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分子生物学复习题及其答案

分子生物学复习题及其答案
分子生物学复习题及其答案

一、名词解释

1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2

2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能

3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。

4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。

5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。

6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。

7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输

8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质

9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。

10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。

11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。

12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。

13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。

14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。

15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。

16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。

17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列

18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。

19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。

20、基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。

21、基因簇:基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。

22、超基因家族:由基因家族和单基因组成的大基因家族,各成员序列同源性低,但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。

23、假基因:一种类似于基因序列,其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。

24、复制:是指以原来DNA(母链)为模板合成新DNA(子链)的过程。或生物体以DNA/RNA

为模板合成DNA/RNA的过程。

25、半保留复制:DNA复制过程中,新合成的子代DNA分子中,一条链是新合成的,另外一条链来自亲代,这种复制方式称为半保留复制。

26、复制子:基因组上能够独立进行复制的单位,包括复制起点和复制终点。所有的原核生物的染色体、噬菌体仅有一个复制子;真核生物的染色体有多个复制子

27、复制起始点:DNA分子上起始复制并控制复制起始频率的特定位置

28、复制终点:终止复制的位点。

29、复制叉:又称生长点,复制开始时,起始点处的DNA双螺旋要解链,松开的两股链和未松开的双螺旋形状象一把叉子,称为复制叉,是复制有关的酶和蛋白质组装成新的复合物和新链合成的部位。

30、引物:是人工合成的与模板DNA互补的寡核苷酸序列

31、简并引物:是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。

32、相向复制:从两个起点开始两条链的复制,形成两个复制叉,各以一条链为模板单一方向复制出一条新链。

33、单向复制:复制从一个起始点开始,只有一个复制叉,以同一方向生长出两条链。

34、双向复制:从一个起始点开始,沿着两个相反的方向形成两个复制叉,一方向移动,两条DNA链都被作为模板,各生长出两条新链,形成一个复制泡,用电子显微镜可以观察到复制泡的存在。这是原核生物和真核生物DNA复制最主要的形式

35、D环复制:又称取代环复制,是线粒体DNA 的复制形式。复制中呈字母D形状而得名。

36、DNA的半不连续复制:DNA在复制过程中,一条链合成是连续的,而另一条链合成是不连续的,这样的复制过程称为半不连续合成。

37、冈崎片段:DNA复制时,以5’→3’方向的母链作为模板,子链沿5’→3’最初合成长短不一、不连续核苷酸小片段,最后连接成为完整子链,这些小片段称之为岗崎片段。38、前导链:以3’→5’方向DNA链为模板链,子代DNA以5’→3’方向连续合成,称为前导链。

39、后随链:以5’→3’方向DNA链为模板链,子代DNA以5’→3’方向不连续合成,形成许多不连续的冈崎片段,最后连接成一条完整的DNA链,称为后随链,又称后滞链。

40、引物酶:又称引发酶,合成起始引物,引物长度为10-60个核苷酸,E.coli中是DnaG 蛋白。

41、RNA聚合酶:以一条DNA链或RNA链为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。促进DnaA活性,促进复制起始。

42、端粒:真核生物线性染色体DNA的两端是一种特殊结构称为端粒功能:稳定染色体末端结构,防止染色体末端融合、重组、降解;补偿5’末端在切除RNA引物后留下的空缺

43、DNA的损伤:生物体生命过程中DNA双螺旋结构发生的任何改变都称之为DNA损伤。

44、DNA修复:是细胞对DNA受损伤后的一种反应。主要包括:直接修复、切除修复、错配修复、重组修复、易错修复和SOS应急反应

45、光修复:光裂合酶能特异地和嘧啶二聚体结合,在可见光下催化光化合反应,使环丁烷环回复到两个独立的嘧啶,这一过程叫光复活作用。

46、应急反应(SOS反应):许多能造成DNA损伤或抑制DNA复制的过程能引起一系列复杂的诱导效应,这种效应称为应急反应(SOS反应)

47、同义突变:指突变改变了密码子的组成,但由于密码子的简并性没有改变所编码的氨基酸序列的突变

48、错义突变:指基因突变改变了所编码氨基酸的序列,不同程度地影响蛋白质和酶的活性。

49、无义突变:指基因改变使代表某种氨基酸的密码子变为终止密码子,导致肽链合成过早终止。

50、致死突变: 有些错义突变和无义突变严重影响到蛋白质活性甚至完全无活性, 从而影响了表现型。

51、渗漏突变: 有些错义的产物仍然有部分活性,使表现型介于完全的突变型和野生型之间的中间类型。

52、中性突变: 有些错义突变不影响或基本上不影响蛋白质活性,不表现出明显的性状变化。

53、电泳:带电颗粒在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。

54、迁移率:是指带电颗粒在单位电场下泳动的速度。影响迁移率的内在因素:(1)样品所带静电荷的多少(2)样品颗粒大小(3)样品分子空间构象影响迁移率的外界因素:电场强度、电泳缓冲液的离子强度、电泳缓冲液的pH值、支持物及其浓度的影响、插入染料的影响、温度的影响、电渗

55、DNA重组:又称遗传重组,指DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,重组产物叫重组DNA

56、同源重组:又称一般性重组,指发生在两条同源DNA分子之间,通过配对、链断裂和再连接,而产生片段交换过程。重组产物称为重组体

57、Holliday中间体:同源重组中,两条同源的DNA分子经过配对、断裂和再连接,形成的连接分子,称为Holliday中间体

58、Chi位点:它是刺激重组的位点。这一位点是由8个碱基组成的非对称序列

59、特异位点重组:指发生在一个特定的短DNA序列内,由特异的酶和辅助因子识别和作用的重组。

60、单链同化:单链DNA与同源双链DNA分子发生链的交换,从而使重组过程中DNA配对、Holliday中间体的形成、分支移动等步骤得以实现的过程。

61、转座子:基因组上中可以移动的DNA片段。转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程叫转座

