ABO血型分型方法

华科基因ABO血型分型方法

按照Bernstein三复等位基因学说，ABO基因座主要有三个等位基因A、B和O。A、B对O为显性，O为隐性。ABO血型的表型与基因型的关系是：A型为AA或AO；B型为BB 或BO；AB型为AB；O型为OO。因为隐性基因O存在，ABO基因型不能直接用凝集反应来确定，但可通过DNA分型技术直接检测基因型，或通过表型的家系调查来推定。

ABO血型分型方法

一、ABO血型血清学分型方法

ABO血型是根据红细胞与特异性抗体的反应来分型。即用抗A抗体判定A抗原，用抗B抗体判定B抗原，这种检查法称作正定型试验(direct grouping)。同时依据血清中的凝集素与标准型别红细胞膜上的凝集原反应的性质来检验结果。即用标准的A型红细胞判定抗A抗体，用标准的B型红细胞判定抗B抗体，称作反定型试验（reverse grouping)。为使结果准确，应进行正反两个试验来分型，同时也应用抗H抗体判定H抗原。当正反试验的结果与常规的ABO分型原则不符的时候,提示可能是弱亚型或变异型。

二、ABO血型DNA分型方法

分子生物学技术将ABO血型分型由血清学水平深入到基因水平。DNA分型方法都是针对核苷酸顺序差异而设计的。常用的有序列特异性引物PCR技术与PCR-RFLP技术等。序列特异性引物PCR(PCR-sequence-specific primers,PCR-SSP)是根据等位基因的序列，设计具有序列特异性的引物，对样本进行DNA分型。该方法是以引物决定分型特异性，具有特异性强、重复性好、结果易于判定的优点。

ABO血型分型可提供以下样本：

常用样本：血液，血痕，带毛囊的毛发，口腔粘膜细胞（口腔拭子）等。

特殊检材：如精斑、混合斑、肌肉、烟蒂、胎儿的羊水等都可以采用。

采样建议：

1.我们建议您采用血痕或口腔棉签作为检测样本，或采用毛发（带毛囊）作为检测样本。

2.如果您的孩子未满四周岁，请采用血痕、口腔棉签作为样本。

3.如果孩子还未出生，则参考羊水样本抽取方法。

ABO血型分型方法

华科基因ABO血型分型方法 按照Bernstein三复等位基因学说，ABO基因座主要有三个等位基因A、B和O。A、B对O为显性，O为隐性。ABO血型的表型与基因型的关系是：A型为AA或AO；B型为BB 或BO；AB型为AB；O型为OO。因为隐性基因O存在，ABO基因型不能直接用凝集反应来确定，但可通过DNA分型技术直接检测基因型，或通过表型的家系调查来推定。 ABO血型分型方法 一、ABO血型血清学分型方法 ABO血型是根据红细胞与特异性抗体的反应来分型。即用抗A抗体判定A抗原，用抗B抗体判定B抗原，这种检查法称作正定型试验(direct grouping)。同时依据血清中的凝集素与标准型别红细胞膜上的凝集原反应的性质来检验结果。即用标准的A型红细胞判定抗A抗体，用标准的B型红细胞判定抗B抗体，称作反定型试验（reverse grouping)。为使结果准确，应进行正反两个试验来分型，同时也应用抗H抗体判定H抗原。当正反试验的结果与常规的ABO分型原则不符的时候,提示可能是弱亚型或变异型。 二、ABO血型DNA分型方法 分子生物学技术将ABO血型分型由血清学水平深入到基因水平。DNA分型方法都是针对核苷酸顺序差异而设计的。常用的有序列特异性引物PCR技术与PCR-RFLP技术等。序列特异性引物PCR(PCR-sequence-specific primers,PCR-SSP)是根据等位基因的序列，设计具有序列特异性的引物，对样本进行DNA分型。该方法是以引物决定分型特异性，具有特异性强、重复性好、结果易于判定的优点。 ABO血型分型可提供以下样本： 常用样本：血液，血痕，带毛囊的毛发，口腔粘膜细胞（口腔拭子）等。 特殊检材：如精斑、混合斑、肌肉、烟蒂、胎儿的羊水等都可以采用。 采样建议： 1.我们建议您采用血痕或口腔棉签作为检测样本，或采用毛发（带毛囊）作为检测样本。 2.如果您的孩子未满四周岁，请采用血痕、口腔棉签作为样本。 3.如果孩子还未出生，则参考羊水样本抽取方法。

ABO血型鉴定(生理盐水法).

