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《生化工程》复习资料

第一节生化工程的诞生与发展

一、概述

1.概念:

生化工程或生物化工全称是生物化学工程

(Biochemical Engineering)是为生物技术服务的

化学工程。它是利用化学工程原理和方法对实验室所取得的生物技术成果加以开发,使之成为

生物反应过程的一门学科,是生物化学与工程学

相互渗透所形成的一门新学科。

第一章培养基灭菌

第一节概述

一、在发酵生产中,为什么要进行灭菌操作?

1、由于杂菌的污染,使生物反应中的基质或产物因

杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;

2、由于杂菌所产生的一些代谢产物,或在染菌后改

变了培养液的某些理化性质,使产物的提取和分

离变得困难,造成收率降低或使产品的质量下降;

3、杂菌会大量繁殖,会改变反应介质的pH值,从而

使生物反应发生异常变化;

4、杂菌可能会分解产物,从而使生产过程失败;

5、发生噬菌体污染,微生物细胞被裂解,而使生产

失败,等等

一、灭菌的原理和方法

消毒与灭菌的区别:消毒与灭菌在发酵工业中均有广泛应用。消毒是指用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病源微生物。一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。例如,用于消牛奶、啤酒和酿酒原汗等的巴氏消毒法,是将物料加热至60维持30min,以杀死不耐高温的物料中的微生物营养细胞。

灭菌是用物理或化学方法杀死或除去环境中所

有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。消毒不一定能达到灭菌要求,而灭菌则可达到消毒的目的理解消毒需要强调二点:第一,消毒是针对病原微生物,并不要求消除或杀灭所有微生物;第二,消毒是相对的而不是绝对的,它只要求将有害微生物的数量减少到无害的程度,而并不要求把所有有害微生物全部杀灭,一般来说,若能使微生物在消毒过程中的存活概率达到10-3,则认为是可靠的。

消毒和灭菌的区别:消毒是相对的,而灭菌则是绝对的,意为完全杀灭或去除灭菌物品上的一切微生物,然而事实上要达到这样的水平是不可能的。

灭菌的程度:目前国际上规定,灭菌过程必须使物品中的微生物的存活概率减少到10-6,换句话说:若对一百万件物品进行灭菌处理,允许灭菌后仍有一件物品中留有活的微生物。

培养基及设备的灭菌方法:1、加热灭菌(火焰灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法)、射线灭菌法、化学试剂灭菌法

第二节灭菌的基本原理

一、湿热灭菌原理由于蒸汽具有很强的穿透能力,

而且在冷凝时会放出大量的冷凝热,很容易使蛋白质凝固而杀死各种微生物。灭菌条件121℃,30min。

灭菌不利方面同时也会破坏培养基中的营养成分,甚至会产生不利于菌体生长的物质。因此,在工业培养过程中,除了尽可能杀死培养基中的杂菌外,还要尽可能减少培养基中营养成分的损失

致死温度:杀死微生物的最低温度。

致死时间:在致死温度下,杀死全部微生物所需的时间。

在致死温度以上,温度愈高,致死时间愈短。由于一般细菌、产芽胞细菌、微生物细胞和微生物孢子对热的抵抗力不同,因此,它们的致死温度和致死时间也有差别。微生物对热的抵抗力常用“热阻”表示。

1、热阻:微生物在某一特定条件下(主要是温度和

加热方式)下的致死时间。

相对热阻:某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值。

2.微生物的热死规律——对数残留定律

反应速率常数k是微生物耐热性的一种特征,它随微生物的种类和灭菌温度而异。

在相同的温度下,k值愈小,则此微生物愈耐热。

同一种微生物在不同的灭菌温度下,k值不同,灭菌温度愈低,k值愈低。

-d N/d t=KN

N——培养基中残留活菌数,个;

t——受热时间,min;

k

min-1。

灭菌时间取决于污染的程度(N0)、灭菌的程度(残留菌数Nt)和k值。

反应速率常数k是微生物耐热性的一种特征,它随微生物的种类和灭菌温度而异。

在相同的温度下,k值愈小,则此微生物愈耐热。

同一种微生物在不同的灭菌温度下,k值不同,灭菌温度愈低,k值愈低

1/10衰减时间D:在某一温度中,当N0/Nt=10时的时间称为D(decimal reacgtion time),D=2.303/K,D与K成反比。

在培养基灭菌的过程中,除微生物被杀死外,还伴随着营养成分的破坏,如糖液焦化变色、蛋白质变性、维生素失活、醛基和氨基反应、不饱和醛聚合、一些化合物发生水解等。因此,必须选择一个既能达到灭菌的目的,又能使培养基中营养成分破坏至最小的灭菌工艺条件。

活化能(ΔE):基元反应的过渡态与反应物之间的能量差。

在分子碰撞过程中,只有某些分子的碰撞是有效的碰撞,这些分子在碰撞时所具有的内能比在该温度下其他分子所具有的平均内能要大。正是这种过剩能量,才是分子在所指定条件下进行反应所必须具备的能量,这就是活化能。

在活化能大的反应中,反应速度随温度变化也大。反之如果某一反应的活化能非常小,那么该反应的速度随温度变化也很小。由于细菌的ΔE 明显高于维生素ΔE,所以当温度升高时,杂菌的死亡速度要比营养成分的破坏速度快得多。在生产中应用上述理论,将培养基进行高温短时间灭菌的方法,以减少营养成分的破坏。

二、T(温度)对K(比热死速率常数)影响

阿累尼乌斯方程K =Ae-E/(RT)

A——频率因子;

E——反应所需的活化能,J/mol;

T——绝对温度,K。

在其它条件相同时,ΔE越高,K值即比热死速率常数越低,细菌抵抗力越强。

在温度(T)相同的条件下,ΔE低的孢子比热死速率常数(K值)不一定比ΔE高的孢子大,即其抵抗力不一定比后者弱,因为K值还取决于A(频率因子,因菌种不同而异)。

反应的ΔE越高,lnK对T的变化率越大,即T的变化对K的影响越大,细菌死亡速率对温度变化敏感。

三、影响培养基灭菌的因素

1.营养成分的保持:在灭菌过程中,既要达到灭菌效

果,又要考虑尽量减少营养成分的破坏。

2.微生物的耐热性:一般无芽孢的细菌在60℃60min 或70℃5min即可杀死,霉菌孢子在86~88 ℃3min 也可杀死。但有些细菌的芽孢热阻较大,100 ℃

30min仍可存活。灭菌所需要的时间取决于把活的细菌的芽孢减少到所规定数目的时间。细菌总数=细菌数+芽孢数。

3.pH值:一般微生物在6~8时容易存活,pH<6时氢

离子会进入细胞内部导致其易死亡。

4.培养基成分:油脂、糖类和一定浓度的蛋白质会增加生物的耐热性。如大肠杆菌在糖水中致死时间延长或热阻增高。

5.泡沫:泡沫中的空气可以形成隔热层(空气是热的

不良导体)。解决办法可采用加入少量消泡剂。6.颗粒:颗粒越大越难灭菌,含有较大颗粒剂粗纤维

的培养基可考虑过滤方法去除之。

7.培养基的物理状态:固体培养基灭菌时间比液体培

养基灭菌时间要长,是其的2-3倍。

8.空气排除情况:由于空气排除不彻底,存在空气分压,而不全是蒸汽压力,使罐内实际温度偏低,造成灭菌不彻底。

9.培养基中微生物的数量:数量多,时间长

10.微生物细胞的其他特性:含水量(含越水多的细

胞其蛋白质凝固温度越低)及菌龄等。

Ns(规定灭菌度),即表示灭菌效率,为计算方便取lnN0 / Ns(也称为V)做为设计依据。

例:100m3培养基,含菌(实为芽孢,下同)105个/mL,要求灭菌后Ns=10-3个,求灭菌效率V。

V=lnN0 / Ns =ln100*106*105/10-3

=ln1016=2.303*16 = 36.848

5.分批灭菌设备的优缺点

将培养基置于发酵罐中用蒸汽加热,达到预定灭菌温度后维持一定时间,再冷却到发酵温度,然后接种发酵这种叫间歇灭菌或实罐灭菌(实消)。

优点:不需要专门的灭菌设备,投资少,设备简单,灭菌效果可靠,对蒸汽要求较低。

缺点:灭菌过程中蒸汽用量变化大,造成锅炉负荷波动大,一般只限于中小型发酵装置。

第三节连续灭菌

一、基本概念

1.连续灭菌的过程:将配制好的并经预热(60~75℃)的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔,使在短时间内达到灭菌温度(130~140℃)。然后进入维持罐(或维持管),使在灭菌温度下维持5~15秒钟后再进入冷却管,使其冷却至接种温度并直接进入已事先灭菌(空罐灭菌,即“空消”)过的发酵罐内的灭菌方法。简称为“连消”。

2.注意事项:培养动物细胞的培养基的灭菌一般不能用热灭菌法,因其中有血清、氨基酸等易受热破坏的成分。这种培养基应采用孔径小于0.22 微米(0.45)的滤膜来除菌。

3.连续灭菌(连消)的优缺点

优点:比分批灭菌的温度更高,保温时间则比较短,有利于减少营养物质的破坏;灭菌过程中蒸汽用量平稳;不在发酵罐内进行,提高发酵罐利用率。缺点:设备比较复杂,投资较大;加热器、维持罐(管)、冷却器以及发酵罐(空消)等均应先进行灭菌。

4.连消的基本流程

连消塔-喷淋冷却连消流程

喷射加热-真空冷却连消流程

薄板换热器连消流程

设备构造

1.连消塔是培养液高温短时间连续灭菌设备,它

与维持罐组成连续灭菌系统,分套管式和汽液混合式两类。

2.维持罐灭菌系统中的维持设备,主要是使加热后的培养基在维持设备中保温一段时间,以达到灭菌的目的,也称保温设备。

3.喷射加热器可使料液和蒸汽迅速接触,充分

混合,加热是在瞬时内完成的。

4.冷却设备常用喷淋冷却器和套管冷却器。喷淋

冷却器是将冷却水通过喷淋装置均匀的淋在水平的排管上,以冷却管内的培养基。套管冷却器是一种内管走热培养基,内外管间的管隙中走冷却水的冷却器。

5.补充说明

组成培养基的耐热物质和不耐热物质可考虑在不同

温度下分开灭菌,以减少相应营养物质受热的破坏程度;也可将碳源和氮源分开灭菌,以避免醛基与氨基发生反应,防止有害物质的生成。

上述3种为国内外常用的连续灭菌流程,由于灭菌过程就是加热和冷却过程,故这些设备组成的流程不是一成不变的,例如当喷射加热方式后采用真空冷却有困难时,也可考虑其他冷却方式(喷淋冷却器或薄板换热器等)。

第二章空气除菌

第一节概述

二、空气中微生物的数量与环境有密切关系。

一般干燥寒冷的北方,空气中含微生物量较少,而湿润温暖的南方空气中含微生物较多;一般每升高10米,空气中的含菌量就降低一个数量级。

三、空气除菌的方法

1、加热除菌基于加热后微生物体内的蛋白质(酶)热变性而得以实现。

鉴于空气在进入培养系统之前,一般均需用压缩机压缩,提高压力,所以,空气热灭菌时所需的温度,就不必用蒸汽或其他载热体加热,而可直接利用空气压缩时的温度升高来实现。

空气经压缩后温度可升到200℃以上,保持一定时间后,便可实现干热杀菌。

利用空气压缩时所产生的热量进行灭菌的原理对制

备大量无菌空气具有特别重要的意义。

在实际应用时,对培养装置与空气压缩机的相对位置,连接压缩机与培养装置的管道灭菌以及管道长度等问题都必须加以仔细考虑。

2、静电除菌

3、介质过滤除菌

1).概念:介质过滤除菌是使空气通过经无菌介质过滤层,将空气中的微生物等颗粒阻截在介质层中,而达到除菌目的。

2).介质过滤除菌的分类:根据介质间的孔隙分类。常规介质过滤:是介质间孔隙大于微生物直径,故必须有一定厚度的介质滤层才能达到过滤除菌的目的,称为常规介质过滤。这类过滤介质有棉花、活性炭、玻璃纤维、有机合成纤维、烧结材料(烧结金属、烧结陶瓷、烧结塑料);

