Gateway NV44拆机

Gateway NV44拆机

原因：上午开机一小时，CPU温度达到70度，然后就自动关机，当然，气温也一度飙到37度。散热风扇严重不给力！

目的：清楚电脑内部灰尘，解决散热问题。

工具：常用手机电脑螺丝刀一套（电脑维修地方有售，10元左右）、矿泉水瓶盖3~4个，清洁套装（买电脑一般会送）。

准备工作：

最好将一叠报纸放在桌面上，防止划伤笔记本表面，这里选用的是《电脑报》，因为一份比较厚。

建议用自来水洗一下手，据说是防止静电。

拆机开始：

将笔记本的底部向上

拆开所有的螺丝，外壳的螺丝放在一个事先准备好的矿泉水瓶盖子里，防止丢失和混乱。一般也混乱不了，螺丝只有两三种，基本差不多。

然后将笔记本正面朝上。

拆开快捷键面板，因为在这下面还有几颗螺丝。

这里不是很好拆卸，需要用平口螺丝刀轻轻的撬动，用力不要过大防止划伤外壳，一般很容易拆卸下来。

这个时候不要直接拿下来，因为还有排线。

然后就是拆卸键盘，扣住键盘中间，往上去，尽量完成弓形，比较容易取出。

这个时候也不要直接拿下来，因为，还是有排线。

下面就是将排线拆下来了。

将黑色卡扣拉上来，就可以轻易的将排线抽出来，注意不要用力拉扯，排线坏了就麻烦了。

然后就是拆下主板了，螺丝比较多，但不是都需要拆下来，需要拆的螺丝旁边都有小箭头标示的。

一般来说，对于Gateway NV系列的笔记本来说，风扇是比较不好拆的，因为风扇在最下面，而且底部即使拆开了也不会看到风扇，所以要拆开键盘和位于键盘下面的主板了。

320GB 日立（Hitachi）硬盘

金士顿2GB 内存条

建兴DVD RW刻录光驱

键盘

Intel T4400 中央处理器

最后就是拆下主板了，如下：

风扇在背面：

注意铜管上面的螺丝钉，都有标号1234，拆下来即可。

本来以为积累了一年后会有非常多的灰，没想到，和预料的一样…

用清洁套装里面的毛刷刷掉灰尘，用软布沾清洁剂清洗风扇。

然后清洗一下主板上面的灰尘，把指纹也要清除掉。

将主板的螺丝拧好后，开始将触控板、快捷键面板、键盘的排线安装好，将排线插入线卡中，按下卡扣即可。

将快捷键面板装上，拧紧螺丝。

然后就是键盘，用力按下即可扣上。

最后就是背部的螺丝，依样拧紧。

然后将内存、硬盘、光驱安装好。

最后全部是拧螺丝了，没什么技术好讲。

通上电源，开机：

拆机前，风扇噪音比较大，半小时后就严重发热，双手在键盘上打字都会感觉到散发的热量。现在，几乎听不到任何噪音，风扇出口的风也不热，键盘表面也感觉不到温度，用鲁大师测

式，硬盘和CPU温度都在37度左右（现在是夏天）。

整体非常好。赞！

晚上吃饭，华夏医院免费发鼠标垫，当然鼠标垫上面印有广告。拿回来感觉比自己花5元钱买的鼠标垫还好…很给力。

拆除工程协议书

拆除工程协议书 发包人：北京市长丰源房屋拆除有限责任公司 承包人：身份证号： 为一进步加强企业部管理工作、使施工现场有一个正常的生产、经营、安全管理的工作秩序，确保进场各单位各项工作有人抓，分项工作有人管，责任到人落到实处，本着“谁主管、谁负责，谁使用、谁负责，谁管理、谁负责的基本原则”，根据《中华人民国合同法》、《中华人民国建筑法》及《北京市房屋拆迁现场管理办法》及其他有关法律法规，遵循平等自愿、公正和诚实手心的原则，双协商一致，订立本合同。 第一条工程概况及承包工作容 1、工程名称：西黄城根工地 2、工程概况：本次拆除工程为西黄城根正式房屋及附属违章建筑。 3、工作容：房屋拆除及旧物回收。 第二条作业人员 承包人根据工程需要，合理安排参施人员，保证工程顺利进行。 第三条合同工期 根据拆迁指挥部的通知进场施工，并随拆迁进度拆除施工。 第四条合同价款 1、合同拆除围：以发包人给的拆房单为准。 2、合同价款为：拆除建筑物残值由承包人收回，承包人向发包人交纳建筑物残值8 元 /㎡，暂估拆除面积为3000 ㎡；拆除面积格按照拆房单面积计算（面积为暂估面积），最后结算以实际拆除房屋面积计算。

3、本合同价款的确定：经过招投标确定，由承、发包双协商一致确认。 4、本合同价款为固定单价，在约定的风险围合同价款不再调整。 5、施工现场如发生搭设围挡、配合洒水车降尘等零星用工，发包不再支付费用。 6、因不可抗力及拆迁进度等原因造成的停、窝工发包人不承担任经济补偿。 第五条合同价款的结算和付款 1、根据拆迁单位下发拆除通知单，由发包人现场负责人共同确定拆除面积，并由双共同确 认，以此作为拆除面积的结算依据。 2、承包人根据发包人下达的施工任务书或现场负责人的指令，安排作业人员完成作业容， 并取得有效的书面完工签证单据。 3、合同价款的结算支付：协议签订后，一次性交齐。 4、拆除工程结束后，承包人向发包人递交完整的拆除资料，发包人在收到决算资料后，给 予确认并办理决算手续。 第六条安全施工、重大伤亡及其他安全事故处理 1、安全施工：发包人、承包人必须贯彻、执行和政府、行业主管部门颁布实施的有关安全 生产的法律法规及各项规定，格按安全标准组织施工。 2、发生重大伤亡及其他安全事故，承、发包双应采取紧急措施防止事态扩大并全力组织抢 救伤者，保护事故现场，如因抢救伤者必须移动现场设备，须作出书面记录或拍照。3、承包人对拆除围的安全问题负责，并承担所有经济责任，协议签订后承包人向发包人一 次性交纳安全保证金人民币10万元，如有安全问题发生，发包人可以先用此资金，救助伤者及采取安全措施，无需承包人认可。如无安全问题发生完工后一次性退出承包人。第七条文明环保措施 1、发包人、承包人应格执行北京市人民政府颁发的“北京市拆除施工现场管理暂行规定”，

