5-HMF是一种重要的化工原料，它的分子中含有一个醛基和一个羟甲基，可以通过加氢，氧化脱氢，酯化，卤化，聚合，水解以及其它化学反应，用于合成许多有用化合物和新型高分子材料，包括医药，树脂类塑料，柴油燃料添加物等。 5-HMF本身具有药物活性，是很多中药中的有效成分，由5-HMF出发制备的一系列呋喃衍生物也具有不同的功能，包括合成医药和农药方面的先导化合物；作为单体合成具有光学活性、可生物降解等特性的高分子材料，还可以合成具有强配位能力的大环化合物。 2、5-羟甲基糠醛的制备 5-HMF可由六碳糖、低聚糖、高聚糖甚至可以是一些由工业废料转化而来 的碳水化合物为原料，在酸性催化剂的作用下脱水而得。通常是以六碳糖为原料，期间会产生甲酸和乙酰丙酸等副产物，其原理如下。 2.1 果糖降解生成5-HMF的机理 VanDam、Kuster、Antal提出果糖脱水生成5-HMF有两种可能的反应机理i 和ii。其中路线i中包括一个环状化合物而路线ii没有经历环状化合物直接脱水得到5-HMF。 Antal通过实验进一步证明了5-HMF的生成要经历一个环状中间体。其根据如下： (1)果糖比蔗糖易于发生该反应。 (2)当果糖在氘代的水溶液中反应时，产物中不含有C-D键。如果化合物a在反应中生成，那么由于烯醇互变异构会在产物中生成C-D键。 因此，该反应应按路线i进行。
5羟甲基糠醛产品
5羟甲基糠醛产品 2021-2026年中国5羟甲基糠醛产品行业投资前景咨询报告 【报告编号】CB16679 5羟甲基糠醛产品行业专项报告,包括5羟甲基糠醛产品行业发展趋势,5羟甲基糠醛产品前景预测,5羟甲基糠醛产品市场规模,5羟甲基糠醛产品全球,5羟甲基糠醛产品品牌,5羟甲基糠醛产品细分,5羟甲基糠醛产品产业链,5羟甲基糠醛产品政策,5羟甲基糠醛产品机遇和挑战,5羟甲基糠醛产品竞争格局,5羟甲基糠醛产品重点企业,5羟甲基糠醛产品集中度,全球5羟甲基糠醛产品,5羟甲基糠醛产品价格,5羟甲基糠醛产品进出口,5羟甲基糠醛产品区域结构等 第一章宏观经济环境分析 第一节全球宏观经济分析 一、2016-2020年全球宏观经济运行概况 二、2021-2026年全球宏观经济趋势预测 第二节中国宏观经济环境分析 一、2016-2020年中国宏观经济运行概况 二、2021-2026年中国宏观经济趋势预测 第三节5羟甲基糠醛产品行业社会环境分析 第四节5羟甲基糠醛产品行业政治法律环境分析 一、行业管理体制分析 二、行业相关发展规划 三、主要产业政策解读 第五节5羟甲基糠醛产品行业技术环境分析
一、技术发展水平分析 二、技术革新趋势分析 第二章国际5羟甲基糠醛产品行业发展分析 第一节国际5羟甲基糠醛产品行业发展现状分析 一、国际5羟甲基糠醛产品行业发展概况 二、主要国家5羟甲基糠醛产品行业的经济效益分析 三、2021-2026年国际5羟甲基糠醛产品行业的发展趋势分析 第二节主要国家及地区5羟甲基糠醛产品行业发展状况及经验借鉴 一、美国5羟甲基糠醛产品行业发展分析 1、2016-2020年行业规模情况 2、2021-2026年行业前景展望 二、欧洲5羟甲基糠醛产品行业发展分析 1、2016-2020年行业规模情况 2、2021-2026年行业前景展望 三、日韩5羟甲基糠醛产品行业发展分析 1、2016-2020年行业规模情况 2、2021-2026年行业前景展望 四、2016-2020年其他国家及地区5羟甲基糠醛产品行业发展分析 五、国外5羟甲基糠醛产品行业发展经验总结 第三章2016-2020年中国5羟甲基糠醛产品市场供需分析 第一节2016-2020年5羟甲基糠醛产品产能分析
5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求初探
发布日期20050622 栏目化药药物评价>>化药质量控制 标题5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求初探 作者邓海星蒋煜 部门 正文内容 审评三部邓海星蒋煜 摘要：5-羟甲基糠醛是含葡萄糖等单糖的注射剂中重要的有关物质。本文就5-羟甲基糠醛的来源、影响其产生的因素、检测方法及限度等进行了阐述。 并提请申请人注意在制剂工艺筛选过程、以及质量研究过程中注意控制该杂 质。 关键词：5-羟甲基糠醛检查方法限度 一、概述 5-羟甲基糠醛（5-Hydroxymethyl furfural，简称5-HMF）是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类化合物，该化合物稳定 性不好，容易分解成乙酰丙酸和甲酸，或发生聚合反应。一方面，5-HMF对
