治疗性克隆的伦理学限制

治疗性克隆的伦理学限制

2005年11月24日,有韩国“克隆之父”之称的黄禹锡教授在韩国汉城举行新闻发布会,向全世界宣称辞去首尔国际干细胞研究中心主席一职,以及其在韩国政府和社会组织担任的所有职务,并为自己有意向公众隐瞒实验用卵子的来源而恳切道歉。该事件再一次在全世界范围内激起人们对胚胎干细胞研究的伦理学争论。

英国经济和社会研究委员会基因组学经济与社会研究中心的Whittaker撰文(Toxicol Appl Pharmacol 2005, 207: 689-691)分析了目前关于治疗性克隆存在的主要伦理学争论,并建议了一些可能可以避开违背伦理学的干细胞研究方法,其主要观点概括如下,希望能对国内开展干细胞研究带来一些启示。

干细胞与治疗性克隆

关于用干细胞疗法治疗退行性疾病和损伤的可能作用引起了广泛的讨论(He et al., 2003, Kerr et al., 2003, Kim et al., 2002, Rippon and Bishop, 2004 a nd Sylvester and Longaker, 2004)。这些疾病和损伤包括:帕金森病、阿尔茨海默病、心脏病、白血病、糖尿病以及各种自身免疫性疾病和脊髓损伤。

干细胞是一种能够分裂成与自身一致的细胞或几种特殊分化的细胞型的细胞。动物体内干细胞的正常作用是在发育的过程中可提供不同的细胞型,以生长成不同的组织和器官。它们也提供替代细胞以修复身体不同部分的损伤。干细胞疗法就是利用已特殊分化的干细胞,通过特殊的途径提供细胞去替代那些在退行性过程和损伤中失去的细胞。使用未分化干细胞也存在畸胎瘤和其他肿瘤形成的风险(Martin, 1980)。

干细胞可以根据其分化潜能进行分类。就人类干细胞而言,可以分为:

①多能干细胞,可以分化成为人体任何细胞;

②专能干细胞,可以分化成几种类型人体细胞,但不是全部类型人体细胞;

③单能干细胞,只能分化成一种人体细胞。

目前人干细胞的主要来源或者潜在来源如下:

①胚泡,可以提供多能干细胞;

②胎儿组织,可以提供多能或者专能干细胞;

③脐带血,可以提供专能干细胞;

④成人组织,可以提供专能干细胞或者单能干细胞。

干细胞疗法的一个潜在问题是机体对移植干细胞的免疫排斥。有建议说利用现今的治

疗性克隆方法获取的干细胞可以避免这个问题。治疗性克隆指的是利用核转移技术将患者成熟细胞的二倍体核转移至一个去核卵子,然后让这一生成的胚胎在体外生长至胚泡期。胚泡期的胚胎内含有大量的内细胞群,这些细胞可以发育成人类胎儿的各种组织。将这些细胞移走并培养,从而产生胚胎干细胞。2004年韩国科学家用这种方法成功获得人干细胞 (Hwang et al., 2004)。这些干细胞可以根据治疗需要经过特殊处理而分化成不同类型细胞。

常见的伦理学思考

随着所有的医学介入,一个重要的伦理学考虑就是,不论对供体还是受体,任何操作包括获得或植入细胞都必须是自主的。很显然,必须让供体和受体都完全认识到任何操作的性质和重要性,以及任何可能的风险,且应知情同意。关于治疗性克隆,供体和受体应该是同一个个体,无论患者因任何原因不能够提供知情同意,应该从至亲中寻找细胞来源。

治疗性克隆的一些步骤与胚胎处理操作的一些步骤相似或相同,这些步骤包括:

①通过体外受精(IVF)生殖。这常常认为是一个符合伦理学的过程,虽然最近有证据表明通过IVF的儿童,发育缺陷水平升高(Hansen et al., 2002)。

②通过IVF胚胎产生胚胎干细胞。这个也是一个治疗的目的,特别是在免疫排斥较小的情况下。与治疗性克隆一样,这里最主要的伦理学问题还是胚胎的破坏。

③生殖性克隆。核转移过程中也许会带来累积的体细胞变异和遗传学损害,所以遭到伦理学的质疑,特别是当任何一种产生的胚胎有导致出生缺陷危险时。当胚胎被用作提取干细胞进行治疗目的时,体细胞变异也许可能是一个相对小的问题,然而伦理学考虑要求治疗性克隆操作,需在动物试验得到验证后才能运用在人体上。也有争论,对于治疗性克隆,假如需要治疗的疾病非常严重,一些水平的风险也许可以被接受。

对于患者可能受益的治疗性克隆,进一步的伦理学考虑的问题是成千上万人卵子的可获得性。人卵子是一种有限的资源,获取卵子对于卵子捐赠者而言需要付出身体代价。也许用牛的或者其他的哺乳动物卵子,可以防止发生这一问题。然而,安全性问题——将人细胞核与非人类线粒体DNA放在一起以及可能的动物病毒的传播的不可预知性——将导致更多的伦理学问题。上述原因可能导致治疗性克隆并不能如预测的那样,可取得广泛的医学突破,它也许可能仅成为一种少数能支付起费用的患者可利用的治疗方法。

就卵子捐赠而言,目前另外一种伦理学争论正在进行。目前已经知道,一个克隆出人类胚胎的韩国研究小组的一名女科学家(Hwang et al., 2004),同样也是他们研究的卵子捐赠者。一些伦理学家认为这名捐赠者,作为这项获得非常成功的研究小组一员,从这个捐赠中获益颇多。这违反了伦理学准则,即人体组织捐赠时捐赠者不能因此获利。一直都建议卵子捐赠者和研究者的活动应该保持距离。另一方面,似乎这名捐献者的收益并不是精神上的,这种收益与金钱无直接关系。

尽管上述这些伦理学考虑都很重要,但是这些争论与破坏人胚胎相比显得苍白无力。那些参与这一争论的人代表着两个阵营,一个阵营认为早期人胚胎也是人的生命,也应该值得同样的尊重,包括享受人应享受的生命的权利;另一个阵营认为人胚胎仅仅是一个无关紧

要的细胞团。由于没有任何建立在科学证据和伦理学妥协基础上的调解余地,这个一直都很激烈的伦理学争论被解决似乎是不可能的。

这场争论涉及医学、神学、伦理学,甚至语义学的众多领域。早期人胚胎是一个生命(human life),人(human being)还是一个人类个体(human person)?这些术语的精确含义到底是什么?大多数人,但也许并非所有的人,同意一个早期人胚胎是一个生命(human life)——它是一个活着的实体。但是这足以说明它是人(human being)或一个人类个体(human person)吗?字典中的解释认为出生后才能称为人(human being),然而,“being”这个词意味着存在才是最基本的。生命前组织(Pro-Life groups)成员认为胚胎就是人(human being)。更有甚者认为,人类个体(human person)是指具备个性特征的实体。我们可以将后者定义为具备独特行为和精神特征总和的个体。然而,天主教派的观念也认为胚胎就是一个人类个体(human person)(天主教派教义,1994)。

