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血细胞分析仪发展史

血细胞分析仪发展史
血细胞分析仪发展史

血细胞分析仪50年的发展历史和展望

中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜(图1),1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍

克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最

原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞

的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计

并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。

自从发明了显微镜以后,人们从微观世界中了解和观察到

了血液的组成,并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和

白细胞和血小板。在以后的研究中,人们发现许多疾病的发

生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对

疾病诊断的需求,人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法,1855 年发明了用于计数血细胞的计数板,目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的

经典一种,虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用,但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术,它不仅适用于血细胞计数,还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品,因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能,是不应该忘记和放弃的手段。

随着对血细胞计数和分析需求的不断增加,对血细胞计数的方法进行改进,实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高,现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似,但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾,并对最新的进展进行介绍和展望,期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。

一、血细胞计数仪的发展历史

谈到血细胞计数仪的发展史,在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter (图2a,b),他年青时对电子学

非常感兴趣,最初是一位广

播电台的电器工程师,后来

做过X光机的销售员和维

修工程师,在亚洲许多国家

包括我国的上海工作过。

1948 年他在芝加哥一家公

司工作时,在一间地下室建

立了自己的实验室,开始秘

密的从事自己的实验,这项

实验导致了一个重大的发明,他发现了微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象,并根据这种电阻变化特点将其应用于微小粒子的粒度测量和计数

上。科技界为表彰他的发明,将其称为库尔特原理(Coulter principle )。根据这个原理,Coulter 先生将其引入到血液细胞计数上,在1953 年获得美国发明专利,同年和他的兄弟约瑟夫(Joseph )开创了自己的公司,并成功的设计和

制造出了可以计数血细胞的专用仪器,然后开始了在这一领域的商业运作。这种仪器看起来非常原始和简单,好象一个示波器另加一些管道、电极和瓶瓶罐罐

(图3)。它的计数原理是根据血细胞的不良导电性和产生电阻抗原理来计数

血液中的细胞,也就是电阻式血细胞计数原理,这种原理现在已经成为血细胞计数和分析中最为经典的原理。

最初的血细胞计数仪是一种单参数测定仪器,只能对血液中的红细胞和白细胞进行计数,并且需人工切换。最

早生产的血球计数仪为Coulter A

型,笔者曾经见到和使用过Coulter

D型,那是一个黑色外壳的长方型

仪器,它的前面有一些调节轮盘,

右下方有一个可以升降的样品台,

它通过U型水银管控制计数时间和

计数容量,外侧安装有一个窥孔器(用于观察计数小孔是否有堵塞的放大镜),通过数码管显示结果,通过切换按键选择白细胞还是红细胞计数的简单仪器。

1958 年以Coulter 命名的专门从事颗粒性测量和计数的仪器公司,库尔特电子(Coulter Electronics )公司成立。

此后,欧洲、日本也开始了血液细胞计数仪的开发和研制,我国在60年代中期也

开始了这种仪器的开发和生产。例如日本Sysmex 公司1962 年就生产了可进行红细胞和白细胞计数的CC-1001 型血球计数仪,我国1965年在上海也生产了简单的血细胞计数仪,1975 年北京医疗仪器厂也开始模仿设计自己的简单的红白细胞计数仪。

到目前为止已经有许多国家开始生产各种类型的血细胞分析仪,经过半个多世纪的发展,这种仪器已经有了非常明显的进步。以前因为只能进行细胞计数,因此我们

一般将这类仪器叫做血细胞计数仪(Blood Cell Counter),由于技术的进步目前这类仪器可以提供除了血细胞计数以外的更多参数的联合测定和分析,因此我们一般将这类仪器统称为血液细胞分析仪(Hematology Analyzer) 。

经过多年的发展,特别是近年来电子计算机技术的发展,血细胞分析仪无论在技术上、形式上、功能上、参数上、用户界面上等许多方面都有很大的改观和进步。

因人所共知的原因,我国和美国在50年代基本没有任何贸易往来,因此英国进口的EEL型血球计数仪应该是国内引进比较早的血球计数仪。协和医院检验科在60 年代初期就引进了这样一台仪器,该仪器是具有代表性的早期采用光学的细胞

移动型血细胞计数的仪器,也是最早使用光学法和壳流技术的仪器。血细胞在流动的壳液的带动下经过光轴的中心,在暗视野下呈现出明亮的光脉冲信号,通过对这个信号的收集和分析来计数血细胞。该仪器的特别之处是稀释倍数和人工计数法一致,当仪器出现故障时,将标本滴入计算板仍可实施人工计数。该仪器体积较大,

并缺乏备件,在80年代初期停止了使用,遗憾的是笔者没有找到该仪器的资料照片。

二、血细胞分析仪发展中的技术进步

随着各种技术的不断进步以及实验室工作对仪器设备需求的不断增加,血细胞分析仪的各项用途和用法也有不断的进展,这首先体现在仪器应用的方便性、准确性和尽可能增加的参数上。

1、稀释技术的进步:早期的仪器一般要求在测定前先进行人工稀释,因此许多操作要求直接取20~40ul 的末梢血加到稀释液中。白细胞稀释比例多在

1:251 和1:501倍,红细胞则需要

进行二次稀释,稀释倍数在6.25~

25万倍之间,然后再将稀释好的标

本放入计数杯内进行计数,而且需

要在白细胞稀释悬液中加入溶血剂。由于人工稀释费时费力且精确性差,随后的一些血细胞计数仪增加配置了专用的稀释器,专供该型号的仪器进行机外稀释,这样减少了人工稀释带来的误差和麻烦,提高了效率。这类仪器的典型例

子有国内应用非常普遍的SysmexF820 型(图4),此型号仪器到目前仍有市

场需求并在广泛使用。现代的血细胞分析仪则更加先进,已经将自动稀释技术,自动进样方式全部添加到仪器本体内,即提高了技术含量、取样和稀释的精确度,使得进样的速度和可操作性更加方便,同时使得检测速度加快。

2、分析参数的增加:前面谈到早期的血球计数仪仅能进行红白细胞计数,而且是需要通过切换分别进行红白细胞得计数,所以将其

称为血细胞计数器是恰当得。由于血常规检验对血红蛋

白测定的需求增加,沙利比色法由于精度和操作不便不

能满足临床需求,已经有单独的血红蛋白比色计配备,

将加入专用的溶血剂后的样本进行白细胞计数后再将其

倒入血红蛋白比色计,即可得到比色法测定的血红蛋白

结果。此时期国内使用最多的血细胞计数仪是Coulter ZF

型和血红蛋白计(图5)。由于对血红蛋白测定要求的增

加,因此在仪器内增加一套比色装置,就可方便的测定

血红蛋白。电阻法定细胞数量的同时还可对细胞体积进

行测定,因此对红细胞平均体积(MCV)、红细胞压积

(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细

胞血红蛋白浓度(MCHC)测定和计算也成为血球计数仪的标准参数。1975 年日本东亚公司(TOA,Sysmex 的前身)推出了包含以上7 个参数的全自动血细胞计数仪器CC-710 和CC -720 型。

3、血小板计数功能的增加:血小板是血细

胞中最小的粒子,早期的血细胞计数仪均不包含

血小板计数。60 年代起国外开始研制血小板计

数仪,70 年已经有比较成熟的产品,这类仪器

一般需使用PRP 血浆进行,即使用特殊的离心

速度将红细胞和白细胞进行沉淀,使上层血浆中

尽量保存最为丰富的血小板,然后应用这种PRP

血浆进行血小板计数,例如Sysmex PA-701 型和

CONTRAVE 1000 型,此类仪器多配有专用PRP

离心机(图6 为TOA PLT-100 型血小板计数仪

和离心机)。使用全血方式和水动力聚集方式计

数血小板的仪器如Clay-Adams 的Ultra-Flo100

型以及80 年代后出现在我国的Baker S-810 型

血小板分析仪(图7 为作者15 年前应用Baker

S-810 型血小板分析仪的工作照片),该仪器设

定了单独血小板分析测量通

道,根据红细胞和血小板体积

的显著差异他们区分开(图8),将血小板按体积大小划分到64 个通道,分别累加体积大小不同的血小板数量。它通过直接吸入稀释好的血细胞悬液进行测定,除了给出血小板数量外,还提供了两个新的参数,平均血小板体积(MPV) 和血小板体积分布宽度(PDW)。在这之后血细胞分析仪将血小板计数这一重要功能合并到全血细胞计数(CBC)范围内。当时的仪器有很多型号,例如Baker 8000, Sysmex CC-800,Coulter S 系列和T 系列等。

3、定量部的改进:仪器为了准确进行细胞计数,除了要准确稀释血液外,对直接进入计数小孔内的液体量也要进行定量控制,因此仪器对定量部的要求是非常严格的。在血细胞计数仪开始阶段,人们设计了U型水银管压力计,通过水银的重

量和在两个电极间的距离来控制吸入的标本量。后来人们通过两只光电管来了解液体通过一个固定距离所需要的时间和容积来控制标本的吸入量,还有一些公司设计并使用了微量注射器技术以及浮球定量技术来控制计数样本的量。最新的光电计时容量控制技术控制标本进入计数区的量,可以使得进入计数区域的细胞悬液定量更加准确和无污染、同时还可判断小孔是否出现堵塞或半堵塞问题,以及便于维护。

4、自动取样技术:由于仪器需要对全血进行自动取样和稀释,因此取样量也

同样需要精确控制。最初的仪器是需要进行手工取样和稀释的,后来逐渐有了外置式专用取样稀释器。再后来仪器内部设置了内置式负压取样稀释器,根据负压量的大小来吸取血液样品,这对控制负压的精确度要求很高,此外还有微量注射器取样技术,依靠光电管控制血液取样量的技术等。目前认为采用旋转阀取样技术是比较精确的方法,旋转伐内部有多个按一定体积设计的小孔,当血液进而后,旋转伐从吸入的小孔转向排出的小孔,此时血液不能再进入,而孔内保留的固定量的血液进入仪器的稀释部,然后清洗,再进入下一次循环。目前许多更加先进的血液分析仪均采用陶瓷制的旋转阀来分配血液标本。