人体横纹肌和内脏有损害，另一方面，葡萄糖注射液在高温情况下颜色容易变黄，虽然5-HMF本身无色，但由于5-HMF可发生聚合而由聚合物导致变色，且葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，因此5-HMF的量可指代产品中葡萄糖的分解程度。由于5-HMF的毒性及对产品质量情况的指示作用，在含葡萄糖或其它单糖的制剂中应作为一个重要的有关物质加以控制。 影响5-HMF产生量的因素有溶液的pH值、灭菌的温度及灭菌的时间等。葡萄糖在碱性溶液中极不稳定，易脱水分解，而在酸性溶液中相对稳定，其中以pH3.0时分解最少，中国药典规定葡萄糖注射液的pH值应在3.2～5.5。葡萄糖注射液在高温加热灭菌时易产生5-HMF，其量的增加与灭菌温度、时间成正比，在工艺筛选过程中选择考察指标时，需注意纳入5-HMF检查项。另外在贮藏过程中，5-HMF也会增加，所以应尽量缩短葡萄糖注射液的贮藏时间。此外，有文献报道，不同方法制备的注射用水配制的葡萄糖注射液经灭菌处理后，5-HMF的量有显著性差异，四级截留法制备的注射用水较重蒸馏法、蒸馏法制备的注射用水更好。另据文献报道，亚硫酸盐在溶液中能与葡萄糖生成葡萄糖羟基亚硫酸，使葡萄糖分解成5-HMF的反应延迟。 二、检查方法 5-羟甲基糠醛的检查方法通常有以下几种：控制溶液的颜色、紫外法、双波长法、杂质对照法等。 由于葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，可通过控制溶
028为什么要控制药品中的5-羟甲基糠醛
发布日期20040304 栏目化药药物评价>>化药质量控制 标题为什么要控制药品中的5-羟甲基糠醛 作者张哲峰 部门 正文内容为什么要控制药品中的5-羟甲基糠醛 有关5－HMF的小常识 审评三部张哲峰 随着以葡萄糖注射液为载体的各种输液剂的不断出现，产品中5-羟甲基糠醛（简称 5-HMF）的控制应引起足够关注，现介绍有关5-HMF的几点常识，以期引起大家的重视。 1.什么是5-HMF？5-HMF是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的 一个醛类化合物。该化合物对人体横纹肌和内脏有损害。 2.5-HMF与葡萄糖输液剂的稳定性有何关系？5-HMF稳定性欠佳，可进一步分解为 乙酰丙酸和甲酸或聚合，5-HMF本身无色，其聚合物为有色物质，导致葡萄糖注射液 变色，色泽深浅与5-HMF的生成量成正比，故5-HMF量可指代产品中葡萄糖分解程度。 3.哪类药品要控制5-HMF？一般有哪些检测方法？对于葡萄糖注射液和葡萄糖氯化 钠注射液，ChP(2000)、BP(1998)和USP(24)均采用284nm测定吸收度的方法控制产 品中5-HMF量，浓度不同，吸收度的限度不同；国外有些企业标准对用到葡萄糖等单糖的口服制剂也进行了5-HMF的限度控制，我国药典对蜂蜜及某些含蜂蜜制剂也进行 5-HMF的限度控制。足见5-HMF的控制是很重要的质量指标，故研制以葡萄糖注射液为载体的输液剂均应规定5-HMF的控制限度；研制以葡萄糖为主要辅料，且制备工艺中有酸性溶液环境及较长时间高温过程的口服制剂时，建议进行产品中5-HMF的含量考察。 常见的5-HMF检测方法有UV法（284nm吸收度或衍生化后284nm与336nm的吸收度差值法）和HPLC法。 4.检测5-HMF时应注意哪些问题？开发以葡萄糖为载体的输液剂，5-HMF的限度控制是必不可少的检测项目，UV吸收度法（284nm）因简单、通用、不需对照品，可作为首选方法；若主药等干扰检测时，可采用HPLC外标法，但限度要求应不低于药典 中葡萄糖注射液或葡萄糖氯化钠注射液限度，需用对照品进行限度的等量转换试验， 以确定合适的限度。如使用HPLC－归一法，同样需要限度等量转换，并作峰位确认。亚铁氰化钾、醋酸锌衍生化后以284nm与336nm的吸收度差值法是中国药典一部检 测蜂蜜中5-HMF含量的方法，进行灵敏度和限度的对比研究后，合适时也可采用。 类别:审评三部 备注
糠醛
糠醛 维基百科，自由的百科全书 糠醛（呋喃甲喃甲醛醛，英文：furfural ）是一种工 业用化学制品，可由各种农副产品中萃取， 包括玉米穗轴(corncobs)、燕麦与小麦的麦麸 (bran)和锯木屑(sawdust)。furfural 这个字取自 于拉丁字的furfur ，意思是麦麸，因为这是糠 醛取得的来源。 糠醛是一种芳香族的醛，其环状结构如右图 所示。其化学式为 C 5 H 4 O 2。纯糠醛是有杏 仁味的无色的油状液体，暴露于空气中会快 速变成黄色。 历史 1832年，德国化学家Johann Wolfgang D?bereiner 首先将糠醛分离出来。他在制取蚁 酸的过程中萃取出微量的副产品，即糠醛。 [1] 在当时，蚁酸是用死亡的蚂蚁蒸馏制取，D?bereiner 用的蚂蚁体内可能含有一些植物碎 屑。1840年，苏格兰化学家John Stenhouse 发 现相同的化学品可以由许多种不同的农作物中蒸馏制取，他将玉米、燕麦、麦麸和锯木屑(sawdust)分别放入稀硫酸中，检测出该糠醛的实验式(empirical formula)为C 5H 4O 2。1901年，德国化学家Carl Harries 推论出糠醛结构。 在1922年Quaker 燕麦公司使用燕麦麸大规模制造以前，糠醛除了偶而用作芳香剂外，仍然是一个基本无人问津的化学品。现在，糠醛仍然由农副产品如甘蔗渣和玉米穗轴中制取。 特性 糠醛?编辑
