真菌的培养及形态观察

题目：真菌的培养及形态观察

动物科学1204班聂孝明 20121546 指导教师：邹玲

摘要：了解酵母菌和霉菌的菌落特征及在培养基中的生长表现，还有真菌的分离培养方法和载片培养，学习真菌水浸片的制备及形态观察。本实验通过真菌的固体培养，酵母菌水浸片旳制备观察及划线分离培养的方法进行形态观察。在固体培养基上，观察到A菌落成绿色比较光滑、有分生孢子、菌丝有横隔为青霉。D菌落有大量直立菌丝并且顶部发黑、有孢子囊、菌丝无横隔为根霉。B菌落大而光滑、显微镜下菌体较大、有假菌丝并且出芽生殖的为酵母菌。

关键词：酵母菌霉菌形态观察分离培养

引言：真菌在自然界中分布广、数量大、种类多。酵母菌是单细胞微生物，细胞核和细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大10倍左右，多为圆形或卵圆形，无性繁殖为出芽生殖，可以形成假菌丝，有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色液制成水浸片可以观察期外形和区分细菌的死活。霉菌的营养体是分支的丝状体，较大，分为基内菌丝和气生菌丝，不同的霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子，细胞易收缩变形，孢子容易分散。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰，完整，保持自然状态的霉菌形态。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌种：酵母菌，青霉，根霉的斜面培养菌种

1.1.2试剂：沙堡培养基、美蓝染色液、70%酒精、无菌水等

1.1.3其他：解剖针、玻片、盖玻片、接种环、显微镜等

1.2方法

1.2..1真菌的划线分离培养

培养基：将沙堡琼脂培养基融化后，冷却至45摄氏度，注入无菌平皿中，每皿15~20ml，做成平板备用。

接种：取待分离的材料少许，投入无菌水试管中，振荡，使分离菌悬浮于水中，将接种环火焰灭菌后冷却，取上述悬液，进行平板划线分离。

培养与观察：划线完毕后，置于28摄氏度温箱培养2~5天，待形成子实器官后，取单个菌落部分，制片镜检。若只有一种菌，既得纯培养物。如有杂菌可取培养物少许制成悬液，用作划线分离，有时反复多次可获得纯种。也可在放大镜下观察，用无菌镊子夹取一段分离的真菌菌丝，在平板上分离培养，即可得到真菌的纯培养物。

1.2.2真菌在固体培养基上的生长表现：

酵母菌在固体培养基上菌落呈油脂状或蜡质状，表面光滑、湿润、粘稠，有的表面呈现粉粒状，粗糙或褶皱，菌落边缘整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色、红色等。将不同的霉菌在固体培养基上培养2~5d，可见霉菌有绒毛状、絮状、绳索状等。大小依霉菌种类而异，很多霉菌的孢子和菌丝能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、黑色、橙色等。

1.2.3真菌的形态观察

1.2.3.1酵母菌水浸片的制备：将美蓝染色液或蒸馏水滴于干净的载玻片中央，用接种环以无菌及操作取培养48h的酵母菌少许，均匀涂于液滴中，染色2~3min后加盖玻片。注意切勿产生气泡，然后低倍镜和高倍镜观察其细胞形态、芽殖方式，注意酵母菌的形态、大小和芽体，同时可以根据是否染上颜色来区别死活细胞。

1.2.3.2挑取真菌孢子接入盛有灭菌水的试管中，震荡试管制成孢子悬液，用灭菌滴管吸取

灭菌后融化的固体培养基少许，滴于载玻片中央用接种环将孢子悬液接种在培养基四周将玻片加在培养基上，轻轻压一下，在适宜温度下培养，定期取出，低倍镜下观察孢子的着生状态，菌丝的生长状况等。

2结果分析

2.1真菌在固体培养基上的生长状况如图

2.2酵母菌水浸片的观察如图

2.3真菌的载片直接观察和显微镜下观察如图

3讨论

3.1制片时染色液不宜过多或过少，加盖玻片时勿产生气泡和移位

3.2制备湿室载玻片培养过程中，注意无菌操作

3.3载片培养时，将分散的孢子接在琼脂边缘，量要少，以免菌丝过于稠密影响观察。 4结论

菌A 观察到其菌落光滑并且为绿色、有分生孢子、菌丝有横隔。菌B 观察到菌落较大并且黄色的光滑菌落，细胞较大呈圆形，在美蓝浸片中观察到酵母菌无性繁殖主要是出芽生殖，活的细胞呈无色，死的细胞染成蓝色。D 可以观察到其有大量的直立菌丝并且顶部有黑色、有孢子囊、菌丝无横隔，因此，A 菌为青霉，B 菌为酵母菌，D 菌为根霉。

参考文献：

1.胡桂学.兽医微生物实验教程，中国农业大学出版社，2006（2）71-73

2.兽医微生物学实验教程【M 】北京：中国农业出版社，2006

真菌的分离培养及形态观察

真菌的分离培养及形态观察 真菌分离培养应考虑所分离真菌的特性，配制合适的培养基，选择所需的气体环境。同时, 由于真菌分离材料常污染有大量细菌，所以可在培养基中加入抗菌素并在分离培养过程中严格执行无菌操作。 目的要求 1．掌握真菌分离培养方法。 2．认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。 3．了解真菌载片培养法。 4．掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。 操作步骤 —、真菌的分离培养方法 （－）平板划线分离法 1．取适合真菌的琼脂培养基融化，冷至45℃，注入无菌平皿中，每皿15～20ml，制成平板待用。 2．取要分离的材料（如田土、混杂的或污染的真菌培养物、真菌）少许，投入盛无菌水的试管内，振摇，使分离菌悬浮于水中。 3．将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取上述菌悬浮液，进行平板划线(同细菌的划线法)。 4．划线完毕，置温箱中培养2～5d，待长出菌落后，钓取可疑单个菌落先作制片检查，若只有一种所需要的真菌生长，即可进行钓菌纯培养。如有杂菌可从单个菌落中钓少许菌制成悬液，再作划线分离培养，有时需反复多次，才得纯种。另外，也可在放大镜的观察下，用无菌镊子夹取一段待分离的真菌菌丝，直接放在平板上作分离培养，可获得该种真菌的纯培养。 （二）稀释分离法 1．取盛有无菌水的试管5支（每管9ml），分别标记1、2、3、4、5号。取样品（如田土等）1g，投入1号管内，振摇，使悬浮均匀。 2．用1ml灭菌吸管，按无菌操作法，从1号管中吸取1ml悬浮液注入2号管中，并摇匀；同样由2号管取1ml至3号管，依此类推，直至5号管。注意每稀释一管应更换一支灭菌吸管。 3．用2支无菌吸管分别由4号、5号试管中各取1ml悬液，并分别注入2个灭菌培养皿中，再加入融化后冷至45℃的琼脂培养基约15ml，轻轻在桌面上摇转，静置，使冷凝成平板。然后倒置温箱中培养，2～5d后，从中挑选单个菌落，并移植于斜面上。 二．真菌培养性状观察 （一）真菌在固体培养基上的生长表现 1 .酵母菌菌落：酵母菌在固体培养基上多呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、黏稠，有的表面呈粉粒状、粗糙或皱褶。菌落边缘有整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色或红色等。 2. 霉菌菌落：将不同霉菌在固体培养基上培养2～5d，可见霉菌菌落呈绒毛状、絮状、蜘蛛网状等。菌落大小依种而异，有的能扩展到整个固体培养基，有的有一定的局限性（直径1～2mm或更小）。很多霉菌的孢子能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、青色、黑色、橙色等。 （二）真菌在液体培养基中的生长表现 1. 酵母菌注意观察其混浊度、沉淀物及表面生长性状等。

