动物繁殖技术

牛和水牛人工授精发展及现况

摘要

人工授精（artificial insemination，AI）是指以人工的方法，采集雄性动物的精液，再将处理后的精液输入到雌性动物生殖道的特定部位，以代替雌雄动物自然交配而繁殖后代的一种技术。

关键词：人工授精输精采精精液的稀释解冻精液受胎率

Situation andDevelopment of Artificial Insemination in

Cattle and Buffalo

ABSTRACT

Artificial Insemination is breeding methods that use artificial methods to collect semen of males,and then put the semen,which have been examined and processed,intooestrous female genital to replace the natural union process of male and female animals.

KEYWORDS: artificial insemination;semendeposition;collectsemen;the dilution of semen;thawed semen;conception rates

1人工授精的发展历程

人工授精最初报道成功是在1780年意大利生理学家L.Spallanzani进行狗的实验。1900年，俄国学者E.I.Ivanoff开始研究家畜的人工授精。他最初以马为研究对象，却是第一个成功的进行了牛和绵阳的人工授精。到了20世纪30年代，人工授精技术形成了比较完善的操作程序，有实验阶段进入到了使用阶段。丹麦于1936年成立了世界上第一个人工授精协会，并在牛的人工授精技术上处于领先地位。美国Rutgers大学的E.J.Perry教授于1938年组织了美国的第一个人工授精合作会。20世纪40年代之后，人工授精技术的应用得到了蓬勃发展，成为家畜品种改良的重要手段。人工授精在奶牛业的发展最快，多数国家已普及了冷冻精液人工授精，如美国、英国、澳大利亚、新西兰、加拿大和日本等。由于冷冻精液普及率逐年提高，法国经过后裔测定，优良种公牛的遗传力的改进每年进展达20%。猪的人工授精近20年来在很多国家也受到了重视。如美国，猪人工授精技术应用于20世纪70年代，90年代得到了较快的普及，普及率由1992年的5%~10%发展到1997年的30%~50%，目前美国的猪人工授精技术应用率达到80%，由规模较大的专业供精公司供给和推广，一些大型种猪育种公司也广泛采用人工授精技术进行生产。2002年资料表明，全球1900万头猪中，99%是经稀释常温保存后授精出生的，这是此前15年的3倍。马和绵羊、山羊的人工授精在少数国家也得到了应用。

我国近30多年来的人工授精技术，从发展迅速、普及的范围和动物来看，都取得了很大的成绩。奶牛已普及冷冻精液的人工授精，在中国黑白花奶牛的育种上起到了极其重要的作用。

2人工授精的技术环节

人工授精技术的基本程序包括采精、精液品质检查、精液的稀释、分装保存、运输、冷冻精液的解冻与检查、输精等环节。

2.1 采精

采精是人工授精的首要步骤和重要环节。认真做好采精前的准备工作，正确掌握采精技术，合理安排采精频率，是保证获得量多质优精液和保持种公牛健康的重要条件。

2.1.1器材和设备的准备

采精用的主要器材和设备有牛用假阴道，集精杯，假台牛等。假阴道及集精杯等器材，在采精前必须充分洗涤，玻璃器材应高温干燥消毒。采精时要调节假阴道内壁的温度至39度左右，并维持适当的压力。阴道内壁还要涂抹适量医用凡士林以增加润滑度。假台牛可以是非种用待淘汰的健康母牛，或是利用木料或金属制成的假台牛架。但如若是假台牛架，其后部需要制成与母牛的后躯相似，在架的表面，大多覆盖牛皮。

精液处理、检查和保存需要的器材和设备：包括精液处理设备(如恒温水浴锅、离心机等)、精液质量检测设备(如显微镜、比色仪等)、精液分装设备(如封装用细管、精液分装机)、冷藏箱、冷冻设备和冷藏设备(液氮、液氮罐)等。

人工授精用器材有精液运输时保存精液的设备、人工授精器材(如输精管或输精枪)、精液质量检查设备(如显微镜)、牛体清洗器材。

另外，在各个环节，还需要器材的消毒设备和药品，如烘箱、干燥箱、酒精等。

2.1.2公牛的准备

公牛的准备主要是指初次采精公牛的调教和公牛采精前的准备。公牛的性成熟期约在7-8月龄，人工采精的公牛，约8—10月龄可开始采精训练。新公牛开始采精训练时，为了促使其性欲，可用健康的非种用母牛作台牛，诱使公牛接近台牛，并刺激其爬跨。待公牛适应了采精后，也可将母牛换成假台牛，但要注意，在肉用牛和一些性欲不很强的乳用公牛，往往用假台牛，更激发不起公牛的性欲，故不宜进行更换。在采精训练时，必须注意耐心细致的原则，不能强行从事，或粗暴对待采精不顺利的公牛，以防使公牛产生对抗情绪[1]。

2.1.3 采精的方法

(1)假阴道法是利用模拟母牛阴道环境条件的人工阴道，诱导公牛射精而

采集精液的方法，比较安全而简单。采精时将公牛引至台牛后面，采精员站在台牛后部右侧，右手握持备好的假阴道。当公牛准备起步爬跨时，采精人员用左手取下盖假阴道入口的灭菌纱布；公牛爬跨后，迅速用左手准确地托握公牛包皮（切勿触摸阴茎），将阴茎导人假阴道入口（假阴道应与阴茎方向一致，一般与水平线呈35。角），使假阴道靠在台牛臀侧，随后公牛的后躯向前一冲即完成射精。当公牛滑下时，采精人员应持假阴道随公牛滑下，迅速而自然地取下假阴道，将假阴道直立并重新盖上灭菌纱布（保持假阴道入口向上倾斜）。打开开关，放出空气和部分热水，以便精液完全流入集精杯内。取下集精杯，盖上集精杯盖立即送入精液检查处理室。

(2)按摩法操作时，先将直肠内的宿粪排除，术者手伸入直肠约25厘米处，轻轻按摩精囊腺，使精囊腺分泌物自包皮流出，然后将食指放在输精管两膨大部中间，中指和无名指放在一膨大部的外侧，拇指放在另一膨大部外侧对它按摩。按摩时，手指向前向后滑动并轻轻伴以压力，这样反复进行按摩，即可引起公牛精液流出，由助手将精液接入集精杯内。为减少细菌污染，助手最好配合按摩公牛阴茎S状弯曲部，使阴茎伸出包皮之外，收集精液。但这种精液质量要比假阴道法所采精液差，密度稀且易污染细菌[2]。

2.2精液品质检查

精液品质检查的目的是为了检查精液的品质的优劣，同时也可以为精液的稀释、分装保存和运输提供依据。但是在精液品质检查的过程中要注意，采精后迅速置于37度条件下检查，防止温度骤然下降，对精子造成低温打击；检查操作要迅速，不能人为损害精子；评定结果要准确，取样要均匀。

外观评定标准：从动物的射精量、精液的色泽、气味、精子的状态（精子密度和活率）、PH等几个方面对精液的品质进行鉴定。

输精前都要对精子的活力和运动能力进行检测以保证受胎率。

2.3 精液的稀释

精液稀释是指向精液中是指向精液中加入一些适宜于精子存活和保持其受精能力的稀释液。精液稀释的目的就是为了扩大精液量，延长精子在体外的存活时间，增强其受精能力，充分提高优良种公畜的配种效率，有利于精子的保存和运

输。精液稀释液中一般要加入的必要成分包括能量物质、维持精液PH的缓冲剂、防止精子冷休克的抗冻物质以及抗菌物质等的保护性物质和其他的一些酶类、激素类、维生素类的添加剂。

