Takechi 0713 moss transform

PEG-mediated DNA transformation into protoplasts of Physcomitrella patens

Stable transformation using protoplasts and PEG

Foreign DNA is introduced into protoplasts prepared from propagated protonemata. The isolation efficiency of protoplasts depends on the age (days from subculture) of the protonemata. We obtained the best results using protonemata grown for 4 to 6 days. When older protonemata were used it was difficult to digest the cell walls using the enzyme driselase. For optimum results, vigorous, light green protonemata should be used. Transformation schedule

We routinely transformed protonemata according to the schedule below.

1. (Day 1)

Subculture the propagated protonemata at 25?C for approximately 4-6 days.

2. (Day 5 at the earliest)

DNA transfer takes 2 days. After the transfer of DNA, incubate for 5 days. 3. (Day 12)

Transfer cellophane with top agar containing regenerating protoplasts onto a selection plate supplemented with adequate antibiotics. Cultivate for 5 days on the selection medium.

4. (Day 17)

Transfer cellophane with moss colonies onto a non-selection plate (no antibiotics). Cultivate for 5-7 days on the selection medium.

5. (Day 24)

Transfer cellophane with moss colonies onto a selection plate supplemented with adequate antibiotics. Cultivate for 5-7 days on the selection medium. 6. (Day 31)

Transplant a selection of the peripheral section of the colonies (100-200 lines) onto a non-selection plate.

Cultivate for 7-10 days on the non-selection medium.

7. (Day 41)

Transplant a selection of the peripheral section of the colonies onto a selection plate

Cultivate for 7-10 days on the selection medium.

8. (Day 51)

Transplant colonies surviving on the selection medium as stable transformants onto non-selection medium.

1. Propagation of protonemata

1) Growth medium

Stock medium

All stock media are stored at 4?C. Stock D should be used within 2-3 months before iron precipitates.

Stock B (x 100) Autoclave

MgSO4 7H2O 2.5 g (0.1 mM)

Fill up to 100 ml with H2O

Stock C (x 100) Autoclave

KH2PO4 2.5 g (1.84 mM)

Adjust to pH6.5 with 4M KOH

Fill up to 100 ml with H2O

Stock D (x 100)Do NOT autoclave

KNO310.1 g (1 M)

FeSO4 7H2O 125 mg (4.5 mM)

Fill up to 100 ml with H2O

Alternative TES (x 1000) Autoclave

CuSO4 5H2O 5.5 mg (0.22 mM)

H3BO3 61.4 mg (10 mM)

CoCl2 6H2O 5.5 mg (0.23 mM)

Na2MoO4 2H2O 2.5 mg (0.1 mM)

ZnSO4 7H2O 5.5 mg (0.19 mM)

MnCl2 4H2O 38.9 mg (2 mM)

KI 2.8 mg (0.17 mM)

Fill up to 100 ml with H2O

500mM Ammonium Tartrate (x 100) Autoclave

Ammonium tartrate 9.21 g

Fill up to 100 ml with H2O

100mM CaCl2 (x 100) Autoclave

CaCl2 2H2O 1.47 g

Fill up to 100 ml with H2O

[Medium used for protonemata culture ]

BCDAT medium 1000 ml

Stock B 10 ml

Stock C 10 ml

Stock D 10 ml

Alternative TES 1 ml

500mM Ammounim tartrate 10 ml (final 5 mM)

50mM CaCl2 2H2O 10 ml (final 1 mM)

Agar (INA agar; TC-6) 8 g (final 0.8%)

Fill up to 1000 ml with H2O

After autoclave, pour into 50 dishes of 9 cm and solidify for 30 min. on a clean bench. Store at room temperature.

2) sub-culture

The 4-6 days culture on a 9 cm-dish is harvested with dental forceps, suspended in 8-10 ml of sterile water per cultured dish and blended using a homogenizer. 2 ml of suspension is inoculated in a new dish overla with cellophane. After 4-6 days of incubation at 25?C under continuous white light (40 μmol/m2/s), growing protonemal tissue, consisting mainly of chloronemata, is obtained on the dish. The dish may be sealed with medical surgical tape to prevent contamination.

[Material]

Solid medium (BCDAT) – 9 cm-petri dish

Sterile water

Cellophane (autoclave) – Preparation of cellophane is as follows:

1) Place cellophane in a glass petri dish and add 5 mM EDTA

solution (pH8.0). Autoclave.

2) Wash with MilliQ water several times.

3) Add MilliQ water to the dish. Autoclave.

Pipette man P-1000

Dental forceps

Homogenizer Ultra turrax T-8 (IKA)

Ultra turrax T-8 generator shaft S8N-8G (autoclave)

glass tube (30-40 ml)(autoclave)

[Procedure]

1. Overlay the solid medium with cellophane.

2. Add 8-10 ml of sterile water (per cultured dish) in a glass tube.

3. Recover propagated protonemata from one cultured dish (4-to-6-days

old) with dental forceps and add to the glass tube.

4. Blend for about 10 sec. with Ultra turrax at max speed. Used generator

shaft must be washed as soon as possible to prevent the adhesion of moss cells inside.

5. Inoculate 2 ml of suspension into a new 9 cm-petri dish.

6. Incubate at 25?C under continuous white light.

2.1 Transformation (on the First day)

[Materials]

500 ml beaker x 1 (for discarding waste solution)

10 ml disposable pipet x 3 (sterile)

35 ml centrifuge glass tube x 2 (autoclave)

Funnel with a 80 μm nylon mesh (autoclave)

Forceps x 1

Cellophane (cut into circles) (autoclave)

Yellow tips for P200 and blue tips for P1000 (autoclave)

0.22 μm syringe-driven filter unit and 10 ml syringe x 2

0.45 μm syringe-driven filter unit and 50 ml syringe x 1

Neubauer hemacytometer (Becton Dickinson no. 424011)

Water bath x 2

Centrifuge with swing roter

50 ml conical tube (Nunc 373687, etc) (sterile) x1

15 ml conical tube (Nunc 366060, etc) (sterile) x2

15 ml conical polystyrene tube (Falcon 2057) (sterile) x number of sample 6-cm Petri dish (Falcon 351007)(sterile) x number of sample

Surgical tape

Parafilm

[Solution]

500 ml 8% (w/v) mannitol solution (autoclave)

2 g of PEG6000 and a small stir bar in a 50 ml medium bottle (autoclave) 1% (w/v) MES (pH5.6)

100 ml protoplast liquid medium (autoclave)

Stock A 1 ml

Stock B 1 ml

Stock C 0.1 ml

5 g/lAmmonium tartrate 1 ml (final 50 mg/l)

Mannitol 6.6 g (final 6.6%)

Glucose 0.5 g

Fill up to 100 ml with H2O

Divide into 4 flasks (25 ml in each flask) and autoclave

500 ml 8% (w/v) Mannitol (Sterile)

1 M Ca(NO3)

2 Solution

1 M MgCl

2 Solution

Driselase (We use driselase C-20, kindly provided by Kyowa Hakko Co., Ltd.)

30 μl of linearized plasmid DNA (1μg/μl) digested adequate restriction

enzyme (Purify by phenol/chloroform after digesion)

[procedure]

1. Add 1 ml of 1 M Ca(NO3)2 and 100 μl of 1M Tris-HCl (pH8.0) into 9 ml of

8% (w/v) mannitol solution and mix. Filter the solution with a 0.22 μm filter.

2. Preparation of PEG/T solution

Add 5 ml of the filtered solution in step 1 to autoclaved bottle containing warm PEG. Dissolve the PEG completely. This solution is called PEG/T.

3. Preparation of MMM solution

Mix 910 mg of mannitol, 0.15 ml of MgCl2, 1 ml of 1% MES (pH5.6) and

8.85 ml of H2O and filter the solution with a 0.22 μl filter.

4. Add 0.5 g of driselase in a 50 ml conical tube and then add 25 ml of 8%

mannitol solution. Vortex for more than 30 min.

5. Set water baths at 45?C and 20?C.

6. Centrifuge the driselase solution at 4000 rpm for 5 min.

7. Transfer the supernatant to a 50 ml syringe with a 0.45 μm filter unit and

filter it into a 35 ml centrifuge glass tube.