绝对过滤:介质的孔隙小于细菌,含细菌等微生物的空气通过介质,微生物就被截留于介质上而实现过滤除菌,有时称之为绝对过滤。绝对过滤在生物加工过程中的应用逐渐增多,它可以除去0.2μm左右的粒子,故可以把生物全部过滤除去。

第二节空气过滤除菌的机制

1、常规介质过滤除菌原理:与通常的过滤原理不一样,常见悬浮于空气中的微生物粒子大小在0.5-2um 之间,深层过滤所用的过滤介质如棉花纤维的填充系数为8%时,所形成网络的孔隙为20-50um,微粒随气流通过滤层时,滤层纤维所形成的网格阻碍气流前进,使气流出现无数次改变运动速度和方向,绕过纤维前进,这些改变引起微粒对滤层纤维产生惯性冲击、阻拦、重力沉降、布朗扩散、静电吸引等作用而把微粒滞留在纤维表面上。

1.惯性碰撞滞留作用:当微生物等颗粒随空气以一定速度流动,在接近纤维时,气流碰到纤维而受阻,空气就改变运动方向绕过纤维继续前进。但微生物等颗粒由于具有一定的质量,在以一定速度运动时具有惯性,碰到纤维时,由于惯性作用而离开气流碰到纤维表面上,由于摩擦、黏附作用,被滞留在纤维表面,这叫做惯性冲击滞留作用。当气流速度达到一定时,它是介质过滤除菌的主要作用。

2.阻拦滞留作用:质量很小的微粒随低速气流流动慢慢靠近纤维时,微粒所在的主导气流流线受纤维所阻,而改变流动方向,绕过纤维前进,并在纤维周围形成了一层边界滞留区。滞留区的气流速度更慢,进到滞留区的微粒缓慢靠近和接触纤维而被黏附滞留,称为拦截滞留作用。

3.布朗扩散作用:直径很小的微粒在很慢的气流中能产生一种不规则的直线运动(布朗扩散)而与纤维接触且俯着于纤维表面而被捕集。

4.重力沉降作用

5.静电吸附作用

在过滤除菌中,有时很难分辨上述各种机理各自所作贡献的大小。随着参数的变化,各种作用之间有着复杂的关系,目前还未能作准确的理论计算。

一般认为惯性撞击截留、拦截截留和布朗运动截留的作用较大,而重力和静电引力的作用则很小。

气流速度小:布朗扩散截留和拦截截留显著;气流速度大:惯性撞击截留作用显著

空气过滤除菌的介质

⑴纸类过滤介质

⑵纤维状或颗粒状过滤介质

①棉花②玻璃纤维③活性炭

⑶微孔滤膜类过滤介质

第三节空气过滤除菌的流程

空气过滤除菌流程

几种典型的空气过滤除菌流程

1.两级冷却、分离、加热的空气除菌流程

2.冷热空气直接混合式空气除菌流程

3.高效前置过滤空气除菌流程

4.利用热空气加热冷空气的流程

露点:

(一)空气过滤除菌的基本流程

空气→高空取气管→除尘器→空气压缩机→贮气

罐→一级冷却器→油水分离器→二级冷却器→除雾

气→加热器→总过滤器→分过滤器→无菌空气

1 两级冷却、分离、加热的空气除菌流程

特点:这是一个比较完善的空气除菌流程,可适应各种气候条件,能充分地分离油水,使空气达到低的相对湿度下进入过滤器,以提高过滤效率。该流程的特点是两次冷却、两次分离、适当加热。两次加热、两次分离油水的好处是能提高传热系数,节约冷却水,油水分离得比较完全。

流程1:经第一冷却器冷却后,大部分的水、油都已结成较大的颗粒,且雾粒浓度较大,故适宜用旋风分离器分离。

流程2:第二冷却器使空气进一步冷却后析出一部分较小雾粒,宜采用丝网分离器分离,这样发挥丝网能够分离较小直径的雾粒和分离效率高的作用。通常,第一级冷却到30-35℃,第二级冷却到20-25℃。除水后,空气的相对湿度仍较高,须用丝网分离器后的加热器加热空气,使其相对湿度降低至50%-60%,以保证过滤器的正常运行。

应用:两级冷却、加热除菌流程尤其适用潮湿的地区,其他地区可根据当地情况,对流程中的设备作适当的增减。一些对无菌程度要求比较高的微生物工程产品,均使用此流程。

2.冷热空气直接混合式空气除菌流程(了解)

特点:可省第二冷却分离设备和空气再加热设备,流程比较简单,冷却水用量较少,利用压缩空气的热量来提高空气温度。

①压缩空气从贮罐出来后分成两部分,一部分

进入冷却器,冷却到较低温度,经分离器分

离水、油雾后与另一部分未处理过的高温压

缩空气混合,此时混合空气已达到温度为

30-35℃,相对湿度为50%-60%的要求,再进

入过滤器过滤。

②该流程的特点是可省去第二次冷却后的分离

设备和空气加热设备,流程比较简单,利用

压缩空气来加热析水后的空气,冷却水用量

少等。

③该流程适用于中等含湿地区,但不适合于空

气湿度高的地区。

④由于外界空气随季节而变化,冷热空气的混

合流程需要较高的操作技术。

第三章通气与搅拌

临界氧浓度

1.概念:当培养基中不存在其他限制性基质时,不影响耗氧微生物生长繁殖的发酵液中最低溶氧浓度

称为该微生物的“临界氧浓度”。

第二节传氧速率方程

1.供氧:空气中的氧从空气泡里通过气膜、气液界面和液膜扩散到液体主流中。

2.供氧方面的阻力(为控制因素):

①气膜阻力,主流气流与气膜间的气膜阻力;

②气液界面阻力,与空气情况相关;

③液膜阻力,气液界面至液体主流间的液膜阻力;

④液流阻力。

3.耗氧:氧自液体主流通过液膜、菌体丛、细胞膜扩散到细胞内。整个过程必须克服一系列的阻力,才能被微生物利用。

4.耗氧方面的阻力:

①细胞周围液膜阻力,与发酵液成分和浓度相关;

②菌丝丛或团内的扩散阻力;

③细胞膜阻力,与微生物的生理特性相关;

④细胞内反应阻力。

第三节影响传氧速率的因素

影响传氧速率的因素有溶氧系数kLa和推动力

(C*-C),kLa值与搅拌、空气线速度、空气分布器的形式和发酵液的黏度等有关。

一、搅拌

增加搅拌功率可增大kLa值,提高溶氧速率

1)搅拌能把大的空气气泡打成微小气泡,增加了气液接触面积和接触时间。

2)搅拌使液体作涡流运动,延长了气泡的运动路线,及增加了气液的接触时间。

3)搅拌使发酵液呈揣流运动,从而减少气泡周围液膜的厚度,减少液膜阻力。

搅拌使菌体分散,有利于固液传递中的接触面积的增加。但过度强烈的搅拌使产生的剪切作用过大,对细胞的损伤增加。

挡板

作用:防治液面中央产生漩涡;促使液体强烈翻动,

增加溶解氧;改变液流的方向,由径流改为轴向流;加强搅拌强度,促使液体上下翻动和控制流型、消除涡流。

二、空气线速度

三、空气分布装置

空气分布装置有单管、多孔环管和多孔分支环管等几种。

当通风量很小时(0.02-0.5ml/s),气泡的直径与空气喷口直径的1/3次方成正比,也就是说喷口直径越小,溶氧系数越大。

一般发酵工业的通风量远远超过2所述范围,这时气泡直径只与通风量有关,与喷口直径无关。

四、发酵罐内柱高度

据报道,当H/D(高径比)从1加到3时,kLa可增加40%左右。当H/D从2增加到3时,kLa增加20%。

由此可见,H/D小,氧利用率小(差)。

H/D太大,溶氧系数增加不大。相反由于罐身过高液柱压差大气泡体积被压缩,以至造成气液界面小的缺点。H/D大,厂房要求也高,一般H/D=1.7~4,以2~3为宜。

五、醪液性质

1.有些有机物质,如蛋白胨,能降低kLa值。

2.当水中加入1%蛋白胨时,会将kLa减少到原

来的1/3左右,同时气泡直径减少15%左右,

而kLa值降到未加蛋白胨时的40%左右。

3.在发酵过程中,营养物质的利用,代谢产物的

积累,菌体的繁殖都会改变培养液粘度、表

面张力、离子强度等。从而影响气泡大小、

气泡稳定性和氧传递速度。

4.培养物浓度增大、粘度增大、kLa值降低。

六、罐容

通常发酵罐体积大的氧利用率高,体积小的氧利用低,在几何形状相似的条件下,发酵罐体积大的氧利用率可达7%-10%,而体积小的氧利用率只有3%-5%。

七、氧分压

1、增加推动力(C*-C)或(P-P*),可使氧的溶解度增加。

2、采用增加空气压力即增大罐压或用含氧较多的空气或纯氧都能增加氧的分压。

3、过分增加罐中空气压力是不值得提倡的,因为罐压增大,空气压力增大,整个设备耐压性都要提高,从而大大增加设备投资费用。

4、同时,氧的分压过高也会影响菌的生理代谢。

八、表面活性剂

培养液中消泡用的油脂等具有亲水端和疏水端的表面活性物质分布在气液界面,增大了氧传递的阻力,使氧传递系数kLa等发生变化。

九、离子强度一般在电介质溶液中生成的气泡比水中小得多,因而具有较大的比表面积。

在气-液接触的发酵罐中,在同样的条件下,电解质溶液的氧传递系数(kLa )比水大,且随离子浓度的增高kLa 也有较大增加。

十、温度温度增高能提高kLa值。

第四节溶氧系数及其测定

二、溶氧系数的测定方法

亚硫酸盐氧化法(实验内容)、极谱法、溶氧电极法(包括稳态法和动态法)

1.亚硫酸盐氧化法

亚硫酸盐氧化法的原理

用Cu2+为催化剂,溶解在水中的O2能立即将水中的SO32-氧化成为SO42-,其氧化反应的速度在很大范围与SO32-的浓度无关,

2Na2SO3+ O2→2Na2SO4

剩余的Na2SO3过量的碘作用

Na2SO3+ I2 + H2O →Na2SO4 + 2HI

剩余的I2用标定的Na2S2O3溶液滴定(淀粉为指示)。

2Na2S2O3 + I2 →Na2S4O6 + 2NaI

标准Na2S2O3用量决定于溶解氧的量。即每1mol溶氧可氧化2molNa2SO3,就剩余2mol I2,也就消耗掉4mol Na2S2O3,因此,每滴定消耗1mol Na2S2O3必有

1/4mol溶氧。

若操作时:P=1atm(绝对)

则:Nv=V.N/(1000m.t.4)(mol/ml.min)

或Nv=V.N.60/(m.t.4)(mol/L.h)

Nv---体积溶氧速率(kmolO2/m3.h=mol/L.h )即每立方米液体每小时的溶氧量

V----实际搅拌通气样与空白样各加等量、适量I2液后滴定用标准Na2S2O3体积之差(ml)

N----------- Na2S2O3的标定浓度(mol/L)

m-----------样液的体积(ml)

t-------------两次取样的间隔,即氧化时间(min)

亚硫酸盐氧化法测定溶氧系数的优缺点

优点:氧溶解速度与亚硫酸盐浓度无关,且反应速度快不需要特殊仪器。

缺点:不能在真实发酵条件下进行测定发酵液的溶氧,因为亚硫酸盐对微生物的生长有影响,且发酵液的成分、消泡剂、表面张力、黏度、特别是菌体都影响氧的传递。

这种方法测定的结果仅能说明某种发酵罐在该操作

条件下的性能,而不能说明溶氧和微生物耗氧的全过程。

主要用于作为设备溶氧系数的测定。

第四章微生物发酵动力学

第一节概述

1. 发酵动力学研究的内容

研究内容:包括了解发酵过程中菌体生长速率、基质消耗速率和产物生成速率的相互关系,环境因素对三者的影响,以及影响其反应速度的条件。

发酵过程按进行过程有三种方式:分批发酵(Batch fermentation)、补料分批发酵(Fed-batch fermentation)、连续发酵(Continuous fermentation)

一、分批发酵

1、分批发酵的定义

是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中,除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外,不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少,微生物得到繁殖。