Gateway克隆技术,简单易操作

Gateway克隆技术，简单易操作 在过去数十年，用限制性内切酶产生黏性末端，在DNA连接酶的作用下，连接两个甚至更多片段的克隆方法，是载体构建的经典方案。但是现如今我们再提到克隆的时候，远远不再只有传统的限制酶克隆一种选择。其中Gateway克隆技术作为一种可以快速、高效将DNA 序列转移到载体上的克隆方法已经流行开来。不要觉得Gateway克隆技术高深莫测，其实了解一下你就能懂。 Gateway克隆方法是λ噬菌体感染细菌时发生的整合和切割重组反应的体外形式。在体内，噬菌体（attP）和细菌（attB）的附着位点发生重组反应，噬菌体整合到细菌基因组中，两侧为两个新的重组位点（attL-left-和attR-right-）。在某些条件下，attL和attR位点可以重组，导致噬菌体从细菌染色体上切除并重新生成attP和attB位点。 即Gateway技术依赖于下面描述的两个反应：BP反应和LR反应，通过BP反应获得入门克隆(有时候我们也说中间克隆)，再通过LR反应将目的DNA以正确的方向连接到各种目的载体上，形成不同的表达载体。GeneCopoeia的EZShuttle?重组克隆体系应用E.coli 和λ噬菌体特异位点的重组酶促体系使DNA片段在载体间相互转换，其原理与Gateway 克隆技术相同。 BP反应-构建入门载体： 通过PCR将attB位点添加到目的DAN序列两侧，形成attB-PCR产物。用attB-PCR产物或者含attB位点的供体质粒和含attP位点的质粒发生重组生成入门克隆。EZRecombinase BP混合物，货号：RCBM-1002-020

LR反应-构建表达载体： 制作表达载体时，选择适合的目标载体非常重要。这种选择取决于许多因素，如宿主类型，所需的表达水平和实验目的。选定的attR表达载体与attL-入门载体重组以产生表达载体。EZRecombinase LR混合液，货号：RCBM-1001-020

基于Gateway技术的表达载体构建

基于Gateway技术的表达载体构建 1. Gateway-T载体（pGWC）的酶切反应 pGWC除具有传统T载体的克隆功能外，还可以作为入门克隆（Entry Clone）与Gateway 重组克隆技术兼容。该载体中的ccdB基因编码一个能够使大多数E. coli致死的毒蛋白，可作为重组子的负选标记取代了蓝白斑筛选。 该载体在使用前，需经过AhdI（实验中采用其同裂酶Eam1105 I）酶切，使载体两端产生5’T，用与PCR产物的两端的3’A互补。PCR产物回收后与pGWC载体连接，挑取正向克隆送测序。 pGWC载体的酶切反应体系如下： pGWC 10 μl（约2μg） 10×Eam1105 I Buffer 5 μl Eam1105 I 2 μl ddH2O 34 μl 共计 50 μl 将反应混和液于37℃温育6h。取1μl酶切反应液走1%琼脂糖凝胶电泳检测酶切效果，估测载体片段的浓度，该酶切反应液可直接用作连接无需纯化。 2. PCR产物的回收与连接反应 PCR产物用琼脂糖凝胶回收试剂盒（北京天根生化科技有限公司）进行回收，与pGWC载体进行连接。 DNA片段与pGWC-T的连接： pGWC-T 1μl（约50ng） DNA回收片段 4μl（600bp片段约需40ng） Solution I （TaKaRa） 5μl 共计 10μl 反应混合液于4℃下连接过夜（约12~16h）。 3. 连接产物的转化 取大肠杆菌DH5α感受态细胞（50μl/管）于冰上融化，加入5μl连接产物，用移液器轻轻吸打混匀，在冰上放置30min，42℃水浴热激90s，冰上放置5min，加入无抗生素的LB培养基300μl，37℃，160rpm振荡培养45min，将菌液铺在氯霉素抗性（25mg/L）LB平板上，在超净台吹干后37℃倒置培养过夜。 4. LR反应与表达载体构建 表达载体均采用Gateway重组克隆技术构建，目标基因连入pGWC后即为入门克隆（Entry

房屋装修拆除合同范本

房屋装修拆除合同 篇一：装修拆除合同 装修拆除合同 委托方：（甲方） 受托方：（乙方） 一、甲、乙双方在自愿公平、互惠互利的基础上，就甲方南二环店装修工程前的室内拆除事宜，经双方友好协商、签订合同。 1、工程名称：室内拆除工程。 2、承包范围：甲方委托乙方对室内甲方所指定的拆除项目进行安全拆除工作及产生垃圾的清运工作。 3、工期为天 4、工程造价为元人民币（含正式税票）。 二、乙方责任： 1、听从甲方的一切合理安排，拆除达到甲方满意为止； 2、及时将拆除过程中所产生的垃圾收集并清运； 3、施工过程中，乙方应当遵守施工安全操作规程，负责施工现场的安全管理，避免甲方房屋和其它财产的损失； 4、施工中严格执行施工规范、质量标准、安全操作规程、防火规定，安全、保质、按期完成本合同约定的工程内容；