进样方式也从最初的单一预

稀释方式,演化为预稀释和全血

方式两者兼有。现在许多先进的

五分类血液分析仪还采用了更多

种进样方式,例如Sysmex

XE-2100 和Bayer Advia 120

型,如末梢血方式、开盖手工进样、闭盖手工进样、急诊检验进样、全自动进样等方式以及连接到全自动流水线的自动进样技术等。进样设备有的采用旋转式进

样盘,如MEDONIC CA570 (图9)和SWELAB AC920/970, 这种旋转式进样器

多是选配件。更多的血液分析仪采用了平推式的自动进样系统,即将待检样品插在专用试管架上,仪器将试管架一步步送入仪器的取样口,测定完毕后自动推出。平推式自动进样系统在有些厂家的仪器上是可选择的配件,而在某些仪器上则是必备件。

5、仪器的清洗技术:最初的仪器的清

洗靠人工浸泡或使用毛涮清洗,如果测定完

一个很高值的标本,则需要用空白液清洗一

下,以防止对下一个标本的携带污染。而现

在许多仪器在完成一个标本的检测后可自动

对计数小孔、管道进行冲洗,还可同时对取

样器、稀释器、取样针内外进行全面清洗,

减少交叉污染的机会。许多仪器在开机和关

机时可自动执行清洗程序或按事先设定的清洗程序进行定

时清洗,保证仪器正常工作。

6、小孔管技术的改进:小孔管是血细胞分析仪进行计

数的关键部件,早期的仪器一般仅有一个直径为100μ的小

孔管,多使用宝石经过激光精确打孔,然后镶嵌再玻璃支撑

物上。现在多数电阻法仪器的小孔管在白细胞检测上使用直

径为100 μ的小孔管,在红细胞和血小板检测上使用直径为60~80μ的小孔管,材料有宝石和特殊陶瓷等构成。例如经典的COULTER 外置式小孔管,当发生堵孔时可用毛刷清理或直接拆下来清洗(图10)。早期的小孔管一般暴露在外边,

其主要目的是便于人工清洗,多为单管方式,进行白细胞到红细胞计数转换时最好清洗一下。后来发展为红细胞和白细胞各自独立的两个暴露在外的小孔管(图

11),一般20秒即可同时完成红细胞和白细胞的计数,需人工使用加样器或定量

吸管从白细胞稀释悬液中进行红细胞的二次稀释或使用配套的稀释器。目前的仪器小孔一般采用内置式,减少了污染的机会并同时提供了自动清洗功能,使得每次计数后都能提供自动冲洗,减少了交叉污染的机会同时计数的速度也有了很大提高。

为了更加准确的对细胞计数和防止各种干扰发生,各公司在小孔管的改进和设计上使用了不同的处理方案。这些技术有力的保证细胞计数准确,特别是血小板计数的准确性。

(1)扫流技术(Sweep Flow):为减少已通过计数小孔后由于液流的回流而

重新返回计数区造成重复计数,在小孔后面增加一个扫流液系统,将计数过的细胞

通过扫流液冲进废液管道。(图12)

(2)防反流装置(Von Behrens):为防止细胞返回到计数敏感区,在小孔后面

加一个带孔的当板,用负压将已经计数过的细胞阻挡后直接收集到废液管道中。(图13)

(3)水动力聚焦技术(Hydrodinamic Focusing):是目前认为最为有效的方法,

也叫鞘流技术。它利用流体动力学原理,即可保证细胞位于鞘液中心并排成一列通过检测孔中心或通过激光束中心,又保证它不会返回敏感区,目前许多较为高级的

血液分析仪一般采用此种技术(图14)。

7、其他用于保证计数精确性的技术:

(1)脉冲编辑功能(Pulse Edit):可防止因细胞未从小孔中心通过而产生的脉冲改变并对其进行技术性修正,以得到准确细胞计数和体积测定结果。

(2)三次计数技术或多段计数技术(Voting):采用同时进行三次计数取平均值

的做法或将总体计数时间分为多段进行统计,如果各段之间差异不大,可直接给出准确结果,如果差异稍大则进行提示或报警,如果差异明显则不给出结果,因而保证了计数结果的质量和准确。

(3)重叠校正技术(Coincidence Correction):通过仪器的逻辑电路和数学计算

以及按照计算公式将重叠校正公式编入仪器的测定程序中,当出现两个细胞同时通过小孔的现象时,仪器就会很容易进行判断、运算处理后将结果校正过来。

(4)浮动界标技术(Floating Threshold):为保证血小板计数的准确,浮动界标

将根据红细胞和血小板分布曲线的交界处寻找最低点,将此点作为红细胞和血小板计数的分界线,这样可以很好的处理过多小红细胞对血小板计数的干扰问题。

(5)拟合曲线技术(Fitting Curve):Coulter 公

司设计的血小板计数范围是2~20fl,为排除噪音

干扰和小红细胞干扰,根据正常人血小板体积分

布呈对数正态分布的理论,通过电子曲线拟合将

没有被计数的大血小板计算在内,得到既无噪音干

扰又无小红细胞影响的准确血小板计数结果(图15)。

(6)延时计数计数(Extended Count):当细胞数少于特定值时,仪器自行

重复计数,以保证获取更多的细胞数,以减少统计学误差得到更加正确的结果和直方图形。

8.各种故障处理功能的进展:任何一台血液分析仪都会有故障,而简单的故障处理方法和程序将给用户带来方便。

(1)堵孔的处理:堵孔为最常见原因,在没有处理程序前,人们是通过毛刷来

清洗小孔的。后来仪器设置了自动排堵功能,通过负压或正压,使用清洗剂对小孔的内外进行强力冲洗来排除堵孔。后来发展为燃烧电路,对小孔局部增加高电压,使得堆积在小孔周围的蛋白质等杂质变质和灼烧,然后用清洗液冲洗干净。

(2)自动报警功能:仪器可在开机或运行期间对仪器本身的温度、压力、液流系

统、试剂、电子系统、光路系统等各个需要控制的部件进行监控,一但超过标准或出现故障,仪器可以显示这个故障和记录这个故障,并在手册或软件中增加排除故障的方法介绍。

(3)远程诊断系统:更加先进的设备可以通过Internet 网络和仪器生产厂家在网

络上建立联系,可以将你的故障和问题直接传送到仪器厂家的技术支持部门,由他们在网上对仪器进行诊断,提供解决方案,甚至工程师可以通过网络遥控的方式直接排除故障。

(4)帮助方式:许多仪器设计了很

多故障自动诊断和帮助方式。早期的

仪器一般是将仪器可能出现的各种故

障和解决方法用用户手册的方式提

供,目前更先进的方法是仪器可自动

提供诊断报警,用符号表达或用文字

直接表达,或按帮助键(help)后

自动列出并提供解决故障的参考方

法。而BAYER ADVIA 120 型血液分

析仪更将整个操作说明和故障诊断等

各项帮助程序存入系统中,可以方便的使用检索方式或链接方式找到各项目的说明和帮助,甚至提供动画方式对原理和仪器维护进行演示,提供各种散点图的模式和介绍(图16)。

9、质控程序的进展:血液分

析仪需要进行日常质量控制,以监

控其测定结果的准确性。早期的血

液分析仪一般没有质控程序,是依

靠人工记录质控数据,人工绘制质

控图。90年代以来由于微机技术的

发展,使得包括质控程序在内的许多功能得以在血细胞分析仪上实现。例如浮动均值质控法,自动将符合条件的每20个样本的MCV 、MCH、MCHC 数值求出均值并储存,最后绘制为浮动均值质控图,如Sebia 的Hemalyser 3 型就有这个功能。近年来的许多仪器都增加了多种质控程序,例如ADVIA 120型血液分析仪(图17)和SYSMEX XE-2100 型血液分析仪,可以将日常质控的多达20组的质控数

据储存在机内,或传人相连的电脑处理,甚至通过网络直接发送到厂家的服务器,设备厂商可通过网络直接了解每台设备每天的质控情况,必要时对用户进行指导和对仪器进行校正和检修。

10、仪器校正功能的进

展:任何一台血细胞分析仪都

需要校正。最早人们需要通过

调整设定域值的轮盘(图18,

19),找到域值曲线最为平坦

的部位。随后改进为根据靶值

和测定值人工计算出校正因

子,将校正因子输入仪器,也

可以在现有的校正系数上增加

或减少一定的百分比。现行的

校正方法更为方便,可直接将

靶值输入仪器,让仪器测定该校正品后自己计算出校正系数并保存,当然这种仪器也可以通过人工直接调整的方法进行校正。

11、用户界面的改进:所谓用户界面就是仪器的使用方式、可操作的或可看见的显示界面和程序。最早的仪器

几乎没有什么复杂功能,需要用机械

按键的方式选择白细胞计数还是红细胞计数,没有打印和储存,在电子数码管内

显示的结果需要手工记录下来(图20),例如Coulter ZF 型。后来有了接触式

按键和小型液晶显示屏以及小荧光屏显示,使得仪器在功能上和使用程序上有了一定的改观,可以选择不同的程序来操作仪器的各种功能和存储打印结果,如

Medonic CA570 和CA610,Swelab AC920 等。现在更有一些仪器采用了触摸屏控制方式,使得仪器操作界面更加人性化和更加方便,减少了面板表面的各种控制按键和附加的专用键盘,如日本光电的MEK-6108 和MEK-6318,Coulter 公司的ACT-DIFF 系列仪器,都使用了触摸式荧光屏控制技术。

现行的仪器则使用了更加先进的操作系统化物用户界面,对仪器的整个操作可以在电脑上进行,或者直接采用WINDOWS 的操作系统。仪器的用户界面更加复杂,功能也更加完善,例如Bayer Advia 120 型。许多仪器甚至提供中文操作菜单,非常方便国内用户使用,或连接中文操作系统支持的电脑软件例如SYMEX KX-21 、日本光电MEK-6318 型等。

