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转录组有参考生物信息分析结题报告模版-V2.0

转录组有参考生物信息分析结题报告模版-V2.0
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转录组有参考基因组生物信息分析结题报告

一、生物信息分析流程

获得原始测序序列(Sequenced Reads)后,并且其相应的基因组参考序列( Reference Genome )可以获得的情况下,可以用有参考基因组信息分析流程对数据进行详细的分析,分析流程图如下:

二、结果展示

1. 原始序列数据

高通量测序(如Illunima HiSeq TM2000/ Miseq等测序平台)测序得到的原始图像数据文件经碱基识别(Base Calling)分析转化为原始测序序列(Sequenced Reads),我们称之为Raw Data或Raw Reads,结果以FASTQ(简称为fq)文件格式存储,其中包含测序序列(reads)的序列信息以及其对应的测序质量信息。测序样品中真实数据随机截取结果如下:

@HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1202:2188 1:N:0:GCCAAT CGGATGATCTTCTTAATCTCTCCTTGCATAGTTATGAAACAGTCCGTGGACTTGCTGGAAAATCTCTCTTGAAGATGATGAAGAGATGGCCCTCTACAAT +

CCCFFFDFFHHHHJJJJJIJIGGGIGICIGIIJEIIJIIJJI@DHEDHECFGGAHGGJGHIICGEEIEHGGGIECEEHH@HE>C@EBBE@CCDDCCCDDC @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1237:2217 1:N:0:GCCAAT GAAGGTGAGTCTGAGGAGGCCAAGGAGGGAATGTTTGTGAAAGGATATGTCTACTAAGATATTAGAAAGTATGTACTACTACTACTACTACATGTTTTCA +

@@@FDADDFDHFHIIIDHIIJJJGICGGGCGHGFIGHBHEHHGI;BDHHCFGCHIIIIEHGIGHHIJJE7??ACHCDFFFFFEEECCEE>C>ACCCDC>@ @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1382:2195 1:N:0:GCCAAT TTTTGCAACAATGGCTTCCACCATGATGACTACTCTACCACAGTTCAATGGACTCAAACCCCAACCTTTCTCAGCTTCTCCAATTCAAGGCTTGGTGGCA +

@@@DD3DDFFFF:CDGI@GIEEDH@AAD;;;@@####### @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1255:2239 1:N:0:GCCAAT CGGATTTTCAAGGGCCGCCGGGAGCGCACCGGACACCACGCGACGTGCGGTGCTCTTCCAGCCGCTGGACCCTACCTCCGGCTGAGCCGATTCCAGGGTG +

CCCDFFFFHHH?FHIIIJJJJJIGBEHHJJBHBDDCDAC??@@BDBBBBD8BDDCDDACC@A?@BBB@<(8>?395?4:(:<@## @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1423:2239 1:N:0:GCCAAT CTTGTATTGCTCTCCCACAACCCCGTTTTCACGGTTTAGGCTGCTCCCATTTCGCTCGCCGCTACTACGGGAATCGCTTTTGCTTTCTTTTCCTCTGGCT +

CCCFDFFFHHHHHJJIJJJJJIJJGGIHIIGIIJGIGGIJJGGGJGIJ>FGIIGHGGBEHBCCBBDDD@BB@@@C::@C

2.测序数据质量评估

2.1 测序错误率分布检查

测序错误率与碱基质量有关,受测序仪本身、测序试剂、样品等多个因素共同影响。通常测序序列(Sequenced Reads)5’端前几个碱基的错误率相对较高,随着序列的延伸,3’端碱基错误率会不断升高,这是由高通量测序的技术特点决定的。项目结果见图1。

图1测序错误率分布图

横坐标为reads的碱基位置,纵坐标为单碱基错误率。其中前100个碱基位置为双端

测序序列的第一端测序Reads的分布情况,随后100bp是另一端测序reads的分布情况。

2.2 A/T/G/C含量分布检查

对于RNA-seq来说,因随机性打断及G/C和A/T含量分别相等的原则,理论上GC及AT含量每个测序循环上应分别相等,且整个测序过程稳定不变,呈水平线。项目结果见图2。

图2GC含量分布图

横坐标为reads的碱基位置,纵坐标为单碱基所占的比例。不同颜色代表不同的碱基类型

2.3 测序数据过滤

测序得到的原始测序序列(Sequenced Reads)或者raw reads,里面含有带接头的、低质量的reads,为了保证信息分析质量,必须对raw reads过滤,得到clean reads,后续分析都基于clean reads。项目结果见图3。

图3原始数据过滤结果

2.4 测序数据质量情况汇总

样品测序产出数据质量评估情况详见表1。

表1数据产出质量情况一览表

Sample Raw reads Clean reads Bases Error(%) Q20(%) Q30(%) GC(%) Dup(%) TS-1_1 48900437 48857403 4.89G 0.03 98.24 94.22 43.69 79.61 TS-1_2 48900437 48857403 4.89G 0.03 96.96 91.59 43.68 78.21 TS-2_1 50753113 50709069 5.07G 0.03 98.26 94.3 43.41 79.26 TS-2_2 50753113 50709069 5.07G 0.03 97.11 91.92 43.44 77.83 TR-3_1 37877095 37819080 3.78G 0.03 97.41 92.21 47.79 82.78 TR-3_2 37877095 37819080 3.78G 0.04 95.91 89.18 47.81 81.45 TR-5_1 55854530 55791168 5.58G 0.03 97.9 93.38 45.57 81.97 TR-5_2 55854530 55791168 5.58G 0.03 96.66 90.83 45.54 80.75