62、反转座子:又称反转录转座子或反转录子,是一类在转座过程中需要以RNA为中间体,经过反转录过程再分散到基因组中的转座子。生物学意义:对基因表达的影响;反转座子介导基因的重排;反转座子在进化中的作用

63、转录:生物体以DNA为模板合成RNA的过程。

64、反转录:生物体以RNA为模板合成DNA的过程。

65、剪接:真核生物RNA前体去除内含子,连接外显子的过程。

66、剪接体:在mRNA前体内含子的剪接过程中,由多个核内小分子核糖核酸(snRNA)和蛋白质组装形成催化剪接反应的复合体。

67、模板链:“-链”、“反义链”,指用于转录的DNA单链,是合成RNA的模板

68、编码链:“+链”、“有义链”、“非模板链”,指模板链的对应DNA链,碱基序列与mRNA 一致(DNA:T,RNA:U)

69、编码序列:编码序列从AUG 开始以三核苷酸单位阅读直到出现终止密码UGA ,UAA 或UAG 之一。

70、RNA编辑:是指转录后的RNA在编码区发生碱基的插入、丢失或替换等现象。编辑的生物学意义:(1)改变和补充遗传信息;(2)增加基因产物的多样性,是基因调控的一种方式,有利于进化;(3)可能与学习和记忆有关

71、反式作用因子:通过扩散到与其编码基因不在同一个DNA分子上的靶位置,识别、结合而调节基因表达的分子。如转录因子、RNA聚合酶

72、顺式作用元件:通常只在原位影响与其处于同一个DNA分子上的、物理上紧密相连、被表达的基因序列。通常不编码蛋白,多位于基因旁侧或内含子中。如启动子、终止子、增强子、操纵基因、MAR

73、启动子:位于转录起始点附近,且为转录起始所必需,可被RNA聚合酶特异性识别、结合,并起始转录的一段保守DNA序列,其本身不被转录。

74、-10序列(Pribnow框):几乎所有原核基因的启动子中,在转录起始位点上游-10bp 位点区域都有一个典型的6bp 区域,共有序列为TATAAT(T80A95T45A60A50T96)序列,称为-10序列或Pribnow框。

75、- 35序列(Sextama 框):转录起始位点上游约-35bp处有一段6bp区域,共同序列为TTGACA(T82T84G78A65C54A45),称为-35序列(Sextama 框)

76、操纵子:是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位,由调节基因、启动子、操纵基因和结构基因等序列组成。

77、增强子:指能使基因转录频率明显增加的DNA远端调控序列

78、强终止子:无需其他蛋白质因子的帮助,而是依靠转录产物形成特殊的二级结构就可以终止转录,这种终止子被称为内部终止子。

79、弱终止子:需要在一种蛋白质因子ρ的帮助才能终止,所以又称为ρ依赖性终止子。

80、结构基因:编码参与细胞结构或代谢活动的结构蛋白、酶的基因。

81、操纵基因:指操纵子中常与启动子相邻或重叠的序列,被有活性调节蛋白结合后,影响启动子启动下游结构基因转录,是一类顺式作用元件。

82、调节基因:编码控制其它基因表达的蛋白质或RNA的基因。

83、调节蛋白:是调节基因产物,有活性调节蛋白可与操作基因结合,控制下游结构基因转录。

84、效应物:调节蛋白需要有一个小分子物质结合并改变其活性,共同调节结构基因转录,这个小分子物质称为效应物(effector)

85、CAP:(降解物活化蛋白)或CRP(环腺苷酸受体蛋白)是分子量为22.5kd的二聚体

86、顺反子:遗传学将编码一个蛋白质或多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。

87、多顺反子:原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质,为多顺反子(polycistron) 。

88、单顺反子:真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子(single cistron) 。

89、遗传密码: DNA(或mRNA)中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码。特点:连续性、简并性、通用性、变异性、方向性、变偶性

90、密码子:mRNA上每3个相邻的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨基酸,这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。

91、同义密码子:同一种氨基酸具有两个或更多密码子的现象称为密码子的简并性。对应于同一种氨基酸的不同密码子称为同义密码子。

92、开放阅读框架:从mRNA 5 端起始密码子AUG到3 端终止密码子之间的核苷酸序列,按照三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。

93、RNA的再编码:mRNA以不同的方式翻译,改变原来编码信息,称为RNA的再编码

94、氨基酸的活化:是指氨基酸与tRNA相连,形成氨酰-tRNA的过程。氨基酸的活化在细胞质中进行。反应由氨酰-tRNA合成酶(又称氨基酸活化酶)催化。意义:(1)使氨基酸本身被活化,利于下一步形成肽键反应。(2)tRNA可携带氨基酸到mRNA的指定部位,使氨基酸进入到肽链合适的位置

95、安慰诱导物:又称义务诱导物:能高效诱导酶的合成,但不是酶作用底物,与酶底物结

构类似的分子

96、应急反应:当细菌能源十分缺乏时,几乎所有的生化反应都停止,为生存,细菌体内可立即产生一种应急应答反应,关闭许多基因表达。

97、反式作用因子:通过扩散到与其编码基因不在同一个DNA分子上的靶位置,识别、结合而调节基因表达的分子。如转录因子、RNA聚合酶

98、顺式作用元件:通常只在原位影响与其处于同一个DNA分子上的、物理上紧密相连、被表达的基因序列。通常不编码蛋白,多位于基因旁侧或内含子中。如启动子、终止子、增强子、操纵基因、MAR

99、转录后的加工:是指将各种前体RNA分子加工成成熟RNA的过程。

100、信号序列:所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号,主要为N末端特异氨基酸序列,可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位,这一序列称为信号序列。