第十四条 舞龙动作的分类和难度 舞龙动作按它的动作形态特征可分类为

第十四条舞龙动作的分类和难度舞龙动作按它的动作形态特征可分类为: 一、8字舞龙动作; 一、游龙动作三、穿腾动作四、翻滚动作五、组图造型动作。按动作技术易难分为:A 级难度动作、B级难度动作、C级难度动作; A级难度动作:是指舞龙的基本动作和技术较为简单的舞龙技巧动作; B级难度动作:是指在舞龙基本动作上有所发展、有所提高，具有一定难度，必须经过严格的训练才能完成的舞龙技巧动作; C级难度动作:是指必须具备较高的身体专项素质和专项技能才能完成的高难度舞龙技巧动作，高难度的舞龙组合动作，并有较高的锻炼价值和审美价值。第十五条舞龙动作的难度分值一、A级难度动作，每个动作分值为0.1分二、B级难度动作，每个动作分值为0.3分三、C级难度动作，每个动作分值为0.5分第十六条舞龙创新难度动作一、创编原则:必须符合舞龙运动的本质属性和运动规律;必须是具备一定专项素质、专项技能才能完成的舞龙动作，必须是正式比赛中从未出现过的动作。二、申报程序1、填写创新动作难度申报表; 规范动作名称，并标明类别; 用录像形式形象地说明创新难度动作，也可用照片、画稿等技术图解以及精炼文字形象地说明(达不到上述要求者，不予受理); 申报难度等级2、在规定时间内递交国际龙狮总会技术委员会(或比赛裁判委员会)。3、国际龙狮总会技术委员会(或比赛裁判委员会)依据舞龙动作创编原则，对创新难度动作进行技术鉴别、定级，并将鉴定结果及时通知申报单位及有关部门。第十七条舞龙动作规格、分类、难度定级一、8字舞龙动作运动员将龙体在人左右两侧交替作8字形环绕的舞龙动作，可快可慢，可原地，可行进，也可利用人体组成多种姿态，多种方法作8字形状舞动。要求:龙体运动轨迹要圆顺，人体造型姿态要优美，快舞龙要突出速度、力量;每个动作左右舞龙各不少于4次;单侧舞龙每个动作上下各不少于6次。A 级难度动作: 1.原地8字舞龙2.行进8字舞龙3.单跪舞龙4.套头舞龙5.搁脚舞龙6.扯旗舞龙7.靠背舞龙8.横移(跳)步舞龙9.起伏8字舞龙B级难度动作: 1.原地快速8字舞龙2.行进快速8字舞龙3.跪步行进快舞龙4.抱腰舞龙5.绕身舞龙6.双人换位舞龙7.快舞龙磨转8.连续抛接龙头横移(跑)步舞龙C级难度动作1.跳龙接一蹲一躺快舞龙2.跳龙接摇船快舞龙3.跳龙接直躺快舞龙4.依次滚翻接单跪快舞龙5.挂腰舞龙(两人一组) 6.K式舞龙(3人一组) 7.站腿舞龙(两人一组) 8.双杆舞龙(一人持两杆) 二、游龙动作运动员较大幅度奔跑游走，通过龙体快慢有致、高低、左右的起伏进行，展现婉转回旋，左右盘翻，屈伸绵延等龙的动态特征。要求:龙体循着圆、曲、弧线的规律运动，运动员协调地随龙体的起伏行进。A级难度动作1直线行进. 2.曲线行进3.走(跑)圆场4.滑步行进5.起伏行进6.单侧起伏小圆场7.矮步跑圆场8.直线(曲线、圆场)行进越障碍B级难度动作1.快速曲线起伏行进2.快速顺逆连续跑圆场3.快速矮步跑圆场越障碍4.快速跑斜圆场5.骑肩双杆起伏行进C级难度动作1.龙头站肩平盘起伏(二周以上) 2.直线后倒、鲤鱼打挺接擎龙行进三、穿腾动作龙体运动路线呈纵横交叉形式，龙珠、龙头、龙节依次在龙身下穿过，称“穿越”;龙珠、龙头、龙节依次在龙身上越过称“腾越”。要求:穿越和腾越时，龙形保持饱满，速度均匀，运动轨迹流畅，穿腾动作轻松利索，不碰踩龙体、不拖地，不停顿。A级难度动作1.穿龙尾2.越龙尾3.首尾穿(越)肚B级难度动作1.龙穿身2.龙脱衣3.龙戏尾4.连续腾越行进5.腾身穿尾6.穿尾越龙身7.卧龙飞腾8.穿八五节9.首(尾)穿花缠身行进C级难度动作1.快 速连续穿越行进(3次以上) 2.连续穿越腾越行进(4次以上) 四、翻滚动作龙体呈立圆或斜圆运动，展现龙的腾跃、缠绞的动势。龙体作立圆或斜圆状连续运动，当龙身运动到舞龙者脚下时，舞龙者迅速向上腾起依次跳过龙身，称“跳龙动作”;龙体同时或依次作360°翻转，运动员利用滚翻，手翻等方法越过龙身，称“翻滚动作”。要求:滚翻动作必须在不影响龙体运动速度、幅度、美感的前提下完成，难度较大，技术要求也高，龙体运动员轨迹要流畅，龙形要圆顺，运用技巧动作要准确规范。A级难度动作1.龙翻身B级难度动作1.快速逆(顺)向跳龙行进(2次以上) 2.连续游龙跳龙(2次以上) 3.大立圆螺旋行进(3次以上) C级难度动作1.快速连续斜盘跳龙(3次以上) 2.快速连续螺旋跳龙(4次以上) 3.快速连续螺旋跳龙磨转(6次以上) 4.快速左右螺旋跳龙(左右各3次以上) 5.快速连续磨盘跳龙(3次以上) 五、组图造型动作龙体在运动中组成活动的图案和相对静止的造型。要求:活动图案构图清晰;静止造型形象逼真，以形传神，以形传意，龙珠配合协调，组图造型连接、解脱要紧凑、利索。A级难度动作1.龙门造型2.塔盘造型3.尾盘造型4.曲线造型5.龙出宫造型6.蝴蝶盘花造型7.组字造型8.龙头造型9.螺丝结顶造型10.卧(垛)龙造型B级难度动作1.上肩高塔造型自转一周2.龙尾高翘寻珠、追珠3.首尾盘柱4.龙翻身接滚翻成造型5.单臂侧手翻接滚翻成造型C级难度动作1.大横8字花慢行时(成型4次以上) 2.坐肩后仰成平盘起伏旋转(一周以上)