Raw Reads:由测序得到的原始图像数据经base calling 转化而来的原始序列reads。

Clean reads:将Raw Reads过滤得到的reads。

Bases (Clean bases):过滤得到的数据的总碱基数。

Error (Error rate):指测序错误率,与碱基质量值之间有一定的对应关系。

Q20:测序错误率≤1%的碱基数目比例。

Q30:测序错误率≤0.1%的碱基数目比例。

GC content:G+C的数量占总的碱基数量的百分比。

Dup (Duplication level):重复的reads数占总reads数的比例。

3.参考序列比对分析

3.1RNA-Seq reads参考基因组比对统计

如果参考基因组选择合适并且相关实验不存在污染的情况下,实验所产生的测序序列的定位的百分比正常情况下会高于70% (Total Mapped Reads or Fragments),其中具有多个定位的测序序列(Multiple Mapped Reads or Fragments)占总体的百分比通常不会超过10%。项目结果见表2。

表2 参考基因组比对的统计情况一览表

Sample name TS1 TS2 TR3 TR5

Total reads 97714806 101418138 75638160 111582336

Total mapped 88921431(91%) 92225043 (90.94%) 54554812 (72.13%) 91773760 (82.25%)

Multiple mapped 961182 (0.98%) 1053580 (1.04%) 1422941 (1.88%) 1481392 (1.33%)

Uniquely mapped 87960249 (90.02%) 91171463 (89.9%) 53131871 (70.24%) 90292368 (80.92%) Read-1 44157413 (45.19%) 45745753 (45.11%) 26677577 (35.27%) 45296200 (40.59%)

Read-2 43802836 (44.83%) 45425710 (44.79%) 26454294 (34.97%) 44996168 (40.33%) Reads map to '+' 43944185 (44.97%) 45558208 (44.92%) 26479698 (35.01%) 45055089 (40.38%)

Reads map to '-' 44016064 (45.05%) 45613255 (44.98%) 26652173 (35.24%) 45237279 (40.54%)

Non-splice reads 64211264 (65.71%) 67345511 (66.4%) 42758444 (56.53%) 68211989 (61.13%)

Splice reads 23748985 (24.3%) 23825952 (23.49%) 10373427 (13.71%) 22080379 (19.79%)

77892308 (79.71%) 82296934 (81.15%) 45364262 (59.98%) 80126002 (71.81%) Reads mapped in

proper pairs

3.2RNA-Seq reads参考基因组比对分布图

定位到基因组上的测序序列分布统计,用于检测测序序列基因组上的来源。项目结果见图4。

图4RNA-Seq 测序得到的reads比对到参考基因组不同区域上的分布情况

3.3RNA-Seq reads参考序列密度分布图

对定位到基因组上的测序序列完成染色体密度分布统计,用于检测染色体上测序序列分布的异常情况。项目结果见图5。

图5RNA-Seq 测序得到的reads比对到参考基因组不同染色体上的分布情况

横坐标为染色体的长度信息(以百万碱基为单位),纵坐标为log2(reads的密度的中位数)

4. 可变剪切分析

对该物种及其相应的测序样品进行可变剪切事件的统计。项目结果见图6。

图6可变剪切类型分析

横坐标为可变剪切事件的五种分类缩写,纵坐标为该种事件下可变剪切的数量,

不同颜色代表不同的样品组合或者已知的基因模型

(1)Skipped exon (SE);外显子跳跃

(2)Retained intron(RI); 内含子滞留

(3)Alternative 5’ splicing stie(A5SS); 可变5’端剪切

(4)Alternative 3’ splicing site(A3SS); 可变3’端剪切

(5)Mutually exclusive exon (MEX); 互相排斥的外显子

5.SNP分析

图7

6. 新转录本预测

对所分析的物种在已知的基因模型的基础上,用所有测序的数据对新转录区域进行预测,并对新转录区域的表达水平进行统计分析,项目结果见图8,9,10。

图8新转录本的RPKM累积分布图

图9新转录本的RPKM盒形图

图10新转录本的RPKM密度分布图

7. 基因表达水平分析

在RNA-技术中,RPKM(Reads Per Kilo bases per Million mapped Reads)是一种表示基因表达水平的通用方法,代表每百万reads中来自于某基因每千碱基长度的reads数。项目结果见表3,4,表4详细内容见./Results/DEseq/readcount.rpkm.xls。

表3不同表达水平区间的基因数量统计表

RPKM Interval Gene Counts

TS1 Gene Counts

TS2

Gene Counts

TR3

Gene Counts

TR5

0 - 0.0113724 (36.73%) 13459 (36.02%) 14515 (38.85%) 13728 (36.74%) 0.1 - 0.32032 (5.44%) 1909 (5.11%) 2101 (5.62%) 1982 (5.30%) 0.3 - 3.579783(26.18%) 9786 (26.19%) 9984 (26.72%) 10379 (27.78%) 3.57 - 157641 (20.45%) 7981 (21.36%) 7075 (18.94%) 7424 (19.87%) 15 - 603041 (8.14%) 3116 (8.34%) 2668 (7.14%) 2800 (7.49%)

>601143 (3.06%) 1113 (2.98%) 1021 (2.73%) 1051 (2.81%)

表4基因表达水平统计表(部分)

chromosome gene_id start end RPKM

(TS1) RPKM

(TS2)

RPKM

(TR3)

RPKM

(TR5)

SL2.40ch00 Novo_00001 876120 876253 0.965 3.255 0.985 0.403 SL2.40ch00 Novo_00002 1146195 1147157 0.282 0.440 0.000 0.000 SL2.40ch00 Novo_00003 1230237 1234310 0.387 0.493 0.142 0.351 SL2.40ch00 Novo_00004 4277120 4277288 17.526 20.280 22.794 27.304 SL2.40ch00 Novo_00005 4641283 4642496 1.332 1.365 0.000 0.000 SL2.40ch00 Novo_00006 4640465 4641341 0.546 1.108 0.000 0.000

