体内药物分析实验
1.HPLC法测定大鼠血浆中的山奈酚
1.1目的要求
1.掌握血浆样品的前处理方法。
2.熟悉方法回收率和萃取回收率实验操作和评价。
3.熟悉大鼠眼眶采血技术；熟悉方法学研究中其他评价内容。
1.2 主要实验材料与仪器
山奈酚（Kaempferol）及其对照品，黄芩素（baicalein），抗坏血酸，肝素，β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase）和硫酸酯酶（sulfatase），分析纯甲醇，冰醋酸、无水乙醚，色谱纯乙腈；高效液相色谱仪，氮吹装置，恒温水浴，漩涡混合器，13000r/min台式离心机，不同规格移液枪（5, 20, 50, 100, 200, 1000μL）和容量瓶（10，25mL），5~10mL 具塞离心管若干；雄性SD大鼠（180~220g）。
1.3 实验原理
山奈酚吸收进入体内后，多以二相代谢物葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的形式存在。由于山奈酚葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的对照品难以获得，故采用加入硫酸酯和葡醛酸苷水解酶处理样品，使代谢物水解后测定苷元山奈酚的浓度。实验以黄芩素为内标，HPLC法测定血浆中山奈酚浓度，对建立的方法进行方法学评价。
1.4 实验方法
1.色谱条件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），配保护柱，柱温40℃；乙腈-0.5%冰醋酸（35:65）为流动相，流速1mL/min；检测波长370nm；进样量20μL。
2.溶液配制：取山奈酚对照品约2.5mg，精密称定，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并定容。精密吸取适量，分别用甲醇稀释成0.3、0.6、3、6、9、20和30μg/mL的标准系列溶液，置4℃冰箱保存。另取黄芩素适量，精密称定，用甲醇溶解并定量稀释至0.1mg/mL的溶液，精密吸取1.5mL置10mL量瓶中，用甲醇定容，得内标溶液，置4℃冰箱保存。
3.血浆样品处理：取大鼠血浆样品120μL，加入甲醇20μL、1%冰醋酸（含2mg/mL抗坏血酸）32μL、β-葡萄糖醛酸苷酶（20U/mL）和硫酸酯酶（6U/mL）的混合水溶液50μL，37℃水浴温育30min后，加入内标溶液50μL，然后加无水乙醚2mL，漩涡混合5min，于12000r/min离心5min；取上清液在氮气流下挥干，残留物用100μL 甲醇复溶，12000r/min离心5min，取上清液进样分析。
4.专属性考察：取空白血浆、添加山奈酚与内标的空白血浆、血浆样品，按“血浆样处理”项下方法处理，照“色谱条件”项下方法进样测定。比较所得色谱图，考察血浆内源性物质是否干扰测定，药物及内标是否达到基线分离。若有必要，适当调整色谱条件，已达到专属性要求。
5.标准曲线制备：精密吸取120μL大鼠空白血浆9份，分别加入20μL不同浓度的标准系列溶液，制得0.0（空白）、0.0（空白+内标）、
0.05、0.1、0.5、1.5、3和5μg/mL 的山奈酚血浆标准溶液（每个浓度点平行3~5份）。按“血浆样品处理”项下自“加1%冰醋酸32μL”起，同法处理后进样分析，记录峰面积。以山奈酚与内标峰面积的比值（R ）对山奈酚血浆浓度（C ）进行线性回归（两个空白不计入回归曲线，仅作为对干扰的考察），求得回归方程（R=bC+a ）和相关系数（r ）。并取各浓度点实测值代入回归方程得回归值（C′）,与标示值（C ）比较，计算偏差（偏差%=%100'?-C C
C ）和准确度（准确度=
C′/C×100%）。根据上述结果确定线性范围与定量下限（LLOQ ）。
6.回收率和精密度试验：精密吸取120μL 大鼠空白血浆，分别加入不同浓度的山奈酚标准溶液，配制低、中、高（0.1、1、4μg/mL ）三种浓度的山奈酚血浆样品，每浓度点平行5份，按“标准曲线制备”项下方法进行处理、测定。将山奈酚与内标峰面积比值代入标准曲线，求出测得浓度。计算测得浓度与加入浓度的比值，得方法回收率，并计算各浓度点的相对标准差（RSD ），作为日间精密度；于不同日（至少3d ）重复上述测定，计算日间精密度。
7.萃取回收率试验：精密吸取120μL 大鼠空白血浆，分别加入不同浓度的山奈酚标准溶液，配制0.1，1和4μg/mL 浓度的山奈酚血浆样品，每浓度点平行5份，按“标准曲线制备”项下方法进行处理，记录山奈酚峰和内标峰面积，作为萃取后的测定值。另取上述低、中、高同样浓度的山奈酚甲醇液，加同样量内标溶液，混合，直接于氮气流下挥干，残留物用100μL 甲醇复溶，12000r/min 离心5min ，取同样量上清液进样分析，获得山奈酚峰和内标峰面积，作为未萃取的测
定值。采用外标法计算萃取后山奈酚峰面积与相应浓度的未经萃取的山奈酚峰面积比值，得山奈酚萃取回收率；同法计算内标的萃取回收率。
8. 稳定性实验：精密吸取120μL大鼠空白血浆，按“回收率和精密度试验”项下方法配低、中、高浓度的山奈酚血浆样品。考察其在室温下放置24h（6，12，24h取样）、-20℃下长期冻存1个月（10，20，30d取样）、反复冻融（-20℃—室温）3次的稳定性，将测得结果与0时的结果进行比较，计算RSD。并考察测定溶液的稳定性，即样品制备后到进样分析的放置时间（6，12，24，36，48h）的稳定性。
9.血浆样品测定：将山奈酚按1mg／kg的剂量尾静脉给予禁食12h的SD大鼠，于给药前（0min）和给药后5、10、15、30、45、60、90、120、180、240min分别从眼眶采0.4mL血，8000r／min离心5min，分离血浆。按“血浆处理方法”项下方法处理后，在HPLC 上进样分析，记录峰面积。将山奈酚与内标峰面积比值代入标准曲线，计算血浆中山奈酚的浓度，绘制药-时曲线。
1.5 注意事项
1.山奈酚和内标多为多羟基化合物，对光、热不稳定，测定时应注意避光操作。
2.大鼠眼眶采血容易控制采血的时间周期，采血质量高，而且不受是否尾静脉注射给药的影响，故这种采血方法相对优于尾静脉注射。
3.当线性范围较宽时，宜采用加权最小二乘法进行回归计算，以
使低浓度结果较正确。LLOQ偏离标准浓度应≦20%，其他各点偏离标准浓度应≦15%，r≧0.09.山奈酚和内标的萃取回收率应接近，差异不超过±10%。
1.6 参考文献
田杨,蒋学华,杨平,等. HPLC测定大鼠血浆中山奈酚.华西药学杂志, 2008,23(3):357.
2 HPLC-MS∕MS法测定人尿中左氧氟沙星浓度
2.1 目的要求
1.掌握尿样测定的前处理方法。
2.掌握LC-MS测定中基质效应和专属性的考察方法。
3.熟悉LC-MS分析中质谱条件的选择。
2.2主要实验材料与仪器
盐酸左氧氟沙星胶囊（0.1g或0.2g），左氧氟沙星（levofloxacin）和环丙沙星（ciprofloxacin）对照品，色谱纯甲醇、甲酸，分析纯醋酸铵；液相色谱-质谱联用仪，氮吹装置，恒温水浴，漩涡混合器，不同规格移液枪（5，20，50，100，200，1000μL）和容量瓶（10，25mL)，10m1具塞离心管若干。
2.3实验原理
以环丙沙星为内标，建立尿中左氧氟沙星的LC-MS／MS测定方法，着重考察方法的专属性和基质效应，选择最佳色-质条件。质谱测定方法采用多反应离子监测(MRM)方式。
2.4实验方法
1．色谱和质谱条件：色谱柱为C18柱(100mm×2.1mm，3.5μm)；甲醇-1mmol／L醋酸铵溶液-甲酸(35：65：0.01)为流动相，流速0.25mL ／min；进样量10μL。电喷雾(ESI)离子源，正离子电离模式，多反应离子监测(MRM)的MS扫描方式，左氧氟沙星和内标环丙沙星的检测离子对划分别为362.2→318.2和332.2→288.20（m／z）；MS参数：毛细管电压5.5kV，加热温度400℃。
2．标准溶液配制：取约5mg左氧氟沙星对照品，精密称定，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，精密吸取适量，用甲醇分别稀释成5、10、25、50、100、150、250和500μg／mL的标准系列溶液，置4℃冰箱保存。取5mg环丙沙星，精密称定，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并定容。取适量用甲醇稀释成200μg／mL，即得内标溶液，置4℃冰箱保存。
3.尿样处理：取1mL人尿液样品，加入10μL内标溶液，再加入2mL水(根据实测浓度调整稀释倍数，同时考察调整后的基质效应)，混匀，用0.45μm孔径的偏氟膜过滤，取10μL滤液进样分析。
4．专属性考察：取人空白尿样、添加左氧氟沙星和内标的空白尿样、健康受试者口服盐酸左氧氟沙星胶囊后的尿样(加内标)，按“尿
样处理”项下自“再加入2mL水”起，依法处理后，在选定的条件下进样分析，比较三者图谱，考察方法专属性。必要时对色谱、质谱条件作适当调整。
5．基质效应的评价：取人空白尿液1.0mL，加入2.0mL水，混匀，用0.45μm孔径的偏氟膜过滤得滤液。在滤液中分别加入不同浓度的左氧氟沙星标准溶液，使其终浓度分别为0.5，1.5和4μg／mL 每浓度点平行3份。另用纯水代替空白尿液，同法操作。将上述溶液分别进样测定，获得相应的峰面积。以同浓度下两种不同处理方法的样品峰面积(A尿∕A水)的比值来评价基质效应。
6．标准曲线制备：精密量取不同浓度的标准系列溶液10μL，置氮气流下挥干，精密加入人空白尿液1.0mL，漩涡混合，制成浓度分别为0.05、0.1、0.25、0.5、1、1.5、2.5和5μg／mL的氧氟沙星尿液标准溶液，每浓度点平行2份。按“尿样处理”项下方法处理后，进样分析，记录峰面积。以左氧氟沙星与内标峰面积的比值对左氧氟沙星尿样浓度进行线性回归，得回归方程。
7．尿液样品的测定：健康男性志愿者单剂量口服0.1～0.2g盐酸左氧氟沙星胶囊，在服药前和服药后不同时间段收集尿液，记录体积。按“尿样处理”项下方法处理后，进样分析，记录峰面积。将左氧氟沙星与内标的峰面积比值代入标准曲线，计算尿药浓度。
2.5注意事项
1．尿液主要成分是水、尿素、盐类，易长细菌，宜4℃冷藏或加防腐剂。
2.左氧氟沙星主要以原型自肾排泄，在体内代谢甚少。口服48h 内尿中排出量约为给药量的80%~90%。尿中浓度随给药量变化而变化，尿中达峰时间约为2h，可先进行预试，根据尿中实际浓度，调整尿液稀释倍数。
3.不同型号的LC-MS仪、色谱柱，测定条件可能有较大差异，需要进行优化。
2.6 参考文献
施爱明,潘杰,张全英,等. LC-MS／MS法测定人血浆中左氧氟沙星浓度.药学进展，2008,32(5):228.