糠醛的物性已在右表中列出。糠醛易于极性有机浴液中分解(dissolves)，但在水或烷烃中只会稍微分解。 化学性质，糠醛会与同种类化合物起反应，如乙醛和其他芳香化合物。芳香化合物糠醛稳定性比苯小，而且对氢化作用(hydrogenation)和其他加成反应(addition reaction)的活性都远比其他芳香化合物大。 当加热至约250 °C，糠醛会分解为呋喃和一氧化碳，有时会爆发性的分解。 若与酸一起加热，糠醛会变成坚硬的热固性树脂(thermosetting resin)，这是不可逆反应(irreversibly )。 制备 许多植物原料含有多糖半纤维素 (polysaccharide hemicellulose)，而每个糖聚合物有5个碳原子。当与硫酸一起加热时，半纤维素会水解而形成糖，主要为木糖(en:xylose)。在同样的酸和加热条件下，木糖和其他五碳糖会脱水，失去3个水分子而变成糠醛。 C5H10O5 → C5H4O2 + 3 H2O 在农副产品原料中，原植物体约有 10% 可以再回收制造糠醛。(For crop residue feedstocks, about 10% of the mass of the original plant matter can be recovered as furfural.)在反应混合中糠醛和水会一起蒸发，在凝结后即可分离。( Furfural and water evaporate together from the reaction mixture, and separate upon condensation.) 全世界制造糠醛的总量为约450,000吨。中国是最大的生产地，大约占全世界制造量的一半。 在实验室中，糠醛是由玉米穗轴与稀硫酸回流(reflux)而合成[2]. 使用 糠醛用来作为石化炼制品中的溶剂，从其他碳氢化合物中提炼二烯烃（即用于制造合成橡胶(en:rubber)） 糠醛，以及其衍生糠醇，可与与苯酚、丙酮、尿素反应制造树脂。这种树脂用于制造玻璃纤维、一些飞机零件和汽车制动器(automotive brakes)。 糠醛也是生产呋喃和四氢呋喃溶剂的原料。羟甲基糠醛(hydroxymethylfurfural)已在各种各样的热加工食品(heat processed foods)中使用。
羟甲基糠醛的检测方法
羟甲基糠醛的检测方法 5.10.1原理 样品中的羟甲基糠醛经HPLC反相色谱柱分离，用液相色谱仪紫外检测器检测、用标准曲线外标法定量。 5.10.2 试剂和材料 5.10.2.1 水:GB/T 6682规定的一级水。 5.10.2.2 甲醇:色谱纯。 5.10.2.3 甲醇溶液:10%，吸取100mL的甲醇到1000mL的容量瓶中，用水稀释至刻度。 5.10.2.4 标准物质:羟甲基糠醛纯度≥99%, 5.10.2.5 标准储备溶液:准确称取适量的羟甲基糠醛标准物质于100mL容量瓶，用10mL 甲醇溶解，用水稀释至刻度，配成0.20mg/mL的标准储备液。此溶液可在温度低于4℃冰箱中冷藏保存两个月。 5.10.2.6 标准工作溶液:分别吸取适量的羟甲基糠醛标准储备溶液至100mL容量瓶中，用10%甲醇溶液释稀至刻度，配成0.10μg/mL,0.20μg/mL,1.0μg/mL,2.0μg/mL,4.0μg/mL, 6.0μg/mL,10μg/mL标准工作溶液。当天新鲜配制。 5.10.3 仪器 5.10.3.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。 5.10.3.2 分析天平:感量0.01g, 5.10.3.3 注射器:10mL, 5.10.3.4 过滤膜:0.45μm, 5.10.4 试样制备与保存 5.10.4.1 试样的制备 无论有无结晶的实验室样品，都不要加热。将其搅拌均匀，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。