8. RNA-seq整体质量评估

8.1 均一性分布检查

根据转录组建库实验的特点,转录本其产生的测序序列(reads)实际覆盖度的分布特点见下图:距离转录本的5'端和3'端越近,平均测序深度越低,但总体的均一化程度比较高。项目结果见图11。

图11不同表达水平的转录本的reads密度分布图

High:高表达量转录本;Medium:中度表达量转录本;Low:低表达量转录本。

横坐标为距离转录本5’端的相对位置(以百分比表示),纵坐标为覆盖深度的平均值。

8.2 饱和曲线检查

定量饱和曲线检查反映了基因表达水平定量对数据量的要求。表达量高的基因,就越容易被准确定量;反之,表达量低的基因,需要较大的测序数据量才能被准确定量。项目结果见图12。

图12定量饱和曲线检查分布图

横坐标代表定位到基因组上的reads数占总reads数的百分比,纵坐标代表定量误差

在10%以内的基因的比例。n代表在此RPKM范围内的基因数。

8.3 重复相关性检查

样品间基因表达水平相关性是检验实验可靠性和样本选择是合理性的重要指标。相关系数越接近1,表明样品之间表达模式的相似度越高。通常生物学重复要求R2 > 0.92。

图13RNA-Seq 生物学重复相关性分析

对取自同一时间点均进行RNA-Seq测序的样本进行生物学重复相关性分析

9. 差异表达分析

9.1 不同试验条件下,基因表达水平对比图

图14在不同试验条件,所有基因的表达水平的箱线图

9.2 样本间差异基因筛选

图15样本间基因差异表达分析火山图

有显著性差异表达的基因用红色点表示;横坐标代表基因在不同样本中表达倍数变化;

纵坐标代表基因表达量变化差异的统计学显著性,红色圆点表示有显著性差异的基因。

9.3 差异表达基因列表

项目结果见./Results/DEseq/DESeq.out.xls。

表5差异基因列表(部分)

chromosome gene_id RPKM1 RPKM2 log2FoldChange padj SL2.40ch06 Solyc06g009960 0.107986 158.3342 10.7241 2.46E-221 SL2.40ch10 Novo_02114 0.04235 63.33414 10.77632 3.06E-200 SL2.40ch06 Novo_01304 0.015863 22.18282 10.67336 4.24E-126 SL2.40ch11 Solyc11g028010 19.92548 0.021828 -9.55392 2.38E-125 SL2.40ch06 Novo_01303 0.006346 31.31789 12.53154 1.50E-121 SL2.40ch04 Novo_00935 0.017206 41.81995 11.47674 3.76E-119

有参考基因组的转录组生物信息分析

一、生物信息分析流程 获得原始测序序列(Sequenced Reads)后,在有相关物种参考序列或参考基因组的情况下,通过如下流程进行生物信息分析: 二、项目结果说明 1 原始序列数据 高通量测序(如illumina HiSeq TM2000/MiSeq等测序平台)测序得到的原始图像数据文件经碱基识别(Base Calling)分析转化为原始测序序列(Sequenced Reads),我们称之为Raw Data或Raw Reads,结果以FASTQ(简称为fq)文件格式存储,其中包含测序序列(reads)的序列信息以及其对应的测序质量信息。 FASTQ格式文件中每个read由四行描述,如下: @EAS139:136:FC706VJ:2:2104:15343:197393 1:Y:18:ATCACG GCTCTTTGCCCTTCTCGTCGAAAATTGTCTCCTCATTCGAAACTTCTCTGT + @@CFFFDEHHHHFIJJJ@FHGIIIEHIIJBHHHIJJEGIIJJIGHIGHCCF 其中第一行以“@”开头,随后为illumina 测序标识符(Sequence Identifiers)和描述文字(选择性部分);第二行是碱基序列;第三行以“+”开头,随后为illumina 测序标识符(选择性部分);第四行是对应序列的测序质量(Cock et al.)。 illumina 测序标识符详细信息如下:

第四行中每个字符对应的ASCII值减去33,即为对应第二行碱基的测序质量值。如果测序错误率用e表示,illumina HiSeq TM2000/MiSeq的碱基质量值用Q phred 表示,则有下列关系: 公式一:Q phred = -10log 10 (e) illumina Casava 1.8版本测序错误率与测序质量值简明对应关系如下: 2 测序数据质量评估 2.1 测序错误率分布检查 每个碱基测序错误率是通过测序Phred数值(Phred score, Q phred )通过公式1转化得到,而Phred 数值是在碱基识别(Base Calling)过程中通过一种预测碱基判别发生错误概率模型计算得到的,对应关系如下表所显示: illumina Casava 1.8版本碱基识别与Phred分值之间的简明对应关系 测序错误率与碱基质量有关,受测序仪本身、测序试剂、样品等多个因素共同影响。对于RNA-seq技术,测序错误率分布具有两个特点: (1)测序错误率会随着测序序列(Sequenced Reads)的长度的增加而升高,这是由于测序过程中化学试剂的消耗而导致的,并且为illumina高通量测序平台都具有的特征(Erlich and Mitra, 2008; Jiang et al.)。 (2)前6个碱基的位置也会发生较高的测序错误率,而这个长度也正好等于在RNA-seq 建库过程中反转录所需要的随机引物的长度。所以推测前6个碱基测序错误率较高的原因为随机引物和RNA模版的不完全结合(Jiang et al.)。测序错误率分布检查用于检测在测序长度范围内,有无异常的碱基位置存在高错误率,比如中间位置的碱基测序错误率显着高于其他位置。一般情况下,每个碱基位置的测序错误率都应该低于0.5%。 图2.1 测序错误率分布图

转录组测序结题报告

转录组测序结题报告 1.mRNA纯化: 抽提得到的总RNA首先利用10U的DNaseI(Ambion,美国)在37℃消化1小时;然后利用Micropoly(A)PuristTM mRNA purification kit(Ambion,美国),进行mRNA纯化:把RNA稀释到250μl的体积,按照Kit的操作步骤(Cat.No:

1919)进行;最后得到的mRNA用100μl预热的THE缓冲液洗脱,利用NanoDrop 进行定量。 2.cDNA合成: cDNA合成是在Ng等2005年发表的方法基础上改进而成(文献1,图1)。第一链cDNA合成利用GsuI-oligo dT作为反转录引物,10μg的mRNA作为模板,用1000 单位的Superscript II reverse transcriptase (Invitrogen,美国)在42℃作用1小时完成;随后利用NaIO4(Sigma,美国)氧化mRNA的5’帽子结构,并连接生物素;通过Dynal M280磁珠(Invitrogen,美国)筛选连接了生物素的mRNA/cDNA,并通过碱裂解释放第一链cDNA;然后通过DNA ligase(TaKaRa,日本)在第一链cDNA的5’末端加上接头,然后通过Ex Taq polymerase (TaKaRa,日本)合成第二链cDNA。最后通过GsuI酶切去除polyA和5’端接头。 图1. 全长cDNA合成示意图 3.cDNA测序: 合成的cDNA利用超声仪(Fisher)打断到300-500bp的范围,利用Ampure beads(Agencourt,美国)进行纯化。随后纯化的cDNA利用TruSeq TM DNA XXmple Prep Kit – Set A (illumina,美国)制备文库,并利用TruSeq PE Cluster Kit (illumina,美国)进行扩增。最后在illumina机器上进行测序反应。 测序得到的数据统计见表1. 表1. Solexa测序统计 样品对照 1 2

结题报告——范文

一、结题报告的基本结构 结题报告是一项课题研究结束,研究者客观地、概括地介绍研究过程,总结、解释研究成果,向有关部门(机构)申请结题验收的文章。它是课题研究所有材料中最主要的材料,也是科研课题结题验收最主要的依据,其基本结构包括: 题目部分——标题、署名。 正文部分—— (1)序言(问题的提出、研究的动机)。 (2)理论依据。 (3)研究目标。 (4)研究方法(采用哪些教育科研方法)。 (5)研究的主要内容。 (6)研究过程概述。 (7)研究成果(概括性描述、列出图表、研究假设的检验结果)、结论与建议。 (8)存在的问题或研究的局限性。 结尾部分——注释、参考文献、附录。 结题报告要注意基本格式的规范化。根据具体情况,在体例上可作适当调整,我们反对格式呆板化,但也不能违反基本格式。接下来着重谈谈几个带有普遍性的问题。 二、题报告题目的表述要有明确性 结题报告的题目一般格式为:《……》课题结题报告。 关键是该课题题目应具体明确,准确地概括研究的方向、研究的广度和深度,且有新颖性。具体要求是:①应有价值、有新意。②范围既不会过于宽泛,也不会过于狭窄。③最好能囊括研究范围、对象、内容、方法。④题目内容最好涉及两个变量。⑤题目不要用疑问句形式。⑥题目要避免价值判断。⑦不宜用过分修饰、文学化的题目。⑧用词规范,切忌杜撰。 在研究过程中如果发现题目不当或该研究没有价值,就得终止研究,重新调整研究课题,并呈报立项审批单位。在结题报告中应写新的课题,并附上说明。 三、理论依据的选取、运用要准确 理论依据即本课题研究的科学依据,是选题论证的依据,是研究者对所研究问题预先赋予某种假设的理论依据和指导研究过程的理论依据。 选取理论依据要防止三种情况:①无“论”可依;②有“论”难依;③大“论”小“依”; ④有论不依。所选取理论的科学性、先进性、针对性和理解的深刻性直接关系到教育科学研究的水平。 教育理论都有很强的时代性和现实针对性,有的还存在其局限性,运用时不能拈来便用。 四、教育科研过程要作客观、清晰的概述 对研究过程的概述必须符合研究类型特点。教育科学研究方法有多种划分标准,因而教育科研有多种类型,诸如基础研究、应用研究、开发研究(发展研究);理论研究、实验研究、调查研究、追因研究;探索性研究、描述性研究、解释性研究等等。对于各种研究,特别是应用研究和实验研究应明确界定。 应用研究用于应用或检验理论,评价它在解决教育实际问题中的作用。中小学教育科研大多数是应用研究。 实验研究是根据研究目的,运用一定的人为手段,主动干预或控制研究对象的发生、发展过程,以探索、验证所研究现象因果关系的研究过程。教育实验可分为探索性实验、验证性实验、推广性实验(当前我国进行的有学校整体改革实验、引进国外教育理论的验证实验、教育政策决策的实验、课程教材的改革实验、教学方法的改革实验(转载自第一范文网https://www.wendangku.net/doc/2b5985414.html,,请保留此标记。))。

转录组测序技术的应用及发展综述

转录组测序技术的应用及发展综述 摘要:转录组测序(RNA-Seq)作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段正在改变着人们对转录组的认识。RNA-Seq利用高通量测序技术对组织或细胞中所有RNA 反转录而成cDNA文库进行测序,通过统计相关读段(reads)数计算出不同RNA的表达量,发现新的转录本;如果有基因组参考序列,可以把转录本映射回基因组,确定转录本位置、剪切情况等更为全面的遗传信息,已广泛应用于生物学研究、医学研究、临床研究和药物研发等。文章主要比较近年来转录组研究的几种方法和几种RNA-Seq的研究平台,着重介绍RNA-Seq的原理、用途、步骤和生物信息学分析,并就RNA-Seq技术面临的挑战和未来发展前景进行了讨论及在相关领域的应用等内容,为今后该技术的研究与应用提供参考。 关键词: RNA-Seq;原理应用;方法;挑战;发展前景 Abstract:Transcriptome sequencing (RNA-Seq) is a kind of high efficiency, quick transcriptome research methods are changing our understanding of transcriptome. RNA-Seq to use high-throughput sequencing of tissues or cells of all RNA reverse transcription into cDNA library were sequenced, through statistical correlation read paragraph (reads) numbers were calculated from the expression of different RNA transcripts, find new; if the genome reference sequence, the transcripts mapped to genomic, determine the position of the transcription shear condition, more genetic information, has been widely used in biological research, medical research, clinical research and drug development. This paper compared several methods of platform transcriptome studies and several kinds of RNA-Seq in recent years, RNA-Seq focuses on the principle, purpose, steps and bioinformatics analysis, and discusses the RNA-Seq technology challenges and future development prospect and the application in related field and other content, provide the reference for the research and application of the technology future. Key word:RNA-Seq ;application; principle; method; challenge; development prospects

