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异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成2009

ISS N 100727626C N 1123870ΠQ

中国生物化学与分子生物学报

Chinese Journal of Biochemistry and M olecular Biology

2009年6月25(6):580～584

收稿日期:2008211205;接受日期:2009203210国家自然科学基金资助(N o 130670019)

联系人　T el :010*********;E 2mail :liuxq @https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html,

Received :N ovember 5,2008;Accepted :M arch 10,2009

Supported by National Natural Science F oundation of China (N o.30670019)

C orresponding author T el :010*********;E 2mail :liuxq @https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html,

异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成

王　璐1),　尹文兵2),　李书明2),　刘晓晴

1)3

(1)首都师范大学生命科学学院,北京　100048;

马尔堡大学药物生物研究所,马尔堡　35037,德国)

摘要　异戊烯基化吲哚类生物碱广泛存在于麦角菌、青霉菌和曲霉菌中,具有一定的药理学活性,

与未异戊烯基化的前体在生物活性方面具有明显的差异.曲霉菌中的某些异戊烯基化吲哚类生物碱具有抗癌活性,如烟曲霉毒素C (fumitrem orgin C )、tryprostatin B ,但其天然产量低且不易分离,利用化学酶合成法可很容易地将前体转化为异戊烯基化吲哚类生物碱.异戊烯基转移酶FtmPT 1对二甲丙烯基二磷酸(dimethylallyl diphosphate ,DMAPP )具有专一性,但可以接受不同的芳香族底物.早期研究发现,FtmPT 1能接受含色氨酸的不同环二肽为底物,但以cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 为底物时,酶的相对活性很低,其产物量少,无法用于合成产物.本实验通过优化酶反应条件来提高其产量.将已构建的含ftmPT 1的质粒在大肠杆菌中诱导表达,经Ni 2NT A 亲和柱纯化后用于酶反应.实验结果表明,通过增加酶量(终浓度218μm ol ΠL )、延长培养时间(37℃,24h ),以cyclo 2L 2T rp 2

L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 为底物的酶反应产率分别达到4913%和2113%,产物经1H 2NMR 、1H 21

H 2C OSY 和ESI 2MS 鉴定,其结果与预期吻合.据检索,这2个化合物均为新化合物,分别命名为cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2Phe.关键词　异戊烯基转移酶FtmPT 1;异戊烯基化吲哚类生物碱;化学酶合成中图分类号　Q81

Chemoenzymatic Synthesis of Prenylated I ndole Alkaloids

W ANGLu 1),YI N Wen 2Bing 2),LI Shu 2Ming 2),LI U X iao 2Qing

1)3

(1)College o f Life Science ,Capital Normal Univer sity ,Beijing 100048,China ;

Institut f ür Pharmazeutische Biologie ,Univer sity o f Marburg ,Marburg 35037,G ermany )

Abstract Different from the non 2prenylated precurs ors ,prenylated indole alkaloids produced by Claviceps ,Penicillium and Aspergillus strains exert diverse biological and pharmacological activities ,for exam ples ,fumitrem orgin C and tryprostatin B inhibit the growth of a number of tum or cell lines.H owever ,these com pounds are usually produced at low concentrations in the natural hosts ,thus limits their use in research and development.Chem oenzymatic synthesis has recently been applied to s olve this problem.FtmPT 1,a prenyltrans ferase from Aspergillus f umigatus ,has a high specificity to dimethylallyl diphosphate (DMAPP ),and is als o flexible to tryptophan 2containing cyclic dipeptides as the substrates.H owever ,the yields of FtmPT 1react with cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr or cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe was not su fficient for success ful production of prenylated

com pounds in previous studies.In this paper ,by increasing the enzyme dose to 218μ

m ol ΠL and extending the incubation time to 24hours ,the conversion rates of cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr or cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe to their

prenylated derivatives was increased to 4913%and 2113%,respectively.1H 2NMR ,1H 21

H 2C OSY and ESI 2MS analyses con firmed that the products of the enzymatic reactions were cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2T yr and cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2Phe ,as expected.K ey w ords prenyltrans ferase FtmPT 1;prenylated indole alkaloids ;chem oenzymatic synthesis

生物碱一般指存在于生物体内的碱性含氮化合

物,多数具有复杂的含氮杂环,有光学活性和显著的生理效应,广泛存在于植物、真菌、细菌中.异戊烯基化吲哚类生物碱含有芳香环和异戊烯基,主要存在于真菌的麦角菌、青霉菌和曲霉菌中[1,2]

,它与未异

戊烯化的前体在生物活性方面具有明显的差异[3,4]

.异戊烯基化吲哚类生物碱具有广泛的药理学活性,例如,fumitrem orgin C 是乳腺肿瘤抗药蛋白的抑制

剂,fumitrem orgin B 是一种真菌毒素[5]

,其生物合成前体tryprostatin B 是细胞周期的抑制剂,干扰细胞分

裂G 2ΠM 期[6]

,tryprostatin B 和其甲氧基衍生物tryprostatin A

[4,7]还能抑制微管的聚合[8,9]

,这类衍生

物可成为新的先导化合物,用于研发抗有丝分裂及抗癌的药物.这些异戊烯基化吲哚类生物碱在曲霉菌中含量低且不易分离,不利于药理的研究.因此,对真菌代谢途径的基因工程研究是获取具有潜在药用价值药物的一条重要途径,也是提高活性成分含量的有效手段.异戊烯基转移酶是一类催化C5单位转移的蛋白质.目前,烟曲霉中的7个吲哚异戊烯基转移酶基因已被鉴定出来,其中6个异戊烯基转移酶被过量表达,表达的蛋白质具有生物化学功能,可

以将异戊烯基转移到吲哚环不同的位置上[5,10～16]

.例如,在烟曲霉麦角碱fumigaclavine C 生物合成的第1步中,FgaPT 2催化C 24异戊烯基化反应,将L 2色氨

酸转变为42异戊烯基化色氨酸[10,11]

.最后一步中,

FgaPT 1将异戊烯基加到吲哚环的C 22上,使

fumigaclavine A 转变为fumigaclavine C [12]

;72DMATS 催化C 27异戊烯基化反应,将L 2色氨酸转变为72异

戊烯基化色氨酸[13]

;CdpNPT 能在环二肽色氨酸吲哚环的N 21上引入反式异戊烯基[14]

;FtmPT 1可使brevianamide F (cyclo 2L 2T rp 2L 2Pro )吲哚环的C 22位置

异戊烯化,从而合成tryprostatin B [15]

;FtmPT 2将异戊烯基转移到12,132二羟基2fumitrem orgin C 的N1位

生物合成fumitrem orgin B [16]

.这些酶对DMAPP 具有专一性,但可以接受不同的芳香族底物.在早期的研究中,FtmPT 1在接受含色氨酸的不同环二肽为底物时,其特异性有明显不同,如cyclo 2D 2T rp 2L 2Pro 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Leu 的相对活性是其天然底物brevianamide F 的33%和22%,而cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 的相对活性仅为5%和314%

[15]

.最近有研究报道,加入大量的酶和延长培

养时间可使CdpNPT 和FtmPT 1在以L 2T rp 等为底物

时的产物量提高[17]

.因此,本室通过优化酶反应条件对FtmPT 1催化的反应进行再研究,以cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 为底物(1mm ol ΠL ),218μm ol ΠL FtmPT 1,50mm ol ΠL T ris 2HCl (pH 715),5mm ol ΠL MgCl 2和1mm ol ΠL DMAPP (Fig 11),37℃培养24h 后,使其产物转化率达到4913%和2113

Fig.1　The enzym atic synthesis of prenylated indole alk aloids with FtmPT 1,cyclo 2L 2T rp 2L 2Tyr (A)and cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe (B)

1　材料和方法

111　材料

含有ftmPT 1基因的质粒pAG 012,大肠杆菌

X L12Blue ,环二肽(cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr ,cyclo 2L 2T rp 2L 2

Phe )和DMAPP 见前文[15]

;亲和层析填料Ni 2NT A 购

自Qiagen 公司.