12.仪器的打印方式:早期的仪器没有打印机,需人工记录简单的测定结果。当仪器的参数越来越多时,仪器开始配备打印机。有内嵌式打印机、外接式

卡片式打印机(图21)和卷纸式打印

机、电脑联网打印等许多方式,并可

以选择多种打印格式,可将预设的参

考值和提示字符以及提示语言同时打

印。许多仪器多设有标准的RS-232

接口,可将测定结果的数据传到计算

机中进行处理和打印。有的仪器本身

可依靠自带的硬盘存储大量的数据和

图形,如江西TECOM 的

TEK-2000,3000 型,更多的仪器采用了匹配的电脑系统来存储患者大量的数据和图形。

13、嗜酸细胞、嗜碱细胞提示或计数功能的加入:嗜酸细胞和嗜碱细胞提示功能是在白细胞三分类的基础上,应用软件对图形分析后得到的参数,它一般来讲只具有提示含义,例如嗜酸细胞可能高于参考值等。这类仪器的代表产品有Coulter JT-IR 型。而能够对嗜酸细胞进行计数的Swelab AC920EO 系列则采用特殊试剂将嗜酸细胞保护起来,单独进行嗜酸细胞计数,这种方法应该是较早实现仪器对嗜酸细胞直接计数的方法之一,比提示性结果更加可靠。当五分类血液分析仪进入实验室,单独具有嗜酸细胞计数功能的仪器才无开发的必要和市场需求。

14、其他技术的应用:多数现行的血细胞分析仪都有标准计算机接口,可与

医院信息管理系统进行连接;使用软盘或大硬盘对数据和细胞分析图形进行储存和检索;使用条码技术对标本进行分类和处理;使用全自动进样装置实现全自动化;通过磁卡或条码技术对试剂进行管理;对血细胞分析项目进行有规律的组合和选择等。这些技术的应用给当代血细胞分析仪提供了更加方便的使用方式和良好的管理方式。现代的许多仪器还增加了包括对试剂的管理,试剂消耗、试剂有效期和温度的管理。

15、红细

胞分析技术:

现行的血细胞

分析仪一般可

对白细胞进行

分群或分类,

但是对红细胞

的体积大小和

每个红细胞内

血红蛋白含量

的多少进行分析和分群则是更加特殊的技术。早在上世纪80 年代开始

Technicon 公司采用激光分析技术制作的血

液分析仪就可以做到这些,目前BAYER

ADVIA 120 也是唯一可对红细胞的体积和色

素含量进行分析的仪器。在测定过程中,仪

器的高角度散射光可对每个红细胞内的血红

蛋白含量进行测定,低角度散射光可对每个

红细胞的体积大小进行测定,通过这两个参

数组成的矩阵,可以得到红细胞的九分图,

并可进一步得到每个分布区域内红细胞的数量和百分比。红细胞九分图能够更好的表达患者红细胞的体积和色素分布情况,对贫血的诊断和治疗有很大帮助。(图

22,23)值得一提的还有使用UFC 板技术的BAYER ADVIA 120 血液分析仪。该板

采用集成的液流系统,将多种管道、电磁阀、反应池、电极等全部集成在一个塑料

板内,形成仪器的心脏部件,所有试剂、标本、混合、反应都在板中进行,省去了大量管道和体积大的电磁阀和反应杯,所以样本流动和稀释过程都可从透明板中看

到,是所有血液分析仪中唯一独创的技术。该集成液流反应板被称为UFC 板,主要在ADVIA 120 和2120 仪器上应用(图24)。

15、应用其他原理的血细胞分析仪:除了我们常见的电阻式血细胞分析仪以外,还有某些特殊原理的仪器简要介绍如下。

(1)激光法:应用单束激光照射到经过壳流技术处理的排列成一列的单个细胞上,根据细胞阻断激光束的频率以及PMT 收集到的激光折射信号,对细胞的数量、体积进行分析的仪器,以Sebia Hemalyser 3 为代表。目前采用激光法的高档血细胞分析仪开始逐渐升温,许多采用电阻法进行血细胞计数分析的仪器同时也添加了激光分析技术,如著名的VCS 技术就是典型代表。它除了可用于细胞计数外,还适用于对白细胞的分类、红细胞分析、血小板分析和网织红细胞分析等。

(2)离心式血液分析仪:

将血液充入到含义特殊

试剂的毛细管内,在专用离心机上离心,根据血细胞中各种成份的比重不同而分布

在不同的细胞层内的原理,血细胞被吖啶橙染色,

各细胞层会有明显的颜色差异,然后将毛细管放在

特殊的判读机上对不同的细胞层进行定量分析,可

得到红细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、

血小板、血红蛋白等的参数。该仪器适合于携带,并

且不需要液体试剂,非常方便于外出使用,适合于

仅需要对红白细胞、血小板、血红蛋白以及中性粒

细胞和淋巴细胞计数等常用参数的分析,这种仪器有B-D 公司生产的QBC 型。(图25、26)

(3)移动光学法:早期的光学法血细胞计数仪器,采用普通光源,血细胞在移动

过程中被检测到,不能分析细胞的大小和内部结结构,因此仅可进行红细胞和白细

胞的计数,本文在开始部分就做了简易介绍的英国EEL 就是典型代表,现在已经

停产。

二、白细胞分类技术的进展

最早进行白细胞分类的设备仅根据白细胞的体积分布情况将淋巴细胞单独划分

出来。在1970 年起Coulter 公司开始设计

对白细胞进行分类的仪器,并首先推出了两

分类的S-PLUS 系列仪器,然后在1980年

又推出了T系列(图27) ,都是可进行白细胞

两分类的仪器,大家比较熟悉并仍在使用的

Sysmex F800 和F820 型也是根据白细胞

体积分布直方图进行粗略两分群的仪器。目前半自动或全自动型具有18参数含白细

胞三分类的血细胞分析仪已经成为我国医院检验科的主流血细胞分析仪。

仅仅根据简单的体积分析法就将血细胞进行分类,无论是三分类(3-part differential)还是两分类(2-part differential),其实是将细胞按照体积大大小进行了简单的分群处理,实际上是不科学的,因此国内专家和学者建议将此分类统一称呼为分群(group),即两分群型或三分群型血细胞分析仪。

1、白细胞三分群法原理

各种单纯电阻法血细胞分析

仪的白细胞三分群法原理是根据

白细胞体积分布直方图进行分析

和计算得到的。经过特殊溶血剂处

理的白细胞,可将特定的细胞群进

行处理,使得绝大多数淋巴细胞体

积缩小,使得中性粒细胞体积适当

增大。因此在白细胞分布直方图上

出现两个明显的细胞分布峰(图28)。左侧体积较小的一群细胞称为淋巴细胞群(LYM),右侧体积较大的称为粒细胞群(GRAN),位于两者之间的称为中间

细胞群(MID),中间细胞群一般指含有嗜酸粒细胞,嗜碱粒细胞和单核细胞的细胞群。

Coulter 公司的三分群式仪器用于进行白细胞分群的处理器被称为通道处理器(channelyzer). 进行白细胞和红细胞分析的通道可达256个。每个通道表达一定的体积范围。它将体积处于35~90fl 之间的细胞划分为淋巴细胞群;体积处于90~160fl 的划分为中间细胞或单核细胞群;体积160~450fl 的称为粒细胞群。例如Coulter JT-IR 及S-Plus系列。各厂家因所设计的仪器和配套试剂的不同,所设定的各群

细胞的体积范围不尽相同,但采用的方法和计算方法是相近的。三分群法的白细胞百分比与白细胞总数进行计算可以得到各类细胞的绝对值。

此外应用激光技术进行血细胞测定的仪器,通过激光照射每个流过FLOCELL 的细胞,在特点的角度安排散射光接收器,根据接受到的散射光信号的强弱来判断细胞体积的大小,同样能够产生具有明显三个分布峰的白细胞分布直方图,同样可

以进行白细胞三分群的测定,代表性的仪器有Sebia Hemalyser 3 。

2、白细胞五分类法原理

进入90年代中期以来,国外许多厂家已

经不满足于三分类型的血细胞分析仪,逐

步开始研制和推出具有五分类或更多项白

细胞分析技术的全自动型血液分析仪器,

比较著名的厂家有:Coulter 、Sysmex 、

ABBOTT 、Bayer 、ABX等。各厂家使用

的白细胞分类技术多样化,复杂化,使得白细胞分类技术更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品(试剂)

价格的增加。进入2000年以来,国内许多医

院已经把购买血细胞分析仪的目光瞄向了

此类仪器。

(1)采用VCS技术进行五分类的仪器(图

29):这种技术集合三种测定方法于一体,

同时对一个细胞进行多参数分析的方法,是Coulter 公司推出的专有方法。其中V

代表体积测量,也就是传统的电阻法原理,可将体积大小差异显著的淋巴细胞和粒细胞分开;S代表高频电导性,该技术可直接测量细胞内部结构间的差异,了解细胞内部核浆比例和细胞内化学成分,可辨别细胞体积相同而内部性质不同的细胞,可将体积相近的淋巴细胞和嗜碱性细胞区分开,因为他们的核质比例明显不同。S代

表激光散射,它可穿透细胞,探测细胞内核分叶状况和颗粒情况,通过分析光散射信息对细胞内颗粒性进行分析,细胞内颗粒粗的光反射强,因此可以用于单核细胞和三种粒细胞的区分。通过综合处理三个参数的特性,可全面对白细胞的各种特征

进行综合评价分析,得到五项白细胞分类结果(图30)。应用VCS技术的血液细胞分析仪主要有MAXM 、STKS、HMX 等型号。

(2)采用采用阻抗、激光散射和荧光染色技术进行五分类的仪器:这种技术主要应用在Sysmex 研制和开发的SF-3000 、SE-9000 、SE-9500 、XE-2100 、

XT-1800 等系列血液分析仪中。直流电阻抗法(DC)用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测测白细胞体积大小、

细胞内含物的情况( 细胞核以及颗

粒情况),侧向荧光则可以反应细胞

内托样核糖核酸(DNA)和核糖核

酸(RNA )的含量,特有的嗜酸

性粒细胞检测溶血剂

Strmatolyzer-EO 可将除了嗜酸细胞以外

的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜酸细胞

的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进

行计数。在嗜碱细胞通道中,使用特殊溶血

剂Strmatolyzer-BA 可将除了嗜碱细胞以

外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜碱细

胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术

进行计数。幼稚细胞检查通道(IMI)可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有

脂质较少的现象,在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多,对溶血剂有抵抗作用,当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解,