5、未经甲方允许不准将与施工人员无关的其他任何人员带入施工现场。 三、付款方式：室内装修拆除完毕、垃圾清理完毕，工程完工验收合格后，甲方一次付清拆除款，乙方开具正式税票。 四、安全：为进一步贯彻落实“安全第一、预防为主”的安全生产方针，严格执行劳动保护和安全生产的法令、法规，强化安全生产管理，落实安全生产责任制，依法从严治理施工现场，确保项目施工中操作人员的安全与健康，促进施工顺利进行。乙方在施工过程中必须采取严格的安全措施，承担因安全措施不当造成的工程事故、人身伤亡等责任，并承担全部费用，与甲方无关。 五、违约责任：任何一方不得擅自解除或变更合同，否则视同违约，守约方有权要求违约方赔偿由此造成的全部损失。 六、其它： （1）本合同未尽事宜，双方另行协商； （2）本合同的注解、附件、补充协议是本合同的组成部分，与本合同效力同等。 （3）本合同一式两份，甲乙双方各一份，经双方代表人签字并加盖公章后生效。 甲方：乙方：

空调拆装协议

空调拆迁工程协议 甲方： 乙方： 为了搞好甲方空调拆迁安全工作，经双方协商同意签订本协议。 第一条甲方安全责任 甲方在乙方进行空调拆迁安装前，对乙方现场负责人进行口头教育，甲方现场安全负责人为同志，其教育的主要内容为与拆迁安装有关联的安全注意事项。 1、工程现场甲方负责人全面负责安装施工现场的工作； 2、开工前_____天，甲方应为乙方入场施工创造条件，腾空场地、接通施工水电； 3、开工前_____天，甲方应为乙方提供已确定的设计方案图及安装施工清单； 4、甲方中途终止工程，应向乙方偿付合同款的20%的违约金。 5、甲方未能按合同规定时间支付工程款的，每迟一天，甲方应向乙方支付合同款总额的1‰的违约金，但违约金总额不超过合同款总额的20%。如甲方在达到此限额后仍不能付款，乙方有权终止合同，且甲方应承担乙方的经济损失，乙方也可追究甲方有关的法律责任。 5、甲方如需调整产品型号，应及时通知乙方，并承担乙方重复运输、保管、设备差价、材料损失等有关费用。 6、对以下原因造成的竣工日期延误，经甲乙双方确认,工期相应顺延： （1）工程量变化或设计变更； （2）不可抗力； （3）甲方未按时支付款项和未按时参加阶段验收而造成的停工； （4）甲方同意工期顺延的其他情况。 7，税金的支付按总金额的百分之六。由甲方支付。 第二条乙方安全责任

●乙方自备空调拆迁安装所需的机械、设备、材料，并负责供安装人员的安全带、安全帽、面罩等安全保护用品。 ●乙方负责对拆迁安装人员的安全和治安教育，严格按照国家相关安全操作规程安装，做好安全防范措施，做到安全文明施工。 ●乙方在拆迁安装前，必须与甲方签订协议书，否则视为乙方擅自施工，后果自负。 ●乙方要做到合法用工，相关证件齐全，如乙方违法用工造成的损失由乙方承担。 ●乙方进场后要服从甲方的指挥，接受甲方的监督，甲方有检查处理权利。 ●乙方要做好成品保护工作，不得污染和原有装饰、设备、设施，否则要进行清理、恢复原样，或进行赔偿，达到甲方满意为止。因成品保护不力造成的损失由乙方承担。 ●乙方要做好劳动保护工作，在墙外、临边、高空作业要系好安全带，挂在可靠地点不系安全带严禁拆迁安装工作。 ●乙方要确保无伤亡事故发生。如发生触电、高空坠落、物体打击、机械伤害、中毒、伤亡等安全事故，造成的所有损失和责任均由乙方负责，与甲方无关。 ●乙方要做好建筑物、管线、室内物品的保护工作，做好安全警械和安全防护工作，不得伤害到他人，否则造成的损失由乙方承担。

gateway技术

Gateway技术提供以下可能：通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达 一、一种更好的克隆方法 Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的克隆效率高达95%或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 Gateway技术：克隆、表达新方法 - zhchyuan2008 - zhchyuan2008的博客 目的基因克隆进入门载体后，可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内

切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。 二、一项强大而可靠的技术 Gateway技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway技术是基于已研究的非常清楚的λ噬菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway技术（表1和图2）。BP反应是利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。 LR反应用来在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 图2 Gateway技术总结 下载 (22.19 KB) 6 天前 19:23 Gateway技术：克隆、表达新方法 - zhchyuan2008 - zhchyuan2008的博客 在BP反应中基因转移形成入门克隆，在LR反应中入门克隆可以作为反应物产生最终的表达克隆。