101、分子伴侣:分子伴侣是细胞一类保守蛋白质,可识别肽链的非天然构象,促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。

102、应急反应(strigent response):当细菌能源十分缺乏时,几乎所有的生化反应都停止,为生存,细菌体内可立即产生一种应急应答反应,关闭许多基因表达。

103、管家基因:在生物体几乎所有的细胞中始终表达的基因,表达产物大致以恒定水平始终存在于细胞内,是维持细胞最低限度功能所不可缺少的基因,是细胞生存所必须的。这类基因的表达称为组成型表达

104、奢侈基因:只在特定的细胞类型或细胞生长发育特定时间表达的基因。这类基因的表达称为可调节表达

105、核基质结合区:30nm染色质纤维以特定的DNA序列结合在核基质上,这些特定DNA 序列称为MAR,它使纤维状的染色质DNA形成数以万计的环状结构域。

106、绝缘子:是一类特殊的顺式作用元件,阻止激活或阻遏作用在染色质上的传递,使染色质活性限定于结构域内

107、座位控制区(LCR):是一种远距离顺式元件,为相连接的基因提供了一个可以活化的染色体环境,可能是DNaseI的超敏感位点和许多转录因子结合位点,可促进基因转录108、CpG岛:真核生物基因组中,常见富含的CpG的区域,称为CpG岛,常位于转录调控区及其附近,其甲基化程度直接影响转录活性。

109、DNA甲基化:真核生物DNA双螺旋中,胞嘧啶核苷的嘧啶环5位甲基化,并与其上的鸟嘌呤形成mCpG,是DNA甲基化的唯一形式

110、高速泳动蛋白(HMG):活性染色质中含有两种高度丰富的小分子非组蛋白,这些蛋白具有异常高的电荷,在凝胶电泳中移动快,所以称为高速泳动蛋白(HMG)

111、小卫星DNA序列:又称可变数目串联重复,重复单位6-40bp,每个拷贝长度0.1-20Kb (6-100次),分为位于邻近染色体端粒的区域(端粒家族),以及分散在基因组的多个位置上(高变家族),一般没有转录活性。

112、增强子:指能使基因转录频率明显增加的DNA远端调控序列。

二、填空题

1、原核生物复制方式:θ型复制、滚环复制、D环复制

2、真核生物复制方式:多起点双向复制

3、真核生物基因组组分包括:核内染色体DNA、核外细胞器DNA(线粒体DNA、叶绿体DNA)、质粒

4、真核生物DNA序列类型:单拷贝序列、低度重复序列、中度重复序列、高度重复序

5、PCR体系:引物、DNA聚合酶模板dNTP Mg 2+浓度

6、反式作用因子结构包括:DNA结合结构域、转录激活结构域、二聚体结构域,其中,

DNA结构域包括:螺旋-转角-螺旋(HTH)结构基序、锌指(ZF)结构基序、螺旋-突环-螺旋(HLH)结构基序、亮氨酸拉链(LZ)结构基序

7、DNA的提取的一般步骤

1、准备生物材料

2、裂解细胞

3、去除杂质

4、沉淀DNA

5、检测

6、保存

三、简答论述题

1、增强子为什么具有远距离作用呢?

答:成环模型:认为增强子通过一些蛋白质因子的介导可与远距离的启动子结合,使DNA形成了一个环,从而促使远距离的启动子的转录。成环模型也符合染色体的侧环模型和核基质的调控理论,也就是说DNA的特殊序列可以和核基质结合形成侧环,在某些细胞中有些基因通过环的形成让增强子区和启动子区相互靠近,使这些基因能得以表达。看来环的形成主要是两种因素:①某些蛋白质因子的介导;②和核基质特异的结合

2、病毒基因组的结构特点

答:a与细菌相比,病毒基因组很小,大小相差较大。

b病毒基因组由DNA组成,也可以由RNA组成,每种病毒颗粒中只含有一种核酸,核酸结构可以是单链或双链、环状或线状。

c有重叠基因。

d大部分是用来编码蛋白质的,基因间的间隔序列较短。

e功能上相关的基因集中成簇,在基因组的特定的部位,形成一个功能单位或转录单

元,转录产物为多顺反子,之后经过简单加工。

f噬菌体的基因是连续的;而真核细胞病毒的基因是不连续的,具有内含子。

3、细菌染色体基因组结构的一般特点

答:☆细菌的染色体基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成,染色体相对聚集在一起,形成一个较为致密的区域,称为类核。

☆只有一个复制起点,数个相关的结构基因串联在一起,受同一调控区调节,合成多顺反子mRNA。

☆具有操纵子结构。

☆编码蛋白质的基因都是单拷贝,但rRNA基因是多拷贝。

☆和病毒的基因组相似,非编码的DNA部份所占比例比真核细胞基因组少得多。

☆基因组DNA中具有多种调控区如复制起始区、复制终止区、转录启动区和终止区等,还有重复序列,比病毒基因组复杂。

☆具可移动的DNA序列

4、真核生物基因组的特点

答:☆真核生物的基因组比较庞大,具有多个复制起始点。

☆一个基因组包括多条线状染色体,每条染色体DNA上有多个复制起始点。

☆真核生物的基因组DNA与蛋白质结合形成染色质的复杂高级结构,储存于细胞核内。

☆真核细胞被核膜分隔成细胞核和细胞质,在基因表达中,转录和翻译在时间和空间上被分隔,不偶联。

☆真核生物基因组存在着许多重复序列,重复序列单位长度不一,重复程度各异。

☆真核生物的蛋白质基因一般以少拷贝形式存在,转录产物为单顺反子。

☆存在着可移动的DNA序列。

☆大多数真核生物基因含内含子,为断裂基因。

5、滚环复制特点:

(1)共价延伸;

(2)模板链和新合成的链分开;

(3)不需RNA引物,在正链3‘-OH上延

(4)只有一个复制叉;

(5)形成多联体;

6、D环复制的特点:

D环复制的特点是: 复制起始点不在双链DNA同一位点,内、外环复制有时序差别。

7、DNA聚合酶反应特点

☆以4种dNTP 作为底物

☆反应需要接受模板指导

☆链延伸需要引物3’-羟基存在

☆新链延伸方向5’→ 3’

☆产物DNA极性与模板相对

8、DNA聚合酶I的结构

DNA聚合酶I有5个结合位点:

(1) 模板结合位点

(2) 引物结合位点

(3) 底物dNTP结合位点

(4) 5‘→3’外切酶结合位点

(5) 3'→5'校正位点

9、DNA聚合酶I的主要活性和生理功能

5’→3’聚合活性:催化条件:4×dNTP、Mg2+、模板DNA(双链)、RNA引物;可用与DNA测序

3’→5’外切活性:无dNTP是外切活性,有dNTP时,校正作用

5’→3’外切活性

内切酶活性

生理功能:滞后链合成中除去RNA引物并添补其留下的缺口;参与DNA损伤修复10、DNA聚合酶II的主要活性

5’→3’聚合活性

3’→5’外切活性

生理功能:修复中起作用

11、DNA聚合酶III的主要活性

多亚基酶

5’→3’聚合活性

3’→5’外切活性

生理功能:是体内DNA复制的主要承担者

12、DNA的复制过程

1、复制的起始

①DNA解旋、解链,形成复制叉:拓扑异构酶、解旋酶及单链DNA结合蛋白

②RNA引物合成:依赖于单链模版,由引物酶催化合成一小段RNA引物

③特点:原核环形DNA通常只有一个起点,双向复制;真核线性DNA通常多个起始点,形成多个复制叉

2、复制的延长

①子链延长:引物合成后,由polII催化,在引物3’-OH末端逐一添加与模板链对应互补的脱氧核苷三磷酸

②半不连续合成:

A.领头链:键的延长方向与解链方向相同,为连续合成

B..随从链:键的延长方向与解链方向相反,为不连续合成,产生冈崎片段

3、复制的终止

①水解引物及填补空隙:冈崎片段合成后,由Pol I水解去除RNA引物,并填补留下的空隙

②连接酶连接冈崎片段形成完整双链DNA分子:空隙填补后,DNA片段与片段之间的一个缺口由DNA连接酶催化连接,从而产生完整的双链DNA分子

13、端粒酶的生物学意义

(1)细胞水平的老化,可能与端粒酶的活性下降有关。

(2)基因突变、肿瘤形成,端粒也可表现缺失,融合或序列缩短等现象。

(3)研究端粒的变化是目前肿瘤研究中的一个新领域。

14、DNA重组的意义

1、迅速增加遗传群体的多样性

2、与DNA修复有关

3、可调节某些基因的表达

15、转座子转座的特征

☆转座不依赖靶序列的同源性

☆转座后靶序列重复

☆转座子的插入具有专一性

☆转座具有排他性

☆转座具有极性效应

☆活化临近的沉默基因

☆区域性优化

16、转座子的应用

1、用于难以筛选的基因的转移

2、作为基因定位的标记

3、筛选插入突变

4、构建特殊菌株

5、克隆难以进行表型鉴定的基因

17、RNA转录的一般特点

☆具有选择性,即只对基因组或DNA分子中的编码区进行转录

☆开始于特定位点,并在特定的终点处终止

☆催化转录反应的是RNA聚合酶

☆被转录的DNA双链中只有其中一股模板链(反义链)作为RNA合成的模板,进行“不对称”转录

☆启动子控制起始

☆底物为4种5’-核糖核苷三磷酸

☆合成方向5′→3′

18、原核生物启动子的特征

结构典型:都含保守的识别序列(R)、结合序列(B)、起始位点(I)以及间隔长度;

直接和聚合酶相结合;

常和操纵子相邻;

常位于基因的上游;

19、真核RNA聚合酶的一般特点

结构非常复杂

结构具有相似性

3类RNA聚合酶都有几种共同的亚基:根据其结构与功能,可以分为核心亚基、

共同亚基和非必须亚基。

20、原核生物和真核生物的rRNA基因差异

原核生物无5.8S rRNA

5S rRNA编码基因与其它rRNA编码基因关系不同

重复次数不同

21、帽子结构的功能

(1)对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA提供信号,Cap0 的全部都是识别的重要信号,Cap1,2 的甲基化能增进识别

(2)增加mRNA 的稳定性,使5’端免遭外切核酸酶的攻击

(3) 有助于mRNA越过核膜,进入胞质

22、poly(A) 的功能

(1)可能与核质转运有关

(2)增强mRNA稳定性

(3)增强可翻译能力

23、剪接机制——剪接体套索模型

●第一次转酯,内含子形成套索

●第二次转酯,外显子1、2连接、套索状内含子释放

●拼接体解体与套索降解

24、翻译(蛋白质的生物合成):

以氨基酸为原料

以mRNA为模板

以tRNA为运载工具

以核糖体为合成场所

起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与

合成后加工成为有活性蛋白质

25、简并性的生物学意义?