而幼稚细胞不易被破坏,可通过电阻法检测出来。综合各个测量方法,得到白细胞

五分类的图形和数据(图31)。

(3)激光散射和细胞化学染色技术:采用这项技术的为Technicon H1 、H2、H3 型,该类型仪器的最新型号为Bayer 公司的Advia120 型(图32)和新近推出的Advia 2120 型。

仪器在白细胞分类上采用

了白细胞过氧化酶测定通道和

嗜碱粒细胞测定通道。根据细

胞化学染色的特性进行白细胞

分类。各类白细胞对过氧化物

酶的反应是这样的:早期的原

始粒细胞为阴性,原始粒细胞

以下各阶段都含有过氧化物

酶,并随着细胞的成熟而增强。

不同的粒细胞过氧化物酶含量不同,嗜酸性粒细胞具有最强的过氧化物酶,中性粒细胞含有较强的过氧化物酶,嗜碱粒细胞不含此酶。单核细胞除早期原始阶段外,均含有较弱的过氧化物酶。淋巴细胞不含过氧化物酶。根据激光法散射光强度进行的细胞体积的测量同时也获得了细胞大小的信息,在白细胞过氧化物酶散

点图上,X 轴表现过氧化物酶强度,过氧化物酶强阳性细胞位于右端;Y 轴表

现散射光强度信号,位于上方的表示散射光信号强,细胞体积大。除了嗜碱细胞外每个类型的细胞根据它们的特点被记录于特定的位置,在设定的门的范围内形

成分类(图33)。嗜碱细胞则是通过嗜碱细胞和分叶核通道测定的,因淋巴细胞

与嗜碱粒细胞都无过氧化物酶,因此需要通过嗜碱细胞通道,特殊嗜碱细胞试剂可将除嗜碱细胞以外的其他白细胞膜破坏,胞浆溢出,仅剩裸核。被激光照射后仍然保持正常体积的嗜碱细胞位于Y 轴上方,体积小的其他裸核白细胞分布在下方。

(4)多角度偏振光散射法应用于白

细胞五分类(MAPSS 技术):该技术

的基本原理是标本在水动力聚焦系统的

作用下进入检测部,在激光束的照射下,细胞在多个角度都产生散射光。仪器特

别设置了四个角度来收集散射光的信号。0 度为前角光散射,用于粗略判断细胞体积大小;10 度为狭角散射,用于检测细胞结构及其内部复杂性的指标;90 度为垂直光散射,用于对细胞内部颗粒及细胞核分叶情况的分析;90 度偏振光

散射,基于颗粒可以将垂直角度的激光消偏振的特性,将嗜酸性细胞从中性粒细胞和其他细胞中分离出来。根据散射光的角度和位置,仪器内部的四个检测器可以接收到相应的信号,由仪器内部的微处理器进行分析处理,不同的细胞将被安

置在散点图上的相应位置,根据计算将结果白细胞分类结果得到(图34)。开发和采用这种技术的为ABBOTT 公司生产的CD-3200,CD-3500,CD3700,CD4000 等型号。

(5)采用图像分析的单纯细胞分类仪,以80 年代日本日立公司生产的-8200 为代表。该仪器完全

采用图像分析法,将血片染

色,用含有扫描镜头的显微

镜扫描每个视野,将获取的

细胞图像与仪器内存储的

标准图像进行对照分析,判

断该细胞的类型。此类仪器

需要大型的计算机系统支

持,由于在当时电子计算机

图形识别和分析技术还不很发达,因此该类设备发展收到一定程度的限制,分析速度慢,在细胞判断的准确性上也不尽人意,没有流行起来。现代的计算机图形图像分析技术,由于电子计算机运算速度的飞速发展,已经有了很大的进步,如果能继续开发此类设备,因为其具有非常直观性,与人对细胞的判断分析方法非

常接近,想必会大有前途(图35)。

四、血细胞分析仪的发展近况和展望

近年来由于电子计算机技术的飞速发展,在血液分析仪上也不断采用了最新的电子、光学、化学技术,由于临床工作对于血液细胞分析内容的要求的增加,

提供更加方便、更加适用、更多功能、更加准确、更快速度和更多参数的血液分

析仪,已经是各血液分析仪生产厂商的目标。

1、血常规检验多参数化:近年来许多仪器都在增加新的参数以满足临床在诊断和鉴别诊断方面的需求。最早加入到并得到公认的参数是红细胞体积分布宽度(RDW), 目前该参数已经成为许多型号血细胞分析仪的标准参数,在各种贫血的诊断和治疗中起着重要作用,而该参数是很难应用人工方法测定的。随后有关平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、大血小板比率、血红蛋白浓度分布宽度、异常淋巴细胞提示、幼稚细胞提示等各种参数和功能也不断的添加到一些品牌的仪器上,目前有的仪器甚至可以提供40~50 种测量

或计算参数。但很多的新参数目前仍不能应用于临床,仅限定在实验室中,或供研究使用。

2、多功能合成扩展:血细胞分析仪已经不仅仅局限在进行常规血细胞分析,它增加了许多扩展的功能。例如将

网织红细胞的计数和分析功能

加入其中,例如BAYER ADVIA

120;SYSMEX

SE-9000/SE-9500/XE-2100;

COULTER MAXM/STKS/HMX

型;ABBOTT CELL-DYN3200/3500R/4000;ABX 120 等。一些仪器另外增加了幼稚细胞分析和有核红细胞分析功能,例如SYSMEX

SF-3000/SE-9000/SE-9500/XE-2 100;BAYER ADVIA 120;ABBOTT

CELL-DYN/3500/4000 等。更有一些仪器把流式细胞分析仪的某些简单功能进行了合并,这样在常规血液分析仪上就可以得到某些淋巴细胞亚群的分析结果,例如在COULTER STKS 上可以同时测定CD4 和CD8 ,在ABBOTT CELL-DYN4000 上可以测定CD3、CD4、CD8 和CD61,使得一机两用(图36)。此外BAYER 最新发布的ADVIA 2120 型血液细胞分析仪又将脑脊液的细胞分析功能加入进来,使用

特殊的试剂和程序,可对脑脊液中的红细胞,白细胞和分类进行测定。

3、检测速度的提高:许多仪器由于增加了自得进样系统,使得测定速度加快,已经不满足于每小时检测60 个标本的需求,一般可以达到每小时80~100 个样品,在不包含网织细胞检测的情况下,BAYER ADVIA 120 可以达到每小时120 个标本;而SYSMEX KX-2100 可以达到每小时150 个标本。这些仪器都可以在自动成批进样

的同时,随时插入急诊检验的标本。

4、方法的改进和进展:为了达到更加准确的计数和分析结果,血细胞测定和

分析的方法已经不局限于某一种单一的方法,如单一的电阻抗法或激光散射法,而是互相结合,在前面的文章中以有介绍。除了在白细胞分类上采用多种处理方法外,在红细胞和血小板分析上也采用了光学和电阻法结合的处理方法,以期得到更正确

的结果;对红细胞体积进行三维空间分析(3D),对红细胞进行体积大小和色素含量的分析;对血红蛋白测定不仅使用比色法,同时还使用激光散射法进行单个红细胞血红蛋白量的分析,以尽量减少高WBC、乳糜血、高胆红素等对血红蛋白比色的影响等技术的应用。由于方法的改进,这些仪器已经不仅仅采用2~3 种试剂来完成测定工作,常常是6 种以上的试剂联合使用,才能够适应这些方法,例如Bayer Advia 120 型需要多达11 种试剂,而这些试剂由于技术含量较高,因此还没有替代产品。

5、应用的方便性:对于操作这来说,仪器最大的优越性还应该体现在操作的

方便行和自由性上。许多厂家都考虑到了这一点。例如可以使用静脉血液、也可以使用末稍血液;可以在标本量很大的情况下选择全自动进样系统,也可使用单独闭盖或开盖取样系统,要知道闭盖全自动进样或单独进样对操作者是非常安全的操作方式;或对项目可作适当的组合,以适应临床及患者的需求,例如操作者可以选择

CBC 方式(仅计数、不分类)、CBD+DIFF 方式(计数加分类)、RET 方式(网织红细胞分析)、有核红细胞分析(NRBC)、幼稚细胞分析等项目,还可将它们

任意单选或组合;条码的应用给标本编号提供了方便,仪器通过自动扫描条码,来鉴别标本的来源、需要检测的项目和区分患者,最后根据条码提供的信息将结果返回到临床或病人档案中,为检验数据的电子化提供了极大方便,也减少了编号带来的差错。上述的许多功能已经在许多新型的高端五分类式血液分析仪中得到实现。

6、产品的系列化:各有实力的公司不断开发系列化产品以满足不同类型用户

的需要。例如COULTER 公司早期的S 系列、T 系列,近期的AC·T 系列仪器,有最简单的AC·T 8 型只有8 个参数到12 参数,到含有18 参数三分类的AC·T DIFF ,到具有5 分类的AC·T 5-DIFF ,甚至还有可增加动物血液分析的型号。日本SYSMEX 、美国ABBOTT 、日本光电MEK 以及ABX 都有各种系列化仪器

不断推出,以满足各种用户的不同需求。7、流水线化:在全自动血液分析仪器的

基础上实现全自动流水线化,是血液分析的又一大飞跃,但这需要雄厚的资金支持。

SYSMEX 的HST 小型血液分析流水线将

电脑控制终端、SE-9000 血细胞分析仪、R-300 网织细胞分析仪、SP-100 血片涂

片机结和在一起,使血液标本从计数开始自动按程序运行到推片和染色结束,全部

自动进行(图37)。近年来ABBOTT (图38)、COULTER 、SYSMEX 等许多血

液分析仪制造厂商都有类似小型血细胞分析流水线系统推出。

笔者曾经在日本一所著名的大学医院参观,该实验室的自动化流水线大的惊人,从病人抽血取样开始,由实验室前处理设备自动对血标本进行分检,自动离心,然后在充满整个实验室的连通轨道上进行传送,血标本根据条码上的各种信息走到相应的设备上自动取样和测定,测定后的标本(包括血液、凝血、生化、免疫各种实验)自动盖好盖子,自动进入大型冰箱内储存。而各种仪器测定的结果经过网络传入终端设备,由实验室医生核定签发后,经过医院网络进入医生诊室和电子病历。