房屋拆除协议书范本

房屋拆除协议 甲方：瑞祥文化旅游发展 乙方：市金拓建筑工程 （拆除资质等级：二级/证书编号：B03-4/4） 因工程施工需要，甲方将瑞祥.缇香岭18栋别墅及四个商铺基础承包给房屋拆除等工程承包给乙方施工，依照《中华人民国合同法》及其他有关法律法规，遵循平等、自愿、公平和诚实信用的原则，经双方协商，达成如下协议： 一、工程地点：全椒.十字镇纬四路 二、承包方式：总价包干方式(￥142700元) 三、工程围：瑞祥.缇香岭18栋别墅及四个商铺基础全部拆除清理外运。 四、工程容：瑞祥.缇香岭18栋别墅及四个商铺基础及负责所有建筑物及附属物的拆除、清运、清扫。 五、工期：天（接到甲方通知之日起算工期）,规定工期不能完工的甲方有权另行组织拆迁公司拆除，收取的费用不再退还。 六、乙方的权利、责任和义务： 1、遵守国家有关施工现场安全生产的法规和管理制度，建立健全安全生产责任制和安全生产管理制度。严格执行国家施工现场临时用电及机械设备使用有关技术规和安全操作规程，对施工区域自行管辖的临时用电负全面管理责任。 2、服从甲方安全生产管理。 3、乙方必须为施工作业人员参加人身意外保险。 4、乙方造成生产安全事故，导致人员伤亡时，由乙方承担事故责任和经济责任，与甲方无关。 5、未经安全生产教育培训和无证人员，不得上岗作业。

6、乙方要具备房屋拆除资质，签订合同前乙方要将公司房屋拆除资质报到甲方审核。 (一) 登高上架要求 1. 施工采用的脚手架、安全网必须由专业人员搭设,由项目经理(工地负责人)组织技术部、安全部门的有关人员验收合格后,方可投入使用,应按类别逐项查验,并应有验收记录。 2. 高空作业时,严禁立体交叉作业。水平作业时,各工位间必须有一定的距离,作业人员必须配备相应劳动保护用品如安全帽、安全带、防护眼镜、防护手套、防护工作服等,并应正确使用,施工作业现场周边设置相关安全标志牌,并设专人巡查。 3. 进入施工现场的人员必须佩带安全帽。凡在2m以上高处作业人员,必须正确使用安全带，安全带应高挂低用。 4. 工程施工前,除工程技术人员对施工作业人员进行书面安全技术 交底,并履行签字手续外,必须各施工班组长向施工人员进行班组交底 及履行签字手续。 5. 特殊工程施工项目如;电气、易燃、易爆容器、管道等,必须持有效证件及上岗证的专业人员操作，并有乙方负责和相关部门办理相应手续。 6. 拆除施工现场,必须设有临时急救人员及药品或设立临时救助站。 7. 严禁在工作前和工作中饮酒，不许穿高跟鞋、硬底鞋、拖鞋，应穿防滑鞋。 8. 进入施工现场须服从领导和安检人员的指挥，遵守劳动纪律、严守岗位、不串岗，作业时思想要集中。 9. 严禁随意拆除或损坏防护栏杆、拉杆、安全网、跳板、脚手板、支撑等防护设施。 10. 面砖搬运、安装时应注意安全，防止因面砖翻倒而受伤。

Gateway技术操作指南

Gateway? Cloning Protocols The Basics of Gateway? Reaction ?BP reaction—to create a Gateway? entry clone ?LR reaction—to create a Gateway? expression clone ?One tube format—to create a Gateway? expression clone from a PCR product ?Gateway? Vector Conversion—converting your favorite cloning vectors to Gateway? Technology TOPO? TA Cloning - To Create a Gateway? Entry Clone Step One - Produce PCR product Produce PCR products using Taq polymerase and your own protocol. End the PCR reaction with a final 7 to 30 minute extension step. Step Two - Perform the TOPO? Cloning Reaction 1. Set up one of the following TOPO? Cloning reactions using the reagents in the order shown. For electroporation, dilute Salt Solution 4-fold to prepare Dilute Salt Solution. Reagent Chemical Txn Electroporation Fresh PCR product0.5 to 4 μl0.5 to 4 μl Salt Solution 1 μl-- Dilute Salt Solution -- 1 μl Sterile Water to a final volume of 5 μl to a final volume of 5 μl TOPO? Vector 1 μl 1 μl Total volume6μl6μl 2. Mix gently and incubate for 5 minutes at room temperature. 3. Place on ice and proceed to transform One Shot? chemically competent E. coli, below

Gateway

Gateway?技术提供以下可能： ?通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 ?将您的基因转入到多个表达系统 ?在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达 Gateway?技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。 这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的 克隆效率高达95％或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时， 还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway?也有助于进行带不同数目纯化和 检测标签的表达。 Gateway?利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您感兴趣的基因到Gateway?改造过的的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆的测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。

图1-Gateway?技术的灵活性 *目的基因克隆进入门载体后， 可以同时转移目的基因到多个目的载体。 一种强大而可靠的技术 Gateway?技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway?技术是基于已研究的非常清楚的λ嗜菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway?技术（表1和图2）。BP反应利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。LR反应用来在在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 Gateway?技术也利用了ccdB选择方法，确保高效率的分离重组克隆。典型的效率是＞95％。需要了解更多的有关ccdB的信息，请