可以降低由于遗传密码突变造成的灾难性后果。

可以使DNA上的碱基组成有较大的变化余地,而仍然保持多肽上氨基酸序列不变。

26、tRNA的结构与功能

1、tRNA的一级结构特点

含10~20% 稀有碱基,如DHU

3′末端为—CCA-OH

5′末端大多数为G

具有TψC

2、tRNA的二级结构——三叶草形

氨基酸臂

DHU环

反密码环

额外环

TΨC环

3、tRNA的三级结构——倒L型

27、肽链合成延长

包括以下三步:

进位:新氨酰tRNA识别核糖体内的mRNA,进入A位

转肽:P位的氨基酸转到A位新氨基酸末端,形成肽键

移位:核糖体向3’端移动1个密码子长度

肽链延长是以上3步在核糖体上连续性循环式进行,每次循环增加一个氨基酸,又称为核糖体循环(ribosomal cycle)。

28、原核生物基因表达调控的特点

主要是短期调节

主要是转录水平的调节

以操作子为单位,存在正、负调控,但以负调控为主,调节因子的活性主要受变构效应调节

还存在其它调控机制

29、Lac操纵子调控机制总结

当低葡萄糖而高乳糖时,部分乳糖在β-半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖,异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白失活,不能结合O,RNA聚合酶顺利结合启动子,起始转录利用乳糖的酶;同时,由于没有葡萄糖存在,胞内cAMP浓度高,大量的cAMP-CAP复合物结合在CAP位点,极大的促进下游结构基因转录效率,β-半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高,这时候,细菌就分解乳糖为葡萄糖和半乳糖,葡萄糖直接作为碳源,半乳糖利用gal操纵子调控的酶转变为葡萄糖,由于阻遏物不断合成,当乳糖被消耗完毕后,有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏状态,酶合成被抑制,经过一段延迟期后,逐渐被稀释。

当高葡萄糖和高乳糖时,乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白失活,不能结合O,RNA聚合酶可顺利结合P起始转录分解利用乳糖的酶;同时,但是由于葡萄糖存在,胞内cAMP浓度极低,没有cAMP-CAP结合在CAP位点,转录虽然可以起始但还是效率极低,β-半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量非常少,这时候,细菌就利用葡萄糖作为碳源,而不利用乳糖。

30、色氨酸操纵子调节机制

当环境能提供足够浓度的色氨酸时,调节蛋白R与辅阻遏物-色氨酸结合,构象变化而活化,就能够与操纵基因Otrp特异性亲和结合,阻遏结构基因的转录起始。因此这是属于一种可阻遏的负调控操纵元,即操纵子通常是开放转录的,有效应物(色氨酸为辅阻遏物)作用时则阻遏关闭转录;同时,色氨酸浓度高,tRNAtrp-色氨酸浓度随之升高,核糖体沿mRNA翻译移动的速度加快,占据1和2区域,1和2、2和3配对的机会减少,3和4配对就形成具有终止结构C茎环,RNA聚合酶终止转录,于是即使已经开始的转录就减弱,这样,在有色氨酸存在时,大肠杆菌利用外界提供的色氨酸,而很快关闭其体内色氨酸合成途径,直接利用外界trp。

在色氨酸浓度未达到能起阻遏作用时,调节蛋白R未与辅阻遏物-色氨酸结合,构象处于失活状态,不能与操纵基因Otrp特异性亲和结合,结构基因的转录就可起始进行。同时,Ptrp起始转录后,RNA聚合酶沿DNA转录合成mRNA,同时,核糖体就结合到新生成的mRNA核糖体结合位点上,开始翻译。tRNAtrp-色氨酸量也少,使核糖体沿mRNA翻译移动的速度慢,赶不上RNA聚合酶沿DNA移动转录的速度,这时核糖体占据前导序列1区域,使不能生成发夹结构A ,于是2和3区域配对就形成发夹结构B ,阻止了C生成终止信号的结构,RNA聚合酶得以沿DNA前进,继续去转录,编码合成色氨酸的酶。

31、基因工程的操作流程

1、分:分离目的基因

2、切:对目的基因和载体适当切割

3、接:目的基因与载体连接

4、转:重组DNA转入受体细胞

5、筛:筛选出含有重组体的受体细胞

6、表:目的基因在受体细胞中表达,受体细胞成长为基因改造生物

32、PCR技术的原理

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)原理类似于DNA的变性和复制过程,即在高温(93 ~95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~65℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3’端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以5’→3’方向延伸,合成DNA新链。这样,每一双链的DNA模板,经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行,每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍,PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增,经过25~30个循环后,理论上可使基因扩增109倍以上,实际上一般可达106~107倍。

1.变性:在加热或碱性条件下可使DNA双螺旋的氢键断裂,形成单链DNA,称之为变性。

2.退火:是模板与引物的复性。引物是与模板某区序列互补的一小段DNA片段。

3.延伸:从结合在特定DNA模板上的引物为出发点,将四种脱氧核苷酸以碱基配对形式按5’→3’的方向沿着模板顺序合成新的DNA链。

35、

(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)

分子生物学试题及答案 一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。 3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。 9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子,弱化子等。 12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、(IF-2)和(IF-3)。 4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、(DNA重组技术)三部分。7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、( T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、 (mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。 9.蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法)、(可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从( S2)开始,无G时转录从( S1)开