分批发酵的特点

微生物所处的环境在发酵过程中不断变化,其物理,化学和生物参数都随时间而变化,是一个不稳定的过程。

优点:操作简单;操作引起染菌的概率低。不会产生菌种老化和变异等问题

缺点:非生产时间较长、设备利用率低。

2、微生物的生长曲线

在分批培养过程中,随着微生物和底物、代谢产物的浓度等的不断变化,微生物的生长可分为停滞期、对数生长期、减速期、稳定期和死亡期5 (4)个阶段。

(1)停滞期(适应期,lag phase )

停滞期是微生物细胞适应新环境的过程。微生物细胞从一个培养基被转移至另外一个培养基中,细胞需要有一个适应过程,在该过程中,系统的微生物数量并没有增加,处于一个相对的停止生长的过程。接种物的生理状态和浓度是停滞期长短的关键。(2)对数生长期(指数期,exponential phase) 处于对数生长期的微生物细胞的生长速度大大

加快,单位时间内细胞的数目或重量的增加维持恒定,并达到最大。此阶段生长比速为常数。为缩短适应期,常采用对数期的培养物做接种物。

(3)减速期(decelerating phase)

在对数生长期和稳定期之间是减速期(有时将

其划为稳定期,故有4期之说),特点是必需营养成分缺乏,生存空间限制等原因造成的。

(4).稳定期(静止期,stationary phase)

当细胞停止分裂,或细胞生长与死亡的速率达到平衡时便出现稳定期。在微生物生长的稳定期,细胞重量基本维持稳定,但活细胞数量可能下降。

(5)死亡期(衰亡期,decline phase)

培养基中营养耗尽,代谢产物大量积累,细胞繁殖趋于停止,而死亡细胞越来越多,即活细胞数量显著下降。

3、微生物生长动力学

td为倍增时间:微生物细胞浓度增加一倍所需要的时间,也叫倍增时间。

一些微生物受遗传特性及生长条件的控制,比生长速度和倍增时间有很大的差异。

例题:某微生物的u=0.125 h-1,求td。

比生长速率的意义

比生长速率是菌体繁殖速率与培养基中菌体浓度之比,它与微生物的生命活动有联系

在对数生长期,是一个常数,这时

(2)、无抑制的细胞生长动力学——Monod方程

现代细胞生长动力学的奠基人Monod在1942年指出,在培养基中无抑制剂存在的情况下,细胞的比生长速率与限制性基质浓度的关系可用下式表示:

Monod方程是典型的均衡生长模型,其基本假设如下:

①细胞的生长为均衡式生长,因此描述细胞生长的唯一变量是细胞的浓度;

②培养基中只有一种基质是生长限制性基质,而其它组分为过量,不影响细胞的生长;

③细胞的生长视为简单的单一反应,细胞生长速率为一常数。

按1/ μ对1/s坐标作图,若能得一直线,说明该微生物符合Monod生长动力学,

斜率为Ks / μm ,截距为-KS

3.Monod方程与酶催化反应的米氏方程形式上是一

样的,因为微生物的生长可看作酶反应的粗略代表;但所不同的是,米氏方程是应用酶反应理论推导得到的,而Monod方程却是完全经验得到的。

4、产物形成的动力学模型

Gaden根据产物生成速率与细胞生长速率之间的关系,将其分为三种类型:

类型Ⅰ称为相关模型,或称伴随生长的产物形成模型;

类型Ⅱ称为部分相关模型,或称不完全伴随生长的产物形成模型;

类型Ⅲ称为非相关模型或称不伴随生长的产物形成

模型。

μ

μ

693

.0

2

ln

=

=

d

t h

t

d

544

.5

125

.0

693

.0

2

ln

=

=

=

μ

t

X

X

μ

=

1

2

ln

S

K

S

s

+

=

max

μ

μ

5、反应动力学的相关术语

得率:是指被消耗的物质和所合成产物之间的量的关系。有时也称为产率(Y)。包括生长得率(Yx/s)

和产物得率(Yp/s)

①生长得率:是指每消耗1g(或mo1)基质(一般指碳源)所产生的菌体重(g),即Yx/s=ΔX/ΔS。

②产物得率:是指每消耗1g(或mo1)基质所合成的产物量(g或mol数)。这里消耗的基质是指被微生物实际利用掉的基质数量,即投入的基数减去残留的基质量(S0-S)。

二、连续培养特点

1、定义

培养基料液连续输入发酵罐,并同时放出含有产品的相同体积发酵液,使发酵罐内料液量维持恒定,微生物在近似恒定状态(恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率)下生长的发酵方式。

1.优点

①提供了一个微生物在恒定状态下生长的环境,达到对微生物的稳定高速培养或产生大量代谢产物为目的,便于进行微生物的代谢、生理、生化和遗传特性的研究;

②在工业上可减少分批培养中每次清洗、装料、灭菌、接种、放罐等的操作时间,提高生产效率;

③产物质量比较稳定;

④所需设备和投资较少,便于实现自动化。

2.缺点

①连续培养的细胞在开放系统中进行的,发酵过程易染菌;

②在长时间的培养过程中,微生物菌种容易发生变异;

③新加入的培养基与原有的培养基不易完全混合,影响培养和营养物质的利用。

第五章酶与细胞的固定化

第一节概述

一、概念与特性

1.固定化酶:是被固定在某一有限空间内不再能自由流动而仍有催化活性的酶。

2.固定化酶的特性

①优点:a.不溶于水,易于与产物分离;

b.可反复使用;

c.可连续化生产;

d.稳定性好。

②缺点:固定化过程中往往会引起酶的失活;适应水溶性底物和小分子底物;与完整细胞比较,不适于多酶反应。

二、固定化技术

1.吸附法

①物理吸附②离子吸附2.包埋法

①格子型包埋②微胶囊型包埋

3.共价键结合法

①重氮化法②烷基化法和芳基化法③戊二醛化法

4.交联法

(四)酶固定化方法

1.吸附法:酶被吸附于惰性的固相载体或离子交换剂。根据酶分子与载体吸附的性质有离子吸附和物理吸附之别。

①物理吸附法:使用对酶蛋白有高度吸附能力的硅胶、活性炭,氧化铝、高岭土、石英沙、火棉胶、多孔玻璃等在一定条件下与水溶酶作用制得。

a.优点:操作简单,反应条件温和,酶活力损失少,载体可反复使用;

b.缺点:易引起蛋白质表面变性,且由于结合力弱,当反应液的pH值、离子强度、温度、底物浓度等发生变化时,会导致酶易从载体上部分或全部脱落。

物理吸附法固定化酶举例

②离子吸附法:利用含有离子交换基团的固相载体(如具有交换基团的葡聚糖凝胶或纤维素)与酶蛋白分子的带电基团互相吸引(靠离子链)而形成络合物。

a.优点:制作简单,处理条件缓和,酶蛋白的活性中心和高级结构破坏较少,可以制得活力较高的固定化酶。

b.缺点:离子键结合较松散,如在高离子强度下进行反应时,酶与载体易分开。

常用的载体有阴离子交换剂(如二乙基氨基乙基(DEAE)-纤维素、混合胺类(ECTEDLA)—纤维素、四乙氨基乙基(TEAE)—纤维素、DEAE—葡聚糖凝胶、Amberlite IRA—93、410、900等)、阳离子交换剂(如羧甲基(CM)—纤维素、纤维素柠檬酸盐、Amberlite CG50、IRC—50、IR—200、

Dowex—50等)

2.包埋法:将酶包埋在凝胶的微小空格内或埋于半透膜的微型胶束内,但底物仍能渗入到里面与酶接触。分为微胶囊包埋法和格胶包埋法。

a.优点:利用此法制得的固定化酶,由于酶分子仅仅是被包埋起来,而未受到化学作用。酶蛋白几乎不起变化,可适用与多种不溶酶的制备。

b.缺点:酶被包埋在内部,对大分子底物很难发生催化作用。一般只适用与小分子底物。

(1)微胶囊包埋法:将酶包埋在半透性聚合体膜内,形成的直径为1-100um。如,天门冬酰胺酶采用此法包埋。

将酶包埋在各种高分子聚合物制成的小球内,制成固定化酶。由于固定化形成的酶小球直径一般只有几微米至几百微米,所以也称为微囊化法。

微型胶囊法形成的固定化酶

(2)、网格型

(1) 概念将酶或含酶菌体包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法

(3)格胶包埋法:以丙烯酰胺、硅胶、淀粉琼脂等材料,在酶存在下聚合成凝胶,酶被包埋在聚合物的细小多孔的网状格子中。

3. 交联法:依靠双功能基团的试剂,使酶蛋白分子之间发生交联,凝集成网状结构而成为固定化酶,最常用的双功能试剂有戊二醛、异氰酸酯和双重氮联苯胺等。酶蛋白中的游离氨基、酚基、咪唑基及巯基均可参与交联反应。双功能试剂:常用的是戊二醛。

4.共价偶联法:酶蛋白的非必需基团通过共价键和载体形成不可逆的连接。一般在温和条件下能参与偶联的蛋白质基团包括:游离羧基(包括肽链C-末端的α-羧基等)、游离氨基(如肽链N-末端的α-氨基)等。

①共价偶联法要注意两个问题

a.参加载体共价结合应不是活性中心基团,也不是参与酶蛋白的高级结构的必需基团,否则会使固定化酶不呈现出酶活力。

b.载体必须具有在温和条件下可与酶蛋白发生偶联

反应的基团,又有一定的机械强度和较大的表面积。

②共价偶联法的特点

a.优点:此法制得的固定化酶,酶分子和载体间的共价键较牢固,在介质组成发生改变和进行反应时,都不会造成酶的脱落,因而可以反复使用。

b.缺点:制取固定酶较复杂,反应条件比较剧烈,所以要制得酶活力很高的固定化酶较为困难。

共价偶连法的制作方法包括:有重氮化法、烷基化和芳基化法、肽法和戊二醛法等。

三、固定化酶应注意的几个问题

(一)酶活性的测定方法(了解)

1.测定酶的固定化量:固定化反应完成后,以原始酶量减去洗涤液(反应液)中残存的酶含量。

2.测定颗粒直径:固定化酶的粒径越小,酶活性越高。固定化酶颗粒直径大小影响酶活性。

3.测定酶反应最适pH值:酶固定化后反应的最适pH 较原来的酶有所变化。

4.检查酶是否脱落:测定酶活性后,滤除固定化酶,用离心所得的溶液再经过适当保温检查是否还继续

进行反应,如果溶液中出现酶反应,说明酶脱落。

第三节固定化细胞

一、固定化细胞及其优点

1.固定化细胞:把菌体细胞中特定的酶不经过分离提纯,直接用适当的方法将菌体加以固定来催化各种特定的生物化学反应。

2.优点:不需提制酶,可保持酶的活性。反复使用,与固定化酶比较成本低。

第七章生化反应器及比拟放大

第一节概述

一、生化反应器:

是利用生物催化剂为细胞培养(或发酵)或酶反应提供良好的反应环境(温度、压力、供氧量、密封防漏、防止杂菌污染,促进微生物的新陈代谢,使之能在低消耗下获得较高的产量)的设备,也称为生物反应器,包括酶反应器、微生物反应器(发酵罐)和动植物细胞培养用反应器。

第三节生物反应器的种类及比拟放大

一、按输入机械功率的来源分类

按生化反应是在一个相或是在多个相内进行,可分为均相反应器和非均相反应器。发酵工业中的绝大多数都属于非均相反应器。

(一)机械搅拌式生化反应器

它是借搅拌涡轮输入混合以及相际传质所需要

的功率。这种反应器的适应性最强,从牛顿型流体直到非牛顿型的丝状菌发酵液,都能根据实际情况和需要,为之提供较高的传质速率和必要的混合速度。缺点是机械搅拌器的驱动功率较高,一般2-4kw/m3,这对大型的反应器来说是个巨大负担。