185第6期王　璐等:异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成

112　蛋白质的表达、纯化和鉴定

将pAG012重组质粒转化到大肠杆菌X L12Blue

中,挑取单菌落接种于含羧苄青霉素(终浓度50μgΠml)LB培养基中,37℃摇培过夜,次日以2%量接入含同样抗生素浓度的LB培养液中,37℃培养至A600为016～017,加入IPTG(终浓度为011mm olΠL) 30℃诱导表达过夜,离心收集菌体.菌体重悬于裂解缓冲液(50mm olΠL NaH

PO4,300mm olΠL NaCl,10 mm olΠL咪唑,pH810),加溶菌酶(终浓度1mgΠml)冰上放置30min,超声波破碎,将离心结合后的上清液加入Ni2NT A亲和柱中,分别用冲洗液(50mm olΠL NaH2PO4,300mm olΠL NaCl,20mm olΠL咪唑)和洗脱

液(50mm olΠL NaH

PO4,300mm olΠL NaCl,250mm olΠL 咪唑)冲洗杂蛋白和收集目的蛋白,将洗脱液经PD10柱交换缓冲液(100mm olΠL T ris2HCl,pH715, 15%甘油),S DS2PAGE鉴定收集的目的蛋白.

113　FtmPT1的酶活性分析

小量酶反应体系(100μl)包含218μm olΠL FtmPT1,50mm olΠL T ris2HCl,pH715,5mm olΠL MgCl2, 1mm olΠL环二肽和1mm olΠL DMAPP,37℃培养24 h,100μl甲醇终止反应,离心除去变性蛋白质,取上清液进行HP LC分析(Agilent HP LC series1200, LiChrospher RP1825column,125mm×4mm,5μm). HP LC溶剂为甲醇和水1∶1混合液(溶剂A)、甲醇(溶剂B),为了分离酶反应混合物,用10%～50%溶剂B梯度洗脱15min,之后用100%溶剂B冲洗5min,最后用10%溶剂B平衡柱5min(流速1mlΠmin). 114　大量合成酶促反应产物

大量酶反应体系(10ml)包含218μm olΠL FtmPT1,50mm olΠL T ris2HCl,pH715,5mm olΠL MgCl2, 1mm olΠL环二肽和2mm olΠL DMAPP,37℃培养36 h,向混合物中加10ml水,用乙酸乙酯萃取3次(每次20ml),旋转蒸发萃取液,将萃取物溶于200μl甲醇中.之后用HP LC分离并收集酶反应产物(Agilent HP LC series1200,RP182column,10mm×250mm,5μm).在分离cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2T yr酶反应产物时,用与分析时相同的溶剂和方法,只是流速不同,215mlΠmin;分离酶反应产物cyclo2C221′2DMA2L2 T rp2L2Phe时,溶剂相同,用30%～70%溶剂B梯度洗脱12min,用100%溶剂B冲洗8min,最后用30%溶剂B平衡柱5min.

115　酶反应产物结构的鉴定

将分离收集的纯酶反应产物,用旋转蒸发仪蒸干,然后用干燥器或冷冻干燥过夜,大约012～015 mg样品送样,用核磁共振法(1H2NMR,1H21H2C OSY,仪器J E O L EC A2500)鉴定其结构.另外,取纯样品,电喷雾离子化质谱(ESI2MS,仪器Qtrap Applied Biosysytems)鉴定其分子量.

2　结果

211　FtmPT1蛋白的表达和纯化

含有ftmPT1的质粒经转化后,在大肠杆菌X L12 Blue中诱导表达,表达的蛋白质为融合蛋白质His62 FtmPT1,经纯化后通过S DS2PAGE得到单一条带(Fig12),其分子量与His62FtmPT1分子量的计算值

5314kD基本一致.

Fig.2　Analysis of overproduction and purification of H is62 FtmPT1 The proteins were separated on a12%S DS2 PAGE and stained with C oomassie brilliant blue R2250.1, m olecular mass standards;2,s oluble protein before induction; 3,s oluble protein after IPTG induction(011mm olΠL IPTG at 30℃for16hours);4,wash fraction of Ni2NT A agarose;5, Purified His62FtmPT1

212　FtmPT1的酶活性分析

小量酶反应终止后,将反应混合物通过HP LC 反相层析对其进行分析,以环二肽cyclo2L2T rp2L2T yr 为底物的酶反应,在312min和519min出现化合物峰(Fig13A),分别为底物峰和产物峰.以环二肽cyclo2L2T rp2L2Phe为底物的酶反应,在511min出现底物峰,1013min出现产物峰(Fig13B).

213　酶反应产物结构的鉴定

为了鉴定酶反应产物的结构,本室进行大规模制备培养,纯化的产物进行1H2NMR、1H21H2C OSY和ESI2MS分析,核磁共振光谱数据见T able1.对比产物和其底物的核磁共振光谱数据,产物中异戊烯基的信号分别出现在3144～3148(d)(H21′),5133～5136(t)(H22′),1178～1179(s)(H24′)和1179～

285中国生物化学与分子生物学报25卷

Fig.3　HP LC chrom atograms of incub ation mixtures of recombinant FtmPT 1with cyclo 2L 2

T rp 2L 2Tyr (A),and cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe

(B) The reaction mixtures contained Mg

(5mm ol ΠL ),substrate (1mm ol ΠL )and DM APP (1mm ol ΠL )were incubated at 37℃

for 24hours.Detection was carried out using a Photo Diode Array detector T able 1　1

H 2N MR d ata of the enzym atic products of FtmPT 1

cyclo 2C221′2DM A 2L 2T rp 2L 2T yr

cyclo 2C221′2DM A 2L 2T rp 2L 2Phe Proton in C D 3OD in C DCl 3NH 21H 24H 25H 26H 27H 210H 211H 212H 214H 215H 217H 219H 220H 221H 222H 223H 21′H 22′H 24′H 25′

-7152,d ,7137100,td ,810,1107107,td ,810,1107126,d ,7193106,dd ,1519,4143110,dd ,1519,6114118,t ,511-3179,dd ,1013,312-1121,m

2155,dd ,1016,3166131,dd ,815,2136155,d ,815

6155,d ,8156131,dd ,815,2133148,d ,7115136,t ,7101178,s 1179,s

7194,s

7129,dd ,710,1177125,t ,7137117,td ,712,1157156,dd ,617,1183101,dd ,1417,7173127,dd ,1417,3174127,m 5175,s 4105,d ,14105153,s

1194,dd ,1716,13163113,dd ,1217,3127123,t ,6106179,dd ,717,1127115,td ,711,1146179,dd ,717,1127123,t ,6103144,d ,8105133,t ,7191179,s 1182,s

DM A :3′,3′2dimethylallyl ;chemical shifts are given in ppm and coupling constants in H z

1182ppm (s )(H 25′

).相对于底物吲哚环上的2位碳上的氢消失了,说明异戊烯基加在吲哚环上的2位

碳上,这些数据与G rundmann 等[15]

报道的2位碳异

戊烯基化的吲哚类生物碱数据完全吻合,这2个化

385第6期王　璐等:异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成　

合物分别命名为cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2T yr和cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2Phe.ESI2MS鉴定结果如下:对于cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2T yr,[M+H]+是41811,[M+NH4]+是43512,[M+Na]+是44011;对于cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2Phe,[M+H]+是40211, [M+NH4]+是41912,[M+Na]+是42411.这些产物的分子量比底物大68,也证明了异戊烯基的存在.