在进行稀释前首先要确定精子的活率和密度，根据检测结果确定稀释倍数。精液稀释的操作方法是将精液和稀释液同时置于30度左右的恒温箱或水浴锅中，进行短暂的同温处理。稀释时，将稀释液沿器皿壁缓慢加入，并轻轻摇动，使之混合均匀。稀释倍数应按照奶牛、肉牛5~40倍，输精剂量一般在0.2~1ml，每个输精剂量的有效精子数一般要达到0.1~0.5亿；而水牛则按照5~20倍进行稀释，输精剂量基本在0.2~1ml，每个输精剂量的有效精子数为0.1~0.5亿[3]。

2.4 精液的分装保存

精液的保存一般分为常温保存、低温保存和冷冻保存。常温保存的温度一般是15~25度，在精液稀释中加入弱酸性物质，调整精子的酸性环境使精子处在弱酸性环境中，在弱酸性环境中精子活动受到抑制，能量消耗降低，PH一旦恢复到中性，精子即可复苏。但常温保存也有利于微生物的生长繁殖，因此必须加入抗生素。

低温保存的温度一般是0~5度，一般将稀释好的精液置于冰箱中进行保存，但应该注意严格遵守逐步降温的操作规程，原则上精液稀释后，要逐渐降温到0~5度[3]。当温度缓慢将至0~5度时，精子呈现休眠状态，精子代谢机能和活动力减弱。因此，利用低温来抑制精子活动，降低代谢和运动的能量消耗。当温度回升后，精子又逐渐恢复正常的代谢机能而不丧失其受精能力。低温保存时，为了避免出现冷休克，要在精液稀释液中加入抗冷物质。另外，低温保存精液在输精前一定要进行升温处理，一般可将存放精液的试管或小瓶直接投入30度的温水中即可。

冷冻保存是指将处理后的精液放在-196度的液氮中，进行长期保存。精液经过特殊处理后，保存在超低温下，精子的代谢活动完全受到抑制，其生命在静止状态下长期保存，当温度回升后又能复苏，且具有受精能力。在冷冻保存的过程中，需要在稀释液中加入一定量的甘油、二甲基亚砜等抗冻物质来增强精子的抗冻能力，并对防止发生冰晶其重要作用[4, 5]。

2.5 精液的运输

冷冻精液的运输前要查验所运输的冷冻精液的公畜的品种、畜号、数量及精子活率等是否符合要求后，方可运输，到达目的地后办好交接手续。要确保盛装精液的液氮容器的保温性能良好，运输之前充满液氮，容器外应罩好保护套，安放牢固，装卸时要轻拿轻放，严禁碰撞反倒。运输中避免强烈震动和暴晒，随时检查并及时补充液氮。

2.6 精液的解冻

解冻方法直接影响到解冻后精子的活率，所以精液的解冻是不可忽略的环节。不同畜种及剂型的冷冻精液，其解冻方法和温度有差别。一般牛细管精液，可直接浸入38~40度的温水浴中，摇晃15秒，解冻更长时间不会有更多的损害，但应该保证在20min内使用，冻精管一旦开始解冻就不能继续冷冻[6]。

2.7适时输精

输精人员要根据母牛的的发情情况来判断具体的输精时间，输精时间的准确判断也是人工授精的关键环节，输精过早或者过晚都会影响母牛的受胎率。母牛的发情周期是18~25天，平均为21天；发情的持续期一般为24~30h，对母畜的发情鉴定主要靠外部观察，即根据食欲、爬跨、外阴肿胀、分泌粘液、分泌量多少、排尿量及频率等症状来判断母牛发情与否[7]。

头胎母牛的发情持续期相对较短。母牛的排卵时间一般出现在爬跨后的12-18小时，精子要在输卵管内呆5个小时左右，获得能量才有利于精子游到子宫角内与卵子相结合。因此，适时输精的时间是10-25小时，最多延长到30h。在实际工作中，最好在母牛出现爬跨行为时输第一次，间隔8-12小时输第二次可以大大提高受胎率[8]。

2.8输精

输精是人工授精的最后一个重要环节，是确保获得较高受胎率的关键。因此，输精过程对操作人员有较高的技术要求。在进行正式输精前，首先要进行以下几个方面的输精前准备。

2.8.1牛的保定：

将待配母牛保定在六柱保定架内或在奶牛的畜床上输精。

2.8.2精液的准备：

冷冻精液要先进行解冻，颗粒冻精解冻后，吸入输精器中。颗粒冻精解冻后或直接用鲜精输精时，可在钢质输精器末端接一个1或2.5ml的一次性注射器，然后吸取精液，以保证精液输入的数量。细管输精器应将细管冻精解冻后，用专用剪刀剪去封口端约0.5cm（用聚乙烯醇粉或热封端，另一端为中间夹有聚乙烯醇粉的棉塞），把细管专用输精枪捅针向后拉10～15cm，将剪口端向前装入输精枪的前端。将输精枪外套管的后端从塑料膜中推出塑料膜外，然后将外套管与输精枪套在一起旋紧[9]。

2.8.3外阴部消毒：

将母牛的尾巴拉到一侧，操作员站在牛的后方。用0.1%高锰酸钾冲洗母牛的外阴、肛门，并用消毒纸巾将水分吸干，将外阴部及唇裂擦拭干净。

输精前的准备工作完成之后，就要进行输精操作，母牛的输精主要由以下两种方法：

2.8.4阴道开张器输精法

操作时一手持开张器，打开母牛阴道，借助光源找到子宫颈口，另一只手握吸有精液的输精器，伸入子宫颈1～2皱褶处(2～3cm)，慢慢注入精液。此法能直接观察到输精管(输精枪)伸人子宫颈口的情况，比较好掌握。但操作时，母牛往往骚动不安，努责弓背加之输精部浅易引起精液倒流，受胎率低。另外，此法容易损伤母牛的阴道粘膜，输精不方便，故生产中很少采用[10]。

2.8.5直肠把握输精法

一只手伸人直肠内把握住子宫颈，另一手持输精器，先斜上方伸入阴道内进入5～10cm后再水平插入到子宫颈口，两手协同配合，把输精器伸人到子宫颈的3—5个皱褶处或子宫体内，慢慢注入精液。把输精枪插入子宫颈内口后，将输精枪后退0.1-0.3cm，以防皱褶堵塞枪口，使精液倒流。每次输完精后应及时将输精器具进行消毒处理，以保证人工授精的卫生环境[11]。

一般情况下，发情母牛只需输精一次即可，但如果输精后8h内母牛仍有明显的发情征状，应在第一次输精后8～10h进行第二次输精。

2.9 人工授精的意义[12]

2.8.1 人工授精有效的改变家畜的配种过程，提高优良种公畜的配种效率和种用

价值。

2.8.2人工授精可减少种公畜的饲养头数，降低生产费用，提高经济效益。

2.8.3人工授精可充分利用优秀种公畜的遗传资源，加快遗传进程及品种改良速度，促进育种工作进程。

2.8.4人工授精可克服公畜与母畜因体格相差过大不宜配种，或生殖道因某些异常不易受胎的困难，并能及时发现不孕症等生殖器官疾病，有利于提高母畜的受胎率。

2.8.5人工授精使公畜和母畜不直接接触即可完成配种，可防止各种接触性疾病的传播。

2.8.6冷冻精液可以长期保存和运输，使配种不受地域限制，并可开展国际间的交流和贸易，代替种公畜的引进。

参考文献：

[1]刘建兵，杨国义，陈玉山，张茂华，郭鹏，种公牛若干采精技术措施[J]，黄牛杂志，2003(01):70-71

[2]梁家充，兰干球，牛和水牛人工授精的现状与发展，见：中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（下册），南宁，2010，505-508