1.机械搅拌发酵罐的基本条件

①发酵罐应具有适宜高径比。一般高径比为2.5-4。

②发酵罐能承受一定的压力。由于发酵罐在消毒和正

常工作时,罐内有一定的压力和温度,因此罐体各部件要有一定的强度,能承受一定的压力。

③发酵罐的通风搅拌装置要能使气泡分散细碎,气液

充分混合,保证发酵液必须的溶解氧,提高氧的利用率。

④发酵罐应具有足够的冷却面积。

⑤发酵灌内应抛光,尽量减少死角,避免藏垢积污,

使灭菌彻底,避免染菌。

⑥搅拌器的轴封严密,尽量减少泄漏。

2.机械搅拌罐结构

设备主要部件包括罐身、搅拌器、轴封、消泡器中间轴承,空气喷射器、挡板、冷却装置、测量系统(pH、溶解氧等)及附属系统(视镜)等。

①罐体由圆柱体及椭圆形或碟形封头焊接成,材料为碳钢或不锈钢。为满足工艺要求,罐需承受

一定压力,通常灭菌压力0.25MPa(绝对大气压)

②搅拌器涡轮式搅拌器的叶片有平叶式、弯叶

式、箭叶式三种,其主要是打碎气泡,加速和提高溶氧。平叶式功率消耗较大,弯叶式较小,箭叶式又次之。

③挡板挡板作用是防止液面中央产生旋涡,促使

液体激烈翻动,提高溶氧。挡板宽度约为(0.1-

0.12)D。装设4-6块挡板,可满足全挡板条件。

全挡板条件:是指在一定转速下,再增加罐内附件,轴功率仍保持不变。

要达到全挡板条件必须满足下式要求:

(W/D)Z=0.4或0.5

D---罐的直径

Z---挡板数

W---挡板宽度

标准发酵罐的几何尺寸

H/D=1.7~4.0 d/D=1/2~1/3(0.3-0.5)

W/D=1/8~1/12(0.08-0.12)

B/D=0.8~1.0 (s/d) =1.0~2.5

二、按运行方式对生化反应器分类

间歇式(分批式)生化反应器、连续式反应器及半连续式反应器。

1.间歇式生化反应器特点:一次投料,待反应完毕后,

卸料(取出),清洗进行下一次生产;反应器内的成分随反应时间而变化,属于非稳态系统;适合于多品种、小批量、反应速率较慢的反应过程。

2.连续式生化反应器特点:进料和出料连续进行,反

应体积恒定;克服底物耗尽及有害代谢产物积累造成反应只能在有限时间内进行的缺点;反应属于稳态;产品质量稳定、生产效率高;操作及质量控制要求较高。

3.半连续式生化反应器:在一次反应的过程中,底物

分次补入,产物分次取出;综合了间歇式反应器及连续式反应器的特点。

三、按流动模型将连续式反应器分类

连续流搅拌反应器和活塞流反应器。

1.返混:又称逆向混合,是指不同停留时间微团之间

的混合,返混随机发生,导致不同微团经历不同的反应时间。

2.返混产生的原因:反应器内的环流运动物料在连续

反应器中的反向运动造成返混如连续釜式反应器中的搅拌作用;反应器内物料的流速分布不均匀导致改变反应器内的浓度分布造成返混。

五、比拟放大

(一)比拟放大的原因及基本方法

1.为何进行比拟放大:为了使小型发酵试验所获得的

规律和数据能在大生产中再现,就要掌握和运用放大技术。一般采用相似原理进行比拟放大。

2.比拟放大的基本方法:

找出表征此系统的各种参数,将它们组成几个具有一定物理含义的无因次数;

建立发酵罐和各种参数间的函数式;

然后用实验的方法在试验设备里求得此函数式中所包含的常数和指数,则此关系式便可用作与此试

验设备几何相似的大型设备的设计。

3.比拟放大的基本原则:

比拟放大不是简单的按比例放大,而是建立在几何相似、培养条件相同和微生物在反应器中充分分散等基本假设之上的;

放大与通气、搅拌等技术构成了生化工程的核心部分。

第八章生化过程参数的检测

第一节直接参数的检测

一、生化过程参数的分类

1.直接参数:可以直接采用特定的传感器检测的参数称为直接参数,包括各种反映物理环境和化学环境变化的参数。

物理环境参数:主要包括温度、压力、体积、流量(空气、料液、冷却水)、轴功率、搅拌转速、泡沫高度、黏度、浊度等。

化学环境参数:主要有pH、离子强度、溶解氧、氧化还原电位、进出口氧及二氧化碳浓度、基质、细胞主要成分等。

黏度的检测

常用的黏度测定仪毛细管黏度计(1,2)、回转式黏度计(3)和涡轮黏度计等。一般装设自动无菌取样循环系统,使发酵液通过取样管路流过回转式黏度计或毛细管黏度计,以实现发酵液黏度的连续在线检测。

第二节生物传感器

一、基本概念

1.传感器(电极或探头):能感受规定的被测量并按照一定的规律将其转换成可用信号的器件或装置,它通常由敏感元件、转化元件及相应的机械结构和线路组成。

2.生物传感器:是利用酶、抗体、微生物等作为敏感材料,将所感受的生物体信息(分子识别)转换成电化学信号、光学信号、声信号进行检测的传感器。

第九章生化过程控制及计算机应用

第一节生化过程控制

一、消泡控制

(一)泡沫产生的原因

1.一般而言,纯水及纯表面活性剂不起泡,因为它们的表面和内部是均匀的,很难形成薄膜,即使形成也不稳定,会瞬间消失;

2.发酵液中含有蛋白质等类似表面活性剂的物质存在,由外界引入的气流被机械地分散形成气泡,另外发酵过程中产生的气体聚结也可形成气泡(气泡形成后后由于分子间力的作用,形成规则排列的亲水基和

疏水基并被气泡壁吸附,其亲水基朝向水相,疏水基朝向气泡内,从而在气泡界面上形成弹性膜,其稳定性很强,常态下不易破裂);

3.泡沫的稳定性与表面粘性和弹性、电斥性、表面膜的移动、温度、蒸发等因素有关。

(二)泡沫的危害

过多的持久性泡沫会给发酵过程造成困难,产生一些不利于生产的因素,表现在:

使发酵罐的装填系数减少(0.6-0.9);

造成大量“逃液”,导致产物损失;

泡沫“顶罐”可导致培养基从轴封渗出,增加染菌几率;

影响正常的通气搅拌,妨碍细胞呼吸,导致发酵异常,导致最终产物产量下降;

促使菌体自溶,释放的菌体胞浆蛋白,进而促进更多泡沫产生;

使不同生长阶段的细胞随泡沫粘附在罐盖或罐壁上,增加了细胞群体的非均一性,增加了清洗难度。

(三)泡沫的控制和消除

主要有化学消泡和机械消泡两种方法。

1.机械消泡:

①消泡机理:靠机械强烈振动、压力的变化,促使气泡破裂,或借机械力将排出气体中的液体加以分离回收。

②优缺点:节省原料,减少由于消泡剂所引起的污染机会;需要一定的设备和消耗一定的动力,不能从根本上消除引起泡沫温定的因素。

③罐内机械消泡和罐外机械消泡

a.罐内消泡包括:耙式消泡浆、超声波消泡器及碟片式消泡器等。

b.罐外消泡包括:旋转叶片式、离心式及转向板式等。

2.化学消泡:

①消泡机理:消泡剂表面张力低,使气泡膜局部的表面张力降低,使得平衡受到破坏。

②优点:来源广泛、消泡效果好,作用迅速可靠,用量少,容易实现自动控制;可能影响下游技术中的产物分离。

③选用依据:

a.表面活性剂,有较低表面张力;

b.对气-液界面的散布系数必须足够大;

c.无毒害,不影响细胞的生长和代谢,不影响产物提取和产品质量;

d.在水中的溶解度较小,不影响溶液中氧的溶解和传递;

e.来源方便,成本低;

f.不干扰各种测量仪表的使用。

④消泡剂种类:a.天然油脂:豆油、菜籽油、玉米油、棉籽油、鱼油、猪油等。

b.高级醇类:十八醇,聚二醇等。

c.聚醚类:聚氧丙烯甘油、聚氧乙烯氧丙烯甘油等。

d.硅酮类:聚二甲基硅氧烷及其衍生物。

⑤消泡剂的应用和增效作用

a.消泡剂+ 载体

b.复合消泡剂

c.消泡剂+ 乳化剂

三、pH值的控制

(一)pH值对菌体生长和代谢产物合成的影响

1.菌种不同,对pH要求不同(细菌6.5-7.5,霉菌4.0-5.8,酵母3.8-6.0,放线菌6.5-8.0);

2.菌种相同,pH不同,形成的产物不同(黑曲霉2-3产柠檬酸,7左右时产草酸;酵母4.5-5.0产酒精,8.0除酒精外还有醋酸和甘油);

3.菌种生长最适pH值和发酵产物形成的pH值不同(青霉菌生长6.5-7.2,青霉素合成6.2-6.3;链霉菌生长6.3-6.9,链霉素合成6.7-7.3)。

(二)pH值对细胞生长繁殖和代谢产物形成影响的主要原因

1.影响原生质膜的性质,尤其是原生质膜的电荷,使其对个别离子的渗透性改变,进而影响细胞对某些营养物质的吸收及代谢产物的渗漏;

2.影响酶的活性,只有在合适的pH值下,细胞的酶才能发挥最大的活性,不适宜的pH值会抑制细胞酶的活性,进而抑制其生长和代谢;

3.影响营养物质和中间代谢产物的解离,影响细胞对这些物质的吸收和利用。

第十章工业发酵染菌的防治

第一节工业发酵染菌的危害

一、染菌的危害

1.避免染菌的措施

为防止杂菌污染,采取如下措施:

①密闭式发酵罐;②无菌空气;

③无菌室;④培养基和设备灭菌;

⑤无菌操作。






隧道工程期末总复习资料(完整版)

1.隧道的构成及分类 隧道构成:主体建筑物(洞身衬砌、洞门) 附属建筑物(通风系统、照明系统、防排水设备、安全设备)隧道分类:按用途(交通、水工、市政、矿山隧道) 按底层(岩石、土质隧道) 按所处位置(山岭、城市、水底隧道) 按施工方法(钻爆法、明挖法、机械法、沉埋法隧道) 按断面形式(圆形、矩形、马蹄形隧道) 按开挖断面大小(特大断面、大断面、中等断面、小断面、极小 断面隧道) 按长度(特长、长、中长、短隧道) 2.隧道洞口位置的选用原则 总原则:早进洞、晚出洞;目的:确保施工、运营的安全 具体原则: 1.洞口应尽可能设在山体稳定、地质较好处,不应设在排水困难的沟谷低洼 中心 2.洞口应尽可能设在线路与地形等高线正交处 3.隧道洞口的路肩设计标高,应高于洪水设计标高 4.边坡、仰坡不宜开挖过高,以保证洞口安全 5.当隧道穿过悬崖陡壁时,可贴壁进洞 6.当洞口地形平缓时:由于选定洞口位置有较大的伸缩范围此时,此时应结 合洞外填方路堑施工难易、路堑排水支农要求、弃碴场地、施工力量及机械设备等情况全面考虑 7.注重环境保护 3.选择越岭隧道的位置主要以什么作为依据? 平面位置与立面位置的选择 (1)平面位置的选择——选择垭口 (2)立面位置的选择——选择高程 4.隧道位于曲线上的缺点以及隧道坡度折减(原因及要求) 隧道位于曲线上的缺点: ⑴建筑限界加宽,增大开挖土石方量,增加衬砌圬工量; ⑵断面变化,支护和衬砌尺寸不一致,技术复杂; ⑶空气阻力加大,抵消部分机车牵引力; ⑷通风条件变坏; ⑸钢轨磨损增大,养护工作量增加; ⑹施工测量困难,精度降低。 坡度折减原因: ⑴列车车轮与钢轨面间的粘着系数降低; ⑵洞内空气阻力增大。 注: ⑴上坡进洞前半个远期货物列车长度范围内,也要折减; ⑵限制最小坡度:≥3‰。 5.隧道净空与界限关系 机车车辆限界—基本建筑限界—隧道建筑限界—隧道净空