不被伦理学禁止的方法

胚胎实验和胚胎破坏似乎争议很多,基于此,人们也许应该寻找避开伦理学障碍的治疗性克隆方法,如果目的是产生免疫学相容的专能干细胞,也许有如下几种方法可以一试:

①分化自体成人干细胞或建立脐血干细胞库(Bjornson et al., 1999, Eglitis and Mezey, 1997 and Raff, 2003)。有证据表明成人干细胞或者脐血干细胞可以分化成专能干细胞,虽然对于这些干细胞的分化以及分裂,仍然需要进行很多工作去研究它们,但这也许是争论最少的途径。

②改变已经建立的干细胞培养方法,使得它们免疫学相容 (He et al., 2003) 。然而支持生命者(Pro-Life purists)也许将对这些胚胎起源于这些干细胞感到不舒服,虽然不会发生进一步的胚胎损害。

③自身体细胞与已经建立的多能胚胎干细胞系融合(Ying et al., 2002)。研究正在朝这个方向进行,但是再一次,支持生命者可能对源于已经建立的干细胞系不满意。

科学家对于他们的工作进行伦理学方面的考虑是非常重要的。常常因为商业的或者医学的紧急需要,导致最后的研究结果存在超越伦理学限制的危险。所以有时候,也许应该去探讨一个更符合伦理学要求的途径去达到同样的目的。科学家应该非常清楚地知道他们自己所从事工作的潜力,同时具备分辨自己研究中哪些是正确和哪些是错误的能力,以及应该十分清楚地知道自己的研究应该朝什么方向发展。

关于生殖性克隆的哲学思考

关于生殖性克隆的哲学思考 摘要：随着科技的发展，相关伦理问题也随之突出。其中，由生殖性克隆引发的伦理争议最为剧烈。然而，伦理问题并不会成为终止科技发展的因素。因此，虽然现在国际上普遍禁止生殖性克隆，笔者仍认为克隆人终将出现，所出现的伦理矛盾也会得到解决。我们应正确引导克隆技术朝着有利于人类的方向发展, 尽可能减少克隆技术产生的伦理负效应,并为其制定相应的伦理规则以约束其可能造成的危害。 关键词: 克隆技术；生殖性克隆；科技伦理；哲学思考 一、关于克隆技术 1996年7月5日，克隆绵羊多利的诞生，标志着真正的人工诱导的无性繁殖的实现，随后动物克隆技术的研究与开发进入一个高潮。然而，“多利”的诞生引起的反响不仅限于此，更重要的是引发了一场由克隆人所衍生的道德问题的讨论。 克隆是指由单个祖先个体经过无性繁殖而产生的其他个体。一般来说，克隆人类胚胎可以分为三种情况：第一，治疗性克隆，以治疗人类疾病为目的，主要是用胚胎多能干细胞来克隆特定细胞、组织乃至器官以修复病人的组织或器官。第二，研究性克隆，以研究人类胚胎发育及其中的基因调控过程为目的。第三，生殖性克隆，以复制人为目的，是对人类个体的复制，把克隆出的人类胚胎植入母体, 生产出克隆人。这三种人类胚胎的克隆都使用同一种核转移技术，只是目的不同而已。目前，许多科学家、科学组织以及一些国家的政府都发表声明支持治疗性克隆的研究与开发，但是，另一方面，由于生殖性克隆对伦理道德的冲击，几乎所有国家对生殖性克隆持坚决反对态度，许多国家还制定一系列的政策法规来控制克隆人。 二、生殖性克隆及其引发的伦理争议 克隆技术的发展使克隆人的出现成为了可能。诺贝尔奖获得者乔舒亚·雷德贝格博士认为, “在人类中完成这项工作绝不会有特殊困难”。然而，就目前而言，国际社会的主流观点一般都对克隆人持坚决反对态。反对原因主要涉及以下技术问题及伦理问题： 1. 目前生殖性克隆技术尚未成熟 目前克隆动物技术的不成熟（成功率很低、克隆繁殖时异常比例超过了40%）很可能会产生出许多畸形的、具有严重缺陷的克隆人。首先，动物克隆的成功率处于极低的水平。多利羊是在第276次失败上才取得的成功，成功率仅为1/277。其次，即便经过千辛万难，克隆动物得以诞生，它们在出生后发生肥胖、早衰、早夭及其他问题的概率也远远高于自然生殖的发生率。正值壮年的多利死于肺部感染，而这是一种老年绵羊的常见疾病。而若利用[3][2][1]

猪嵴病毒全长cDNA感染性克隆的构建及拯救

密级：论文编号： 中国农业科学院 学位论文 猪嵴病毒全长cDNA感染性克隆的构建及拯救Construction and rescue of Porcine Kobuvirus full-length cDNA infectious clone 硕士研究生：李长龙 指导教师：冯力研究员 申请学位类别：农学硕士 专业：预防兽医学 研究方向：兽医微生物及分子生物学 培养单位：哈尔滨兽医研究所 中国农业科学院研究生院 2014年5月

Secrecy:No. Chinese Academy of Agricultural Sciences Master Dissertation Construction and rescue of Porcine Kobuvirus full-length cDNA infectious clone Ms. Candidate：Li Changlong Advisor：Prof. Feng Li Major：Preventive Veterinary Medicine Specialty：Molecular Biology and Veterinary Microbiology May 2014

独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名：时间：年月日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 论文作者签名：时间：年月日 导师签名：时间：年月日

克隆

克隆，科学发展的必然产物 1997年克隆羊“多利”的问世证明了单性繁殖的可能性，这是生物学界的重大事件.“克隆”作为一项新生的科学技术手段，它标志着人类科学技术新的发展阶段的到来，它为人类探索生命的奥秘，研究生命的发生、发展的规律提供了一项重要的技术手段，它与人们业已掌握的其他科技手段一样，应予以充分的肯定。换句话说，克隆是科学发展到一定阶段的必然产物。 Sence the first successful experiment in cloning ，this technique has caught attentions of people all over the world，尤其在是否应该克隆人的问题上。因为它同时也带来了许多法律、道德、伦理上的问题。我的回答是肯定的，因为克隆不仅是一项技术，更重要的是它的使用价值。“克隆”是一种科学技术，人类既然能掌握它，就一定有办法控制它，而不会任由其危害人类社会。 在农业科学方面，可快速培育和扩繁抗病力强、生产性能高的优良动物；可以研究动物的发病机理，寻求新的有效治疗药物。人们利用“克隆”技术培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病虫害的优质高产品种，大大提高了粮食产量。克隆技术对保护物种特别是珍稀、濒危物种来讲是一个福音，具有很大的应用前景。从生物学的角度看，这也是克隆技术最有价值的地方之一。 在当代，医生几乎能在所有人类器官和组织上施行移植手术。但就科学技术而言，器官移植中的排斥反应仍是最为头痛的事。排斥反应的原因是组织不配型导致相容性差。如果把“克隆人”的器官提供给