3 GC-MS法测定大鼠肝脏组织中盐酸克伦特罗浓度
3.1 目的要求
1.掌握固相萃取法的原理和方法。
2.熟悉组织样品的前处理方法。
3.熟悉GC-MS质谱条件的选择。
3.2 主要实验器材与仪器
盐酸克伦特罗（clenbuterol hydrochloride）样品和对照品，分析纯双甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA),甲醇、甲苯、乙酸乙酯、盐酸、氢氧化钠、碳酸钠等。GC-MS联用仪、涡旋混合器、恒温干燥箱、高速冷冻离心机、组织匀浆机、阳离子交换萃取小柱。SD大鼠（180~220g）。
3.3 实验原理
利用盐酸克伦特罗的碱性，采用碳酸钠碱性条件下使盐酸克伦特罗游离，用有机溶剂乙酸乙酯萃取。然后在有机相中加入稀盐酸酸化，使克伦特罗离子化而溶于酸水中，进一步采用阳离子交换固相小柱去除杂质。再与BSTFA衍生化，用GC-MS进行检测。
3.4 实验方法
1.色谱和质谱条件：GC色谱柱为HP-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；程序升温：初始柱温70℃（保持1min），以20℃∕min升至180℃（保持1min），以5℃∕min升至220℃（保持2min），以25℃∕min升至260℃（保持2min）；进样口温度280℃；不分流进样，进样量1.0μL；载气高纯He：1.0mL∕min。EI源，源温度200℃；传输线温度280℃；电离电压为70eV；四级杆温度160℃；测定方式为全扫描和选择离子检测，条件如下：0~3.5min为溶剂延迟时间，3.5~15.0min，全扫描范围（m／z 50~400），监测离子（m／z 86），15.0min~最后，关闭灯丝。
2.标准溶液的配制：精密称取10mg盐酸克伦特罗于100mL量瓶
中，用甲醇定容至刻度，得盐酸克伦特罗标准储备液。然后用甲醇配制0.5、1、5、15、50和200μg∕mL浓度系列的标准溶液。
3.组织样品的处理
（1）稀酸提取：取大鼠肝脏约1g，精密称定，加水5mL，匀浆，在匀浆液中加入20mL乙酸乙酯（定量转移至50 mL离心管中），再加入15%碳酸钠溶液2 mL，超声15min后，于高速冷冻离心机上以6000r／min离心5min，收集上层有机相，再加入10 mL乙酸乙酯于离心管中，超声提取15min后，收集合并有机相。在收集的有机相中加入0.2mol／L的稀盐酸溶液2mL，旋涡混合后，于5000r／min离心5min，吸取下层水相，重复萃取一次，合并两次萃取的水相，用稀NaOH溶液调节pH至5.5。
（2）阳离子交换萃取小柱净化：将阳离子交换小柱依次经过5mL 甲醇、5mL水和5mL 20mmol／L稀盐酸活化，然后将处理好的稀酸提取液上样至小柱，依次用5mL水和5mL甲醇淋洗柱子，抽干小柱，再用5mL 5%氨化甲醇洗脱，收集洗脱液5mL的刻度试管中。
（3）衍生化：洗脱液与50℃水浴氮气流下吹干，精密加入200μL 的甲苯和100μL的BSTFA，充分旋涡混合30s，在80℃的烘箱中加热衍生1h（反应容器加盖盖紧）。衍生完毕待冷却后转移入进样品中，进行GC-MS检测。
4.标准曲线的制备：分别取大鼠空白肝脏1g，加水5mL，匀浆，在匀浆液中分别加入不同浓度的盐酸克伦特罗标准溶液10μL，使匀浆液中终浓度分别为5，10，50，150，500和2000ng/g组织，混匀。
照“组织样品处理”项下自“在匀浆中加入20mL乙酸乙酯”起，依法进行稀酸提取、阳离子交换萃取小柱净化和衍生化处理，GC-MS测定。以盐酸克伦特罗浓度对相应的峰面积进行线性回归，获得标准曲线。
5.样品测定：取盐酸克伦特罗样品，按50μg/kg给药剂量灌胃给予SD大鼠。在给药后1h，处死大鼠。肝脏以生理盐水灌流，并用滤纸吸干水分。精密称取肝组织1g，按“组织样品处理”项下方法进行测定。将获得的峰面积代入标准曲线，计算肝组织中盐酸克伦特罗的浓度。
3.5 注意事项
固相萃取小柱使用前需要进行活化，一般先用甲醇，再用水冲洗。对于阳离子或阴离子交换小柱还需用酸或碱进一步活化。
3.6 参考文献
[1] 王红.气相色谱-质谱法检测动物肝脏组织中盐酸克伦特罗.中国卫生检验杂志，2007,17(8):1409.
[2] 吴银良,李晓薇,杨挺,等. 气相色谱-质谱法测定肝脏组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺.分析化学，2006,34(8):1083.
4.原子吸收分光光度法测定头发中锌含量
4.1 目的要求
1.掌握消化法处理生物样品的方法。
2.熟悉原子吸收分光光度法检测原理和方法。
4.2 主要实验材料与仪器
色谱纯锌，优质纯硝酸，分析纯盐酸、高氯酸、氨水。原子吸收分光光度计、锌空心阴极灯、电热板
4.3 实验原理
采用硝酸-高氯酸对头发进行消解处理，使微量锌以金属离子状态转入溶液溶液，用原子吸收分光光度法测定。样品溶液进入火焰后，待测元素的基态原子吸收来自同种元素空心阴极灯发射的共振线，其吸收强度在一定范围内与待测元素浓度成正比，采用标准曲线法进行定量。
4.4 实验方法
1.仪器参数：检测波长213.9nm；光谱通带0.4~0.8nm；灯电流3~4mA；空气流量5~6L/min；乙炔流量1L/min；火焰高度6~12mm。
2.锌标准溶液的制备：取金属锌1g，精密称定，置200mL烧杯中，加入6mol/L盐酸溶液30~40mL，使锌溶液，待溶解完全后，加热煮沸数分钟，冷却，定量转移至1000mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1mg/mL的锌标准储备液；精密移取10mL 锌储备液于100mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为100μg/mL的锌标准溶液；精密移取10mL锌标准溶液于100mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10μg/mL的锌标准溶液。
3.样品处理
（1）发样洗涤：取头发0.3g左右，用剪刀剪成1~2cm的小段，置50mL烧杯中，用5%氨水（pH置8.0~8.5）浸泡30min，用自来水
漂洗3~4次，再用二次去离子水冲洗4~5次，置于65℃烘箱中干燥4h，取出后放入干燥器中保存备用。
（2）消化处理：取经过洗涤处理的头发0.2g，精密称定，置于100mL烧杯中，加入5mL浓硝酸，盖上表面皿，在电热板上加热消解，待完全溶解后取下，冷却至室温，加入高氯酸1mL，再在电热板上继续加热，冒白烟至溶液剩余1~2mL时（切不可蒸干）取下，冷却后加入适量蒸馏水，定量转移至100mL量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀待测。同时按相同步骤制备1份空白溶液。
4．标准曲线的制备：精密吸取浓度为10μg/mL的锌标准溶液0，2，4，6，8，10mL，分别置于6个100mL量瓶中，用1%高氯酸溶液稀释至刻度，摇匀。于213.9nm波长下测定吸光度值，以浓度对吸光度值做线性回归，获得标准曲线。
5．样品测定：取头发适量（3份），按“样品处理”项下方法操作，照标准曲线测定条件测定样品溶液的吸光度，将测得的吸光度值代入标准曲线，计算供试液中锌浓度，并根据头发取样量求得发样中锌含量（μg/g）。
4.5 注意事项
1. 本实验采用硝酸-高氯酸消解法对头发进行处理，这是湿法有机破坏的常用消解液，其破坏力强，适用于生物样品的破坏，所得无机金属离子为高价态。由于硝酸和高氯酸均具有氧化性，破坏反应激烈，切勿将溶液蒸干，以免爆炸。消化操作应在通风柜内进行。
2．乙炔（燃气）-空气（助燃气）流量比对锌测定有较大影响，
应通过实验选择。此外，光谱通带、灯电流、火焰高度等均对测定有一定影响，需要进行选择。
4.6 参考文献
[1] 黄高明，孙林超.人体头发中锌含量分析研究.农产品加工·学刊，2007,11:87.