ABO血型鉴定（生理盐水法） 1. 原理 根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB 型红细胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时，与抗A 试剂发生凝集者即为A型，与抗B分型试剂发生凝集者即为B型，与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型，与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗－A或/和抗－B。 2. 标本采集 2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。 2.2 标本要求： 2.2.1 抗凝剂：如用抗凝血，多主张用EDTA K2（㎎/dL）抗凝。 2.2.2 用手指末梢血作血型检测时，最少样品量为100ul，如手指有 冻疮，则主张采耳垂血。 3. 标本储存：2小时内完成实验，室温放置下不超过8小时，4℃-8℃ 保存不超过48小时。 4. 标本运输：室温运输 5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血标本不能作测定 6. 试剂 6.1 试剂名称：ABO血型检测试剂 6.2 试剂生产厂家：长春博德生物技术有限责任公司上海血液生物医药有限责任公司 6.3 试剂组成 试剂1：抗A分型试剂（蓝色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。 试剂2：抗B分型试剂（黄色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。 试剂3：5％A、B及O型红细胞盐水悬液，自制。配制方法：分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压积红细胞配成不同浓

血型鉴定

ABO血型试验(正反定型) 一原理 利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定ABO血型。 二试剂和材料 1．抗-A（B型血），抗-B（A型血）及抗-A+B（O型血）分型血清。2．5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。 3．受检者血清。 4．受检者5%红细胞盐水悬液。 三操作（玻片法） 1．取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A+B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内，再加受检者2%红细胞悬液1滴，混合。 2．另取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 3．将玻片轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集反应。也可用低倍镜观察结果。 四结果判定：见表1 表1 ABO血型正反定型结果 五注意事项 1．试管、滴管和玻片必需清洁干燥，防止溶血。 2．操作中应先加血清后加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。 3．为防止冷凝集现象的干扰，一般在室温内进行试验。

4．标准抗血清必须符合标准，不要长期放在室温，以免污染和孳长细菌，等渗生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。 5．观察结果要仔细，微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本，要用显微镜观察。 注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。 六血型鉴定中常见的假阳性反应 1．红细胞串钱形成：红细胞相互重叠，连接成串，象一串重叠的钱币，称为串钱形成，又称假凝集。可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中温度过高，作用时间过长，致水分蒸发，血清浓缩。可在观察结果前，再加等渗盐水1滴，彻底混匀，串钱状红细胞因血液稀释而散开。也可用高倍镜仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。 2．寒冷凝集：在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。多数正常人的血清在0~2oC 时能凝集本人的红细胞，又称自家凝集。这种凝集是可逆的，在0-2oC时作用最强，20oC时可消失。但在支原体肺炎、自免溶贫、肝硬化、系统性红斑狼疮等患者血清中，可以出现高效价的病理性自身冷凝集抗体，能与本人及其它各型人的红细胞发生凝集。其最适反应温度是低温，一般在25-30oC凝集作用即减弱。克服方法：被检红细胞在配制悬液前，先用37oC等渗生理盐水洗涤，必要时试验操作可在37oC条件下进行，或在37oC水浴中反复观察几次，报告时要注明有寒冷凝集现象。 七血型鉴定中常见的假阴性反应 1.标准血清效价太低亲和力不强: 抗血清保存方法不当或贮藏时间过长而致 效价减弱是最常见原因。 2.被检红细胞敏感度过低: 如新生儿红细胞抗原形成不足,老年人红细胞敏 感性下降,或红细胞标本贮藏时间过久(红细胞敏感性在血块中下降相对较快),易将A亚型错定为O型。 3.红细胞悬液过浓或过淡: 抗原抗体比例适当时反应最明显。如红细胞悬液 液过浓时,标准血清中的抗体全部被吸收,呈后带现象,以致凝集不明显或不凝集。红细胞浓度太淡,抗体浓度相对增高,呈前带现象而不易凝集,或凝集很弱,未被发现。克服方法: 按规定配制红细胞悬液,悬液太浓时可多加1滴血清,转动玻片,增加红细胞接触的机会.微弱凝集必须用显微镜观察。 4.溶血反应: 红细胞抗原与相对应的免疫抗体相遇,在补体存在时就可发生 溶血。溶血反应与凝集反应在血型鉴定上意义相同,都是抗原抗体反应。克服方法: 玻片法看结果时,片底最好衬以白纸,溶血时液滴边缘呈透明红色,试验前后两次镜下观察,可发现红细胞减少或消失。作血型发现溶血,要换好的等渗盐水和洗涤后红细胞重新配制悬液来作血型鉴定。