[3]李长彬，牛液态精液处理的方法[J]，养殖技术顾问， 2013(5):50-52

[4]贾永宏，朱庆超，杨海涛，武致存，高璞，李梅等，牛精液冷冻保护剂研究进展[J]，家畜生态学报， 2014，35(1):5-8

[5]邓福金，王化青，吴庆荣，牛精液冷冻机理的探讨[J]，中国牛业科学，2013，39(2):57-59

[6]韦英明，蒋如明，凌泽继，牛人工授精操作技术要领[J]，广西畜牧兽医，2005(06):260-262

[7]金勇权，许国栋，金文淑，牛人工授精技术和影响受胎率的因素及防止措施[J]，中国牛业科学，2006(04):78-80

[8]刘建兵，杨国义，穆秀萍，母牛发情鉴定和适配时间探讨[J]，畜牧兽医杂志，

2004(02):48-49

[9]金勇权，许国栋，牛人工授精受胎率影响因素及控制[J]，吉林畜牧兽医， 2006(04):37-38

[10]黄梅，白强，周建雄，李江能，牛的人工授精技术[J]，畜禽业， 2009(2):58-59

[11]王增强，赵萍，浅谈牛人工授精技术[J]，新疆畜牧业，2013(02):48-49

[12]孙长青，动物人工授精的意义与程序[J]，养殖技术顾问， 2014(5):55-55

动物繁殖技术

牛和水牛人工授精发展及现况 摘要 人工授精（artificial insemination，AI）是指以人工的方法，采集雄性动物的精液，再将处理后的精液输入到雌性动物生殖道的特定部位，以代替雌雄动物自然交配而繁殖后代的一种技术。 关键词：人工授精输精采精精液的稀释解冻精液受胎率 Situation andDevelopment of Artificial Insemination in Cattle and Buffalo ABSTRACT Artificial Insemination is breeding methods that use artificial methods to collect semen of males,and then put the semen,which have been examined and processed,intooestrous female genital to replace the natural union process of male and female animals.

KEYWORDS: artificial insemination;semendeposition;collectsemen;the dilution of semen;thawed semen;conception rates 1人工授精的发展历程 人工授精最初报道成功是在1780年意大利生理学家L.Spallanzani进行狗的实验。1900年，俄国学者E.I.Ivanoff开始研究家畜的人工授精。他最初以马为研究对象，却是第一个成功的进行了牛和绵阳的人工授精。到了20世纪30年代，人工授精技术形成了比较完善的操作程序，有实验阶段进入到了使用阶段。丹麦于1936年成立了世界上第一个人工授精协会，并在牛的人工授精技术上处于领先地位。美国Rutgers大学的E.J.Perry教授于1938年组织了美国的第一个人工授精合作会。20世纪40年代之后，人工授精技术的应用得到了蓬勃发展，成为家畜品种改良的重要手段。人工授精在奶牛业的发展最快，多数国家已普及了冷冻精液人工授精，如美国、英国、澳大利亚、新西兰、加拿大和日本等。由于冷冻精液普及率逐年提高，法国经过后裔测定，优良种公牛的遗传力的改进每年进展达20%。猪的人工授精近20年来在很多国家也受到了重视。如美国，猪人工授精技术应用于20世纪70年代，90年代得到了较快的普及，普及率由1992年的5%~10%发展到1997年的30%~50%，目前美国的猪人工授精技术应用率达到80%，由规模较大的专业供精公司供给和推广，一些大型种猪育种公司也广泛采用人工授精技术进行生产。2002年资料表明，全球1900万头猪中，99%是经稀释常温保存后授精出生的，这是此前15年的3倍。马和绵羊、山羊的人工授精在少数国家也得到了应用。 我国近30多年来的人工授精技术，从发展迅速、普及的范围和动物来看，都取得了很大的成绩。奶牛已普及冷冻精液的人工授精，在中国黑白花奶牛的育种上起到了极其重要的作用。 2人工授精的技术环节 人工授精技术的基本程序包括采精、精液品质检查、精液的稀释、分装保存、运输、冷冻精液的解冻与检查、输精等环节。

动物繁殖学复习资料

一、名词解释（6个） 1、红体 成熟卵泡破裂、排卵后，由于卵泡液排出，卵泡壁塌陷皱缩，从破裂的卵泡壁血管流出血液和淋巴液，聚积于卵泡腔内形成血凝块，称为红体。 2、黄体 卵泡内膜分生出血管，布满于发育中的黄体，卵泡内膜细胞也移入黄体细胞之间，由于吸取脂类而使颗粒细胞变成黄色，称为黄体。 3、睾丸下降 睾丸在胎儿期存在于腹腔内，在动物出生前或出生后，睾丸才由腹腔沿腹股沟管进入阴囊内。 4、隐睾 动物出生或成年后，一侧或双侧睾丸未能进入阴囊，仍留于腹腔或腹股沟内的现象。 5、卵泡发育波 雌性动物在一个发情周期中，卵巢上有群体卵泡发育到三级卵泡及少数卵泡发育到成熟卵泡大小时，发生闭琐退化或排卵的现象。 6、皮质反应 卵子激活后，胞质内皮质颗粒向卵质膜下移动，并且与卵质膜融合，释放内容物的过程。 7、透明带反应 透明带在皮质酶作用下，糖蛋白分子结构发生变化，导致精子无法识别和穿过透明带的现象。 8、卵黄膜反应 精子进入卵黄膜时，精子质膜与卵黄膜融合，卵黄膜立即发生变化，表现为卵黄紧缩，卵黄膜增厚，并排出部分液体进入卵黄周隙。 9、顶体反应 获能后的精子，在受精部位与卵子相遇，顶体结构的囊泡形成和顶体内酶的激活与释放的过程。

10、情期受胎率 即妊娠母畜头数占配种情期数的百分率。 11、卵丘 随着卵泡液增多，卵泡腔扩大，初级卵母细胞、透明带、放射冠及部分卵泡细胞突入卵泡腔内形成卵丘。 12、精子获能 哺乳动物精子离开雄性生殖道时，还不能立即与卵子受精，必须在雌性生殖道内经历一段时间，在形态和生理上发生某些变化，机能进一步成熟，才具备获得受精的能力。 13、适配年龄 根据品种、个体发育及繁殖能力等，确定适用于配种的公畜年龄。 14、胚胎附植 胎在子宫中定位后结束游离状态，开始同母体建立紧密的联系，这个过程称为附植 15、胚胎分割 是指利用特制的玻璃针或显微刀片，采用机械方法将早期胚胎显微分割成2、4、8或更多等分，人工制造同卵双生或同卵多生的技术。 16、妊娠识别 在妊娠初期，孕体发出信号（类固醇激素或蛋白质）传递给母体作用于母体，母体随即产生反应，以识别孕体的存在。由此，母体和孕体建立密切联系，促进孕体进一步发育，这一生理过程叫妊娠识别。 17、同期发情 采用外源生殖激素等方法使一群母畜在同一时期发情并排卵的技术。 18、超数排卵 是应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育，并排出具有受精能力的卵子的方法，称为超数排卵，简称“超排”。 19、繁殖力 家畜维持正常繁殖机能、生育后代的能力

奶牛胚胎移植技术

奶牛胚胎移植技术 上海交通大学农业与生物学院 朱淑文 一、概述 牛胚胎移植的商业化应用开始于七十年代初期。当时，必须通过手术方法才能采集胚胎，由于奶牛的乳房影响手术的顺利进行，手术后往往还会影响奶牛以后的繁殖性能，因此，胚胎移植主要在肉牛中应用。1976年，一些研究小组报道了应用导管高效采集胚胎的非手术方法。随后，胚胎移植在奶牛中的应用得到了飞速发展。1974年，第一头胚胎移植登记荷斯坦奶牛在美国出生。七十年代后期，胚胎移植（ET）登记荷斯坦奶牛的数量每年以100%以上的速度增长，1980年达到8298头年。进入80年代后，随着非手术采胚法和移植技术的改进以及胚胎冷冻保存技术的发展，每年（ET）登记奶牛的数量在稳步增长，至1990年达到18727头年。截止1991年，美国登记的胚胎移植荷斯坦奶牛总数量已达到142598头。目前，44%的荷斯坦优秀种公牛是由胚胎移植培育的。九十年代以来，胚胎移植在发达国家中的增长速度有所减缓，但是技术含量越来越高，例如体外受精胚胎生产技术、转基因技术以及克隆技术的应用和研究得到加强。近几年来，胚胎移植在亚洲和南美一些国家中增长速度很快。从整个世界范围来看，牛胚胎移植的增长速度仍然很快。 二、胚胎移植技术 （一）体内受精胚的移植 1 超数排卵 在常规胚胎移植技术中，获得大量可用胚胎的主要途径是超数排卵（简称超排），因此，高效率的超排技术是胚胎移植技术能否在生产中推广应用的关键。应用于奶牛的超排激素主要有PMSG（孕马血清促性腺激素）和FSH（促卵胞素）。PMSG尽管只需一次性注射，省时省力，但是半衰期过长，可以导致卵巢的过度刺激以及对排卵、受精和随后的胚胎发育产生不利的影响，因此现在一般已不采用PMSG对奶牛进行超排处理。目前广泛应用于母牛的超排激素是FSH。用于奶牛超排的商品FSH均是从屠宰家畜的脑垂体中提取的，脑垂体不但能够分泌