分子生物学试题整理

一、植物组织培养:狭义指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。广义:无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。生物技术中的一个基本技术。 MS:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其营养丰富,养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 愈伤组织愈伤组织callus在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。 cDNA文库:包含细胞全部的mRNA信息的反转录所得到的cDNA的集合体。 胚状体:是指植物在离体培养条件下,非合子细胞经过胚胎发生和发育的过程形成的胚状结构,又称体细胞胚。 体细胞杂交:体细胞杂交又称体细胞融合,指将两个GT不同的体细胞融合成一个体细胞的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的染色体。 分子标记:是指在分子水平上DNA序列的差异所能够明确显示遗传多态性的一类遗传标记。 基因工程原称遗传工程,亦称重组DNA技术,是指采用分子生物学手段,将不同来源的基因,按照人类的愿望,在体外进行重组,然后将重组的基因导人受体细胞,使原有生物产生新的遗传特性,获得新品种,生产新产品的技术科学。 细胞培养指动物、植物和微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。过程:①取材和除菌;②培养基的配制;③接种与培养。 生物反应器是适用于林木细胞规模化培养的装置。 生物技术biotechmlogy:也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 外植体explant:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 植物细胞的全能性:植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。 再分化:脱分化的分生细胞(愈伤组织)在一定的条件下,重新分化为各种类型的细胞,并进一步发育成完整植株的过程。 器官发生organogenesis:亦称器官形成,一般指脊椎动物个体发育中,由器官原基进而演变为器官的过程。各种器官形成的时间有早有晚,通过器官发生阶段,各种器官经过形态发生和组织分化,逐渐获得了特定的形态并执行一定的生理功能 体细胞胚胎发生:单细胞或一群细胞被诱导,不断再生非合子胚,并萌发形成完整植株的过程。 PCR:聚合酶链式反应是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。Recombinant DNA重组DNA:是指采用分子生物学手段,将不同来源的基因,按照人类的愿望,在体外进行重组,然后将重组的基因导人受体细胞,使原有生物产生新的遗传特性,获得新品种,生产新产品的技术科学。 细胞融合:两个或多个细胞相互接触后,其细胞膜发生分子重排,导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程称为细胞融合。 悬浮培养:悬浮培养是细胞培养的基本方法,不仅为研究细胞的生长和分化提供了一个

分子生物学试题及答案

生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学(A)答案及评分标准 一、选择题,选择一个最佳答案(每小题1分,共15分) 1、1953年Watson和Crick提出(A ) A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的,常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是(D ) A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是(D ) A、按全保留机制进行 B、按3'→5'方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时(A ) A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述,哪一个是正确的?(B ) A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括(A ) A、加CCA—OH B、5'端“帽子”结构 C、3'端poly(A)尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括(C ) A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3'末端加poly(A)尾 D、特定氨基酸的修饰

8、有关肽链合成的终止,错误的是(C ) A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在,蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子:RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究(C ) A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件(B ) A、含有复制原点,抗性选择基因 B、含有复制原点,合适的酶切位点 C、抗性基因,合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是(D ) A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢,适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是(E ) A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由(D )编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时,细菌DNA修复酶基因表达反应性增强,这种现象称为(A ) A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成?(A ) A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时

关于分子生物学试题及答案

分子生物学试题(一) 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的()片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为()、()两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是()、()和()。 4.蛋白质的跨膜需要()的引导,蛋白伴侣的作用是()。5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:()和()。6.分子生物学的研究内容主要包含()、()、()三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是()、()。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:()、()。 9.蛋白质多亚基形式的优点是()、()、()。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从(S2 )开始,无G时转录从(S1 )开始。 12.DNA重组技术也称为(基因克隆)或(分子克隆)。最终目的是(把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体)。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤: ①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为(松弛型质粒)。 14.PCR的反应体系要具有以下条件: a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物(约20个碱基左右)。 b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15.PCR的基本反应过程包括:(变性)、(退火)、(延伸)三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括: ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中; ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;

(精选)分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学复习提纲 一.名词解释 (1)Ori :原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS:自主复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。 (3)r-independent termination不依赖r因子的终止,指在不依赖r因子的终止反应中,没有任何其他因子的参与,核心酶也能在某些位点终止转录。(强终止子) (4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基识别位点),存在于原核生物起始密码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16SrRNA3’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA 上的这段序列,并把它作为翻译起始位点。 (5)Operator:操纵基因,与一个或者一组结构基因相邻近,并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用,从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 (6)Enhancer:增强子,能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 (7)cis-acting element :顺式作用元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor:反式作用因子,是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 (8)Open reading frame (ORF):开放式阅读框架,是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始,到终止密码子结束。 (9)Gene:基因,产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。(能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。)

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术(基因工程) (1)可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; (2)可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; (3)可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化(时序调节),并随着内外环境的变化而不断加以修正(环境调控)。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提: (1)拥有特定的空间结构(三维结构); (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向: (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法? (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性,是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性,决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学,是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。

(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质,它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容: (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕,两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧,3′,5′- 磷酸与核糖在外侧,彼此通过磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,A与T相配对形成两个氢键,G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制,但根据碱基互补配对原则,当一条多核苷酸的序列被确定后,即可决定另一条互补链的序列。

分子生物学复习题及其答案

一、名词解释 1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列 18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇:基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族:由基因家族和单基因组成的大基因家族,各成员序列同源性低,但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因:一种类似于基因序列,其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制:是指以原来DNA(母链)为模板合成新DNA(子链)的过程。或生物体以DNA/RNA