[2] 马威，袁英贤.原子吸收法测头发中锌含量的方法探讨.河南科学，2003,21(6):722.
[3] 张桂文.原子吸收光谱法测定儿童头发中锌含量.辽宁化工，2009,38(10):770.
5 双氯芬酸钠的生物利用度
5.1 目的要求
1.掌握药物生物利用度测定的实验设计和数据处理方法。
2.掌握大鼠眼眶采血技术和常用给药技术。
5.2 主要实验材料与仪器
双氯芬酸钠（diclofenac sodium）,布洛芬（ibuprofen），肝素，色谱纯甲醇，分析纯KH2PO4；13000r／min离心机，高效液相色谱仪；SD雄性大鼠（180~220g）。
5.3 实验原理
用甲醇沉淀血浆蛋白，以布洛芬为内标，HPLC法测定大鼠血浆中双氯芬酸钠浓度。根据静脉注射给药和灌胃给药的药动学参数（AUC）和给药剂量(D)计算双氯芬酸钠的生物利用度。
5.4 实验方法
1.色谱条件：分析柱为C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-20mmol／L KH2PO4溶液（pH 3）（50：50）；检测波长282nm；进样量20μL。
2.标准曲线的制备：取双氯芬酸钠适量，用甲醇配制出浓度为1mg ／mL的储备液，然后用甲醇稀释至200，100，50，10，5，2和1μg ／mL的溶液作为标准溶液。取布洛芬适量，用甲醇溶解并稀释制成浓度为20μg∕mL的溶液，作为内标溶液。
取空白大鼠血浆100μL，分别加入上述双氯芬酸钠标准溶液10μL 和布洛芬溶液10μL，混匀，再加入250μL甲醇溶液，混匀，在10000r∕min下离心10min，取上清液20μL进样测定。将双氯芬酸钠的峰面积与内标峰面积的比值与双氯芬酸钠浓度进行线性回归，获得标准曲线。
3.血样采集：取SD雄性大鼠12只，随机分成2组，将其中一组
按20mg ／kg 的给药剂量灌胃给药，另一组按2mg ／kg 的给药剂量尾静脉注射给药。分别在给药前和给药后5，10，15，30，45，60，90，120，240，360和480min ，眼眶取血250μL ，置于肝素离心管中，5000r ／min 离心，取100μL 血浆，4℃放置备用。
4.样品分析：取大鼠血浆样品100μL ，加入内标溶液10μL ，加入甲醇260μL ，混匀，在10000r ／min 离心10min ，取上清液20μL 进样。将双氯芬酸钠与内标的峰面积比值代入标准曲线中，计算相应的浓度。
5.数据分析：灌胃给药和静脉注射给药各大鼠不同时间点的血药浓度按表1和表2填写。采用药动学分析软件DAS2.0计算药物动力学参数。并按以下公式计算生物利用度：
生物利用度F=
AUCiv AUCpo ×po iv D D ×100%
5.5 注意事项
1.计算药物动力学参数的软件有很多，如3P97，DAS
2.0等。可根据实验室已有的软件进行计算。开始计算前，需保证时间和浓度的单位一致。在进行计算时，有两种拟合模型，分别是房室模型和统计钜模型。当采用房室模型拟合时，可能出现同一组动物数据中出现不同房室模型的情况，使数据处理出现偏差。因此，常用的拟合模型为统计矩模型。
2.静脉注射组开始几个时间点的样品浓度有可能超出标准范围的上限，出现这种情况时，应将样品用空白大鼠血浆稀释后测定。
表1 灌胃给药各大鼠不同时间点的血药浓度（μg/mL）
时间鼠号
（min） 1 2 3 4 5 6 5
10
15
30
……
表2 静脉注射给药大鼠不同时间点的血药浓度（μg/mL）
时间鼠号
（min） 1 2 3 4 5 6 5
10
15
30
……
5.6 参考文献
[1]León-Reyes MR,Castaneda-Hernández G, Ortize MI. Pharmacokinetic of declofenac in the presence and absence of glibenclamide in the rat. J Pharm Pharmaceut Sci 2009,12(3):280.
[2] Musmade P, Subramanian G, Srinivasan KK, High-performance
liquid chromatography and pharmacokinethcs of aceclofenac in rats. Analytical Chmica Acta.2007, 585:103.
6．血浆蛋白结合率测定
6.1目的要求
1.掌握超滤法测定蛋白结合率的方法。
2.熟悉实验条件的考察与选择。
6.2 主要实验材料与仪器
龙胆苦苷（gentiopicroside，GPS），正常人血浆，色谱纯甲醇，分析纯磷酸盐；超滤管（10k），可控温高速离心机，Eppendor（EP）离心管，高效液相色谱仪；昆明种小鼠。
6.3 实验原理
将龙胆苦苷与人血浆混合，平衡一段时间，取其中一部分通过超滤管，分别测定血浆中龙胆苦苷总浓度和超滤管中龙胆苦苷游离浓度，计算血浆蛋白结合率。
6.4 实验方法
1.色谱条件：C18柱；流动相为甲醇-水（28:72），流速1mL/min；检测波长274nm；进样量20μL。
2.标准曲线的制备：取干燥至恒重的GPS对照品约25mg，精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得浓度为1mg/mL的对照品储备液。精密吸取储备液1mL于10mL量瓶中，加pH7.4的磷酸盐缓冲液至刻度。再精密量取0.05，0.1，0.2，0.5，1.0，
2.0mL于25mL量瓶中，加pH7.4的磷酸盐缓冲液至6mL，加甲醇至刻度，得浓度为0.2，0.4，0.8，2，4，8μg/mL的系列标准溶液，摇匀，微孔滤膜滤过，取续滤液进样测定，以峰面积对浓度进行回归，得标准曲线方程。
3.超滤管吸附性试验：取GPS标准储备液（1mg/mL）适量，用pH7.4的磷酸盐缓冲液稀释至刻度为1，5和10μg/mL的溶液，分别取500μL置超滤管中，于4000r/min下离心25min（离心机温度设为37℃）。分别取超滤管和未离心溶液100μL，各加入300μL甲醇，旋涡混合30s，16000r/min离心15min，取上清液过微孔滤膜，取20μL 续滤液进行HPLC分析。计算超滤管吸附性。
如果超滤管对药物吸附过多，应对超滤管进行测定溶液饱和处理。方法如下：取上述吸附性试验项下低、中、高3种浓度溶液各1mL，置超滤管中饱和24h，弃去溶液，用滤纸将超滤管中残液吸干，然后再进行吸附试验。
4.血浆蛋白结合率试验：分别精密吸取1mg/mL的GPS对照品储备液0.5，2.5，
5.0mL于25mL量瓶中，加pH7.4的磷酸盐缓冲液至刻度，得到浓度为20，100和200μg/mL的GPS溶液。分别精密吸取3种浓度的GPS溶液50μL于EP管中，加入人血浆950μL，漩涡混合均匀，置于37℃水浴平衡4h，移取500μL，置超滤管中（若有必要对超滤管进行饱和处理），于4000r/min离心25min（离心机温度设为37℃），取超滤液100μL，照“血浆中龙胆苦苷总浓度测定”方法操作，将测得的峰面积代入标准曲线，求得超滤液中GPS浓度。同
时测定血浆中龙胆苦苷总浓度。
5.血浆中龙胆苦苷总浓度测定：精确吸取100μL血浆，加入300μL甲醇，旋涡混合30s，16000r/min离心15min，取上清液过微孔滤膜，取20μL续滤液进样分析。
6.血浆蛋白结合率计算：根据超滤液中GPS浓度（ρ1）和血浆中GPS总浓度（ρ2），按下列公式计算龙胆苦苷血浆蛋白结合率：
血浆蛋白结合率%=（ρ1-ρ2ρ2）×100%
6.5注意事项
1.超滤法是利用半透膜原理对游离药物和结合药物进行分离，设备简单、操作方便，其最大优点是实现血浆中游离药物的快速分离，仅十几分钟至数十分钟即可收集到足够供测定的血浆超滤液。但此法也存在一定弊端：①分离过程中结合平衡不稳定；②对高蛋白结合率药物的游离浓度难以准确检测；③结合药物在透过滤膜时会出现泄漏；④超滤装置对药物具有吸附性。因此，实验前应先考察超滤管对龙胆苦苷的吸附性，必要时对结合反应的温度、pH值等因素进行考察。
2.温度考察：血浆蛋白结合率试验温度一般为4℃和37℃，按“血浆蛋白结合率试验”项下方法配制GPS低、中、高3个浓度（1、5、10μg/mL）的样品溶液，分别置37℃水浴和4℃冰箱中，于0、1、2、3、4h取样测定浓度，考察不同温度下GPS稳定性，选择血浆蛋白结合率试验的适合温度。
3.龙胆苦苷在pH7.4缓冲溶液中的稳定性考察：取龙胆苦苷标准
arcgis栅格数据空间分析实验报告
实验五栅格数据的空间分析 一、实验目的 理解空间插值的原理，掌握几种常用的空间差值分析方法。 二、实验内容 根据某月的降水量，分别采用IDW、Spline、Kriging方法进行空间插值，生成中国陆地范围内的降水表面，并比较各种方法所得结果之间的差异，制作降水分布图。 三、实验原理与方法 实验原理：空间插值是利用已知点的数据来估算其他临近未知点的数据的过程，通常用于将离散点数据转换生成连续的栅格表面。常用的空间插值方法有反距离权重插值法（IDW）、 样条插值法（Spline）和克里格插值方法（Kriging）。 实验方法：分别采用IDW、Spline、Kriging方法对全国各气象站点1980年某月的降水量进行空间插值生成连续的降水表面数据，分析其差异，并制作降水分布图。 四、实验步骤 ⑴打开arcmap，加载降水数据，行政区划数据，城市数据，河流数据，并进行符号化， 对行政区划数据中的多边形取消颜色填充 ⑵点击空间分析工具spatial analyst→options，在general标签中将工作空间设置为实验数据所在的文件夹