3　讨论

在前一个研究中,FtmPT1虽能接受含色氨酸的不同环二肽,但对某些化合物的转化率较低,不能有效用于合成化合物,如cyclo2L2T rp2L2T yr、cyclo2L2 T rp2L2Phe相对于brevianamide F的反应活性仅为5%和314%[15],产率分别为015%和0134% (G rundmann and Li,未发表结果).在本实验中通过改变酶反应条件,如增加酶量,延长培养时间,达到了有效合成化合物的目的,如:以cyclo2L2T rp2L2T yr 和cyclo2L2T rp2L2Phe为底物的酶反应产率分别为4913%和2113%,产物量提高较大.

近年来的研究证明,利用芳香族异戊烯基转移酶的化学酶合成法,可获得一系列异戊烯基化的吲哚类生物碱[5,11,17,18],此途径可做为化合物修饰的新策略.与化学合成相比较,化学酶合成是在温和的条件下进行的,因此可以避免不必要的反应和重排.酶反应产物cyclo2C221′2DMA2L2T rp2L2T yr和cyclo2C22 1′2DMA2L2T rp2L2Phe是2个新化合物,其结构与有抗癌作用的tryprostatin A、tryprostatin B、cyclo2 tryprostatin A,B,C,D、fumitrem orgin C相似[5,9],因此,新合成的这两种化合物也可能具有抗癌的潜力.本室将进一步研究其药理作用,并在细胞水平上研究其对微管的影响.

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485中国生物化学与分子生物学报25卷

天然药物化学生物碱

第十章生物碱【习题】（一）选择题 [1-220] A型题[1-58] 1.生物碱不具有的特点是 A.分子中含N原子 B. N原子多在环内 C. 具有碱性 D. 分子中多有苯环 E.显著而特殊的生物活性 2.具有莨菪烷母核的生物碱是 A. 甲基麻黄碱 B. 小檗碱 C. 阿托品 D. 氧化苦参碱 E. 乌头碱 3.属于异喹啉生物碱的是 A. 东莨菪碱 B. 苦参碱 C. 乌头碱 D. 小檗碱 E. 麻黄碱 4.在常温下呈液体的生物碱是 A. 槟榔碱 B. 麻黄碱 C. 苦参碱 D. 乌头碱 E. 莨菪碱 5. 具有挥发性的生物碱是 A. 吗啡碱 B. 小檗碱 C. 苦参碱 D. 麻黄碱 E. 乌头碱 6. 具有升华性的生物碱是 A. 烟碱 B. 咖啡因 C. 小檗胺 D. 益母草碱 E. 氧化苦参碱 7. 生物碱的味多为 A. 咸 B. 辣 C. 苦 D. 甜 E. 酸 8. 具有颜色的生物碱是 A. 小檗碱D. 莨菪碱C. 乌头碱 D. 苦参碱 E. 麻黄碱 9. 无旋光性的生物碱为 A. 伪麻黄碱 B. 小檗碱 C. 烟碱 D. 乌头碱 E. 长春新碱

10. 表示生物碱碱性的方法常用 A. pkb B. Kb C. pH D. pka E. Ka 11. 生物碱碱性最强的是 A. 伯胺生物碱 B. 叔胺生物碱 C. 仲胺生物碱 D. 季铵生物碱 E. 酰胺生物碱 12.水溶性生物碱主要指 A. 伯胺生物碱 B. 仲胺生物碱 C. 叔胺生物碱 D. 两性生物碱 E. 季铵生物碱 13. 溶解脂溶性生物碱的最好溶剂是 A. 乙醚 B. 甲醇 C.乙醇 D. 氯仿 E. 水 14.生物碱沉淀反应呈桔红色的是 A. 碘化汞钾试剂 B. 碘化铋钾试剂 C.饱和苦味酸试剂 D. 硅钨酸试剂 E. 碘-碘化钾试剂 15. 生物碱沉淀试剂反应的介质通常是 A. 酸性水溶液 B. 碱性水溶液 C. 中性水溶液 D. 盐水溶液 E. 醇水溶液 16.水溶性生物碱分离的常用方法是 A. 碘化汞钾沉淀法 B. 硅钨酸沉淀法 C. 雷氏盐沉淀法 D. 苦味酸沉淀法 E. 碘化铋钾沉淀法 17. 用离子交换树脂法分离纯化生物碱时，常选用的离子交换树脂是 A. 强酸型 B. 弱酸型 C. 强碱型 D. 弱碱型 E. 中等程度酸型 18. 从CHCl3中分离酚性生物碱常用的碱液是 A. Na2CO3 B. NaOH C. NH4OH D. NaHCO3 E. Ca(OH)2 19. 碱性较强的生物碱在植物体内的存在形式多为 A. 有机酸盐 B. 络合状态 C. 游离状态 D. 无机酸盐 E. 两性状态 20. 在水溶液中两性生物碱形成沉淀的pH为 A. 1 B. 10 C. 2～3 D. 6～7 E. 8～9 21. 游离生物碱的提取可选用

有机化学试题答案

有机化学答案第一章绪论一、指出下列化合物所含官能团的名称 1.双键 2.卤基 3.羟基 4.氨基 5.羰基 6.醛基 7.羧基 8.硝基 9.醚基 10.氰基二、按照开库勒及古柏尔等所提出的经典有机化合物结构理论，写出下列分子式的各种可能结构式 C O O 1. C C C C H H H H H H H H 2. C C C C H H H H H H H H C C N H H H H H H 3. C C N H H H H H H O C H H O 4.

