第十一章 核酸的生物合成
一、填空题
1.中心法则是 于 年提出的,其内容可概括为
2.所有冈崎片段的延伸都是按 方向进行的。
3.前导链的合成是 的,其合成方向与复制叉移动方向 。
4.引物酶与转录中的RNA 聚合酶之间的差别在于它对 不敏感;后随链的合成是 的。
5.DNA 聚合酶I 的催化功能有 、 、 。
6.DNA 拓扑异构酶有 种类型,分别为 和 ,它们的功能是 。
7.细菌的环状DNA 通常在一个 开始复制,而真核生物染色体中的线形DNA 可以在 起始复制。
8.大肠杆菌DNA 聚合酶III 的 活性使之具有 功能,极大地提高了DNA 复制的保真度。
9.到目前为止,在大肠杆菌中已发现有 种DNA 聚合酶,其中 负责DNA 复制, 负责DNA 损伤修复。
10.大肠杆菌中DNA 指导的RNA 聚合酶全酶的亚基组成为 ,去掉 _因子的部分称为核心酶,这个因子使全酶能识别DNA 上的 位点。
11.在DNA 复制中, 可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。
12.DNA 合成时,先由引物酶合成 ,再由 在其3′端合成DNA 链,然后由 切除引物并填补空隙,最后由 连接成完整的链。
13.大肠杆菌DNA 连接酶要求 的参与,哺乳动物的DNA 连接酶要求 参与。
14.原核细胞中各种RNA 是 种RNA 聚合酶催化生成的,而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA 聚合酶催化,其中rRNA 基因由 转录,hnRNA 基因由 转录,各类小分子量RNA 则是 的产物。
15.转录单位一般应包括 序列, 序列和 序列。
16.真核细胞中编码蛋白质的基因多为 ,编码的序列还保留在成熟mRNA 中的是 ,编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是 ;在成熟的mRNA 中 序列被拼接起来。
17.限制性核酸内切酶主要来源于 ,都识别双链DNA 中 ,并同时断裂 。
二、选择题(只有一个最佳答案):
1.如果一个完全具有放射性的双链DNA 分子在无放射性标记溶液中经过两轮复制,产生的四个DNA 分子的放射性情况是:( )
A 、其中一半没有放射性
B 、都有放射性
C 、半数分子的两条链都有放射性
D 、一个分子的两条链都有放射性
E 、四个分子都不含放射性
2.关于DNA 指导下的RNA 合成的下列论述除了( )项外都是正确的。
A 、只有存在DNA 时,RNA 聚合酶才催化磷酸二酯键的生成
DNA DNA RNA 蛋白质
复制 转录 反转录 翻译
B、在转录过程中RNA聚合酶需要一个引物
C、链延长方向是5′→3′
D、在多数情况下,只有一条DNA链作为模板
E、合成的RNA链不是环形3.下列关于核不均一RNA(hnRNA)论述哪个是不正确的?()
A、它们的寿命比大多数RNA短
B、在其3′端有一个多聚腺苷酸尾巴
C、在其5′端有一个特殊帽子结构
D、存在于细胞质中
4.hnRNA是下列那种RNA的前体?()
A、tRNA
B、rRNA
C、mRNA
D、SnRNA
5.DNA复制时不需要下列那种酶:()
A、DNA指导的DNA聚合酶
B、RNA引物酶
C、DNA连接酶
D、RNA指导的DNA聚合酶
6.参与识别转录起点的是:()
A、ρ因子
B、核心酶
C、引物酶
D、σ因子
7.DNA半保留复制的实验根据是:()
A、放射性同位素14C示踪的密度梯度离心
B、同位素15N标记的密度梯度离心
C、同位素32P标记的密度梯度离心
D、放射性同位素3H示踪的纸层析技术
8.以下对大肠杆菌DNA连接酶的论述哪个是正确的?()
A、催化DNA双螺旋结构中的DNA片段间形成磷酸二酯键
B、催化两条游离的单链DNA连接起来
C、以NADP+作为能量来源
D、以GTP作为能源
9.下面关于单链DNA结合蛋白(SSB)的描述哪个是不正确的?()
A、与单链DNA结合,防止碱基重新配对
B、在复制中保护单链DNA不被核酸酶降解
C、与单链区结合增加双链DNA的稳定性
D、SSB与DNA解离后可重复利用
10.有关转录的错误叙述是:()
A、RNA链按3′→5′方向延伸
B、只有一条DNA链可作为模板
C、以NTP为底物
D、遵从碱基互补原则
11.关于σ因子的描述那个是正确的?()
A、不属于RNA聚合酶
B、可单独识别启动子部位而无需核心酶的存在
C、转录始终需要σ亚基
D、决定转录起始的专一性
12.真核生物RNA聚合酶III的产物是:()
A、mRNA
B、hnRNA
C、rRNA
D、srRNA和tRNA 13.合成后无需进行转录后加工修饰就具有生物活性的RNA是:()
A、tRNA
B、rRNA
C、原核细胞mRNA
D、真核细胞mRNA 14.DNA聚合酶III的主要功能是:()
A、填补缺口
B、连接冈崎片段
C、聚合作用
D、损伤修复15.DNA复制的底物是:()
A、dNTP
B、NTP
C、dNDP
D、NMP
16.下来哪一项不属于逆转录酶的功能:()
A、以RNA为模板合成DNA
B、需要短的RNA作为引物
C、水解RNA-DNA杂交分子中的RNA链
D、指导合成RNA
17.逆转录酶是一类:()
A、DNA指导的DNA聚合酶
B、DNA指导的RNA聚合酶
C、RNA指导的DNA聚合酶
D、RNA指导的RNA聚合酶
18. DNA上某段碱基顺序为5’-ACTAGTCAG-3’,转录后的上相应的碱基顺序为:()
A、5’-TGATCAGTC-3’
B、5’-UGAUCAGUC-3’
C、5’-CUGACUAGU-3’
D、5’-CTGACTAGT-3’
19.参与转录的酶是()
A、依赖DNA的RNA聚合酶
B、依赖DNA的DNA聚合酶
C、依赖RNA的DNA聚合酶
D、依赖RNA的RNA聚合酶
20.DNA复制需要:(1)DNA聚合酶Ⅲ;(2)解链蛋白;(3)DNA聚合酶Ⅰ;(4)DNA指导的RNA聚合酶;
(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是:()
A、(4)(3)(1)(2)(5)
B、(4)(2)(1)(3)(5)
C、(2)(3)(4)(1)(5)
D、(2)(4)(1)(3)(5)
21.下列有关大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的描述哪个是不正确的?()
A、其功能之一是切掉RNA引物,并填补其留下的空隙
B、是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶
C、具有3'→5'核酸外切酶活力
D、具有5'→3'核酸外切酶活力
22.DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成,其核心酶的组成是()
A、α2ββ
B、α2ββ'ω
C、ααβ'
D、αββ'
23.1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?()
A、DNA能被复制
B、DNA的基因可以被转录为mRNA
C、DNA的半保留复制机制
D、DNA全保留复制机制
24.DNA指导下的RNA聚合酶,由α2ββ’σ五个亚基组成,与转录起动有关的亚基是()
A、α
B、β
C、β’
D、σ
三、是非题(在题后括号内打√或×):
1.中心法则概括了DNA在信息代谢中的主导作用。()
2.原核细胞DNA复制是在特定部位起始的,真核细胞则在多位点同时起始复制。()
3.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。()
4.原核细胞和真核细胞中许多mRNA都是多顺反子转录产物。()
5.因为DNA两条链是反向平行的,在双向复制中,一条链按5′→3′方向合成,另一条链按3′→5′方向合成。()
6.限制性内切酶切割的片段都具有粘性末端。()
7.已发现有些RNA前体分子具有催化活性,可以准确的自我剪接,被称为核糖酶或核酶。()8.原核生物中mRNA一般不需要转录后加工。()
9.RNA聚合酶对弱终止子的识别需要专一性的终止因子。()
10.已发现的DNA聚合酶只能把单体逐个加到引物3′-OH上,而不能引发DNA合成。()
11.在复制叉上,尽管后随链按3′→5′方向净生成,但局部链的合成均按5′→3′方向进行。()12.RNA合成时,RNA聚合酶以3′→5′方向沿DNA的反意义链移动,催化RNA链按5′→3′方向增长。()
13.在DNA合成中,大肠杆菌DNA聚合酶I和真核细胞中的RNaseH均能切除RNA引物。()14.隔裂基因的内含子转录的序列在前体分子的加工中都被切除,因此可以断定内含子的存在完全没有必要。()
15.如果没有因子,核心酶只能转录出随机起始的、不均一的、无意义的RNA产物。()16.在真核细胞中已发现5种DNA指导的DNA聚合酶:α、β、γ、δ、ε。其中DNA聚合酶γ参与复制线粒体的DNA;DNA聚合酶β和ε在损伤修复中起着不可替代的作用;DNA聚合酶α和δ是核DNA 复制中最重要的酶。()
四、问答题:
1.什么是复制?DNA复制需要哪些酶和蛋白质因子?