桥梁拆除协议

***大桥老桥拆除协议 合同编号： 甲方： 乙方： 根据《中华人民共和国合同法》、《中华人民共和国建筑法》及其它有关法律、行政法规，遵循平等、自愿、公平和诚实信用的原则，甲乙双方就****大桥老桥拆除工程分包事项协商达成一致，订立本合同。 第一条工程概况 1、工程名称：***大桥老桥拆除工程 2、工程地点：********************* 3、工程范围：桥型：南北两侧共三幅预应力混凝土T梁桥梁，中幅为桁架拱桥梁，桥长约90m，宽48m，桥面铺装为沥青混凝土，桥面附属构造物包括人行道、栏杆等 4、主要工作内容：上部结构及附属构造（人行道、路缘石、栏杆和桥面铺装绞缝、T梁、桁架拱等）；下部结构墩柱、桥台、盖梁拆除；桩基、系梁基础拆除；拆除后破碎、外运、弃置、场地清理、河道打捞清理及航道恢复等；协助甲方办理本工程承包区域内桥梁拆除相关手续；拆除后垃圾清运；为实现安全、环保、文明、绿色施工应采取的措施；航道、海事、建设规划、城管、卫生、市政、交通、环保、公安等部门要求采取的其他措施；本合同中其他有关乙方工作内容的约定。 第二条工期要求 1、工期要求：从 2011 年 11 月 5 日至 2011 年 12 月 5 日止，总日历 33 天，实际进程日期以甲方通知为准；中间节点工期按甲方要求完成，乙方必须按甲方计划要求完成全部拆除任务，否则，乙方承担2000元/天的违约金。 2、为确保甲方工期要求得以实现，当乙方出现不能按时完工的倾向时，乙方应增加施工机械、人员投入，保障工期，并承担因自身施工能力不足给甲方造成增加成本费用。 3、由乙方延误工期或者施工组织不当而造成的水上施工监管维护所增加的费用，全部由乙方承担。

gateway重组技术

河南农业大学牧医工程学院 1 Gateway 基因克隆 Gateway 基因克隆是由Invitrogen 公司在二十世纪九十年代末发明并应用于分子生物学基因克隆的一项专利技术。该技术利用专有的重组序列使得DNA 片段能够更有效地被转入质粒当中，可应用于大片段的基因克隆，并且在保持正确阅读框的前提下让不同表达载体间的DNA 转移成为可能。 这一技术在插入的目的DNA 片段两端整合att L1和att L2两个侧端重组序列，来构建一个类似通道的结构并称之为“入门克隆”（Gateway Entry Clone ）。据Invitrogen 宣称Gateway 技术使用99%有效且可逆的一小组重组反应，如此使得基因克隆不同于传统的限制性内切酶方法，避免了目的片段内存在切点的问题而使得大片段DNA 保持其完整性，大大提高了克隆效率，常应用于大规模的DNA 片段整合进同一种表达载体，因此又称之为高通量基因克隆技术（Gateway Cloning Technology ）。 一、Gateway 基因克隆的原理及机制 Gateway 被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体（Entry Vector ）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体（Destination Vector ，目的载体）上。 Gateway 的原理是建立在噬菌体DNA 定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子（INF 、Int ）的作用下，lambda 的attP 位点和大肠杆菌基因组的 attB 位点可以发生定点重组，lambda 噬菌体DNA 整合到大肠杆菌的基因组DNA 中，两侧产生两个新位点：attL 和attR 。这是一个可逆的过程，如果在一个噬菌体编码蛋白Xis 和IHF 、Int 的共同介导下这两个新位点可以再次重组回复为attB 和attP 位点，噬菌体从细菌基因组上裂解下来（见图1）。这一过程的方向是受控于两个重要因素：存在的介导蛋白和重组位点。

工程拆卸施工协议书

工程拆卸施工协议书 拆卸是一项很大的工程，下面小编整理了工程拆卸施工协议书，欢迎阅读! 工程拆卸施工协议书 发包人(全称)：(甲方) 承包人(全称)：(乙方) 依照《中华人民共和国合同法》、《中华人民共和国建筑法》及其他有关法律、行政法规，遵循平等、自愿、公平和诚实信用的原则，双方就下列建设工程施工事项协商一致，订立本合同。 第一条：工程概况 工程名称： 工程地点： 第二条：发包方式、合同价款及承包范围 2.1发包方式： 2.2合同价款： 人民币大写：(￥) 2.3承包范围： 第三条：下列文件作为本合同附件，并具有法律效力： 第四条：合同价款支付： 4.1、工程款支付：双方约定的工程款(进度款)支付时间和方式： 4.2、工程结算：双方约定的工程款结算支付时间和方式： 4.3、付款采用银行汇票或电汇。

4.4、本合同为固定单价合同，在合同实施期间不因政策或市场或实际拆除物数量与乙方测算数量发生偏差等因素的变化而发生改变。 第五条工期 具体开工时间：日期： 第六条工程质量及技术要求 6.1 乙方将拆除范围内建(构)筑物全部拆除，并将建筑垃圾运至指定的地点，拆除的材料全部运出厂外，拆除现场要做到工完料净场地清。 6.2 拆除过程中要保证拆除范围外的其他生产设施等的安全。 6.3 拆除的整个过程的工程质量及技术要求严格相关质量技术规范书执行。 第七条施工安全 7.1 乙方应遵守工程建设安全生产有关管理规定，制定安全生产施工措施，严格按安全标准组织施工。并随时接受行业安全检查人员依法实施的监督检查，采取必要的安全防护措施，消除事故隐患。 7.2 乙方必须设置足够的专职安全员，负责施工现场安全生产的监督检查工作。 7.3 乙方在施工过程中所造成的工伤等事故或其他经济损失，概由乙方负责。 7.4 乙方应做好垃圾运输过程中沿途的安全防护工作，严防附近农民在沿途卸车、哄抢建筑垃圾，在堆放场地严防因堆放和防护不当