诺禾致源真核无参转录组生物信息分析结题报告2013年8月

真核无参转录组生物信息分析结题报告 建库测序流程 Total RNA样品检测 文库构建 上机测序 F:/结题报告+老销售培训/结题报告模板修改/…/真核无参转录组_Report.html 1/38

2/38 F:/结题报告+老销售培训/结题报告模板修改/…/真核无参转录组_Report.html 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 一、建库测序流程 从RNA 样品到最终数据获得,样品检测、建库、测序每一个环节都会对数据质量和数量产生影响,而数据质量又会直接影响后续信息分析的结果。为了从源头上保证测序数据的准确性、可靠性,诺禾致源对样品检测、建库、测序每一个生产步骤都严格把控,从 根本上确保了高质量数据的产出。实验流程图如下: 1 Total RNA 样品检测 诺禾致源对RNA 样品的检测主要包括4种方法:(1) 琼脂糖凝胶电泳分析RNA 降解程度以及是否有污染(2) Nanodrop 检测RNA 的纯度(OD260/280比值)(3) Qubit 对RNA 浓度进行精确定量(4) Agilent 2100精确检测RNA 的完整性 2 文库构建及库检 样品检测合格后,用带有Oligo (dT )的磁珠富集真核生物mRNA (若为原核生物,则通过试剂盒去除rRNA 来富集mRNA )。随后加入fragmentation buffer 将mRNA 打断成短片段,以mRNA 为模板,用六碱基随机引物(random hexamers )合成一链cDNA ,然后加入缓冲液、dNTPs 、RNase H 和DNA polymerase I 合成二链cDNA ,随后利用AMPure XP beads 纯化双链cDNA 。纯化的双链cDNA 再进行末端修复、加A 尾并连接测序接头,然后用AMPure XP beads 进行片段大小选择,最后进行PCR 富集得到最终的cDNA 文库。文库构建完成后,先使用Qubit2.0进行初步定量,稀释文库至1ng/ul ,随后使用Agilent 2100对文库的insert size 进行检测,insert size 符合预期后,使用Q-PCR 方法对文库的有效浓度进行准确定量(文库有效浓度 >2nM ),以保证文库质量。文库构建原理图如下:

转录组测序

真核mRNA测序是基于HiSeq平台,对真核生物特定组织或细胞在某个时期转录出来的所有mRNA进行测序,既可研究已知基因,亦能发掘新基因,全 面快速地获得mRNA序列和丰度信息。真核mRNA测序方法可以分为:有参考转录组、无参考转录组以及数字基因表达谱(DGE)三大类。 技术参数 案例解析 [案例一] mRNA和small RNA转录组揭示新合成异源六倍体小麦杂种 优势的动态部分同源调控 诺禾致源携手中国农业科学院作物科学研究所,利用转录组测序技术,对杂交亲本、新合成异源六倍体小麦的幼苗、穗和种子进行了mRNA和smallRNA测序及信息分析,发现新合成异源六倍体小麦绝大部分基因表现为12类基因表达模式,包括加性表达,少部分的基因表现为非加性,基因的非加性表现出非常强的发育时期特异性,与生长势密切相关;miRNA的丰度随着倍性的增加逐渐下降,新合成异源六倍体小麦中非加性表达的 miRNA也同样表现出亲本显性表 达,miRNA的表达敏感性与生长势和适应性密切相关。该研究揭示了不同倍性 非对等杂种优势的分子基础。 [案例二] 磷酸三(2,3-二氯丙基)酯(TDCPP)对四膜虫生长繁殖的 抑制作用与核糖体相关 诺禾携手华中农业大学,利用转录组测序和信息分析技术,研究了TDCPP处理组和对照组差异基因表达,并对差异表达基因进行KEGG通路分析,发现核糖体基因通路显著富集, 同时伴随胞浆和粗面内质网上核糖体数量减少体积增大。这些探索表明四膜虫可以作为TDCPP反应的生物指标,为后续研究TDCPP作用其他生物的毒理机制提供了新视角。 [案例三] 转录组揭示寄主植物与宿主之间进行RNA交换的机制 参考文献 菟丝子被称作勒死草,会用被称作吸根的专用器官穿透宿主组织与其建立联系,可以吸取宿主的水份与营养物质,也能吸取RNA(mRNA)分子。本研究分别选取菟丝子和拟南芥及番茄的共生体茎上的三段组织进行转录组学的研究,发现寄生植物与寄主之间mRNA的转移量很大且是一种双向转移的模式;两种宿主相比,更多的拟南芥RNA被转移到菟丝子植物之中,而且菟丝子与拟南芥之间较自由的交换,可表明调节菟丝子吸根选择性的机制可能是宿主特异性的,从而揭示了寄主与宿主之间进行RNA转移的遗传机制。 [1] Li A, Liu D, Wu J, et al . mRNA and small RNA transcriptomes reveal insights into dynamic homoeolog regulation of allopolyploid heterosis in nascent hexaploid wheat [J]. The Plant Cell, 2014: tpc. 114.124388.[2] Jing Li, John P , Giesy, Liqin Yu, et al . Effects of Tris (1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate (TDCPP) in Tetrahymena Thermophila: Targeting the Ribosome. Scientific Reports. 2015, 5:10562. [3] Kim G, LeBlanc M L, et al . Genomic-scale exchange of mRNA between a parasitic plant and its hosts [J]. Science, 2014, 345(6198): 808-811. 图1 非加性表达miRNA与亲本显性表达miRNA的 等级聚类分析和两者的关联 图2 显著富集的KEGG通路 图3 菟丝子与拟南芥、番茄转移RNA和非转移RNA的表达和富集分析 样品要求文库类型测序策略数据量类型 分析内容 项目周期 真核有参转录组测序 真核无参转录组测序 6 Gb、8 Gb、10 Gb、12 Gb clean data 6 M clean reads 3 Gb clean data 项目数据至少12 Gb clean data 数字基因表达谱(DGE) HiSeq PE150 HiSeq PE150 HiSeq SE50HiSeq PE125普通转录组文库; 链特异性转录组文库 40天50天30天 35天(有参)45天(无参) RNA样品总量≥1.5 μg; RNA样品浓度≥50 ng/μL 参考基因组比对 新转录本预测可变剪切分析SNP/InDel分析 基因表达水平分析RNA-seq整体质量评估 转录因子注释GO/KEGG富集分析蛋白互作网络分析基因共表达网络构建可视化结果展示 参考转录组拼接 转录本/Unigene长度统计 基因功能注释NR,NT,Swiss Prot GO,KEGG,KOG Protein Family CDS预测分析SNP/SSR分析

