亚硝酸盐氮的测定(N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法)

亚硝酸盐氮得测定(N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法): 亚硝酸盐就是氮循环得中间产物,不稳定,根据水环境条件,可被氧化成硝酸盐,也可被还原成氨。亚硝酸盐可使人体正常得血红蛋白(地铁血红蛋白)氧化成为高铁血红蛋白,发生高铁血红蛋白症,失去血红蛋白在体内输送氧得能力,出现组织缺氧得症状。亚硝酸盐可与仲胺类反应生成具致癌性得亚硝胺类物质,在PH 值较低得酸性条件下,有利于亚硝胺类得形成。

水中亚硝酸盐得测定方法通常采用重氮-偶联反应,使生成红紫色染料。方法灵敏、选择性强。所用重氮与偶联试剂种类较多,最常用,前者为对氨基苯磺酰胺与对氨基苯磺酸,后者为N-(1-萘基)-乙二胺与a-萘胺。此外,还有目前国内外普遍使用得离子色谱法与新开发得气相分子吸收法。这两种方法虽然须使用专用仪器,但方法简便、快速,干扰较少。

亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定,在采集后应尽快进行分析,必要时冷藏以抑制微生物得影响。

1、实验原理

在磷酸介质中,pH1、8±0、3时,亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应,生成重氮盐,再与N-(1-萘基)-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。

2、干扰及消除

氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠与高铁离子有明显干扰。水样呈碱性(PH>11)时,可加酚酞溶液为指示剂,滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物,可加氢氧化铝悬浮液并过滤。

3、方法得适用范围

本方法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水、与工业废水中亚硝酸盐得测定。最低检出浓度为0、003mg/L;测定上限为0、20mg/L亚硝酸盐氮、

4、仪器

分光光度计

5、试剂

实验用水均为不含亚硝酸盐得水

1)无亚硝酸盐得水:于蒸馏水中加入少许高锰酸钾晶体,使呈红色,再加氢氧化钡(或氢氧化钙)使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏,弃去50ml初馏液,收集中间约70%不含锰得馏出液。亦可于每升蒸馏水中加1ml浓硫酸与0、2ml硫酸

锰溶液(每100ml水中含36、4gMnSO

4、H

2

O),JIARU 1~3ml0、04%高锰酸钾溶液至

呈红色,重蒸馏。

2)磷酸密度=1.70g/ml。

3)显色剂:于500ml烧杯中,加入250ml水与50ml磷酸,加入20、0对-氨基苯磺酰胺,再将1、00gN-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中,转移至

500ml容量瓶中,用水稀释至标线,混匀。

此溶液贮于棕色瓶中,保存在2~5度,至少可稳定一个月。

注意:本试剂有毒性,避免与皮肤接触或摄入体内。

4)贮备液:称取 1.232g 亚硝酸钠(Na2NO2),溶于 150ml 水中,转移至1000ml 容量瓶中,用水稀释至标线。每毫升含约 0、25mg 亚硝酸盐氮。此溶液贮于棕色瓶中,加入 1ml 三氯甲烷,保存在 2-5℃,至少稳定一个月。贮备液得标定如下: 在 300ml 具塞锥形瓶中,移入 50、00ml 0、050mol/L 高锰酸钾溶液,5ml 浓硫酸,用 50ml 无分度吸管,使下端插入高锰酸钾溶液液面下,加入50、00ml 亚硝酸钠标准贮备液,轻轻摇匀,置于水浴水加热至 70-80℃,按每次10、00ml 得量加入足够得草酸钠标准溶液,使红色褪去并过量,记录草酸钠标准溶液用量(V2 )。然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸钠至溶液呈微红色,记录高锰酸钾标准溶液总用量 (V1)。再以 50ml 水代替亚硝酸盐氮标准贮备液,如上操作,用草酸钠标准溶液标定高锰酸钾溶液得浓度(c1)。按下式计算高锰酸钾标准溶液浓度:亚硝酸盐

c1(1/5KMnO4)=0、0500 × V4 /V3

按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液得浓度:

亚硝酸盐氮(N, mg/L)=(V1c1 ? 0、0500 × V2 ) × 7、00 × 1000/50、00

=140 V1 c1 –7、00×V2

式中:c1--经标定得高锰酸钾标准溶液得浓度(mol/L);

V1—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时,加入高锰酸钾标准溶液总量(ml);

V2--滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时,加入草酸钠标准溶液总量 (ml);

V3—滴定水时,加入高锰酸钾标准溶液总量(ml);

V4—滴定空白时,加入草酸钠标准溶液总量(ml);