Gateway重组克隆技术

Gateway? 重组克隆技术 经典的克隆工作流程包括许多步骤，尤其是传统的限制性内切酶克隆方法。这种传统的方法限制了克隆的成功率。 例如，当其可能会在目的基因内部进行切割， 从而截短插入片段，并使得基因无法用于下游表达时，某些限制性内切酶是不能使用的。采用传统的克隆方法， 需要额外的片段回收步骤，而且在克隆大片段DNA 时，将会遇到重组效率降低， 从而需要浪费费很多时间以筛选到所需的克隆的问题- 所有这些步骤都会耗费大量的时间和精力，而且成功还无法得到保障。 而Gateway? 重组克隆技术则不存在这些问题。 极好的通用性 相反，Gateway? 重组克隆技术则规避了这些克隆限制，使您几乎能够使用任何表达系统。Gateway? 重组克隆采用了99% 有效且可逆的一小时重组反应， 并且不使用限制性内切酶、连接酶、亚克隆步骤，也不需要对不计其数的菌落进行筛选，从而节省您的时间、金钱和精力。Gateway? 技术自推出后便为研究界广泛采用， 仅参考文献便超过1500 篇。此技术使跨学科研究的合作变得简单方便，而且能从这些研究团体中获得众多载体用于真正的多学科科学研究。 最后，MultiSite Gateway? 技术等最新进展使得Invitrogen 的 Gateway? 克隆成为蛋白质表达和功能分析的理想克隆方法。 Gateway? 技术的优点 只需一小时，室温克隆反应便能快速产生您所需的克隆，效率高达99% 以上 无需使用限制性内切酶或连接酶便能保持片段正确的插入方向和阅读框，从而，获得可直接进行表达的克隆 从靶标鉴定到验证始终使用同一个克隆，无需重新测序，从而确保结果在整个实验过程中一致 使DNA 插入片段从一个表达载体穿梭到另一个表达载体，既提高了灵活性，同时还简化了克隆工作流程

旧设备拆除合同协议书范本

甲方： ________________________________________ 乙方：________________________________________________ 经甲乙双方友好协商，为明确双方的责任和义务，双方协商一致，签订本协议，以便双方共同遵守。甲方将________________________指定的旧设备卖给乙方，拆除工作由乙方完成，具体内容如下： 一、拆除设备所需吊装、搭架、设备、工具及费用由乙方自行负责。 二、设备拆除施工过程中乙方应严格遵守安全操作规范进行作业，做好安全防范措施，确保安全作业。 三、拆除的旧设备所有部件归乙方所有,由乙方自行处理。施工过程中（含拆除设备、吊运、装车、运输等）所有经济及法律责任由乙方负责，甲方不承担经济及法律责任。 四、拆除的旧设备周围4米内的石棉瓦可以根据拆除需要拆除，拆除完毕后石棉瓦不用恢复。拆除过程产生所有垃圾乙方及时清运。 五、拆除施工期限：________年________月________日________年________月________日（工作时间按照现的作息时间，如遇特殊情况顺延）。 六、付款方式：旧设备折合人民币：________元(人民币大写：________________元整）拆除前乙方一次性支付给甲方。 七、如现机械厂阻扰乙方施工，由甲方沟通。

八、如有一方违约，违约方应当赔偿给对方造成的相应经济损失。 九、本协议未尽事宜，甲乙双方另行商议，达成一致意见做成书面材料为本协议附件，具有同等法律效益。 十、本协议一式贰份，甲乙双方签字盖章后生效，甲乙双方各执壹份。 甲方： 乙方： 日期：

gateway重组技术

Gateway也可以被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体 （Entry Vector）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组 位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体 （Destination Vector，目的载体）上。 Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在 噬菌体和细菌的整合因子（INF、Int）的作用下，lambda的attP位点和大肠 杆菌基因组的attB位点可以发生定点重组，lambda噬菌体DNA整合到大肠杆 菌的基因组DNA中，两侧产生两个新位点：attL和attR。这是一个可逆的过程，如果在一个噬菌体编码蛋白Xis和IHF、Int的共同介导下这两个新位点 可以再次重组回复为attB和attP位点，噬菌体从细菌基因组上裂解下来。这 一过程的方向是受控于两个重要因素：存在的介导蛋白和重组位点。 在Gateway系统中,入门载体包含两个重组位点序列attL1和attL2，大小 均为100bp，中间夹着一个自杀基因——ccdB基因。由于ccdB基因的表达产 物能抑制普通的E.coli生长，在克隆时没有切开或者自身环化的载体在转化 时不能生长。在构建含目的基因的入门载体时必须切掉这个基因，接入目的基因。ccdB基因两端可以选择的酶切位点有限（2个），同时还必须考虑读码框架、启动子、终止密码等问题，因此Gateway系统提供了5种不同的入门载体 以供选择。需要特别注意的是转化用的菌株必须是不含F附加体的，因为它表 达的一种产物能阻断ccdB基因，影响筛选结果。 同样，目的载体（Destination Vector）也必须和Gateway系统配套，即 目的载体的表达调控元件下游有两个重组位点attR1和attR2，大小均为 125bp，同样也夹着一个ccdB自杀基因。 当需要将目的基因从入门载体（Entry Vector）转移到目的载体（Destination Vector）时，只要将两种质粒混合（线性化能有效提高重组率），加入含有Int、IHF、Xis等重组因子的LR重组酶混合物，attR2序列和attL2序列发生重组，生成一个融合质粒。attL1序列再和attR1序列重组， 融合质粒分解为两个新的质粒，目的基因与原来位于目的载体上的自杀基因发 生重组置换，得到一个带目的基因的目的载体（生成新的重组位点attB1、B2）和带自杀基因的入门载体（生成新的重组位点attP1、P2）。反应过程需要25 度保温1小时（时间越长，重组率越高，特别是较大的质粒，反应过夜能提高 5倍重组效率），蛋白酶K37度处理10分钟，转化。由于带自杀基因的载体不 能生长，加上抗生素筛选，转化产物重组率高达90%以上。同样，转化用的菌 株必须是不含F附加体的。