动物繁殖生物技术

第一章 动物胚胎技术：以动物生殖细胞和胚胎为主要研究对象，以生物科学为基础，研究调控和提高动物繁殖力的一门学科 第二章 精细管上皮周期：某个特定时间有一个特定的细胞组合，然后间隔一段时间后，在同一横断面又会出现相同的细胞组合 精细管上皮波：从精细管纵切面上看，细胞组合也是有规律的出现，即沿着纵切面每间隔一段距离会观察到相同的细胞组合 促性腺激素释放激素（GnRH） 促卵泡素（FSH） 促黄体素（LH） 催产素（OXT） 催产素和精氨酸加压素（AVP） 表皮生长因子（EGF） 胰岛素样生长因子（IGF） 转化生长因子β（TGF-β） 转化生长因子α（TGF-α） 胶质细胞系来源的神经营养因子（GDNF） 干细胞因子（SCF） 精子：有头部、颈部、尾部组成，精子的形态的差异主要在头部 卵泡：分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡 征集：生长卵泡池中一群小卵泡开始迅速生长 选择：只有部分被征集的卵泡继续发育，以致最终确立优势卵泡的过程 优势化：优势卵泡迅速发育而其他同时被征集的卵泡的生长和发育被抑制 自发排卵：卵泡成熟后不需外界刺激即可排卵和自动形成黄体 诱发排卵：动物经过交配或人为刺激子宫颈才能引起排卵。 旁分泌：某种组织内一种类型的分泌的活性物质作用于同一组织中另一类型细胞，调节其功能、生长和分化 自分泌：某种细胞的因子作用于同一类型的细胞或自身细胞的现象 第三章 获能：动物刚射出的精子不能穿入卵子，只有在雌性生殖道内经历一段时间，在形态和生理上发生一系列变化，才具备受精能力的生理现象。 去能：获能精子一旦与浆液和附睾液接触，已获能的精子就会失去授精能力 发生泡破裂：卵细胞成熟后，这一时期细胞核的变化包括两个衔接的过程 早期胚胎发育阶段：1、卵裂2、桑椹胚3、囊胚4、胚胎的原肠化胚胎的扩张或伸长6、胚胎迁移和分布

动物繁殖技术的研究进展

动物繁殖技术的研究进展 摘要：随着人工授精技术、胚胎移植和克隆技术的不断发展，动物实际繁殖率将进一步提高，这在动物育种上能够充分发挥优良公母畜的生产潜力，提高品种总体生产性能，加快畜牧业的发展。介绍了新型繁殖技术在动物育种上的应用。 关键词：人工授精；胚胎移植；克隆；转基因 现代动物繁殖技术包括人工授精、同期发情、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、体外受精、克隆技术和性别控制等等，其中人工授精和胚胎移植在现代畜牧业生产中发挥着极其重要的作用，尤其是人工授精技术，是迄今为止应用最广泛并最有成效的繁殖技术。 随着科技的不断发展，动物繁殖技术的研究不断深入，繁殖技术的应用日益广泛。从常规的人工授精到胚胎移植和体外性控胚胎生产等一系列高新技术的应用使得家畜繁殖的速度更快。生产性能更高，繁殖准确性更好，给畜牧业带来了巨大的经济和社会效益，为畜牧业的产业化发展提供了强劲的动力和竞争力。 1 主要繁殖技术应用概述 1．1人工授精技术 人工授精技术是借助于专用器械，用人工方法采取公畜精液，经体外检查与处理后，输入发情母畜的生殖道内，以代替公母畜自然交配，使母畜受胎的一种繁殖技术。人工授精技术能充分利用优良公畜的繁殖性能，减少种畜的饲养量，降低生产成本；使优良基因的影响迅速扩大，可以极大地加快遗传改良的速度；能提高母畜的受胎率；使种公畜的精液不受时间和地域的限制，可以很好地在各地组织实施和交流。我国自20世纪60年代普及了奶牛的新鲜精液人工授精技术后，从1977年开始在全国推广牛的冷冻精液。目前，全国各省区共有40多个冷冻精液站已具备年产近2 000万个剂量的牛冻精生产能力，奶牛人工授精已得到普及，黄牛每年杂交改良也在千万头以上。在养羊发达的北方省区已经普及人工授精，猪的人工授精在生产上也得到广泛应用，部分野生动物也广泛采用人工授精技术。 1．2胚胎移植 近几年，胚胎移植也已成为畜牧业生产上的一项常用技术，采用胚胎移植越来越普遍。胚胎移植又称受精卵移植，也称为“借腹怀胎”或“人工受胎”，其含义是将一头良种母畜的早期胚胎用冲洗子宫的方法取出，或是经体外受精获得的胚胎，移植到另一头生理状态相 同的母畜体内，使之继续发育为新个体的技术。提供胚胎的个体称为供体，接受胚胎的个体称为受体。胚胎移植产生的后代，遗传特性取决于胚胎的双亲，受体母畜对后代的生产性能影响很小。胚胎移植对畜牧业生产的重要意义在于从低产母畜能得到高产后代；加速引进品种的繁殖和新品种的培育，比用现有品种进行长期杂交育种更为经济有效；加速家畜改良的进展，通过超数排卵和胚胎移植技术，可使供体繁殖的后代增加7～10倍以上；增加双胎率，加速繁殖；使不孕母畜获得生育能力，继续发挥其繁殖作用。自20世纪90年代初至今，人工胚胎移植技术向产业化方向发展，每年移植受体牛数万头，扩繁纯种肉羊数万只，在奶牛、超细毛羊和肉用羊育种中发挥了蕈要作用。 1.3克隆技术 动物克隆是指由一个动物不经有性生殖而直接获得与亲本具有相同遗传物质的多个后代的过程。自1997年，英国体细胞核移植绵羊“多莉”(Dolly)的降生(Wilmut etal．)，是生物学史上乃至整个生命科学领域内划时代的突破，如同在科技界爆炸了一颗“原子弹”．在生物学及相关领域引发了一场革命。“多莉”的成功首次证明了成年动物分化的体细胞具有发育的全能性，并能维持核移植胚胎发育直至出生。这一成果不仅给人们的观念带来了很大的改变，