5.10.4.2 试样的保存 将试样于室温下保存。 5.10.5 测定步骤 5.10.5.1 试样处理 称取10g试样，精确至0.01g，置于100mL烧杯中，加人10mL甲醇(4.2)，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，使试样完全溶解。转移至lOO mL容量瓶中，用水释稀至刻度，充分混匀。用0.45μm的滤膜过滤，滤液用于液相色谱仪紫外检测器测定。 5.10.5.2 色谱侧定 5.10.5.2.1 液相色谱条件 a) 色谱柱:DiamonsilC18 5 μm,250mmX4.6mm（i.d)或相当者； b) 流动相:甲醇+水(10十90)； c) 流速:1.0mL/min； d) 检测波长:285nm； e) 柱温:30℃； f) 进样量:10μL。 5.10.5.2.2 液相色谱测定 首先测定七个标准工作溶液(4.6)在上述色谱条件下的峰面积，以峰面积对相应浓度绘制标准工作曲线，然后测定未知样品，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中羟甲基糠醛的响应值应在仪器的线性范围内。在上述色谱条件下，羟甲基糠醛的参考保留时间约为12min.羟甲基糠醛标准物质色谱图和含有羟甲基糠醛的样品色谱图参见附录A中图A.1、图A.2 , 5.10.5.3 平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 5.10.5.4 空白试验
5-羟甲基糠醛的制备及应用研究
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5-羟甲基糠醛的制备及应用研究 作者：李凤， 荣先国， 黄玉玲， LI Feng， RONG Xian-guo， HUANG Yu-ling 作者单位：滨州医学院烟台校区,山东,烟台,264003 刊名： 甘肃科学学报 英文刊名：JOURNAL OF GANSU SCIENCES 年，卷(期)：2010,22(4) 参考文献(12条) 1.Frieder W Lichtenthaler;Siegfried Peters Carbohydrates as Green Raw Materials for the Chemical Industry[外文期刊] 2004(02) 2.Haibo Z;Johnathan E H;Z.Conrad Z Metal Chlorides in Ionic Liquid Solvents Convert Sugars to 5-Hydroxymctllyl Rurfftral 2007 3.Conier L;Descolcs G;Neyrel C Pyrolysis of Carbohydrates.Analysis of Industrial Caramelvapors 1989 4.Yuriy R;Uben N C;James A D Phase Modifiers Promote Efficient Production of Hydroxyl Methyl furfuraI from fructose 2006(30) 5.Yuriy R;Christopher J B;James A D Production of Dimethylfuran for Liquid Fuels from Biomass-derived Carbohydrates 2007 6.Hawonb W N;Jones W G M Conversion of Sucrose Into Furancompounds.5-Hydroxymethylfurfuraldehyde and Some Derivatives 1944(11) 7.Kei-ichi Seri;Yoshihisa Inoue;Hitoshi Ishida Catalytic Activity of Lanthanide(Ⅲ) Ions for the Dehydration of Hexose to 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde in Water[外文期刊] 2001(06) 8.Mercadier D;Gaset A;Rigal L Synthesis of 5-hydroxymethyl-2-furancarboxy-aldehyde catalysed by cationic exchange resins[外文期刊] 1981 9.Quanxi B;Kun Q;Daisuke Tomida Preparation of 5hydroymethylfurural by Dehydration of Fructose in the Presence of Acidic Ionic Liquid 2008(06) 10.贾天柱;陈焕亮;解世全狗脊升华物中5-羟甲基糠醛的分析[期刊论文]-中成药 2002(10) 11.