8. Put propagated protonema into the driselase solution and incubate at

25?C for 30 min. Mix very gently every 5 min.

9. Filter the protoplast cells of protonemata through an 80 μm nylon mesh.

10. Centrifuge freshly isolated protoplasts at 1000 rpm (180 x g) for 2 min.

and discard supernatant. Suspend protoplasts gently and completely in remaining driserase solution and then gently add 35 ml of 8% (w/v)

mannitol. Repeat this washing procedure twice.

11. Count the finally suspended protoplasts with hemacytometor, and

re-suspend at 1.6 x 106 protoplasts/ml in the MMM solution.

MMM (ml) = number of protoplasts per square (large nine squares) x 104 (cell/ml) x 35 (ml) / (1.6 x 106)

12. Add 30 μl of plasmid DNA (1μg/μl) into a 15 ml polystyrene tube (Falcon

2057). Add 300 μl of protoplast suspension and 300 μl of PEG solution to the tube and tap gently.

13. Incubate the transformation mixture at 45?C for 5 min. and then at 20?C

for 10 min.

14. Dilute the transformation mixture 5 times by adding 300 μl of protoplast

liquid medium every 3 min. and then dilute 5 times with 1 ml of protoplast liquid medium at 3 min. intervals.

15. Pour the diluted protoplast solution into a 6 cm-dish and incubate at 25?C

overnight in darkness.

[Key points]

Suspend protoplasts in the MMM solution by pipetting gently if protoplasts aggregate on the bottom of the centrifuge tube.

Use a 15 ml falcon polystyrene tube (2057) for transfer of plasmid.

Keep the temperature of the water bath at 20?C after heat-shock.

Use of plasmid DNA purified by CsCl gradient increases transformation efficiency.

2.2 Transformation (on the second day)

[Materials]

10 ml disposable pipet (sterile) x number of sample

Forceps x 1 (autoclave)

Cellophane (autoclave)

15 ml conical tube (Nunc 366060) x number of sample

Centrifuge with swing rotor

Surgical tape

parafilm

[Solution]

PRM/T (200 ml) Autoclave

Stock B 2 ml

Stock C 2 ml

Stock D 2 ml

Alternative TES 0.2 ml

500mM Ammonium tartrate 2 ml (final 5 mM)

Mannitol 16 g (final 8%)

CaCl2 2H2O 0.29 g (10 mM)

Agar (INA agar; TC-6) 1.6 g

Fill up to 200 ml with H2O

After melting agar divide it between 10 flasks, 20 ml in each flask, and autoclave.

PRM/B (1000 ml) Autoclave

Stock B 10 ml

Stock C 10 ml

Stock D 10 ml

Alternative TES 1 ml

500 mM Ammonium tartrate 10 ml (final 5 mM)

Mannitol 60 g (final 6%)

CaCl2 2H2O 1.47 g (final 10 mM)

Agar (INA agar; TC-6) 8 g (final 0.8%)

Fill up to 1000 ml with H2O

After autoclave, pour into 50 dishes of 9 cm each and solidify for 30 min on a clean bench. Store at room temperature.

[Procedure]

1. Overlay cellophane on a 9 cm-dish containing PRM/B medium.

2. Remove the protoplast solution into a 15 ml conical tube (Nunc) and

centrifuge at 1000 rpm for 2min.

3. Re-suspend the protoplasts in 8 ml of PRM/T medium pre-warmed at

48?C by pipetting.

4. Pour 2 ml of protoplast suspension on a 9 cm-dish containing PRM/B

medium overlaid with cellophane.

5. Incubate the plate at 25?C for 5 days under continuous daylight with a

light flux of 40 μmol/m2/s.

3. Transfer to selection medium

[Materials]

Forceps x 2

Surgical tape

[Solution]

Selection medium (BCDAT supplemented with adequate antibiotics) Stock B 10 ml

Stock C 10 ml

Stock D 10 ml

Alternative TES 1 ml

500mM Ammonium tartrate 10 ml (final 5 mM)

100mM CaCl2 2H2O 10 ml (final 1 mM)

Agar (INA agar; TC-6) 8 g (final 0.8%)

Fill up to 1000 ml with H2O

After autoclave, allow to cool at ~60?C and add adequate antibiotics into the medium. Store at 4?C.

Antibiotics used for selection

1) Genetecin (G418)

Nacalai (cat.no. 16513-84) 50 mg/mL solution

Use at the final concentration of 20 μg/l

2) HygroGold

Invivogen (cat.no. ant-hg-1) 100 mg/ml solution

Use at the final concentration of 30 μg/l in the medium.

3) Zeocin

Invivogen (cat.no. ant-zn-1) 100 mg/ml solution

Use at the final concentration of 50 μg/l in the medium.

Zeocin is light sensitive. Store zeocin solution and plates or medium containing zeocin in the dark.

4) BlasticidinS

Invivogen (cat.no. ant-bl-1) 100 mg/ml solution

Use at the final concentration of 75 μg/l in the medium.

[Procedure]

1. Transfer the cellophane with moss colonies to BCDAT medium

supplemented with adequate antibiotics using 2 pairs of forceps. 2. Incubate at 25?C for 5 days under continuous light.

4. Transfer to antibiotics-free medium (non-selection

medium)

[Procedure]

1. Transfer the cellophane with moss colonies to BCDAT medium

2. Incubate at 25?C for 7 days under continuous light.

5. Transfer to selection medium

[Procedure]

Repeat step 3.

6. Transfer to non-selection medium

[Materials]

Forceps (sharp) x 5-7

BCDAT plate

Surgical tape

[Procedure]

1. Transfer each colony under antibiotic selection to an antibiotic-free BCDAT

medium.

2. Culture at 25?C for 10 days under continuous light.

7. Transfer to selection medium

[Procedure]

1. Transfer the peripheral cells of each colony grown under antibiotic

selection to an antibiotic-free BCDAT medium. Do not transfer a whole colony or

gametophores.

2. Culture at 25?C for 7-10 days under continuous light.

8. Transfer to non-selection medium

[Procedure]

After incubation for 10 days, select transformants that were able to survive on selection medium as stable transformants.

9. Screening for homologous recombinants by PCR [Materials]

Forceps (sharp) x1

Sterile water

1.5 ml tube x number of samples

PCR tube or PCR plate

Clear chip for P2 pipette man

liquid N2

Thermal cycler (BioRad iCycler etc)

PCR enzyme (BlendTaq (TOYOBO), ExTaq (TAKARA bio) etc.)

10x PCR buffer

25mM dNTPs

10 μM each primer set (for WT and recombinant)

agarose

electrophoresis aparatus

[Procedure]

1. Transfer two picks ofcells from the peripheral region of each colony to a

1.5 ml tube containing sterile water on a clean bench. Do not transfer a

whole colony or gametophores.

2. Transfer each colony to two separate PCR tubes for detection of

genotypes (WT and recombinant) in transformants.

3. Remove the remaining water in the PCR tube using P2 tip

4. After removing water, immediately add 5 μl of 10x PCR buffer.

5. Crack moss cells by P2 tip

6. Incubate PCR tubes in thermal cycler at 45?C for 30 min and then 68?C

for 15min.

7. Freeze PCR tubes by soaking in liquid N2 and thaw by hand warming.

Repeat at least 5 times.

8. Add PCR mixture except PCR buffer.

9. Perform PCR by following cycle and mixture;

Cycle; 1 cycle of 94?C for 2min and 55 cycles of 94?C for 30sec, primer Tm ? 5?C for 1min and 72?C for 1min/kbp.

PCR mixture; 1x PCR buffer, 0.25mM dNTPs, 0.1 μM primer pair, 0.75U Blend Taq (or ExTaq)

[Key points]

If fresh and vigorous moss colonies are not used, no PCR fragments will be amplified.

The moss cell freeze-thaw cycle will increase PCR efficiency. Do not skip this step.