羊的胚胎移植.doc

羊的胚胎移植 一、胚胎移植概述 二、胚胎移植原理 三、胚胎移植技术程序 一、胚胎移植概述 1.胚胎移植的发展历史 2.胚胎生物技术的研究意义及其在畜牧生产中的应用 3.胚胎移植目前存在的问题 4.影响胚胎移植的主要因素 5.胚胎移植的经济效益 6.胚胎移植的发展前景 1.1国外胚胎移植发展史 George是世界上第一个提出动物胚胎移植的人。1890年4月，Walter Heape用兔作为实验动物，成功地获得了世界上第一个动物胚胎移植后代。Heape兔胚胎移植的成功，极大的影响着繁殖生物学和畜牧业的发展。1900年，Heape的杰出接班人FHA Marshall和John Hammond总结了他的主要工作内容，提出了哺乳动物性季节的概念，也就是现在所说的发情周期。1911-1913年，奥地利维也纳的Biedl 等进行了兔的胚胎移植实验，但由于战争，直到1922年才报道了其研究结果。虽然他们做了70多个实验，但由于把输卵管的胚胎移植到子宫，结果只有一只受体兔妊娠，这充分证明了胚胎和受体的同步性是非常重要的。1932年和1933年，Warwick,Berry和Horlache第

一次把胚胎移植技术用在绵羊和山羊上，Dr. Berry也因此成为了第一个国际胚胎移植协会先驱奖的获得者。1948年，张明觉用超数排卵技术从2只母兔获得88枚受精卵，给7只受体母兔移植，成功地产出76只小兔，这次试验的成功具有划时代的意义。1950年12月19日，33岁的美国人Elwyn Willed成功地获得了世界上第一头胚胎移植牛犊。60年代初，全部采用的是手术回收胚胎和移植，1964年Mutter 等和1965年Sugie相继报道了非手术移植胚胎获得成功。70年代中期，牛的非手术移植完全取代了手术移植. 1974年，成立了国际胚胎移植协会(IETS )，随后相继成立了美国胚胎移植协会、加拿大胚胎移植协会、欧洲胚胎移植协会 1.2 国内胚胎移植发展史 我国的胚胎移植研究起步较晚，于20世纪70年代初才开始。1973年首先在家兔上获得成功。1974年，中科院遗传所在绵羊胚胎移植上取得成功。1976年郭志勤、谭丽玲等在家兔胚胎和绵羊胚胎低温(100C)保持1天和10天后移植成功。手术法和非手术法牛胚胎移植在1978年和1980年也相继成功。1980年中国农业科学院畜牧所在绵羊胚胎超低温保存后移植产羔。20世纪80年代，胚胎移植进入了实验阶段，掀起了全国的研究高潮，20几个省近30个单位相继开展了胚胎移植研究工作。20世纪90年代初期，我国的胚胎移植工作逐渐进入了生产应用初始阶段。生产应用比较好的地区主要是内蒙古、新疆和黑龙江、北京 1.3 羊的胚胎移植发展历史

动物发育生物学.

动物繁殖技术简介 摘要：动物繁殖技术是畜牧业生产中的关键技术环节，在优质、高产、高效的现代畜禽繁育中占有重要的地位。本文综述了人工授精技术，体外受精技术，性别控制，胚胎移植技术，克隆技术，转基因技术，B-型超声波诊断技术等九个方面的动物繁殖技术的进展。 关键词：人工授精；性别控制；胚胎移植；克隆；转基因 Brief Introduction of Animal Reproductive Technique Abstract: The animal breeding technology is a key technology in the production of animal husbandry, occupying an important position modern livestock and poultry breeding of high quality, high yield and high efficiency. This paper reviewed the development of the technique of animal breeding such as the artificial insemination, in vitro fertilization technology, sex control, embryo transfer technology, cloning, transgenic technology, b-type ultrasonic diagnosis, etc. Keywords: artificial insemination; Sex control; Embryo transfer; Cloning; Genetically modified 前言 动物繁殖技术是生物技术的重要分支。动物繁殖技术从20世纪50年代人工授精技术到20世纪70年代胚胎移植技术的应用，似乎才真正开始动物繁殖技术的新纪元。动物繁殖技术在过去的50年里取得了显著进展，现代动物繁殖技术包括人工授精、同期发情、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、体外受精、克隆技术和性别控制等等，其中人工授精和胚胎移植在现代畜牧业生产中发挥着极其重要的作用，尤其是人工授精技术，是迄今为止应用最广泛并最有成效的繁殖技术[1]。这是一个以人工授精起始的连续过程。随着体外受精、精子分离和核移植克隆等技术的发展，这些连续性的繁殖技术将是目前和未来提高生产力的强有力手段。

动物繁殖学名词解释

动物繁殖学：研究动物繁殖现象、本质和规律，并在此基础上开发相应的技术，调整和控制繁殖的过程，以充分发挥动物的繁殖潜力，提高繁殖力的学科。 Sertoli cell支持细胞或足细胞:是曲精细管上的体细胞。分泌抗缪勒氏管激素。 Leydig cell间质细胞：由睾丸间充质细胞分化而来。分泌睾丸激素。 激素(hormone)：由内分泌腺分泌的通过血液循环系统作用于靶细胞，并对靶细胞有兴奋或抑制的生理作用的一类高蛋白物质 生殖激素：对生物生殖有直接作用的激素 睾丸下降(descent of testicle)：胎儿期的睾丸位于腹腔内，大多数雄性家畜或动物在出生前或出生后不久，睾丸才由腹腔通过腹股沟管进入位于腹壁的阴囊内，这一过程叫睾丸下降。 初情期(puberty)：公畜初次释放有受精能力的精子，并表现出完整性行为序列的年龄，即为公畜初情期；母畜初次发情和排卵的时期。性成熟（sexual maturity）：是继初情期之后，青年公畜的躯体和生殖器官进一步发育，具备正常生育能力的生理状态。指母畜初情期后的一段时间，生殖器官发育成熟，但其他组织器官仍在发育。通常公畜性成熟比母畜晚。性成熟是生殖成熟的标志。适配年龄(age that suitable for mating)：是根据公畜自身发育状况和使用目的，人为确定的公畜适宜配种的年龄阶段。 性行为(sexual behavior)：是指在初情期以后，公畜和母畜接触中，在激素作用下，通过神经刺激（嗅觉、听觉、视觉和触觉）所表现出来的特殊行为。 性行为序列(sexual behavior chain)：性唤醒→求偶→勃起→爬跨→插入→射精→下爬→不应 精子发生(spermatogenesis)：从精原细胞分裂到形成精子的全过程称为精子发生，包括生精细胞分裂、增殖、演变和向管腔释放等过程，同时也存在着时间和空间变化规律。 精子的形成：生精细胞中的精原细胞经数次分裂形成初级精母细胞(primary spermatocyte)，再经减数分裂(meiosis)变为单倍体的精子细胞，精子细胞经变形过程形成精子，这一过程称为精子的形成。 精子形成(spermiogenesis)：精子细胞的变形和精子的形成，称精子形成。 细胞组合(cellular association)：精子发生过程中，在精细管任何一个断面上都存在着精子发生系列中不同类型的生精细胞，这些细胞群中的细胞类型是不断变化的、周期性的，通常把这些细胞群称为细胞组合。 精细管上皮周期：在精细管同一部位出现两次相同细胞组合期所经历的时间，叫做精细管上皮周期。 精细管上皮波：是指在精细管的纵长方向细胞组合排列状态所显示的周期性变化规律，它反映的是精细管上皮的空间或距离的变化规律，与精细管上皮周期不同，是一个空间概念。 精子发生周期(spermatogenic cycle)：在精细管上皮细胞出现的精子发生序列，即由A型精原细胞分裂开始，直至精子细胞变成精子所需的时间叫做精子发生周期。 血—睾屏障：血液和淋巴液不能直接进入精细管，使发育中的生精细胞免受血液化学变化的影响，是靠精细管外周的肌细胞和足细胞间的特殊连接来完成，这种结构称为血—睾屏障。 卵子发生（oogenesis）：过程包括卵原细胞的增殖、卵母细胞的生长和卵母细胞的成熟三部分。 增殖期：卵原细胞通过有丝分裂增加卵原细胞的数量，这个时期称为有丝分裂期或增殖期。 生发泡(germinal vesicle,GV)：第一次减数分裂阶段，染色体发生变化，产生大量核质，形似球状，此时的细胞核称为生发泡。 生发泡破裂（germinal vesicle,GVBD）：发生在细胞核成熟阶段。 卵母细胞成熟：是指卵母细胞逐步获得恢复减数分裂的能力并为受精和胚胎早期发育做准备的过程，包括细胞核成熟和卵泡质成熟。卵泡发育（follicular development）：是指卵泡由原始卵泡发育为初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成熟卵泡的生理过程。 卵泡发生（育）波(follicular wave)：雌性动物在一个发情周期中，卵巢上有群体卵泡发育到三级卵泡及少数卵泡发育到成熟卵泡大小时， 发生闭锁退化或排卵的现象。 红体(corpus hemorrhagicum)：成熟的卵泡破裂排卵后，由于卵泡液被排空，导致卵泡腔内产生了负压，从而使部分血管发生破裂，血 液积聚于卵泡腔内形成凝块，破裂口呈火山口样，呈红色，称为红体。 黄体(corpus luteum)：产生红体后颗粒层细胞增生变大，长满整个卵泡腔，并突出于卵泡表面，由于吸取类脂质而使颗粒细胞变成黄色，称为黄体。 发情周期(estrous cycle)：母畜自第一次发情后，如果没有配种或配种后没有妊娠，则每间隔一定时间便开始下一次发情，如此周而复始地进行，直到性机能停止活动的年龄为止。有四分法（发情前期、发情期、发情后期、间情期）和二分法。产后发情(estrus after parturition)：是指母畜分娩后出现的第一次发情。 乏情(anestrus)：到达初情期的雌性动物不出现发情周期的现象，称为乏情。 安静发情(slient estrus)：又称安静排卵，即母畜无发情症状，但卵泡能发育成熟并排卵。孕后发情：母畜妊娠后仍出现发情表现。 慕雄狂(nymphomania)：常见于牛和马的一种异常发情状态，患畜高度兴奋、食欲减退、消瘦、尾根举起、频频排尿，经常追逐和爬跨其他母牛，配种后不能受胎，伴有雄性第二特征，多与卵泡囊肿有关。 发情控制(control of estrus)：应用外源生殖激素或药物以及管理措施人工控制母畜个体或群体发情并排卵的技术，称发情控制。