普文英5-羟甲基糠醛用于神经系统药物的研究 2005(10) 12.Smay G L The Characteristics of High-temperature Resistant Organic Polymers and the Feasibility of Their Use as Glass Coating Materials[外文期刊] 1985(04) 本文读者也读过(9条) 1.傅紫琴.王明艳.蔡宝昌.FU Zi-qin.WANG Ming-yan.CAI Bao-chang5-羟甲基糠醛(5-HMF)在中药中的研究现状探讨[期刊论文]-中华中医药学刊2008,26(3) 2.仝新利.李梦然.TONG Xin-li.LI Meng-ran果糖和蔗糖转化合成5-羟甲基糠醛的研究[期刊论文]-广州化工2010,38(9) 3.林鹿.陈天明.Lin Lu.Chen Tian-ming阳离子交换树脂和Al2O3 催化葡萄糖制取5-羟甲基糠醛[期刊论文]-华南理工大学学报（自然科学版）2010,38(11) 4.董喜恩.蒋锋.罗根祥.Dong Xien.Jiang Feng.Luo Genxiang糖类脱水生成5-羟甲基糠醛的研究进展[期刊论文]-化工中间体2010,06(2) 5.卢奎多5-羟甲基糠醛生成量与高压灭菌的关系[期刊论文]-中外医疗2010,29(12) 6.王军.张春鹏.欧阳平凯.WANG Jun.ZHANG Chunpeng.OUYANG Pingkai5-羟甲基糠醛制备及应用的研究进展[期刊
5-羟甲基糠醛(5-HMF)的检测方法
羟甲基糠醛的检测方法 （IFU） 1 适用范围 本标准适用于果汁加工中半成品、成品的羟甲基糠醛的测定。 2 仪器及试剂 2.1仪器 2.1.1 722S分光光度计：检测波长550nm； 2.1.2 比色管：10ml带有塞子的比色管。 2.2试剂 2.2.1 巴比妥酸溶液：500mg巴比妥酸在温水浴中溶解，冷却后在容量瓶中定容至100ml。最好在冰箱中保存，保存期为一个月。 2.2.2 对甲苯胺溶液：10.0g的对甲苯胺用10.0ml的冰醋酸溶解，转移至100ml 装有50ml异丙醇的容量瓶中，最后用异丙醇定容至刻度。最好在冰箱中用棕色瓶保存，保存期为一个月。 3. 检测步骤 3.1浓缩苹果清汁稀释至11.5°Brix，两根25ml比色管中各移取2ml，用新制备的蒸馏水定容至10ml并充分的混合。在定容后的溶液中加入5ml对甲苯胺，摇匀。其中一根加入1.0ml的水（空白），另一根试管中加入1.0ml的巴比妥酸溶液，摇匀。 3.2 以空白作为对照，用分光光度计在550nm下用1cm比色皿检测并读取吸光度值。巴比妥酸添加以后，吸光度通常很快的下降，反应在3-4分钟达到最大值，用最大值计算。 3.3 实验的准备 空白检测 果汁（11.5°Brix） 2.0ml 2.0ml 对甲苯胺 5.0ml 5.0ml 巴比妥酸 - 1.0ml 水 1.0ml -
4.计算 HMF= （ P*V）/（ v*E） P标准曲线上读取的HMFmg/L V原被稀释溶液的体积 v被用于显色反应检测的稀释部分的体积 E原始果汁的体积 参考文献：本标准依据IFU检测HMF的方法编制
棒曲霉素、羟甲基糠醛含量的检测方法 (液相色谱法) 1. 适用范围 本标准适用于果汁加工中半成品、成品的棒曲霉素、羟甲基糠醛的测定。 2. 仪器及试剂 除另有规定外,试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水。所用流动相需用0.45μm 水系滤膜过滤。 2.1试剂 2.1.1冰醋酸（分析纯）； 2.1.2乙酸乙酯（分析纯）; 2.1.3乙腈：色谱纯一级品含量>99.9%； 2.1.4棒曲霉素标准品：纯度>99%； 2.1.5醋酸溶液：c（CH3COOH）= 0.2mol/L； 2.1.6醋酸钠溶液：c（CH3COONa）= 0.2mol/L； 2.1.7醋酸盐缓冲溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液:醋酸钠水溶液=164:36（v/v）； 2.1.8无水碳酸钠溶液：c（Na 2CO 3 ）=14g/L ； 2.1.9流动相: 乙腈：水=10：90（v/v）； 2.2仪器 2.2.1高效液相色谱仪：型号LC2010A、配有紫外检测器； 2.2.2色谱柱：250mm×4.6mm（id）ODS反相不锈钢柱； 2.2.3旋转蒸发器：型号RE52－A 2.2.4 分析检测条件： 流动相：乙腈：水=10：90（v/v）； 流速： 1.0ml/min； 柱温：35℃； 检测波长： 276nm；
5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求