血型检测方法

血型检测方法 一、血凝试验 指抗体和红细胞在液体介质中发生肉眼可见的凝集反应。根据操作方法的不同,主要可以分为以下3 种方法: ①玻片法:根据标准抗体血清与待测红细胞(或标准红细胞与待测血清) 在干燥玻片上是否发生凝集反应来确定待测红细胞(待测血清) 血型。它仍然是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法,具有操作简便,节省材料的优点。但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。 ②试管法:是交叉配血试验中最基础的实验方法之一,其与玻片法原理相同,只是借助试管更大的反应空间,并对待测红细胞予以一定浓度的稀释(通常是用生理盐水稀释红细胞至2 %～5 %) 或加入更多的待测血清,通过低速离心后根据有无肉眼可见的凝集反应来判定结果。由于待测红细胞经过稀释,在一定程度上减少了血液中非特异性抗体的浓度,从而提高了试验的敏感性。相比玻片法具有更加准确可靠的优点。 ③全自动微板法:检测技术产生于全自动血液样品系统以及用于凝聚实验的扫描酶标仪问世之后。通过标准化加样、孵育、离心、悬浮、静止以及反应前后吸光度值增加数值的计算,从而达到对血型进行定型与反定型的目的。应用ABO 血型自动化检测方法进行正反定型试验,一次判读正确率在99.8%以上,且能提高检测灵敏度,使弱凝集样本更易显现。全自动微板法检测ABO血型改变了传统的手工操作,肉眼判读结果的检测方法,具有快速、准确、自动化程度高等优点,适合批量操作。并且血型微量化检测具有节约大量昂贵抗血清、缩短检测时间、操作程序简单等优点, 目前在各大采供血机构已得到广泛应用。 二、微柱凝胶试验 采用凝胶技术进行抗球蛋白试验可提高试验的灵敏度及特异性。目前微柱凝胶试验(MGT) 在国外输血领域已逐渐作为常规应用于ABO及Rh血型定型,未知血型抗体筛查以及直接抗球蛋白试验。在微柱凝胶介质中,红细胞与相应的抗体结合,经过低速离心,凝集的红细胞悬浮于凝胶中,而未与相应抗体结合的红细胞沉到管底。凝胶试验分为中性胶,特异性胶和抗球蛋白胶,分别用于血型血清学不同的试验:在中性胶试验中,凝胶不含抗体,可用于细胞筛选,抗体检测和ABO血型反定型;在特异性胶试验中,凝胶含有血型抗体,可用于血型抗原检测;在抗球蛋白胶实验中,凝胶中含球蛋白抗体,可用于血型不完全抗体检测。 MGT与经典盐水法相比,操作简单,省略了洗涤细胞及结果确认等过程,结果明确可靠、易于判读,反应灵敏,工作程序和结果判定易于标准化、自动化、重复性好,对需大量或反复输血的患者配血既安全又快速。所需样本量少,对样本不易抽取的患者(如新生儿、大面积烧伤患者等) 可节约样本。另外,对于不规则红细胞血型抗体的检测,MGT 法要优于经典的试管法。目前,MGT 已经通过全新的液

血液类型

血液类型 我们所说的血型一般是指ABO血型，是按红细胞所含有的抗原来分型的。1920年，奥地利维也纳大学的病理学家兰德斯坦纳发现，如果按血液中红细胞所含抗原物质来划分血型就可以避免病人因输血而频频发生的血液凝集导致病人死亡的悲剧。 具体的区分是，以人血液中红细胞上的抗原与血清中的抗体来定型。一个人红细胞上含有A抗原（又称凝集原），而血清中含有抗B抗体（又称凝聚素）的称为A型；红细胞上含有B抗原，而血清中含有抗A抗体的称为B型；红细胞上含有A和B抗原，而血清中无抗A、抗B抗体的称为AB型；红细胞上不含A、B抗原，而血清中含有抗A和抗B抗体称为O型。 1921年，世界卫生组织（WHO）正式向全球推广认同和使用A、B、O、AB四种血型，这也就是传统的ABO血型分类。由于在血型发现和分类上的贡献，兰德斯坦纳获得1930年的诺贝尔生理学或医学奖，并被誉为“血型之父”。 但是，随着研究的一步步深入，人们发现自身的血型除了ABO血型外，还可以有其他的分类。1940 年兰德斯坦纳和韦纳又发现了Rh血型，到1995年，共发现23个红细胞血型系统，外加一个低频率抗原组、高频率抗原组和尚未形成体系的血型集合，抗原总数达193个。