部编本语文四年级上册第六单元整理与复习

第六单元整理与复习 板块一:课文内容回顾 18.《牛和鹅》记叙了“我们”在回家的路上被鹅追赶,后来在金奎叔的帮助下赶走了鹅的故事,并借助金奎叔的话告诉我们(看待周的事物,如果从不同的角度出发,就会得到不同的结果)。 19.《一只窝囊的大老虎》通过讲述作者上小学时扮演老虎,因为不会豁虎跳而使演出失败的故事,表现了作者(求真)的精神和(对童年生活的眷恋)之情。 20.《陀螺》一文以(陀螺)为线索,主要叙述了作者的一只其貌不扬的陀螺战胜大陀螺的事情,作者从中悟到了(“人不可貌相,海水不可斗量”)的道理,并体会到了成长中的快乐。 板块二:识字加油站 1、听写词语 甚至顽皮故意脖子扑打忙乱大概助威 昏乱结实汉子可笑平白摸索跪下捶背 绕圈脱离惹怒握住摔倒任凭掐住摇摆 文艺表演角色期待排练危机充分自信 提示撤换紧张砸锅至今片段咱俩圈套 衣裤逃跑头罩亏得挖坑否则旋转况且

椅子仍然尤其预料顽强溃败自豪旋风 士兵帅气品尝小丑恨不得冰天雪地重整旗鼓得心应手手舞足蹈摇头晃脑不动声色通情达理哄堂大笑无缘无故 2、认读词语 拳头捶背衣襟胳膊酒瓶恐怖欺负轮流 羡慕角色殷切撇嘴笨拙瞌睡陀螺冰尜 妩媚铁钉绰号角锥鼻涕责骂懊恼恍惚 嘲笑寂寞挑衅扭身辉煌荣誉由衷韭菜 芥菜芹菜青蒜辣椒莲藕红薯芋头 3、易错读音 捶(chuí)背甚(shèn)至拳(quán)头 胸(xiōng)口胳膊(bo) 掐(qiā)算 黄昏(hūn) 摔(shuāi)打凭(píng)借 囊(náng)括羡(xiàn)慕砸(zá)开 殷(yīn)切豁(huò)虎跳撇(piě)嘴 笨拙(zhuō) 钉(dīng)子兵(bīnɡ)器 彻(chè)底丑(chǒu)小鸭旋(xuán)转 可恨(hèn) 帅(shuài)气况(kuàng)且4、多音字

《体育公共关系》复习思考题

(0456)《体育公共关系》复习思考题 一、名词解释 1、体育组织 2、体育公众 3、公众 4、大众传播 5、体育公共关系专题活动 6、企业文化 7、组织形象 8、传播 9、礼仪 10、体育公共关系部 11、记者招待会 12、目标导向 13、互利观念 14、公众观念 15、职业道德 16、体育公共关系计划的实施 17、公共关系活动(实务) 18、从众心理 19、公关策划 20、整合营销传播 21、公共关系 22、差异观念 23、美誉度 24、体育竞赛 25、社会公益活动 二、简答题 1、公共关系与社会上抨击的“庸俗的拉关系”现象有什么本质上的区别? 2、如何理解“体育公共关系是以推动体育发展总体目标的一类公共关系策划和实 践活动”这句话? 3、什么是体育组织?体育组织的构成要素有哪些? 4、体育组织有何特性? 5、体育公众的界定及其特征

6、体育公共传播有何特点? 7、体育公共关系的作用 8、试阐述实现体育公共关系的协调功能,需要行使哪些职责? 9、举例说明体育公共关系的效益功能 10、试述体育公共关系的基本原则对现实体育组织目标的作用 11、体育公共关系从业人员应如何树立自己的形象? 12、体育公共关系从业人员应该具备哪些能力?如何获得这些能力? 13、什么是公众?什么是受众?其主要区别是什么? 14、作好边缘公众的工作对组织的发展有什么意义? 15、社区体育公共关系的处理技巧 16、什么是大众传播?它有哪些特点? 17、简述大众传播与体育的关系 18、大众传播媒介有哪些类别?在体育公关活动中如何选择合适的传播媒介? 19、试举例说明传播技巧在各类公关关系活动中的作用。 20、体育公共关系策划在体育实践工作中有何重要意义? 21、体育公共关系策划的步骤 22、简述体育公共关系计划实施中的反馈调整原则。 23、体育公共关系评估一般分为几个步骤?它们之间有什么关系? 24、体育公共关系活动评估的重要性 25、礼仪在体育公共关系活动中的价值体现 三、论述题 1、常见的体育新闻稿件的写作方法有哪几种? 2、简述体育公共关系新闻的主要特征 3、简述体育公共关系广告的类型及创作技巧 4、什么是体育公共关系专题活动?它对体育组织的发展有什么作用? 5、体育庆典的公关意义何在? 6、什么是CI策划?其意义体现在哪些方面? 7、什么是企业文化?如何理解体育类企业文化? 8、企业文化的特征与功能有哪些 9、企业组织的企业文化对公共关系活动有哪些影响? 10、培育企业文化的途径有哪些? 11、论述在商品经济条件下,体育工作必须开展公共关系工作的理由。 (0456)《体育公共关系》复习思考题答案 三、名词解释 1、作为体育公共关系活动主体的体育组织,它是人们按照特定的目标、任务和形 式建立起来的协调力量和行为的合作系统。 2、因面临某个共同问题而形成的并与体育组织利益相关且相互影响、互相作用的 社会群体称为体育公众 3、公众,是指与特定的社会组织发生联系,并对其生存发展具有影响的个人、群

隧道工程复习

一、名词解释 1、隧道:以任何方式修建,最终使用于地表面以下的条形建筑物,其空洞内部净空断面在2m^2以上者均为隧道。 2、垭口:当线路必须跨越分水岭时,分水岭的山脊线上总会有高程较低处,称之为垭口。 3、隧道净空:隧道衬砌的内轮廓线所包围的空间。 4、建筑限界:是指隧道衬砌等任何建筑物不得侵入的一种限界。 5、衬砌内轮廓线:是衬砌的完成线,在内轮廓线之内的空间为隧道的净空断面。 6、衬砌外轮廓线:指为保持净空断面的形状,衬砌必须有足够的厚度(或称最小衬砌厚度)的外缘线。该线又称为最小开挖线。 7、实际开挖线:为保证衬砌外轮廓,开挖时往往稍大,尤其用钻爆法开挖时,实际开挖线不可避免的成为不规则形状。 8、洞门:是隧道两端的外露部分,也是联系洞内衬砌与洞口外路堑的支护结构。 9、明洞:采用明挖法修筑的隧道结构。 10、围岩:隧道周围一定范围内,对其稳定性产生影响的岩体。 11、围岩压力:是指隧道开挖后,围岩作用在隧道支护上的压力,是隧道支撑或衬砌结构的主要荷载之一。 二、填空 1、隧道按用途分为(交通隧道)、(水工隧道)、(市政隧道)与(矿山隧道)。 2、隧道按断面面积分为(特大断面隧道)、(大断面隧道)、(中等断面隧道)与(小断面隧道)。 3、隧道按所处的地理位置分为(山岭隧道)、(水底隧道)与(城市隧道)。 4、隧道的特点(隐蔽性)、(施工环境差)、(条形建筑物)与(大量涌水)。 5、隧道勘察分为(可行性研究勘察)、(初步勘查)与(详细勘察)三个阶段。 6、可行性研究勘察分为(预可行性研究)、(工程可行性研究)与(桥隧可行性研究现状)。 7、详细勘察的步骤为(前期的准备工作)、(沿线地质勘察)、(试验)、(整理资料)与(编写详勘报告)。 8、隧道勘察的主要方法有(收集研究既有资料)与(调查与测绘)。 9、隧道勘察的主要手段有(挖探)、(简易钻探)、(钻探)与(地球物理勘探)。 10、隧道的纵坡有(单向坡)与(人字坡)两种;纵坡不小于(0.3%),不大于(3%);控制纵坡大小的主要因素是(通风问题)与(排水问题)。 11、隧道断面设计主要解决(内轮廓线)、(轴线)与(厚度)三个问题。 12、道路隧道结构构造由(主体构造物)和(附属构造物)两大类组成;主体构造物通常指(洞身衬砌)和(洞门)构造物。 13、衬砌结构的类型有(直墙式衬砌)、(曲墙式衬砌)与(复合式衬砌)等。 14、洞门的形式有(端墙式洞门)、(翼墙式洞门)、(环框式洞门)、(台阶式洞门)与(遮光棚式洞门)。 15、常用的永久衬砌形式有(整体衬砌)、(复合式衬砌)、(拼装衬砌)与(锚喷衬砌)等4种。 16、围岩分级的指标有(单一的岩性指标)、(单一的综合岩性指标)与(复合指标)几种。 17、工程地质调查主要采用(直接观察)与(访问当地群众)的方法。 18、我国隧道排防水采用(“以排为主,防、排、截、堵相结合”)的综合治理原则。 19、隧道通风大体分为(自然通风)与(机械通风)两种方式。机械通风又分为(纵向通风方式)、(半横向通风方式)、(全横向通风方式)与(组合通风方式)四种。 20、围岩压力按作用形态分为(松散压力)、(形变压力)、(膨胀压力)与(冲击压力)。

四年级语文下册第六单元知识点梳理

【名师课堂】部编版四年级语文下册 第六单元知识点梳理 知识点一:字音精讲 1.易读错的字音 吃荤(hūn)攥(zuàn)着黝(yǒu)黑苇絮(xù)笤(tiáo)帚(zhōu)扭(niǔ)身糠(kāng)皮嗖嗖(sōu)哐(kuāng)啷(lāng)门槛(kǎn)拧(níng)紧推搡(s ǎng) 劫(jié)难糠(kāng)皮嘟囔(nāng)刀鞘(qiào)咧(liě)嘴趔(liè)趄(qiè)吆(yao)喝漩(xuán)涡恍(huǎng)惚(hū)嘱(zhǔ)咐雪屑(xiè)济济(jǐ)轮廓(kuò)捋(luō)下祈(qí)求 2.易混淆的多音字 zuān(钻研) lù(露营) sāi(塞车) luò(落叶) bā(扒开) zhá(挣扎) 钻露塞落 là(落下)扒扎 zā(包扎)zuàn(钻石) lòu(露面) sài(边塞) lào(落枕) pá(扒手) zhā(扎起) 知识点二:词语精讲 1.词语听写 保姆滋味谜语翘起恍惚和尚潦草沮丧倔强拘束熟悉妨碍倾覆空寂抛落抚摸清新 唯恐遗憾晋察冀藏猫猫光溜溜睁眼瞎鼓囊囊手榴弹红绸子大拇指暖和和亮堂堂 毛茸茸蓬松松笑眯眯芦苇芦花柔软扭身泥鳅发愣苇席哐啷咔啦枪栓嗖嗖拧紧胳膊劫难炕沿枕头鬼脸戒指柜板枪声扒开敌人尸首漩涡防备慌忙 2.熟记四字词语

咕咚咕咚哗啦哗啦唔哩哇啦推推搡搡嘟嘟囔囔嗷嗷直叫风靡全国一生不吭 哭声嘹亮老老少少干干净净漫天大雪咯吱咯吱啧啧称赞有志不在年高飘飘悠悠 钻上钻下黝黑发亮嗡嗡嗡嗡歪歪斜斜吧嗒吧嗒 3.形近字 柜(柜子)绸(绸缎)尸(尸体)慌(慌忙)搏(搏击)晋(晋中)炕(土炕)栓(木栓) 拒(拒绝)调(调节)户(户口)谎(说谎)膊(胳膊)普(普通)坑(火坑)拴(拴紧) 4.近义词 潦草—马虎沮丧—失落镇静—沉着拘束—拘谨抱怨—埋怨妨碍—阻碍厚实—结实空寂—空旷 唯恐—害怕歪歪斜斜—歪歪扭扭柔软—柔嫩扭身—转身发愣—发呆劫难—灾难温和—温柔 防备—防守慌忙—慌乱嘱咐—叮嘱恍惚—隐约倔强—固执 5.反义词 镇静—慌乱拘束—洒脱熟悉—陌生鲜明—灰暗空寂—热闹便宜—昂贵仰—俯 柔软—坚硬温和—严厉慌忙—镇静恍惚—清楚倔强—温顺潦草—工整沮丧—兴奋 6.词语搭配 (惊慌)地看着 (嗷嗷)地叫着 (飘飘悠悠)地飞来 (雪白)的芦花 (飘着)的浮云 (悲伤)地哭着(愤怒)地指着 (鹅毛般)的苇絮 (明亮)的眼睛 (黄绿)的芦苇 知识点三:句子精讲 1.比喻句 (1)一只胖胖的手在我的手掌里,像一条倔强的活鱼一样挣扎着。 (2)蓝蓝的天上飘着的浮云像一块一块红绸子,映在还乡河上,像开了一大朵一大朵鸡冠花。(3)芦花开的时候,远远望去,黄绿的芦苇上好像盖了一层厚厚的白雪。风一吹,鹅毛般的苇絮就飘飘悠悠地飞起来,把这几十家小房屋都罩在柔的芦花里。