5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求初探 审评三部邓海星蒋煜 摘要：5-羟甲基糠醛是含葡萄糖等单糖的注射剂中重要的有关物质。本文就5-羟甲基糠醛的来源、影响其产生的因素、检测方法及限度等进行了阐述。并提请申请人注意在制剂工艺筛选过程、以及质量研究过程中注意控制该杂质。 关键词：5-羟甲基糠醛检查方法限度 一、概述 5-羟甲基糠醛（5-Hydroxymethyl furfural，简称5-HMF）是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类化合物，该化合物稳定性不好，容易分解成乙酰丙酸和甲酸，或发生聚合反应。一方面，5-HMF对人体横纹肌和内脏有损害，另一方面，葡萄糖注射液在高温情况下颜色容易变黄，虽然 5-HMF本身无色，但由于5-HMF可发生聚合而由聚合物导致变色，且葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，因此5-HMF的量可指代产品中葡萄糖的分解程度。由于5-HMF的毒性及对产品质量情况的指示作用，在含葡萄糖或其它单糖的制剂中应作为一个重要的有关物质加以控制。 影响5-HMF产生量的因素有溶液的pH值、灭菌的温度及灭菌的时间等。葡萄糖在碱性溶液中极不稳定，易脱水分解，而在酸性溶液中相对稳定，其中以pH3.0时分解最少，中国药典规定葡萄糖注射液的pH值应在3.2～5.5。葡萄糖注射液在高温加热灭菌时易产生5-HMF，其量的增加与灭菌温度、时间成正比，在工艺筛选过程中选择考察指标时，需注意纳入5-HMF检查项。另外在贮藏过程中，5-HMF也会增加，所以应尽量缩短葡萄糖注射液的贮藏时间。此外，有文献报道，不同方法制备的注射用水配制的葡萄糖注射液经灭菌处理后，5-HMF 的量有显著性差异，四级截留法制备的注射用水较重蒸馏法、蒸馏法制备的注射用水更好。另据文献报道，亚硫酸盐在溶液中能与葡萄糖生成葡萄糖羟基亚硫酸，使葡萄糖分解成5-HMF的反应延迟。 二、检查方法 5-羟甲基糠醛的检查方法通常有以下几种：控制溶液的颜色、紫外法、双波长法、杂质对照法等。 由于葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，可通过控制溶液的颜色来控制5-HMF的量，但由于5-HMF并非葡萄糖注射液变色的唯一因素，该法专属性和准确性较差。
为什么要控制药品中的5-羟甲基糠醛
为什么要控制药品中的5-羟甲基糠醛 ――有关5－HMF的小常识 审评三部张哲峰 随着以葡萄糖注射液为载体的各种输液剂的不断出现，产品中5-羟甲基糠醛（简称5-HMF）的控制应引起足够关注，现介绍有关5-HMF的几点常识，以期引起大家的重视。 1.什么是5-HMF？5-HMF是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个 醛类化合物。该化合物对人体横纹肌和内脏有损害。 2.5-HMF与葡萄糖输液剂的稳定性有何关系？5-HMF稳定性欠佳，可进一步分解为乙酰 丙酸和甲酸或聚合，5-HMF本身无色，其聚合物为有色物质，导致葡萄糖注射 液变色，色泽深浅与5-HMF的生成量成正比，故5-HMF量可指代产品中葡萄糖分解程度。 3.哪类药品要控制5-HMF？一般有哪些检测方法？对于葡萄糖注射液和葡萄糖氯化钠注 射液，ChP(2000)、BP(1998)和USP(24)均采用 284nm测定吸收度的方法控制产品中5-HMF量，浓度不同，吸收度的限度不同；国外有些企业标准对用到葡萄糖等单糖的口服制剂也进行了5-HMF的限度控制，我国药典对蜂蜜及某些含蜂蜜制剂也进行5-HMF的限度控制。足见5-HMF的控制是很重要的质量指标，故研制以葡萄糖注射液为载体的输液剂均应规定5-HMF的控制限度；研制以葡萄糖为主要辅料，且制备工艺中有酸性溶液环境及较长时间高温过程的口服制剂时，建议进行产品中5-HMF 的含量考察。常见的5-HMF检测方法有UV法（284nm吸收度或衍生化后284nm与336nm 的吸收度差值法）和HPLC法。 4.检测5-HMF时应注意哪些问题？开发以葡萄糖为载体的输液剂，5-HMF的限度控制是必 不可少的检测项目，UV吸收度法（284nm）因简单、通用、不需对照品，可作为首选方法；若主药等干扰检测时，可采用HPLC外标法，但限度要求应不低于药典中葡萄糖注射液或葡萄糖氯化钠注射液限度，需用对照品进行限度的等量转换试验，以确定合适的限度。如使用HPLC－归一法，同样需要限度等量转换，并作峰位确认。亚铁氰化钾、醋酸锌衍生化后以284nm与336nm的吸收度差值法是中国药典一部检测蜂蜜中5-HMF含量的方法，进行灵敏度和限度的对比研究后，合适时也可采用。