实习报告：动物胚胎移植技术

动物胚胎移植技术

摘要 胚胎移植又称受精卵移植，是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵管或是子宫内，使之继续发育成新个体的技术。 动物胚胎移植主要是通过对优良供体母畜作同期排卵处理和体内胚胎生产或体外人工授精（IVF）的方法，以大量获得优良的动物胚胎后再将其移植给普通代孕受体母牛进行快速繁殖优良动物的生物技术。胚胎移植技术主要用于快速扩大优秀种公牛和核心母牛的数量。尽管单个胚胎的生产成本较高，但由于种公牛和种母牛较高的经济价值和社会价值，以及利用胚胎移植在育种方面可以获得同胞或同卵双生牛进行后裔测定等优势，因此，该技术在种公牛的选育和优质核心母牛群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。 本论文将对动物胚胎技术作比较全面的阐述，使大家对动物胚胎技术有一个比较全面的认识。 关键词：供受体超数排卵同期发情胚胎回收胚胎检查胚胎移植

1.1 发情后生殖器官的孕向发育 家畜在发情后生殖器官会发生一系列变化，如：卵巢中功能性黄体的形成，孕酮的分泌和维持，子宫内膜组织的增生和分泌机能的增强，以及其他生理生化的特异现象。这些变化都为胚胎的生存和发育创造了适宜的条件，为妊娠作准备。 配种受孕后的动物其生殖系统朝着妊娠的方向继续发生变化以适应胚胎发育的需要，如黄体的持续存在以及孕酮的分泌和维持，子宫内膜的继续发育。而未受孕的动物其生殖系统会退回到发情前状态。 发情供体和受体发情周期的同期化程度前后不超过一天，否则移植成功率就会降低，甚至移植失败 因此发情后或交配刺激后雌性动物生殖器官的孕向变化是进行胚胎移植的主要生理学基础。 1.2 早期胚胎的游离状态 胚胎在发育的早期有相当一段时间是游离存在于子宫内的，和子宫黏膜没有建立紧密联系，其发育主要靠自身贮存的养分。这样，早期的胚胎容易从生殖道中取出，而且在离体情况下，可短期培养，易存活。 早期胚胎处于游离状态是能够进行胚胎移植技术的基础 1.3 子宫对早期胚胎的免疫耐受性 1.4 胚胎遗传物质的稳定性 在同一物种之内进行胚胎移植不会产生排斥现象;同时，受体对胚胎不产生遗传上的影响，不会改变新个体的遗传特性，也不会减弱起优良性状在出生后的表现程度。

动物繁殖

动物繁殖技术最新进展 摘要：动物繁殖技术是畜牧业生产中的关键技术环节．在优质、高产、高效的现代畜禽繁育中占有重要的地位，本文主要综述性别控制技术、克隆技术、集约化的Moet技术等三个方面的动物繁殖技术的新进展。关键词：性别控制技术克隆技术集约化的Moet技术 随着科技的不断发展，动物繁殖技术的研究不断深入，繁殖技术的应用日益广泛。从传统的人工授精到现在的性别控制技术、体外授精胚胎移植技术（IVF-ET）、超数排卵胚胎移植技术（MOET）等高新繁殖技术，使得家畜繁殖的速度更快，生产性能更高，繁殖准确性更好。因此，重视动物繁育技术的不断改进和发展，对于我国动物种业的长远高效发展具有重要意义。 1 性别控制技术 动物性别控制技术是通过人为手段干预决定动物出生性别的技术。在家畜育种业，性别控制的主要目标是产生具有特定经济价值和生产特性的单一性别家畜。例如生产具有高产奶量母牛，以及高效饲料转录率和高瘦肉率的优质公肉牛。X、Y精子分离技术是家畜性别控制技术中的重要组成部分。X、Y精子分离术结合人工授精、体外受精以及胚胎移植技术是规模化生产单一性别动物的有效技术体系。多年来，研究人员试图使用不同的方法进行X、Y精子分离，包括利用X、Y精子在染色质含量、泳动模式、体积以及免疫相关的差异等特性进行精子分离。在这些精子分离技术中，基于X、Y染色质含量差异的流式细胞分选技术是目前最有效的精子分离技术，该技术的分选精度达到90%以上[1]目前，分离的精子已经能够很好的被用于基础研究和商业生产[2]。截至目前，精子分离技术已经在兔、猪、牛、绵羊、马等家畜动物中成功运用。X精子与Y精子相比，X精子具有更大的头、颈和尾,更高的干质量。同时携带比Y精子多3-4%的染色质。 最初的流式分选技术效率非常低，每小时仅能够分选400000枚精子[3]。经过改进，目前精子分离速度可达12-20亿枚/小时[4]。然而，该技术也存在一定问题，随着技术不断改进和发展，基于流式细胞分选仪的家畜精子分选技术体系已经趋于成熟，然而分离精子浓度低的问题始终没有很好解决。目前，在牛，分离精子的产业化应用更为成熟，已经有大量性格控制奶牛、肉牛被生产。挑选低浓度精子受精能力强的优质公牛结合成熟的精子冷冻技术以及合理的饲养管理是牛精子分离技术产业应用成功的关键[5]。在羊和猪，结合腹腔镜技术能够实现低浓度精子的高效受精[6]。基于腹腔镜的人工输精技术虽然可以提高低浓度精子的受精率，但是技术和设备要求较高，推广速度较慢。此外，由于流式精子分离术要求专业、昂贵的流式细胞仪，目前仅一些较大的育种站或公司拥有。一些偏远地区对于精子分离的要求几乎没有办法满足。精子采集、冷冻、解冻、分离、再冷冻是解决这一问题的主要手段，