真菌学实验报告

真菌学实验报告 一.实验目的： 1.1了解真菌形态的基本特征。 1.2掌握丝状真菌制片方法。 1.3掌握内生真菌的分离方法 1.4掌握真菌的鉴定方法。 二.前言： 真菌广泛分布于地球表面,从高山、湖泊到田野、森林，从海洋、高空到赤道、两极，到处都有真菌。真菌虽然不在空气中生长繁殖，但它的孢子却成群的漂浮在天空，只要稍微注意你会发现人类原来生活在真菌的汪洋大海中。 当今世界，生物技术已迈入世界经济的支柱产业，真菌学在生物技术的大潮中得到了长足的发展。真菌是原始的真核生物，具有广泛的多样性，真菌生长我繁殖迅速，在很短的时间内就可以得到比动物和植物多得多的后代，能够直接、快速地进行遗传性状分离的

分析。因此，真菌可以作为研究基础生物学过程中的一个重要工具，真菌基因的多样性以及真菌分子生物学的发展，为生物技术产业提供了一个广阔的天地。 植物的生长环境直接影响内生真菌的生物多样性，植物物种的年代越久远，其生物内生真菌的多样性越丰富：抗病原性能越强的植物，其所含的内生真菌具有抗菌活性的可能行就越大；其所含的内生真菌有可能产生与植物相同或相似的抗菌无知或产生抗菌活性物质可能参与了药用植物的抗菌过程，本实验通过植物病原真菌和G+、G-细菌的抑制实验发现茎，根，花，种子或果实内生真菌的代谢产物具有不同程度的抑菌能力，并且对G+、G-有普片遍的抑菌作用。研究和开发内生真菌的寻找新的抗菌活性物质具有广泛的应用前景。 三.材料与方法： 3.1.1材料： 在校园内采集银杏、喜树、桂花树样品包括叶、茎、根、花、种子或果实。 3.1.2.药品与试剂： 葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。双

真菌的培养及形态观察

题目：真菌的培养及形态观察 动物科学1204班聂孝明 20121546 指导教师：邹玲 摘要：了解酵母菌和霉菌的菌落特征及在培养基中的生长表现，还有真菌的分离培养方法和载片培养，学习真菌水浸片的制备及形态观察。本实验通过真菌的固体培养，酵母菌水浸片旳制备观察及划线分离培养的方法进行形态观察。在固体培养基上，观察到A菌落成绿色比较光滑、有分生孢子、菌丝有横隔为青霉。D菌落有大量直立菌丝并且顶部发黑、有孢子囊、菌丝无横隔为根霉。B菌落大而光滑、显微镜下菌体较大、有假菌丝并且出芽生殖的为酵母菌。 关键词：酵母菌霉菌形态观察分离培养 引言：真菌在自然界中分布广、数量大、种类多。酵母菌是单细胞微生物，细胞核和细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大10倍左右，多为圆形或卵圆形，无性繁殖为出芽生殖，可以形成假菌丝，有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色液制成水浸片可以观察期外形和区分细菌的死活。霉菌的营养体是分支的丝状体，较大，分为基内菌丝和气生菌丝，不同的霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子，细胞易收缩变形，孢子容易分散。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰，完整，保持自然状态的霉菌形态。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种：酵母菌，青霉，根霉的斜面培养菌种 1.1.2试剂：沙堡培养基、美蓝染色液、70%酒精、无菌水等 1.1.3其他：解剖针、玻片、盖玻片、接种环、显微镜等 1.2方法 1.2..1真菌的划线分离培养 培养基：将沙堡琼脂培养基融化后，冷却至45摄氏度，注入无菌平皿中，每皿15~20ml，做成平板备用。 接种：取待分离的材料少许，投入无菌水试管中，振荡，使分离菌悬浮于水中，将接种环火焰灭菌后冷却，取上述悬液，进行平板划线分离。 培养与观察：划线完毕后，置于28摄氏度温箱培养2~5天，待形成子实器官后，取单个菌落部分，制片镜检。若只有一种菌，既得纯培养物。如有杂菌可取培养物少许制成悬液，用作划线分离，有时反复多次可获得纯种。也可在放大镜下观察，用无菌镊子夹取一段分离的真菌菌丝，在平板上分离培养，即可得到真菌的纯培养物。 1.2.2真菌在固体培养基上的生长表现： 酵母菌在固体培养基上菌落呈油脂状或蜡质状，表面光滑、湿润、粘稠，有的表面呈现粉粒状，粗糙或褶皱，菌落边缘整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色、红色等。将不同的霉菌在固体培养基上培养2~5d，可见霉菌有绒毛状、絮状、绳索状等。大小依霉菌种类而异，很多霉菌的孢子和菌丝能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、黑色、橙色等。 1.2.3真菌的形态观察 1.2.3.1酵母菌水浸片的制备：将美蓝染色液或蒸馏水滴于干净的载玻片中央，用接种环以无菌及操作取培养48h的酵母菌少许，均匀涂于液滴中，染色2~3min后加盖玻片。注意切勿产生气泡，然后低倍镜和高倍镜观察其细胞形态、芽殖方式，注意酵母菌的形态、大小和芽体，同时可以根据是否染上颜色来区别死活细胞。 1.2.3.2挑取真菌孢子接入盛有灭菌水的试管中，震荡试管制成孢子悬液，用灭菌滴管吸取