2.在转录过程中哪种酶起主要作用?简述其作用。
3.试述DNA复制的基本规律。
4.单链结合蛋白在DNA复制中有什么作用?
5.大肠杆菌的DNA聚合酶和RNA聚合酶有哪些重要的异同点?
6.下面是某基因中的一个片段的(-)链:3′……ATTCGCAGGCT……5′。
A、写出该片段的完整序列
B、指出转录的方向和哪条链是转录模板
C、写出转录产物序列
D、其产物的序列和有意义链的序列之间有什么关系?
7.简述原核生物RNA转录的基本特点。
8.简要说明DNA半保留复制的机制。
9.各种RNA的转录后加工包括哪些内容?
10.试比较转录与复制的区别。
11.生物DNA聚合酶的种类和主要功能是什么?
五、名词解释:
半保留复制不对称转录逆转录冈崎片段复制叉前导链后随链模板链编码链内含子外显子顺反子启动子终止子转录单位半不连续复制
参考答案:
第十一章 核酸的生物合成
一、填空题
1.中心法则是 Crick 于 1958 年提出的,其内容可概括为
2.所有冈崎片段的延伸都是按 5′-3′ 方向进行的。
3.前导链的合成是 连续 的,其合成方向与复制叉移动方向 相同 。
4.引物酶与转录中的RNA 聚合酶之间的差别在于它对 利福平 不敏感;后随链的合成是 不连续 的。
5.DNA 聚合酶I 的催化功能有 5′-3′聚合酶活性 、 3′-5′外切酶活性 、 5′-3′外切酶活性 。
6.DNA 拓扑异构酶有 两 种类型,分别为 拓扑异构酶I 和 拓扑异构酶II ,它们的功能是 增加或减少超螺旋 。
7.细菌的环状DNA 通常在一个 复制位点 开始复制,而真核生物染色体中的线形DNA 可以在 多个复制位点 起始复制。
8.大肠杆菌DNA 聚合酶III 的 3′-5′外切酶 活性使之具有 校对 功能,极大地提高了DNA 复制的保真度。
9.到目前为止,在大肠杆菌中已发现有 3 种DNA 聚合酶,其中 DNA 聚合酶III 负责DNA 复制, DNA 聚合酶II 负责DNA 损伤修复。
10.大肠杆菌中DNA 指导的RNA 聚合酶全酶的亚基组成为 2σ ,去掉 σ _因子的部分称为核心酶,这个因子使全酶能识别DNA 上的 启动子 位点。
11.在DNA 复制中, 单链DNA 结合蛋白 可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。
12.DNA 合成时,先由引物酶合成 引物 ,再由 DNA 聚合酶III 在其3′端合成DNA 链,然后由 DNA 聚合酶I 切除引物并填补空隙,最后由 DNA 连接酶 连接成完整的链。
13.大肠杆菌DNA 连接酶要求 NAD + 的参与,哺乳动物的DNA 连接酶要求 ATP 参与。
14.原核细胞中各种RNA 是 1 种RNA 聚合酶催化生成的,而真核细胞核基因的转录分别由 3 种RNA 聚合酶催化,其中rRNA 基因由 RNA 聚合酶I 转录,hnRNA 基因由 RNA 聚合酶II 转录,各类小分子量RNA 则是 RNA 聚合酶III 的产物。
15.转录单位一般应包括 启动子 序列, 编码 序列和 终止子 序列。
16.真核细胞中编码蛋白质的基因多为 隔(断)裂基因 ,编码的序列还保留在成熟mRNA 中的是 外显子 ,编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是 内含子 ;在成熟的mRNA 中 外显子 序列被拼接起来。
17.限制性核酸内切酶主要来源于 微生物 ,都识别双链DNA 中 特异序列 ,并同时断裂 DNA 双链 。
二、选择题(只有一个最佳答案):
1.如果一个完全具有放射性的双链DNA 分子在无放射性标记溶液中经过两轮复制,产生的四个DNA 分子的放射性情况是:( A )
A 、其中一半没有放射性
B 、都有放射性
C 、半数分子的两条链都有放射性
D 、一个分子的两条链都有放射性
E 、四个分子都不含放射性
DNA DNA RNA 蛋白质
复制 转录 反转录 翻译
2.关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了( B )项外都是正确的。
A、只有存在DNA时,RNA聚合酶才催化磷酸二酯键的生成
B、在转录过程中RNA聚合酶需要一个引物
C、链延长方向是5′→3′
D、在多数情况下,只有一条DNA链作为模板
E、合成的RNA链不是环形3.下列关于核不均一RNA(hnRNA)论述哪个是不正确的?( D )
A、它们的寿命比大多数RNA短
B、在其3′端有一个多聚腺苷酸尾巴
C、在其5′端有一个特殊帽子结构
D、存在于细胞质中
4.hnRNA是下列那种RNA的前体?( C )
A、tRNA
B、rRNA
C、mRNA
D、SnRNA
5.DNA复制时不需要下列那种酶:( D )
A、DNA指导的DNA聚合酶
B、RNA引物酶
C、DNA连接酶
D、RNA指导的DNA聚合酶
6.参与识别转录起点的是:( D )
A、ρ因子
B、核心酶
C、引物酶
D、σ因子
7.DNA半保留复制的实验根据是:( B )
A、放射性同位素14C示踪的密度梯度离心
B、同位素15N标记的密度梯度离心
C、同位素32P标记的密度梯度离心
D、放射性同位素3H示踪的纸层析技术
8.以下对大肠杆菌DNA连接酶的论述哪个是正确的?( A )
A、催化DNA双螺旋结构中的DNA片段间形成磷酸二酯键
B、催化两条游离的单链DNA连接起来
C、以NADP+作为能量来源
D、以GTP作为能源
9.下面关于单链DNA结合蛋白(SSB)的描述哪个是不正确的?( C )
A、与单链DNA结合,防止碱基重新配对
B、在复制中保护单链DNA不被核酸酶降解
C、与单链区结合增加双链DNA的稳定性
D、SSB与DNA解离后可重复利用
10.有关转录的错误叙述是:( A )
A、RNA链按3′→5′方向延伸
B、只有一条DNA链可作为模板
C、以NTP为底物
D、遵从碱基互补原则
11.关于σ因子的描述那个是正确的?( D )
A、不属于RNA聚合酶
B、可单独识别启动子部位而无需核心酶的存在
C、转录始终需要σ亚基
D、决定转录起始的专一性
12.真核生物RNA聚合酶III的产物是:( D )
A、mRNA
B、hnRNA
C、rRNA
D、srRNA和tRNA 13.合成后无需进行转录后加工修饰就具有生物活性的RNA是:(C )
A、tRNA
B、rRNA
C、原核细胞mRNA
D、真核细胞mRNA 14.DNA聚合酶III的主要功能是:( C )
A、填补缺口
B、连接冈崎片段
C、聚合作用
D、损伤修复
15.DNA复制的底物是:( A )
A、dNTP
B、NTP
C、dNDP
D、NMP
16.下来哪一项不属于逆转录酶的功能:( D )
A、以RNA为模板合成DNA
B、需要短的RNA作为引物
C、水解RNA-DNA杂交分子中的RNA链
D、指导合成RNA
17.逆转录酶是一类:( C )
A、DNA指导的DNA聚合酶
B、DNA指导的RNA聚合酶
C、RNA指导的DNA聚合酶
D、RNA指导的RNA聚合酶
18. DNA上某段碱基顺序为5’-ACTAGTCAG-3’,转录后的上相应的碱基顺序为:(C)
A、5’-TGATCAGTC-3’
B、5’-UGAUCAGUC-3’
C、5’-CUGACUAGU-3’
D、5’-CTGACTAGT-3’
19.参与转录的酶是( A )
A、依赖DNA的RNA聚合酶
B、依赖DNA的DNA聚合酶
C、依赖RNA的DNA聚合酶
D、依赖RNA的RNA聚合酶
20.DNA复制需要:(1)DNA聚合酶Ⅲ;(2)解链蛋白;(3)DNA聚合酶Ⅰ;(4)DNA指导的RNA聚合酶;