共同但有区别责任原则

题目：共同但有区别的责任原则在实施中的困境与对策姓名：罗珠玉、戴政

共同但有区别的责任原则在实施中的困境与对策 摘要：共同但有区别的责任原则作为国际环境法的一项基本原则，该原则的要求在实践中未能得到充分尊重与落实。笔者通过对该原则实施困境及原因的分析,寻求解决该原则的可行性办法。 关键词：共同但有区别的责任原则；实施困境；可行性办法

共同责任和区别责任组成了共同但有区别责任原则。二者之间相辅相成，密不可分。一方面各国不能以任何的借口而拒绝参与环境保护问题，这是每个国家的共同责任；另一方面，基于合理性而产生的区别责任，我们在对待共同责任的同时要给予发达国家与发展中国家差别待遇。只有当我们正确的理解二者关系时才能确保该原则的正确实施。实践中，该原则面对来自不同国家的阻力。 一、共同但有区别的责任原则的实施困境 发达国家有先进的技术与雄厚的资金，在各国订立国际公约之初，对发达国家明确规定了需向发展中国家提供环保技术的援助。可公约本身并未说明具体的援助方式，使发达国家有机可趁，利用市场操作以高价的方式向发展中国家提供商业性援助。而即使存在无偿性援助，实际数据也令人心寒，发展中国家适应气候变化每年所需的资金大约在 500 亿美元，而联合国的专门基金从发达国家筹集到的资金从 90 年代初至今总计只有 670 亿美元，发达国家对发展中国家的资金援助可见一斑，这也是共同但有区别责任难以落实的一个重要原因。 在发展中国家共同但有区别的责任原则的实施也受到了挑战。发展中国家的经济水平比较落后，他们没有先进的技术支撑他们在保证解决自己温饱问题的同时兼顾环境保护，而要想解决生存问题必须以牺牲坏境为代价。传统的经济发展技术、能源技术已经不能适应现代可持续发展的要求，尤其 21 世纪对各国高新技术提出了更高的要求，在环境治理方面也不例外。现在单纯的现有技术转让已经不能满足发展中国家环境治理的需要了，发达国家需要尽可能地多与发展中国家进行技术交流与合作，让发展中国家也成为高新技术开发的参与者，掌握自主的知识产权。 最后，为应对国际环境的问题而制定的众多国际公约，足以应对坚持和实施共同但有区别的责任原则。比如《人类环境宣言》、《联合国气候变化框架公约》、《联合国海洋法公约》、《京都议定书》······这些制定与签署的国际公约，不仅构成了世界环境保护国家合作的标准，而且也未共同但有区别责任作出了各种细化的规定。 二、共同但有区别的责任原则实施中存在困难的原因 美国曾以不符合本国的国家利益为由退出《京都议定书》，而各国对其只能进行谴责，因为国家享有主权原则，有权决定自己是否愿意加入某一国际公约。

论共同但有区别责任原则在我国的适用(改)

论共同但有区别责任原则在我国的适用 摘要: 文章在结合我国的具体国情的基础上,对我国进行环境污染防治过程中在环境保护法律中适用这一前沿的原则所具有的理论基础以及需要注意的问题进行了探讨。 关键词:京都议定书;共同但有区别责任原则;共同责任;区别责任 1 共同但有区别责任原则概述 共同但有区别责任原则是国际环境法中的一项基本原则。这一原则的产生主要是基于各国社会发展的历史对国际环境的影响及本国的实际承担能力。其核心思想是,在实现将大气中温室气体的浓度稳定在防止气候系统受到危险的人为干扰的水 平上这一目标过程中全球各国都负有共同的责任和义务,但是基于各国的历史发展 状况及现实承受能力,发达国家应该在这一过程中应该率先承担并且承担主要的责任。 1.1共同但有区别的责任原则主要包含以下两个基本要素： 1.1.1共同责任 共同责任的理论依据:全球的生态系统是一个不可分割的整体,环境问题具有全球性,解决全球环境问题需要所有国家的参与，每个国家都有责任。全球环保问题已经成为人类共同关注的焦点,而不只是某一个国家的国内立法问题。 共同责任的内容:许多关于环境与发展的国际文件中均有共同责任的规定。共同责任要求每个国家不论其大小、贫富等方面的区别,都对保护全球环境负有一份责任,都应当参加全球环境保护事业,都必须在保护和改善环境方面承担义务。基于共同责任,所有国家,尤其是发展中国家,都应该参与关于可持续发展的立法以及相关法律 的实施。许多现有的有关环境的国际法律文件没有发展中国家的参与。为了保护发展中国家的利益,有必要对相关文件进行修订，从而确保上述法律文件适用范围的广泛性。 1.1.2有区别的责任 有区别的责任的理论依据:有区别的责任的理论依据是公平原则。如果一个国家曾未经其他国家同意而不公平地对其进行利用而使其付出代价,那么受害国有权要

医院手卫生标准操作规程

文档序号：XXYY-ZWK-001 文档编号：ZWK-20XX-001 XXX医院 手卫生标准操作规程 编制科室：知丁 日期：年月日

手卫生标准操作规程 手卫生是指所有手部清洁行为的通称，包括洗手、卫生手消毒和外科手消毒。洗手是指用普通或者抗菌皂液和流动水洗手，清除手部皮肤污垢和暂居菌的过程。卫生手消毒是指使用速干手消毒剂揉搓手，减少手部暂居菌的过程，无需冲洗或干手设备。外科手消毒是指术前医务人员使用外科手消毒剂，清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程，应具备持久抗菌活性。本规程制订的“手卫生”指洗手和卫生手消毒，不包括外科手消毒。 手卫生是预防医院感染最有效、最方便、最经济的方法，但也是存在问题最多的医院感染控制措施之一。很多医院感染的暴发，尤其是ICU获得性感染，与不良的手卫生有关，故严格的手卫生措施对控制医院感染就显得尤为重要。 一、手卫生指征 (一) 直接接触病人前、后； (二) 摘手套后（戴手套不能代替洗手）； (三) 进行侵袭性操作前，不论是否戴手套； (四) 接触体液或排泄物、黏膜、破损皮肤或伤口敷料之后； (五) 护理患者从污染部位移到清洁部位时； (六) 接触患者周围的物品（包括医疗设备）之后； 特别注明：如果手部皮肤无可见污染，建议使用速干手

消毒剂做为手卫生方法。当手上有血迹或分泌物等明显污染时，必须洗手。 有耐药菌流行或暴发时，洗手时建议使用抗菌皂液。 二、手卫生方法 (一) 洗手： 1. 湿手：用水打湿双手； 2. 涂液：取适量洗手液涂抹所有手部皮肤； 3. 揉搓：认真揉搓双手，步骤包括： （1）掌心相对，手指并拢，相互揉搓； （2）手心对手背沿指缝相互揉搓，交换进行； （3）掌心相对，双手交叉指缝相互揉搓； （4）弯曲手指使关节在另一手掌心旋转揉搓，交换进行； （5）右手握住左手大拇指旋转揉搓，交换进行； （6）将五个手指尖并拢放在另一手掌心旋转揉搓，交换进行； （7）必要时增加对手腕的清洗。 4. 冲洗：用流动水冲洗、清洗双手； 5. 干手：用纸巾或烘手机干燥双手； 6. 关水龙头：如为接触式，则干手方式应为纸巾或一次性毛巾，用纸巾或小毛巾关闭水龙头。 (二) 手消毒

医务人员手卫生的标准操作流程

编码3411C1 医务人员手卫生的标准操作规程 一、概念 手卫生（hand hygiene）: 为洗手、卫生手消毒和外科手消毒的总称。 洗手（handwashing）：指用肥皂或者皂液和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。洗手目的：是为了消除或杀灭手上的微生物，切断通过手的传播感染途径。 卫生手消毒(hand antisepsis)：指用手消毒剂擦手的过程。 手的消毒是指使用消毒剂杀灭手上沉积的致病微生物，主要是暂住菌，常住菌也可被部分杀死。 外科手消毒(surgical hand antisepsis)：指用手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。 美国疾病控制中心（CDC）将洗手定义为：将手涂满肥皂，并对其所有表面进行强有力的短暂的摩擦，产生大量泡沫，然后用流动水冲洗的过程。洗手可分为使用单纯的肥皂或清洁剂和用含有消毒剂的洗涤两种方法。前者为机械去污过程，能使皮肤脂肪乳化和微生物悬浮于表面，再用水将其冲洗干净；后者为化学去污过程，能杀死或抑制微生物的生长繁殖，达到消毒灭菌的目的。 二、洗手的指征 在医院内非紧急情况下，医务人员在下列情况下均应认真洗手 1、进入和离开病房前，在病室中由污染区进入清洁区之前 2、进行深部侵入性操作前，如脑室引流，胸腔穿刺等 3、护理每例特殊高危病人前，如严重免疫缺陷病人和新生儿 4、接触伤口，无论是切口、创口，或深部切口前后 5、处理污染的物品后，如接触被血液、体液、分泌物或渗出物污染的物品 6、在护理感染病人或可能携带具特殊临床或流行病学意义的微生物（如多重 耐药菌）的病人之后 7、与任何病人长时间和密切接触后 8、在高危病房中接触不同病人前后 9、戴脱手套前后；戴脱口罩前后；穿脱隔离衣前后