“原版人”，作器官移植之用，则绝对没有排斥反应之虑，因为二者基因相配，组织也相配。 这对于不孕不育家庭，单亲家庭和同性家庭来说也是个不错的选择。 克隆技术还可用来大量繁殖有价值的基因，例如，在医学方面，人们正是通过“克隆”技术生产出治疗糖尿病的胰岛素、使侏儒症患者重新长高的生长激素和能抗多种病毒感染的干挠素，等名贵药物。 Cloning,the inevitable product of scientific development The arrival of cloning Dolly in February 1997 proved the possibility of parthenogenesis, which was a major event in the biological sciences. As a new techniques, cloning marks the arrival of a new stage of development of human science and technology. And it is also an important technique to explore the mysteries of life for humans, study the law of the occurrence and development of life. Like other technological means mastered by people, cloning should be fully affirmed. In other words, cloning is the inevitable outcome of the scientific development to a certain stage. Sence the first successful experiments in cloning, this technique has caught attentions of people all over the world, Especially in the problem of whether we should clone human beings. Because it also gives rise to a lot of problems in law, morality, ethics and so on. My answer is

治疗性克隆的伦理学限制

治疗性克隆的伦理学限制 2005年11月24日,有韩国“克隆之父”之称的黄禹锡教授在韩国汉城举行新闻发布会,向全世界宣称辞去首尔国际干细胞研究中心主席一职,以及其在韩国政府和社会组织担任的所有职务,并为自己有意向公众隐瞒实验用卵子的来源而恳切道歉。该事件再一次在全世界范围内激起人们对胚胎干细胞研究的伦理学争论。 英国经济和社会研究委员会基因组学经济与社会研究中心的Whittaker撰文(Toxicol Appl Pharmacol 2005, 207: 689-691)分析了目前关于治疗性克隆存在的主要伦理学争论,并建议了一些可能可以避开违背伦理学的干细胞研究方法,其主要观点概括如下,希望能对国内开展干细胞研究带来一些启示。 干细胞与治疗性克隆 关于用干细胞疗法治疗退行性疾病和损伤的可能作用引起了广泛的讨论(He et al., 2003, Kerr et al., 2003, Kim et al., 2002, Rippon and Bishop, 2004 a nd Sylvester and Longaker, 2004)。这些疾病和损伤包括:帕金森病、阿尔茨海默病、心脏病、白血病、糖尿病以及各种自身免疫性疾病和脊髓损伤。 干细胞是一种能够分裂成与自身一致的细胞或几种特殊分化的细胞型的细胞。动物体内干细胞的正常作用是在发育的过程中可提供不同的细胞型,以生长成不同的组织和器官。它们也提供替代细胞以修复身体不同部分的损伤。干细胞疗法就是利用已特殊分化的干细胞,通过特殊的途径提供细胞去替代那些在退行性过程和损伤中失去的细胞。使用未分化干细胞也存在畸胎瘤和其他肿瘤形成的风险(Martin, 1980)。 干细胞可以根据其分化潜能进行分类。就人类干细胞而言,可以分为: ①多能干细胞,可以分化成为人体任何细胞; ②专能干细胞,可以分化成几种类型人体细胞,但不是全部类型人体细胞; ③单能干细胞,只能分化成一种人体细胞。 目前人干细胞的主要来源或者潜在来源如下: ①胚泡,可以提供多能干细胞; ②胎儿组织,可以提供多能或者专能干细胞; ③脐带血,可以提供专能干细胞; ④成人组织,可以提供专能干细胞或者单能干细胞。 干细胞疗法的一个潜在问题是机体对移植干细胞的免疫排斥。有建议说利用现今的治

基因克隆的四大要素(Four Elements for Gene Cloning)

将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，使该基因能在受体细胞内复制、转录、翻译和表达，整个操作称为基因重组技术。要实施该技术必须具备四大要素：工具酶、载体、基因和受体（宿主）细胞。 22楼 一、工具酶： 基因工程的基本技术是人工进行基因的剪切、拼接、组合。基因是一段具有一定功能的DNA分子，要把不同基因的DNA 线形分子片段准确地切出来，需要各种限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）；要把不同片段连接起来，需要DNA 连接酶（DNA ligase）；要合成基因或其中的一个片段，需要DNA 聚合酶（DNA polymerase）等。因此，酶是DNA 重组技术中必不可少的工具，基因工程中所用的酶统称为工具酶。 工具酶就其用途而言可分为三大类：限制性内切酶、连接酶和修饰酶，其中限制性内切酶为一大类酶（达上千种）。基因重组正是利用了这些工具酶对DNA 分子进行一系列的酶催化反应，才得以在体外实现DNA 分子的切割和连接。因此，工具酶的发现为基因操作提供了十分重要的技术基础。首先重点介绍限制性内切酶（restriction endonucleases＝restriction enzyme），其他酶在相关内容中再一一介绍。 从分子生物学发展历史看，核酸限制性内切酶的发现和应用对该学科发展所起的作用是难以估量的。首先使外源基因在大肠杆菌中克隆的实验是在1973 年完成的，Stanley Cohen，Herbert Boyer（见补充资料2.1）正是利用了限制性内切酶这一分子手术刀才得以实现。 核酸限制性内切酶是原核生物中的一类能识别双链DNA 中特定碱基顺序的核酸水解酶。原核生物的限制和修饰系统犹如高等动物的免疫系统，依靠一对识别相同序列的核酸限制性内切酶和甲基化酶活性来对抗外来DNA 的入侵：当自身的基因组在复制完成下轮DNA 复制尚未开始前就被甲基化酶修饰(使某特定序列 甲基化), 避免了被对应的限制性内切酶的识别和水解，而入侵的噬菌体由于未来得及修饰而被破坏，从而保护细菌不受噬菌体的感染。各种细菌都能合成一种或几种顺序专一的核酸内切酶。这些酶的功能就是通过特异性序列的识别后进行DNA 的切割，来限制外源性DNA 侵入自身的细胞内，所以称这种核酸内切酶为限制酶。 根据酶的识别切割序列的特性、催化条件以及是否具有修饰酶的活性而分成三类：I、II、III类： 第I 类限制性内切酶是双功能酶，具有修饰活性（甲基化）和内切酶活性，作用时需要消耗ATP，能识别专一的核苷酸顺序，并在距离识别点大约1000 个核苷酸对处切割DNA 分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没有专一性，是随机的。 第II 类限制性内切酶只具有核酸内切酶活性，能识别专一的具有回文结构的核苷酸顺序，并在该顺序内的固定位置上切割双链，作用时不需要水解ATP 提供能量。 第III 类限制性内切酶也同时具有修饰活性和内切酶活性，具有专一的识别顺序，但不是对称的回文顺序。它在识别顺序旁边24-26 个核苷酸对的固定位置上切割双链，但这几个核苷酸对则是任意的。