7、00—亚硝酸盐氮(1/2N)得摩尔质量(g/mol);

50、00—亚硝酸盐标准贮备液取用量(ml);

0、0500—草酸钠标准溶液浓度(1/2Na2C2O4,mol/L)。

4) 亚硝酸盐氮标准中间液:分取适量亚硝酸盐标准贮备液(使含 12、5mg 亚硝酸盐氮),置于 250ml 容量瓶中,用水稀释至标线。此溶液每毫升含 50、0μg 亚硝酸盐氮。中间液贮于棕色瓶内,保存在 2-5℃,可稳定一周。

6) 亚硝酸盐标准使用液:取 10、00ml 亚硝酸盐标准中间液,置于 500ml 容量瓶中,用水稀释至标线。每毫升含 1、00μg 亚硝酸盐氮。此溶液使用时,当天配制。

7)氢氧化铝悬浮液:溶解 125g 硫酸铝钾[KAl (SO4)2·12H2O]或硫酸铝[NH4Al(SO4)2·12H2O]于 1000ml 水中,加热至 60℃,在不断搅拌下,徐徐加入55ml 氨水,放置约 1h 后,移入 1000ml 量筒内,用水反复洗涤沉淀,最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后,把上清液尽量全部倾出,只留稠得悬浮物,最后加入 300ml 水,使用前应振荡均匀、

8)高锰酸钾标准溶液(1/5KMnO4,0、050 mol/L):溶解1.6g 高锰酸钾于1200ml 水中,煮沸 0、5-1h,使体积减少到 1000ml 左右,放置过夜。用 G-3 号玻璃砂芯滤器过滤后,滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存,按上述方法标定。

9)草酸钠标准溶液(1/2Na2C2O4,0、0500mol/L):溶解经 105℃烘干 2h 得优级纯无水草酸钠 3.350g 于 750ml 水中,移入 1000ml 容量瓶中,稀释至标线、

6、实验步骤

(1)校准曲线得绘制依次吸取亚硝酸盐氮标准使用液0ml、1、00ml、3、00ml、5、00ml、 7、00ml及10、00ml ,至50ml比色管中,用水稀释至标线,然后加入1、0 ml显色剂密塞,混匀。显色剂, 至标线,然后加入1、0 ml显色剂,密塞,混匀。静置20 min, 1cm比色皿于波长540 nm处比色皿, 静置20 min, 1cm 比色皿,于波长540 nm处,以水为参比,测量吸光度。水为参比,测量吸光度。从测得得吸光度, 从测得得吸光度,减去零浓度空白管得吸光度后,获得校正吸光度绘制曲线。

(2) 水样得测定? 当水样pH≥11时,可加入1滴酚酞指示液,边搅拌边逐滴加入(1+9)磷酸溶液,至红刚消失。( 水样如有颜色与悬浮物,加入2 ml氢氧化铝悬浮液,搅拌、静置、过滤, 弃去25 ml初滤液初滤液。弃去25 ml初滤液。? 分取经预处理得水样入50 ml比色管中(分取经预处理得水样入50 ml比色管中比色管中(如含量高,则分取适量,用水稀释至标线), ),加量高,则分取适量,用水稀释至标线),加1、0 ml显色剂,然后按校准曲线绘制得相同得步骤操作,测量吸光度。经空白校正后, 步骤操作,测量吸光度。经空白校正后,从校准曲线上查得亚硝酸盐氮含量。准曲线上查得亚硝酸盐氮含量。

(3)空白试验用实验用水代替水样,用实验用水代替水样,按相同步骤进行全程测定。

7、计算

亚硝酸盐氮(mg/L)亚硝酸盐氮(N,mg/L)= m/V

m——由水样测得得校正吸光度,从校准曲线——由水样测得得校正吸光度由水样测得得校正吸光度上查得相应得亚硝酸盐氮含量(μg);

V——水样体积(ml)。

8、注意事项

如水样经预处理后,还有颜色时,则分取两如水样经预处理后,还有颜色时,份体积相同得经预处理得水样,一份加1、0ml 1、0ml显色份体积相同得经预处理得水样,一份加1、0ml显色剂,另一份改加1ml(1+9)磷酸溶液。由加显色另一份改加1ml 1+9)磷酸溶液。 1ml( 剂得水样测得得吸光度, 剂得水样测得得吸光度,减去空白试验测得得吸光度, 光度,再减去改加磷酸溶液得得水样所测得得吸光度后,获得校正吸光度,以进行色度校正。光度后,获得校正吸光度,以进行色度校正。