(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是:( D )
A、(4)(3)(1)(2)(5)
B、(4)(2)(1)(3)(5)
C、(2)(3)(4)(1)(5)
D、(2)(4)(1)(3)(5)
21.下列有关大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的描述哪个是不正确的?(B)
A、其功能之一是切掉RNA引物,并填补其留下的空隙
B、是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶
C、具有3'→5'核酸外切酶活力
D、具有5'→3'核酸外切酶活力
22.DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成,其核心酶的组成是(A)
A、α2ββ
B、α2ββ'ω
C、ααβ'
D、αββ'
23.1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?(C)
A、DNA能被复制
B、DNA的基因可以被转录为mRNA
C、DNA的半保留复制机制
D、DNA全保留复制机制
24.DNA指导下的RNA聚合酶,由α2ββ’σ五个亚基组成,与转录起动有关的亚基是( D )
A、α
B、β
C、β’
D、σ
三、是非题(在题后括号内打√或×):
1.中心法则概括了DNA在信息代谢中的主导作用。(√)
2.原核细胞DNA复制是在特定部位起始的,真核细胞则在多位点同时起始复制。(√)
3.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。(×)
4.原核细胞和真核细胞中许多mRNA都是多顺反子转录产物。(×)
5.因为DNA两条链是反向平行的,在双向复制中,一条链按5′→3′方向合成,另一条链按3′→5′方向合成。(×)
6.限制性内切酶切割的片段都具有粘性末端。(×)
7.已发现有些RNA前体分子具有催化活性,可以准确的自我剪接,被称为核糖酶或核酶。(√)8.原核生物中mRNA一般不需要转录后加工。(√)
9.RNA聚合酶对弱终止子的识别需要专一性的终止因子。(√)
10.已发现的DNA聚合酶只能把单体逐个加到引物3′-OH上,而不能引发DNA合成。(√)11.在复制叉上,尽管后随链按3′→5′方向净生成,但局部链的合成均按5′→3′方向进行。(√)12.RNA合成时,RNA聚合酶以3′→5′方向沿DNA的反意义链移动,催化RNA链按5′→3′方向增长。(√)
13.在DNA合成中,大肠杆菌DNA聚合酶I和真核细胞中的RNaseH均能切除RNA引物。(√)14.隔裂基因的内含子转录的序列在前体分子的加工中都被切除,因此可以断定内含子的存在完全没有必要。(×)
15.如果没有因子,核心酶只能转录出随机起始的、不均一的、无意义的RNA产物。(√)16.在真核细胞中已发现5种DNA指导的DNA聚合酶:α、β、γ、δ、ε。其中DNA聚合酶γ参与复制线粒体的DNA;DNA聚合酶β和ε在损伤修复中起着不可替代的作用;DNA聚合酶α和δ是核DNA 复制中最重要的酶。(√)
四、问答题:
1.什么是复制?DNA复制需要哪些酶和蛋白质因子?
答:复制是指DNA双链经变性解旋后,形成单链(RNA只有单链),再以此为模板,按碱基互补配对的规律,各自合成一条新的互补链,结果生成两个(RNA单链)与亲代DNA完全相同的子代DNA分子。所以子代细胞具有亲代细胞的遗传信息,这一过程称为复制(replication),意指在DNA指导下合成DNA的过程。
DNA复制需要的酶和蛋白质因子:DNA聚合酶I、III,连接酶,引物酶,引物体,解螺旋酶,单链DNA 结合蛋白,拓扑异构酶。
2.在转录过程中哪种酶起主要作用?简述其作用。
答:在转录过程中起主要作用的酶:RNA聚合酶。作用略
3.试述DNA复制的基本规律。
答:DNA复制的基本规律:
①复制是半保留的;
②复制有固定的起始点,起始点在原核生物中特定的部位,在真核生物中起始点往往有多个;
③复制的方向可以是单向的,也可以是双向的,以双向复制为常见;
④复制时,子代DNA的两条链是从5’→3’端延伸;
⑤复制是半不连续的;
⑥复制时需要RNA引物;
⑦复制有多种机制。
4.单链结合蛋白在DNA复制中有什么作用?
答:单链DNA结合蛋白在DNA复制中的作用:
①使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存在,即稳定单链DNA,使复制中的单链DNA保持伸展状态,防止碱基重新配对,便于以其为模板复制子代DNA;
②保护单链DNA,避免核酸酶的降解。
5.大肠杆菌的DNA聚合酶和RNA聚合酶有哪些重要的异同点?
答:DNA聚合酶和RNA聚合酶都能催化多核苷酸链向5′-3′方向的聚合;
二者不同点为:DNA聚合酶以双链为模板,而RNA聚合酶只能以单链为模板;DNA聚合酶以dNTP 为底物,而RNA聚合酶以NTP为底物;DNA聚合酶具有3′-5′以及5′-3′的外切酶活性,而RNA聚合酶没有;DNA聚合酶可参与DNA的损伤修复,而RNA聚合酶无此功能;二者的结构也是不相同的。
6.下面是某基因中的一个片段的(-)链:3′……A TTCGCAGGCT……5′。
A、写出该片段的完整序列
B、指出转录的方向和哪条链是转录模板
C、写出转录产物序列
D、其产物的序列和有意义链的序列之间有什么关系?
答:A、3′……ATTCGCAGGCT……5′
5′……A TTCGCAGGCT……3′
B、转录方向为(一)链的3′—5′(一)链为转录模板
C、产物序列:5′……UAAGCGUCCGA……3′
D、序列基本相同,只是U代替了T。
7.简述原核生物RNA转录的基本特点。
答:①具有不对称性:
DNA双链中仅有一条链可作为转录的模板;一次转录只发生在整个DNA链上的部分区段;模板链并非自始至终位于同一股DNA单链上。
②RNA的转录不需要引物。
③转录具有方向性:延5'→3'方向合成RNA新链。
④转录具有连续性:RNA合成方向必须和解旋方向相同。
⑤转录具有特定的起始位点(依靠启动子识别)和终止位点(依靠终止子识别)。
8.简要说明DNA半保留复制的机制。
答:DNA不连续复制的机理为:解链;合成引物;在DNA聚合酶催化下,在引物的3′端沿5′-3′方向合成DNA片段;在不连续链上清除引物,填补缺口,最后在连接酶的催化下将DNA片段连接起来。
9.各种RNA的转录后加工包括哪些内容?
答:转录后加工主要包括:断裂、拼接、修饰、改造等。
10.试比较转录与复制的区别。
答:①目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA;
②方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板,复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为模板,在DNA的两条链上进行;
③复制需要引物,转录不需要引物;
④复制过程存在校正机制,转录过程则没有;
⑤转录产物需要加工,复制产物不需要加工;
⑥复制与转录都经历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板,新链按碱基互补原则,5'→3’方向合成。
11.生物DNA聚合酶的种类和主要功能是什么?