玉米的形态特征及类型识别演示教学

玉米的形态特征及类 型识别

实验十玉米的形态特征及类型识别 一、目的 1、了解玉米植株各部位的形态特征 2、识别各玉米主要类型的果穗和种子特征。 二、材料和用具 玉米的植株、各类型的果穗。解剖刀、镊子、扩大镜等。 三、内容及方法步骤 （一）玉米植物学的形态特征 玉米为禾本科（Gvamineae）玉蜀黍属（Zea）学各为Zea Mays.L。该属栽培的只有玉米一个种。各部分的特征如下： 1、根：玉米为发达的须根系。根据根的发生时期和部位不同，可分为三种：（1）初生根：种子发芽时，从种胚长出的一条幼根，称为初生胚根，2—3天后在下胚轴处又长出了3—7条幼根，称为次生胚根，两者合称初生根。这些根系是玉米幼苗期的吸收器官。（2）次生根：三叶期后至拔节期间，从地下茎节上长出4—7层轮生的根系。它是玉米一生中最重要的吸收器官。（3）支持根：拔节后从靠近地表的茎节上，环生的2—3层根系。支持根在物质吸收、合成及支撑防倒方面具有重要作用。 2、茎：直立，较粗，圆柱形，一般高1—3m，但因品种、土壤、气候和栽培条件不同而异。茎秆由若干节组成，一般为15—22节，其中地下4—6节密生。每节生一片叶子，节与节之间为节间。玉米主茎各节均有一个腋芽。茎基部上的腋芽能长成侧枝，称为分蘖，并形成自己的根系。生长良好的大多数品种，名节间的长度由下而上向顶式增加，而直径逐渐减小。一般情况下，穗颈节最长，其次是穗位的上、下两节间较长。 3、叶：玉米叶片数与茎节数相同。叶由叶鞘、叶片、叶舌三部分构成。叶鞘有皱纹（其他作物无），叶片主脉明显叫中肋，叶缘呈波浪状。一般穗位叶及其上下两叶最大。叶舌膜质，着生于鞘与叶片交接处。 4、花序：玉米为雌雄同株异位花序。 （1）雄花序，俗称天花，为圆锥花序。有主轴和分枝，分枝多少随条件而变化。主轴着生4—11行成小穗，分枝仅有2行成对小穗。成对的小穗，一为有柄位于上方，一为无柄位于下方。每一小穗颖片中包有两朵雄花。每雄花由内、外颖、浆片，3枚雄蕊等构成，花成熟，内外颖张开，雄蕊的花丝伸长将花药送出外为散粉。（2）雌花序：雌花序由茎杆中间叶腋间的腋芽发育而成，俗称果穗，为肉穗花序。果穗是变态的茎，具有缩短了的节间（果穗柄）及变态的叶（苞叶）果穗的中央为穗轴，红色或白色。穗轴上着生纵行成对排列的无柄小穗花，每一小穗的颖花内有两朵小花，上位花结实，下位花退化。果穗上籽粒行数是偶数，一般有8—24行。 5、子粒：玉米子粒为颖果，由果皮（与种皮连在一起），胚和胚乳组成。果皮多为黄、白两种，也有其它颜色。子粒外形有近圆形或扁平形。胚乳是贮藏有机营养的地方，有角质胚乳和粉质胚乳之分。玉米的胚较大，位于子粒一侧。千粒重一般约200—250g，子粒出产率（占果穗重量）一般为75—85%。 （二）玉米类型的特征 根据玉米果穗颖壳的长短、籽粒形状，表面特征，籽粒内部胚乳结构等性状，将玉米划分为九个类型（亚种）。

真菌形态的几种观察方法

真菌形态的几种观察方法.txt39人生旅程并不是一帆风顺的，逆境失意会经常伴随着我们，但人性的光辉往往在不如意中才显示出来，希望是激励我们前进的巨大的无形的动力。40奉献是爱心，勇于付出，你一定会收到意外之外的馈赠。真菌形态的几种观察方法 真菌作为一种实验材料，在微生物实验室中的应用是相当普遍的，正确的培养观察方法，能够如实地反映其本质特征。下面介绍实验室中真菌形态的几种观察方法。 1．载片培养法 载片培养方法是实验室观察真菌形态的基本方法。此法的基本步骤是：在无菌条件下，用无菌吸管吸取融化的培养真菌的固体培养基，快速地滴一滴于无菌的载玻片上，待其冷却以后，用接种环沾取少许孢子或者挑取一点菌丝段于凝固的培养基上，上面放上无菌的盖玻片。然后，将此片子放入干净的培养皿中，培养皿底部放入潮湿的吸水滤纸，或者将培养皿底放入一些水，中间用玻璃棒隆起，将做好的培养片子搭放在上面，合适温度下培养。将培养好的片子取出，用小镊子轻轻地取下上面的盖玻片，把盖玻片转放于另一干净的载玻片上，待自然干燥后，两边用透明胶固定，用棉蓝染色液染色。 载片培养法还可以这样进行：将厚度约0.5mm的平板培养基用小刀切成大小0.5cm2的小块，挑取一小块培养基放于干净的载玻片上，同样的方法接种、培养观察。还可以用刀片将培养好的载玻片上的多余培养基割去，自然干燥后，用大一点的盖玻片盖上菌丝，用同样方法两边固定，染色观察，这种方法特别适用于产生无性孢子的真菌的形态观察。该方法要注意以下几点：滴的培养基不能太多，接种物不能太多，防止污染。 2．插片培养法 插片培养法是实验室观察真菌形态的另一种基本方法。这种方法的基本步骤是：将菌丝块接种于固体平板的中间。假如是以孢子接种，则将孢子稀释液涂布于固体平板上，然后，用小镊子夹起一块无菌的盖玻片，以45度角的角度斜插入培养基中，不要插入培养基太深，让菌丝爬上盖玻片；培养好了以后，再用小镊子将盖玻片取出，自然干燥以后，将盖玻片转移到一干净的载玻片上，用同样的方法两边固定，染色观察。该方法要注意：插片的角度要掌握好，不能太直或太平；当两面都有菌丝时，擦去背对中心的那面的菌丝，以避免干扰。 3．粘片法 粘片法是用透明胶粘贴菌丝或者孢子进行观察的方法。用剪刀剪取一小段透明胶，用小镊子夹住一个角，轻轻地粘一些菌丝或者孢子，然后将其放入一干净的载玻片上，在载玻片上滴一滴染色液，可以染色观察。此法要注意：粘贴时，不要用力粘的太多；粘上菌丝或者孢子的透明胶放入载玻片上，不要移动，要一次放好。 4．平板观察法 平板观察法是在平板上直接观察真菌的方法。对菌丝生长得比较稀疏的真菌和观察基内菌丝。此法比较直接真实地反映菌丝的形态特征，观察时将平板的上盖拿开，倒置于显微镜的载物台上。这种方法可以消除由于培养体变干或者放在菌丝表面的盖玻片等可能出现的影响。此