第二章烷烃一、命名下列化合物 1.2—甲基戊烷 2.3，3—二甲基戊烷 3.3—甲基—3—乙基戊烷 4.2，3，4—三甲基己烷 5.3—甲基—5—乙基辛烷 6.2，2，4，4—四甲基戊烷 7.2—甲基—5—乙基庚烷 8.2，3，5—三甲基—5—乙基庚烷 9.2—甲基—3，3—二乙基己烷 10.3—甲基—4—异丙基庚烷二、写出下列化合物的系统名称 1.丙烷 2.丁烷 3.2—甲基丙烷（异丁烷） 4.2，2—二甲基丙烷 5.2，3—二甲基丁烷 6.3—乙基戊烷三、写出下列化合物的结构式

C CH 3CH 2CH 3 C CH 3CH 3 CH 3CH 3 1. 2.CH CH 3 CH 33 CH 3 CH 3.CH CH 3CH 2CH 3 CH 3 CH 2CH 3 CH C CH 2CH 3 CH 3 4.CH 3CH 2CH 2CH 3 CH 2CH 3 CH C CH 2CH 3CH 3 5.CH 3CH 2CH 2CH 3 CH 3 CH C CH 2CH 3 CH 3 CH 2 CH 3CH 3 CH 3 6.CH 2CH 2CH CH 3CH 7.CH 3CH 2CH 3 CH 3 CH CH CH 2CH 3 CH 3CH 3 CH 3 8.CH 3 CH 2CH CH 3 C

单萜吲哚生物碱的合成综述

目录摘要 (1) Abstract: (2) 1.概述 (3) 2.分类 (3) 2.1 单萜吲哚生物碱 (3) 2.1.1.重排单萜吲哚生物碱 (4) 2.1.2.非重排单萜吲哚生物碱 (5) 2.2双聚单萜吲哚生物碱 (5) 2.3与单萜吲哚碱相关的生物碱 (5) 3.单萜吲哚生物碱的化学合成 (7) 3.1柯南因-的士宁碱类的合成 (7) 3.1.1.士的宁的合成 (8) 3.1.2 最新的柯南因类生物碱的合成方法 (14) 3.2白坚木碱类 (16) 3.3双吲哚类生物碱的合成 (17) 3.3.1.长春碱的合成 (17) 3.3.2.马钱子碱的合成 (20) 3.3.2.1.Mangus，P.小组的合成策略 (20) 3.3.2.2.Overman小组的合成策略 (21) 3.3.2.3.Mori小组的合成策略 (22) 3.3.2.4.Tobru Fukuyama，小组的合成策略 (23) 3.4.灯台碱类 (24) 参考文献 (26)

摘要：生物碱是自然界中种类繁多且拥有生物活性的一类物质，因为其显著的生物活性，近年来有关生物碱的研究异常活跃，这些研究在医学研究与生物化学领域有着重要的地位。在生物碱中，单萜吲哚生物碱因其优异而广泛的生物活性又是其中十分重要的一类。本文综述了吲哚生物碱的分类和生物活性以及一些重要的单萜吲哚生物碱的合成，如柯南因-士的宁碱类、白坚木碱类、灯台碱类与长春碱、马钱子碱等重要双吲哚类生物碱的合成。并介绍了Mangus.P小组、Overman小组、Mori小组与Tobru Fukuyama小组的合成策略。

Abstract:Alkaloid compounds that are numerous in the nature have remarkable biological activities giving rise to the hyperactive studies of alkaloids in recent years. These studies have an important position in the medical research and biological chemistry field .Among the alkaloids,Monoterpenoid Indole Alkaloid is an significant one because of its excellent and extensive biological activity. This paper reviewed the classification and biological activities of indole alkaloids and some important synthesis of Monoterpenoid indole alkaloids,such as Strychnine，Aspidosperma，Echitamine ， vinblastine and Stychnine。Meanwhile,the synthesis strageties of Mangus.P、Overman、Mori and Tobru Fukuyama groups have been introduced.

次生代谢—黄铜的合成通路相关

次生代谢—黄铜的合成通路相关 14应用生物科学，1443204000306，王晓云摘要：黄酮类化合物是是一类植物中分布很广且非常重要的多酚类天然产物，黄酮足一类具有抗炎，抗菌，抗病毒等作用的化合物．本文综述了黄酮类化合物的重要合成方法及其最新发展。从黄酮的分子结构，理化性质等方面入手，研究黄酮合成的通路。同时，也阐述了一些黄酮的其他性质及在生产生活中的作用。关键字：黄酮合成通路苯环Baker—Venkaetaraman法引言：黄酮几乎存在于所有绿色植物中，尤其以芸香科，唇形科，石南科，玄参科，豆科，苦苣苔科，杜鹃科和菊科等高等植物中分布较多。据估计，经植物光合作用所固定的碳2％转变为黄酮类化合物或与其密切相关的其他化合物。[1] 黄酮类化合物泛指两个苯环（Ａ一与Ｂ一环）通过中央三个碳原子相互连结而成的一系列化合物．黄酮类化合物结构中常连有酚羟基、甲氧基、异戊烯基等官能团。由于其具有抗炎，抗菌，抗病毒等作用，长期以来受到很多人的关注。随着取代基及其取代位置的不同，而具有不同的物化性质和药理活性。天然黄酬中，Ｃ－５和Ｃ－７位有羟基或苯环上有３个羟基的黄酮的活性较高。而在非天然的黄酮类化合物中，７位羟基被其他基团取代之后仍具有很好的活性旧。传统的合成方法足采用Baker—Venkaetaraman法重排来合成黄酮类化合物。[2] 随着科技的发展，黄酮合成的方式趋于多样化。本文通过了解黄酮的基本结构等特征，来总结一些黄酮的传统合成方法及新的合成方法。 1.黄酮化合物的基本结构及生物合成途径 1.1.基本结构黄酮（flavonoids）是一类其骨架具有15个碳原子组成的化合物（C6—C3—C6），骨架中含有两个苯环，一个苯环由一个C3部分桥连，C3部分可以是脂肪链，也可以是C6部分形成的六元或五元氧杂环，见图1。[1] 图1 黄酮的基本骨架 1.2.黄酮的生物合成 1.经过多年的研究,科学家们认为黄酮类化合物是由莽草酸途径和多酮化途径生物合成的产物,黄酮的基本骨架是由3个丙二酰辅酶A(malonylCoA)和1个香豆酰辅酶A(coumaroylCoA)生合而产生的。经同位素标记实验证明,3个A丙二酰辅酶A来源于多酮化途径并通过环化作用生成黄酮类化合物骨架A环,而B环则来自于香豆酰辅酶A。其中,香豆酰辅酶A是以苯丙氨酸和酪氨酸(两者均来源于莽草酸途径)为前体合成的;已知参与这一过程的相关酶有苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂

天然药物化学-第9章生物碱-20101026完美修正版资料

第九章生物碱【单项选择题】 1．生物碱不具有的特点是（C ） A. 分子中含N 原子 B. 具有碱性 C. 分子中多有苯环 D. 显著而特殊的生物活性 E . N 原子多在环内 2. 生物碱碱性最强的是（ D ） A. 伯胺生物碱 B. 叔胺生物碱 C. 仲胺生物碱 D. 季铵生物碱 E . 酰胺生物碱 3. 生物碱酸水提取液处理常用的方法是（B ） A. 阴离子交换树脂 B. 阳离子交换树脂 C.硅胶柱色谱吸附 D. 大孔树脂吸附 E . 氧化铝柱色谱吸附 4.碱性不同生物碱混合物的分离可选用（ C ） A. 简单萃取法 B. 酸提取碱沉淀法 C. pH 梯度萃取法 D. 有机溶剂回流法 E . 分馏法 5. 生物碱沉淀反应的条件是（ A ） A . 酸性水溶液 B . 碱性水溶液 C . 中性水溶液 D . 盐水溶液 E . 醇水溶液 6. 下列生物碱碱性最强的是（ A ） A. 莨菪碱 B. 东莨菪碱 C. 山莨菪碱 D. N-去甲基莨菪碱 E. 樟柳碱 7．溶解游离亲脂性生物碱的最好溶剂为（D ） A. 水 B. 甲醇 C. 正丁醇 D. 氯仿 E. 苯 8．游离麻黄碱所具有的性质是（ B ） A. 黄色 B. 挥发性 C. 与雷氏铵盐沉淀 D. 发泡性 E. 溶血性 9．从苦参总碱中分离苦参碱和氧化苦参碱是利用二者（ E ） A . 在水中溶解度不同 B . 在乙醇中溶解度不同 C . 在氯仿中溶解度不同 D . 在苯中溶解度不同 E . 在乙醚中溶解度不同 10. 可分离季铵碱的生物碱沉淀试剂是（ D ） A . 碘化汞钾 B . 碘化铋钾 C . 硅钨酸 D . 雷氏铵盐 E . N N O 苦参碱氧化苦参碱