温州医学院医学分子生物学试题及附加题

名词解释: SiRNA: 利用双链小片段RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失的表型。 Blue/white screen: 蓝白斑筛选。即β-半乳糖苷酶基因失活筛选。其原理是:某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因,该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α-肽的DNA片断,IPTG可诱导此片断合成,此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α-互补,形成完整的β-半乳糖苷酶。该酶能催化指使剂底物X-gal形成蓝色菌落。当外源基因插入lacZ’基因中MCS(多克隆位点),lacα-肽基因阅读框架被破坏,细菌内将无β-半乳糖苷酶活性,结果重组克隆呈白色菌落。 Knock down:(基因)敲除。是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。基因敲除除可以终止某一基因的表达外,还包括引入新基因及引入定点突变,既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因,也可以用正常基因敲除相应的突变基因。G-protein : G蛋白。是三聚体GTP结合调节蛋白的简称,位于质膜内胞浆的一侧,由α,β,γ三个亚基组成,βγ二聚体通过共价结合锚定于膜上起稳定α亚基的作用,而α亚基本身具有GTP酶活性。G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用,当G蛋白α亚基与GDP 结合,处于关闭态;当胞外配体与受体结合形成复合物时,导致受体胞内结构域与α亚基偶连,并促使α亚基结合的GDP被GTP交换而被活化,即处于开启状态,从而传递信号。DNA-chip: DNA芯片。指通过微阵列技术将高密度DNA片断阵列通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面作为探针,荧光标记的样品DNA/RNA借助碱基互补作用与探针进行杂交,从而进行大量的基因表达及检测等方面的研究。 Off-target effect:脱靶效应。指的是与一个内源性基因某一位点并不完全同源的RNA亦能通过抑制翻译而导致基因表达的静默。 Super gene family:超基因家族。指一个共同的祖先基因通过各种各样的变异,产生了结构大致相同但功能却不尽相似的一大批基因,这一大批基因分属于不同的基因家族,但可以总称为一个超基因家族。 Environment genetic project :环境基因工程,指专门鉴定体积暴露在特定环境下的那些显示易感或抗性基因的DNA多态性。 Tumor vaccine:肿瘤疫苗。肿瘤疫苗的本质是将某一抗原组份作用于生物体,从而激发该机体对该抗原或抗原载体的免疫保护,这种抗原形式或抗原的载体形式即是疫苗。肿瘤疫苗的形式有细胞性疫苗和可溶性抗原疫苗两大类。细胞疫苗是将肿瘤细胞进行某些处理灭活后直接作用于机体。可溶性抗原或多肽疫苗则是在体外通过基因工程的方法制备出已知某肿瘤的抗原成分,与不同的佐剂联合应用达到免疫激发的目的。 问答题: 1. 请从“一条基因一条蛋白”到“一条蛋白一条基因”说说你对基因概念的变化的理解。 2. 基因诊断的优缺点及发展前景。 3. 逆转录酶在RNA病毒感染宿主及自身复制中的意义。 4. PCR与细胞内DNA复制的异同点。(不少于5点) 5. 试从肿瘤多基因,多机制说明肿瘤的基因筛选。 医学分子生物学附加题 反式作用因子中的DNA结合结构域: a.螺旋-转折-螺旋(helix-turn-helix, HTH):

中南大学_医学分子生物学试题库答案.pdf

医学分子生物学习题集 (参考答案) 第二章基因与基因组 一、名词解释 1.基因(gene):是核酸中储存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息 所必需的全部核苷酸序列。 2.断裂基因(split gene):真核生物基因在编码区内含有非编码的插入序列,结构基因 不连续,称为断裂基因。 3.结构基因(structural gene):基因中用于编码RNA或蛋白质的DNA序列为结构基因。 4.非结构基因(non-structural gene):结构基因两侧一段不编码的DNA片段,含有基 因调控序列。 5.内含子(intron):真核生物结构基因内非编码的插入序列。 6.外显子(exon):真核生物基因内的编码序列。 7. 基因间DNA (intergenic DNA):基因之间不具有编码功能及调控作用的序列。 8. GT-AG 法则 (GT-AG law):真核生物基因的内含子5′端大多数是以GT开始,3′ 端大多数是以 AG 结束,构成 RNA 剪接的识别信号。 9.启动子(promoter):RNA聚合酶特异识别结合和启动转录的DNA序列。 10.上游启动子元件(upstream promoter element ):TATA合上游的一些特定的DNA序 列,反式作用因子,可与这些元件结合,调控基因转录的效率。 11.反应元件(response element):与被激活的信息分子受体结合,并能调控基因表达的 特异DNA序列。 12.poly(A)加尾信号 (poly(A) signal) :结构基因末端保守的 AATAAA 顺序及下游 GT 或T富含区,被多聚腺苷酸化特异因子识别,在mRNA 3′端加约200个A。 13.基因组(genome):细胞或生物体一套完整单倍体的遗传物质的总称。 14.操纵子(operon):多个功能相关的结构基因成簇串联排列,与上游共同的调控区和下 游转录终止信号组成的基因表达单位。 15.单顺反子(monocistron):一个结构基因转录生成一个mRNA分子。 16.多顺反子(polycistron):原核生物的一个mRNA分子带有几个结构基因的遗传信息,

分子生物学题库

分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序(Motifs) 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉(RNA interference) 15.反义RNA 16.启动子(Promoter) 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域(carboxyl terminal domain,CTD) 19.single nucleotide polymorphism,SNP 20.切口平移(Nick translation) 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体(vector) 38.位点特异性重组 39.原癌基因(oncogene) 40.重叠基因、 41.母源影响基因、

42.抑癌基因(anti-oncogene)、 43.回文序列(palindrome sequence)、 44.熔解温度(melting temperature, Tm) 45.DNA的呼吸作用(DNA respiration) 46..增色效应(hyperchromicity)、 47.C0t曲线(C0t curve)、 48.DNA的C值(C value) 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶(topoisomerase)、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒(telomere) 57.酵母人工染色体(yeast artificial chromosome, YAC)、 58.SSB蛋白(single strand binding protein)、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子(codon)、、 73.同义密码(synonymous codons)、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子(衰减子)(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白(阻遏蛋白)(repressor) 82.诱导物(inducer)、 83.CTD尾(carboxyl-terminal domain ) 84.载体(vector)、 85.转化体(transformant)

(珍贵)浙江大学05-12年博士医学分子生物学真题

2012浙江大学医学分子生物学(乙)回忆版: 一.名词解释(3分*5) 1.The Central Dogma 2.Telomere 3.nuclear localization signal, NLS 4.Protein Motif 5.Splicesome 二.简答题:(5分*9) 1.一个基因有哪些结构组成? 2.基因、染色体、基因组的关系? 3.表观遗传机制改变染色质结果的机制? 4.内含子的生物学意义? 5.什么是蛋白质泛素化?其生物学意义是什么? 6.蛋白质纯化的方法? 7.MicroRNA是什么?它如何发挥作用? 8.什么是全基因组关联研究(Genome Wide Association Studies,GWAS)?其研究目的是什么? 9.分子生物学研究为什么需要模式生物? 三.问答题:(10分*4) 1.人体不同部位的细胞其基因组相同,为什么表达蛋白质的种类和数量不同? 2.用分子生物学知识,谈谈疾病发生机制? 3.有一块肿瘤组织及癌旁组织,设计一个实验证明细胞内蛋白质在肿瘤发生发展中的作用? 4.目前,基因靶点研究已成为新药开发的用药部分,结合目前药物靶点在新药开发中的应用,谈谈你的建议和观点?