论共同但有区别责任原则

论共同但有区别责任原则 ——全球环境 徐博 （机械与汽车工程系机制2082班） 摘要:文章在结合我国的具体国情的基础上,对我国进行环境污染防治过程中在环境保护法律中适用这一前沿的原则所具有的理论基础以及需要注意的问题进行了探讨。 关键词:京都议定书;共同但有区别责任原则 一、共同但有区别责任原则的主要内容 《京都议定书》第一次设定了具有法律约束力的温气限排额度,是迄今为止国际社会承诺削减温气排放、遏制地球变暖的唯一一项国际公约。结合1994年3月生效的《联合国气候变化框架国际公约》的相关内容可知,共同但有区别责任原则主要内容包含两个方面——共同责任以及有区别责任。由于现实原因的限制或者说是从公平的角度考虑,发达国家和发展中国家在国际环境保护中所要承担的责任的范围、时间、方式、手段等方面是有差异的,从历史和现实的角度出发,对于各国的具体责任的确定,应当兼顾公平与效率,统筹考虑各种因素,在公平和效率之间做出适当的权衡取舍。保护和改善全球环境是全人类的共同利益所在,是世界各国的共同责任。这种共同责任主要体现在:基于“地区生态系统的整体性”,各国,不论其大小、贫富方面的差别都应该采取措施保护和改善其管辖范围内的环境,并防止对管辖范围以外的环境造成损害,同时各国应该在环境方面相互合作和支持等。但是另一方面,由于各国经济发展和工业化的水平不同,废弃物和污染物的排放数量也不同,不应该要求所有的国家承担完全相同的责任。发达国家在自身发展过程中曾经向大气排放大量有害物质,最先并且主要是他们造成了大气的污染,发展中国家不应为他们造成的大气污染后果承担责任。 二、共同但有区别责任原则适用于我国环境法律体系的基础 不可否认,共同但有区别责任原则在全球范围内是适用、且必须加以运用的。一种被证实具有优越性的原则能否在我国的环境法中适用,必须要针对我国的具体国情以及此原则的特征进行分析。 (一)我国在环境保护方面与世界进行了深入的交流和合作,具备运用相应知识的能力 从环境角度来看,世界是一体的,一国环境的污染和破坏都可能引起相关地区甚至全球范围内的环境破坏。我国积极参加全球范围内的环境保护活动,签订相关的环境保护国际协议。我国先后与30多个国家签署了双边环境合作协议或备忘录,与美国、日本、法国、德国、加拿大、俄罗斯等10个国家签订了有关核安全与辐射环境管理的双边合作协议,与联合国环境规划署、联合国开发计划署、国际原子能机构、世界银行、亚洲开发银行、全球环境基金、蒙特利尔议定书多边基金等国际机构建立了密切的合作关系。积极参与了重要国际环境公约的谈判和重要多边环境论坛的活动,参加或签署了气候变化框架公约、生物多样性公约、保护臭氧层的维也纳公约和蒙特利尔议定书、巴塞尔公约、核安全公约等国际环境公约,广泛、深入地开展了有关国际公约的履约工作。表明我国在环境保护方面已经全面与世界接轨,对国际环境保护及其责任履行上的原则有了深入地了解和学习,能够结合我国的具体实际情况合理地移植到我国的相关法律体系中来。

手卫生标准操作规程

手卫生标准操作规程（SOP） 手卫生是指所有手部清洁行为的通称，包括洗手、卫生手消毒和外科手消毒。洗手是指用普通或者抗菌皂液和流动水洗手，清除手部皮肤污垢和暂居菌的过程。卫生手消毒是指使用速干手消毒剂揉搓手，减少手部暂居菌的过程，无需冲洗或干手设备。外科手消毒是指术前医务人员使用外科手消毒剂，清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程，应具备持久抗菌活性。本规程制订的“手卫生”指洗手和卫生手消毒，不包括外科手消毒。 手卫生是预防医院感染最有效、最方便、最经济的方法，但也是存在问题最多的医院感染控制措施之一。很多医院感染的暴发，尤其是ICU获得性感染，与不良的手卫生有关，故严格的手卫生措施对控制医院感染就显得尤为重要。 一、手卫生指征 (一)直接接触病人前、后； (二)摘手套后（戴手套不能代替洗手）； (三)进行侵袭性操作前，不论是否戴手套； (四)接触体液或排泄物、黏膜、破损皮肤或伤口敷料之后； (五)护理患者从污染部位移到清洁部位时； (六)接触患者周围的物品（包括医疗设备）之后； 特别注明：如果手部皮肤无可见污染，建议使用速干手消毒剂做为手卫生方法。当手上有血迹或分泌物等明显污染时，必须洗手。

有耐药菌流行或暴发时，洗手时建议使用抗菌皂液。 二、手卫生方法 (一)洗手： 1.湿手：用水打湿双手； 2.涂液：取适量洗手液涂抹所有手部皮肤； 3.揉搓：认真揉搓双手，步骤包括： （1）掌心相对，手指并拢，相互揉搓； （2）手心对手背沿指缝相互揉搓，交换进行； （3）掌心相对，双手交叉指缝相互揉搓； （4）弯曲手指使关节在另一手掌心旋转揉搓，交换进行；（5）右手握住左手大拇指旋转揉搓，交换进行； （6）将五个手指尖并拢放在另一手掌心旋转揉搓，交换进行；（7）必要时增加对手腕的清洗。 4.冲洗：用流动水冲洗、清洗双手； 5.干手：用纸巾或烘手机干燥双手； 6.关水龙头：如为接触式，则干手方式应为纸巾或一次性毛巾，用纸巾或小毛巾关闭水龙头。 (二) 手消毒 1、取液：取足量速干手消毒剂于掌心。 2、涂抹：涂抹双手，确保完全覆盖所有皮肤。 3、揉搓：用“七步洗手法”搓揉双手直至干燥。 （三）对于部分酒精不能杀灭的病原体如诺如病毒等，应采用流动水洗手做为手卫生的方法；

论国际环境法的共同但有区别责任原则

目录 毕业论文诚信承诺书 (2) 摘要 (3) 关键字 (3) 正文 一、共同但有区别责任原则的概述 (3) 二、共同但有区别责任原则的发展 (4) 三、共同但有区别责任原则的性质 (5) 四、共同但有区别责任原则的意义 (6) 五、坚持和发展“共同但有区别责任”原则 (6) 结语 (7) 参考文献 (7)

毕业论文诚信承诺书 本人作为《论国际环境法的共同但有区别责任》一文的作者，郑重承诺： 一、本论文是我在导师的指导下，参考相关文献资料，进行分析研究，独立完成的，其中所引用的文献资料和相关数据，都是真实的，除标明出处的内容外，不包含他人已公开发表的研究成果和学术观点。 二、本论文中若有抄袭他人研究成果和剽窃他人学术观点，本人自愿承担取消毕业论文成绩、交回学历学位证书等一切后果。 学生签名： 年月日注：本承诺书一式二份，一份置于毕业论文分册首页，一份置于过程材料分册末页。