异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成2009

ISS N 100727626C N 1123870ΠQ 中国生物化学与分子生物学报 Chinese Journal of Biochemistry and M olecular Biology 2009年6月25(6):580～584 收稿日期:2008211205;接受日期:2009203210国家自然科学基金资助(N o 130670019) 3 联系人　T el :010*********;E 2mail :liuxq @https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html, Received :N ovember 5,2008;Accepted :M arch 10,2009 Supported by National Natural Science F oundation of China (N o.30670019) 3 C orresponding author T el :010*********;E 2mail :liuxq @https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html, 异戊烯基化吲哚类生物碱的化学酶合成王　璐1),　尹文兵2),　李书明2),　刘晓晴 1)3 (1)首都师范大学生命科学学院,北京　100048; 2) 马尔堡大学药物生物研究所,马尔堡　35037,德国) 摘要　异戊烯基化吲哚类生物碱广泛存在于麦角菌、青霉菌和曲霉菌中,具有一定的药理学活性, 与未异戊烯基化的前体在生物活性方面具有明显的差异.曲霉菌中的某些异戊烯基化吲哚类生物碱具有抗癌活性,如烟曲霉毒素C (fumitrem orgin C )、tryprostatin B ,但其天然产量低且不易分离,利用化学酶合成法可很容易地将前体转化为异戊烯基化吲哚类生物碱.异戊烯基转移酶FtmPT 1对二甲丙烯基二磷酸(dimethylallyl diphosphate ,DMAPP )具有专一性,但可以接受不同的芳香族底物.早期研究发现,FtmPT 1能接受含色氨酸的不同环二肽为底物,但以cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 为底物时,酶的相对活性很低,其产物量少,无法用于合成产物.本实验通过优化酶反应条件来提高其产量.将已构建的含ftmPT 1的质粒在大肠杆菌中诱导表达,经Ni 2NT A 亲和柱纯化后用于酶反应.实验结果表明,通过增加酶量(终浓度218μm ol ΠL )、延长培养时间(37℃,24h ),以cyclo 2L 2T rp 2 L 2T yr 和cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe 为底物的酶反应产率分别达到4913%和2113%,产物经1H 2NMR 、1H 21 H 2C OSY 和ESI 2MS 鉴定,其结果与预期吻合.据检索,这2个化合物均为新化合物,分别命名为cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2T yr 和cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2Phe.关键词　异戊烯基转移酶FtmPT 1;异戊烯基化吲哚类生物碱;化学酶合成中图分类号　Q81 Chemoenzymatic Synthesis of Prenylated I ndole Alkaloids W ANGLu 1),YI N Wen 2Bing 2),LI Shu 2Ming 2),LI U X iao 2Qing 1)3 (1)College o f Life Science ,Capital Normal Univer sity ,Beijing 100048,China ; 2) Institut f ür Pharmazeutische Biologie ,Univer sity o f Marburg ,Marburg 35037,G ermany ) Abstract Different from the non 2prenylated precurs ors ,prenylated indole alkaloids produced by Claviceps ,Penicillium and Aspergillus strains exert diverse biological and pharmacological activities ,for exam ples ,fumitrem orgin C and tryprostatin B inhibit the growth of a number of tum or cell lines.H owever ,these com pounds are usually produced at low concentrations in the natural hosts ,thus limits their use in research and development.Chem oenzymatic synthesis has recently been applied to s olve this problem.FtmPT 1,a prenyltrans ferase from Aspergillus f umigatus ,has a high specificity to dimethylallyl diphosphate (DMAPP ),and is als o flexible to tryptophan 2containing cyclic dipeptides as the substrates.H owever ,the yields of FtmPT 1react with cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr or cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe was not su fficient for success ful production of prenylated com pounds in previous studies.In this paper ,by increasing the enzyme dose to 218μ m ol ΠL and extending the incubation time to 24hours ,the conversion rates of cyclo 2L 2T rp 2L 2T yr or cyclo 2L 2T rp 2L 2Phe to their prenylated derivatives was increased to 4913%and 2113%,respectively.1H 2NMR ,1H 21 H 2C OSY and ESI 2MS analyses con firmed that the products of the enzymatic reactions were cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2T yr and cyclo 2C221′2DMA 2L 2T rp 2L 2Phe ,as expected.K ey w ords prenyltrans ferase FtmPT 1;prenylated indole alkaloids ;chem oenzymatic synthesis

吲哚的合成-060117

经典化学合成反应标准操作吲哚的合成

目录 2. Fischer 吲哚合成 (2) 2.1 Fischer 吲哚合成反应示例 (2) 3. 从硝基苯的衍生物出发合成吲哚 (3) 3.1 邻甲基硝基苯衍生物合成吲哚 (4) 3.1.1 邻甲基硝基苯衍生物合成吲哚示例 (4) 3.2 邻甲酰基硝基苯衍生物合成吲哚 (4) 3.1.2 邻甲酰基硝基苯衍生物合成吲哚示例 (5) 3.3 邻氰甲酰基硝基苯衍生物合成吲哚示例 (5) 3.4 邻乙烯基硝基苯衍生物合成吲哚示例 (6) 3.5 邻位有氢的硝基苯衍生物直接用乙烯格氏试剂合成吲哚（Bartoli反应）示例7 4. 从苯胺的衍生物出发合成吲哚 (7) 4.1苯胺经佛克烷基化再还原关环合成吲哚 (7) 4.2 N-羟基苯胺DMAP催化下与丙炔酸酯缩合合成3-羧酸吲哚衍生物 (9) 4.3 Nenitzescu吲哚合成 (9) 5. 2-叠氮基-3-芳基丙烯酸酯环合合成2-羧酸吲哚衍生物 (10) 5.1 2-叠氮基-3-芳基丙烯酸酯环合合成2-羧酸吲哚衍生物示例 (11)

1. Introduction 吲哚及其衍生物是一类非常有效的药物中间体。已有不少相关综述报道其合成方法 1 。我们将一些常用的合成方法简单的列举了出来，供大家在合成此类化合物的时候参考。 1 (a) G. W. Gribble, Contemp. Org. Synth., 1994, 145. (b) U. Pindur and R. Adam, J. Heterocycl. Chem., 1988, 25, 1. (c) C. J. Moody, Synlett , 1994, 681. (d) R. J. Sundberg, Indoles , Academic Press, San Diego, CA, 1996. (e) T. L. Gilchrist , J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1999, 2849. (f) G. W. Gribble, J. Chem. Soc ., Perkin Trans. 1, 2000, 1045. 2. Fischer 吲哚合成 Fischer 吲哚合成法是一个常见的吲哚合成方法。通过苯腙在酸催化下加热重排消除一分子氨得到2－取代或3－取代吲哚衍生物。在实际操作中，常可以用醛或酮与等当量的苯肼在酸中加热回流得到苯腙，其在酸催化下立即进行重排、消除氨而得到吲哚化合物。常用的催化剂有氯化锌、三氟化硼、多聚磷酸等，常用的酸有AcOH ， HCl, 三氟乙酸等。其机理大致如下： N H N R'R H + H 2H R N +R' NH 2H H N H R R' 2.1 Fischer 吲哚合成反应示例 Br NHNH 2.HCl + O N H Br 1 23 4-Bromophenylhydrazine hydrochloride 1 (21 g) was suspended in 150 mL of acetic acid, and the mixture was heated to reflux. Then a solution of cyclohexanone 2 (9.3 mL) in 10 mL of