2011浙江大学博士入学考试医学分子生物学试题回忆 一、英文名解 1、冈崎片段: 2、反式作用因子: 3、多克隆位点: 4、micro RNA: 5、分子伴侣: 二、简答 1、蛋白质四级结构。 2、真核转录调控点。 3、表观遗传学调控染色质。 4、真核RNA聚合酶类型及作用。 5、基因突变。 6、组学概念及举例。 7、简述兔源多克隆抗体的制备。

分子生物学复习题(有详细答案)

绪论 思考题:(P9) 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义? 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念,即将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?什么是反向生物学?什么是 后基因组时代? 研究内容: DNA的复制、转录和翻译;基因表达调控的研究;DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学:是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能,在体外使基因突变,再导入体内,检测突变的遗传效应,即以表型来探索基因结构。 后基因组时代:研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式,人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件(年代、发明者、简要内容) 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文,提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年,重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术,并完成了第一个细菌基因的克隆,开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的? 随着基因组计划的完成,人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代,人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生,如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题:(P130) 1、基因的概念如何?基因的研究分为几个发展阶段? 概念:基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段:○120世纪50年代以前,主要从细胞的染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后,主要从DNA大分子水平上进行研究,属于分

分子生物学试题

分子生物学试题 一、名词解释 1、基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体:能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA 分子。 17、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。 19、转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 22、 DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构。 23、退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交

(完整版)分子生物学》试题及答案

《分子生物学》考试试题B 课程号:66000360 考试方式:闭卷 考试时间: 一、名词解释(共10题,每题2分,共20分) 1. SD 序列 2. 重叠基因 3.ρ因子 4.hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon): 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题(共20空,每空1分,共20分) 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成,真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子,其中__ 个为氨基酸编码,起始密码子为__ _______;终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______,冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中,独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一

种_______状双链DNA,在基因工程中,它做为_______。 三.判断题(共5题,每题2分,共10分) 1.原核生物DNA的合成是单点起始,真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时,前导链的合成方向为5’→ 3’,后随链的合成方向也是5’→ 3’。() 四、简答题(共6题,每题5分,共30分) 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别? 四、问答题(共2题,共20分) 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。(10分) 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节?分别是怎样进行 的?(10分)

医学分子生物学试题答案

名词解释: 基因是核酸中贮存遗传信息的遗传单位,是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 基因组(gencme):细胞或生物中,一套完整单倍体遗传物质的总和(包括一种生物所需的全套基因及间隔序列)称为基因组。基因组的功能是贮存和表达遗传信息。 SD序列(Shine-Dalgarno sequence,SD sequence) 是mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译所需要的序列。SD序列与16S rRNA的3’末端碱基(AUUCCUCCAC-UAG-5’)互补,以控制转译的起始 分子克隆:克隆(clone):是指单细胞纯系无性繁殖,现代概念是将实验得到的人们所需的微量基因结构,引入适当的宿主细胞中去,在合适的生理环境中进行无性繁殖,从而利用宿主的生理机制繁衍人们所需要的基因结构,并进行表达。由于整个操作在分子水平上进行,所以称为分子克隆(molecular cloning)。 动物克隆(Animal cloning)就是不经过受精过程而获得动物新个体的方法. 基因诊断:就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法,直接检测基因结构 (DNA水平)及其表达水平(RNA水平)是否正常,从而对疾病做出诊断的方法。 基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以纠正或置换致病基因的一种治疗方法,是指有功能的目的基因导入靶细胞后有的可与宿主细胞内的基因发生整合,成为宿主细胞遗传物质的一部分,目的基因的表达产物起到对疾病的治疗作用。 转基因动物就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中,并在细胞基因组中稳定整合,再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来,采用借腹怀孕法寄养在雌性动物(foster mother)的子宫内,使之发育成具有表达目的基因的胚胎动物,并能传给下一代。这样,生育的动物为转基因动物。 探针:在核酸杂交分析过程中,常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 限制性核酸内切酶:限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)是一类专门切割DNA 的酶,它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列并切割dsDNA。 载体:要把一个有用的基因(目的基因-研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。 限制性片段长度多肽性分析(RFLP):DNA片段长度多态性分析(restriction fragment length polymer-phism,RFLP)基因突变导致的基因碱基组成或(和)顺序发生改变,会在基因结构中产生新的限制性内切酶位点或使原有的位点消失. 用限制酶对不同个体基因组进行消化时,其电泳条带的数目和大小就会产生改变,根据这些改变可以判断出突变是否存在。 简答题: 1.蛋白质的生物合成过程中的成分参与,参与因子,作用? mRNA是合成蛋白质的“蓝图(或模板)” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机(操作台) tRNA mRNA是合成蛋白质的蓝图,核糖体是合成蛋白质的工厂,但是,合成蛋白质的原料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此,需要转运RNA把氨基酸搬运到核糖体中的mRNA上 rRNA 核糖体RNA(rRNA)和蛋白质共同组成的复合体就是核糖体,核糖体是蛋白质合成的场所。

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