论国际环境法的共同但有区别责任原则 摘要 环境保护已经成为我们时代最为重大的主题之一。世界每一个成员都应当共同承担保护和改善全球环境的责任，环境保护不再是仅限于一个两个国家主权之间的事情。全球性环境问题需要所有国家的共同努力才能得以解决。在对环境问题形成所起的作用上，发达国家和发展中国家扮演者主次不同的角色。如果要让本来就相对贫困的发展中国家在解决目前的全球性问题上承担和发达国家同样的义务，肯定是不公平的，必然会遭到发展中国家的反对。国际环境法的共同但有区别的责任原则“就在这样的背景下产生了，它调解了国家之间的矛盾，促进各国都参与到全球环保事业当中，将不同国情，制度的国家团结成一个“求大同、存小异”合作的整体。共同担有区别的责任原则主要包含两层意思：共同责任和区别责任。它不但是国际法上的一项重要原则，更代表了环境争议思想在适用范围上的扩展，本文主要探讨共同但是有区别的责任的定义、内涵以及环境正义与共同但有区别的责任之间的关系，还有共同但有区别的责任定义的必要性。 关键字 共同但有区别的责任国际发达国家发展中国家 一、共同但有区别责任原则的概述 国际环境法中共同但有区别责任原则因体现谋求优先发展经济的利益诉求,获得大部分发展中国家认同。但该原则的地位、内容一直存有争议。随着中国、印度等发展中大国碳排放日益增长,在后续气候谈判中如仅以发展中国家身份不参加实质减排,将面临极大压力。因此,探讨该原则的地位以及承担责任的依据,对于确定发达国家与发展中国家应对气候变化所应承担的共同责任以及各自应承担的义务,将具有重要意义. 共同但有区别责任主要体现在国际气候大会中表现最为明显，备受关注的联合国第十九次气候变化大会雨2013年11月23日晚在波兰首都华沙落幕，会期比原计划拖延了一整天。经过长达两周的艰难谈判和激烈争吵，特别是会议结束前最后48小时，各国代表挑灯夜战，最终就德班平台决议、气候资金和损失损害补偿机制等焦点议题签署了协议。 但是，由于发达国家不愿承担历史责任，在落实向发展中国家提供资金援助问题上没有诚信，导致政治互信缺失，加上个别发达国家的减排立场严重倒退，致使谈判数次陷入僵局。会议最终经过妥协，达成了各方都不满意、但都能够接受的结果。 《联合国气候变化框架公约》第十九次缔约方会议暨《京都议定书》第九次缔约方会议23日晚打破僵局达成协议后在华沙落下帷幕。尽管大会成果不尽如人意，但中方表示，节能减排是中国可持续发展的内在要求，无论谈判进展如何

“共同但有区别的责任”原则的解读

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/1b9462798.html, “共同但有区别的责任”原则的解读 作者：王小钢 来源：《中国人口·资源与环境》2010年第07期 摘要哥本哈根气候变化会议中最大的立场之争可能是关于“共同但有区别的责任”原则的政治辩论。“给不平等者以不平等”和“给平等者以平等”是“共同但有区别的责任”原则的哲学基础。历史责任、矫正正义和“与能力有关的责任”体现了“给不平等者以不平等”的理念。人均排放权和平等参与权则体现了“给平等者以平等”的理念。在“共同但有区别的责任”原则视域中，不是中国，而是丹麦和美国劫持了哥本哈根气候变化会议。从中国的立场看，国际社会在哥本哈根气候变化会议之后理应在“给不平等者以不平等”和“给平等者以平等”理念基础上坚守“共 同但有区别的责任”原则。首先，国际社会应将历史累积排放量和人均GDP作为适应气候变化的参考标准。其次，鉴于发展中国家的发展律令和后代人的正当需要，国际社会应将人均累积排放量和人均排放量作为减缓气候变化的参考标准。最后，国际社会必须按照平等参与原则开展将来的国际谈判。 关键词气候变化；共同但有区别的责任；给不平等者以不平等；历史责任：人均标准 中图分类号X22 文献标识码 A 文章编号1002－2104(2010)07－0031－07 doi：10.3969／j.issn.1002-2104.2010.07.005 2009年12月19日，哥本哈根气候变化会议落下帷幕。《联合国气候变化框架公约》(以下简称《公约》)各缔约方均不太满意，尽管缔约方会议同意“注意到”(taking note of)《哥本哈根协议》(Copenhagen Accord)。由于苏丹、委内瑞拉和玻利维亚等国家的反对，缔约方会议没有通过《哥本哈根协议》。在联合国条约中，“注意到”的术语意味着缔约方会议没有批准也没有通过，不持肯定态度也不持否定态度。哥本哈根会议中最大的立场之争可能是关于“共同但有区别的责任”(Common But Differentiated Responsibilities)原则的政治辩论。中国、印度、巴西和南非(BASIC四国)在多次谈判场合重申坚持“共同但有区别的责任”(Common But Differentiated Responsibilities)原则。然而，美国总统奥巴马(Barack Obama)甚至在12月18日领导人会议上发言将“共同但有区别的责任”修改为“共同但有区别的回应”(Common But Differentiated Responses)。在气候正义的视角下，全球气候体制中“共同但有区别的责任”原则的哲学基础究竟是什么?在“共同但有区别的责任”原则视域中，究竟是哪些国家劫持了哥本哈

论共同但有差别责任原则

黑龙江大学自学考试法律专业本科 毕业论文 题目：论共同但有差别责任原则作者：吴春刚 所在单位： 指导教师：李艳岩 黑龙江大学 2008年10月18日

目录 内容摘要 (1) 一、共同但有差别责任的体现 (1) 二、共同但有差别责任原则的内容 (2) 三、共同但有区别的责任原则的合理性分析 (2) 四、共同但有区别责任原则的正义基础 (3) （一）正义的一般含义 (3) （二）环境正义观念的起源 (4) （三）承担责任的实际能力分析 (4) 五、共同但有区别的责任原则在实践中的贯彻状况 (5) 六、落实共同但有差别责任原则的努力 (6) 七、结束语 (7) 参考文献 (9)

论共同但有差别责任原则 摘要：国际环境法是一个正在迅速发展的法学部门，国际环境法基本原则的体系也正在形成之中，共同但有差别责任原则的涵义分为共同的责任和有差别的责任，基于环境与人类的密切关系，在环境领域，全球所有国家对地球环境污染负有共同的防治责任，但是，由于历史的原因，发达国家只顾发展，不顾环境，大量使用环境资源和大量排放废弃物造成全球环境恶化，另发达国家在以全球环境资源的大量损耗和环境状况的急剧恶化为代价积累起来丰富的技术和财力资源，基于环境法的“谁破坏，谁治理”的公平原则，发达国家理应承担比发展中国家更为主要的或承担更多的义务。此原则在一系列国际环境法规中得到了体现。 关键词：国际环境法共同责任区别责任环境 一、共同但有差别责任的体现 保护和改善全球环境昰国际社会所要承担的共同义务。作为国际社会主要成员的各个国家，自然负有保护和改善环境的共同责任。1967年的《外层空间条约》和1971年的《禁止在海洋床底及其底土安置核武器和其他大规模毁灭性武器条约》都承认了人类对环境的“共同利益”，要实现共同利益必然要求各国承担共同责任。[1]1972年斯德哥尔摩《人类环境宣言》指出：“……保护和改善人类环境是关系到全世界各国人民的幸福和经济发展的重要问题，也是全世界各国人民的迫切希望和各国政府的责任。”关于“区别责任”，《人类环境宣言》指出：“在发展中国家中，环境问题大半是由于发展不足造成的。……因此，发展中国家必须致力于发展工作，牢记他们优先任务和保护及改善环境的必要”。1982年《内罗毕宣言》指出：“……发达国家及有能力这样做的国家，应协助受到环境失调影响的发展中国家，帮助他们处理最严重的环境问题。”《气候变化框架公约》的原则部分规定：“各缔约国应当在公平的基础上，并