玉米的形态特征及类型识别

实验十玉米的形态特征及类型识别 一、目的 1、了解玉米植株各部位的形态特征 2、识别各玉米主要类型的果穗和种子特征。 二、材料和用具 玉米的植株、各类型的果穗。解剖刀、镊子、扩大镜等。 三、内容及方法步骤 （一）玉米植物学的形态特征 玉米为禾本科（Gvamineae）玉蜀黍属（Zea）学各为Zea Mays.L。该属栽培的只有玉米一个种。各部分的特征如下： 1、根：玉米为发达的须根系。根据根的发生时期和部位不同，可分为三种：（1）初生根：种子发芽时，从种胚长出的一条幼根，称为初生胚根，2—3天后在下胚轴处又长出了3—7条幼根，称为次生胚根，两者合称初生根。这些根系是玉米幼苗期的吸收器官。（2）次生根：三叶期后至拔节期间，从地下茎节上长出4—7层轮生的根系。它是玉米一生中最重要的吸收器官。（3）支持根：拔节后从靠近地表的茎节上，环生的2—3层根系。支持根在物质吸收、合成及支撑防倒方面具有重要作用。 2、茎：直立，较粗，圆柱形，一般高1—3m，但因品种、土壤、气候和栽培条件不同而异。茎秆由若干节组成，一般为15—22节，其中地下4—6节密生。每节生一片叶子，节与节之间为节间。玉米主茎各节均有一个腋芽。茎基部上的腋芽能长成侧枝，称为分蘖，并形成自己的根系。生长良好的大多数品种，名节间的长度由下而上向顶式增加，而直径逐渐减小。一般情况下，穗颈节最长，其次是穗位的上、下两节间较长。 3、叶：玉米叶片数与茎节数相同。叶由叶鞘、叶片、叶舌三部分构成。叶鞘有皱纹（其他作物无），叶片主脉明显叫中肋，叶缘呈波浪状。一般穗位叶及其上下两叶最大。叶舌膜质，着生于鞘与叶片交接处。 4、花序：玉米为雌雄同株异位花序。 （1）雄花序，俗称天花，为圆锥花序。有主轴和分枝，分枝多少随条件而变化。主轴着生4—11行成小穗，分枝仅有2行成对小穗。成对的小穗，一为有柄位于上方，一为无柄位于下方。每一小穗颖片中包有两朵雄花。每雄花由内、外颖、浆片，3枚雄蕊等构成，花成熟，内外颖张开，雄蕊的花丝伸长将花药送出外为散粉。（2）雌花序：雌花序由茎杆中间叶腋间的腋芽发育而成，俗称果穗，为肉穗花序。果穗是变态的茎，具有缩短了的节间（果穗柄）及变态的叶（苞叶）果穗的中央为穗轴，红色或白色。穗轴上着生纵行成对排列的无柄小穗花，每一小穗的颖花内有两朵小花，上位花结实，下位花退化。果穗上籽粒行数是偶数，一般有8—24行。 5、子粒：玉米子粒为颖果，由果皮（与种皮连在一起），胚和胚乳组成。果皮多为黄、白两种，也有其它颜色。子粒外形有近圆形或扁平形。胚乳是贮藏有机营养的地方，有角质胚乳和粉质胚乳之分。玉米的胚较大，位于子粒一侧。千粒重一般约200—250g，子粒出产率（占果穗重量）一般为75—85%。 （二）玉米类型的特征 根据玉米果穗颖壳的长短、籽粒形状，表面特征，籽粒内部胚乳结构等性状，将玉米划分为九个类型（亚种）。 1、硬粒型：又普通种或燧石种。果穗圆锥形，籽粒饱满圆形、顶部，周围为角质淀粉，中间为粉质淀粉，外壳呈半透明状，坚硬有光泽。品质较好，适应性强，成熟早，产量稳定，是生产上的主要类型之一。

竹子的形态特征及种类

竹子的形态特征及种类 来源：中国供应礼品网时间2010-02-01 02:28:25 关键字：促销礼品，促销品，广告礼品，小礼品，促销小礼品，礼品促销品,家庭保健,立体吸塑,卡包,手机座 即单轴散生型、合轴丛生型、复轴混合型。 竹类的种类繁多，竹类植物根据地下茎的生长情况可分为三种生态型。国有500余种，大多可供庭园观赏。常见栽培观赏竹有：散生型的紫竹（Phyllostachysnigra毛竹（Ph．pubescen刚竹（Ph．uiridi桂竹（Ph．bambusoid 方竹（Chimonobambusaquadrangulari等，丛生型的佛肚竹（Bambusauentricosa孝顺竹（B．multiplex等，混生型的箬竹（Indocalamuslatifoliu茶杆竹（Pseudosasaamabili等。具地上茎（竹杆）和地下茎（竹鞭）竹杆常为圆筒形，竹是多年生木质化植物。极少为四角形，由节间和节连接而成，节间常中空，少数实心，节由箨环和杆环构成。每节上分枝。叶有两种，一为茎生叶，俗称箨叶；另一为营养叶，披针形，大小随品种而异。竹花由鳞被、雄蕊和雌蕊组成。果实多为颖果。

竹类的一生中，大部分时间为营养生长阶段，一旦开花结实后全部株丛即枯死而完成一个生活周期。 根据竹竿和竹鞭的生长情况可分为三种类型：散生型、丛生型和混生型。散生型竹类有紫竹、方竹、毛竹、淡竹等；丛生型的有佛肚竹、凤凰竹、青皮竹等，而混生型的有茶竿竹、苦竿竹。竹子大约有1200多种，在我国就有250余种。 丛生竹新的竹是从老竹子的秆根茎侧芽长出来的，所以看起来都会聚在一起，一丛一丛的。麻竹、绿竹、刺竹、长枝竹、蓬莱竹等。 散生竹他们长长的地下茎匍匐於地下！新竹子再从这些地下茎冒出来，所以新的竹子会长在老竹子的附近，看起来一枝一枝独立生长。孟宗竹、桂竹、人面竹、墨竹、唐竹、四方竹、日本红竹等。