答:E.coli DNA聚合酶有三种:
(1)DNA pol Ⅰ:具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性,发挥校读、切
除RNA引物、填补空隙、修复损伤DNA等作用;
(2)DNA pol Ⅱ:具有5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性,参与DNA损伤的特殊修复作用;
(3)DNA pol Ⅲ:具有5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性,是主要的DNA复制酶。
五、名词解释:
半保留复制不对称转录逆转录冈崎片段复制叉前导链后随链模板链编码链内含子外显子顺反子启动子终止子转录单位半不连续复制
不对称转录:在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板的转录方式。
逆转录:也称反转录,以RNA为模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。与一般转录方向相反,故称为逆转录。
冈崎片段:相对比较短的DNA链(大约1000核苷酸残基),是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段。
外显子:在原始转录产物中通过RNA拼接反应而保留于成熟RNA中的序列或基因中与成熟RNA序列相应的DNA序列。
内含子:在原始转录产物中通过RNA拼接反应而被去除的RNA序列或基因中与这种RNA序列相应的DNA序列。
模板链:在DNA双链中,仅有一条可用于转录,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链。
核酸 一级要求单选题 1 下列关于核苷酸生理功能的叙述哪一项是错误的? A 核苷酸衍生物作为许多生物合成过程的活性中间物 B 生物系统的直接能源物质 C 作为辅酶的成分 D 生理性调节物 E 作为质膜的基本结构成分 E 2 RNA和DNA彻底水解后的产物是 A 核糖相同,部分碱基不同 B 碱基相同,核糖不同 C 碱基不同,核糖不同 D 碱基不同,核糖相同" E 以上都不是 C 3 对于tRNA来说下列哪一项是错误的? A 5'端是磷酸化的 B 它们是单链 C 含有甲基化的碱基 D 反密码环是完全相同的 E 3'端碱基顺序是-CCA D 4 绝大多数真核生物mRNA5'端有 A poly A B 帽子结构 C 起始密码 D 终止密码 E Pribnow盒 B 5 下列关于tRNA的叙述哪一项是错误的? A tRNA的二级结构是三叶草形的 B 由于各种tRNA,3'-末端碱基都不相同,所以才能结合不同的氨基酸 C tRNA分子中含有稀有碱基 D 细胞内有多种tRNA E tRNA通常由70-80个单核苷酸组成 B 6 下列关于tRNA的描述哪一项是错误的? A 在大肠杆菌中所有的tRNA分子在3'-末端均携带5'-CCA-3'序列 B 在tRNA中的许多碱基转录后被修饰 C 大多数t-RNA分子的二级结构可以用""三叶草型""描述 D t-RNA分子的反密码子上的第一个碱基经常是次黄嘌呤 E t-RNA分子的5'末端是三磷酸核苷 E 7 核酸中核苷酸之间的连接方式是 A 2',3'磷酸二酯键 B 3',5'磷酸二酯键 C 2',5'-磷酸二酯键 D 糖苷键 E 氢键 B 8 核酸的各基本单位之间的主要连接键是 A 肽键 B 磷酸二酯键 C 二硫键 D 糖苷键 E 氢键 B 9 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+),黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)和辅酶A(CoA), 三种物质合成的共同点是 A 均需要尼克酸 B 均需要泛酸 C 含有来自磷酸核糖焦磷酸(PRPP)的核糖基团 D 均接受半胱氨酸基团 E 均属于腺苷酸的衍生物 E 10 Watson-Crick DNA分子结构模型 A 是一个三链结构 B DNA双股链的走向是反向平行的 C 碱基A和G配对 D 碱基之间共价结合
第二章核酸的结构与功能 一、名词解释 1.核酸 2.核苜 3.核甘酸 4.稀有碱基 5.碱基对 6. DNA的?级结构 7.核酸的 变性8. Tm值9. DNA的复性10.核酸的杂交 二、填空题 11.核酸可分为—和—两大类,其中—主要存在于—中,而—主要存在于—= 12.核酸完全水解生成的产物有—、—和—,其中糖基有—、—.碱基有—和—两大类。 13.生物体内的噂吟碱主要有和,啼嚏碱主要有、和=某些RNA分广中 还含有微量的其它碱基,称为—。 14. DNA和RNA分子在物质组成上有所不同,主要表现在和的不同,DNA分子中存 在的是和,RNA分子中存在的是和。 15. RNA的基本组成单位是、、、, DNA的基本组成单位是、、、—,它们通过—键相互连接形成多核甘酸链。 16. DNA的二级结构是结构,其中碱基组成的共同特点是(若按摩尔数计算)、、 17.测知某DNA 样品中,A=0.53mok C=0.25mok 那么T=mol, G=mol. 18.噪吟环上的第一位氮原『与戊糖的第一位碳原子相连形成—键,通过这种键相连而成的化合物叫—= 19.啼咤环上的第一位氮原广与戊糖的第一位碳原子相连形成—键,通过这种键相连而成的化合物叫—。 20.体内有两个主要的环核昔酸是—、—,它们的主要生理功用是一° 21.写出下列核昔酸符号的中文名称:ATP、 22.DNA分子中,两条链通过碱基间的相连,碱基间的配对原则是一对—、—对—o 23. DNA二级结构的重要特点是形成—结构,此结构属于—螺旋,此结构内部是由—通过—相连维持。 24.因为核酸分广中含有—和—碱基,而这两类物质又均含有—结构,故使核酸对一波长的紫外线有吸收作用。 25. DNA双螺旋直径为_2_nm,双螺旋每隔_3_nm转?圈,约相当于」0—个碱基对。戊糖和磷酸基位于双螺旋_外_侧、碱基位于_内_侧。 26、核酸双螺旋结构中具有严格的碱基配对关系,在DNA分广中A对、在RNA分广中A 时—、它们之间均可形成一个氢键,在DNA和RNA分子中G始终与—配对、它们之间可形成一个氢键。 27. DNA的Tm值的大小与其分子中所含的—的种类、数量及比例有关,也与分广的—有关。若含的A-T配对较多其值则、含的G-C配对较多其值则 .分/?越长其Tm值也越 29.组成核酸的元素有一、—、—、—、—等,其中—的含量比较稳定,约占核酸总量的—,可通过测定—的含量来计算样品中核酸的含量。 。和双螺旋结构的维系力主要有DNA. 30. 31. ?般来说DNA分子中G、C含量高分子较稳定,同时比重也较—、解链温度也—。 33.DNA分广中两条多核甘酸链所含的碱基和间有三个氢键,—和—之间仅有两个氢键。 34.RNA主要有三类,鹿、和、,典型的tRNA二级结构是型结构。 36.在生物细胞中主要有三种RNA,其中含量最多的是、种类最多的是、含有稀有碱基最多的是一= 三、选择题 A型题
第十章核酸的生物合成 已知DNA是生物遗传的主要物质基础,是遗传信息的载体。但它是怎样把信息传递给子代并进行表达的?已证明DNA可进行自我复制,即在细胞分裂时,—个DNA分子可复制成两个与原来完全相同的DNA分子,并分配在两个分裂的子细胞中,这是把遗传信息传给子代的方式。在后代的生长发育过程中,遗传信息自DNA转录——即把其分子中某些片段的信息转抄在RNA分子中,此种RNA称为信使RNA (mRNA),它们再指导合成特异的蛋白质(翻译),并由这些蛋白质表现出生命活动的特征,执行各种生命功能。这种转录和翻译,即为遗传信息的表达过程。 第一节DNA的生物合成 DNA是由其组成单元脱氧核苷三磷酸聚合起来的生物大分子。活体内合成的新的DNA必须维持亲代细胞内原有的DNA分子结构,这样才得以保持遗传性状不变。现已知无论是高等生物或低等生物,体内DNA的合成都是以原有的DNA为模板“浇铸”而成,因此它们的结构和功能都能保持和亲本一模一样,所以DNA的合成也往往称为DNA复制。 —、DNA的复制方式 原核生物每个细胞只含有一个染色体;真核生物每个细胞则含有多个染色体。在细胞增殖周期的一定阶段,整个染色体组都将发生精确的复制,随后以染色体为单位把复制的基因组分配到两个子代细胞中去。染色体DNA的复制与细胞分裂之间存在密切的相互联系,一旦复制完成,即可发动细胞分裂;细胞分裂结束后,又可开始新的一轮DNA复制。 1. 半保留复制 DNA由互补的两条多核苷酸链组成。一条链上的核苷酸排列顺序决定了另一条链的核苷酸排列顺序。由此可见,DNA分子的每一条链都含有合成它互补链所必需的全部信息。1953年,Wotson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测,DNA复制时两条互补链分开,然后在每条链上按碱基配对的方式合成新的互补链,以组成新的DNA分子。这样新形成的两DNA分子与原来的DNA分子的碱基顺序完全一样。每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,这种复制方式称为半保留复制。 二、复制的起点和方向 DNA的复制开始于染色体上固定的起始点。超始点是含有100~200个碱基对的一段DNA。先是DNA 的两条链在起始点分开形成叉子样的“复制叉”,随着复制叉的移动完成DNA的复制过程。细胞内存在着能识别起始点的特种蛋白质。 DNA复制可以朝一个方向,也可以朝两个方向进行。 三、与DNA复制有关的酶和蛋白质 DNA的复制是一个十分复杂的过程,但能精确高速地进行,极少出现错误(错误机率10-8~10-9),这是许多酶和蛋白质共同作用的结果。 (一)DNA聚合酶 1.大肠杆菌DNA聚合酶 DNA复制过程中最基本的酶促反应是四种脱氧核苷酸的聚合反应。1956年Kornberg等首先从大肠杆菌提取液中分离出催化此反应的酶。他们将大肠杆菌提取液与32p标记α—磷酸根的四种脱氧核苷三磷酸(dA TP,dTTP,dGTP,dCTP)的混合物一同温育,发现32P掺入到延伸的DNA链的核苷酸残基之间的3',5'—磷酸二酯键中去。催化这个反应的酶称为DNA聚合酶,其后从不同的生物中都找到了这种酶。 2. 真核生物DNA聚合酶 在发现大肠杆菌DNA聚合酶后不久,从小牛胸腺中也分离到了DNA聚合酶。其后,曾对各种真核生物,包括动物、植物和微生物,广泛研究了它们细胞中的DNA聚合酶。现已知,在真核生物中存在四种