5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求初探
5-羟甲基糠醛的检查方法及限度要求初探 摘要：5-羟甲基糠醛是含葡萄糖等单糖的注射剂中重要的有关物质。本文就5-羟甲基糠醛的来源、影响其产生的因素、检测方法及限度等进行了阐述。并提请申请人注意在制剂工艺筛选过程、以及质量研究过程中注意控制该杂质。 关键词：5-羟甲基糠醛检查方法限度 一、概述 5-羟甲基糠醛（5-Hydroxymethyl furfural，简称5-HMF）是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类化合物，该化合物稳定性不好，容易分解成乙酰丙酸和甲酸，或发生聚合反应。一方面，5-HMF对人体横纹肌和内脏有损害，另一方面，葡萄糖注射液在高温情况下颜色容易变黄，虽然5-HMF本身无色，但由于5-HMF可发生聚合而由聚合物导致变色，且葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，因此5-HMF的量可指代产品中葡萄糖的分解程度。由于5-HMF的毒性及对产品质量情况的指示作用，在含葡萄糖或其它单糖的制剂中应作为一个重要的有关物质加以控制。 影响5-HMF产生量的因素有溶液的pH值、灭菌的温度及灭菌的时间等。葡萄糖在碱性溶液中极不稳定，易脱水分解，而在酸性溶液中相对稳定，其中以pH3.0时分解最少，中国药典规定葡萄糖注射液的pH值应在3.2～5.5。葡萄糖注射液在高温加热灭菌时易产生 5-HMF，其量的增加与灭菌温度、时间成正比，在工艺筛选过程中选择考察指标时，需注意纳入5-HMF检查项。另外在贮藏过程中，5-HMF也会增加，所以应尽量缩短葡萄糖注射液的贮藏时间。此外，有文献报道，不同方法制备的注射用水配制的葡萄糖注射液经灭菌处理后，5-HMF的量有显著性差异，四级截留法制备的注射用水较重蒸馏法、蒸馏法制备的注射用水更好。另据文献报道，亚硫酸盐在溶液中能与葡萄糖生成葡萄糖羟基亚硫酸，使葡萄糖分解成5-HMF的反应延迟。 二、检查方法 5-羟甲基糠醛的检查方法通常有以下几种：控制溶液的颜色、紫外法、双波长法、杂质对照法等。 由于葡萄糖注射液颜色的深浅与5-HMF产生的量成正比，可通过控制溶液的颜色来控制5-HMF的量，但由于5-HMF并非葡萄糖注射液变色的唯一因素，该法专属性和准确性较差。 5-HMF的最大吸收波长为284nm，该处干扰较少，UV法常可以作为5-HMF检查的首选方法。如中国药典2000、BP2000、USP27和日本药局方中纳入的葡萄糖注射液，均采用UV法控制5-羟甲基糠醛含量。如果制剂中的主药或辅料在284nm有明显的吸收，会干扰5-HMF 的检查，可采用HPLC法代替。 双波长法是通过试验找到与干扰组分在284nm波长处吸收度相同的等吸收波长，测定样品在这两个波长处吸收度的差值，以消除制剂中其它组分的干扰。如甲硝唑葡萄糖注射液，因甲硝唑在320nm 有最大吸收，在284nm、355nm 为等吸收波长,5%葡萄糖溶液在此两波长附近均无吸收，5-HMF在355nm 无吸收。因此,有生产单位选择284nm为测定波长,355nm 为参比波长,以两波长的吸收度差值(ΔA = A284 - A355) 为定量信息测定5-HMF的含量。需要注意的是，等吸收波长的准确性直接影响测定结果，因此需要进行完备的方法学验证，一般建议采用多个浓度进行试验。 采用HPLC－杂质对照法检查5-HMF，具有较强的专属性，一般采用的色谱条件为：ODS 柱，甲醇-水作流动相，也可加入适量的酸调节pH值，在284nm波长下进行限度检查。在研究过程中应注意进行方法学考察，确定5-HMF的色谱峰不受其它峰的干扰。
文献检索 5-羟甲基糠醛的测定
一、中文摘要、关键词(斜体字体部分有错) 5-羟甲基糠醛（HMF）的检测 摘要 本文建立了通过测定HMF的含量来监测热处理对乳制品质量影响的方法。考察了电泳缓冲液的总类、电泳缓冲液pH 值、添加剂浓度和分离电压等因素的影响。最终选定的分离条件为：pH 6.85，30 mmol/L 的磷酸电泳缓冲液以及80 mmol/L 的SDS添加剂，15 KV 工作电压，使用内径75 μm，总长58.5 cm，有效长度50 cm，的未涂层石英毛细管,检测波长214 nm （检测三聚氰胺）和280 nm（检测HMF）。在上述条件下，三聚氰胺和HMF能被有效地分离，HMF 的最低检出限为0.067 μg/mL；其峰面积的相对标准偏差：日内1.69%~3.53%，日间 4.23%~5.42%；并进一步将该方法用于奶制品的检测，平均回收率为80% 左右。本方法高效、简便、节能、经济环保，有望应用于对食品安全检测产生借鉴和启发作用。 关键词：5-羟甲基糠醛（HMF）；三聚氰胺；未涂层石英毛细管