真菌的生物学形态特征

真菌的生物学形态特征 与细菌相比，真菌的大小、形态、结构和化学组成均有很大的差异。真菌比细菌大几倍至几十倍，可以用普通光学显微镜观察。真菌的细胞是典型的真核细胞，真菌细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞器及细胞质。真菌细胞壁主要化学成分为几丁质(chitin)和1，3-葡聚糖，而细菌细胞壁主要化学成分为肽聚糖。真菌按形态可分为单细胞和多细胞两类。单细胞真菌主要为酵母菌(yeast)和酵母样菌(veast-1ike)，菌体呈圆形或卵圆形，其形成的菌落为酵母型或类酵母型，临床常见的有念珠菌属和新生隐球菌。多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝伸长分支，交织成团形成菌丝体(mycelium)，并长有各种孢子，这类真菌称为丝状菌(filamentous fungus)，俗称霉菌(mold)。其形成的菌落为丝状型。对人致病的有皮肤癣菌等。有些真菌可因营养、温度、氧气等环境条件的改变，而两种形态发生互变，称为二相性(dimorphic)。真菌的菌落形态、颜色变化及真菌不同生长时期的镜下特征是正确鉴定真菌的重要依据。 (一)真嚣的镜下形态 多细胞真菌的菌丝和孢子随真菌种类不同而形态不同，是鉴别真菌的重要依据。 1.菌丝菌丝是由孢子出芽形成的。孢子在环境适宜的条件下长出芽管，逐渐延长呈丝状即菌丝(hyphae)。当菌丝不断生长、分支并交织成团时，被称为菌丝体(mycelium)。孽警粤结构不同可分为有隔菌丝和无隔菌丝。有隔菌丝(septate hyphae)是由横隔将管状尊构的菌丝分隔成一连串多细胞样的丝状体，如曲霉、青霉和毛癣菌等大多数丝状真菌的菌丝属于此类：无隔菌丝(nonseptate hyphae)无隔膜，整条菌丝为单个细胞，细胞质内有多个细胞核，根霉和毛霉的菌丝属于此类。菌丝在人工培养基中生长，按其着生情况可分为营乔丽丝(vegetative hyphae)和气生菌丝(aerial hyphae)。菌丝向下生长，深入培养基内获取营养的菌丝称为营养菌丝：而从培养基表面长出向空中伸展的菌丝称为气生菌丝。部分气生菌丝发育到一定阶段可衍化为具有繁殖能力的繁殖菌丝(reproductive hyphae)。菌缝可有多种形态，如螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状、梳状和关节状等，它们有助于真菌的鉴别。 2.孢子孢子是真菌的繁殖结构，分为有性孢子和无性孢子两类。有性孢子是由同一里体璧不同菌体上的两个细胞融台经减数分裂形成。无性孢子由菌丝上的细菌直接分化或出芽形成，是病原性真菌传播和延续后代的主要方式。真菌孢子抵抗力不强，加热60～70℃短时间即死亡。真菌孢子与细菌芽胞不同，其区别见表22-1。

树木形态特征

常见树木形态总结 植物形态学基础较差的同学可先参考幻灯片：被子植物分类的形态学基础。 将常见的木本植物的科或属按形态特征进行归类，便于树木分类的学习与工作的查阅和比较。为了节省篇幅，较普遍的特征如单叶、互生叶、圆锥花序、总状花序、两被花、两性花、上位子房子等均未编入。 一，对生叶：1.杉科的水杉属；2.柏科（刺柏属除外）；3.三尖杉科；4.红豆杉科的榧树属； 5.连香树科； 6.蜡梅科； 7.黄杨科的黄杨属； 8.忍冬科； 9.卫矛科的卫矛属；10.石榴科；11.芸香科的吴茱萸属，黄檗属；12.山茱萸科的梾木属，四照花属；13.桃金娘科的桃金娘属，蒲桃属，番石榴属；14.槭树科；15.七叶树科；16.省沽油科的山香圆属；17.醉鱼草科的醉鱼草属；18.马钱科；19.木犀科；20.夹竹桃科的络石属；21.茜草科的水团花属，香果树属，咖啡属；22.紫葳科的菜豆树属，猫尾木属；23.马鞭草科；24.玄参科的泡桐属；25.山梅花科。二，轮生叶：1.柏科的刺柏属；2.夹竹桃科的萝芙木属，夹竹桃属；3.茜草科的栀子属；4.紫葳科的梓树属（部分对生）；5.木麻黄科。 三，羽状复叶：1.苏木科（紫荆属，羊蹄甲属除外）；2.含羞草科；3.蝶形花科（多数属）； 4.蔷薇科的蔷薇属，花揪属少数种； 5.胡桃科； 6.芸香科的吴茱萸属，黄檗属，花椒属； 7.苦木科； 8.橄榄科； 9.楝科；10.无患子科；11.伯乐树科；12.清风藤科泡花树属的红枝柴，暖木；13.漆树科的南酸枣属，盐肤木属，漆树属，黄连木属；14.槭树科的金钱槭属；15.省沽油科；16.木犀科的白蜡树属；17.五加科的檧木属；18.小檗科的十大功劳属；19.木通科猫儿屎属。 四，三出复叶：1.蝶形花科的胡枝子属，葛属，刺桐属；2.大戟科的重阳木属，橡胶树属； 3.芸香科的枸桔属； 4.木犀科迎春花属的迎春，迎夏，云南黄馨； 5.大血藤科； 6.蔷薇科的蔷薇属，悬钩子属； 7.省沽油科的省沽油属。 五，掌状复叶：1.七叶树科；2木棉科的木棉属；3.五加科的鹅掌柴属，五加属；4.马鞭草科的牡荆属；5.木通科的鹰瓜枫属，木通属；6.葡萄科爬山虎属的五叶爬山虎。 六，单身复叶（单小叶）：1.芸香科的金桔属；柑桔属。 七，单生花：1.木兰科；2.八角科；3.山茶科；4.茜草科的栀子属。 八，头状花序：1.悬铃木科；2.桑科的柘属，构树属（雌花序），（榕属为隐头花序）；3.蓝果树科的喜树属，珙桐属；4.山茱萸科的四照花属；5.含羞草科的象耳豆属，合欢属，金合欢属，银合欢属；6.金缕梅科的枫香属（雌花序），双花木属，马蹄荷属，蕈树属；7.壳斗科的水青冈属（雄花序）；8.茜草科的团花属，风箱树属，水团花属；9.木麻黄科（雌花序）。九，柔荑花序：1.杨柳科；2.胡桃科；3.桦木科；4.榛科；5.壳斗科；6.木麻黄科（雄花序）； 7.杨梅科；8.桑科的桑属；构属（雄花序）。 十，单被花：1.榆科；2.桑科；3.壳斗科；4.桦木科（雄花）；5.榛科（雌花）；6.梧桐科的梧桐属，苹婆属；7.水青树科；8.大戟科的乌柏属，重阳木属，算盘子属，叶下珠属，野桐属，橡胶树属；9.漆树科的黄连木属；10.瑞香科；11.胡桃科；12.胡颓子科；13.山龙眼科；14.大风子科的柞木属，山桐子属，山拐枣属，山羊角属；15.金缕梅科的蕈树属。 十一，无被花：1.杨柳科；2.杜仲科；3.悬铃木科；4.连香树科；5.领春木科；6.桦木科（雌花）；7.榛科（雄花）；8.胡桃科的化香属；9.金缕梅科的枫香属（雄花）；10.蓝果树科的珙桐属（雄花）；11.木麻黄科；12.禾本科。 十二，蝶形花冠：1.蝶形花科。 十三，唇形花冠：1.玄参科的泡桐属；2.紫葳科；3.马鞭草科的牡荆属，石梓属。 十四，下位子房：1.蔷薇科的苹果亚科；2.榛科；3.壳斗科；4.蓝果树科；5.山茱萸科；6.胡桃科；7.忍冬科；8.石榴科；9.山矾科；10.五加科,11.茜草科；12.桃金娘科多数属；13.红树科的红树属；6.野茉莉科的陀螺果属。