(高考生物)胚胎分割是一种生物技术

（生物科技行业）胚胎分割是一种生物技术

2008.12.31 龙冈中学2008/2009学年度专题3、4、5单元检测 高三生物（选修） 命题人：侍东升 班级：____________学号：__________姓名：_____________一、单项选择题：本部分包括25题，每题2分，共计50分。每题只有一个 ．．．． 选项最符合题意。 1、在动物胚胎发育过程中，早期原肠胚的细胞从一个部位移植到另一部位时，被移植的细胞能适应新的部位并参与那里的器官形成，但如果在原肠胚的末期，把未来发育为蝾螈后肢的部分移植到另一蝾螈胚胎不长后肢的部分，将发育为一条额外的腿，这说明() A.原肠胚末期已出现了组织分化和器官的形成 B.细胞是全能的 C.原肠胚末期出现了细胞分化 D.原肠胚已出现了三个胚层 2、下列哪项正确的表达了牛胚胎的发育顺序() A．配子→受精→合子→胚→卵裂 B．合子→胚→胎儿→幼体→成体 C．合子→卵裂→囊胚→原肠胚→胎儿 D．精卵细胞形成→受精→合子→胎儿→出生 3、哺乳动物受精卵在卵裂期发生的变化是() A.细胞的总面积与总体积的比值逐渐增大 B．细胞的数目增多，有机物含量大增C．每个细胞的DNA含量不断增加，全能性增高 D．逐渐出现了原肠腔，并有了胚层的分化 4、下列说法正确的是() A．卵裂期细胞经过了细胞分裂，不再分化B．原肠胚细胞属于全能细胞 C．囊胚腔先于原肠腔出现D．桑椹胚开始进行孵化 5、体外受精的场所是() A.在水溶液中 B.在盐溶液中 C.在获能溶液或专用的受精溶液中 D.在酒精溶液中 6、供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是() A、防止受体牛不愿意接受胚胎 B、只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育 C、只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同 D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强 7、判断卵子是否受精的标志是() A.当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到一个极体时 B.当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到二个极体时 C.当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到三个极体时 D.当卵黄膜和透明带的间隙中极体消失时 8、下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是() A．受孕母畜体内的早期胚胎能够移植B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态

小鼠胚胎移植技术方法比较_管彤

第18卷　第1期2001年3月实验动物科学与管理 LABORATORY ANIMAL SCIENCE AND ADMINSTRATION Vol .18　No .1Mar .2001 小鼠胚胎移植技术方法比较 管　彤,王凤山,王　静,王晓军,于国德,杨梦礼 (天津市劳动卫生职业病研究所,天津　300204) 摘要:以近交系小鼠C 57BL 6J 、BDF 1小鼠作为供体胚小鼠,封闭群昆明种小鼠作为代母,对实验小鼠胚胎移植的三种方法,即:对小鼠受精卵(或2个细胞期胚)经由代母输卵管口移植、经由代母输卵管壁移植及对小鼠进行子宫移植(8细胞期胚)的方法了进行实验研究,并对各方法适于使用的动物对象、实验要求、产仔率、优势与不足等做了进一步的探讨,为今后的实验动物与动物实验提供参考依据。关键词:近交系小鼠;输卵管口(壁);移植;子宫移植 中图分类号:S865.13　文献标识码:A 文章编号:1006-6179(2001)01-0029-03 收稿日期:2000-07-07 第一作者简介:管彤(1968-),女,助理研究员,主要从事野生小鼠资源开发及实验小鼠胚胎毒理学研究。 自五十年代以来人类建立了受精卵和早期胚胎的采集技术之后,很快就完成了早期胚向代母体内 输卵管及子宫移植的胚胎移植技术的开发和研究[1] 。小鼠的胚胎移植技术对于实验动物学研究及生命科学研究具有重要价值。人类由小鼠进行发育生物学研究,包括胚胎的发生、发育、突变基因的研究、转基因动物的研究、基因打靶技术及小鼠胚胎冷冻种子库技术等涉及胚胎体外操作的各种研究,均需要进行胚胎移植入代母体内来完成。按照胚胎发 生的阶段不同,移植部位也不同[2] 。1～2个细胞期胚胎进行输卵管口移植,8细胞期至桑椹期胚进行 子宫移植。1992年,日本学者Nakagata [3] 又报道了经由输卵管壁进行输卵管移植的技术,以解决移植中一些代母品系输卵管口较小、较短的问题。 本文主要是将此三种移植方法引入,使之在本实验室成为常规后,将其应用于实验小鼠并进行了方法上的比较,重点比较了方法上的难易程度、产仔率、方法选择的前提因素。 1　材料与方法 1.1　实验动物 实验动物作为参比对照的成年近交系C 57BL 6J 小鼠、B DF 1小鼠(♀C 57BL 6J ×♂DBA 2)和作为代母的昆明种封闭群小鼠。 1.2　试剂 PMSG (pregnant mare serum gonadotropin )、HC G (human chorionic gonadotropin )、胚胎移植用Injection Medium 培养液、M 2培养基等。1.3　假孕代母的准备 1.3.1　昆明种雄性小鼠的结扎 为输卵管移植及子宫移植用代母(昆明种封闭群小鼠)交配用的雄性昆明种小鼠进行输精管结扎手术,以便制备假孕代母。进行输精管结扎手术的雄性昆明种小鼠应提前三周施行手术,术后备用。1.3.2　制备假孕代母 胚胎移植前一日(子宫移植,前三日)将已施行输精管结扎手术术后三周的昆明种雄性小鼠以1∶2与其雌性小鼠进行同笼交配,次日检查阴道栓有无,以阴道栓形成者作为移植用代母。1.4　卵的采集 1.4.1　超排卵 [4] 取出生后8～10周的C 57BL 6J 及B DF 1雌性小鼠进行PMSG 处理(腹腔注射,5IU 只),48h 后进行HC G 超排卵处理,方法、剂量相同,HC G 处理14～17h 后可进行受精卵的采集(子宫移植,为HC G 处理后第三日)。 1.4.2　交配 取已注射PMS 、HCG 后的C 57BL 6J 、B DF 1雌性小鼠与其相应的C 57B L 6J 、BDF 1雌性小鼠进行同笼

动物繁殖学综述-

《动物繁殖学》生产实习（2014-2015学年上半学期） 论文题目：动物繁殖学生产实习综述 指导教师：龙翔、伏彭辉、周沛 班级：13级科产1班 学号：222013602022174 姓名：李超林

动物繁殖生产实习综述 李超林 动物科学系，2013级科产1班，222013602022174 摘要：通过观察理化因素对精子的影响、猪的采精、冷冻精液的制作、PMSG 和FSH 生物测定法的实习操作，把理论与生产实践相联系、把学与习相结合，掌握了影响精子活率的理化因素、采精的技术、对精子的品质检测、精液的冷冻及超数排卵和同期发情技术，获益匪浅。 关键词：发情鉴定人工授精生殖器官精液品检冷冻精液超数排卵 1实验1：母畜的发情鉴定 1.1 实验目的 了解各种发情鉴定技术，重点掌握外部观察法、阴道检查法、试情法、直肠检查法的具体操作程序，并能针对不同的家畜，合理地选用方法进行鉴定。熟悉母畜发情的基本规律和各种家畜发情的特点及配种时间的掌握。 1.2 实验材料 阴道开张器、水、肥皂、温水、75%酒精棉球、消毒棉签 1.3 实验内容 1.3.1 外部观察法 主要是通过对母畜个体的观察，视其外部表现和精神状态的变化，来判断是否发情以及发情的状况、用其方法最好从发现母畜发情开始就定期观察，了解发情变化的全过程，从而获得较准确的鉴定结果。 发情动物常表现为精神不安，来回走动，鸣叫，食欲减退甚至拒食，外阴部充血肿胀，湿润，有粘液流出，频频排尿，对周围的环境和雄性动物的反应敏感。母牛发情表现不安，哞叫，食欲和奶量都减少，尾巴常不停地摇摆和高举。放牧时通常不安静吃草而乱走。明显的特征是接受其它母牛的爬跨，弓腰站立不动，发情母畜也追逐其它牛。其它牛常嗅闻发情母牛的阴门，但发情母牛从不嗅闻其它母牛的阴门。阴道排出蛋清样的粘液，打开阴道从开张器中间滴流垂到地下。发情排卵过的母牛有时会看到从生殖道内排出带有血丝或少量血液的粘液。 1.3.2 开张器法 1.3. 2.1 检查前的准备工作 保定：根据现场条件和习惯，利用绳索，六柱栏保定母畜；将尾毛理齐，由一侧拉向前方。 外阴部的洗涤和消毒：先用温水（或肥皂。2-3%的苏打水等）洗净外阴部，然后用1%的煤酚皂溶液进行消毒，最后用消毒纱布或酒精棉球擦干。消毒或清洗时，应先由阴门裂开始，逐渐向外扩大。如果准备用手臂检查，洗涤及消毒范围应该上至尾根，两侧达到臀端外侧。 开张器的准备：先用75%的酒精棉球清毒开张器的内外面，然后用无烟火焰烧灼消毒，也可用消毒液浸泡消毒，然后用开水冲去药液并在其润湿时使用。1.3.2.2 方法步骤 用左手拇指和食指开张阴门，以右手转开开张器把柄向右或向左。把柄向右或向左，尖端斜向前上方插入阴门。当开张器的前1/3进入阴门后，即改为水平