植物次生物的代谢途径

２００６年第４ｌ卷第３期生物学通报１９植物次生物的代谢途径季志平苏印泉张存莉（西北农林科技大学林学院陕西杨陵７１２１００）摘要系统地介绍了关于植物次生物代谢途径方面的研究成果．归纳了植物次生物的３个主要代射途径：酚类代谢途径、萜类代谢途径、生物碱代谢途径，并对其代谢机理进行了探讨。关键词次生代谢物代谢途径机理植物次生代谢产物是植物体利用某些初生代谢产物，在一系列酶的催化作用下，形成的一些特殊化学物质。这些化学物质是细胞生命活动或植物正常生长发育非必需的小分子有机化合物．其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。次生代谢产物是植物对环境适应的结果。次生代谢物为人类提供了丰富的药物、香料和工业原料．对人类的生产和生活具有重要的作用。植物次生代谢物种类繁多，结构迥异，一般分为酚类、萜类、含氮有机物三大类，每一类已知化合物都有数千种甚至数万种以上，如黄酮类、酚类、香豆素、木脂素、生物碱、萜类、甾类、皂苷和多炔类等。这些次生代谢产物在植物体内主要通过苯丙烷代谢途径、异戊二烯代谢途径、生物碱合成途径形成。莽草酸途径主要能提供合成一些次生代谢物的前体。１酚类合成途径酚类主要包括黄酮类、简单酚类和醌类等。黄酮类化合物系色原烷（ｃｈｒｏｍａｎｅ）或色原酮（ｃｈｍｍａｎｅ）的２一或３一苯基衍生物，泛指由两个芳香环（Ａ和Ｂ）通过中央三碳链相互连接而成一系列化合物．可以分为１４种主要类型．酚类化合物主要是通过苯丙基类生物合成途径合成的（图１）。植物次生代谢物的合成途径通常是以不同类别的次生代谢物合成途径为单位即代谢频道（ｍｅｔａｂｏｌｉｃｃｈａｎｎｅｌ）的形成存在。不同代谢频道分布在植物不同的器官、组织、细胞或细胞内不同的细胞器即分隔（ｃｏｍ．ｐａｒｔｒｎｅｎｔ）内，不同代谢频道ＱＴＬ（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｉ）可能分布在不同的染色体上．次生代谢物生物合成“代谢频道”的存在，有效地隔绝了次生代谢物合成过程中间产物在细胞内扩散，有利于底物与酶的有效结合和酶促反应的顺利进行，减少次生代谢途径中不同支路之间争夺底物的现象及有毒中间产物对细胞的伤害，并使细胞内多种类型次生代谢物的合成途径得以同时存在。苯丙烷中央代谢途径、类黄酮和异黄酮合成支路均有代谢频道存在。例如，拟南芥细胞中的查尔酮合成酶（ＣＨＳ）、查尔酮异构酶（ＣＨＩ）、黄烷酮一３一氢氧化酮酶（Ｆ３Ｈ）和二氢黄酮醇还原酶（ＤＦＲ）酶之间相互联系，在这些多酶复合体中，Ｆ３Ｈ、肉桂酸一４一羟基化酶（Ｃ４Ｈ）、阿魏酰一５一羟基化酶等细胞色素Ｐ４５０酶多充当细胞膜“锚”的作用，将相关的酶组装固定在内质网膜上这些酶组成代谢频道。苯丙氨酸裂解酶（ＰＡＬ）肉桂酸一４一羟基化酶（Ｃ４Ｈ）、４一香豆酰一ＣｏＡ一连接酶（４ＣＬ）是苯丙烷类代谢途径中的关键酶．也是合成途径中的限速酶，它们在植物苯丙烷次生代谢物合成途径中位于代谢支路的分叉口或位于次生代谢物合成途径的下游，负责合成酚类次生代谢物一般合成前体。查尔酮合成酶（ＣＨＳ）是将苯丙烷类代谢途径引向黄酮类合成的第１个酶，该酶基因的表达也会受到病原菌的诱导。总之，硒的生物活性及其与疾病相关性的研究正６ｓｔａｐｌｅｔｏｎｓ．Ｒ．，ＧａｄｏｃｋＧ．Ｌ．，ＦｏｅｌＩｍｉＡ．Ｌ．ｅｔ一．ｓｅｌｅｎｉｕｍ：ｐ一在逐步揭示这一元素对生命健康独特而重要的作用。０ｌｅｎｔｓｔｉｍｕｌａ豳ｏｆｔｙｍｓｙｌｐｈ。ｓｐｈ。ｒｙｌａｔｉｏｎａｎ４”ｔｉＶａｔｏｒｏｆＭＡＰｋｉ～主要参考文献。篇篇烹篙三笔：絮：：１｝：１盂譬２：：：岫。。，。。叩。。。ｉ。１Ｍａ。ｇａＩ℃ｔＰ．Ｒａｙｍａｎ．Ｔｈｅｉｍｐｏｒ【ａｎｃｅｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍｔｏｈｕｆｒＩａｎｈｅａｌｔｈ（ｒｅ— ＰＨＧＰｘｄｕｒｉｎ＃ｓｐｅｒｍｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９９，２８５（５４３２）：ｌ３９３——６．Ｖｉｅｗ）．１１１ｅＬａｎｃｅｔ．２０００，３５６：２３３—４１．８ＯｌｓｏｎＧ．Ｅ．．Ｗｉｆｌｆｒｅｖｖ．Ｐ．，Ｎａ殂ａｓＳ．Ｋ．ｅ￡甜．Ｓｅｌｅｎｏｐｍｔｅｉｎｐｉｓ２徐辉碧．硒的化学．生物化学及其在生命科学中的应用．湖北：华ｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｍｏｕｓｅｓｐｅｍｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＢｉｏｌＲｅｐｍｄ．２００５，７３（１）：中理工大学出版社，１９９４：１０４—９４．２０１一１１．３ＢｅｒｒｙＭ．Ｊ．，ＢａｎｕＬ．，Ｉ五ｒｓｅｎＰ．Ｒ．．ＴｙｐｅＩｉｏｄｏｔｈｙｒｏｎｉｎｅｄｅｉｏｄｉｎａｓｅｉ８９ＳｈｉｓｌｅｒＪ．Ｌ，，ＳｅｎｋｅｖｉｃｈＴ．Ｇ．，ＢｅｒｒｖＭ．Ｆ．ｅｆａｊ．Ｕ１ｔｒａｖｉ０１ｅｔ—ｉｎｄｕ—ａｓｅＩｅｎｏｃｙｓｔｅｉｎｅ—ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｅｎ２ｙｍｅ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９１，３４９：４３８——４０．ｃｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈｂｌｏｃｋｅｄｂｖａ８ｅｌｅｎｏＤｒｏｔｅｉｎｆｂｍａｈｕｍａＪｌｄｅＨｎａｔｏｔ一４Ｒ０ｄｅｒｉｃｋＣ．Ｍ．，ＴｅｒｅｓａＳ．Ｆ．，Ｇｅ础ｂｙＪ．Ｂ．．Ｓｅｌｅｎｉｕｍ：ａｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｍｐｉｃｐｏｘｖｉｎｌｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９８，２７９：１０２—５．ｅｌｅｍｅｎｔｆｏｒｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎ．ＩⅡ１ＩＩｌｕｎｏｌｏｇｙＴｏｄａｙ．１９９８，１９（８）：３４２—５．１０ＢｅｃｋＭ．Ａ．，ＨａｎｄｖＪ．，ｋｖａｎｄｅｒ０．Ａ．．Ｈｏｓｔｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｓｔａｔｕｓ：ｔｈｅ５ＨｅｉＹ．Ｊ．，ＦａｒａｈｂａｋｈｓｈｉａｎＳ．，ＣｈｅｎＸ．“ｏ．ＳｔｉｍｕｌａｔｊｏｎｏｆＭＡＰｋｉ— ｎｅ—ｅｃｔｅｄｖｉｍｌｅｎｃｅｆａｃｔｏｒ．ＴｒｅｎｄｓＭｉｃｒｏｂｉ０１．２００４，１２（９）：４１７—２３．ｎａｓｅｂｙｖａｎａｄｉｕｍａｎｄｓｅｌｅｎｉｕｍｉｎｒａｔａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ．Ｍ０１．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｒＲＨ、１９９８，１７８（１—２）：３６７—７５．女国家十五专题．２００ｌＢＡ５０２８０４０３　万方数据