克隆的好处_总结(精华版)

《克隆的好处》 阅读精选（1）： 克隆的好处 克隆很大程度上促进了人类科技文化的发展。克隆能为人类作出很大的贡献，它不但能有效地繁殖高附加值的牲畜，挽救珍稀动物，还对研究癌生物学，研究免疫学，研究人的寿命有不可低估的作用。1．克隆技术与遗传育种 在农业方面，人们利用克隆技术培育出超多具有抗旱、抗倒伏、抗病虫害的优质高产品种，大大提高了粮食产量。在这方面中国已迈入世界最先进的前列。 2．克隆技术与濒危生物保护 克隆技术对保护物种个性是珍稀、濒危物种来讲是一个福音，具有很大的应用前景。从生物学的角度看，这也是克隆技术最有价值的地方之一。 3．克隆技术与医学 在当代，医生几乎能在所有人类器官和组织上施行移植手术。但就科学技术而言，器官移植中的排斥反应仍是最为头痛的事。排斥反应的原因是组织不配型导致相容性差。如果把克隆人的器官带给给原版人，作器官移植之用，则绝对没有排斥反应之虑，因为二者基因相配，组织也相配。问题是，利用克隆人作为器官供体合不合乎人道？是否合法？经济是否合算？ 克隆技术还可用来超多繁殖有价值的基因，例如，在医学方面，人们正是透过克隆技术生产出治疗糖尿病的胰岛素、使侏儒症患者重新长高的生长激素和能抗多种病毒感染的干扰素，等等。 4．生长周期短，遗传性状稳定 5克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。 6克隆实验的实施促进了遗传学的发展，为制造能移植于人体的动物器官开辟了前景。 7克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗传疾病，克隆的 胚胎与子宫中发育的胎儿遗传特征完全相同。 8克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生潜力，但干细胞能够 修复神经系统损伤。 9在体外受精手术中，医生常常需要将多个受精卵植入子宫，以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能带给一个卵细胞用于受精。透过克隆能够很好地解决这一问题。这个卵细胞能够克隆成为多个用于受精，从而大大提高妊娠成功率。克隆技术取得突破，给人类带来极大的好处，最大的好处是培养超多品质优良的家畜，丰富人们的物质生活，使畜牧业的成本降低，效率提高，还可带给某些药物原料以提高人类免疫功能等。一是利用克隆等生物技术，改变农作物的基因型，产生超多抗病、抗虫、抗盐碱等的新品种，从而大大提高农作物的产量。二是培育超多品种优良的家畜，如培养一些肉质好的牛、羊和猪等，也能够培养一些产奶量高，且富含人体所需营养元素的奶牛。三是对医疗保健工作产生重大影响，如依靠分子克隆技术，

关于细胞克隆的简述

关于细胞克隆的简述 姓名：付中凯班级：计本1102 学号：20113708 摘要：克隆技术即无性繁殖技术。通常的有性生殖是由雌雄交配，精子和卵子结合发育成胚胎，经妊娠后产出新的个体。克隆技术不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需从动物身上提取一个单细胞，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎植入雌性动物体内，就可孕育出新的个体。这种以单细胞培养出来的克隆动物，具有与单细胞供体完全相同的特征，是单细胞供体的“复制品”。关键词：无性繁殖两面性生物技术 引言：克隆是无性生殖所以它并不是根据基因重组、基因突变、染色体变异等原理。克隆动物就是将已有的动物，以人工无性繁殖的形式通过现代生物技术而创造的“生命”。早在20世纪50年代，人们就已经开始克隆动物研究了。1997年，克隆羊“多莉”的诞生标志着这一技术的重大发展。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“克隆羊”多利和“克隆猴”。克隆技术的成功，被人们称为“历史性的事件，科学的创举”。有人甚至认为，克隆技术可以同当年原子弹的问世相提并论。 克隆技术又称为“生物放大技术”，它经历了三个发展时期：第一个时期是微生物克隆时期，即用一个细菌可以很快复制出成千上万个和它一模一样的细菌，从而变成一个细菌群；第二个时期是生物技术克隆时期，比如用遗传基因一DNA进行克隆；第三个时期是动物克隆时期，即由一个细胞克隆成一个动物。克隆绵羊“多利”就是由一头母羊的体细胞克隆而来，使用的便是动物克隆技术。“自然界的许多动物，在正常情况下都是依靠父方产生的雄性细胞(精子)与母方产生的雌性细胞(卵子)融合(受精)成受精卵(合子)，再由受精卵经过一系列细胞分裂长成胚胎，最终形成新的个体。这种依靠父母双方提供性细胞、并经两性细胞融合产生后代的繁殖方法就叫有性繁殖。但是，如果我们用外科手术将一个胚胎分割成两块、四块、八块……最后通过特殊的方法使一个胚胎长成两个、四个、八个……生物体，这些生物体就是克隆个体。而这两个、四个、八个……个体就叫做无性繁殖系(也叫克隆)。” 1.细胞克隆-无性生殖的神奇 1.1利用供体细胞核与去核卵母细胞的融合形成胚胎，导入动物子宫使其怀孕最终产下幼体。 先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞者基因相同的动物。 1.2提取两个或多个人的基因细胞进行组合形成胚胎,植入受体子宫，最终产出幼体。