(完整版)拆除协议书

拆除工程协议书 甲方： 乙方： 甲方将中成大厦餐厅及健身房改造工程－拆除项目委托乙方进行拆除和渣土清运。为明确双方的权利和义务，经共同协商，一致同意签订本协议。 一、施工内容及工程量： 1、施工内容及工程量：2层、1层、地下3层原有需墙体，地面（砖），墙面（砖），天花拆除，渣土清运。 2、拆除标准：拆除范围内根据甲方规定拆除、渣土清运干净。 二、工程价款及结算方式： 1、工程价款： （1）双方商定项目总金额：元（一次性包清价） 2、结算方式： （1）、二层拆除及垃圾清运完毕，经甲方验收合格，支付总工程款%；元（2）、一层拆除及垃圾清运完毕，经甲方验收合格，支付总工程款%；元（3）、地下三层拆除及垃圾清运完毕，经甲方验收合格，支付余款元。 三、双方责任、权力及注意事项： 甲方： 1、乙方进场后，甲方向乙方进行施工交底，交待清楚施工现场周围地下障碍物与在施工中需注意的事项并提供有关技术资料。 2、负责协调切断通往被拆除区域内的水源、电源、热源、燃气、通信等线路。 3、配合乙方对施工人员进行安全教育。 4、甲方指定为工程项目负责人，负责协调施工中有关事宜并监督乙方的施工全过程。 乙方： 1、负责编制施工方案，制定安全、环保措施，。 2、积极配合甲方的工作。 3、认真贯彻执行国家有关部门对建筑施工提出的各项要求和规定，做到文明施工、安全、按期完成施工任务。 4、必须严格按照相关法规条文施工作业，注意环保要求：控制噪声，避免不安全因素发生。

5、负责机械及人员的安全，加强对施工人员的安全教育及防范措施,确保施工中万无一失; 并负责其施工人员的安全保险，对因管理不善所发生的任何安全责任事故，责任由乙方承担，。 6、服从甲方现场管理人员的指挥，尊重甲方的管理制度。 7、乙方指定为工程项目负责人，全权负责工程拆除事宜并及时向甲方通报工程拆除有关情况。 8、不得随便穿梭工作范围内其它场所，不得乘坐客梯，所有施工人员由一层东门进入，乘坐货梯，违反规定造成后果乙方自负。 9、注意；施工中拆下的各类废旧材料归甲方所有，均由甲方自行处理。 10、乙方对本拆除工程实行乙方自备拆除用工具、设备，包施工安全、施工质量，严格按照拆除施工工期完工。 四、违约责任： 1、违反本合同规定，甲、乙双方各自承担其责任。造成的损失由责任方全部承担（含经济损失）。 2、合同执行中发生纠纷，双方应做好协商解决。 五、其他： 1、本合同签字生效后甲、乙双方如有未尽事宜或对合同条款修改，需经双方协商同意并签订补充协议。 2、补充协议及附件与本合同正文有同等的法律效力，双方须共同遵守。 3、本合同自甲乙双方的法定代表人或授权委托代理人签字并加盖各自公章之日起生效。 4、本合同一式贰份，甲乙双方各执壹份，具有同等法律效力。 甲方：乙方： 代表人：代表： 年月日年月日

【合同协议范文】空调拆装协议书

空调拆装协议书 协议编号： 签约时间： 工程地点： 发包方________________________________________（以下简称甲方）联系电话：____________________ 甲方代表：___________ 承包单位：_____________________________________（以下简称乙方）联系电话：____________________ 乙方代表：____________ 根据《中华人民共和国合同法》等有关法律、法规的规定，在平等、 自愿的基础上，甲乙双方就乙方拆装中央空调设备达成如下协议： 第一条甲方订购及乙方安装的设备规格型号及数量，以及工程概况： 1、设备情况：两台130KW风冷冷水模块主机，2台水泵，一个水泵控 制箱，一个补水箱。 2、安装工程概况： （1）工程地点及面积： （2）工程造价：； （3）开工日期：20XX年月日； （4）完工日期：20XX年月日；

（5）付款方式：现金. 第二条乙方工程材料进场时，由甲方确认并指定货物堆放地点（甲方指定的地点必须是具有安全保证的及方便乙方施工），工程材料的安全由甲乙方共同负责。乙方安装调试中央空调完毕，甲方现场验收合格，并签字验收认可。 第三条产品的拆装、验收： 合同范本1、乙方负责中央空调设备的拆装。甲乙双方商定： （1）、20XX年月日，乙方派出工程技术及施工人员到达工地现场开始拆装施工； （2）、20XX年月日，完成拆装施工； 2、安装质量标准按国家规范及行业要求。乙方于工程竣工当天通知甲方验收，甲方在接到验收通知两天内组织人员对工程进行验收，认定工程质量和工程内容符合要求的，双方代表在工程验收单（表）上签字盖章，超过两天，视为甲方验收合格。乙方负只责提供拆装及故障咨询，不负责设备维修。如设备在拆装前已损坏，乙方有责任提醒甲方，但不负责维修。需乙方维修的，须经双方协商同意，维修费用另行计算。 第四条价款结算方式及期限： 1、本合同价款为双方约定方式支付安装工程款（固定价款）； 2、本合同工程安装总价款为人民币：； （1）合同签定后,甲方支付乙方（第一期工程款）人民币元（大写：整）； （2）乙方拆装工程完工并验收后，甲方三天内支付工程款元（大写：整），剩余￥元（大写：整）壹年后付清，超出约定期限五日，甲方以每日千分之五给乙方补偿。