1、Ribozyme:具有高效特异催化功能的RNA。 2、自杀性底物:Kcat型不可逆抑制剂不但具有与天然底物相似的结构,而且本身也是酶的底物,可被酶催化而发生类似底物的变化。 因此称之为“自杀性底物” 3、酶的活性部位(活性中心):与底物接触并且发生反应的部位就称为酶的活性中心,也称为酶的活性部位。 4、变构酶又称别构酶,酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后,引起酶的构象的改变,进而改变酶的活性状态 5、卫星DNA:主要分布在染色体着丝粒部位,由非常短的串联多次重复DNA序列组成,因为它的低复杂性又称简单序列DNA,又因其不同寻常的核苷酸组成,常在浮力密度离心中从整个基因组DNA中分离成一个或多个“卫星”条带,故称卫星DNA。 6、Southern印迹:将凝胶上分离的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上,再通过同位素标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA 片段的方法。步骤:限制性酶切DNA分子、琼脂糖凝胶电泳分离、碱变性、转膜、探针杂交、洗膜除去未杂交的探针、放射性自显影。 Nouthern印迹:将RNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素膜上,然后进行核酸杂交的一种那个实验方法。Wouthren:将蛋白质从电泳凝胶中注意到硝酸纤维素膜上,然后与放射性同位素i125标记的特定蛋白质的抗体进行反应。7、酶活力:指酶催 化某化学反应的能 力,其大小可以用 在一定条件下所催 化的某一化学反应 的反应速率来表 示,两者呈线性关 系。 8、1)、可逆抑制作 用:抑制剂与酶以 非共价键结合,用 透析、超滤或凝胶 过滤等方法可以除 去抑制剂,恢复酶 活性。 主要包括:竞争性 抑制、非竞争性抑 制和反竞争性抑制 作用三种。 竞争性抑制是I与 S竞争E的结合部 位,影响了S与E 的正常结合。 非竞争抑制是I与 S同时与E结合,但 三元复合物不能进 一步分解为产物, 酶活性下降。 反竞争抑制是E只 有与S结合后,才 能与I结合,三元 复合物不能进一步 分解为产物。 2)、不可逆抑制作 用:抑制剂通常以 共价键与酶的必须 基团进行不可逆结 合,从而使酶失去 活性。按其作用特 点又可以分为专一 性不可逆抑制作用 和非专一性不可逆 作用。 非专一不可逆抑 制:抑制剂与酶分 子中一类或几类基 团作用,不论必须 基团与否,符合共 价结合,由于必须 基团也被共价结 合,从而导致酶的 抑制失活。 专一不可逆抑制作 用:抑制剂专一地 作用于酶的活性中 心或其他必须基 团,进行了共价结 合,从而抑制酶的 活性。 9、cDNA文库:以 mRNA为模板,经反 转录酶催化,在体 外反转录成cDNA, 与适当的载体(常 用噬菌体或质粒载 体)连接后转化受 体菌,则每个细菌 含有一段cDNA,并 能繁殖扩增,这样 包含着细胞全部 mRNA信息的cDNA 克隆集合称为该组 织细胞的cDNA文 库。 10、DNA指纹:在人 类vntrs位点是 1-5kb,但人的总 DNA提取后用限制 性内切酶切成不同 的片段,然后以 vntrs中的特异序 列为探针进行 southerm杂交,可 发现阳性片段的大 小各不相同。由于 不同个体的这种串 联重复的数目和位 置各不相同,所以 vntrs的southern 杂交带谱就具有高 度的个体特异性, 称DNA指纹。 11、后生遗传(外 遗传):指不处于 DNA自身的核苷酸 序列中可影响DNA 活性的任何可遗传 的性质。 11、多克隆位点: 多克隆位点是包含 多个(最多20个)限 制性酶切位点的一 段很短的DNA序列 12、亲和层析:蛋 白质分子能对配基 专一性地结合成复 合物,改变条件, 又能分离,利用这 种特性而设计的一 种层析技术。 13、疏水吸附层析: 使用适度疏水性的 分离介质,在含盐 的水溶液体系中, 借助于分离介质与 蛋白质分子之间的 疏水作用达到吸附 活性蛋白分子的目 的 14、抗体酶:用没 反应中间产物为抗 原诱导产生的具有 催化能力的免疫球 蛋白称为抗体酶 15、蛋白质完全水 解:即将所有的肽 键都打断,使蛋白 质完全裂解为氨基 酸。 蛋白质部分水解: 即将蛋白质的部分 肽键打开,进而部 分地分离出所需氨 基酸。 16、DNS-cl-Edman 测序法: 将高度灵 敏的DNS技术与能 连续降解的Edman 反应有机结合起来 测定氨基酸排列顺 序的方法。 17、基因芯片:固 定有寡核苷酸、基 因组DNA或cDNA等 的生物芯片。利用 这类芯片与标记的 生物样品进行杂 交,可对样品的基 因表达谱生物信息 进行快速定性和定 量分析。 18、密度梯度区离 心:蛋白质颗粒的 沉降速度与分子大 小和密度相关,在 具有密度梯度的介 质中离心时。质量 和密度大的颗粒比 质量和密度小的颗 粒沉降的快,并且 每种蛋白质颗粒沉 降到与自身密度相 等的介质密度梯度 中。 19、穿梭载体:既 能在原核生物中复 制,又能在真核生 物中复制的载体。+ 20、SiRNA:RNA干 涉现象中,介入细 胞中特定双链rna 加工裂解成的 21-23nt的正义和 反义链组成等干扰 基因表达的小分子 RNA,其引发的RNAi 是转录后基因沉默 现象的机制之一 21、RNAi:即RNA 干涉,是近年来发 现的在生物体内普 遍存在的一种古老 的生物学现象,是 由双链RNA(dsRNA) 介导的、由特定酶 参与的特异性基因 沉默现象,它在转 录水平、转录后水 平和翻译水平上阻 断基因的表达。 22、蛋白质组学: 以蛋白质组为研究 对象,分析细胞内 动态变化的蛋白质 组成成分、表达水 平和修饰状态,了 解蛋白质间的相互 作用与联系,在整 体水平上研究蛋白 质的组成与调控的 活动规律。 蛋白质组:一个细 胞或组织或机体所 包含的所有蛋白 质,现定义为基因 组表达的全部蛋白 质。具有三种含义:
生物化学习题(核酸答案) 一、名词解释: 单核苷酸:核苷与磷酸缩合生成的磷酸酯 磷酸二酯键:单核苷酸中,核苷的戊糖与磷酸的枪击之间形成的磷酸酯键 碱基互补规律:在形成双螺旋结构的过程中,由于各种碱基的大小与结构的不同,使得碱基之间的互补配对只能在G-C(或C-G)与A-T(或T-A)之间进行,这种碱基配对的规律称为碱基配对规律(互补规律) 核酸的变性与复性:当双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时,氢键断开,双链DNA解离为单链,称为核酸的“熔解”或变性;在适宜的温度下,分散开的两条DNA链可以完全重新结合成与原来一样的双股螺旋(DNA螺旋的重组过程称为复性) 退火:当将变性(双链呈分散状态)的DNA溶液缓慢冷却时,它们可以发生不同程度的重新结合而形成双螺旋结构的现象 增色效应、减色效应:DNA双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时,紫外吸收增加的现象——增色效应;变性DNA在退火条件下复性时,DNA在260nm的光密度比DNA分子中的各个碱基在260nm处吸收的光密度的总与小得多(35%-40%)的现象DNA的熔解温度:DNA双螺旋解开一半时的温度(Tm) 分子杂交:不同的DNA片段之间、DNA片段与RNA片段之间,如果彼此间的核苷酸排列顺序互补,也可以复性,形成新的双螺旋结构。按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程 环化核苷酸:单核苷酸中的磷酸基分别于戊糖的3’-OH及5’-OH形成酯键,这种磷酸内酯的结构成为环化核苷酸 核小体:用于包装染色质的结构单位,由DNA链缠绕一个组蛋白核构成 cAMP:3’,5’-环腺苷酸,就是细胞内的第二信使,由于某些激素或其它分子信号刺激激活腺苷酸环化酶催化ATP环化而成 二、填空题: 1、核酸变性后,其摩尔磷吸光系数ε(P) 。 2、维持DNA双螺旋结构稳定性主要就是靠。 3、核酸的基本结构单位就是。 4、脱氧核糖核酸在糖环位置不带羟基。