整个实验室只有20 余个工作人员,而在前台抽血或接收标本一般工作人员,与在后

台签发报告和进行形态学检查的工作人员占了很大比例,真正在操作机器的技师则很少。实验室前处理设备和连接轨道以及电脑控制系统是实现实验室全自动化的关

血细胞分析仪

深圳大学实验报告 课程名称:体外诊断仪器原理与实践 实验项目名称:血细胞分析仪 学院:医学院 专业:医疗器械工程 指导教师: 报告人:学号:班级: 实验时间: 2014-05-09 实验报告提交时间: 教务部制

方法、步骤: 实验仪器: 三分类血细胞分析仪: 一、简要操作指南及注意事项 1、开机前的准备 检查试剂是否足量,有无浑浊变质,试剂管道有无扭结,并倒空废液瓶2、开机

综上可知: 不同脉冲波的大小表示细胞体积的不同. 不同脉冲波的数量即为细胞的个数 库尔特原理主要由测量杯、小孔管、内外电极等组成。其中 , 小孔管(主要是红宝石孔)下图 是整个测量系统的主要部分 , 它决定了血球分析仪的测量准确度。小孔越小(大概100

μ米那样) , 测量准确度越高 , 但易造成堵孔 ; 小孔越大 ,测量准确度越低 , 但不易堵孔。目前市场上销售的利用电阻抗法设计的血球分析仪的竞争焦点就在于把小孔做得小而不易堵孔 ,为了实现细胞逐个通过可采用鞘流法,根据两侧鞘流的流速不同使细胞一个个的进入孔内从而不造成堵孔和细胞并排进入的误差的问题(如下图): 其排堵方法大致有反冲法和电灼烧法两种 , 或二者兼而有之。测量系统得到的电平信号经放大、阈值调节、甄别、整形后进行计数 , 得到 RBC、WBC、PLT 的数量。但三者的计数原理又略有不同。白细胞计数时 , 机内微型计算机按体积大小将白细胞从 30~45fl 分为 256 个通道 , 每个通道为1164fl。根据细胞大小被分别放在不同的通道中得到白细胞体积的直方图 , 根据体积大小可分为不同的细胞群 , 第一群主要是淋巴细胞 , 第二群主要是单核细胞 , 第三群为粒细胞 , 这就是“三分群法”也就是常说的三分类。 红细胞计数原理同白细胞计数原理大致相同。在红细胞计数的同时 , 把各脉冲幅度相加 , 得到红细胞的总体积 , 经计算得到红细胞的平均体积。血红蛋白的测量通常用比色法得到。红细胞的平均体积 (MCV) , 红细胞平均血红蛋白含量 (MCH) , 平均血红蛋白浓度 (MCHC) , 红细胞体积分布宽度(RDW) 都是通过计算得来的。血小板计数时 , 微型计算机按体积分成 64 个通道 , 范围为 2~28fl 之间 , 血小板的平均体积(MPV) 是计算得来的

迈瑞-BC-5380血液细胞分析仪标准操作程序资料

迈瑞-BC-5380血液细胞分析仪标准操作程序 适用于血液白细胞计数及分类,红细胞计数,血红蛋白,血小板计数,红细胞压积,红细胞体积分布宽度,平均红细胞血红蛋白含量,平均红细胞血红蛋白浓度,平均红细胞体积,血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等检验。 2 仪器设备试剂 BC-5380血液细胞分析仪专用试剂:M-53D稀释液;M-53LEO(I) 溶血剂;M-53LEO(II) 溶血剂;M-53LH 溶血剂;M-53 清洁液;M-53P 探头清洁液。所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。变质、超过效期的所有试剂不能使用。 3 仪器设备标本 原始样品采集、制备、处理、检验和存放见检验科相关规范。 4 仪器设备性能参数 BC-5380血液细胞分析仪一般资料见附件1;BC-5380血液细胞分析仪性能指标见附件2。 5 仪器设备环境要求,使用安全措施 5.1 仪器设备环境要求 5.1.1 空间安装要求 仪器应安装在稳固工作台上。在仪器两侧各保留至少1米的空间,以方便维护和保养。后部至少要有0.50米的空间,以防止阻碍热气的排放并保证主机后的液路管道不受挤压。将BC-5380血液细胞分析仪安放在通风良好、灰尘少的地方。避免在过热或过冷以及日光直射的环境中使用BC-5380血液细胞分析仪。保证操作台面以及主机下方有足够的空间放置稀释液、废液桶。 5.1.2 运行条件 环境温度要求:10℃~40℃。 环境相对湿度要求:10%~90%。 电源电压要求:100~240VAC,50/60Hz。 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰;仪器附近无强电磁干扰源以及电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备;不应放在通风条件差、阳光直射的环境中,或热源及风源前。 5.2 仪器安全 在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品,避免引起火灾和爆炸。 在电源打开状态下,禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板,以免损害线路板;禁止触摸BC-5380血液细胞分析仪外壳里面的电子元件,尤其避免湿手触摸,以免造成电击。 仪器设备使用前,必须认真检查设备之间连接及外接线(件)是否正确、正常,电源插头是否正确插接,设备是否处于正常状态。实验过程中如遇水、电故障或中断,应立即关闭影响仪器设备安全的有关开关,并实施安全保护措施。 仪器设备的运输必须按BC-5380血液细胞分析仪使用说明书规定进行搬运,禁止鲁莽装卸,应避免倾斜,振动和碰撞。 如果标本、试剂溢出在分析仪上,立即擦掉并依照检验科相关规范处理。 5.3 人员安全 仪器设备中所有与病人的样品接触或有潜在性接触可能的表面与零件都视污染物。

三分类血液细胞分析仪与五分类区别

三分类血液细胞分析仪与 五分类区别 This manuscript was revised by the office on December 22, 2012

三分类血液细胞分析仪与五分类区别 血液细胞分析仪又名血细胞分析仪,目前市场上的血细胞分析仪主要分为全自动的和半自动的仪器。随着该仪器成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展,产品也从三分群转向五分群,从二维空间转向三维空间,对于三分类血液细胞分析仪与五分类仪器有何区别呢? 1、仪器检测原理的区别 三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术,由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成;五分类的产品大都采用光散射检测技术,主要由激光源(多采用氩离子激光器,以提供单色光)、检测区(主要由鞘流形式的装置构成,以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流)、检测器(散射光检测器系光电二极管,用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号;荧光检测器系光电倍增管,用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号)。 2、白细胞分类方法的区别 三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞,单核细胞,粒细胞;五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞(中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞)。 3、适用客户的区别 三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等,价格相对要便宜很多;而五分类的产品主要用于三甲以上的医院,价格以及试剂方面要贵很多。 随着当前临床检测的需要,各种血液细胞分析仪不断涌现,小编个人认为产品没有好坏之分,主要是选择合适自己的,客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择

血细胞分析仪检测原理

?继续教育园地? 血细胞分析仪检测原理 乐家新 周建山 兰亚婷 传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。20世纪90年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。 图1 细胞计数电阻抗原理 作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科 一、电阻抗法血细胞分析技术 (一)电阻抗法白细胞计数和分类原理 电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。在等渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细胞的体积成正比。脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。图1显示出血细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方 法及过程。 目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示细胞群体分布情况的图形———直方图。可显示出某一特定细胞群的平均细胞体积、细胞分布情况和是否存在明显的异常细胞群,由脉冲累积得到。如图2所示,左图为示波器显示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。 在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35~450fl 分为256个通道,每个通道约为1164fl ,并将每个白细胞的脉冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。再由计算机拟合成一条平滑曲线,从而得到白细胞体积分布直方图(见图3),其纵坐标表示白细胞的相对数量(REL No 1),横坐标表示白细胞体积(单位:fl )。 电阻抗法得到的白细胞分类值是根据各群细胞在白细胞直方图上所占面积的大小计算得来的(见图4)。白细胞计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血剂一方面使红细胞溶解;另一方面使白细胞浆经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包核”。仪器将体积在35~450fl 的这种颗粒认定为白细胞,并根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三个细胞群。在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又高又陡的峰,分布在35~90fl 范围,以成熟淋巴细胞(L YM )为主要特征细胞;大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,

三分类血液细胞分析仪与五分类区别

三分类血液细胞分析仪与五分类区别 血液细胞分析仪又名血细胞分析仪,目前市场上的血细胞分析仪主要分为全自动的和半自动的仪器。随着该仪器成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展,产品也从三分群转向五分群,从二维空间转向三维空间,对于三分类血液细胞分析仪与五分类仪器有何区别呢? 1、仪器检测原理的区别 三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术,由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成;五分类的产品大都采用光散射检测技术,主要由激光源(多采用氩离子激光器,以提供单色光)、检测区(主要由鞘流形式的装置构成,以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流)、检测器(散射光检测器系光电二极管,用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号;荧光检测器系光电倍增管,用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号)。 2、白细胞分类方法的区别 三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞,单核细胞,粒细胞;五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞(中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞)。 3、适用客户的区别 三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等,价格相对要便宜很多;而五分类的产品主要用于三甲以上的医院,价格以及试剂方面要贵很多。 随着当前临床检测的需要,各种血液细胞分析仪不断涌现,小编个人认为产品没有好坏之分,主要是选择合适自己的,客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择购买三分类的还是五分类的产品。现在临床应用而言,三分类的仪器应用更为广泛,目前汉方的血液细胞分析仪均采用三分类的仪器,无论是在价格上、操作方法上,还是在检测结果上都不亚于五分类仪器。