生物的生殖和发育

生物的生殖和发育 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT

生物的生殖和发育 第一节、生物的生殖 一、生殖的类型 名词：1、生物的生殖：每种生物都能够产生自己的后代，这就是~。 2、无性生殖：是指不经过生殖细胞的结合，由母体直接产生出新个体的生殖方式。易保持亲代的性状。 3、有性生殖：是指经过两性生殖细胞(也叫配子)的结合，产生合子，由合子发育成新个体的生殖方式。这是生物界中普遍存在的生殖方式，具有双亲的遗传性，有更强的生活力和变异性。 4、分裂生殖(单细胞生物特有)：是生物体由一个母体分裂成两个子体的生殖方式。如变形虫、细菌、草履虫。 5、出芽生殖：母体→芽体→新个体，如水螅、酵母菌。 6、孢子生殖：母体→孢子→新个体，如青霉、曲霉。 7、营养生殖：植物的营养器官(根、茎、叶)发育为新个体，如马铃薯块茎、草莓的匍匐茎，秋海棠等。

8、嫁接：一种用植物体上的芽或枝，接到另一种有根系的植物体上，使接在一起的两部分长成一个完整的新植物体的方法。 9、植物组织培养技术：外植体(离体组织或器官)→消毒→接种→愈伤组织(组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞)→组织器官→完整植株。 10、配子生殖：由亲体产生的有性生殖细胞——配子，两两相配成对，互相结合，成为合子，再由合子发育成新个体的生殖方式，叫做～。 11、卵式生殖：卵细胞与精子结合的生殖方式叫做～。凡是种子植物用种子进行繁殖时，都属予卵式生殖。 12、受精作用：精子与卵细胞结合成为合子的过程，叫做～。 13、花粉管：是萌发的花粉粒内壁突出，从萌发孔伸出而形成的管状结构。主要作用是将其携带的精子和其他内容物运至卵器或卵细胞内，以利于受精作用。 14、双受精：一个精子与卵细胞结合成为合子，又叫受精卵(染色体为2N);另一个精子与两个极核结合成为受精极核(染色体为3N)，这种被子植物特有的受精现象叫做双受精。

病毒感染细胞实验整体流程及原理

病毒感染细胞实验整体流程及原理 目的基因不能直接整合到大多数真核细胞，常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。 1、病毒的种类 病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒 1.1慢病毒 1.1.1原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。 1.1.2特点 1）直接包装成为假病毒颗粒，对分裂和非分裂细胞均有感染作用，适合RNAi 研究和体内实验中难于转染的细胞(比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。 2）可以通过简单方式，在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。 3）可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。 4）无需任何转染试剂，操作简便。 5）可以根据客户需要制备多种标记。 1.1.3慢病毒包装简要流程： 1）含有目的基因的慢病毒RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。 2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3）培养48hrs - 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。 4）病毒的纯化和浓缩。 5）分装、- 80 ℃保存。 6）滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。 1.2、腺病毒 1.2.1原理 腺病毒(Adenovirus，Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型，大多数Ad载体都是基于血清型2和5，通过转基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制，因此是一种适用于治疗的高效控制系统。 1.2.2特点 1）几乎可以感染所有类型的细胞 2）可以获得复制缺陷型(E1 和E3 缺失) 的腺病毒 3）病毒滴度高，产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL，能有效的进行增殖。4）腺病毒载体感染宿主的范围比较广，制备容易，操作简单.

治疗性克隆面临的机遇与挑战(一)

治疗性克隆面临的机遇与挑战(一) 【关键词】治疗性克隆 【关键词】治疗性克隆；细胞核;移植；胚胎干细胞 1治疗性克隆概述 治疗性克隆（therapeuticcloning）是体细胞核移植技术和最新的人胚胎干细胞技术结合的产物，将成为人类医疗历史上革命性的技术.该技术首先应用患者体细胞，如皮肤细胞、骨髓间充质干细胞，作为核供体，移植入去核的人卵母细胞，获得克隆胚胎；然后从克隆胚胎分离建立胚胎干细胞系；并将这些胚胎干细胞在一定条件下，诱导分化成所需要的各种类型的细胞用于治疗目的〔1,2〕.目前已报道，将产生多巴胺的神经元细胞用于治疗帕金森症〔3〕，将产生胰岛素的胰岛细胞治疗糖尿病患者〔4〕.从理论上来说由于使用的是患者自身的细胞生产出来的治疗用细胞，移植这些细胞到患者体内将不会产生免疫排斥反应.另一方面，每年都有数以百万计的患者需要细胞、组织的修复或者器官移植，由于胚胎干细胞可以无限传代，在数量上可以保证治疗的需要，从而解决可供移植的细胞、组织和器官来源严重不足的瓶颈问题〔5〕，为人类健康和长寿提供了新的希望. 近年来，利用核移植技术和胚胎干细胞技术相继建立了人核移植胚胎干（nucleartransferembryonicstemcell，ntES）细胞系和人兔异种间ntES细胞.这2项阶段性研究成果的取得，标志着治疗性克隆研究的巨大进步.韩国科学家Hwang等〔6〕通过核移植技术获得了人人ntES细胞.他们以健康女性志愿者的体细胞为核供体，以其自身卵母细胞为受体.在30枚核移植囊胚中，得到20个内细胞团（ICMs），建成1株人ntES细胞系，可传代培养70代以上.上海第二医科大学盛惠珍研究小组〔7〕在国际上首次构建了人兔核移植重构胚.分别将5，42，52和60岁4个年龄组的人皮肤成纤维细胞核移入去核兔卵母细胞内，获得ntES细胞，通过原位杂交、免疫组化、核型和同源基因分析等证实ntES细胞具有人源性，并且保持干细胞的未分化特性，能形成类胚体，在一定诱导条件下可以分化为神经、肌肉等3个胚层的细胞群.200506，汉城国立大学的研究者〔8〕以患者的皮肤细胞为供体，以志愿者捐赠的卵母细胞为受体，利用体细胞核移植技术成功建立11株人核移植胚胎干细胞，这些细胞具有多能性，染色体正常，与供核患者的DNA一致、组织相容性抗原一致. 2治疗性克隆的应用前景 ES细胞在生物医学的各个领域均有广阔的应用前景，ntES细胞也有着同样广阔的前景，为临床治疗学、细胞生物学、生物发育学、比较动物学等研究提供研究材料和方法. 2.1临床疾病的治疗ntES细胞与普通的细胞移植治疗相比，具有革命性的进步.它以患者的体细胞为核供体，通过核移植技术获得的ntES细胞，与患者的遗传物质相同，可以消除受体对供体的免疫排斥反应，为目前多种退形性疾病，如心脏病、脊髓损伤、帕金森病、1型糖尿病等的治疗带来了新的希望.特别是一些目前还没有找出致病基因的遗传病，如脊髓侧索硬化症，ntES细胞移植是最有希望的治疗方法.目前已经应用ntES细胞在体内外分化成多种细胞，包括神经细胞和生殖细胞〔9,10〕.尤其Barberi等〔9〕建立了一套方法，能使ntES 细胞向中枢神经系统细胞特定分化，能产生高效率的神经胶质细胞、寡突细胞、神经元细胞，包括多巴胺能神经元、γ氨基丁酸能神经元等，将分化的多巴胺能神经元移植到Parkinson 病模型后，能改善其症状.细胞治疗的途径有两种：其一，ntES细胞定向分化后移植.细胞扩增后，体外定向分化，对分化细胞进行纯化，将获得的目的细胞移植到病变部位，替代丧失功能的部分细胞；其二，ntES细胞原位移植.与定向分化后相比，ntES细胞原位移植有以下缺点：①没有经过纯化，可能将污染的异源饲养层细胞带进移植部位；②ntES细胞没有转入经选择基因，无法控制植入细胞的命运，可能发生癌变；③ntES细胞分化成分复杂，目的细胞分化成分少，可能出现大量非必须细胞的分化. 2.2细胞生物学通过研究ntES细胞的体外分化特性，可以识别某些靶基因，对人类新基因的