转录组有参考生物信息分析结题报告模版-V2.0

转录组有参考基因组生物信息分析结题报告 一、生物信息分析流程 获得原始测序序列(Sequenced Reads)后,并且其相应的基因组参考序列( Reference Genome )可以获得的情况下,可以用有参考基因组信息分析流程对数据进行详细的分析,分析流程图如下:

二、结果展示 1. 原始序列数据 高通量测序(如Illunima HiSeq TM2000/ Miseq等测序平台)测序得到的原始图像数据文件经碱基识别(Base Calling)分析转化为原始测序序列(Sequenced Reads),我们称之为Raw Data或Raw Reads,结果以FASTQ(简称为fq)文件格式存储,其中包含测序序列(reads)的序列信息以及其对应的测序质量信息。测序样品中真实数据随机截取结果如下: @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1202:2188 1:N:0:GCCAAT CGGATGATCTTCTTAATCTCTCCTTGCATAGTTATGAAACAGTCCGTGGACTTGCTGGAAAATCTCTCTTGAAGATGATGAAGAGATGGCCCTCTACAAT + CCCFFFDFFHHHHJJJJJIJIGGGIGICIGIIJEIIJIIJJI@DHEDHECFGGAHGGJGHIICGEEIEHGGGIECEEHH@HE>C@EBBE@CCDDCCCDDC @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1237:2217 1:N:0:GCCAAT GAAGGTGAGTCTGAGGAGGCCAAGGAGGGAATGTTTGTGAAAGGATATGTCTACTAAGATATTAGAAAGTATGTACTACTACTACTACTACATGTTTTCA + @@@FDADDFDHFHIIIDHIIJJJGICGGGCGHGFIGHBHEHHGI;BDHHCFGCHIIIIEHGIGHHIJJE7??ACHCDFFFFFEEECCEE>C>ACCCDC>@ @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1382:2195 1:N:0:GCCAAT TTTTGCAACAATGGCTTCCACCATGATGACTACTCTACCACAGTTCAATGGACTCAAACCCCAACCTTTCTCAGCTTCTCCAATTCAAGGCTTGGTGGCA + @@@DD3DDFFFF:CDGI@GIEEDH@AAD;;;@@####### @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1255:2239 1:N:0:GCCAAT CGGATTTTCAAGGGCCGCCGGGAGCGCACCGGACACCACGCGACGTGCGGTGCTCTTCCAGCCGCTGGACCCTACCTCCGGCTGAGCCGATTCCAGGGTG + CCCDFFFFHHH?FHIIIJJJJJIGBEHHJJBHBDDCDAC??@@BDBBBBD8BDDCDDACC@A?@BBB@<(8>?395?4:(:<@## @HWI-ST1106:227:D14F6ACXX:1:1101:1423:2239 1:N:0:GCCAAT CTTGTATTGCTCTCCCACAACCCCGTTTTCACGGTTTAGGCTGCTCCCATTTCGCTCGCCGCTACTACGGGAATCGCTTTTGCTTTCTTTTCCTCTGGCT + CCCFDFFFHHHHHJJIJJJJJIJJGGIHIIGIIJGIGGIJJGGGJGIJ>FGIIGHGGBEHBCCBBDDD@BB@@@C::@C

华大转录组测序内部培训资料

(内部资料,请勿外传) 动植物转录组 (Transcriptome ) 产品说明书 科技服务体系 动植物研究方向

版本信息: 2011年07月08日

目录 1产品概述 (1) 1.1 什么是转录组测序 (1) 1.2 转录组测序的产品功能 (1) 1.3 转录组测序产品优势 (1) 1.4 转录组测序产品发展史 (1) 1.5 项目执行时间 (3) 1.6 产品交付结果 (3) 2转录组测序研究方法 (4) 2.1 产品策略 (4) 2.2 样品准备 (5) 2.2.1 RNA样品要求 (5) 2.2.2 RNA样品送样标准 (6) 2.2.3 RNA提取的组织用量建议 (6) 2.3 样品运输要求 (7) 2.3.1 样品包装 (7) 2.3.2 样品标识 (8) 2.3.3 样品运输条件 (8) 2.4 文库的构建及测序 (9) 2.4.1 实验流程 (9) 2.4.2 测序及数据处理 (10) 2.5 转录组生物信息学分析 (10) 2.5.1 没有参考序列的转录组De novo (10) 2.5.2 有参考序列的转录组Re-sequencing (18) 2.5.3 参考文献 (24) 3成功案例 (25)