丝状真菌地鉴定主要根据形态特征

丝状真菌地鉴定主要根据形态特征。形态特征包括群体形态和个体形态。 1、群体形态 群体形态即菌落的形态。观察菌落形态时多采用固定的培养基，将固体培养基制成平板，以点植法接种，即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板上适当的位置，例如中心，或三角形的三点。然后于25－28℃培养一定时间（如2、4、7、10天）进行观察，观察时可用肉眼或借助放大镜、低倍镜、解剖镜等。 观察的要点一般包括下列几项： 1）大小：它反映生长或发育速度，通常测量菌落的直径。 2）颜色：包括菌落表面子实体、气生菌丝、菌核的颜色和基内的颜色，还应注意培养基颜色的变化。 3）菌落表面的纹饰：如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。 4）菌落的质地：即菌落外观呈毡状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状，有无成束状或绳状的气菌丝。 5）菌落的高度：菌落扁平或凸起，中心部分凸起或凹陷。气生菌丝的高度。 6）菌落的边缘：全缘、锯齿状、树枝状等。 7）渗出物：指菌落表面有无液滴、液滴的颜色和数量。 2、个体形态 个体形态指菌丝的特征，子实体的形态(如孢子囊。子囊壳、子囊、担子果等的形态)，孢子的形态（如孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、节孢子、厚垣孢子、卵孢子、接合孢子、担孢子等）。由于丝状真菌的个体大都较小，必须制成载片标本在显微镜下观察。 丝状真菌的制片比较简单，通常将乳酸苯酚（Lactophenol）液一滴，滴于

载片上，再用解剖针挑取欲观察的培养物置此液滴内，并且用针尖将其分散开勿使成团，盖好盖片即得载片标本。这种载片可保存数月，如盖片四周涂封漆则可保存数年。 1两种分生孢子, 大型分生孢子呈镰刀形，小型分生孢子呈椭圆形 2孢子长方形，接连成链 菌丝断裂为成串的节孢子 3灰绿色，绒毛状，表面有绿色的孢子孢子圆球形，呈绿色 孢子大小(μm)：3.03～4.26 分生孢子梗顶端膨大，表面的产孢瓶体上成链的分生孢子

真菌学实验指导

本课程，本课程是大学本科生物技术、生物科学专业的选修课程。介绍真菌分类现状、分类方法（包括传统与现代分类方法的比较）、分类依据及其原则。本课程的教学不限于介绍研究的成果，重在介绍分析和解决问题的方法，以培养学生分析问题和创新的能力。所以在理论学习的同时开设综合性实验，培养学生观察、分析和动手能力。基本掌握真菌分离、鉴定的方法，并应用于真菌其它领域的研究。 本指导书适用于生物技术和生物科学专业。

1、实验：内生真菌的分离及鉴定 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????3 2、实验报告基本内容要求 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????7 3、实验报告格式????????????????????????????????????????????????????????????????8

实验内生真菌的分离及鉴定 实验学时：18 实验类型：综合 实验要求：选修 一、实验目的 1.了解真菌形态的基本特征。 2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。 二、实验内容 采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实，然后对分离样品的内生真菌，并进行形态和分子生物学方法的鉴定。 三、实验原理、方法和手段 （一）实验原理 根据真菌的形态特征和ITS序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。 （二）实验手段和方法 1、内生真菌分离纯化方法 1.1样品的表面消毒及预处理 分别取根、茎、叶、果实，用洗涤剂在自来水下洗净。 老树皮用75%酒精进行表面消毒后，用镊子取出，于酒精灯上烧灼15秒至表面焦糊，切成1×1cm2大小置于PDA固体培养基上。 对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒： 75%的酒精漂（浸）洗2-3min→无菌水冲洗4-6次→0.1%升汞不同的消毒时间（共设置7个梯度）→无菌水冲洗4-6次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块 将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开，并切成0.5×0.5cm2大小。将果实的外种皮去掉，消毒之后将内种皮去掉。 灭菌时，沥干的植物材料转放到烧杯中，记好时间，倒入消毒溶液，不时用玻璃棒轻轻搅动，以促进材料各部分与消毒溶液充分接触，驱除气泡，使消毒彻

实验二真菌形态观察(一).

实验二、真菌形态观察（一） 1目的： 认识真菌营养体及变态，认识真菌无性和有性孢子类型。 掌握鞭毛菌亚门和接合菌亚门的主要形态特征。 掌握临时玻片的制作方法和绘图技术。 2原理： 真菌营养生长阶段的结构称为营养体，当营养生长进行到一定时期，就开始转入繁殖阶段，形成繁殖体，即子实体。营养体主要为菌丝体，主要变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状索菌等。繁殖体主要包括无性孢子和有性孢子。 通常制作临时玻片来观察病原物在植物上着生的情况以及病原物的形态特征。 3材料用具 番茄晚疫病菌装片，辣椒疫霉病菌装片，黑根霉装片，酵母菌悬浮液等培养真菌，植物病害组织。挑针，刀片，木块，酒精灯，火柴，载玻片，盖玻片，纱布，乳酚油，二甲苯，显微镜，吸水纸，擦镜纸。投影仪，多媒体课件等。 4内容与方法（自己写，包括主要内容即可） 4.1 临时玻片 4．1 .1浮载剂制作临时玻片都要使用浮载剂，浮载剂的作用是防止材料干燥和集中光线，以利于显微镜下观察。浮载剂的种类很多，最常用的是水和乳酚油，其次是甘油、甘油明胶，希尔浮载剂等。 (1水：水浮载剂一般使用蒸馏水，应用最为方便。对细菌、真菌孢子等无不利影响。观察细菌、线虫活动，真菌孢子萌发都必须用水作浮载剂。测量真菌菌丝直径和真菌孢子大小时也以水作浮载剂为