⑶点击spatial analyst→interpolate to raster→inverse distance weighted，在input points 下拉框中输入rain1980，z字段选择rain，像元大小设置为10000 点击空间分析工具spatial analyst→options，在extent标签中将分析范围设置与行政区划一致，点击spatial analyst→interpolate to raster→inverse distance weighted，在input points下拉框中输入rain1980，z字段选择rain，像元大小设置为10000 点击空间分析工具spatial analyst→options在general标签中选province作为分析掩膜，点击spatial analyst→interpolate to raster→inverse distance weighted，在input points下拉框中输入rain1980，z字段选择rain，像元大小设置为10000
生物药物分析实验指导
生物药物分析实验指导 药物分析实验指导玉林师范学院生命科学与技术学院制药工艺学教研室2012年5月实验一药物的杂质检查一、目的 1.了解药物杂质检查的意义。 2.掌握杂质检查的原理和方法。 3.掌握杂质限量的计算方法。二、实验内容(一)标准溶液的配制1.标准氯化钠溶液的制备称取氯化钠，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml置100ml 瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Cl)。 2.标准硫酸钾溶液的制备称取硫酸钾，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于100μg 的SO4)。 3.标准铁溶液的制备称取硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2·12H2O] ,
置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Fe)。 4.标准铅溶液的制备称取硝酸铅g，置于1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml 溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前精蜜量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Pb)。配制与贮存用的玻璃容器均不得含有铅。 5.标准砷溶液的制备称取三氧化二砷，置1000ml量瓶中，加20％氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液1ml，置100ml 量瓶中，加稀硫酸1ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于μg的As)。 (二)氯化钠的杂质检查 1.酸碱度取本品，加水50ml溶解后，加溴麝香草
空间目标轨道分布特性分析实验报告
空间目标轨道分布特性分析实验报告 一、实验目的 1、了解空间目标轨道分布规律； 2、掌握TLE数据格式分析方法； 3、掌握空间目标高度分布特性分析方法与过程。 二、实验环境 Matlab或C语言 三、实验原理 1、空间目标及其分布 空间目标广义是指离地球表面120公里以外空间的所有目标，包括自然天体和人造天体。本研究报告中的空间目标系指环绕在地球周围数万公里内的人造天体，包括卫星、平台和运载，以及上述目标解体后形成的空间碎片。对这些人造目标进行监视属空间目标监视系统的范畴。 根据有关研究，环绕地球的空间目标数目大约为35,000,000，其中大小在1～10cm的约110,000个，大于10cm的在8000个以上。目前美国空间目标监视系统可对30cm以上的空间目标进行例行的日常观测，对10cm以上的目标可能观测到，但不能保证例行的日常跟踪。上述空间目标中，到2008年8月24日，被美国空间目标监视系统编目过的空间目标数目为33311个，其中21597个已经陨落，11714个仍在轨。 } 空间目标都有一定大小、形状，运行在一定轨道上，使得每一空间目标都有其独特的轨道特性、几何特性和物理特性。这些特性奠定了对空间目标进行定轨和识别的基础，尤其是在用航天器一般都有特定的外形、稳定的轨道、姿态、温度等特性，是空间目标识别的主要技术支撑。 空间目标监视的核心任务是对空间目标进行探测、跟踪和识别。获取空间目标的几何特征、物理特征和运动参数等重要目标信息，进而确定目标威胁度、警戒空间碰撞、提供安全告警信息，是实施防御性空间对抗和进攻性空间对抗的基础。其中在空间目标的识别过程中，空间目标的轨道特性是主要依据，而其几何特性和物理特性则是对其轨道特性的进一步补
药物分析实验报告
实验四苯甲酸钠的含量测定 一、目的 掌握双相滴定法测定苯甲酸钠含量的原理和操作 二、操作 取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水约25mL，乙醚50mL和甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，随滴随振摇，至水层显持续橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5mL洗涤，洗涤液并入锥形瓶中，加乙醚20mL，继续用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，随滴随振摇，至水层显持续橙红色，即得，每1mL的盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于72.06mg的C7H5O2Na。 本品按干燥品计算，含C7H5O2Na不得少于99.0％ 三、说明 1.苯甲酸钠为有机酸的碱金属盐，显碱性，可用盐酸标准液滴定。 COO Na +H C l COOH +N aC l 在水溶液中滴定时，由于碱性较弱(Pk b=9.80)突跃不明显，故加入和水不相溶混的溶剂乙醚提除反应生成物苯甲酸，使反应定量完成，同时也避免了苯甲酸在瓶中析出影响终点的观察。 2.滴定时应充分振摇，使生成的苯甲酸转入乙醚层。 3.在振摇和分取水层时，应避免样品的损失，滴定前，使用乙醚检查分液漏斗是否严密。 四、思考题 1.乙醚为什么要分两次加入?第一次滴定至水层显持续橙红色时，是否已达终点?为什么? 2.分取水层后乙醚层用5mL水洗涤的目的是什么? 实验五阿司匹林片的分析 一、目的 1.掌握片剂分析的特点及赋形剂的干扰和排除方法。 2.掌握阿司匹林片鉴别、检查、含量测定的原理及方法。 二、操作 [鉴别] 1.取本品的细粉适量(约相当于阿司匹林0.1g)，加水10mL煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。 2.取本品的细粉(约相当于阿司匹林0.5g)，加碳酸钠试液10mL，振摇后，放置5分钟，滤过，滤液煮沸2分钟，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。 [检查] 游离水杨酸 取本品的细粉适量(约相当于阿司匹林0.1g)，加无水氯仿3mL，不断搅拌2分钟，用无水氯仿湿润的滤纸滤过，滤渣用无水氯仿洗涤2次，每次1mL，合并滤液和洗液，在室温下通风挥发至干；残渣用无水乙醇4mL溶解后，移至100mL量瓶中，用少量5％乙醇洗涤容器、洗液并入量瓶中，加5％乙醇稀释至刻度，摇匀，分取50mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸液(1mol/L)1mL，加硫酸铁铵指示液2mL后，再加水适量使成100mL] 1mL，摇匀；30秒钟内如显色，和对照液(精密称取水杨酸0.1g，置1000mL量瓶中，加冰醋酸1mL，
生物药物分析实验指导书
生物药物分析实验指导书 蚌埠学院生物与食品工程系 二0一0年十二月
目录 目录 ----------------------------------------------------------1 实验一药物分析基本操作 --------------------------------------2 实验二葡萄糖的杂质检查 ------------------------------------6 实验三药物的鉴别试验-----------------------------------------9 实验四异烟肼片含量测定--------------------------------------10 实验五阿司匹林含量测定--------------------------------------11 实验六阿司匹林片剂含量分析----------------------------------12 实验七对乙酰氨基酚片的含量测定------------------------------14 实验八片剂的含量均匀度与溶出度测定 -------------------------15 参考文献------------------------------------------------------17