房屋拆除合同协议书范本标准版

房屋拆除合同 甲 方： __________________________ 乙 方： __________________________ 签订日期： _____ 年 _____ 月 _____ 日 发包方（以下简称甲方）： 编号 号：

承包方（以下简称乙方）: 按照《中华人民共和国合同法》、《建筑安装工程承包合同条例》、建设工程及有关法律法规， 遵循平等、自愿、公平和诚实信用的原则，经双方协商，就本工程施工中的相关事项，达成如下协议： 第1条：工程概况与承包范围 1.1拆除地点位于：农房建筑一座。 1.2拆除费用：甲方补给乙方拆除费用为（人民币）。 1.3进场日期：，完工日期。 1.4房屋内以及拆除房屋后的所有物品归属权为甲方所有，乙方必须征得甲方同意后才可以能处理。 第2条：双方职责 2.1甲方责任： 2.1.1负责拆除房屋的断水、断电、断气、断通讯等工作，配合乙方做好各方面的协调工作。 2.1.2 负责对拆除施工现场的监督、检查、对拆除完毕的区域进行验收。 2.1.3在乙方拆除完成并通过验收后一次性支付拆除费用给乙方。 2.2乙方责任： 2.2.1 按甲方要求按时进入施工现场、保证工期的顺利完成。 2.2.2负责对本协议所列拆除范围内所有建筑物及附属物的拆除、清运、清扫等工作。 3.2.3乙方按有关规定，采取严格的安全防护措施，承担由于自身安全措施不力造成事故的责任 和因此发生的费用。因拆除原因造成的各种事故、行政处罚等一切责任、费用均有乙方自行承担。 2.2.4自备安全拆除施工方案、拆除现场坚持文明施工、对岀入施工现场的道路及时清扫。严禁在道路，路道堆放任何材料。

gateway 载体

Gateway 载体 Gateway技术提供以下可能：通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间，同时将您的基因转移到多个表达系统，在任何您选择的系统-体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物-分析表达 一、一种更好的克隆方法 Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的克隆效率高达95%或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体后，可以同时转移目的基因到多个目的载体。

Gateway利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。 二、一项强大而可靠的技术 Gateway技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway技术是基于已研究的非常清楚的λ噬菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway技术（表1和图2）。BP反应是利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。LR反应用来在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 表1 反应和术语总结 图2 Gateway技术总结 在BP反应中基因转移形成入门克隆，在LR反应中入门克隆可以作为反应物产生最终的表达克隆。

拆除工程协议书

拆除工程协议书 发包人：市长丰源房屋拆除有限责任公司 承包人：号： 为一进步加强企业部管理工作、使施工现场有一个正常的生产、经营、安全管理的工作秩序，确保进场各单位各项工作有人抓，分项工作有人管，责任到人落到实处，本着“谁主管、谁负责，谁使用、谁负责，谁管理、谁负责的基本原则”，根据《中华人民国合同法》、《中华人民国建筑法》及《市房屋拆迁现场管理办法》及其他有关法律法规，遵循平等自愿、公正和诚实手心的原则，双方协商一致，订立本合同。 第一条工程概况及承包工作容 1、工程名称：西黄城根工地 2、工程概况：本次拆除工程为西黄城根正式房屋及附属违章建筑。 3、工作容：房屋拆除及旧物回收。 第二条作业人员 承包人根据工程需要，合理安排参施人员，保证工程顺利进行。 第三条合同工期 根据拆迁指挥部的通知进场施工，并随拆迁进度拆除施工。 第四条合同价款 1、合同拆除围：以发包人给的拆房单为准。 2、合同价款为：拆除建筑物残值由承包人收回，承包人向发包人交纳建筑物残值 8 元 /㎡，暂估拆除面积为 3000 ㎡；拆除面积严格按照拆房单面积计算（面积为暂估面积），最后结算以实际拆除房屋面积计算。

3、本合同价款的确定：经过招投标确定，由承、发包双方协商一致确认。 4、本合同价款为固定单价，在约定的风险围合同价款不再调整。 5、施工现场如发生搭设围挡、配合洒水车降尘等零星用工，发包方不再支付费用。 6、因不可抗力及拆迁进度等原因造成的停、窝工发包人不承担任何经济补偿。 第五条合同价款的结算和付款 1、根据拆迁单位下发拆除通知单，由发包人现场负责人共同确定拆除面积，并由双方共同 确认，以此作为拆除面积的结算依据。 2、承包人根据发包人下达的施工任务书或现场负责人的指令，安排作业人员完成作业容， 并取得有效的书面完工签证单据。 3、合同价款的结算支付：协议签订后，一次性交齐。 4、拆除工程结束后，承包人向发包人递交完整的拆除资料，发包人在收到决算资料后，给 予确认并办理决算手续。 第六条安全施工、重大伤亡及其他安全事故处理 1、安全施工：发包人、承包人必须贯彻、执行国家和政府、行业主管部门颁布实施的有关 安全生产的法律法规及各项规定，严格按安全标准组织施工。 2、发生重大伤亡及其他安全事故，承、发包双方应采取紧急措施防止事态扩大并全力组织 抢救伤者，保护事故现场，如因抢救伤者必须移动现场设备，须作出书面记录或拍照。 3、承包人对拆除围的安全问题负责，并承担所有经济责任，协议签订后承包人向发包人一 次性交纳安全保证金人民币10万元，如有安全问题发生，发包人可以先用此资金，救助伤者及采取安全措施，无需承包人认可。如无安全问题发生完工后一次性退出承包人。第七条文明环保措施 1、发包人、承包人应严格执行市人民政府颁发的“市拆除施工现场管理暂行规定”，加强