语文A版四年级语文上册第六单元知识梳理

语文A版四年级语文上册第六单元知识梳理 分类:教学札记 2011-12-29 20:45阅读(?)评论(0) 第六单元知识梳理 单元知识分析: 本单元围绕“诚信、真爱”这一主题编排四篇课文,通过本单元的学习, 使学生认识到“诚信”比金钱更重要,父爱有很多种,真爱有别于溺爱,他能促使人进步,健康成长,爱是相互的,人与大自然中的生命也有爱,蝉的生命是短暂的,但它却利用有限的生命尽情歌唱。 单元学习目标: 学生从课文的学习中能感受到诚信的魅力,体会到真爱的温暖,树立积极向上的人生态度,教师要在教学中整合多种资源,关注课内外,关注学生已有的生活经验,引导学生走进教材,通过多种形式的诵读感悟文章的语言和意境,达到在读中识字,在读中提高朗读能力、在读中悟理,在读中积累运用语言的目的。 语文乐园中安排了象形字、反义词构成的四字词语,关于“雪”的名诗名句,写字板,阅读欣赏,学会读广告并按广告的要求写广告。 单元知识框架:

21、《比金钱更重要》课后练习 一、基础知识 1、会写字填空 检测侧身碰撞车辆照顾陌生车票无人知晓 2、近义词选择填空 义务责任 (1)教育好学生是教师的()。 (2)好好学习是学生的()。 事故故障 (1)他的汽车出了一点(),发动不起来。 (2)那边围了许多人,好像出了什么()。 3、加一加,再组词 ___()___() 成___()则___() ___()___() 4、多音字 ----------------() ----------------()尽重 ----------------() ----------------()

二、病句门诊 1、早晨,我穿着毛衣和帽子去上学。 _________________________________________________________ 2、春天的北京是个美丽的季节。 _________________________________________________________ 3、准备去买一批书。 _________________________________________________________ 三、阅读理解 1、课内阅读(阅读课文1-----3段回答问题) (1)文中用到的关联词是___________________,请你用这个关联写一句 话。 ------------------------------------------------------------------------------------------------ (2)那句话说明绿色小汽车的主人也有过失,但“我”主动承认事故责任? 用“------------”在文中画出来。 (3)没有见到车主,“我”是怎么做的?说明了什么? ______________________________________________________________ ___ ______________________________________________________________ ___ 2、课外阅读 太好啦太好啦听妈妈说我家的电脑跨上了信息高速路我情不自禁地欢呼起来电脑网络这个新鲜玩意儿到底是什么呢爸爸告诉我:“它就像一个遍布全球的巨大蜘蛛网,把每一个国家,每一个城市,甚至每一个家庭连接到一起。在互联网里,可以查阅信息,便捷地了解周围的世界;可以用自己的电子邮箱和全世界的小朋友建立联系;还可以参加网络上的购物、拍卖等各种活动。有了网络,咱们的地球就变成了一个小村庄,五湖四海的人们可以随时进行交流。 (1)、把文中缺标点符号的地方补上标点符号。

公共关系基础教案

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公共关系基础教案 目录 第一章形成意识 第一节公共关系的含义 第二节公共关系的基本特征 第三节现代公共关系的兴起和发展及对我国现代化建设的促进 第四章沟通协调 第一节组织内部的公共关系 第二节组织外部的公共关系 第五章培养素质 第一节公共关系人员的形象 第三节公共关系人员的基本条件 第三节公共关系人员的能力 第六章交际礼仪 第一节一般社交礼仪 第二节对外交往礼仪 第三节有关场合礼仪 第七章语言表达 第一节交际与交际技巧 第二节语言表达的基本要求 第三节陈述、说明和议论

第四节即兴发言 第八章演讲商谈 第一节演讲的作用和风度第二节演讲的语言技巧 第三节商谈的原则和过程第九章活动策划 第一节公共关系活动的方式第二节公共关系专题活动第四节公共关系策划 第十章 第十一章

第一章形成意识 第一节公共关系的含义 【教学内容分析】 学习公共关系科学,首先要了解公共关系的基本含义,公共关系的基本概念,通过案例的分析学习深入了解体会公共关系的内涵。 【教学目标】 知识目标和技能目标:理解公共关系的基本含义,公共关系状态、公共关系活动、公共关系 意识,树立初步的公共关系意识。 情感目标:提高公共关系学习的信心和热情。 【教学重点和难点】 教学重点:理解公共关系的基本含义,公共关系状态、公共关系活动、公共关系意识。 教学难点:树立公共关系意识,提高学生学习公共关系的信心。 【课时安排】1课时 【教学方法】讲述法、案例分析法、讨论法

【课堂外延】 1.知识补充:案例推荐 (1)有一位老人家的海尔电冰箱坏了,声音像拖拉机的响声一样大,老人家吓坏了,赶紧查海尔的服务电话,打过去。“我家的冰箱坏了,需要你们过来修一下”。然后告之在什么地点,冰箱大约什么样之类的。半个小时左右,一位服务人员骑着摩托过来了,进门就拿出一个单子说;“先生你先给我签字。老人心想冰箱还没给我修,让我签什么字?他说:“你帮我签一下,你是几点给我打的电话,还有我是几点到达的就可以”。 签完以后,他走到冰箱处,听一听,摸了摸,说:“先生你这个冰箱在这儿肯定修不好,需要拉走,我们会在两小时内把冰箱拉走,同时用一台冰箱来替换这个冰箱”。他走之前,老人问:“你进家门不看冰箱,为什么先签那个”。他说我们有一个时间的要求,必须在若干分钟内达到,让客户确认,不然要扣我们的工资,这让我们有了压力,必须高质量的完成好我们的工作。 两小时内,来了一个汽车,好几个人抬走了坏的冰箱,把替换的冰箱弄好,装上,插上电源,布都给你擦干净了,大约两天以后再把修好的给你送过来,替换的再拉走。后来老人讲如果我还需要微波炉,就买海尔的,就买海尔的。 (2)美国有一个豪诚公司,是多元化发展的公司。有一次两个员工出差,飞机在空中盘旋好长时间,机组人员已经通知所有乘客,飞机面临很大威胁。经过四十几分钟的空中搏斗以后,飞机安全着陆了,豪诚这两个员工就想利用这个机会宣传一下公司,他们向乘务人员要了纸笔写下了这样的字,“豪诚公司祝大家永远平安”、“豪诚公司向战胜这次空难的所有同胞致敬,并请你们享用豪诚的啤酒”。 当这两个员工手中拿着纸片下飞机的时候,所有的记者的镜头,所有记者的跟踪访问都围绕他俩展开,由此豪诚公司的啤酒生意在整个美国西部地区首屈一指。 (3)《公共关系实例与运作》中公关职能一章的〈长城托起长城饭店〉 2.拓展训练: 在我们身边,可以开展哪些公关活动,提高同学们的礼仪形象,做文明学生,并提高自己所在组织(班级)的形象。

隧道工程(自考复习资料)

新奥法:奥地利隧道施工法,是奥地利工程师布希维首先提出来的。以控制爆破为开挖方法,以 喷射混凝土和锚杆作为主要支护手段,通过检测控制围岩的变形,动态修正设计参数和变动施工 方法的一种隧道施工方法,其核心内容是充分发挥围岩的自承能力。在锚喷支护技术基础上总结 和发展起来的。 锚喷支护:是喷射混凝土、锚杆、钢筋网喷射混凝土等结构组合起来的支护形式。 喷射混凝土是利用高压空气将掺有速凝剂的混凝土混合料通过混凝土喷射机与高压水混合喷射到 岩面上迅速凝结而成的。 实际开挖线:为保证衬砌外轮廓,开挖时往往稍大,尤其是用钻爆法开挖时,实际开挖线不可避 免的成为不规则形状,因为比衬砌外轮廓线大,有成为超挖线。衬砌内轮廓线:衬砌的完成线在 内轮廓之内的空间,即为隧道的净空断面。衬砌外轮廓线:外保持净空断面的形状,衬砌必须有 足够的厚度的外缘线,也称为最小开挖线。 墙效应:隧道边墙给驾驶员带来的唯恐和冲撞的心里影响。 隧道净空:隧道衬砌内轮廓线所包围的空间,包括隧道建筑限界通风及其他所需的断面积。 支护结构通常分为初期支付(一次支护)和永久支护(二次支护、二尺衬砌)。一次支护是为了保证施工的安全,加固岩体和阻止围岩的变形、坍塌而设置的临时支护措施(木支护、型钢支护、 锚喷支护等。)二次支护是为了保证隧道净空和结构的安全而设置的永久性衬砌结构,有整体衬砌、复合衬砌、拼装衬砌、锚喷衬砌等。 围岩压力:隧道开挖后,围岩作用在支护上的压力,是隧道支撑和衬砌结构的主要荷载之一。其 性质、大小、方向以及发生和发展的规律,对正确进行隧道设计和施工有很重要的影响。 空间效应:洞室在掘进过程中,由于受到开挖面的约束。使开挖面附近的围岩不能立即释放其全部位移,这种现象称为开挖面的空间效应。 弹性抗力:约束着衬砌变形的围岩,相应的产生被动抵抗力,即为弹性抗力。 隧道:以任何方式修建,最终使用于地表以下的条形建筑物,其空洞内部净空面积在2平方米以上者均为隧道。 曲墙式衬砌:对于Ⅳ级以下围岩中,水平压力较大,为了抵抗较大的水平压力把边墙也做成曲线 形状,当基础条件较差时,防止衬砌沉陷,抵抗底鼓压力,使衬砌做成环形封闭结构可以设置仰 拱。 直墙式衬砌:通常用于垂直围岩压力大、水平围岩压力小的情况,一般用于ⅠⅡ级围岩,有时也 用于Ⅳ级。 隧道亮度曲线:沿隧道轴线,由入洞外的接近段、过渡段、中间段直至出口段,司机在白天所需 要的路面亮度变化曲线,称为亮度曲线。 纵向式通风:从一个洞口直接引入新鲜空气,由另一个洞口把污染空气排出的方式,与自然通风 原理是相同的。 半衬砌:拱圈直接支承在坑道围岩侧壁上时,称为半衬砌。 越岭隧道:从一个水系进入另一个水系,路线为穿越分水岭而修建的隧道。 简答题 新奥法施工的原则: 1.少扰动; 2.早喷锚; 3.勤测量; 4.紧封闭。分全断面法、台阶法、分部开挖法。 隧道综合治水的原则:为避免和减少水的危害,我国隧道工作者总结出“截、堵、排相结合”的 综合治水原则,并以模筑混凝土衬砌作为防水(治水)的基本措施。 截:在隧道以外将地表水和地下水疏导截流,使之不能进入隧道工程范围内; 堵:以衬砌混凝土为基本防水层,其他防水材料为辅助防水层,阻隔地下水,使之不能进入隧道 内的防水措施,必要时可采用注浆堵水措施。 排,认为设置排水系统,将地下水排出隧道。 结合,就是因地制宜、综合考虑、适当选择治水方案、做到技术可行、费用经济、效果良好、保

四年级语文下学期第六单元考点梳理(带答案)

第六单元考点梳理 考点一:字音 1. 易混的多音字 nāng(软鼓囊囊)kēng(一声不吭) 囊NáNG(皮囊)吭HáNG(引吭高歌) sāi(活塞)qiáng(坚强) 塞sài(边塞)强qi ǎng(勉强) sè(堵塞)jiàng (倔强) 2. 易读错的字 晋级(jìn)扭打(niǔ)捆绑(kǔn)枪栓(shuān)苇絮(xù)扒开(bā)趁机(chèn)安徽(huī)嘴唇(chún)倔强(jué) 沮丧(jǔ)叮嘱(zhǔ)嘹亮(LIáO)纸屑(xiè)搓手(cuō) 祈求(qí)遗憾(HàN)沮丧(jǔ)轮廓(kuò) 考点二:词语听写 土炕铅笔迈步胳膊劫难绸缎扒开敌人尸首趁早慌张防备戒指晋察冀消防栓飘飘悠悠哗啦哗啦歪歪斜斜 推推搡搡软鼓囊囊日益高涨满头大汗一声不吭不约而同 考点三:词语积累 1. 词语搭配 厚厚的白雪鹅毛般的苇絮柔软的芦花长长的步枪光溜溜的脊背