磺酰氯合成法

目录 1. 前言 3 2. 芳香磺酰氯的制备 3 2. 1直接氯磺化法制备芳香磺酰氯 (3) 2. 2芳香磺酸或盐氯化制备芳香磺酰氯 (4) 2. 3芳香硫醇及相关衍生物氯代、氧化合成芳香磺酰氯错误！未定义书签。 2. 4. 芳香硫醇的制备··········错误！未定义书签。 2. 5 Sandermeyer 反应由芳胺合成芳香磺酰氯错误！未定义书签。 3.脂肪磺酰氯的制备 3. 1 烷基硫醇的合成及通过烷基硫醇合成脂肪磺酰氯错误！未定义书签。 3. 2 通过烷基硫脲合成脂肪磺酰氯·····错误！未定义书签。 3. 3 通过烷基异硫氰酸酯合成芳香磺酰氯··错误！未定义书签。 3. 4 通过羧酸硫醇酯合成芳香磺酰氯····错误！未定义书签。 3. 5 脂肪磺酰氯合成反应示例·······错误！未定义书签。参考文献：错误！未定义书签。

1. 前言磺酰氯是有机化学中非常重要的一类化合物，它们可以作为重要的中间体进行修饰。比如，同胺类化合物作用生成的磺胺类药物是优良的化学治疗剂，开始应用于20世纪30年代。它们能抑制多种细菌，如链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌、痢疾杆菌等的生长和繁殖，因此常用以治疗由上述细菌所引起的疾病。高碳烷基磺酸钠类化合物则是优良的合成洗涤剂。磺酰氯主要分为脂肪族磺酰氯和芳香族磺酰氯。芳香磺酰氯的来源有以下几类：1）由硫酚，各种硫醚在酸性溶剂中导入氯气制得；2)芳香磺酸类化合物在氯化试剂作用下形成；3）磺化反应。脂肪族磺酰氯的来源主要是硫醇或相关衍生物氯代或氧化。因此，作为磺酰氯的重要前体，磺酸和硫醇类化合物的引入，也是合成磺酰氯基团的重要手段。 2. 芳香磺酰氯的制备芳香磺酰氯的制备一般分为以下几种方法，直接用氯磺化法制备芳香磺酰氯。芳香磺酸或盐经氯化制备芳香磺酰氯。芳香硫醇及相关衍生物氯化，氧化合成芳香磺酰氯。Sandermeyer反应由芳胺合成芳香磺酰氯。 2. 1直接氯磺化法制备芳香磺酰氯氯磺酸是一类比较常用的直接氯磺化试剂，氯磺酸的活性比浓硫酸大，反应温度较低，同时可以直接得磺酰氯。氯磺化也是亲电反应，选择性也遵循芳环取代基定位效应及其规则。有规律可循。如果希望反应比较缓和，可以用氯仿或其它卤代烷烃作为稀释剂。反应温度一般都控制在0至20℃。如果芳环上存在至钝基团，像羧基等，直接氯磺化的温度要提的比较高，要达到100多度。1 当体系因为位阻，取代基定位效应劣势等等不能直接完成氯磺化时，就可以选择分两步走，先引入磺酸基团。再转变为磺酰氯。 2. 1. 1芳香环磺化反应示例： In a three necked 500 mL round flask equipped with mechanical stirring, was placed H (290 g, 2.49 mol). The system was cooled to 12－15℃ using ice water. with ClSO 3 N-Phenyl-acetamide (67.5 g, 0.5 mol) was added dropwise. The temperature was maintained at 15 o C. After addition, the reaction mixture was heated at 60o C for two hours. The reaction was cooled down to room temperature and poured slowly into 1000 mL of water under finely stirring. The precipitate was collected by filtration,

大学有机化学试题答案

简单题目 1．用括号的试剂和方法除去下列各物质的少量杂质，不正确的是（） A、苯中含有苯酚（浓溴水，过滤） B、乙酸钠中含有碳酸钠（乙酸、蒸发） C、乙酸乙酯中含有乙酸（饱和碳酸钠溶液、分液） D、溴乙烷中含有醇（水、分液） 2．下列物质不能使酸性KMnO4溶液褪色的是（） A、B、C2H2C、CH3 D、CH3COOH 3．(CH3CH2)2CHCH3的正确命名是( ) A、3－甲基戊烷 B、2－甲基戊烷 C、2－乙基丁烷 D、3－乙基丁烷 4．手性分子是指在分子结构中，当a、b、x、y为彼此互不相同的原子或原子团时，称此分子为手性分子，中心碳原子为手性碳原子。下列分子中指定的碳原子（用＊标记）不属于手性碳原子的是（） A、苹果酸 B、丙氨酸C H3CH COOH NH2 C、葡萄糖 D、甘油醛CH CH2 CHO OH OH 5．某烷烃发生氯代反应后，只能生成三种沸点不同的一氯代烃，此烷烃是（） A、(CH3)2CHCH2CH2CH3 B、(CH3CH2)2CHCH3 C、(CH3)2CHCH(CH3)2 D、(CH3)3CCH2CH3 6．有—CH3，— OH，—COOH，—C6H5四种基团，两两结合而成的有机化合物中，水溶液具有酸性的有（） A、3种 B、4种 C、5种 D、6种 7．下列说法错误的是（） A、C2H6和C4H10一定是同系物 B、C2H4和C4H8一定都能使溴水退色