实验一药物分析基本操作 一、目的要求 1、掌握电子分析天平的使用与维护； 2、掌握容量仪器和滴定管的使用 二、主要仪器与药品 电子分析天平、容量瓶、酸式滴定管、碱式滴定管。 三、实验方法 1-1电子分析天平的使用与维护 分析天平是定量分析工作的最常用的仪器之一，称量准确与否对分析结果有重大影响。因此，必须掌握天平的正确使用和必要的日常维护，以保证仪器的精度和分析结果的准确性。 1、称量前检查与校正 水平位置：揭去天平罩，检查天平的水平位置，调节天平底座后面的两个脚扭，使水泡置于圆圈中央。察看天平上标明的最大载重量，称量时切勿超过最大载重量。 零点校正：接通电源，按天平面板上“on”键，天平预热和自检后，显示“0.0000g”闪动，待数字稳定，表明天平已稳定，进入准备称量状态。 2、称量方法 包括：直接称量法、减重称量法和固定重量称量法 直接称量法打开天平侧门，将物品放在天平称盘中央，关上天平侧门。待数字显示稳定，准确读取（注意：拿取物品时应戴手套，或用干净的纸条或塑料薄膜套住被称器皿）。 减重称量法将适量试样装入称量瓶中，按直接称量法称得重量为W1g，然后从天平盘上取下称量瓶，在接受物品的容器上方，取下称量瓶盖，将称量瓶倾斜，用瓶盖轻敲瓶口，使试样慢慢落入接受容器中，接近所需重量时，用瓶盖轻敲瓶口，使粘在瓶口的试样落下，同时将称量瓶慢慢直立，然后盖好瓶盖。再称取称量瓶重量为W2g。两次重量之差（W1-W2），即为供试样品的重量。如此继续进行，可称取多份试样。 固定重量称量法将空容器置天平盘上，待数字显示稳定，按键去皮或记下重量。取待测样品适量置容器中，精密称定，读取数据。 若采用称量纸称取物品，则将样品到入容器后必须回称纸的重量，并从读取的称量数据中减去回称后重量。例如：在称量纸上称取适量样品，借助小漏斗，将样品导入容量瓶内，回称纸的重量；或直接将盛有样品的称量纸卷成筒状，倒入容量瓶内，注意容量瓶口必须干燥。
药物分析实验大纲
《药物分析实验》教学大纲 一、课程基本信息： 课程编号： 中文名称：药物分析实验 英文名称：Pharmaceutical Analysis Experiment 授课专业：制药工程 总学时:36 学分:2 实验课时:36 修读学期：第三学期 先修课程：无机化学无机化学实验有机化学有机化学实验分析化学分析化学实验物理化学物理化学实验药物化学药物化学实验等 课程内容：《药物分析实验》是《药物分析》课程的重要组成部分，是运用各种分析技术检验药物及其制剂质量的实践性课程，内容主要包括各种分析技术在药物分析中的应用及方法评价。 建议教材：侯晓虹编，《药物分析实验》，沈阳药科大学社，2002年。 参考书：[1]中华人民共和国药典委员会编，中华人民共和国药典（2000年版）二部，化学工业出版社出版 [2]中华人民共和国药典委员会编，中华人民共和国药典注释（1990年版），化学工业出版社出版 [3]刘文英主编，药物分析，人民卫生出版社出版，1998年 二、课程教学大纲 （一）、课程实验目的与要求： 目的：本课程要求学生加深对药物分析学科基本理论和专业知识的认识和理解，掌握中国药典常用的分析方法和实验技术的基本原理及常用仪器的正确使用，熟悉各种分析方法的操作技术和效能指标的评价。 要求：培养学生具有科学的实验态度和操作技能，为从事药品质量检验工作奠定基础。（二）、课程教学内容及要求： 实验一葡萄糖杂质检查 （一般杂质检查） 1．类别：验证性实验 2．实验目的和要求： (1) 通过葡萄糖分析，了解药物的一般杂质检查的原理和意义。 (2) 熟悉杂质检查的操作方法
3．实验内容： 参照中国药典附录内容和方法检查药物中的氯化物、重金属、砷盐等一般杂质. 4．学时：4 实验二药物中的杂质检查 （特殊杂质检查） 1.类别：验证性实验 2.实验目的和要求： (1)．掌握本实验中药物特殊杂质的来源和检查原理。 (2)．掌握薄层层析法用于特殊杂质检查的一般操作。 3．实验内容： 乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查（原料） 4.学时：4 5. 实验注意事项 （1）点样采用微量注射器进行，在距薄层板底边2.5cm处开始，点样应少量多次点于同一原点处，原点面积应尽量小。 （2）采用倾斜上行法展开，展开剂应浸入薄层板底边约1cm深度。 （3）碱性四氮唑蓝试液应临用新配。新鲜试剂应呈黄色，颜色如变深者不宜使用。（4）显色后，应立即检视斑点，并用针头定位，以便记录图谱。 实验三苯巴比妥的鉴别、区别（微晶 反应）及含量测定（银量法） 1.类别：验证性实验 2.实验目的和要求： （1）．掌握熟悉用银量法测定巴比妥类药物含量的原理方法及其操作条件。 （2）．了解苯巴比妥的鉴别反应的原理及微晶反应的观察。 3．实验内容： （1）银量法测定巴比妥类药物含量 （2）苯巴比妥的鉴别反应和微晶反应 4.学时：4 5. 实验注意事项
药物分析实验指导书(11版大纲)
药物分析实验指导书 实验一烟酸原料药的鉴别实验 一、实验目的 1、掌握鉴别烟酸的原理及方法 2、掌握紫外分光光度法鉴别烟酸的方法原理及紫外吸收图谱的解析 3、熟悉紫外分光光度计的操作要点及紫外分光光度法效能指标评价的内容与要求 二、实验原理 1、鉴别反应 （1）烟酸加2,4-二硝基氯苯加热溶化后，生成季铵化合物，再加乙醇制氢氧化钾溶液，即显紫红色，以此鉴别烟酸，反应式为： N OH O Cl 醇制KOH N CHOH KOOC NO2 2 NO2 NO2 本反应需在无水的条件下进行 （2）烟酸与氢氧化钠发生酸碱中和反应，遇石蕊试纸显中性，遇硫酸铜生成淡蓝色烟酸酮沉淀，以此鉴别烟酸，反应式为： N OH O O N O O Cu 淡蓝色沉淀 （3）烟酸加水溶解后，照紫外-可见分光光度法测定，在262nm的波长处有最大吸收，在237nm的波长处有最小吸收，且237nm波长处的吸光度与262nm波长处的吸光度的比值应为0.35～0.39；而烟酰胺也在262nm的波长处有最大吸
收，在245nm波长处有最小吸收，在A254nm/A262nm为0.63～0.67。因此可用该方法来区别烟酸和烟酰胺。 三、实验内容与操作 （一）仪器和试剂 1、仪器紫外分光光度计、配对比色杯一对、试管（25ml，2支）、电炉、药物天平、烧杯（50ml，2只）、容量瓶（100ml、10ml各2只）、移液管（1ml，2只）、乳钵（小号1个，配乳槌）。 2、试剂烟酸、0.4%氢氧化钠试液（取氢氧化钠0.4g，加水使溶解成100ml，即得）、2,4-二硝基氯苯、乙醇制氢氧化钾试液（取氢氧化钾3.5g，加100ml95%乙醇使溶解，静止后取上清液）、硫酸铜溶液（取硫酸铜12.5g，加水溶解成100ml，即得），蒸馏水、95%乙醇 （二）实验步骤 1、鉴别 （1）取烟酸约4mg，加2,4-二硝基氯苯8mg，研匀，置试管中，缓缓加热溶化后，再加热数秒钟，放冷，加乙醇制氢氧化钾试液3ml，即显紫红色。 （2）取烟酸约50mg，加水20ml溶解后，滴加0.4%氢氧化钠溶液至遇石蕊试纸显中性反应，加硫酸铜试液3ml，即缓缓析出淡蓝色沉淀。 （3）取烟酸，加水溶解并稀释制成每1mL中约含20μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版附录ⅣA）测定，在262nm的波长处有最大吸收，在237nm的波长处有最小吸收；在237nm波长处的吸光度与262nm波长处的吸光度的比值应为0.35～0.39。 四、思考题 1、计算烟酸的A235nm/A262 nm 五、实验报告书写要求 1、实验目的； 2、实验原理； 3、主要仪器与试剂； 4、实验结果； 5、思考题答案。
药物分析实验
