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缺血预处理对大鼠缺血再灌注肾损伤诱发凋亡的保护机制

缺血预处理对大鼠缺血再灌注肾损伤诱发凋亡的保护机制

作者:王颖;李志辉;邓旭;康志娟;夏团红;银燕;

作者机构:湖南省儿童医院肾内科,湖南省儿科医学研究所肾脏病研究室,南华大学儿科学院,长沙410007;;;;;;

来源:中华实用儿科临床杂志

ISSN:2095-428X

年:2016

卷:031

期:005

页码:P.354-358

页数:5

中图分类:R277.52

正文语种:CHI

关键词:缺血再灌注损伤急性肾损伤缺血预处理Bax Bcl-2 凋亡

摘要:目的探讨缺血预处理(IPC)对大鼠缺血再灌注(IR)肾损伤引起肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及其与Bcl-2、Bax表达变化的关系。方法采用夹闭小鼠双侧肾蒂30min的方法建立小鼠IR肾损伤模型;微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂15rain的方法进行预缺血,4d后再进行IR。实验共分为5个大组:对照组(C组),假手术组(S组),IR组,IPC组(IPC+IR组),IPC对照组(S+IR组);除C组外,其他4组根据再灌注的时间分亚组(再灌注后0h,3h,6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d);反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测小鼠肾组织Bax、Bcl-2mRNA表达水平;免疫组织化学方法检测小鼠肾组织Bax、Bcl-2的分布及蛋白质表达水平。原位末端转移酶标记(TUNEL)法免疫荧光染色检测。肾小管上皮细胞凋亡。结果1.与S组、S +IR组比较,IR组IR后血肌酐、血尿素氮、肾脏病理损害评分逐渐加重,再灌注24h达到峰值,各亚组之间差异均有统计学意义(P均〈0.01);肾组

织Bax、Bcl-2mRNA表达急剧上升,分别于6h、24h到达峰值,相对表达水平分别为2.66±0.12、2.70±0.10,各亚组间比较差异均有统计学意义(P均〈0.01);肾组织Bax、Bcl-2蛋白质的表达水平,各亚组间比较差异均有统计学意义(P均〈0.05),TUNEL免疫荧光染色C组、S组小鼠肾小管上皮未见明显的凋亡细胞;IR组在IR后肾小管上皮细胞凋亡数逐渐增多,再灌注后24h达到峰值[(25.07±2.29)%]。2.IPC+IR组肾脏病理损害明显减轻,Bax、Bcl-2mRNA及蛋白质表达水平、细胞凋亡明屁低于IR组及S+IR组(P均〈0.05)。结论Bax/Bcl-2与IR肾损伤密切相关,IPC町能通过调控Bax/Bcl-2参与急性肾损伤的调控。

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