2. 3. 4. 考点四:句子赏析 1. 我们是中国人,我们爱自己的祖国。。 品析:这是雨来能够掩护革命干部、同敌人作斗争的思想基础,正是因 为雨来有对祖国深切的爱,才有了后面勇救交通员、勇斗敌人的故事。 2. 有志不在年高。 品析:有志气不在于年纪大,指人贵在有志,不能凭年龄大小来衡量志 气的大小;只要有志气,年轻也能做出优异成绩。这是人们对雨来的赞扬, 雨来热爱祖国、勇敢机智的品质深深感动、激励着芦花村的人们。 考点五:课文理解 可怕的狂热 奇妙的事情 金黄的稻草 细软的绒毛 空寂的街上 清新的空气 近义词 针刺般的寒冷 劫难—— 灾难 趔趄—— 踉跄 商量—— 商议 防备—— 防范 爽气—— 爽快 胆怯—— 害怕 拘束—— 拘谨 妨碍—— 阻碍 祈求—— 祈祷 反义词 温和—— 暴躁 柔软—— 僵硬 防备—— 松懈 凶恶—— 和善 紧张—— 松懈 狂热—— 冷淡 镇静—— 慌乱 厚实—— 单薄 欣喜—— 悲伤 描写人物性格特点的词语 文质彬彬 宽以待人 知难而上 不拘小节 直率坦诚 足智多谋 目中无人 逆来顺受 光明磊落 心直口快 谨小慎微 斤斤计较

公共关系学复习资料(答案)(1)

1、公共关系的英文是( A ) A 、 publicrelations B 、 publicrelation C 、 publicationrelations D 、 publication relation 2、公共关系学可直接称为( A ) A 、公众关系 B 、人际关系 C 、人群关系 D 、社区关系 3、组织与公众联结的方式是( B ) 6、公共关系的主体是( C ) 7、公共关系的客体是( A ) 8、公共关系的中介环节是( B ) 9、( B )是指与组织虽有关系,但联系较少,影响较小的一类公众,其重要性最 小。 第2章 第1章 A 、大众传播 B 、传播 C 、人际沟通 D 、 舆论宣传 A 、社会公众 B 、传播 C 社会组织 D 、 政府官员 A 、社会公众 B 、传播 C 社会组织 D 、 政府官员 A 、社会公众B 、传播C 社会组织 D 、 政府官员 A 、潜在公众B 、边缘公众C 独立公众 D 、知晓公众 10、(C )又称为中立公众或不确定公众 或未表态的公众。 ,是指那些持中立态度或态度不明确 A 、潜在公众 B 、边缘公众 C 独立公众 D 、知晓公众

11、利用新闻媒介揭露垄断企业“愚弄公众”的现象,形成了美国近代史 上著名的(C)。 A、报刊宣传运动 B、便士报C揭丑运动D、民主政治运动12、1906年, 艾 维李发表的著名文件是(B)。 A、《有效的公共关系》B《原则宣言》C《公众舆论之形成》D、《公共关系学》 13、被誉为“公共关系之父”的是(艾维。 李)。 第3章 16、组织形象的基础是(D)。 A、员工形象 B、管理形象C机构形象D、产品形象17、设计一个具有独特风格的组织名称和商标是处于(B)。A、初创时期B、发展困难时期C发展顺利时期D、形象受损时期 18、民主参与法是用来协调(D)的。 A、外部公众关系 B、顾客公众关系 C、媒介公众关系 D、内部公众关系 19、树立交往合作的观念,提高社交能力属于公众关系的(D) 。 A、优化环境功能 B、提高素质功能C塑造形象功能D、协调关系功能 20、组织公共关系活动的出发点应当是(A)。 A、从事实出发 B、从理想出发C从利益出发D、从专家意见出发 21 、组织最需要广告宣传,可恰恰拿不出大笔广告费是组织处于( 初创时期B、发展困难时期C发展顺利时期D、形象受损时期A)A、 第4章 26、公共关系部是一种具有服务性质的、较高层次的间接(D) 。 A、管理者 B、领导者C生产者D、管理部门

隧道工程知识点总结-期末复习【打印版】

1.水工隧道:引水隧洞、尾水隧洞、导流隧洞、泄洪隧洞、排沙隧洞 矿山隧道:运输巷道、给水巷道、通风巷道 2. 铁路工程地质技术规范的总要求: (1)查明隧道通过地段的地形地貌、底层岩性、构造; (2)查明隧道是否通过煤层、膨胀性地层及有害矿体等; (3)查明不良地质特殊地质对隧道通过的影响,特别是洞口位置及边坡仰坡影响; (4)查明隧道附近井、泉的分布情况,分析水文地质条件、地下水类型、水质来源; (5)对深埋隧道做隧道地温升温预测; (6)综合分析岩性、构造、地下水分析围岩级别; (7)在隧道洞口需要接长明洞,查明洞底工程地质条件; (8)查明横洞、平行导坑、竖井、斜井等工程地质条件。 3. 地层、岩性调查时要特别注意软弱岩层和特殊岩层的分布和厚度。 4.岩体的基本工程性质: ①岩体是处于一定的天然应力作用之下的地质体; ②岩体的物理力学性质不均匀; ③岩体是由结构面分割的多裂隙体; ④岩体具有各向异性; ⑤岩体具有可变性。 5. 初始应力:天然应力这种状态是指岩体在天然状态下所具有的内在应力,可称之为岩体的初始应力,也称地应力。 6. 岩体的初始应力主要是由于岩体的自重和地质构造作用和地质低温作用引起的。地温在深部岩体中作用明显。 7. 岩体中的结构面按成因可以分为:(1)原生结构面(2)构造结构面(3)次生结构面 8. 风化作用普遍存在,风化作用随着深度逐渐减弱,改变了岩石的矿物组成和结构构造,不同风化程度的岩体物理力学性质不同。 9. 风化岩石按风化的剧烈程度分为若干级:全风化带W4、强风化带W3、中风化带W2、弱风化带W1核微风化带(新鲜)五带。

10.岩石的质量指标:RQD=求和li/L*100% 12.不同岩体条件中开挖隧道后岩体所表现出的性态分为:充分稳定、基本稳定、暂时稳定和不稳定四种。 13.围岩分级的基本要素:(1)与岩性有关(2)与地质构造有关(3)与地质状况及岩性综合因素有关。 14. 以岩石强度为基础的分级方法分为:坚石、次坚石、松石和土。 15. 以岩石质量为指标的分级方法--RQD法 RQD=(10cm以上岩芯累计长度)/(单位钻孔长度)*100% 16.综合多因素提出的分级方法: 岩体质量--Q分级法 Q=RQD/Jh*Jr/Ja*Jw/SRF 17. 目前铁路隧道围岩分级采用以围岩稳定性为基础的分级方法。 18. 围岩基本分级应由岩石坚硬程度和岩体完整程度两个因素的定性特征和定量的基本质量指标BQ,综合进行初步分级。 19. 根据单轴饱和极限抗压强度Rc分为5级:极硬岩、硬岩、较软岩、软岩、极软岩。 Rc>60 30~60 15~30 5~15 Rc<5 20.隧道级别修正:围岩级别应在基本分级的基础上,结合隧道工程的特点,考虑地下水状态、初始地应力状态等必要的因素进行修正。 22.地下水对围岩的影响主要表现在:①软化围岩;②软化结构面;③承压水增加滑动力,使围岩失稳。 23.风化作用的影响:隧道洞深埋深较浅,应根据围岩受地表的影响状况进行修正。当围岩为风化层时应按风化层的围岩基本分级考虑。围岩仅受地表影响时,应较相应围岩降低1~2级。 24.岩体完整程度的定量指标用岩体完整性系数Kv表示 第三章隧道线路及断面设计 1.选择越岭隧道的位置主要以选择垭口和确定隧道高程两大因素为依据。 2.越岭线上选址:宁长勿短、宁深勿浅、避免洞口深挖

四年级下册语文第六单元单元导语和整理

四年级第八册第六单元整组教学 专题走进田园热爱生活 一.单元要点分析 本组教材围绕“走进田园,热爱乡村”这一专题,编排了四篇文章。都围绕乡村生活,田园风光来叙事描写。 《乡下人家》描写了富有诗意的乡村生活;《牧场之国》展现了异国的田园风光;《古诗词三首》更是生动地再现了一幅幅乡村风光,田园诗趣的图画;《麦哨》则侧重于描绘了乡村儿童在田间无拘无束,充满乐趣的童年生活。每篇文章虽然从不同角度描写了乡村的景色和生活,描写方法也各具特色,但都表达了同样的情感,即对乡村田园生活由衷地热爱,赞美与向往。 21 乡下人家 文章按房前屋后的空间顺序和春夏秋三季,白天傍晚夜间的时间顺序交叉描写,展现了乡下人家朴实自然和谐,充满诗情画意的乡村生活,也赞扬了乡下人家热爱生活,善于用自己勤劳的双手装点自己的家园,装点自己生活的美好品质。作者还通过对动植物拟人化的描写来表达自己热爱乡村生活的情感。 22 牧场之国 课文为我们描绘了荷兰牧场白日的辽阔无际,宁静和谐和夜晚的祥和寂静,神秘含蓄,让我们看到了荷兰牧场和运河交错的独特地形,看到了荷兰蓝天,碧草,牛羊组成的优美迷人,自然和谐的景观,所以作者四次讲到“这就是真正的荷兰”。这既是作者在向人们介绍荷兰的特点,更是对荷兰的美景发出的赞叹。本文语言生动,形象传神,比喻,拟人是本文语言上的一个突出特点。 23 古诗词三首 《古诗词三首》分别写了乡村田园与水乡渔村的勤劳,快乐的生活,表达了乡野生活的平静,安宁。在读中体会田园,渔乡的生活,或繁忙或闲适,或安宁,以读来体会理解,对诗歌展开想象,进行相象,补充,构成美好的画面,用自己的语言进行描绘,使文章更加生动,具体。 24 《麦哨》 以生动有情趣的笔调抒写着乡村孩子快乐的童年,在声声麦哨里,孩子们勤劳地割草,快乐地嬉戏,嘴馋地吮吸,表现了乡村浓浓的欢乐。教学中了解作者

体育公共关系

1.体育组织的含义 作为体育公共关系活动主体的体育组织,它是人们按照特定的目标、任务和形式建立起来的协调力量和行动的合作系统。 2.体育组织的构成要素 1.目标及任务 2.人员 3.物质条件 4.内在结构与机制 5.信息联系 3.体育公共关系的性质 1.以公众为目标 2.以获得美誉为目标 3.以真诚为信条 4.以互惠为原则 5.以沟通为手段 6.以长期性、战略性、持久性为基本方针 4.体育公众 因面临某个共同问题而形成的与体育组织利益相关且相互影响、相互作用的社会群体称为体育公众。 体育公众的特征: 相关性、同质性、群体性、多维性、可变性。 5.体育公众的分类 1.根据体育公众与体育组织的相互关系分类:内部体育公众和外部体育公众 2.根据体育公众对体育组织的不同态度分类:顺意体育公众,逆意体育公众,独立体 育公众。 3.根据体育公众对体育组织的重要性不同分类:首要体育公众,次要体育公众,边缘 体育公众 6.体育公共关系传播的特点:双向性,共享性,快速性,广泛性(25) 7.信息传播在体育公共关系中的作用 1.信息传播可以使体育公共关系主体准确地把握自身与现实环境及其关系的真实状 况 2.信息传播可以使体育公共关系主体增强选择能力,扩大选择范围,从而提高决策的 可行性 3.信息传播可以使体育公共关系主体的预定目标易于实现。 8.体育公共关系传播的基本方式 一.人际传播 特征:1个体性强 2参与度高 3从传播的信息看,其交流的手段丰富,符号多样化 4从传播的反馈看,其速度最快,交流的双方最易于相互调整适应 5最富有人情味 6不利于信息广泛、迅速、准确的传递 二.体育组织传播 特称:1.有特定的传播主体——体育组织