3.1 华大成功案例 (25) 3.2 相关文献解读 (26)

1产品概述 1.1什么是转录组测序? 转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA。转录组测序是指用新一代高通量测序技术对物种或者组织的转录本进行测序并得到相关的转录本信息。 1.2转录组测序的产品功能 1.获得物种或者组织的转录本信息; 2.得到转录本上基因的相关信息,如:基因结构,功能等; 3.发现新的基因; 4.基因结构优化; 5.发现可变剪切; 6.发现基因融合; 7.基因表达差异分析。 1.3转录组测序产品优势 覆盖度高:检测信号是数字信号,几乎覆盖所有转录本; 检测精度高:几十到数十万个拷贝精确计数; 分辨率高:可以检测到单碱基差异,基因家族中相似基因及可变剪切造成的不同转录本的表达; 完成速度快:整个项目周期只需要50个工作日时间; 成本低:基本上每个实验室可以承担相关研究经费。 1.4转录组测序产品发展史 转录组的研究手段大体包括:EST序列构建及研究,芯片研究,运用第二代测序技术研究等。EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次sanger测序获得的短的cDNA 部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在

结题报告(完成版)

《新课程背景下初中数学课堂教学有效性研究》 结题报告 一、选题背景 目前初中数学课堂教学的目前状况常态教学中,“教师苦教、学生苦学”的目前状况在初中数学课堂中依然普遍存在。其典型表现为:三维目标的割裂、教学内容的泛化,教学层次的低下,解题教学的呆板,预设和生成的冲突等。造成学生学习状态低迷,学习喜好减弱,学习能力低下,主动精神和创造力缺失。课堂上没有了生命活力的焕发和学习主体个性精神的张扬,也感觉不到生命的挑战和学习者的内在愉悦。即使事先有预备的公开课等,也是“新瓶装旧水”,生硬地套用新课改模式,结果还是如从前一样——单调、枯燥、繁琐和压抑,学生数学素养并没有真正得到有效的提高。师生实际的精力付出和收效不成正比。除此,长期以来的惯性思维和惰性也抑制了教师创新意识的拓展,屏蔽了新问题解决的新角度和新出路,使得“高耗低效”这一重大新问题的探究和改进始终停留在口头上或纸面上,处于一种应付状态,甚至仍是“穿旧鞋走老路”,无实际之效,致使广大初中数学教师因一方面要减轻学生负担,提高课堂实效;另一方面又要加班加点,死盯硬盘,提高升学率而处于两难境地。因此,如何使我们的教师拥有新课程背景下的课堂教学有效性的理念,把握初中数学课堂教学有效性的策略,是摆在我们广大数学教师面前的一个课题。 二、课题研究的主要理论依据 1. 心理学关于认识论和动机理论认为:认识过程是指人们获得

知识的过程。在“需要、诱因与动机”的关系中,需要是人对某种客观要求的反映,这种要求可以来自有机体的内部(内环境),也可以来自个体周围的环境;动机是在需要的基础上产生的,诱因是与需要相联系的外界刺激物,它吸引有机体的活动,并使需要有可能得到满足。这表明调动学生的学习积极性并提高其知识和能力是可行的。 2. 多元智能理论认为:人至少具有八种智能,每种智能都具有同等的重要性且彼此互补、统整运作。不同的学生具有不同的心智组型,并且会以不同的方法来学习、表征与回忆知识,因此不应以相同的方法、相同的教材来教育所有的学生,教师应配合学生的不同需要而使用各种不同的方法来进行教学。 3.教学最优化理论。巴班斯基教学教育过程最优化的理论主要包括以下6个方面:(1)教学教育过程最优化的概念;(2)教学教育过程最优化的理论基础;(3)教学教育过程最优化的原则;(4)实施教学教育过程最优化的程序;(5)预防和克服学生成绩不良而采取的最优化措施;(6)对优秀学生实施教学教育过程最优化的途径。认为:要达到教学最优化的目的,就必须分析学生状况和教学任务,明确教学内容,选择教学方式、方法,拟定教学进度,对教学结果加以测定和分析等等。要达到最优化的关键:一是分析教材中主要的和本质的东西,确保学生能掌握这些内容;二是选择能有效地掌握所学内容、完成学习任务的教学方法、方式,进行有区别的教学。 4. 有效教学理论。该理论源于20世纪上半叶西方的教学科学化运动,有效教学理论的核心是教学的效益。它关注学生的进步或发展;

有参考基因组的转录组生物信息分析模板

亠、生物信息分析流程 获得原始测序序列(Sequeneed Reads)后,在有相关物种参考序列或参考 基因组的情况下,通过如下流程进行生物信息分析: 原始测序序別 测序数据质量评佶 切娈剪功分析 新转录△预测

1、项目结果说明 1原始序列数据 高通量测序(如illumina HiSeq TM 2000/MiSeq 等测序平台)测序得到的原 始图像数据文件经碱基识别(Base Calling)分析转化为原始测序序列 (Sequeneed Reads),我们称之为 Raw Data 或 Raw Reads ,结果以 FASTQ(简 称为fq)文件格式存储,其中包含测序序列(reads)的序列信息以及其对应的测序 质量信息。 FASTQ 格式文件中每个read 由四行描述,如下: @EAS139:136:FC706VJ:2:2104:15343:197393 1:Y:18:ATCACG GCTCTTTGCCCTTCTCGTCGAAAATTGTCTCCTCATTCGAAACTTCTCTGT + @@CFFFDEHHHHFIJJJ@FHGIIIEHIIJBHHHIJJEGIIJJIGHIGHCCF 其中第一行以“ @开头,随后为illumina 测序标识符(Sequenee Identifiers)和描述文字(选择性部分);第二行是碱基序列;第三行以“ +”开头, 随后为illumina 测序标识符(选择性部分);第四行是对应序列的测序质量(Cock r --------------------------------------- 、 RNA-£E 口整体质量评估 基因差异表达分桁 蛋口网络互作分析 k ____________ ______ ) GO 富集分析 KEGCg 集分析