试论国际环境法的共同但有区别责任原则

试论国际环境法的共同但有区别责任原则 试论国际环境法的共同但有区别责任原则 的国际责任。而另一方面发展中国家相比而言，发展起步较晚，工业化进程对全球环境的影响小，加之很多发展中国家还没有摆脱贫困的威胁，从某种意义上说发展是其的第一要义。同时发展中国家治理环境的资金技术匮乏，客观上也不具备彻底清除全球污染的实力。因此，区别责任强调，应对全球环境问题，发达国家和发展中国家的责任是有区别的，发达国家理应承担更多的、更重的责任。这也是“受益者补偿”原则的体现，同时也是维护实质正义的要求。 二、共同但有区别责任原则确立及发展 1.共同但有区别责任原则的确立。1972年在斯德哥尔摩召开的第一届人类环境大会，是国际社会就环境问题召开的第一次会议。在此次会议上通过的人类环境宣言，其内容强调和突出了利益和责任的共同性，以及具体环境和实际情况的区别，是共同但有区别责任的萌芽；1992年在巴西的里约热内卢召开的联合国环境与发展大会，是应对全球气候变化的一次会议。大会签署了《联合国气候变化框架公约》，会议提出“鉴于导致全球环境退化的各种不同因素，各国负有共同但有区别的责任”，这就正式提出了共同但有区别的责任原则，标志着共同但有区别原则的确立。根据此原则，发达国家应采取措施限制温室气体排放，同时要向发展中国家提供新的额外资金以支付发展中国家履行《公约》所需增加的费用，并采取一切可行的措施促进和方便有关技术转让的进行。 2.共同但有区别责任原则的发展。由于《联合国气候变化框架公约》没有对个别缔约方规定具体需承担的义务，也未规定实施机制，缺少法律上的约束力。因此，五年后以议定书的附属形式设定了强制排放的限制。1997年在日本京都，联合国气候变化框架公约的缔约方大会举行会议并通过了《京都议定书》，核心内容是：要求全球38个工业化程度较高的国家削减温室气体的排放量，规定了具体的减排义务。可见《京都议定书》遵循了公约确立的原则，规定了全球各国的二氧化碳排放量标准，但对发展中国家和发达国家的排放量的限制采用了双重标准，为遏制全球变暖发达国家应尽更多的义务。《京都议定书》规定的各国二氧化碳的排放标准截止到201X

手消毒标准操作规程

医务人员外科手消毒标准操作规程 一.定义 外科手消毒，即外科手术前医务人员用肥皂（皂液）和流动水洗手，再使用外科手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。 二.设施 1.洗手池应设置在手术间附近，水池大小、高矮适宜，防喷溅，池面光滑无死角，每日清洁、消毒。 2.应为非手接触式水龙头，数量应不少于手术间数，间距应避免洗手时手臂相互接触。 3.配备清洁剂，宜含有护肤成分和使用一次性包装，重复使用的容器每次用完应清洁、消毒。 4.清洁指甲用具指定容器存放，每日清洁与消毒。 5.揉搓用品如海绵、手刷等指定容器存放，一人一用一灭菌或一次性无菌使用。 6.外科手消毒剂应符合国家有关规定。 7. 外科手消毒剂应采用非手接触式出液器，宜使用一次性包装，重复使用的容器每次用完应清洁、消毒。 8.干手物品及其盛装容器一人一用一清洗一灭菌。 三.方法 （一）洗手 1.揉搓：取适量的清洁剂清洗双手、前臂和上臂下1/3，并认真揉搓。清洁双手时，可使用海绵、手刷等清洁指甲下的污垢和手部皮肤皱褶处。 2.冲洗：流动水冲洗双手、前臂和上臂下1/3。 3.擦干：使用干手物品彻底擦干双手、前臂和上臂下1/3。 （二）外科手消毒方法 方法一：冲洗手消毒方法 1.取液：取足量的外科手消毒剂涂抹至双手的每个部位、前臂和上臂下1/3. 2.揉搓：认真揉搓2-6min。 3.冲洗：用流动水冲洗双手、前臂和上臂下1/3。 4.擦干：无菌巾彻底擦干。

5.特殊情况水质达不到GB5749的规定时，应用外科消毒剂再消毒双手后戴无菌手套。方法二：免冲洗手消毒方法。 1.取液：取适量的免冲洗外科手消毒剂涂抹至双手的每个部位、前臂和上臂下1/3。 2.揉搓：认真揉搓

论共同但有区别责任原则

论共同但有区别责任原则 姓名：杜晓静 专业：国际法学 学号：09122326

论共同但有区别责任原则 摘要：共同但有区别责任原则勾勒出了发达国家和发展中国家在承担全球环境退化责任问题上的大致轮廓，在解决国际环境问题领域有着重要的作用。但该原则在实践的过程中也面临着重重挑战。本文介绍了该原则的历史发展，分析了它的内涵和合理性，最后结合其在国际环境法中的实践，对它的适用前景提出了设想。 关键词：共同但有区别责任国际环境法合理性

共同但有区别的责任原则是指由于地球生态系统的整体性和导致环境退化的各种不同因素，以及能力上的差异，各国对保护和改善全球环境负有共同的但是又有区别的责任。关于该项原则在国际环境法中的地位，一直存在着很大的争议。但毫无疑问，该原则在解决国际环境问题领域有着重要的作用，它勾勒出了发达国家和发展中国家在承担全球环境退化责任问题上的大致轮廓。 一、共同但有区别责任原则的历史发展 最开始，在国际环境保护领域只是强调“共同责任”。如1959年《南极条约》的序言指出：“……承认为了全人类的利益，南极应永远专为和平目的而使用，不应成为国际纷争的场所和对象”；又如1967年《外层空间条约》的序言指出：“……确认为了和平目的发展，探索利用外层空间，是全人类的共同利益”；1971年《拉姆萨尔湿地公约》的序言承认，“人类同其环境的相互依存关系”。[1]直到1972年《人类环境宣言》第一次将发达国家和发展中国家的环境问题区分了开来，被认为是该原则的萌芽阶段。它指出：“在发展国家中，环境问题大半是由于发展不足造成的。……因此，发展中国家必须致力于发展工作，牢记它们优先任务和保护及改善环境的必要，”“应筹集资金维护和改善环境，其中要照顾到发展中国家的情况和特殊性，照顾到它们的请求而额外的国际技术和财政援助的需要。”[2]文件虽然没有明确使用“区别责任”，但提到了要照顾发展中国家的情况和特殊性。 而1992年里约会议提出了“鉴于导致全球环境退化的各种不同因素，各国负有共同但有区别的责任”，从而确立了这一原则。1992年的《联合国气候框架公约》把发达国家置身于承担环境问题责任的前列，强调了这一原则。在《气候变化框架公约》第3条中明确提到了共同但有区别责任，“各缔约国应当在公平的基础上，并根据它们共同但又有区别的责任和能力，为人类当代和后代的利益保护气候系统。因此，发达国家缔约方应当率先对付气候变化及其不利影响。”这段话为“共同但有区别责任”指出了法理基础。 1997年《京都议定书》更是以“共同但有区别原则”为基础制定的，在国际实践中被誉为“共同而有区别原则”的典型代表。议定书明确规定了发达国家温室气体排放削减义务，发展中国家没有削减的义务。议定书中规定，在2008-2012年间，附件一国家应将其温室气体排放量从1990年的水平减少5%，并为这些国家规定了具体的减排指标；附件二国家是附件一国家中的工业化国家，除了承担减排义务外，还要为发展中国家提供新的额外资金，并向这些国家转移用于缓解和适应气候变化的先进技术；而发展中国家仅仅承担研究、报告、宣传、培训教育等一般义务，当然也可以自愿减排。[3] 共同但有区别责任原则被确立下来，并在国际环境法中被广泛的应用，它有着丰富而深刻的内涵。 二、共同但有区别责任原则的内涵 共同但有区别原则指，各国对保护全球负有共同的但是有区别的责任，包括共同责任和区别责任两方面。共同责任指国际社会的每个成员国不论大小、强弱，都有义务去保护地球环境。这一点很多国际环境条约上都得到了体现，如《生物多样性公约》确认了生物多样性保护是人类共同的关注事项。具体而言，共同责任可以从以下几个方面加以理解： (1)各国都有义务保护本国的环境。各国有责任采取有效的措施，通过制定一系列法规严格追究国内环境损害责任。 (2)各国有责任对该国管辖内的企业或个人的活动给他国造成环境损害承担