BC-5390-CRP血液细胞分析仪标准操作程序

BC-5390 CRP血液细胞分析仪标准操作程序 1 仪器设备检验项目 适用于血液白细胞计数及分类,红细胞计数,血红蛋白,血小板计数,红细胞压积,红细胞体积分布宽度,平均红细胞血红蛋白含量,平均红细胞血红蛋白浓度,平均红细胞体积,血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等检验。 适用于血液C-反应蛋白的检测。 2仪器设备试剂 BC-5390 CRP血液细胞分析仪专用试剂:M-53D稀释液;M-5LEO(I) 溶血剂;M-5LEO(II) 溶血剂;M-53LH 溶血剂; M-53P 探头清洁液;LC 溶血剂;C-反应蛋白(CRP)测定试剂盒(乳胶免疫比浊法)。所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。变质、超过效期的所有试剂不能使用。 3 仪器设备环境要求,使用安全措施 3.1 仪器设备环境要求 3.1.1 空间安装要求 仪器应安装在稳固工作台上。在仪器两侧各保留至少1米的空间,以方便维护和保养。后部至少要有0.50米的空间,以防止阻碍热气的排放并保证主机后的液路管道不受挤压。将BC-5390 CRP血液细胞分析仪安放在通风良好、灰尘少的地方。避免在过热或过冷以及日光直射的环境中使用BC-5390 CRP血液细胞分析仪。保证操作台面以及主机下方有足够的空间放置稀释液、废液桶。 3.1.2 运行条件 环境温度要求:-10℃~40℃。 环境相对湿度要求:10%~90%。 电源电压要求:100~240VAC,50/60Hz。 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰;仪器附近无强电磁干扰源以及电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备;不应放在通风条件差、阳光直射的环境中,或热源及风源前。 3.2 仪器安全 在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品,避免引起火灾和爆炸。 在电源打开状态下,禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板,以免损害线路板;禁止触摸BC-5390 CRP血液细胞分析仪外壳里面的电子元件,尤其避免湿手触摸,以免造成电击。 仪器设备使用前,必须认真检查设备之间连接及外接线(件)是否正确、正常,电源插头是否正确插接,设备是否处于正常状态。实验过程中如遇水、电故障或中断,应立即关闭影响仪器设备安全的有关开关,并实施安全保护措施。 仪器设备的运输必须按BC-5390 CRP血液细胞分析仪使用说明书规定进行搬运,禁止鲁莽装卸,应避免倾斜,振动和碰撞。 如果标本、试剂溢出在分析仪上,立即擦掉并依照科室相关规范处理。

全自动五分类血细胞分析仪技术参数及规格要求

全自动五分类血细胞分析仪技术参数及规格要求 1、测试参数:不少于31项,可提供23项基本参数WBC、LYMPH%、LYMPH#、NEUT%、NEUT#、 MONO%、MONO#、EO%、EO#、BASO%、BASO#、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD、PLT、PDW、MPV、PCT及四项研究参数ALY%、ALY#、LIC%、LIC%(异淋和巨大未成熟细胞检测)和WBC/BASO散点图、4DIFF散点图、RBC直方图、PLT直方图。 △2、测量原理:WBC五分类双通道检测,采用半导体激光散射、细胞化学染色检测;无氰溶血剂测HGB。 △3、操作软件:全中文操作,无需外配电脑主机即可实现中文输入。 △4、样本模式:静脉全血、预稀释末梢血;样本量:静脉全血≤200ul,预稀释末梢血≤40ul 。△5、测试速度:不少于80样本/小时;配自动进样器,每次可装载40份标本以上。 △6、工作模式:全自动进样和手动进样兼备,并配有内置稀释器,末梢血预稀释模式无需手工加入稀释液,可用预稀释末梢血模式实现WBC五分类,并有急诊样本优先检测功能。 △7、分析模式:全血CBC模式,全血CBC+5DIFF模式;预稀释末梢血CBC,预稀释末梢血CBC+5DIFF模式。 △8、显示屏:彩色大屏幕TFT全中文触摸屏。 △9、资料储存:不外接电脑,主机可储存不少于40000份的样本完整结果,包括所有中文信息和全部散点图及直方图。 10、定量系统才有陶瓷分血阀装置,并且具备分血阀自动维护程序。 11、试剂:可提供原厂配套试剂,具备试剂预加温功能。 12、数据输出:具备USB接口和网络接口,可支持USB接口打印机、支持101标准键盘、 支持外接条码扫描仪,具备联网功能,可支持激光、喷墨、针式等多种打印机。 13、报告单格式:测量结果必须中文打印,多种报告格式可选。 △14、售后服务:本省有仪器厂家设立的售后服务中心和零配件中心,并有多名专业维修工程师提供服务,实现365天24小时全天候售后服务。 15、运行环境:电压:宽电源设计(100-240V),湿度:10%-90%,温度:10℃-40℃。 注:带“△”为重要技术参数。

迈瑞血细胞分析仪

迈瑞血细胞分析仪 Document number:WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT

BC-3000PLUS血细胞分析仪工作原理及故障分析 摘要:本文主要介绍了BC-3000PLUS血细胞分析仪的工作原理和其常见的一些故障分析与处理方法。 前言 目前我国大型医院在血常规检查时多采用五分类血球仪,但其机器及试剂成本过高,在医院大型体检和乡镇医院,三分类的血细胞分析仪任占有不可取代的地位,迈瑞BC-3000PLUS血细胞分析仪以其价格合理,性能稳定,重复性好等优势,成为市场上占有率最高的三分类血球仪。现将其工作原理和使用过程中可能遇到的问题与分享,介绍如下。 工作原理:该仪器采用库尔特.贝克曼原理对血液中的WBC、RBC、PLT进行计数,并对WBC分类,利用朗伯.比尔定律对HGB进行测量。 常见故障:该血球仪常见的故障主要分为机械故障、液路故障、结果异常等 一机械故障 BC-3000PLUS机械运动部分主要有采样针组件,用其实现标本采集、稀释、混匀等功能;注射器及注射器电机组件,用其实现样本和试剂的定量及机器管路的清洗; 1升降/偏转电机故障 BC3000PLUS血细胞分析仪采用德国进口步进电机,()上下各一个,上面的控制升降,下面的控制偏转,在工作时,功率驱动板接受CPU板的控制信号,给电机提供驱动电压,带动采样针的上下左右的动作。在特定的位置,装有光耦,用来确定采样针的位置,上面一个长线的为升降电机光耦,下面两个短线

的为偏转电机光耦。若在规定的时间,光耦没有被触发,或者光耦没在规定时间就被触发,则机器报相对应的电机故障。 故障处理方法:若出现这样的报警,先进入服务菜单进行自检,其步骤如下,“菜单——服务——系统检测——升降/偏转电机检测”,如果结果正常,则故障消除。若故障无法消除,检测1温度是否太低2丝杆脏,阻力大3运动过程中是否有东西阻挡运动部件4上下光耦故障5电机故障6驱动板坏。另外,由于升降电机的运动优先于偏转电机,当升降电机故障时可能会导致机器报“偏转电机故障”的警。 维修案例 现象采样针无法正确偏转到计数池上方机器,机器报“偏转电机故障” 处理过程及故障分析进入维修菜单,做偏转电机自检,正常,但是再做标本,故障依旧。因为可以完成自检过程,而且上下左右的运动都比较流畅,可以排除电机自身故障、阻力过大故障、阻挡、驱动板供电不足故障,而且光耦能传递位置信号。再仔细观察计数过程,发现给偏转定位并控制采样针搅拌的那个小孔(在偏转电机上方的一个两层塑料环上)通过右光耦时机器没能控制偏转电机停下,判定是该光耦的问题,拆下擦拭后机器正常。 2注射器电机故障 BC-3000PLUS一共有三个注射器、两个电机,其中10ml注射器由一个电机推动、另外50ul和的注射器由同一个电机推动。电机工作原理跟升降/偏转电机原理相同,每个电机对应一个光耦。当光耦没有按规定被触发时,机器报相应的电机故障。

血细胞分析仪发展史

血细胞分析仪50年的发展历史和展望 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民 1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜(图1),1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍 克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最 原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞 的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计 并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。 自从发明了显微镜以后,人们从微观世界中了解和观察到 了血液的组成,并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和 白细胞和血小板。在以后的研究中,人们发现许多疾病的发 生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对 疾病诊断的需求,人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法,1855 年发明了用于计数血细胞的计数板,目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的 经典一种,虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用,但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术,它不仅适用于血细胞计数,还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品,因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能,是不应该忘记和放弃的手段。 随着对血细胞计数和分析需求的不断增加,对血细胞计数的方法进行改进,实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高,现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似,但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾,并对最新的进展进行介绍和展望,期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。 一、血细胞计数仪的发展历史 谈到血细胞计数仪的发展史,在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter (图2a,b),他年青时对电子学

血细胞分析仪操作规程

DIRUI迪瑞 BF-6700 全自动无分类血细胞分析仪操作规程 一、开机程序 1.1开机前的检查、准备 (1)试剂:检查稀释液、溶血剂是否充足,有无过期;试剂管路是否弯折,连接是否可靠。(2)废液桶:废液桶是否有足够的空间盛装废液,如废液桶满,应及时倒掉并清理。(3)打印机:检查打印机是否正确安装,打印纸是否充足。 (4)供电电源:检查电源线是否正确连接。 (5)连接:检查分析仪与计算机主机之间通讯电缆是否正确连接;外置条码扫描仪的电缆线是否与计算机连接就绪。 1.2开机 (1)打开分析仪右侧的电源开关,电源指示灯亮。 (2)打开电脑电源后启动分析仪软件。输入用户名和密码,登录软件。(初始用户名为Admin,初始密码为1。) (3)自检过程结束后,系统进入操作界面。 二、校准 分析仪提供三种校准方式:人工校准、校准物校准和新鲜血校准。 2.1人工校准 在“人工校准”界面直接更改校准系数,点击“保存”键。 2.2校准物校准与新鲜血校准 在校准物校准和新鲜血校准中,所有与校准相关的数学计算都由分析仪自动完成,同一次校准物校准测试需用同一批号的校准物,测试3—5次,建议5次。新鲜血校准测试需3—5各样本,每个样本测5次。校准后得到的校准系数自动保存在“人工校准”界面。 校准物校准步骤: 在校准物校准界面点击【开始计数】键后,封闭进样器仓门自动打开,将校准物放置在封闭进样器3号位上,关闭进样仓门,按分析仪前面板右侧的计数键进行测试,测试结构自动保存,测试5次后点击【保存】键,校准系数自动存入“人工校准”界面的“校准系数”中。