C 、C 3H 6不只表示一种物质 D 、单烯烃各同系物中碳的质量分数相同 8．常见有机反应类型有：①取代反应 ②加成反应 ③消去反应 ④酯化反应 ⑤加聚反应 ⑥缩聚反应 ⑦氧化反应 ⑧还原反应，其中可能在有机分子中新产生羟基的反应类型是（） A 、①②③④ B、⑤⑥⑦⑧ C、①②⑦⑧ D、③④⑤⑥ 9．乙醛和新制的Cu （OH ） 2 反应的实验中，关键的操作是（） A 、Cu （OH ）2要过量 B 、NaOH 溶液要过量 C 、CuSO 4要过量 D 、使溶液pH 值小于7 10．PHB 塑料是一种可在微生物作用下降解的环保型塑料，其结构简式为： n O CH C 2H 5C O 。下面有关PHB 说法不正确的是（） A 、PH B 是一种聚酯 B 、PHB 的单体是CH 3CH 2CH(OH)COOH C 、PHB 的降解产物可能有CO 2和H 2O D 、PHB 通过加聚反应制得 11. 能与银氨溶液发生银镜反应，且其水解产物也能发生银镜反应的糖类是（） A 、葡萄糖 B 、麦芽糖 C 、蔗糖 D 、淀粉 12． “茶倍健”牙膏中含有茶多酚，但茶多酚是目前尚不能人工合成的纯天然、多功能、高效能的抗氧化剂和自由基净化剂。其中没食子儿茶素（EGC ）的结构如下图所示。关于EGC 的下列叙述中正确的是（） A 、分子中所有的原子共面 B 、1molEG C 与4molNaOH 恰好完全反应 C 、易发生加成反应，难发生氧化反应和取代反应 D 、遇FeCl 3溶液发生显色反应 13．化合物丙可由如下反应得到：丙的结构简式不可能是（） A 、CH 3CH （CH 2Br ）2 B 、（CH 3）2C Br CH 2 Br O —OH OH OH OH

不同植物MEP途径中HDS基因及其功能的比较

Botanical Research 植物学研究, 2020, 9(4), 387-391 Published Online July 2020 in Hans. https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html,/journal/br https://https://www.wendangku.net/doc/1e11651483.html,/10.12677/br.2020.94048 Comparison of HDS Genes and Functions in MEP Pathway among Different Plants Shinan Liu, Mingcong Chen, Ruofei Lv, Jie Na* School of Life Sciences, Liaoning Normal University, Dalian Liaoning Received: Jul. 1st, 2020; accepted: Jul. 17th, 2020; published: Jul. 24th, 2020 Abstract HDS belongs to GcpE protein family, with 4Fe-4S activation center. HDS is the key enzyme of ter-penoid substances precursor IPP synthesis, monoterpene and double terpenoids aromatic sub-stances, carotenoids, VE and important material such as chlorophyll synthesis of key control site. The MEP pathways that regulate the catalysis of synthesis of TIAs for pollinating plants against predators, metabolic regulation plays an important role in such aspects, the HDS for cloning genes and carries on the correlation analysis to study the effect of the synthesis of TIAs has great signi-ficance. In this paper, HDS genes in MEP pathway were compared among different plants from gene cloning, gene function and gene expression characteristics mainly to try to understand the role of HDS gene playing in MEP pathway. Keywords HDS Gene, MEP Pathway, Biosynthesis of Terpenoid Substances 不同植物MEP途径中HDS基因及其功能的比较刘诗楠，陈明聪，吕若飞，那杰* 辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连收稿日期：2020年7月1日；录用日期：2020年7月17日；发布日期：2020年7月24日摘要 HDS属于GcpE蛋白家族，具4Fe-4S活化中心。植物HDS既是萜类物质前体IPP合成的关键酶，也是单萜*通讯作者。

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简单题目 1．用括号内的试剂和方法除去下列各物质的少量杂质，不正确的是 A、苯中含有苯酚（浓溴水，过滤） B、乙酸钠中含有碳酸钠（乙酸、蒸发） C、乙酸乙酯中含有乙酸（饱和碳酸钠溶液、分液） D、溴乙烷中含有醇（水、分液） 2．下列物质不能使酸性KMnO4溶液褪色的是 A、B、C2H2C、CH3 D、CH3COOH 3．(CH3CH2)2CHCH3的正确命名是 A、3－甲基戊烷 B、2－甲基戊烷 C、2－乙基丁烷 D、3－乙基丁烷 4．手性分子是指在分子结构中，当a、b、x、y为彼此互不相同的原子或原子团时，称此分子为手性分子，中心碳原子为手性碳原子。下列分子中指定的碳原子（用＊标记）不属于手性碳原子的是 A、苹果酸 B、丙氨酸C H3CH COOH NH2 C、葡萄糖D CH CH2 CHO OH OH 5．某烷烃发生氯代反应后，只能生成三种沸点不同的一氯代烃，此烷烃是 A、(CH3)2CHCH2CH2CH3 B、(CH3CH2)2CHCH3 C、(CH3)2CHCH(CH3)2 D、(CH3)3CCH2CH3 6．有—CH3，— OH，—COOH，—C6H5四种基团，两两结合而成的有机化合物中，水溶液具有酸性的有（） A、3种 B、4种 C、5种 D、6种 7．下列说法错误的是（） A、C2H6和C4H10一定是同系物 B、C2H4和C4H8一定都能使溴水退色 C、C3H6不只表示一种物质 D、单烯烃各同系物中碳的质量分数相同 8．常见有机反应类型有：①取代反应②加成反应③消去反应④酯化反应⑤加聚反

应 ⑥缩聚反应 ⑦氧化反应 ⑧还原反应，其中可能在有机分子中新产生羟基的反应类型是（） A 、①②③④ B 、⑤⑥⑦⑧ C 、①②⑦⑧ D 、③④⑤⑥ 9．乙醛和新制的Cu （OH ）2反应的实验中，关键的操作是（） A 、Cu （OH ）2要过量 B 、NaOH 溶液要过量 C 、CuSO 4要过量 D 、使溶液pH 值小于7 10．PHB 塑料是一种可在微生物作用下降解的环保型塑料，其结构简式为： n O CH C 2H 5C O 。下面有关PHB 说法不正确的是（） A 、PH B 是一种聚酯 B 、PHB 的单体是CH 3CH 2CH(OH)COOH C 、PHB 的降解产物可能有CO 2和H 2O D 、PHB 通过加聚反应制得 11. 能与银氨溶液发生银镜反应，且其水解产物也能发生银镜反应的糖类是（） A 、葡萄糖 B 、麦芽糖 C 、蔗糖 D 、淀粉 12． “茶倍健”牙膏中含有茶多酚，但茶多酚是目前尚不能人工合成的纯天然、多功能、高效能的抗氧化剂和自由基净化剂。其中没食子儿茶素（EGC ）的结构如下图所示。关于EGC 的下列叙述中正确的是（） A 、分子中所有的原子共面 B 、1molEG C 与4molNaOH 恰好完全反应 C 、易发生加成反应，难发生氧化反应和取代反应 D 、遇FeCl 3溶液发生显色反应 13．化合物丙可由如下反应得到：丙的结构简式不可能是（） A 、CH 3CH （CH 2Br ）2 B 、（CH 3）2C Br CH 2 Br C 、C 2H 5CH Br CH 2 Br D 、CH 3（CH Br ）2CH 3 14．某有机物甲经氧化后得乙（分子式为C 2H 3O 2Cl ）；而甲经水解可得丙，1mol 丙和2mol 乙反应的一种含氯的酯（C 6H 8O 4Cl 2）。由此推断甲的结构简式为（） O —OH OH OH OH

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