外科手消毒操作流程

医务人员外科手消毒标准操作规程 一、定义 外科手消毒，即外科手术前医务人员有肥皂（皂液）和流动水洗手，再使用外科手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。 二、设施 1、外科洗手池设置在手术间附近，大小适度，地面光滑无死角，易于清洁，每日清洁、消毒； 2、应为非手触式水龙头，数量根据手术台的数量设置，不少于手术间的数量，间距应避免洗手时手臂相互接触； 3、配备清洁剂。宜含有护肤成分和使用一次性包装，重复使用的容器每次用完清洁、消毒； 4、清洁指甲用具指定容器存放，每日清洁、消毒。 5、揉搓用品如海绵、手刷等指定容器存放，一人一用一消毒或者一次性使用； 6、外科手消毒剂符合国家有关规定； 7、外科手消毒剂采用非手接触式出液器，宜使用一次性包装，重复使用的容器每次用完应清洁、消毒； 8、干手物品及其盛装容器一人一用一清洗一灭菌。 三、方法 （一）洗手 1、揉搓：取适量的清洁剂清洗双手、前臂和上臂下1/3，并认真揉搓，清洁双手时，或使用海绵、手刷等清洁指甲下的污垢和手部皮肤皱褶处； 2、冲洗：流动水冲洗双手、前臂和上臂下1/3； 3、擦干：使用干手物品彻底擦干双手、前臂和上臂下1/3。 （二）、进行外科手消毒方法 方法一：冲洗手消毒方法、 1：取液：取足量的外科手消毒剂涂抹至双手的每个部位，前臂和上臂下1/3； 2：揉搓：充分揉搓2～6分钟， 3：冲洗：用洁净流动水冲净双手、前臂和上臂下1/3， 4：擦干：用无菌巾彻底擦干； 5：特殊情况水质达不到GB5749的规定时，应用外科洗手消毒剂（waterless antiseptic agent）再消毒双手后戴无菌手套。 方法二:免冲洗水消毒方法。 1、取液：取适量免冲洗外科手消毒剂涂抹至双手的每个部位、前臂和上臂下1/3； 2、揉搓：认真揉搓直至消毒剂彻底干燥。

手卫生操作规程

手卫生操作规程 一般洗手 （一）目的 去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌。 （二）实施要点 1.洗手指征： (1)直接接触患者前后。 (2)无菌操作前后。 (3)处理清洁或者无菌物品之前。 (4)穿脱隔离衣前后，摘手套后。 (5)接触不同患者之间或者从患者身体的污染部位移动到清洁部位时。 (6)处理污染物品后。 (7)接触患者的血液、体液、分泌物、排泄物、粘膜皮肤或伤口敷料后。 2.洗手要点： (1)正确应用六步洗手法，清洗双手，也可以将洗手分为七步，即增加清洗手腕。 (2)流动水下彻底冲洗，然后用一次性纸巾/毛巾彻底擦干，或者用干手机干燥双手。 (3)如水龙头为手拧式开关，则应采用防止手部再污染的方法关闭水龙头。 （三）注意事项 1.认真清洗指甲、指尖、指缝和指关节等易污染的部位。 2.手部不佩带戒指等饰物。 3.应当使用一次性纸巾或者干净的小毛巾擦干双手，毛巾应当一用一消毒。 4.手未受到患者血液、体液等物质明显污染时，可以使用速干手消毒剂消毒双手代替洗手。

外科手消毒 （一）目的 1.清除指甲、手、前臂的污物和暂居菌。 2.将常居菌减少到最低程度。 3.抑制微生物的快速再生。 (二)实施要点 1.外科手消毒指征： 进行外科手术或者其他按外科手术洗手要求的操作之前。 2.操作要点： (1)修剪指甲、锉平甲缘，清除指甲下的污垢。 (2)流动水冲洗双手、前臂和上臂下1/3。 (3)取适量皂液或其他清洗剂按六步洗手法清洗双手、前臂和上臂下1/3，用无菌巾擦干。 (4)取适量手消毒剂按六步洗手法揉搓双手、前臂和上臂下1/3，至消毒剂干燥。 （三）注意事项 1.冲洗双手时，避免水溅湿衣裤。 2.保持手指朝上，将双手悬空举在胸前，使水由指尖流向肘部，避免倒流。 3.使用后的海棉、刷子等，应当放到指定的容器中，一用一消毒。 4.手部皮肤无破损。 5.手部不佩带戒指、手镯等饰物。

清洁洗手 手消毒 快速手消毒 外科洗手操作规程

1.政策 清洁洗手、手消毒是医院工作人员在工作中及家属、探视者等来访者共同遵守的规程。外科洗手是外科手术前，手术医生和洗手护士应严格遵守的规程。 2.目的 清洁洗手、手消毒:清除手污染的微生物，减少其传播，是预防外源性医院感染最简单最有效的方法。 外科洗手:清除手上所有暂住菌；降低常住菌至最低程度而达到近无菌状态的要求；维持较长的抑菌作用；防止细菌从工作人员手转移至病人手术部位。 3.标准 在手没有明显污迹或者无明确病原体污染的情况下，清洁洗手和手消毒可以相互代替。但如果手有明显污迹则必须清洁洗手。如手有明确病原体污染时先进行清洁洗手，再用有效消毒剂擦拭消毒。 清洁洗手(洗手) 3.1.1洗手设备:包括洗手池、洗手液、消毒剂、擦手纸或烘干机、加盖垃圾桶(内有黑色胶袋)。 3.1.1.1病房及各诊疗科室设有流动水洗手设施，开关采用感应式或手拨式。 3.1.1.2洗手液(建议选择刺激性小、有较好的护肤性能)应避免污染，容器每月清洁和消毒一次。 3.1.1.3不便洗手时，可用快速手消毒剂。 3.1.2洗手的指征 3.1.2.1接触病人之前后，特别是在接触有破损的皮肤，粘膜和侵入性操作之前后。 3.1.2.2进行无菌技术操作前后，进入和离开隔离病房、ICU、母婴室、新生儿病房、烧伤病房、感染性疾病病房等重点部门时，戴口罩和穿脱隔离衣之前后。 3.1.2.3接触血液、体液、分泌物和被污染的物品之后。 3.1.2.4对病人进行不同部位的诊疗操作时。 3.1.2.5穿脱手套之前后。 3.1.2.6餐饮前；便后；回家后。 3.1.3洗手准备:修剪指甲(长度与指端皮肤平齐)、不涂指甲油、手部不戴任何首饰(除手表)。 3.1.4洗手方法 3.1. 4.1打开水龙头(提倡感应式)。 3.1. 4.2湿润双手，取适量洗手液。

手卫生标准操作程序

手卫生SOP 一、手卫生设施 （一）采用流动水洗手，手术室、产房、重症监护室等重点部门应当采用非手触式水龙头开关。 （二）肥皂或者皂液：固体肥皂应保持肥皂及皂盒的清洁与干燥；皂液宜使用一次性原装的挤压式液体皂，如使用分装液体皂，容器必须保持清洁，并每周至少消毒一次。皂液有混浊或变色时应及时更换，并清洁、消毒容器。 （三）干手设施：提倡使用一次性纸巾，或用干手毛巾（一用一消毒，并干燥），避免造成二次污染。 （四）配备合格的快速手消毒剂，并放置在医务人员便于取用的位置，包括流动使用诊疗车上。 二、卫生洗手 （一）洗手指征 1. 接触病人黏膜、破损皮肤或伤口前后，接触病人的血液、体液、分泌物、排泄物、伤口敷料之后； 2. 直接接触病人前后，接触不同病人之间；穿脱隔离衣前后； 3. 戴手套前、脱手套后进行卫生洗手（戴手套不能替代洗手）； 4. 进行无菌操作前后，处理清洁、无菌物品之前，处理污染物品之后； 5. 处理药物及配餐前；

6. 手有可见的污染物或者被病人的血液、体液等蛋白性物质污染后。 （二）洗手方法 1. 湿手：用水打湿双手； 2. 涂皂：取适量皂液涂抹所有手部皮肤； 3. 揉搓：认真揉搓双手，按照六步法洗手，时间不得少于15秒，见图1； 4. 冲洗：用流动水冲洗、清洗双手； 5. 干手：用纸巾或干手毛巾干燥双手。 6. 护肤：适量护肤用品护手。 图1 六步洗手法： 掌心对掌心搓揉手指交叉掌心对手背搓揉手指交叉掌心对掌心搓揉