新鲜血校准的操作步骤与上述相同。 三、质控程序 每天开机后要先进行质控测试。 3.1质控设置 在“质控”的设置界面下,设置质控品信息。 3.2质控测试 在“质控计数”界面进行质控测试。点击【开始计数】键后,封闭进样器仓门自动打开,将质控品放置在1号位上,关闭进样仓门,按分析仪前面板右侧计数键进行质控测试。可在“质控图”及“质控列表”中查询质控结果。 四、常规操作程序 4.1试剂注册 4.1.1自动扫描 在分析仪软件上点击【服务】,在“维护”栏中点击【试剂注册】,用手持条码阅读器扫描试剂条形码,软件提示“注册成功”。 4.1.2手动输入 如果条形码由于脏污、脱落等原因不能被扫描时,可手工输入条形码信息:在输入框中录入正确的条码信息,点击【确定】键,试剂条码注册成功。 注:更换整瓶/整桶试剂时,注册成功后,在“服务”→“维护”→“更换/灌注”界面下点击【更换】键,软件提示“正在更换……”,当软件提示“操作完成”时,点击【确定】键,即完成试剂的更换。 4.2样本登记 (1)在分析仪软件上点击【样本登记】,然后点击【设置】,可以设置患者信息的输入项目。设置完成后可按此设置内容作为默认项目类型进行样本信息输入。 (2)点击【新增】,在界面左侧编辑区可直接输入样本编号、条码号、病历号、患者姓名、年龄、床号;采样/送检时间可在其右侧的下拉框中直接选择时间;参考值、性别、科室、送检医生均可在其右侧的下拉框中选择,或直接输入预先在“设置”中设置的代码。编辑后点击【保存】键或者按键盘回车键即可进行下一样本的编辑。 注:也可先进行样本测试,测试后在“数据浏览”界面编辑样本信息。

全自动五分类血液细胞分析仪技术参数要求

全自动五分类血液细胞分析仪技术参数要求: 1.检测原理:多角度激光散射结合细胞化学染色技术,独立嗜碱性粒细胞检测 通道; 2.*检测项目≥35项; 3.分析模式:CBC,CBC+DIFF; 4.测量模式:全血、预稀释全血、末梢全血; 5.*标本用量:全血模式:CBC≤12ul,CBC+DIFF≤15ul;预稀释全血≤20ul; 6.检测速度:≥60样本/小时; 7.*检测线性范围: WBC:0.00×109/L~400.00×109/L RBC:0.00×1012/L~8.00×1012/L HGB:0 g/L~250g/L PLT:0×109/L~5000×109/L 8.*重复性: WBC≤2.0% RBC≤1.5% HGB≤1.5% MCV≤1.0% PLT≤4.0% 9.*质控品、校准品:有仪器厂家原厂生产并通过省级SFDA注册的校准品、质 控物,保证仪器检测结果准确性,并提供注册证复印件; 10.*溯源性:投标时需提供五分类血细胞原厂生产校准品的国际溯源性检测报告复印件; 11.*配套试剂:有仪器厂家原厂生产并通过SFDA注册/备案的配套试剂,并提供注册证或备案凭证复印件; 12.*试剂种类:仅需两种溶血剂和一种稀释液和一种清洗液,降低使用成本; 13.显示类型:10寸以上彩色液晶显示屏,同屏显示全部参数,便于基层操作人员使用; 14.数据管理:4个USB接口,支持连接U盘、打印机、鼠标、键盘等;

15.质控方式:L-J质控和X-B浮动均值法质控; 16.工作环境:温度:10-30℃,湿度:20%-85%,气压:70kPa-106kPa; 17.中文软件与细胞分析仪同一品牌(或同一厂家),并提供证明材料。 18.*生产厂家具有血液分析标准化实验室(非检测中心),并且获得CNAS(中国合格评定国家认可委员会)颁发的标准化实验室认可证书,确保血液分析系统的溯源有效性和检测质量; 19*质评报告:投标设备系列产品参加安徽省临床检验中心室间调查,PT评价合格,并提供医院安徽省临床检验中心室间调查报告复印件; 20.售后:生产厂家在安徽省境内设有常驻办事处和维修点,并提供证明材料; 21.*售后服务人员:提供5名以上厂家售后服务工程师的本地社保证明(包括:社保卡正反面复印件及在合肥社保局查询截图),真实有效; 22.投标系列产品通过FDA认证。 参数说明: *项为关键项参数,每一*项不符合将导致废标;非*号项参数每三项(含三项)以上将导致废标;

血细胞分析仪的工作原理

血细胞分析仪也就是我们所说的血液细胞分析仪,也被叫做血球仪、血球计数仪等。是临床检验中较为常见的检验分析仪器,它可以检查红细胞,白细胞,血小板计数. 该仪器提高了实验结果的准确性,还提供了许多实验指标,对疾病的诊断和鉴别诊断起了重要的作用。了解血细胞分析仪的工作原理可以让我们更好的使用该设备。 选择一款好的血细胞分析仪我们需要考虑很多,像品牌、质量、口碑、价格等等。综合看来国产血细胞分析仪的性价比相对较高,而如今也已有越来越多的医院开始选用国产设备了。可见国产设备也是很好的选择。 (普朗医疗品牌-- XFA6100A型血液细胞分析仪) XFA6100A型血液细胞分析仪,该设备是三分类双通道二十二项,全部中文(或英文)菜单显示,设备采用嵌入式、触屏式双操作系统以及成熟稳定的管路设计和精确的丝杆传动方式。 XFA6100A特点: 1、采用嵌入式、触屏式双操作系统对测量数据和图形自动进行运算、分析、处理保证测量准确、可靠。 2、TFT 显示各种测量参数和直方图、全部中文(或英文)菜单显示。 3、由中文打印机直接打印测量结果,八种报告单打印模式。还可外接打印机。 4、仪器具有自检和维护功能,开、关机时自动清洗取样器和管路,在待机状态时自动定时清洗。

5、具有自动和手动排堵方式,采用智能化瞬时高压电蚀和正压反冲双功能排堵,有效避免堵孔。 6、采用时间计数和先进的波形分析技术,配合高速数据采集和强大的数据处理系统,保证测量准确有效 7、成熟稳定的管路设计结合先进的扫流技术,,精确的丝杆传动方式,保证系统的稳定和可靠 8、浮动界标算法和异常提示功能,可有效帮助用户识别和筛选异常血样 9、系统可进行通用、成男、成女、儿童和新生儿参考值设定和编辑 10、仪器具有RS232接口、USB、PS2、并口接口。

血细胞分析仪

1.奥巴克斯(Abacus) : Abacus、Abacus Junior 2. 雅培(Abbott) : CELL-DYN1200、CELL-DYN 1500、CELL-DYN 1600、CELL-DYN 1700、CELL-DYN 3000、CELL-DYN 3200、CELL-DYN 3500、CELL-DYN 3700、CELL-DYN 1800 3. ABX : Micros 60、Micros 45、Micros vit、Micros CRP、Pentra60、 Pentra120、Pentra80 4. 拜耳(Bayer) : Advia 60、Advia 70、Advia 120、Advia 2120 5. 倍爱康(Biochem) : Spirit 6. 百特(BT) : 2100 7. Careside : H2000 8. 库尔特(Coulter) : Act diff / diff II、Gens、Md2、Maxm、Stks、Act 5Diff、HmX 9. 丹能(Danam) : Excell 18、Excell 22 10. Hema : Screen 18、Star II、Star III、Hs Compact 11. HL : 2200、2400 12. 法国Hycel : Celly、Hemacell、Diana5 13. MC : 1200、1200-2 14.日本光电(Mek) :Mek -5216K、Mek -6108K、Mek -6318K、Mek -8118K、Mek - 7222 15. Medicon : 4000 16. 麦道尼克 (Medonic) : CA530、CA570 17. Melet : Ms4、Ms9、MS9-3H、Ms4-5、Ms9-3 18. 深圳迈瑞(Mindray) : Bc2000、Bc3000、Bc1800、Bc2200、Bc2800、Bc3200、 Bc2300、Bc5500、Bc2600、Bc2900、Bc5100、Bc5500、Bc2100、Bc5380 19. 日本东亚(Sysmex) : F800、F820、K4500、Kx21、Poch-100i、Sf3000、Kx21N、 Poch-80i、Xt1800i、Xt200i、Xs800i、Xs1000i

五分类血球原理总结

血细胞分析仪五分类检测技术与原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着近几年计算机技术的日新月异的发展,血细胞分析的技术也从三分类转向五分类,从二维空间进而转 向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非 常先进的流式细胞仪相同的技术,如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。本 文重点就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述 1、电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法 这是Coutler公司1987年推出的新技术,血球悬浮在电解液中,用一定的电流通过传感器的内外两个电极,由于血细胞电阻抗很大,当血细胞通过两个 电极时,电极间阻抗瞬间增大,形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲,根据 脉冲的大小可测出细胞的体积。在测量红细胞时,利用一个脉冲甄别器,将幅 度较小的血小板脉冲去掉,保留红细胞和白细胞脉冲,因血液中白胞的数量不 及红细胞的1/500,故其总数据近似认为是对红细胞计数。在测量白细胞时, 利用溶血素,使红细胞溶解,再对剩下的白细胞计数。在对血小板计数时,调 低脉冲甄别器的阈值,计出总数,再减去红细胞的计数(其中已包括白细胞的 计数),即为血小板计数。由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相 同,故仅靠体积是不能完全区分,利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部 结构可以弥补这一缺陷。虽然细胞壁不能使低频电流通过,但能通过高频电流,细胞核的大小和密度不同,它们对高频电流的阻抗也不同,因此可以用来区分 白细胞。激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。激光散射对 细胞颗粒的结构和密度的区分能力强,粗颗粒产生的光散射比细颗粒强,借此 可将粒细胞区分开来,美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分 析仪五分类就是利用电阻法、高频电导及激光散射联合检测法 2、光散射和细胞化学染色联合检测法 它利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。嗜酸性粒细胞有很强的过氧化氢酶活性,中性粒细胞浆内含有较为丰富的过氧化氢酶,单核细胞 次之,原始细胞则极少,而淋巴细胞和嗜碱性细胞则缺管此酶。使用微量血液 经与含有清洗剂和甲醛的高渗液体进行适当稀释并孵育几十秒钟,此时细胞被 清洗剂所破坏,白细胞浆内酶固定,此后继续再进行第二次反应,加入过氧化 氢和四氢一萘酚加热,此时待测细胞中过氧化氢酶分解过氧化氢产生氧,后者 使四氯一萘酚显色并沉淀定位于含酶的颗粒中,此类细胞经激光束,由于光散 射及细胞大小不同而被分类。显然暑碱性细胞、淋巴细胞、原始细胞由于不含