好。但是用水作浮载剂制片时较易形成气泡，制成的玻片也易干燥而不能保存。 (2乳酚油：乳酚油长期以来一直是真菌学和植物病理学工作者习惯使用的浮载剂。乳酚油的组成如下：苯酚结晶(加热熔化20ml，乳酸 20ml，甘油40ml、水20ml。各成分混合后成为油状粘稠液体，具杀死和固定病原物的作用，可使干瘪的真菌孢子膨胀复原，还可使病组织变得略为透明。如在乳酚油中加入0．05--0．1％的染料制成棉蓝乳酚油，藏红乳酚油等，还能使菌丝或孢子略微着色，更便于观察。用乳粉油制作的玻片可长期保持湿润不会干燥，它的缺点中，很难精确测量病原物的大小。另外，乳酚油能与许多封固剂起作用，盖玻片也易滑动，不易封固。 4．1.2 临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂，撕、粘，挑和切片等，可根据病原物的类型选择使用。 (1涂抹法，细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干，固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 (2撕取法，用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。此法可以观察着生在寄主或基物表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆，以及病毒病的内含体等。 试以小麦白粉病叶，烟草花叶病病叶，蚕豆花叶病叶，受禾谷多粘茵为害的小麦病根等为材料，用撕取法制作临时玻片，观察病原物的形态。 (3粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块，使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。粘贴法用于菌丝或子实体着生于病组织或基物衷面的材料制片，特别适用于观察分生袍子在分生抱子梗上的着生情况。 (4挑取法，采用挑取法可以直接用挑针从病组织或基物(如培养基

实验二真菌形态观察(一).

实验二、真菌形态观察（一）1 目的：认识真菌营养体及变态，认识真菌无性和有性孢子类型。 掌握鞭毛菌亚门和接合菌亚门的主要形态特征。 掌握临时玻片的制作方法和绘图技术。 2原理：真菌营养生长阶段的结构称为营养体，当营养生长进行到一定时期， 就开始转入繁殖阶段，形成繁殖体，即子实体。营养体主要为菌丝体，主要变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状索菌等。繁殖体主要包括无性孢子和有性孢子。 通常制作临时玻片来观察病原物在植物上着生的情况以及病原物的形态特征。 3 材料用具 番茄晚疫病菌装片，辣椒疫霉病菌装片，黑根霉装片，酵母菌悬浮液等培养真菌，植物病害组织。挑针，刀片，木块，酒精灯，火柴，载玻片，盖玻片，纱布，乳酚油，二甲苯，显微镜，吸水纸，擦镜纸。投影仪，多媒体课件等4内容与方法（自己写，包括主要内容即可）4.1 临时玻片 4．1 .1浮载剂制作临时玻片都要使用浮载剂，浮载剂的作用是防止材料干燥和集中光线，以利于显微镜下观察。浮载剂的种类很多，最常用的是水和乳酚油，其次是甘油、甘油明胶，希尔浮载剂等。 （1 水：水浮载剂一般使用蒸馏水，应用最为方便。对细菌、真菌孢子等无不利影响。观察细菌、线虫活动，真菌孢子萌发都必须用水作浮载剂。测量真菌菌丝直径和真菌孢子大小时也以水作浮载剂为 好。但是用水作浮载剂制片时较易形成气泡，制成的玻片也易干燥而不能保存。 (2乳酚油：乳酚油长期以来一直是真菌学和植物病理学工作者习惯使用的浮载剂。乳酚油的组成如下：苯酚结晶(加热熔化20ml，乳酸20ml，甘油 40ml、水20ml。各成分混合后成为油状粘稠液体，具杀死和固定病原物的作

用，可使干瘪的真菌孢子膨胀复原，还可使病组织变得略为透明。如在乳酚油中加入0．05--0．1％的染料制成棉蓝乳酚油，藏红乳酚油等，还能使菌丝或孢子略微着色，更便于观察。用乳粉油制作的玻片可长期保持湿润不会干燥，它的缺点中，很难精确测量病原物的大小。另外，乳酚油能与许多封固剂起作用，盖玻片也易滑动，不易封固 4．1.2 临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂，撕、粘，挑和切片等，可根据病原物的类型选择使用。 (1涂抹法，细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干，固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 (2 撕取法，用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。此法可以观察着生在寄主或基物表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆，以及病毒病的内含体等。 试以小麦白粉病叶，烟草花叶病病叶，蚕豆花叶病叶，受禾谷多粘茵为害的小麦病根等为材料，用撕取法制作临时玻片，观察病原物的形态。 (3粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块，使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。粘贴法用于菌丝或子实体着生于病组织或基物衷面的材料制片，特别适用于观察分生袍子在分生抱子梗上的着生情况。 (4 挑取法，采用挑取法可以直接用挑针从病组织或基物(如培养基

真菌学报告

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真菌学实验报告 学院：生命科学学院 专业：生物技术 班级：生计091 姓名：xxxxxx 学号：xxxxxxx 指导教师：xxxxx 实验组：第九组 实验时间：2011.10.15——2011.12.15

一.实验目的： 1.了解真菌形态的基本特征。 2.掌握丝状真菌制片方法。 3.掌握内生真菌的分离方法 4.掌握真菌的鉴定方法。 二.前言： 真菌广泛分布于地球表面,从高山、湖泊到田野、森林，从海洋、高空到赤道、两极，到处都有真菌。真菌虽然不在空气中生长繁殖，但它的孢子却成群的漂浮在天空，只要稍微注意你会发现人类原来生活在真菌的汪洋大海中。 当今世界，生物技术已迈入世界经济的支柱产业，真菌学在生物技术的大潮中得到了长足的发展。真菌是原始的真核生物，具有广泛的多样性，真菌生长我繁殖迅速，在很短的时间内就可以得到比动物和植物多得多的后代，能够直接、快速地进行遗传性状分离的分析。因此，真菌可以作为研究基础生物学过程中的一个重要工具，真菌基因的多样性以及真菌分子生物学的发展，为生物技术产业提供了一个广阔的天地。 植物的生长环境直接影响内生真菌的生物多样性，植物物种的年代越久远，其生物内生真菌的多样性越丰富：抗病原性能越强的植物，其所含的内生真菌具有抗菌活性的可能行就越大；其所含的内生真菌有可能产生与植物相同或相似的抗菌无知或产生抗菌活性物质可能参与了药用植物的抗菌过程，本实验通过植物病原真菌和

G+、G-细菌的抑制实验发现茎，根，花，种子或果实内生真菌的代谢产物具有不同程度的抑菌能力，并且对G+、G-有普片遍的抑菌作用。研究和开发内生真菌的寻找新的抗菌活性物质具有广泛的应用前景。 三.材料与方法： （一） 1.材料： 在校园内采集银杏、喜树、桂花树样品包括叶、茎、根、花、种子或果实。 2.药品与试剂： 葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。双蒸水、琼脂糖，Tris饱和酚、巯基乙醇(β- Mercaptoethanol)，石英砂，Tris饱和酚，氯仿，异戊醇，无水乙醇，硼酸，冰醋酸，氯化钠，盐酸，氢氧化钠，EDTA，CTAB。 3.培养基： 1、马铃薯、葡萄糖琼脂培养基 马铃薯汁 1000ml，葡萄糖20g，琼脂20g