实验一葡萄糖杂质的检查（一般杂质检查） 一、目的要求 1、通过葡萄糖的分析，了解药物的一般杂质检查的原理和意义。 2、熟悉杂质检查的操作方法。 二、操作方法 1、酸度取本品2.0g，加水20ml溶解后，加酚酞指示剂3滴与0.02mol/L氢氧化钠液0.2ml，应显粉红色。 2、溶液的澄清与颜色 取本品5g，加热水溶解后，放冷。用水稀释至10ml溶液迎接澄清无色。如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与对照液（取比色用氯化钴液3ml，比色用重铬酸钾3ml与比色用硫酸铜液6ml，加水稀释至50ml）1.0ml，加水稀释至10ml比较，不得更深。 3、氯化物 取本品0.60g，加水溶液使成25ml（如显碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应），再加稀硝酸10ml，溶液如不澄清，滤过，置50ml纳氏比色管中，加水适量使成约40ml，摇匀，即得供试品溶液。加硝酸银试液1.0ml，用水稀释使成50ml，摇匀，在暗处放置5min。如发生浑浊，与标准氯化钠溶液一定量制成的对照液[取标准氯化钠溶液（10ugCl/ml）6.0ml，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀释使成约40ml。 加硝酸银试液1ml，再加水适量使成50ml，摇匀，在暗处放置5min比较，不得更深（0.010%）。 4、硫酸盐 取本品2.0g，加水稀释使成40ml（如显碱性，可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应）。 溶液如不澄清，滤过置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，加25%氯化钡5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，纺织10min，如发生浑浊，与对照标准液[取标准硫酸钾（100ug SO4/ml）溶液2ml，置50ml纳氏比色管中，加水稀释使成40ml，加稀盐酸2ml，加25%氯化钡溶液5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，放置10min]比较，不得更浓（0.010%）。 5、乙醇中不溶物 取本品1.0g，加90%乙醇30ml，置水浴上加热回流约10min，应溶解成澄明的溶液①。 6、亚硫酸盐与可溶性淀粉 取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应立刻显黄色②。 7、铁盐 取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45ml，加30%硫氰酸铵溶液3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液（10ugFe/ml）2.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得加深（0.001%）。 三、注解 ①葡萄糖溶解而淀粉和糊精等不溶。 ②存在可溶性淀粉是呈兰色，存在亚硫酸盐时碘液褪色。 实验一附录
液质联用实验报告
液质联用技术在药物分析中的应用 1、实验目的 1、了解液质联用的原理及作用； 2、了解该液质联用仪器适用的样品种类及注意事项； 2、实验原理 液质联用（HPLC-MS）又叫液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。 电喷雾四级杆飞行时间质谱（ESI-Q-TOF-MS）：质谱分析是一种测量离子荷质比的分析方法，其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带正电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定去质量。电喷雾电离（ESI）是质谱方法中的一种“软电离”方式，它的原理是：在强电场的作用，引发正、负离子的分离，从而生成带高电荷的液滴。在加热气体（干燥气体）的作用下，液滴中溶剂被汽化，随着液滴体积逐渐缩小，液滴的电荷密度超过表面张力极限时，引起液滴自发的分裂，即“库仑爆炸”。分裂的带电液滴随着溶剂的进一步变小，最终导致离子从带电液滴中蒸发出来，产生单电荷或多电荷离子，进入质谱仪。由于ESI的电离方式可以产生多电荷离子，大大拓宽了测定物质的分子量的范围。四级杆（Quadrupole）主要起选择离子的作用，其后的碰撞池可以将通过四级杆选择的母离子碎裂成子离子，从而获得更多的结构信息。气相离子能够被适当的电场或磁场在空间或时间上按照荷质比的大小进行分离有赖于质量分析器。与其他质量分析器相比，飞行时间质量分析器（TOF）具有结构简单、灵敏度高和质量范围宽等优点（因为大分子离子的速度慢，更易于测量），分辨率也可达到万分之一。 3、实验仪器 Aglient 6510 Quadrupole Time-of-Flight LC/MS 4、数据记录及结果处理 样品的LC-MS图如下图1所示，结合表1前可知，该物质为软骨藻酸。
空间分析实验报告
空间分析原理 及应用 上机实验
练习1：利用缺省参数创建一个表面 1．1 启动ArcMap并激活地统计分析模块 单击窗口任务栏的Start按扭，光标指向Programs，再指向ArcGIS，然后单击ArcMap。在ArcMap中，单击Tools，在单击Extensions，选中Geostatistical Analyst复选框，单击Close按扭。 1.2 添加Geostatistical Analyst工具条到ArcMap中。 单击View菜单，光标指向Toolbars，然后单击Geostatistical Analyst。 1．3 在ArcMap中添加数据层 一旦数据加入后，就能利用ArcMap来显示数据，而且如果需要，还可以改变没一层的属性设置（如符号等等） 1.单击Standard工具条上的Add Data按扭。 找到安装练习数据的文件夹（缺省安装路径是C:\ArcGIS\ArcTutor\Geostatistics）,按住Ctrl键，然后点击并高亮显示Ca_ozone_pts和ca_outline数据集。 3.单击Add按扭。 4.单击目录表中的ca_outline图层的图例，打开Symbol Selector对话框。 5.单击Fill Color下拉箭头，然后单击No Color。 6.在Symbol Selector对话框中单击OK按钮。 点击Standard工具条上的Save按扭。新建一个本地工作目录（如C:\geostatistical）,定位到本地工作目录。
1．4 利用缺省值创建表面 单击Geostatistical Analyst，然后单击Geostatistical Wizard。 2.点击Input Data下拉箭头，单击并选中ca_ozone_pts。 3.单击Attribute下拉框箭头，单击并选中属性OZONE。 4.在Methord对话框中单击Kriging. 单击Next按扭。缺省情况下，在Geostatistical Method Selection对话框中，Ordinary Kriging和Prediction Map被选中. 6．在Geostatistical Method Selection对话框中单击next按扭。 7．点击next按扭。
药物分析A卷及答案
天津医科大学学年一学期 药学、制剂专业药物分析课程考试及答案（卷）一、名词解释 药物分析课程：是一门研究药品全面质量控制的学科。 ：重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质 杂质限量：杂质的最大允许量 一般杂质：在自然界分布较广泛，在多种药物的生产和储藏过程中容易引入的杂质。 精密度：是指在规定的测试条件下，在同一均匀供试品经多次取样测定所得结果之间的接近程度 二、填空 ．丙二酰脲类的鉴别反应有银镜反应、铜盐反应。适用于巴比妥类药物的鉴别。 ．药物稳定性试验包括影响因素试验、加速试验和长期试验。 ．溴量法可用来测定含有双键、酚羟基结构的药物。 ．中国药典（版）测定维生素含量采用的是三点校正法。 ．的中英文全称分别是：药品生产质量管理规范、。 ．钯离子比色法可用于吩噻嗪类药物的含量测定，其依据是该类药物结构中含有。 ．区分巴比妥与含硫巴比妥可采用铜盐反应和紫外检测。 ．的英文全称为。 ．对法进行准确度考查时，回收率一般为；容量分析法的回收率一般为。 ．绿奎宁反应可用于位含氧喹啉衍生物的鉴别，例如奎宁。 ．阿司匹林片剂（中国药典版），采用的是双步滴定法，该方法可以消除制剂中水杨酸和酸性稳定剂的干扰。 ．用非水滴定法测定有机碱药物常用的滴定剂是高氯酸，常采用的溶剂是醋酸，常用的指示剂是结晶紫，硫酸根的干扰可通过计算方法消除，在非水介质中硫酸根呈一级电离。．芳酸的碱金属盐的药物可用双相滴定法进行含量测定。 ．链霉素鉴别的特征反应式麦芽酚反应，其水解产物链霉胍的特有反应是坂口反应。 ．用戊烯二醛反应鉴别异烟肼是针对结构具有γ或β位被羧基衍生物取代的吡啶 ．阿司匹林中水杨酸的检查室利用水杨酸具有酚羟基，可在弱酸性溶液中与高铁盐反应呈紫色。 ．中国药典版规定中两个分析物分离度应符合要求是指大于或等于. ．阿司匹林特殊杂质检查中溶液澄清度检查是检查碳酸钠试液中不溶物。此类不溶物包括：苯酚、水杨酸苯酯、醋酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯。 三、选择题（括号内有答案） . 某一药品不溶于水，可溶于氯仿和乙酸乙酯。对该药品中氯化物进行检查时，下述叙述正确的是（） ．加水过滤后，依法检查 . 加氯仿使药物溶解后，依法检查 . 加乙酸乙酯使药物溶解后，依法检查经炽灼后，依法检查 . 某一药品有色，对该药品中的氯化物进行检查时，下列叙述正确的是（） . 加焦糖，调色后，依法检查 加标准比色液，调色后，依法检查 经过化学反应，使药品褪色后，依法检查
《药物分析》实验指导书
《》《药物分析》实验指导书 (供药学专业使用) 黄石理工学院医学院药学系 二0一三年一月编