人类的生殖(含答案)

人类的生殖（含答案) 未命名 一、单选题 1．胎儿与母体交换物质的器官是（） A．胎盘B．脐带C．子宫D．羊水 【答案】A 【解析】 【分析】 生殖细胞包括睾丸产生的精子和卵巢产生的卵细胞，含精子的精液进入阴道后，精子缓慢地通过子宫，在输卵管内与卵细胞相遇，有一个精子进入卵细胞，与卵细胞相融合，形成受精卵；受精卵不断进行分裂，逐渐发育成胚泡；胚泡缓慢地移动到子宫中，最终植入子宫内膜，这是怀孕；胚泡中的细胞继续分裂和分化，形成组织，并进一步形成器官，逐渐发育成胚胎，并于怀孕后8周左右发育成胎儿，胎儿已具备人的形态；胎儿生活在子宫内半透明的羊水中，通过胎盘、脐带与母体进行物质交换．怀孕到40周左右，胎儿发育成熟，成熟的胎儿和胎盘一起从母体的阴道排出，即分娩。 【详解】 胎儿生活在子宫内半透明液体羊水中，通过脐带、胎盘从母体获取所需营养物质和氧，并排出二氧化碳等废物。所以胎儿与母体进行物质交换的器官是胎盘。故选A。 【点睛】 本题主要考查胚胎的发育过程。解题关键是正确理解胎儿与母体进行物质交换的器官是胎盘。 2．人的精子与卵细胞结合成受精卵和胚胎发育的部位分别是 A．输卵管、子宫B．卵巢、子宫C．子宫、子宫D．输卵管、输卵管 【答案】A 【解析】 【分析】 人类受精的过程及胚胎发育过程如图：

【详解】 受精的过程是精子进入阴道，缓缓通过子宫，在输卵管内与卵细胞相遇，精子与卵细胞结合形成受精卵，所以受精卵的形成部位在输卵管。此后受精卵不断运动和分裂，最终植入子宫内壁上，怀孕开始。怀孕后胚胎继续发育，其中的细胞开始分化成各种组织，由组织再形成各种器官、系统，逐渐发育成胚胎。胚胎在母体内大约经过40周，即280天，发育成熟后从阴道产出，这个过程叫分娩，分娩的结束标志着婴儿的诞生。可见胚胎发育的初期在输卵管，当着床后到分娩前的一段时间是在母体的子宫内，胚胎（胎儿）（母体怀孕第8周--第40周）发育的场所主要是子宫。故选A。 【点睛】 解答此类题目的关键是熟记受精过程、胚胎发育过程。 3．人体内最大的细胞是（） A．卵细胞B．神经细胞C．精子D．红细胞 【答案】A 【解析】 【分析】 人体内最大的细胞是卵细胞，其直径约0.2毫米，几乎用肉眼就可以看出。 【详解】 卵细胞是由卵巢产生的一种生殖细胞，卵细胞体积较大，呈球形，其直径约200微米，即0.2毫米（1微米=1/1000毫米）．可以从储存一定的养分，以供受精卵初期发育的需要。因此人体内最大的细胞是卵细胞，几乎用肉眼就可以看出。 【点睛】 因为受精卵早期发育的营养主要由卵细胞提供，所以卵细胞个体很大。 4．人们可以采取嫁接的方法让一株苹果树结出多个品种的果实，这种生殖方式与哪项生殖方式相似（） A．人工孵化小鸡B．试管婴儿的诞生 C．大豆植物开花结果D．水螅的出芽生殖 【答案】D 【解析】