公共关系学复习资料(新)

公共关系学复习资料: 1、公关三要素:社会组织,公众,传播活动。公关三特征:以事实为依据、以传播为手段、以互惠为原则。 形象:公众对社会组织的总体评价,也是社会组织的表现与特征在公众心目中的反映。 2、公共关系的含义:社会组织为了塑造组织形象,通过传播、沟通手段来影响公众的科学与艺术。它有公共关系状态、公共关系活动、公共关系学科这三种指代。 3、组织形象识别:组织形象识别是由社会组织制作识别体系,进行公关传播活动,进入公众视野,从而形成组织形象。 组织形象识别系统包括:物系统——VI(设计整合化)——组织的脸 人系统——MI(理念共识化)——组织的心事系统——BI(活动环境化)——组织的手评介组织形象的三个基本指标:认知度(一个社会组织被社会公众所认识、知晓的程度,包括深度和广度)、美誉度(一个社会组织获得公众赞美、称誉的程度)、和谐度(一个社会组织在发展运行过程中,获得目标公众态度认可、情感亲和、言语宣传、行为合作的程度) 4、公关的兴起和发展: 1\艾维.李,核心理论:公众必须被告知—向公众讲真话; 2\伯纳斯,核心理论:投公众所好; 3\卡特里普与森特,《有效公共关系》,公关圣经; 4\格鲁尼格,公关实践的四种模式:新闻代理模式,公共信息模式,双向非对称模式,双向对称模式。 5中国公关兴起的背景: 闭关锁国走向对外开放;计划经济走向市场经济;政府本位走向社会组织本位;社会媒介资源匮乏走向媒介化社会。 中国公关目前存在的问题:社会公众对公共关系的认识还存在很多误区;整个公关市场仍处于无序状态,缺乏统一的收费标准和服务规范;高素质公关人才的严重缺乏制约了中国公关业的迅速发展;理论研究比较滞后:公关理论水平滞后于公关实践水平、公关基础理论研究滞后于应用性研究、公关研究者的理论视角存在偏差、公关理论研究资源严重缺乏。 中国公关发展趋势:公关运作的国际化和本土化融合趋势大大增强;公关公司定位从代理性发展为咨询顾问性;公关专业服务进一步细化和深化;中资客户将成为中国公关咨询业市场新一轮竞争的焦点;公关人才市场竞争将更趋激烈;公关理论研究更加深入。 4、公共关系的本质属性: (广告本质属性——“付费性”;新闻本质属性——“真实性”;营销本质属性——“交易性”;人际关系本质属性——“个体性”)公共关系的本质属性是“公共性”,即“第三方市场”。公共关系是一种“组织——公众——环境”关系:从组织的角度来看,公共关系通过倡导组织对社会责任的担当,来说通、监督和制造民意,公关人员扮演着“组织的良心”和“道德卫士”的角色;从公众、环境的角度来看,它又代表着公众和环境的意见,向组织传达、沟通。 4、公共关系“4P”: 公众性:Public,是一种对象性;公开性:Publicity,是一种手段性; 公共舆论性:Public Opinion,是一种内容性;公益性:Public Interest,是一种伦理属性。 5、公共关系基本特征: 说真话:是有效公共关系的一个必要条件——信息真实、态度真诚、好事要出门、坏事要讲清 做善事:是积极公共关系的活动方式——利己利人,有社会责任感。 塑美形:是成功公共关系的追求目标——对组织美誉度、和谐度的提升(理念美、行为美、视觉美) 公共关系通俗定义:公共关系是一门说真话、做善事、塑美形的科学和艺术。 6、公共关系的主要功能: 说服:改变组织或公众的态度和行为;制造舆论;影响民意。 倡导:倡导一种组织定位和品牌个性;倡导一种文化认同;倡导优惠的产业政策、优良的以营环境、健康的消费理念。 咨询:为决策提供信息咨询;协助拟定和选择决策方案;从公共关系角度评价决策效果;为确立决策目标提供咨询建议。 管理:战略管理;信息管理;传播管理;关系管理;声誉管理;危机管理;议题管理;活动管理。 7、公关与新闻的比较: 相同点:1都是一种信源的提供者,而且在很大程度上,新闻依赖于公关人员提供的信息。2他们都有相似的价值观,即以事实为基础,以说真话为原则,代表了第三方立场,具有一定的公信力。3他们在舆论上互相控制,在信源上互相依赖,为了交换资源和达成

隧道工程复习资料(网上)

隧道工程复习资料 1.隧道的定义及分类? (1)以某种用途、在地面下用任何方法按规定形状和尺寸修筑的断面积大于2平方米的洞室。(2)(一)交通隧道 1.铁路隧道 2.公路隧道 3.水底隧道 4.地下铁道 5.航运隧道 6.人行地道(二)水工隧道 1.引水隧道 2.尾水隧道 3.导流隧洞或泄洪隧洞 4.排沙隧洞(三)市政隧道1.给水隧道2.污水隧道3.管路隧道4.线路隧道5.人防隧道(四)矿山隧道1.运输巷道2.给水巷道3.通风巷道1.选择越岭隧道位置的两大因素:选择哑口、确定隧道高程。 2.河谷线上,隧道位置选择多年实践总结一条经验:“宁里勿外”意思是河谷线上,隧道位置稍向内靠为好。 3.隧道洞口位置选择的原则:早进晚出. 4.隧道洞口位置选择的依据:1.洞口不应宜设在垭口沟谷的中心或沟底低洼处,在一般情况下垭口沟谷在地质构造上是最薄弱的环节,常会遇到断层带、古坍方冲积土等不良地质。2.洞口应避开不良地质地段,如断层、滑坡、岩溶及避开地表水汇集处。3.当隧道线路通过岩壁陡立,基岩裸露处时,最好不刷动或少刷动原生地表,以保持山体的天然平衡。4.减少洞口路堑段长度,延长隧道,提前进洞。 5.洞口线路宜于等高线正交。当线路位于有可能被水淹没的河滩或水库回水影响范围以内时,隧道洞口标高应高出洪水位加破浪高度,以防水灌入隧道。7.为确保洞口稳定安全,边坡及仰坡均不宜开挖过高。当洞口附近遇有水沟或水渠横跨线路时,可设置拉槽开沟的桥梁或涵洞,以排泄水流。9.当洞口地势开阔,有利于施工场地布置时可利用弃渣有计划有目的的改造洞口场地,以便布置运输通道、材料堆放场、生活用房等。 5.隧道内线路纵断面设计的内容、坡道形式?答:(1)就是要选定隧道内线路的坡道形式、坡度大小、坡段长度和坡段间的衔接等。(2)单面坡和人字坡 6.隧道净空:指隧道衬砌的内轮廓所包围的空间。隧道建筑限界:指包围“基本建筑界限”外部的轮廓线。基本建筑限界:指线路上各种建筑物和设备均不得侵入的轮廓线。机车车辆限界:指机车车辆最外轮廓的限界尺寸。四者关系:铁路隧道净空是根据隧道建筑限界确定的,而隧道建筑限界是根据基本建筑限界制定的,基本建筑限界又是根据机车车辆限界制定的。 7.限界:是一种规定的轮廓线,这种轮廓线以内的空间是保证列车安全运行所必需的。建筑限界:是建筑物不得侵入的一种限界。 8.掌握单双线铁路曲线隧道加宽的原因及加宽值的计算方法原因:1)车辆通过曲线时,转向架中心点沿线路运行,而车辆本身却不能随线路弯曲,仍保持其矩形形状,故其两端向曲线外侧偏移,中间向曲线内侧偏移。2)由于曲线外轨超高,车辆向曲线内侧倾斜,使车辆限界上的控制点在水平方向上向内移动了一个距离。 9.掌握铁路曲线隧道与直线隧道衬砌的衔接方法并用图示表示见书P28。 1.掌握隧道衬砌的主要方式及适用条件,复合式衬砌的主要组成部分主要方式:(一)整体式混凝土衬砌1)直墙式衬砌:适用于地质条件比较好,以垂直围岩压力为主而水平压力比较小的情况,主要适用于Ⅰ~Ⅲ级围岩。2) 曲墙式衬砌:适用于地质较差,有较大水平围岩压力的情况,适用于Ⅳ级及以上的围岩,或Ⅲ级围岩双线。(二)装配式衬砌:目前多在使用盾构法施工的城市地下铁道和水底隧道中采用。(三)锚喷式衬砌:在围岩整体性较好的军事工程、各类用途的使用期较短及重要性较低的隧道中广泛使用。(四)复合式衬砌:是目前公路、铁路隧道主要的结构形式。复合式衬砌主要由锚喷支护和混凝土衬砌组成。 2.掌握隧道洞门的类型作用类型:洞口环框、端墙式洞门、翼墙式洞门、柱式洞门、台阶

人教版小学四年级上册语文第六单元知识点整理

人教版小学四年级上册语文第六单元知识点整理 第六单元(人间真情)体会:我体会到人与人之间要互相关爱,互相帮助。 教材内容分析: 本组教材编排了三篇精读课文、两篇略读课文。《古诗两首》表现了朋友间真挚的爱,《搭石》体现了乡亲们淳朴的爱,《跨越海峡的生命桥》展现了爱的奇迹,《卡罗纳》诠释了爱的真谛,《给予是快乐的》阐释了爱的哲理。这一篇篇充满人间真情和爱意的课文一定会拨动学生爱的心弦,激起仿效的意愿。 第二十课《古诗两首》 一、《黄鹤楼送孟浩然之广陵》是一篇精读课文,为唐代大诗人李白所写。这首诗表达了诗人送别好友时无限依恋的感情,也写出了祖国河山的壮丽美好。 《送元二使安西》是盛唐著名诗人、画家和音乐家王维所著的一首脍炙人口的送别诗。王维的好友元二将远赴西北边疆,诗人特意从长安赶到渭城来为朋友送行,其深厚的情谊,不言可知。这首诗既不刻画酒筵场面,也不直抒离别情绪,而是别巨匠心地借别筵将尽、分手在即时的劝酒,表达出对友人的留恋、关切和祝福。 二、课内知识 1、这两首诗都是(送别诗),《黄鹤楼送孟浩然之广陵》是唐代大诗人李白所写,这首诗表达了诗人送别好友时无限依恋的感情,也写出了祖国河山的壮丽美好。诗的前两行叙事,后两行写景。 《送元二使安西》的作者是唐代著名诗人王维。表达出对友人的留恋、关切与祝福。 2、诗句意思 (1)故人西辞黄鹤楼,烟花三月下扬州。

这句诗的意思是:我的好友孟浩然在繁花似锦的阳春三月,由黄鹤楼出发,乘船东行到扬州去。“烟花三月”写出了三月的扬州烟雾迷蒙、繁花似锦的景象。 (2)孤帆远影碧空尽,唯见长江天际流。这句诗的意思是:我伫立江边,目送友人的小舟愈行愈远,渐渐消失在水天相接的地方,只望见浩浩荡荡的江水流向天际。“孤帆”并不是说浩瀚的长江上只有一只帆船,而是说诗人的注意力全部集中在好友乘坐的那只帆船上。 (3)劝君更尽一杯酒,西出阳关无故人。 这两行诗由写景转入送别:朋友,请再喝尽这杯醇香的美酒吧,等你西行出了阳关之后,就再也没有一个交情深厚的老友了。“更”字表明(酒已劝了多次、尽了多杯。) 3.相关链接: 送别诗:王维《山中送别》:山中相送罢,日暮掩柴扉。春草年年绿,王孙归不归? 高适《别董大》:千里黄云白日曛,北风吹雁雪纷纷。莫愁前路无知己,天下谁人不识君。 三、课内阅读题: 黄鹤楼送孟浩然之广陵 故人西辞黄鹤楼,烟花三月下扬州。 孤帆远影碧空尽,惟见长江天际流。 (1)这首诗的作者是_______代大诗人________,其中诗中的“故人”是________。我们以前学过这位作者的诗有____________和________。我还知道他另外一首赠别诗是________。我们学过的这位“故人”的诗有______________。 (2)这首诗紧扣一个“送”字展开,“送”的时间是_____________,“送”的地点是

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