目录 实验一实验要求与分析中常用仪器的基本操作要点实验二《中国药典》一部、二部的查阅 实验三药物的杂质检查 实验四葡萄糖注射液分析 实验五芳酸及其酯类药物的鉴别 实验六阿司匹林制剂容量分析的综合性实验 实验七有关物质的色谱检查 实验八槐花药材中总黄酮的质量分析 实验九维生素C制剂分析的综合设计性实验 实验十双波长分光光度法测定复方制剂含量 实验十一考核:药物的区别、鉴别试验
实验一实验要求与分析中常用仪器的基本操作要点 【实验目的】 1、了解药物分析实验要求。 2、学习并掌握分析中常用仪器的基本操作要点。 【实验要求】 按教学人纲规定,实验课教学应做到: 1.认真验证实验教材指定的药物分析理论,加深对本学科专业知识的理解。 2.正确掌握实验教材中各类代表性药物的分析方法,熟练各种分析方法的操作技术,培养独立开展药物分析工作的能力。 3.全面了解药物分析工作的性质与内容,培养严肃认真、实事求就是的科学态度与工作作风。 为提高实验课教学质量,参加实验课学习者应努力做到: 1.认真预习,明确实验目的,弄懂原理与操作要点,预先安排好实验进程,估计实验中可能发生的问题及处理办法。 2.严格按实验规程操作,操作应力求正规,细心观察实验现象。 3.及时做好完整、确切的原始记录。原始纪录不得记于纸条上、手上或其她本上再撰写,应直接记于实验记录本上。 4.防止试剂、药品污染,取用时应仔细观察标签与取用工具上的标志,杜绝错盖或不盖瓶塞的现象。公用试剂、药品应在指定位置取用,不得随意挪动。 5.爱护仪器、小心使用,破损仪器应及时登记报损、补发。动用精密仪器,须经教师同意,用毕登记签名。 6.实验时确保安全、时刻注意防火、防爆。发现事故苗头及时报告,不懂时不要擅自动手处理。 7.爱护公物,节约水电、药品、试剂。 8.实验完毕认真清理实验台,仪器洗净后放回原位,锁好柜子,经教师同意后,方可离开。值日生应负责全面整理实验室卫生。 认真总结实验结果,按指定恪式写好实验报告,并按时交出。 【实验内容】 1、常用仪器的基本操作要点 滴定管、容量瓶与移液管就是滴定分析中准确量测液体的三种仪器,正确地使用这些仪器就是做好定量分析实验的基本技能。为此须特别注意这三种仪器的性能及其使用方法。
药物分析实验2012
药物分析实验工程技术大学制药工程系
目录 实验一葡萄糖酸钙片的分析 2 实验二葡萄糖的一般杂质检查 5 实验三阿司匹林肠溶片的分析 11 实验四过氧化苯甲酰凝胶的分析 15 实验五盐酸小蘗碱片的分析 17 实验六紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量 24 实验七维生素AD滴剂中维生素A的鉴别与含量测定 26 实验八牛黄解毒片的鉴别 30
实验一葡萄糖酸钙片的分析【目的要求】 1.掌握葡萄糖酸钙片鉴别实验的原理； 2.掌握滴定法测定葡萄糖酸钙片含量的原理与操作。 【基本原理】 药物 COO - C H OH HO H H OH H OH 2OH Ca2+ 2 , H2O 本品含葡萄糖酸钙（C 12H 22 CaO 14 ·H 2 O）应为标示量的95.0%-105.0% 性状：本品为白色片。 1原理 (1)鉴别： ①与苯肼反应 本品在酸性条件下与苯肼反应生成黄色的结晶。 ②本品与三氯化铁 ③本品在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。 ( 2) 含量测定 钙紫红素先与钙离子络合生成紫红色络合物，随着EDTA络合剂的加入，由于EDTA 与钙离子的配位能力强于钙指示剂与钙离子的配位能力，而使钙紫红素先与钙离子络合生成紫红色络合物中的钙离子被EDTA夺取，将指示剂游离出来，溶液即显示游离指示剂的颜色，从而指示滴定的终点。
【实验操作】 （一）鉴别： 1．与三氯化铁反应 取本品一片，研细，加温热的水10mL，振摇，过滤，吸取5mL溶液，加FeCl 3 溶液一滴，应显深黄色。 2．燃烧显色 取铂丝，用盐酸浸湿后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。3．与苯肼反应 取本品约0.5g,置试管中，加水5 mL,微热溶解后，加冰醋酸0.7mL与新蒸的苯肼1mL，置水浴上加热30分钟，放冷，用玻璃棒擦试管的壁，渐生成黄色的结晶。（二）含量测定： 取本品5片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于葡萄糖酸钙1g），加水50毫升，微热使葡萄糖酸钙溶解，放冷至室温，移植至100mL容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取滤液25mL，加水75mL，加氢氧化钠溶液15mL与钙紫红素0.1g，用EDTA溶液滴定至溶液自紫色转变为纯蓝色。每1mLEDTA溶液（0.05mol/L）相当于22.42mg的葡萄糖酸钙。 标示量,(%)=[V EDTA ×22.42×100×W 1 /(1000×W 2 ×25×0.5×5)]×100% W 1 :5片药品的重量(g) W 2 : 称重溶解的药品重量 V EDTA 滴定消耗的EDTA溶液的体积。
GIS空间分析报告实验报告材料
标准文案 本科学生综合性、设计性 实验报告 姓名＿任富祖＿学号＿134130412 专业地理信息系统班级2013级GIS 实验课程名称地理信息系统原理 指导教师＿董铭＿ 开课学期 2014 至＿2015 学年＿下学期 上课时间 2015＿年 3-6月 云南师范大学旅游与地理科学学院
图一 (三)空间分析 （1）在界面中观看加载进来的两个面图层，发现在安徽省境界外仍然有湖的存在，而在省外的是我们不考虑的，所以我们要将它删掉。如图二所示
图二 （2）选择“arctoolbox”中“extract”选项下的“clip”选项，将“湖”当做输入 图层，“城市区域”当做裁剪图层。如图三 图三 （3）图层输出了以后，发现湖在省外的部分都没有了，打开“湖—clip”的属性表， 点击字段下面的自动计算更新一下数据，发现数据和以前的也不一样了。如图四，当 所以数据都更新好之后进入下一步。
图四 （4）这一步要做的是计算土地面积，土地面积就是行政区域减掉湖的面积，所以这一步我们要用的空间叠合分析中的另外一个工具“erase”。打开“arctoolbox”，点击“overlay”选中“erase”工具，双击，出现了如图五的对话框，我们选择“城市区域”为输入图层，而“湖—clip”为擦去图层，点击OK，生成了“城市区域—Erase” 图层。 图六
（5）点击右键，打开属性表，更新一下数据，这些土地的面积就是减掉湖的面积之后所剩下的了。如图七 图七 图八是之前没有减掉湖面积的属性表，我们可以进行一下对比。 图八 （6）添加字段“人口数”这些是从网上查找下来的资料，每个城市的总人数，知道人口数和土地面积了以后，我们就可以计算人口密度了。新建一个字段“人口密度”点击右键，选择“field Calculator”选择人口密度=[人口数]/[面积]，这样字段下面就会自动计算出各个城市的人口密度了。如图九
药物分析实验
药物分析实验 目录 一、基本知识与基本技能 （一）药物分析的性质与任务 （二）药品检验工作的基本程序 （三）计量器具的检定 （四）药物分析数据的处理 （五）药品质量标准分析方法的验证 （六）药典基本知识 二、验证性实验 实验一葡萄糖的一般杂质检查… 实验二醋酸可的松中其它甾体的检查 实验三药物的特殊杂质检查 实验四药物的鉴别与区别 实验五双相滴定法测定苯扎溴铵溶液的含量 实验六凯氏定氮法测定干酵母片的含量 实验七非水碱量法测定硫酸奎尼丁的含量 实验八溴酸钾法测定异烟肼片的含量 实验九磺胺嘧啶的重氮化滴定 实验十酸性染料比色法测定硫酸阿托品注射液的含量 实验十一硅钨酸重量法测定维生素B1片的含量 实验十二差示分光光度法测定苯巴比妥片的含量 实验十三三点校正-紫外分光光度法测定维生素AD胶丸中维生素A的含量实验十四气相色谱法测定维生素E片剂的含量 实验十五高效液相色谱法测定丙酸睾酮注射液的含量
实验十六复方乙酰水杨酸片中三种成分的含量测定 实验十七双波长分光光度法测定复方制剂的含量 实验十八胃蛋白酶片的含量测定 实验十九尿中咖啡酸的比色分析 实验二十尿中异烟肼及其代谢物乙酰异烟肼的比色测定实验二十一血清中氨茶碱的双波长分光光度法测定 实验二十二血清中茶碱的高效液相色谱分析 实验二十三血浆中阿司匹林的高效液相色谱测定 实验二十四唾液中对乙酰氨基酚浓度的比色测定 三、综合性实验 实验一阿司匹林及其制剂的质量分析 (一) 阿司匹林原料药 (二) 阿司匹林肠溶片 (三) 阿司匹林栓 实验二对乙酰氨基酚和对乙酰氨基酚片的质量分析 (一) 对乙酰氨基酚原料药 （二）对乙酰氨基酚片 实验三盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因注射液的质量分析（一）盐酸普鲁卡因原料药 （二）盐酸普鲁卡因注射液 四、设计性实验 实验一药物的鉴别实验 实验二药物的特殊杂质检查实验 实验三药物滴定分析实验 实验四药物紫外定量分析实验 实验五药物的色谱定量分析实验
阿司匹林片的分析的实验报告