后来法国的道塞特于1958年发现人类白细胞抗原（HLA），到1995年已公布112种HLA特异性表型，HLA等位基因已达503个。此外，血小板血型抗原也在1957年后陆续被发现。 所以粗略地讲，人类现在的血型分类就至少有ABO血型、Rh血型、HLA血型等多种血型系统。而在今天，在生活和医疗中应用最广的当然要数ABO血型、Rh血型、HLA血型，前两者与输血者妊娠密切相关，后者与器官、骨髓和干细胞移植密切相联 中国人口有13亿多，4种血型，平均一种血型有3亿多人，为什么如此众多的人只拥有一种血型？血型到底是个人的特征，还是集体、种族的特征？有分析认为：O型血在人类学上是一种非常古老的血型，也叫做狩猎血型； A型血是第二种最多见的血型，其祖先是最先从事农耕作物的，也叫做农耕血型； 与O型和A型相比，B型却是人类学上较晚出现的血型，这类人是最早习惯于气候和其他变迁的游牧民族，也叫做游牧血型。 AB型为最晚出现、最稀少的血型，占总人口不到5%。这类人拥有部分A型血和部分B 型血的特征。 在中国北方长城的两边，匈奴、突厥、鲜卑、女真、契丹、西夏等等古老游牧民族，肉食为主，B型血占了大多数。现在蒙古、满族中B型血占40~60%；

血型和输血原则

血型和输血原则C 一各类血细胞表面抗原 1红细胞凝集反应本质是：抗原－抗体反应 2红细胞膜上的抗原称为：凝集原 3能与红细胞膜上凝集原反应的是：凝集素，凝集素是γ球蛋白，存在于血浆中 4白细胞与红细胞有相同的血型抗原，还有自特有的抗原，白细胞最强的同种抗原是人类白细胞抗原（HLA ） 5HLA 是引起器官行色移植后免疫排斥反应的最重要抗原 6血小板也有一定的抗原，与输血后血小板减少有关 二，红细胞血型 1临床上关系最密切的是ABO 和Rh 血型 2ABO 血型系统： 1ABO 血型分型：据红细胞膜上有无A ，B 抗原分 2ABO 血型亚型： 1 最重要的是：A 型中的A1和A2 2AB 血型亚型： 3亚型血说明：1A2型血占少数，A1红细胞与A2血清抗A1抗体凝集 2A2血型比A1型抗原性弱，作A 抗原鉴定时，易致A2或A2B 型为O 型 4真正的万能受血者是：A1B 万能献血者是：O 型 3ABO 血型系统抗原： 1抗原合成： （A 基因）－A 酶－乙酰半乳糖胺基+H 抗原－A 抗原 前驱物质－（（H 基因）－（岩藻糖基转移酶））－H 抗原 ―― O 型血 （B 基因）－B 酶－半乳糖基+H 抗原－B 抗原 2若缺H 基因，不能合成H 抗原，更不用说A ，B 抗原，只有前驱物质，称为孟买型 3胎儿5－6周开始有A ，B 抗原，在2－4岁发育完全，正常人A ，B 抗原终生不变 4A ，B ，H 抗原也存在淋巴细胞，血小板，大多数内皮细胞，上皮细胞膜上 5组织可分泌可溶性A ，B ，H 抗原入唾液，泪液，尿，胃液，胆汁，血浆和羊水，唾液中含量最多 4ABO 血型系统抗体： 1血型抗体分为：天然抗体和免疫抗体 2新生儿无ABO 抗体，出生后2－8个月开始产生，8－10岁为高峰，天然抗体多为IgM ，不能过胎盘 故母亲血型和胎儿型不同的血不会凝血 3注意：母体天然抗体不能过胎盘，但若有输血溶血史，有免疫性抗体，则可过胎盘，致新生儿溶血 5ABO 血型鉴定： 1有正向鉴定和反向鉴定之，正向用清查胞，反向有胞查清，相互印证时：同时进行正向和反向的检查 三，Rh 血型系统： 1Rh 血型：汉族多为阳性，塔塔尔族，苗族，布依族，乌孜别克族阴性者多 2 Rh 血型系统是红细胞血型最复杂的一种