生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?B(每克样品*6.25) A.2.00g B.2.50g C.6.40g D.3.00g E.6.25g 2.下列含有两个羧基的氨基酸是:E A.精氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸 D.色氨酸 E.谷氨酸 3.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:D A.盐键 B.疏水键 C.肽键D.氢键 E.二硫键(三级结构) 4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:B A.天然蛋白质分子均有的这种结构 B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C.三级结构的稳定性主要是次级键维系 D.亲水基团聚集在三级结构的表面 E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5.具有四级结构的蛋白质特征是:E A.分子中必定含有辅基 B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成 C.每条多肽链都具有独立的生物学活性 D.依赖肽键维系四级结构的稳定性 E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:C A.溶液pH值大于pI B.溶液pH值小于pI C.溶液pH值等于pI D.溶液pH值等于7.4 E.在水溶液中 7.蛋白质变性是由于:D A.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解 8.变性蛋白质的主要特点是:D A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解
D.生物学活性丧失 E.容易被盐析出现沉淀 9.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为:B A.8 B.>8 C.<8 D.≤8 E.≥8 10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?E A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸 E.瓜氨酸二、多项选择题 1.含硫氨基酸包括:AD A.蛋氨酸 B.苏氨酸 C.组氨酸D.半胖氨酸2.下列哪些是碱性氨基酸:ACD A.组氨酸B.蛋氨酸C.精氨酸D.赖氨酸 3.芳香族氨基酸是:ABD A.苯丙氨酸 B.酪氨酸 C.色氨酸 D.脯氨酸 4.关于α-螺旋正确的是:ABD A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周 B.为右手螺旋结构 C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定(氢键) D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5.蛋白质的二级结构包括:ABCD A.α-螺旋 B.β-片层C.β-转角 D.无规卷曲 6.下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的:ABC A.是一种伸展的肽链结构 B.肽键平面折叠成锯齿状 C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D.两链间形成离子键以使结构稳定(氢键) 7.维持蛋白质三级结构的主要键是:BCD A.肽键B.疏水键C.离子键D.范德华引力 8.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷?BCD(>5) A.pI为4.5的蛋白质B.pI为7.4的蛋白质 C.pI为7的蛋白质D.pI为6.5的蛋白质 9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:AC A.中性盐沉淀蛋白 B.鞣酸沉淀蛋白 C.低温乙醇沉淀蛋白D.重金属盐沉淀蛋白
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 生物化学第10章核酸的酶促降解和核苷酸代谢 生物化学第 10 章核酸的酶促降解和核苷酸代谢第十章 核酸的酶促降解和核苷酸代谢一、填空题: 1、人及猿类体内嘌呤代谢最终产物为。 2、别嘌呤醇对有强烈的抑制作用。 3、胸腺嘧啶分解的最终产物有 4、参与嘌呤环合成的氨 基酸有 5、痛风是因为体内产生过多造成的,使用作为黄嘌呤氧 化酶的自杀性底物可以治疗痛风。 6、核苷酸的合成包括和 7、脱氧核苷酸是由 8、嘌 呤核苷酸从头合成途径首先形成核苷酸,嘧啶核苷酸生物合成形成 核苷酸,脱羧后生成核苷酸。 9、 dTMP 是由经修饰作用生成的。 10、不同生物分解嘌呤碱的终产物不同,人类和灵长类动 物嘌呤代谢一般止于,灵长类以外的一些哺乳动物可生成;大多 数鱼类生成,一些海洋无脊椎动物可生成。 二、选择题(只有一个最佳答案): 1、嘧啶核苷酸的第几位碳原子是来自于 CO2 的碳( ) ①2 ②4 ③5 ④6 2、 dTMP 的直接前体是()①dCMP ②dAMP ③dUMP ④dGMP 3、嘌呤核苷酸的嘌呤核上第 1 位 N 原子来自()①Gln ②Gly ③甲酸④Asp 的 -氨基 N 4、嘌呤环中 第 4 位和第 5 位碳原子来自下列哪种化合物?()①甘氨 1 / 9
酸②天冬氨酸③丙氨酸④谷氨酸三、是非题(在题后括号内打或): 1.嘌呤核苷酸的生物合成是先形成嘌呤环,再与糖环结合。 () 2、 CMP 是在 UMP 基础上经谷氨酰胺脱氨消耗 ATP 形成的。 () 3、脱氧核苷酸是在二磷酸核苷酸的基础上还原生成的。 () 4、限制性核酸内切酶是能识别几个特定核甘酸顺序的 DNA 水解酶。 () 5.胞嘧啶、尿嘧啶降解可以产生 -丙氨酸。 () 6、嘌呤核苷酸的从头合成是先闭环,再形成 N-糖苷键。 () 7、 L-氨基酸氧化酶是参与氨基酸脱氨基作用的主要酶。 ()四、问答题: 1、什么是限制性内切酶?有何特点?它的发现有何特殊意义? 2、核苷酸及其衍生物在代谢中有什么重要性? 3、说明核苷酸降解的一般途径,嘌呤与嘧啶的降解有何区别?五、名词解释: 限制性内切酶粘性末端参考答案: 第十章核酸的酶促降解和核苷酸代谢一、填空题 1、人及猿类体内嘌呤代谢最终产物为。
第二章核酸化学 一、核酸的化学组成: 1、含氮碱: 参与核酸与核苷酸构成的含氮碱主要分为嘌呤碱与嘧啶碱两大类。组成核苷酸的嘧啶碱主要有三种——尿嘧啶(U)、胞嘧啶(C)与胸腺嘧啶(T),它们都就是嘧啶的衍生物。组成核苷酸的嘌呤碱主要有两种——腺嘌呤(A)与鸟嘌呤(G),它们都就是嘌呤的衍生物。 2、戊糖:核苷酸中的戊糖主要有两种,即β-D-核糖与β-D-2-脱氧核糖,由此构成的核苷酸也分为核糖核苷酸与脱氧核糖核酸两大类。 3、核苷:核苷就是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。由“稀有碱基”所生成的核苷称为“稀有核苷”。如:假尿苷(ψ) 二、核苷酸的结构与命名: 核苷酸就是由核苷与磷酸经脱水缩合后生成的磷酸酯类化合物,包括核糖核苷酸与脱氧核糖核酸两大类。核苷酸又可按其在5’位缩合的磷酸基的多少,分为一磷酸核苷(核苷酸)、二磷酸核苷与三磷酸核苷。 此外,生物体内还存在一些特殊的环核苷酸,常见的为环一磷酸腺苷(cAMP)与环一磷酸鸟苷(cGMP),它们通常就是作为激素作用的第二信使。 核苷酸通常使用缩写符号进行命名。第一位符号用小写字母d代表脱氧,第二位用大写字母代表碱基,第三位用大写字母代表磷酸基的数目,第四位用大写字母P代表磷酸。 三、核酸的一级结构: 核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧链的多核苷酸长链化合物就称为核酸。核酸具有方向性,5’-位上具有自由磷酸基的末端称为5’-端,3’-位上具有自由羟基的末端称为3’-端。 DNA由dAMP、dGMP、dCMP与dTMP四种脱氧核糖核苷酸所组成。DNA 的一级结构就就是指DNA分子中脱氧核糖核苷酸的排列顺序及连接方式。RNA 由AMP,GMP,CMP,UMP四种核糖核苷酸组成。 四、DNA的二级结构: DNA双螺旋结构就是DNA二级结构的一种重要形式,它就是Watson与Crick 两位科学家于1953年提出来的一种结构模型,其主要实验依据就是Chargaff研究