双手互握搓揉手指拇指在掌中搓揉指尖在掌心中搓揉 三、卫生手消毒 （一）消毒用品：符合规范的一次性使用速干手消毒剂 （二）消毒指征 1. 检查、治疗、护理免疫功能低下的病人之前； 2. 出入隔离病房、重症监护病房等重点部门前后； 3. 需双手保持较长时间抗菌活性时； 4. 为不同病人进行诊疗之间；从同一病人污染部位移动到清洁部位时；手部无明显污染物时； 5. 接触具有传染性的血液、体液和分泌物以及被传染性致病微生物污染的物品后； 6. 双手直接为传染病病人进行检查、治疗、护理或处理传染病人污物之后。 （三）消毒方法 1. 取2～3ml的速干手消毒剂于掌心； 2. 涂抹手的所有皮肤，揉搓方法参照六步洗手法，揉搓时间至少15秒，见图1； 3. 揉搓时，保证手消毒剂完全覆盖手部皮肤，直至手部干燥； 4. 符合上述消毒原则每5、6条者，应先洗手，然后再进行卫生手消毒。

手卫生操作流程

手卫生（洗手、卫生手消毒）技术 一、目的 清除手部皮肤污垢、皮屑和大部分暂住菌，切断通过手传播感染的途径。 二、操作流程 1、评估： （1）了解手部污染程度； （2）了解操作范围、目的； （3）了解手部皮肤及指甲情况。 2、护士准备：衣帽整洁、修剪指甲，取下手表、饰物，卷袖过肘。 3、环境准备：清洁、宽敞、明亮。 4、用物准备：流动水洗手设施、洗手液、手消液、一次性纸巾（或清洁毛巾） 或烘干机。 5、操作步骤： 一般洗手 （1）准备：非手触式打开水龙头，调节适合水流和水温。 （2）湿手：在流动水下，使双手充分淋湿。 （3）涂剂：非手触式关上水龙头，非手触式用手背按压取适量洗手液，均匀涂抹至整个手掌、手背、手指和指缝。 （4）洗手：认真揉搓双手至少15秒，具体操作步骤为： 按六步洗手法认真揉搓至少15秒，揉搓步骤为： 第一步：双手掌心相对，手指并拢相互揉搓； 第二步：手心对手背沿指缝相互揉搓，交换进行； 第三步：掌心相对，双手交叉沿指缝相互揉搓； 第四步：弯曲手指使关节在另一手掌心旋转揉搓，交换进行。 第五步：一手握另一手大拇指旋转揉搓，交换进行； 第六步：五指指尖并拢，在另一手掌心旋转揉搓，交换进行。 （5）冲净：非手触式打开水龙头，在流动水下彻底冲洗双手，冲洗时肘部应高于手掌位置，让水从指尖处流下。 （6）干手：非手触式关闭水龙头，取一次性纸巾（或清洁毛巾）擦干或在

干手机上烘干双手。 卫生手消毒 （1）洗手：按洗手步骤洗手并保持手的干燥。 （2）涂剂：用手背按压取适量手消液，均匀涂抹至整个手掌、手背、手指和指缝。 （3）揉搓：按着揉搓洗手的步骤揉搓双手，直至手部干燥。 （4）干手。 三、注意事项 1.洗手前应摘掉戒指等首饰，指甲长者应作修剪，并去除指甲下的污垢。 2.洗手方法正确，手的各个部位都需清洗到位，注意指尖、指缝、拇指和指关节等处。 3.洗手液，手消液应均匀涂抹于手部。 4.注意调节合适水温、水流，避免污染周围环境。 四、手卫生的操作关键点 1.洗手液、手消液应均匀涂抹手部。 2.洗手时洗手液揉搓时间至少15秒，保障洗手效果。 五、理论提问 1.洗手或卫生手消毒指征是什么？ 答：（1）直接接触每个患者前后，从同一患者身体的污染部位移动到清洁部位时。（2）接触患者黏膜、破损皮肤或伤口前后，接触患者的体液、血液、分泌物、排泄物、伤口敷料等之后。 （3）穿脱隔离衣前后，摘手套后。 （4）进行无菌操作前、接触清洁、无菌物品前。 （5）接触患者周围环境及物品后。 （6）处理药物或配餐前。 2.手卫生的原则是什么？ 答：（1）当手部有血液或其他体液等肉眼可见的污染时，应用皂液和流动水洗手。 （2）手部没有可见污染时，易使用速干手消毒剂，消毒双手代替洗手。 （3）在下列情况时应先洗手，再进行卫生手消毒： 1）接触患者的血液、体液和分泌物，以及被传染性致病微生物污染的物品后。 2）直接为传染病患者进行检查、治疗、护理或处理传染患者污物之后。

[管理]医务人员手卫生的标准操作规程

[管理]医务人员手卫生的标准操作规程医务人员手卫生的标准操作规程 适用对象:所有的医务人员文件编号:RJ-IC-SOP-SWS 编写者:徐桂婷审核者: 版次:01 编写日期:2007-12-5 审核日期:2007-12-10 执行日期: 2007-12-30 注:本文件程序仅供本院医务人员使用，未经同意，不得翻印 目的:建立医务人员手卫生标准操作规程，确保医疗安全和标准预防正确性和规范性内容: 一、概念 手卫生(hand hygiene): 为洗手、卫生手消毒和外科手消毒的总称。 洗手(handwashing):指用肥皂或者皂液和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。洗手目的:是为了消除或杀灭手上的微生物，切断通过手的传播感染途径。 卫生手消毒(hand antisepsis):指用手消毒剂擦手的过程。 手的消毒是指使用消毒剂杀灭手上沉积的致病微生物，主要是暂住菌，常住菌也可被部分杀死。 外科手消毒(surgical hand antisepsis):指用手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。 美国疾病控制中心(CDC)将洗手定义为:将手涂满肥皂，并对其所有表面进行强有力的短暂的摩擦，产生大量泡沫，然后用流动水冲洗的过程。洗手可分为使用单纯的肥皂或清洁剂和用含有消毒剂的洗涤两种方法。前者为机械去污过程，能使皮肤脂肪乳化和微生物悬浮于表面，再用水将其冲洗干净;后者为化学去污过程，能杀死或抑制微生物的生长繁殖，达到消毒灭菌的目的。二、洗手的指征在医院内非紧急情况下，医务人员在下列情况下均应认真洗手

1、进入和离开病房前，在病室中由污染区进入清洁区之前 2、进行深部侵入性操作前，如脑室引流，胸腔穿刺等 3、护理每例特殊高危病人前，如严重免疫缺陷病人和新生儿 4、接触伤口，无论是切口、创口，或深部切口前后 5、处理污染的物品后，如接触被血液、体液、分泌物或渗出物污染的物品 6、在护理感染病人或可能携带具特殊临床或流行病学意义的微生物(如多重耐药菌)的病人之 后 7、与任何病人长时间和密切接触后 8、在高危病房中接触不同病人前后 9、戴脱手套前后;戴脱口罩前后;穿脱隔离衣前后 10、准备及分发病人食品或发药送水等。 11、无菌操作前后 三、正确的洗手方法 (一)、洗手的条件与设备 1、洗手池的设置洗手池位置合理，每个病房内应有一个洗手池。居住数个病人的大病房，特别是重症监护病房内，最好设置多个洗手池。洗手池的位置应便于使用，而且不妨碍有效利用室内空间，如紧靠门处，进行侵入性操作的邻近处。 2、水龙头的开关水龙头用肘式、脚踏式、红外线传感自动调节开关，比较安全、卫生、方便，而且节约用水。应特别强调指出，绝对不可为了防止溅水或使水流柔和，而将纱布缠绕或用其他材料“套管”。 3、皂液的卫生洗手用皂液，于封闭挤压容器中使用，每次用完后容器必须更换，经清洗消毒后再装入新的皂液，切不未用完就加新液，以防止细菌在溶液中生长。