二、英文摘要、关键词 Detection of 5 –HMF Abstract In this paper, a method has been developed for the determination of the influence to dairy products’ quality in heat treatment by the determination of HMF. The effects of several factors such as the concentration and pH of the running buffer solution, the concentration of the additive and the separation voltage were investigated. The optimum condition was as follows: phosphate running buffer solution which had pH value 6.85, 30 mmol/L and 80 mmol/L additive of SDS, 15 KV working voltage, a uncoated qu artz capillary with diameter, 75μm, overall length, 58.5 cm, effective length, 50 cm, the detection wavelength 214 nm (the determination of HMF) and 280 nm(the determination of melamine). In the above conditions, melamine and HMF could be effectively separated, the minimum value of LOD of HMF was 0.067 μg/mL; the repeatabilities of peak area were: 1.69%~3.53% interday, 4.23%~5.42% intraday; and the method was further applied in the determination of the dairy products, the average recovery was around 80%. This method is simple and effective, the energy conservation, economical and environmental protection, could be used for food safety testing produce reference and inspiration effect. Key words：5-hydroxymethyl-2-furaldehyde(HMF); melamine; uncoated quartz capillary
蜂蜜中5-羟甲基糠醛方法文件
5-羟甲基糠醛 【应用领域】 适用于蜂蜜中羟甲基糠醛（HMF）的快速定量检测 【技术指标】 测定范围：0.0mg/kg~150mg/kg 检测下限：5.0mg/kg 示值误差：10% 检测波长：540nm 检测通道：消解管通道 【试剂组成】 【试剂贮存、有效期及注意事项】 试剂有腐蚀性或毒性，检测人员在使用检测试剂时，须佩戴防护眼镜和手套，若试剂接触到眼睛、皮肤等部位，请立即用大量清水冲洗。 试剂常温避光条件下，保质期为12个月，请在有效期内使用。 【样品提取】 称取5.0g经混匀的样品，置于红盖提取瓶中，加入20.0ml的蒸馏水，摇匀（如蜂蜜结晶可40℃水浴加热溶解），加入0.5ml前处理试剂（一），摇匀，再加入0.5ml前处理试剂（二）。摇匀，将全部溶液，通过滤纸、漏斗过滤到另一个红盖提取瓶/烧杯中，为待检液。 【样品检测】 空白校正： 移取5ml待检液到10ml消解管中，加1ml羟甲基糠醛A检测试剂，拧紧盖子剧烈摇匀，静止5分钟，擦净消解管壁，放入消解管检测通道中，进行空白校正。（有超声波，检测前超声1秒除气泡，精度会更高。） 样品测定： 向上述的消解管中，再加0.2ml(200μl)羟甲基糠醛B试剂，拧紧盖子剧烈摇匀，静止5分钟，擦净消解管壁，放入消解管检测通道中，进行检测。（有超声波，检测前超声1秒除气泡，精度会更高。） 【结果判断】 若溶液显色为微红，红色越深，表示羟甲基糠醛越高。 参照GB/T18796-2005；GH/T18796-2012两份标准，蜂蜜中5羟甲基糠醛应≤40mg/kg。
1.蜂蜜中5-羟甲基糠醛试剂配方 一、试剂配制 二、试剂配制方法 三、【试剂组成】（50次）