一、名词解释 1.核酸 2.核苷 3.核苷酸 4.稀有碱基 5.碱基对 6.DNA的一级结构 7.核酸的变性 8.Tm值 9.DNA的复性 10.核酸的杂交 二、填空题 11.核酸可分为 ____和____两大类,其中____主要存在于____中,而____主要存在于____。 12.核酸完全水解生成的产物有____、____和____,其中糖基有____、____,碱基有____和____两大类。13.生物体内的嘌呤碱主要有____和____,嘧啶碱主要有____、____和____。某些RNA分子中还含有微量的其它碱基,称为____。 14.DNA和RNA分子在物质组成上有所不同,主要表现在____和____的不同,DNA分子中存在的是____和____,RNA分子中存在的是____和____。 15.RNA的基本组成单位是____、____、____、____,DNA的基本组成单位是____、____、____、____,它们通过____键相互连接形成多核苷酸链。 16.DNA的二级结构是____结构,其中碱基组成的共同特点是(若按摩尔数计算)____、____、____。17.测知某一DNA样品中,A=0.53mol、C=0.25mol、那么T= ____mol,G= ____mol。 18.嘌呤环上的第____位氮原子与戊糖的第____位碳原子相连形成____键,通过这种键相连而成的化合物叫____。 19.嘧啶环上的第____位氮原子与戊糖的第____位碳原子相连形成____键,通过这种键相连而成的化合物叫____。 20.体内有两个主要的环核苷酸是____、____,它们的主要生理功用是____。 21.写出下列核苷酸符号的中文名称:ATP____、dCDP____。 22.DNA分子中,两条链通过碱基间的____相连,碱基间的配对原则是____对____、____对____。23.DNA二级结构的重要特点是形成____结构,此结构属于____螺旋,此结构内部是由____通过____相连维持,其纵向结构的维系力是____。 24.因为核酸分子中含有____和____碱基,而这两类物质又均含有____结构,故使核酸对____波长的紫外线有吸收作用。 25.DNA双螺旋直径为____nm,双螺旋每隔____nm转一圈,约相当于____个碱基对。戊糖和磷酸基位于双螺旋____侧、碱基位于____侧。 26、核酸双螺旋结构中具有严格的碱基配对关系,在DNA分子中A对____、在RNA分子中A对____、它们之间均可形成____个氢键,在DNA和RNA分子中G始终与____配对、它们之间可形成____个氢键。27.DNA的Tm值的大小与其分子中所含的____的种类、数量及比例有关,也与分子的____有关。若含的A-T配对较多其值则____、含的G-C配对较多其值则____,分子越长其Tm值也越____。 28.Tm值是DNA的变性温度,如果DNA是不均一的,其Tm值范围____,如果DNA是均一的其Tm值范围____。 29.组成核酸的元素有____、____、____、____、____等,其中____的含量比较稳定,约占核酸总量的____,可通过测定____的含量来计算样品中核酸的含量。 30.DNA双螺旋结构的维系力主要有____和____。 31.一般来说DNA分子中G、C含量高分子较稳定,同时比重也较____、解链温度也____。 32.DNA变性后,其钢性_____、粘度____、紫外吸收峰____。 33.DNA分子中两条多核苷酸链所含的碱基____和____间有三个氢键,____和____之间仅有两个氢键。34.RNA主要有三类,既____、____和____、它们的生物功能分别是____、____和____。 35.RNA的二级结构大多数是以单股____的形式存在,但也可局部盘曲形成____结构,典型的tRNA二级结构是____型结构。 36.在生物细胞中主要有三种RNA,其中含量最多的是____、种类最多的是____、含有稀有碱基最多的是____。 37.tRNA三叶草型结构中,氨基酸臂的功能是____,反密码环的功能是____。
一、 A 型题 1. 中心法则阐明的遗传信息传递方式 (A) RNA-DNA-蛋白质 (B) 蛋白质-RNA-DNA (C) RNA-蛋白质-DNA (D) DNA-RNA一蛋白质 (E) DNA一蛋白质-RNA 2. 基因表达是指 (A) 复制+转录 (B) 复制十转录十翻译 (C) 转录十翻译 (D) 翻译十翻译后加工 (E) 转录十转录后加工 3. 生物信息传递中,下列哪一种还没有实验证据 (A) DNA→RNA (B) RNA→蛋白质 (C) RNA→DNA (D) 蛋白质→DNA (E) 上述四种都可以 4. 用实验证实DNA的半保留复制的学者是 (A) Watson和Crick
(B) Kornberg (C) Sanger (D) Meselson和Stabl (E) Nierenberg 5. 将在15NH4CI作为唯一氮源的培养基中培养多代的大肠杆菌,转入含15NH4Cl的培养基中生长三代后,其各种状况的DNA分子比例应该是(LL代表两条轻链14N-DNA,HH代表两条重链15 N-DNA,LH代表轻链、重链DNA) (A) 3LH/1HH (B) 6HH/2LH (C) 15LL/1LH (D) 7HH/1LH (E) 1HH/7LH 6. 原核生物的DNA聚合酶(DNA-pol) (A) DNA-pol Ⅲ是细胞内含量最多的 (B) DNA polⅡ由多亚基的不对称二聚体组成 (C) DNA-polⅠ有即时校读功能 (D) 都用NTP作底物 (E) 催化过程中,β、γ磷酸根分别生成游离磷酸 7. 合成DNA的原料是 (A) dADP dGDP dCDP dTDP (B) dATP dGTP dCTP dTTP (C) dAMP dGMP dCMP dTMP (D) ATP GTP CTP UTP
1核酸的结构与功能 一、名词解释 1、生物化学:是运用化学原理和方法,研究生命有机体化学组成和化学变化的科学,即研究生命活动化学本质的学科。(运用,研究,科学,学科) 2、DNA一级结构:由数量极其庞大的四种脱氧的单核苷酸按照一定的顺序,以3′,5′-磷酸二酯键彼此连接而形成的线形或环形多核苷酸链。 3、增色效应:含DNA和RNA的溶液经变性或降解后对紫外线吸收的增加。是由于碱基之间电子的相互作用的改变所致,通常在260nm测量。 4、减色效应:一种含有DNA或RNA的溶液与含变性核酸或降解核酸的相同溶液相比较,其紫外线吸收为低。是由于DNA双螺旋结构使碱基对的π电子云发生重叠,因而减少了对紫外线的吸收。 5、DNA的变性:指核酸双螺旋的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂。 6、DNA的复性:变性DNA在适当条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,全过程为复性。热变性后的复性又称为退火。 7、核酸分子杂交:应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片断按碱基互补关系形成杂交双链分子,这一过程称为核酸的分子杂交。 8、熔解温度:DNA变性的特点是爆发式的,变性作用发生在一个很窄的温度范围内。通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半(双螺旋结构失去一半)时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度(melting temperature),用tm表示。 9、Chargaff定律:所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等,(A=T),鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔含量相等(G=C),即嘌呤的总含量与嘧啶的总含量相等(A+G=T+C)。DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性。另外生长发育阶段、营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。 二、填空 1、核酸完全的水解产物是(碱基)、(戊糖)和(磷酸)。其中(碱基)又可分为(嘌呤)碱和(嘧啶)碱。 2、体内的嘌呤主要有(腺嘌呤)和(鸟嘌呤);嘧啶碱主要有(胞嘧啶)、(胸腺嘧啶)和(尿嘧啶)。某些RNA分子中还含有微量的其它碱基,称为(稀有碱基)。 3、嘌呤环上的第(9)位氮原子与戊糖的第1位碳原子相连形成(N-C糖苷)键,通过这种键相连而成的化合物叫(核苷)。嘧啶碱—1,1见书上P160 4、体内两种主要的环核苷酸是(cAMP)和(cGMP)。 <3’,5’-环腺苷酸,3’,5’-环鸟苷酸>书上160 5、写出下列核苷酸符号的中文名称:ATP(腺苷三磷酸),dCDP(脱氧胞苷二磷酸)。 6、tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸臂的功能是(携带活化氨基酸),反密码环的功能是(与mRNA模板上的密码子进行碱基配对的专一性的识别)。 7、两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于(细胞核)中,RNA主要位于(细胞质)中。 8、核酸分子中的糖苷键均为(β)型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为(糖苷)键。核苷与核苷之间通过(磷酸二酯)键连接形成多聚体。 9、核酸在260nm附近有强吸收,这是由于(在嘌呤碱基和嘧啶碱基中存在共轭双键)。 10、给动物食用3H标记的(胸腺嘧啶),可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。 11、双链DNA中若(G-C对)含量多,则Tm值高。 12、DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈(窄)。 13、DNA所处介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越(宽),熔解温度越(低),所以DNA应保存在较(高)