五分类全自动血细胞分析仪

五分类全自动血细胞分析仪 1、白细胞五分类全自动血细胞分析仪,检测速度CBC/Diff ≥59 标本/小时。 2、测定参数包括细胞计数,细胞分类,幼稚细胞,异型淋巴细胞等,不少于26项, 其中研究用参数不得少于6项。 ★3、血小板检测要求有脉冲编辑、重叠校正、两次计数等至少3项技术确保检测准确 4、要有嗜碱细胞的检测通道 ★5、能用末梢全血检测白细胞五项分类,所需试剂种类为5种 6、CBC+Diff分析全血进样量要求:≤53 L 7、有废液报警功能 ★8、要求有原厂生产的校准品和质控品,要求校准品有溯源性,并提供溯源性证明文件。★9、免费提供的实验室质量保证活动(IQAP),达到实验室与国际接轨。 ★10、CAP认可的免日常维护,操作简便。 ★11、精密度要求达到 WBC <2% (10X103细胞/μl) RBC <2% (5X106细胞μl) Hgb <1% (15g/dl) HCT <2% (45%) PLT <5% (300X103细胞/μl) ★12、厂家在河南省有独立注册的服务机构(提供营业执照) ★13、中标单位须在中标通知书下发三日内,携带中标通知书与厂家授权书(或代理商授权书)与用户签订合同。

肺功能检查仪检测(便携式) 一、检测项目: 用力肺活量(FVC)、肺年龄、静息肺活量(SVC)、最大通气量(MVV)、支气管扩张试验(BD)、支气管激发试验(PC20) 二、测量指标: 1、FVC(用力肺活量):FVC、PEF、FEV0.75、FEV1、FEV3、FEV6、FEV0.75/FVC、FEV1/FVC、FEV3/FVC、FEV6/FVC、FEV0.75/FEV6、FEV1/FEV6、EVE、LUNG AGE 2、流速容积曲线:PIE、FIVC、FIV1、FIV1/FIVC 3、呼吸峰流速:PEFT、MEF75、MEF50、MEF25、FEF75、FEF50、FEF25、MMEF、FET25、FET50、MIF75(FIF75)、MIF50(FIF50)、MIF25(FIF25)、FEF50/FIF50(R50) 4、肺龄、肺器官年龄损害程度 5、VC/SVC(静息肺活量):VC/SVC、ERV、IRV、TV、IC、IVC 6、MVV(最大肺通气量):MVV、MVVF、MRF 7、支气管扩张试验(BD):VC/SVC,FVC,MVV 8、支气管激发试验:PC20 三、技术性能/指标: ★1、全中文操作界面及可选不同格式的打印报告,方便各级医院,特别是基层医护人员操作使用 ★2、采用可调彩色6英寸触摸屏,薄膜按键方便选择、快捷操作 3、最新的LILLY型压差式双向流速传感器,测试精确度高重复性好 ★4、传感器采用航天纳米UM薄膜过滤技术,耐用且防止交叉感染,方便更换、清洗、消毒。★5、内置自动BTPS传感器,实时调整环境数据,实时校对传感器有效保障测试数据的精准度 ★6、专门设有特殊人群测试指导卡通动画,提高老龄及幼龄受测者的测试质量。 ★7、专门设有激发试验,扩张试验规程菜单,按不同测试要求自行编辑药物名称和剂量,检查结果自动计算,结果用不同颜色曲线标识,清晰明了,无需额外高额购买激发升级软件,检测质量稳定,性价比高,准确安全 ★8、全面的肺通气功能检查和一口气用力肺活量检查可供选择,医护人员可因临床检查或大规模体检的要求相互切换,提高工作效率。更适合体检中心与疾控中心

血细胞分析仪五分类检测技术及原理

血细胞分析仪五分类检测技术及原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着科学技术日新月异的发展,血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类,从二维空间进而转向三维空间,同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术,如鞘流技术、激光技术等。下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。 1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法 直流电阻抗法(DC)用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况(细胞核以及颗粒情况),侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量,特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。在嗜碱细胞通道中,使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。幼稚细胞检查通道(IMI)可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象,在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多,对溶血剂有抵抗作用,当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解,而幼稚细胞不易被破坏,可通过电阻法检测出来。综合各个测量方法,得到白细胞五分类的图形和数据。这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。 2 电阻抗和射频电导联合检测法 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:(1)淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,而使白细胞保持完整,细胞浆及核形态近似于生理状态,当这些细胞通过检测系统时,对白细胞进行电阻抗法(测量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密度)的联合检测,结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。(2)嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统:在细胞悬浮液中加入特殊的溶血剂,除嗜酸性细胞和嗜碱性细胞外,其他细胞均被溶解或萎缩,再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。(3)幼稚细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,结合在幼稚细胞的氨基酸比成熟细胞多,且对溶血剂有抵抗作用,当加入溶血剂时,成熟细胞被溶解,只保留着可能存在的幼稚细胞用来计数。目前日本东亚公司的NE1500、SYSNEX公司的SE9000血细胞分析仪就是采用这种方法进行五分类的。 3 多角度激光偏振光散射检测法

BC-6800血液细胞分析仪标准操作程序-

BC—6800血液细胞分析仪标准操作程序 1 仪器得检测原理及检验项目 BC-6800采用鞘流阻抗法、激光散射法、结合荧光染色得流式细胞技术进行细胞分类、计数;采用比色法进行血红蛋白测定.输出33项测量参数加14项研究参数;两个直方图、六个二维散点图、三个三维散点图。 2仪器设备试剂 BC-6800血液细胞分析仪专用试剂:M-68DS稀释液、M—68DR稀释液;M-68FD 染色液、M—68FN染色液、M—68FR染色液;M—68LD 溶血剂、M—68LB 溶血剂、M—68LH 溶血剂、M-68LN溶血剂;探头清洁液。所有试剂应参照试剂得使用说明进行保存。变质、超过效期得所有试剂不能使用。 3 仪器设备标本 原始样品采集、制备、处理、检验与存放见检验科相关规范。 4 仪器设备性能参数 BC—6800血液细胞分析仪一般资料见附件1;BC—6800血液细胞分析仪性能指标见附件2。 5 仪器设备环境要求,使用安全措施 5、1仪器设备环境要求 5。1。1空间安装要求 仪器应安装在稳固工作台上。在仪器两侧各保留至少1米得空间,以方便维护与保养.仪器与气源后部分别至少要有0。50米得空间,以防止阻碍热气得排放并保证主机后得液路管道不受挤压.将BC-6800血液细胞分析仪安放在通风良好、灰尘少得地方.避免在过热或过冷以及日光直射得环境中使用BC—6800血液细胞分析仪.保证操作台面以及主机下方有足够得空间放置稀释液、废液桶。 5。1。2 运行条件 环境温度要求:15℃~32℃. 环境相对湿度要求:30%~85%。 电源电压要求: 主机:(220V/230V)±10%,50Hz/60Hz±2Hz。 气源:(220V)±10%,50Hz±1Hz. 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源与电源干扰;远离强电磁场干扰源;不要靠近电刷型电机、闪烁荧光灯与经常开关得电接触性设备;建议在运行设备之前对实验室得电磁环境进行评估;避免强光直接照射;避免置于热源及风源前;选择一个通风良好得位置;具有良好得接地环境;不要将主机放置在斜面上;室内使用。 5、2 仪器安全 在仪器设备上面与周围不要使用可燃性危险品,避免引起火灾与爆炸。 在电源打开状态下,禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板,以免损害线路板;禁止触摸BC-6800血液细胞分析仪外壳里面得电子元件,尤其避免湿手触摸,以免造成电击。 仪器设备使用前,必须认真检查设备之间连接及外接线(件)就是否正确(连接方法见BC—6800使用说明书4、3节)、正常,电源插头就是否正确插接,设备就是否处于正常状态。实验过程中如遇水、电故障或中断,应立即关闭影响仪器设备安全得有

血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征

北京协和医院检验科张时民 血细胞分析技术已经进入自动化时代,而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中,为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心,在许多大型医院中已不占主流位置,因此可以说目前在较大医院的检验科,常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。 本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法,此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章(见参考文献)。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析,以获得外周血液中白细胞的五种常见类型,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果,此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商,比较著名的欧美厂家有Beckman-Coulter;ABBOTT;Siemens(Bayer);ABX;日本有Sysmex和Nihon Kohdon。在国内已经有迈瑞(MINDRAY)公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。 一简要发展史 1974年,一种名为HEMALOG D的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。 1982年,Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器,应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200型,仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器,没有其他血细胞计数分析能力。 Technicon 公司1985 年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的Technicon H1 型血液细胞分析仪,随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987 年开发研制其经典VCS技术,并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM 型。 1990年前后,欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪,其在白细胞分类技术上原理各不相同,分析测定项目略有不同,且形式多样,结构复杂,试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品(试剂)价格的增加。 二仪器原理和散点图特点 1 体积、电导和激光散射原理 这是Beckman-Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法,他集三种物

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