克隆人的伦理问题

克隆技术的伦理争论 随着克隆技术的出现，一场科学界和全社会的大争论随之而来。一方面，这项技术可能会给人类社会带来灾难性的后果，不少人强烈反对；而另一方面，又由于其可能会给人类生活带来美好的前景，故寄予了无限的期望。 克隆这个词出现于20世纪初，由韦伯所创，其含义指由单个祖先个体经过无性繁殖而产生的其他个体。随之，1952年克隆蝌蚪；1972年基因复制；1997年克隆羊多莉诞生；1998年克隆批量化，美国科学家克隆出50多只老鼠，日本人克隆出8只小牛；2000年，人类的近亲-猴子被克隆［1］；2001年1月，英国成为全球第一个有效地使克隆人类胚胎合法化的国家，但只允许进行治疗性克隆。同年8月19日，美国科学家扎沃斯和意大利医生安蒂诺里宣布将在1～2年克隆出人类胚胎，并将为200名妇女植入克隆胚胎；11月25 日，美国Advanced Cell Technology公司宣布已经用克隆技术培育出人类早期胚胎，这也是复制人类的第一步。尽管ACT 公司表示其目的不是为了克隆人，而是为了获得能够用于治疗各种疾病的干细胞，但还是引起了广泛的震惊。许多关于克隆人的报道总是将治疗性克隆和生殖性克隆混为一谈。关于克隆技术的争论，多数人认为治疗性克隆很有价值，将给人们带来治疗疾病、移植器官、防止衰老、延长有质量生命的现实希望。而对于是否应当开展“克隆人”的实验问题，大多数人持慎重或反对立场。 一、治疗性克隆的伦理问题 克隆的目的不同则关于克隆的伦理判断就不同。就如把克隆作为治疗疾病的手段和把克隆作为“器官工厂”的生产方式，两者之间就存在极大的差别。治疗性克隆为治疗许多目前不能治愈的疾病带来了可治愈的可能性，让人们可以拥有无尽的想象，但是，如何应用，则存在一条不清楚的界线。 治疗性克隆的目的之一，就是通过胚胎干细胞诱导分化出所需要的细胞、组织或器官，解决器官移植过程中的排斥问题，克隆自体组织的移植不会受到免疫系统的排斥。在这里，有一个关键问题，到底，人类胚胎的伦理地位是怎样的？从这个思路出发，难免会有科学家会有如下的假设：如果能够通过抑制相关基因而表达制造出“无头人”，将其器官用于移植，是不是可以被接受呢？因为大脑是思维和意识的器官，所以“无头人”不是人，为了治愈人的各种疾病，我们可以制造出这样的变异体，并且最终将其毁灭。也就是为了毁灭一个胚胎而制造一个胚胎。有意抑制相关的基因表达，使胚胎不能够发育成人，其目的就是克隆出胚胎去满足他人的需要，而丝毫不考虑克隆出的胚胎的利益。这里，就存在一个“道德滑坡”的问题。英国学者苏珊·吉布森有过关于人工流产中胎儿道德地位的论证。她指出，胎儿本体论地位和道德地位的独特性在于，胎儿只存在于和一个特定的他人的关系之中，它完全依赖他人的供养。正由于这种关系，胎儿在道德上具有重要意义，因为它存在于产生我们的道德义务的种种关系之外。然而，由于胎儿拥有的唯一直接关系就是和它生长发育于其中的妇女之间的关系，因此一个胎儿的具体地位会根据孕育它的妇女赋予它的价值而不同。胎儿没有绝对的价值，因为它们没有独立于这一关系之外存在。它们的价值不是系于一个人(person)的那种价值，而是系于一种人类关系的价值。因为不可能有对系于人类关系的绝对价值的抽象论述，只有系于特定关系的绝对价值的抽象论述，所以不可能有对胎儿绝对价值的抽象论述。我们再回到治疗性克隆，治疗性克隆治疗的群体范围应该是哪些？存在基因缺陷的人通过治疗性克隆获取与其具有相同遗传密码的组织或器官，可以解决组织排异以及器官、组织短缺的问题，并且人体的全部器官都会在需要时随时获得，就像随时以备不时之需的一整套工具一样。把克隆作为“器官工厂”的制造手段，把人体器官作为随时备用的器具，这样是合理的吗?因此，相应的受益群体应该被规定，在贫富差距日益增大的今天，就许多高新技术来说，富人受益，而穷人靠边，已经是很常见的状况了。

生殖性克隆的观点

目前克隆人类胚胎分三类： 一、治疗性克隆，以治疗人类疾病为目的，用胚胎多能干细胞来克隆特定细胞、组织乃至器官以修复病人的组织或器官。 二、研究性克隆，以研究人类胚胎发育及其中的基因调控过程为目的。 三、生殖性克隆，以复制人为目的。指从一个人甲的身上提取体细胞，将该细胞的细胞核植入另一个人乙的细胞核已被取出的卵细胞内，并通过电击刺激产生细胞融合，然后将这样制成的胚胎植入代孕母亲丙的子宫长大。从本质上讲，生殖性克隆是一种无性繁殖技术，这种技术从根本上改变了人类两性繁殖的本质。 三者使用同一种核转移技术,只是目的不同。 （一）支持观点 克隆人的研究有利于人类的发展： 1、有利于人类优质发展。（可在人类基因库中有目的选择利用组合优势基因，筛选淘汰劣势基因。） 2、促进科学的进步和发展。（认识、掌握人类遗传和发育全过程，促进人体科学、生物医学发展。） 3、满足复活故人的愿望。 4、让单身男女能拥有后代。（人类有权处理自身的DNA，每个公民有权决定何时、以何种方案来复制它） 5、可以复制天才（科学家、艺术家、世界冠军等） （二）不支持观点 目前各国对生殖性克隆以不支持观点为多，并以法律形式加以严格限定。 2001 年 7 月 31 日，在布什的敦促下，美国国会众议院以 265票赞成、162票反对的投票结果通过了全面禁止克隆人研究的《韦尔登法案》，规定进行克隆人尝试或者利用克隆胚胎进行研究者，将被处以至少 100 万美元的罚款和多达 10 年的监禁。 对于生殖性克隆人，我国法学界目前对于认为生殖性克隆人是犯罪行为的观点目前还很少见。我国在国际上提出了“不赞成、不支持、不允许、不接受”的“四不”政策，落实到具体行动上只是由卫生部和科技部颁发了一部技术规范和两部伦理指导原则，《人类辅助生殖技术规范》、人胚胎干细胞研究伦理指导原则》明确规定可以通过治疗性克隆来获得用于研究的人胚胎干细胞，但这些规范和原则都还没有上升到法律的高度。相比起国际上许多国家已经采取立法的形式来处理治疗性克隆和生殖性克隆人来明显滞后；我国政府的态度是明显的，那就是禁止生殖性克隆人（“四不”政策中的“不允许”明确透露出禁止的意思），但并没有相应的措施来保障这一政策的实施。 本组亦不支持生殖性克隆的开展，究其原因如下： 1、对性伦理的影响 （1）生殖性克隆可能引起性关系混乱 （2）生殖性克隆将强化性行为的去生殖化趋势 （3）生殖性克隆可能导致部分人性比例失衡 （4）生殖性克隆对同性恋的可能影响 （5）生殖性克隆对性审美的可能影响 （6）生殖性克隆可能加速卵子的商品化

病毒感染细胞实验整体流程及原理知识讲解

病毒感染细胞实验整体流程及原理 杨晓芳于2011年5月11日整理目的基因不能直接整合到大多数真核细胞，常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。 1、病毒的种类 病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒 1.1慢病毒 1.1.1原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。 1.1.2特点 1）直接包装成为假病毒颗粒，对分裂和非分裂细胞均有感染作用，适合RNAi 研究和体内实验中难于转染的细胞(比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。 2）可以通过简单方式，在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。 3）可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。 4）无需任何转染试剂，操作简便。 5）可以根据客户需要制备多种标记。 1.1.3慢病毒包装简要流程： 1）含有目的基因的慢病毒RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。 2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3）培养48hrs - 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。 4）病毒的纯化和浓缩。 5）分装、- 80 ℃保存。 6）滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。 1.2、腺病毒

1.2.1原理 腺病毒(Adenovirus，Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型，大多数Ad载体都是基于血清型2和5，通过转基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制，因此是一种适用于治疗的高效控制系统。 1.2.2特点 1）几乎可以感染所有类型的细胞 2）可以获得复制缺陷型(E1 和E3 缺失) 的腺病毒 3）病毒滴度高，产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL，能有效的进行增殖。 4）腺病毒载体感染宿主的范围比较广，制备容易，操作简单. 5）感染细胞时，不整合到染色体中，不存在激活致癌基因或插入突变等危险，生物安全性高。 1.2.3腺病毒包装简要流程 1）构建表达siRNA/miRNA 的腺病毒载体 2）采用PacI 消化纯化的质粒。 3）消化好的腺病毒表达载体转染293A 细胞，收获细胞以制备病毒粗提液。 4）将病毒粗提液感染293A 细胞以扩增病毒。 5）分装，-80℃保存。 1.3、慢病毒和腺病毒的比较