第十章 RNA的生物合成和加工下册 P455 贮存于DNA的遗传信息需通过转录和翻译而得到表达。通过转录在RNA聚合酶催化下 合成细胞内各种RNA(mRNA、r-RNA、t RNA和具有各种特殊功能的小RNA),转录的RNA产物通常要经过一系列加工和修饰才能成为成熟的RNA分子,遗传信息表达过程中存在复杂调控机制。 RNA携带遗传信息(RNA为信息分子)可以指导RNA合成(复制),也可以指导DNA合成(逆转录);RNA还具催化(核酶)等多种功能(RNA为功能分子)。 10-1 DNA指导下的RNA合成 转录:是以DNA分子为模板合成与其核苷酸顺序相对应的RNA分子的过程。 基因是遗传物质的最小功能单位,相当于DNA一个片段。一个转录单位可以是一个基因也可以是多个基因。 基因的转录是一种有选择性的过程,随着细胞的不同生长发育阶段和细胞内外条件的改变将转录不同的基因。 一一一转录 (1)DNA指导下的RNA聚合酶: 该酶所需底物:四种核糖核苷三磷酸(ATP,GTP,UTP及CTP)。 模板:双链DNA或单链DNA。 Mg2+:促进聚合。 不需引物,合成方向也是5‘→3‘。 催化聚合反应产生的PP i水解推动反应向前。 RNA酶无校对功能。 (2)不对称转录: 在体内DNA两条链中仅有一条链可用于转录,某些区域以这条链转录,另一些区域则可以另一条链转录。 用于转录的链称为模板链或负链(- DNA),对应的链为编码链,即正链(+DNA)。编码链与转录出来的RNA链碱基序 列一样,只是以U取代T,它无转录功能,只能进行复制。 RNA转录时无需将DNA双链完全解开,RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,并以其中一条链为有效的模板,在其上合成出互补的RNA链,合成的RNA 链随DNA双链恢复而离开DNA链。 P456 图36-1 E. coli RNA聚合酶进行转录。 (3) E. coli的RNA聚合酶: 全酶由五个亚基(α2ββ‘σ)组成,相对分子量465,000。没有σ亚基的酶(α2ββ‘)叫核心酶,只能使已开始合成的RNA链延长,而不具有起始合成RNA的能力。开始合 成的RNA链时必须有σ亚基参与作用,σ亚基为起始亚基。 (4)转录反应四阶段: 模板的识别,转录的起始、延伸和终止。 1. 识别:RNA聚合酶在σ亚基引导下识别并结合到启动子上,DNA双链局部解链,形成 转录泡(解链区)。
(二)填空题 1.DNA复制是定点双向进行的,股的合成是,并且合成方向和复制叉移动方向相同;股的合成是的,合成方向与复制叉移动的方向相反。每个冈崎片段是借助于连在它的末端上的一小段而合成的;所有冈崎片段链的增长都是按方向进行。2.DNA连接酶催化的连接反应需要能量,大肠杆菌由供能,动物细胞由供能。 3.大肠杆菌RNA聚合酶全酶由组成;核心酶的组成是。参与识别起始信号的是因子。 4.基因有两条链,作为模板指导转录的那条链称链。 5.以RNA为模板合成DNA称,由酶催化。 6.DNA或UpGpCpA分别经0.3NKOHR、NaseT1和牛胰RNaseI处理所得结果: DNA: 0.3NKOH:;RNaseT1:;RNase I: ; UpGpCpA:0.3NKOH:;RNaseT1:;RNase I :。 7.基因突变形式分为:,,和四类。 8.亚硝酸是一个非常有效的诱变剂,因为它可直接作用于DNA,使碱基中基氧化成基,造成碱基对的。 9.所有冈崎片段的延伸都是按方向进行的。 10.前导链的合成是的,其合成方向与复制叉移动方向;随后链的合成是的,其合成方向与复制叉移动方向。 11.引物酶与转录中的RNA聚合酶之间的差别在于它对不敏感,并可以作为底物。12.DNA聚合酶I的催化功能有、、、和。 13.DNA回旋酶又叫,它的功能是。 14.细菌的环状DNA通常在一个开始复制,而真核生物染色体中的线形DNA可以在起始复制。 15.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的活性使之具有功能,极大地提高了DNA复制的保真度。16.大肠杆菌中已发现种DNA聚合酶,其中负责DNA复制,负责DNA损伤修复。17.DNA切除修复需要的酶有、、和。 18.在DNA复制中,可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。 19.DNA合成时,先由引物酶合成,再由在其3′ 端合成DNA链,然后由切除引物并填补空隙,最后由连接成完整的链。 20.原核细胞中各种RNA是催化生成的,而真核细胞核基因的转录分别由种RNA聚合酶催化,其中rRNA基因由转录,hnRNA基因由转录,各类小分子量RAN则是的产物。 21.一个转录单位一般应包括序列、序列和顺序。 22.真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列还保留在成熟mRNA中的是,编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。在基因中被
第二章核酸化学 一、名词解释 1、DNA一级结构DNA分子中的核苷酸序列,碱基排列顺序。反应生物界物种多样性和复杂性。决定其高级结构,对阐明遗传物质结构,功能及表达调控重 2.增色效应核酸(DNA和RNA)分子解链变性或断链,其紫外吸收值(一般在260nm处测量) 增加的现象。 3.分子杂交不同来源或不同种类生物分子间相互特异识别而发生的结合。如核酸(DNA、RNA)之间、蛋白质分子之间、核酸与蛋白质分子之间、以及自组装单分子膜之间的特异性结合。 4.碱基互补碱基互补配对的规律 规律一:一个双链dna分子中,a=t,c=g,a+g=c+t,即:嘌呤碱基数=嘧啶碱基数。 规律二:双链dna分子中,互补配对的碱基在两条单链中所占的比例与整个dna分子中所占的比例是相等的规律三:双链dna分子中,两条互补单链中非互补配对的碱基和的比值互为倒数 二、简答题: 1、为什么核酸有紫外吸收性质?简述这一特性的应用。 答:嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有一强烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性。DNA钠盐的紫外吸收在260nm附近有最大吸收值(图3-25),其吸光率(absorbance)以A260表示,A260是核酸的重要性质,在核酸的研究中很有用处。在230nm处为吸收低谷,RNA钠盐的吸收曲线与DNA无明显区别。不同核苷酸有不同的吸收特性。所以可以用紫外分光光度计加以定量及定性测定。 2、组成核苷酸的常见碱基有哪些?代号如何表示? 答:DNA中戊糖为D-2-脱氧核糖(D-2-deoxyribose),碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶;RNA中戊糖为D-核糖(D-ribose),碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶 核苷酸中的嘌呤碱(purine)主要是鸟嘌呤(guanine,G)和腺嘌呤(adenine,A),嘧啶碱(pyrimidine)主要是胞嘧啶(cytosine,C)、尿嘧啶(uracil,U)和胸腺嘧啶(thymine,T)。DNA和RNA都含有鸟嘌呤(G)、腺嘌呤(A)和胞嘧啶(C);胸腺嘧啶(T)一般而言只存在于DNA中,不存在于RNA中;而尿嘧啶(U)只存在于RNA中,不存在于DNA中。它们的化学结构请参见图示。
一、是非题 1.滚筒式复制是环状DNA,一种特殊的单向复制方式。 2.所有核酸的复制过程中,新链的形成都必须遵循碱基配对的原则。 3.双链DNA经过一次复制形成的子DNA分子中,有些不含亲代核苷酸链。 4.原核细胞的每一个染色体只有一个复制起点,而真核细胞的每一个染色体就有许多个复制起点。 5.在细胞中,DNA链延长的速度随细胞的培养条件而改变。 6.在细胞生长周期的G1期是双倍体,而在G2期是三倍体。 7.所有核酸合成时,新链的延长方向都是从5′→3′。 8.抑制RNA合成酶的抑制剂不影响DNA的合成。 9.在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。 10.缺失DNA聚合酶Ⅱ的E.coli突变株,可以正常地进行染色体复制和DNA修复合成; 11.在真核细胞中,三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。 12.真核细胞中mRNA 5′端都有一个长约200核苷酸组成的PolyA结构。 13.真核细胞中mRNA的前体为hnmRNA。 14.无论是在原核或真核细胞中,大多数mRNA都是多顺反子的转录产物。 15.一段人工合成的多聚尿苷酸可自发形成双螺旋。 二、填空题 1.mRNA前体的加工一般要经过、在5′端和在3′端三个步骤。2.识别同一断裂序列的限制性内切酶称为、识别相似断裂序列并产生能通过碱基互补相互缔合粘性末端的限制性内切酶称为。 3.逆转录酶是催化以为模板,合成的一类酶,产物是。4.欲标记DNA双链5′端,需要酶催化,利用作底物。5.通过与DNA分子中G-C顺序结合,阻止RNA聚合酶催化的RNA链延伸的抗生素是。 6.核糖体的亚基上含有与mRNA结合的位点。 7.RNA聚合酶复合物中的。因子具有作用。 8.DNA双链中编码链的一段核着酸顺序是pCpTpGpGpApC,转录的mRNA顺序应该是。 9.每个冈崎片段是借助连在它端的一小段引物,每个冈崎片段的增长都是由端向端延伸。 10.寡聚核苷酸片段UpGpCpApUpGpCp经0.3摩尔的KOH水解产物是,经RnaseT1作用产物是,经RNase A 产物是。 11.DNA复制时,前导链的合成是的,复制方向与复制叉移动的方向,后随链的合成是的,复制方向与复制叉移动的方向。 12.在真核细胞的DNA切除修复过程中,受损伤的碱基可由和切除,并由和共同作用将缺失的碱基补上。 13.在实验室使用的大多数诱变剂都是属于诱变,而大多数致癌物质都是属于诱变。 14.14.在线粒体中的环状基因组是通过合成方式复制。滚筒式复制的特点是由。 15.DNA复制和RNA的合成都需要酶,在DNA复制中该酶的作用