动物繁殖(教学大纲)

《动物繁殖学》课程教学大纲 学时：60 学分：3.5 理论学时：44 实验学时：16 面向专业：动物科学课程代码：4600020 先开课程：动物解剖与组织胚胎学动物生理生化学课程性质：必修 执笔人：潘庆杰审定人：张廷荣 第一部分：理论课程教学大纲 一、说明 1、课程的性质、地位和任务 《动物繁殖学》是研究动物繁殖理论和繁殖技术的科学，它以动物的解剖学、组织胚胎学、遗传学、生理学、生物化学为基础，同时又与动物育种学、饲养学、卫生学、产科学及传染病学相联系。它是动物科学专业的一门专业基础课程。 在教学中除课堂讲课外，需安排一定时间的教学实习和实验课。通过本课程的学习，使学生全面了解和认识动物繁殖的基本规律及繁殖生理调节机制，掌握基本理论知识和提高繁殖力所涉及的各种繁殖新技术。 2、课程教学和教改基本要求 《动物繁殖学》是研究动物生殖生理、繁殖技术和繁殖管理的一门学科。通过各种教学方法，要求使学生逐步达到理论与实践相结合，为学好动物科学专业的后续课程奠定良好的基础，并能及时了解掌握一些繁殖新技术，具备解决实际问题的能力。本课程具有技术性、实践性强，知识面宽，难点较多，理论与技术发展迅速等特点，因此教学内容须不断更新补充，以满足学生对知识的渴求。教学方法包括课堂教学、实验、实习等多种形式，课后鼓励学生进行网络课程学习和根据后面提供的参考书及相关的图书资料进行知识面的拓宽和加深理论知识的理解和学习。学生还可以根据自己的兴趣选修一些相关课程，如《动物胚胎生物技术》、《动物转基因技术》等作为辅助。 二、教学内容与课时分配 绪论（2学时） 1.动物繁殖在畜牧学中的位置。

2.动物繁殖学的研究内容：生殖生理、繁殖技术、繁殖管理。 3.动物繁殖学与其他学科的联系。 4.动物繁殖的研究发展过程。 5.简述繁殖技术的研究和应用。 6.介绍课程安排与要求：内容安排、实验安排、教学实习安排。 第一章动物的生殖器官（4-6学时） 本章内容以动物生殖器官的解剖与功能为主，通过讲授使同学基本掌握雌雄性生殖系统各部分组织器官的解剖特点与生理功能，讲述主要以家畜、家禽及常见经济动物为主，搞清动物生殖器官的特点，为学好以后章节打下基础。 （一）雄性的生殖器官 1.睾丸：解剖特点、组织结构、生理功能。 2.附睾：外形、组织构造、生理功能。 3.输精管的构造与作用。 4.副性腺：精囊腺、前列腺、尿道球腺的解剖特点、副性腺的生理功能。 5.尿生殖道、阴茎。 （二）雌性的生殖器官 1.卵巢的形状、位置、组织结构、生理功能。 2.输卵管和子宫的构造特点、类型与生理功能。 3.阴道与外生殖器官的特点。 重点难点： 睾丸的组织结构与生理功能；卵巢的组织结构、生理功能。 思考题： 1.雌性、雄性动物生殖器官的结构特点与主要功能是什么？ 2.试比较马、牛、羊、猪生殖器官的异同点。 3.精子为何能在附睾中存活比较长的时间？ 参考阅读： 性腺的发生及性细胞的形成。 建议教学方法： 课堂讲授为主，辅助以多媒体、模型或标本等。

生物技术在动物方面的应用

铜仁学院生化系生物科学 学 号：2010061082 生 物 技 术 综 述 现代生物技术在动物方面的应用 学 校：铜仁学院 专 业：生物科学 姓 名：何 滔 学 号：2010061082 贵州 ● 铜仁 2013年12月 邮政编码: 55430 TONGREN UNIVERSITY

现代生物技术在动物方面的应用 何滔 摘要：随着科学的不断进步，现在生物技术在生活中的各个领域都有重要的作 用。本文主要简单的阐述了现代生物技术在畜牧业、动物育种和动物胚胎3个方面的应用。只有充分利用生活中的生物技术，才能实现生物技术持续稳步发展,不断满足人类日益增长的需求。 关键词：现代生物技术；动物育种；动物胚胎；畜牧业；应用 前言： 生物技末是一门既有悠久历史,又有薪新内容的科学技术和生产工艺,是当前优先发展的高技术领域之一, 生物技术涉及的科学和工程技术的知识甚多,应用面很广,它的发展和应用无提将对工农业生产、人民保健和社会福利带来深远的影响。为人们的生活带来了巨大的改变，使得人们能更进一步的探索一些前所未有的东西。 随着科学的不断发展，生物技术越来越越被更多的人所关注，生物技术的应用范围很广,涉及到方方面面,邓小平同志的建设有中国特色的社会主义理论为指导,根据社会主义市场经济的特点,为主动适应其需要,本文着重介绍生物在动物方面的应用。其中包括了现代生物技术在动物育种、动物胚胎和畜牧业等领域内的应用作了详尽的介绍。 1 现代生物技术在畜牧业中的应用 当代生物技术与畜牧业结合是现代养殖业技术发展的必然趋势。运用基因操作技术和方法构建转基因动物,来实现生活中的各种所需。利用微生物工程和细胞工程等将农作物废弃物转化为饲料资源,是21世纪畜牧业发展的热点，也是生物技术的重要应用。 1.1 基因工程 基因工程是现代生物技术的核心,它使人类能够在一定程度上可以按照自己的意愿改变生物的形状,产生对人类有用的物种。按照人的意愿在体外切割和拼接,然后将重组后的DNA导人某种宿主或个体,从而改变它的遗传特征,然后表达，以获得基因产物[1]。使人们克服物种间的遗传障碍,培养或创造出自然界的新生命,以满足人类的需要，此外生物技术在性别控制和遗传标记等生物学和畜牧学生产中也有广泛的应用[2]。 1.2 克隆技术 克隆可以分为分子、细胞和个体三个水平上的克隆;分子水平的是基因工程的重要组成部分,动物细胞培养是细胞水平的克隆,而动物体细胞克隆是生物个体水平的克隆[3]。体细胞核移植的成功,对于短期内提高畜群理想基因的频率、对于新性状的稳定遗传、对于转基因动物的扩群与外源基因稳定表达,对于拯救濒危动物或家畜品