ABO血型正反定型

ABO血型正、反定型操作规程 [目的] 保证ABO血型鉴定准确，确保临床输血安全。 [适用范围] XXX医院输血科 [职责] 具有专业技术的工作人员主要负责本院输血（或备血）标本的ABO血型鉴定（但只对该单份标本负责）。 [相关文件] 试剂采购、保存和使用管理程序 设备采购、使用管理程序 消毒与清洁管理程序 标本采集、运输、保存和报废管理程序 紧急用血管理程序 [相关记录] 仪器设备的采购、使用和维护记录 仪器的温度记录 恒温水温箱的换水和消毒记录 消毒液的配置记录 清洁消毒记录 试剂采购、使用记录 标本交接和报废记录 紧急用血记录 [实验原理] ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A型，存在B凝集原的称为B型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型血清中含有抗B凝集素，B型血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者的红细胞反应（称为正定型），用标准红细胞与被测者血清中的凝集素反应（称为反定型），以确定其ABO血型。 [仪器器械] 玻璃试管、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、普通离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。 [试剂] 抗A标准血清、抗B标准血清、A型标准红细胞、B型标准红细胞、O型标准红细胞、生理盐水。以上试剂均为有合格证件的正品。 [标本收集与处理] 1．受检者血清：采集受检者静脉血2~3ml，经1000r/min离心1分钟或室温静置1小时后取上清。 2．2~5%的受检者红细胞：采集受检者静脉血或末梢血，用生理盐水制成2~5％红细胞盐水悬液备用，制备方法见本节质量控制和注意事项。 3．标本出现中度以上溶血者，为不合格标本，不能用于检测。 [实验方法与步骤] 血型的正定型（试管法）：

临床检验abo血型鉴定

临床检验实验室 ABO血型鉴定页码：第1 页，共5 页

[测定原理] 根据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A 或／和抗—B。 [试剂和仪器] 1．批批检的抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清。 2．批批检的5 ％ A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注； 3．离心机，显微镜。 [标本收集与处理] 1，受检者血清； 2，枸缘酸钠抗凝血或未稍取血，受检者血液制成5 ％红细胞盐水悬液使用，制备方法见本节附注。 3，标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。 [操作步骤] 1．试管法 (1) 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A

十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B分型血清各l滴（约50 ul） 于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 (2) 另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B和O细胞。用滴 管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型 5％试剂红细胞悬液l滴，混和。 (3) 立即以1000r／min离心 3 min。 (4) 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或 溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检 查。 (5) 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、 类B或cisAB的发现。 ABO血型鉴定页码：第2 页，共5 页

Blood typing-血型分型

Blood typing Email this page to a friendBookmark & SharePrinter-friendly version Blood typing is a method to tell what specific type of blood you have. What type you have depends on whether or not there are certain proteins, called antigens, on your red blood cells. Blood is often grouped according to the ABO blood typing system. This method breaks blood types down into four categories: ?Type A ?Type B ?Type AB ?Type O Your blood type (or blood group) depends on the types that are been passed down to you from your parents. How the Test is Performed Blood is drawn from a vein, usually from the inside of the elbow or the back of the hand. The puncture site is cleaned with a germ-killing product. An elastic band is placed around the upper arm to apply pressure, which causes the vein to swell with blood. A needle is inserted into the vein, and the blood is collected into a tube. During the procedure, the elastic band is removed to restore circulation. Once the blood has been collected, the needle is removed, and a band-aid or gauze is applied. In infants or young children, the area is cleansed with antiseptic and punctured with a sharp needle or a lancet. The blood may be collected in a pipette (small glass tube), on a slide, onto a test strip, or into a small container. A bandage may be applied if there is any bleeding. The test to determine your blood group is called ABO typing. Your blood sample is mixed with antibodies against type A and B blood, and the sample is checked to see whether or not the blood cells stick together (agglutinate). If blood cells stick together, it means the blood reacted with one of the antibodies. The second step is called back typing. The liquid part of your blood without cells (serum) is mixed with blood that is known to be type A and type B. Persons with type A blood have anti-B antibodies, and those with type B blood have anti-A antibodies. Type O blood contains both types of antibodies. These two steps can accurately determine your blood type. Blood typing is also done to tell whether or not you have a substance called Rh factor on the surface of your red blood cells. If you have this substance, you are considered Rh+ (positive). Those without it are considered Rh- (negative). Rh typing uses a method similar to ABO typing. How to Prepare for the Test

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

一.原理 根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。 二.试剂和材料 1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清（制备方法见本节附注） 2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清； 4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。 三.方法 1．试管法 (1)取洁净小试管3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 (2)另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。 (3)立即以1000r／min离心1min。 (4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有

无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法 （1）取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。 (2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A 细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。