第六章 动物和人的生殖与发育背记

第六章动物和人的生殖与发育 第一节动物的生殖与发育 1.个体生长发育到一定阶段后，能够产生与自己相似的子代个体，叫生殖。 2.生殖是生物体亲代向子代传递遗传信息的过程，是生物的基本特征之一。 3.有性生殖是动物最普遍的生殖方式。 4.高等动物的生殖都是有性生殖。进行有性生殖的动物必须具有生殖系统。 5.生殖系统一般由生殖腺、生殖导管和附腺组成。 6.从结构上看生殖系统的演化过程是由不完善到完善，由雌雄同体到雌雄异体。 7.动物的有性生殖有卵生和胎生两种类型，此外有些动物的生殖方式是卵胎生的。 8.卵生是指动物的受精卵在母体外发育，孵化为新个体的生殖方式。大多数昆虫、鱼、蛙、蛇、鸟类生殖方式都是卵生。 9.胎生是指动物的受精卵在体内发育，受精卵发育的营养主要是从母体获得的生殖方式；绝大多数的哺乳动物生殖方式都是胎生。 10.胎生的优点是：为胚胎提供良好的营养和温度恒定的发育条件，以及良好的结构保护。胎生、哺乳大大提高了幼体的成活率。 11.卵胎生是指受精卵在母体内发育，母体产出的是胎儿，但受精卵发育的营养不是从母体获得的，而是来自受精卵的卵黄。田螺和某些昆虫、鱼、蛇、蜥蜴的生殖方式是卵胎生的。 12.鸭嘴兽是现存最原始的哺乳动物之一；有许多结构与爬行动物相似，生殖方式是卵生，雌兽也能哺乳，但没有乳头；是爬行动物与哺乳动物的过渡类型。是证明哺乳动物起源于古代爬行动物的活化石。 13.受精是精子和卵子结合的过程；动物的受精分为体内受精和体外受精。 14.不需亲体参与，精子和卵子即可受精，叫体外受精；许多水生无脊椎动物、鱼类和两栖类受精方式是体外受精。 15.精子和卵子在母体内结合成受精卵，叫做体内受精；陆生脊椎动物（爬行类、鸟类、哺乳类）及小部分鱼类的受精方式是体内受精。 16.体内受精要有交配行为，需要复杂精致的生殖系统，包括交配器官。 17.高等动物的个体发育是从受精卵进行细胞分裂开始，直至器官系统形成和性成熟的整个发育过程。 18.个体发育分为胚胎发育和胚后发育两个阶段。 19.从受精卵发育开始到幼体脱离卵膜或母体的发育时期，称为胚胎发育阶段。 20.卵内卵黄含量较少的胚胎发育时间就较短，卵黄含量特别多或在胚胎发育过程中能直接从母体获得营养的，则胚胎发育时间就相应加长。 21.受精卵发育成幼虫或幼体后，从脱离卵膜或母体开始到性成熟为止，称为胚后发育。 22.胚后发育分为无变态发育（直接发育）和变态发育（间接发育）（蛙、蟾蜍、多数昆虫）。 23.昆虫的的变态发育分为完全变态（蚊子、蜂、蚕）和不完全变态（蜚蠊、蝉、蝗虫）两种类型。 24.经过受精卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段的变态发育叫做完全变态。 25.经过受精卵、幼虫和成虫三个阶段的变态发育叫做不完全变态。它和完全变态发育相比没有明显的蛹期。 26.人工遗传操作的动物无性繁殖过程叫做克隆。 27.科学家反对克隆人实验。克隆羊“多利”像B绵羊（提供细胞核的绵羊）。 第二节人的生殖与发育

第一章-生殖及生殖生物学

第一章生殖及生殖生物学 “天地之大德曰生”。生命永远是宇宙中最宝贵的，生命具有无可争辩的意义，是第一本位的。“种”的繁衍生殖自然就具有无与伦比的重要意义。生命的承传、沿袭是人类赖以永恒存在的源泉。宇宙中的一切事物，因为有了生命的存在才显示了自身的价值和意义。每个有生命的个体总会以某种方式繁衍与自己性状相似的后代以延续生命，这就是生殖（reproduction）。从生理学的角度来看，生殖是一切生物体的基本特征之一，一个个体可以没有生殖而生存，但一个物种的延续则必需依赖于生殖。 生物通过生殖实现亲代与后代个体之间生命的延续。尽管遗传信息决定了后代延承亲代的特征，但遗传是通过生殖而实现的。亲代遗传信息在传递过程中会发生变化，从而使物种在维持稳定的基础上不断进化成为可能。生命的延续本质上是遗传信息的传递。在生物代代繁衍的过程中，遗传和变异与环境的选择相互作用，导致生物的进化。因此，生殖过程本身除了是生物由一代延续到下一代的重要生命现象外，与遗传、进化，甚至生命起源的问题紧密相关。 一、生殖现象的研究历史 Macedonian Aristotle（公元前384-322）是最早系统从事动物生殖与发育方面研究的学者，首先提出了胚胎是由简单到复杂逐渐形成的观点。1683年Antoni van Leeuwenhoek首次在精液中发现了精子，并提出“精源说”，认为在精子中存在人的雏形，发育只是这个雏形的放大而已。以后Marcello Malpighi（1628-1694）和Jan Swamerdam （1637-1680）等又提出了“卵源说”，认为在卵子中存在一个人的雏形。此后，Charles Bonnet（1720-1793）在蚜虫中首次发现了孤雌生殖现象。 Lazzaro Spallanzani（1729-1799）首次成功地进行了青蛙的人工授精，并发现在缺乏精子穿入时，则卵子发生退化。在进行狗的实验时，他提出只有当卵子和精液共同存在时，才能产生一个新的个体。Caspar Friedrich Wolff（1738-1794）观察到，从受精卵的卵黄中形成了有形态结构的胚胎。Carl Ernst von Baer（1792-1876）对几种哺乳动物的卵子进行了比较研究。以后，Ernst haeckel（1834-1919）提出了个体发育是系统发育简要重演的观点。 Oscar Hertwig（1849-1922）和Richard Hertwig（1850-1937）兄弟在Otto Butschli 的研究基础上，进一步对受精现象进行了研究，提出受精的本质是雌雄配子细胞核的融