实验四阿司匹林片的分析 【实验目的】 ⒈了解溶出度测定的方法与原理； ⒉熟悉片剂分析的项目与方法; ⒊掌握阿司匹林鉴定试验的原理及与药物结构的关系; ⒋掌握本实验中药物特殊杂质的来源和检查原理； ⒌掌握两步滴定法测定阿司匹林片含量的原理与操作，及容量分析法测定片剂含量的计算 方法。 【实验原理】 1.药物 O H O O O CH 3 本品为白色片；遇湿气易变质。本品含阿司匹林应为标示量的95.0%~105.0%。 2.原理： ⑴鉴别 ①三氯化铁反应：水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫 堇色配位化合物。阿司匹林加热水解生成水杨酸，可用三氯化铁反应鉴别。 ②水解反应：阿司匹林与碳酸钠试液加热，酯健水解，得水杨酸钠和醋酸钠，加过量稀 硫酸酸化后，生成白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气，因此可用水解反应鉴别。 ⑵检查 阿司匹林中游离水杨酸的检查 a.杂质来源游离水杨酸为阿司匹林生产中未反应的原料或贮存过程中的水解产物。 b.检查方法阿司匹林无游离酚羟基，不与高铁盐溶液作用，而水杨酸则可与之反应生 成紫堇色，此种方法称之对照法，极为灵敏，可检出1ug的游离水杨酸。 ⑵含量测定 阿司匹林分子结构中有酯健，易水解生成水杨酸和醋酸，片剂中为防止酯健水解加入少量酒石酸或枸橼酸做稳定剂，因此在片剂中有酸性杂质，含量测定时为消除酸性杂质干扰，采用两步滴定法。 第一步中和，消除酸性杂质〔酸性附加剂和降解产物〕的干扰
COOH OCOCH 3 NaOH COONa OCOCH 3 H 2 O 第二步水解后剩余滴定 COONa OCOCH3 NaOH COONa OH CH COONa 3 2NaOH H SO 2 4 Na SO 242H O 2 【实验仪器与试剂】 ㈠仪器 试管，纳氏比色管，溶出度测定仪，紫外-可见分光光度计，10~25ml注射器，0.8um微孔 滤膜，酸式滴定管，容量瓶，移液管，漏斗。
药物分析设计性实验
logo 药物分析设计性实验 研究报告 学院：xx学院 班级： 组号： 成员： 指导教师: 时间：
鉴别试验实验设计 实验目的： 1.掌握药物结构与分析方法间的关系 2.掌握分析方法基本操作与含量计算 3.熟悉专业文献的查阅,信息检索 4.了解药品分析的全过程 5.了解如何根据文献资料进行实验设计 实验原理： 葡萄糖: (1) 单糖分子中都含有羰基或醛基——还原性。 (2).单糖在水溶液中主要呈半缩醛的环状结构。 阿莫西林: (1)具有酚羟基可以与三氯化铁反应 (2) 具有手性碳,比旋度为+290°至+310° SMZ: (1) 具有磺酰氨基,可以金属离子络合 (2)本品具有芳伯胺基团,显芳香第一胺类的鉴别反应 对乙酰氨基酚: (1)具有酚羟基可以与三氯化铁反应 (2)具有隐性芳伯氨基,水解显芳香第一胺类的 实验药品：葡萄糖、阿莫西林、SMZ、对乙酰氨基酚
实验试剂和仪器： 仪器:旋光仪,IR,超声机,水浴锅,一般玻璃仪器 试剂：蒸馏水、碱性酒石酸铜试液、0.4％氢氧化钠溶液、硫酸铜试液、三氯化铁试液、稀盐酸、亚硝酸钠试液、碱性β-萘酚试液。 实验步骤: 葡萄糖： (1)取本品约0.2g，加水5ml 溶解后，缓缓滴入微温 的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。 (2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。 分别称取一定比例干燥的葡萄糖和溴化钾 (1.0:100)，置玛瑙研钵中，在红外灯下研匀，取适量置于压模中，均匀铺布后，抽真空 2 m i n ，加压至 20~30MPa并保持2min，取出制成的供试片，置于红外光谱仪的样品光路中，录制光谱图。 中国药典葡萄糖红外光谱图 ( 光谱号码 7 0 2 ) 阿莫西林： (1)取阿莫西林适量，研细，加pH=7.0磷酸盐缓冲液溶解（必要时冰浴超声助溶10分钟）制成阿莫西林的溶液，静置，滤过，取滤液作为供试品溶液加三氯化铁试液3滴，即显深橘红色。 (2)取本品精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中1mg的溶液，依法测定(除另有规定外，本法系采用钠光谱的D线（589. 3nm)测定旋光度，测定管长度为ldm(如使用其他管长，应进行换算）,测定温度为20°C。使用读数至0. 01°并
药分实验问答题整理
药分实验 一、巴比妥类药物的鉴别和微晶反应 1．鉴别实验中样品如何取？ 取样品要求精确，固体样品应用电子天平称取，液体样品应用移液管移取，取样过程应用专用的移取工具，不能用手接触样品，不能是样品受污染，取样量应以最低浓度取样为准 2.鉴别反应中，所用的仪器要求如何？ 灵敏度高 3.如何正确掌握苯巴比妥、巴比妥微晶反应技术 应用纤维结晶法，根据药物本身的晶形或药物与试剂反应的产物晶形特征进行 二、葡萄糖的一般杂质检查 1.一般杂质检查在药品质量控制中的意义及检查的主要项目 意义：保证药品质量和临床应用安全有效，也为生产和流通过程的药品质量管理提供依据项目：氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、炽灼残渣 2.比色、比浊操作应遵循的原则 比色：溶液色泽较浅时，在白色光背景下自上透视，溶液颜色较深时，在白色背景前平视观察 比浊：置于同一背景下自上而下观察 3.计算重金属检查中，标准铅溶液的取用量 标准铅液为每1毫升相当于10微克的铅，适宜目视比色的浓度范围为每25毫升的溶液中含10~20微克的铅，即得标准铅溶液的取样量1~2毫升 4.药物的一般杂质检查中，为什么称取样品时仅需采用托盘天平，而坩埚的称重需要用精密天平？ 因为药物的一般杂质检查中不要求测定其准确含量，只要检查杂质是否超过限量即可，因此仅需采用托盘天平，而坩埚的称量若不使用精密天平，由于重金属在样品中含量一般都很小，就会导致所得重金属含量测定不准确，影响实验结果。 三、某些药物的特殊杂质检查 1.乙酰水杨酸中游离水杨酸检查的基本原理是什么？ 乙酰水杨酸中有酚羟基，不能与高铁盐反应，而水杨酸可与高铁盐反应呈紫色，比较色泽，方法灵敏，可检出1微克水杨酸。 2.盐酸普鲁卡因注射液中为什么要检查对氨基苯甲酸？ 普鲁卡因可水解生成对氨基苯甲酸，高温加热或长时间储存，对氨基苯甲酸可进一步转化为苯胺，而苯胺又可被转化为有色物质，使注射液变黄，毒性增加，疗效下降。 3.薄层色谱法检查药物中特殊杂质的方法有哪几种类型？盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查方法与醋酸可的松中其他甾体的检查方法有何异同点？ 类型：杂质对照品法、供试品自身对照法、对照药物法 相同点：都用薄层色谱 4.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸与对二甲氨基苯甲醛显色的产物是什么？ 西夫碱 5.旋光法操作注意点有哪些？如何检定旋光计？ 6.设计药物中特殊检查方法的依据是什么？ 利用药物理化性质的差别 7.特殊杂质检查的常用方法有哪些？
药物分析实验报告
阿司匹林的质量分析 一．实验目的 1. 掌握阿司匹林鉴定试验的原理及与药物结构的关系； 2. 掌握本实验中药物特殊杂质的来源和检查原理； 3. 掌握阿司匹林分析的条件及要点 二．实验原理 1.药物 本品为白色片，遇湿气易变质。本品含阿司匹林应为标示量的95.0%~105.0%。 2.原理： ⑴鉴别 ①三氯化铁反应:水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物。阿司匹林加热水解生成水杨酸，可用三氯化铁反应鉴别。 ②水解反应:阿司匹林与碳酸钠试液加热，酯健水解，得水杨酸钠和醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，生成白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气，因此可用水解反应鉴别。
⑵检查 阿司匹林中游离水杨酸的检查 a. 杂质来源 游离水杨酸为阿司匹林生产中未反应的原料或贮存过程中的水解产物。 b. 检查方法 阿司匹林无游离酚羟基，不与高铁盐溶液作用，而水杨酸则可与之反应生成紫堇色，此种方法称之对照法，极为灵敏，可检出1ug 的游离水杨酸。 3.干燥失重测定法 （1）定义：系指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。主要指水分，也包括其它挥发性物质。 （2）干燥失重测定法(中国药典 2010 年版二部附录Ⅷ L)有烘箱干燥法、恒温减压干燥法及干燥器干燥法，后者又分常压、减压两种。 1）常压恒温干燥法：适用于受热较稳定的药物。将供试品置相同条件下已干燥恒重的扁形称瓶中，于烘箱内在规定温度下干燥至恒重（两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下），从减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。干燥温度一般为105℃。
2）干燥剂干燥法：适用于受热分解且易挥发的供试品。将供试品置干燥器中，利用干燥器内的干燥剂吸收水分至恒重。常用的有硅胶、硫酸和五氧化二磷。 3）减压干燥法：适用于熔点低、受热不稳定及难赶除水分的药物。在减压条件下，可降低干燥温度和缩短干燥时间。减压后的压力在2.67kPa(20mmHg)以下。 恒温减压干燥法