RNA-Seq项目常见问题与解答

RNA-Seq项目常见问题与解答 这两年随着测序成本的下降和转录组研究的日渐火热,RNA-seq俨然已经成为了分子生物学课题组推进项目的首选方向。在我们接触的转录组项目中,有些老师对项目分析结果存在或多或少不清楚或有疑惑的地方。那么春天来了,花儿开了,今天福利也到了,我们特意将转录组项目中常见的一些问题进行了汇总,各位老师可以按需自取哈。 1.如何判定生物学重复一致性的高低?生物学重复统计方法及公式 答:(1)皮尔逊相关系数r可以作为生物学重复相关性的评估指标,理想的生物学重复试验r2≧0.92。考虑到个体差异、取材环境、时间以及人员操作熟练程度等因素对测序数据的影响,一般r2≧0.8为可接受范围。 (2)Pearson(皮尔逊)相关系数:皮尔逊相关也称为积差相关(或积矩相关)是英国统计学家皮尔逊于20世纪提出的一种计算直线相关的方法。 2.DEG基因用Transcripts还是Unigenes? 答:DEG基因用的是Unigene。 3.transcript-id代表什么意思?为什么有的基因有多个transcript-id? 答:基因转录本id;因为可变剪切的缘故,一个基因可能有多个转录本。 4.在miRNA鉴定中,可能成为miRNA的reads是怎样计算的?哪些条件会影响到mrd值?micro RNA在不同组织有异构体的存在,是如何处理的? 答:与 Rfam, miRbase, RepBase和 Exon\Intro 序列库进行比对,获得 sRNA 注释信息,以此作为预测新的 miRNA 的基础。 miRNA的鉴定是利用miRDeep2软件进行已知及新(保守及非保守)的miRNA鉴定。miDeep2会在reads比对到基因组上的位置两端分别延伸75、15bp进行结构预测,此软件认为极可能与可能是miRNA的根据是通过mrd值来区分的,mrd>-10为可能,mrd>0为极可能; 影响mrd值的有reads在基因组上的分布和碱基结合的自由能等; 5.对于有生物学重复的项目,怎样计算差异基因? 答:两两比对使用的是R的EBseq包, 是基于负二项分布检验的方式对reads数进行差异显著性检验,重复间的比对使用的是R的DEseq包,是基于分层贝叶斯模型的原理对组合内样品进行分析。 6.外显子,内含子及基因间区各自的比例如何评估建库情况? 答:理论上,来自成熟mRNA的reads应该比对到外显子区。但是,由于基因组注释水平、可变剪切导致的内含子序列保存,以及很多RNA(比如lncRNA)就来自基因间区和内含子,因此有比对到内含子和基因间区的reads。受物种等的影响外显子所占比例不同,一般情况下外显子区域所占比例超过70%即比较理想。

课题结题报告范文八篇

课题结题报告范文八篇 篇一 一、研究的缘由 《幼儿园教育指导纲要》指出,“玩是孩子的天性,要发现、保护和引导幼儿固有的天性。”“幼儿园以游戏为基本活动”。但在实际的幼儿园教育中,还存在重智育、轻游戏的倾向。家长也更关心孩子的智力发展,往往认为游戏就是“玩”,对孩子的成长没有多少用处。儿童游戏越来越少,孩子越来越孤独。而另一方面,民间游戏面临失传。那些以前给我们带来无限快乐的民间游戏踢毽子、跳房、投沙包------已不再为孩子们所熟悉。其实,民间游戏简单易学、趣味性强、材料方便、不受场地人数限制,具有很强的可操作性和潜在发展空间,正适合我们县城的幼儿园,我们何不把民间游戏介绍给孩子们,让他们也体验传统游戏的快乐呢?为此,我们幼儿园选取了董旭花教授的“学前儿童游戏的多元价值开发”子课题——“民间游戏的现代好处挖掘”,期望在课题引领下认真了解、解读民间游戏,让它在幼儿幼儿园教育中发挥巨大作用,让孩子们体会民间游戏的乐趣,促进孩子们健康快乐成长。同时也期望,在课题引领下,教师的专业素质得到进一步提高。 二、研究目标

1、以课题活动为契机,提高老师的专业素质,重点提高教师的教育科研潜力。[由https://www.wendangku.net/doc/2b5985414.html,整理] 2、研究民间游戏所蕴含的教育价值,了解游戏对幼儿社会性交往潜力、情感、智力发展的作用。 三、研究资料 1、各年龄班如何选取适宜的民间游戏,如何对传统民间游戏进行改变和创新。 2、民间游戏与幼儿多元智能(个性是社会交往潜力)发展的关系。 四、研究对象 主要选取夏津华夏幼教中心3---6岁(小、中、大班)约300名幼儿作为研究对象。 五、研究方法 文献研究法、行动研究法、经验总结法、评优展示法、观察法、谈话法 1、文献研究法:透过对相关游戏资料的搜集、学习、分析和理解,了解关于幼儿游戏评价的最新进展和民间游戏的现状,为幼儿进行游戏活动带给理论支 持和方法指导。如:我们透过研究资料搜集了很多少数民族的游戏,如“叼羊大赛”、跳花竿等,孩子们很喜欢。

项目结题报告(正式)

常州市景点旅游资料英译研究结题报告 一项目研究的背景 随着对外经济和文化交流的日益增加,越来越多的外国友人来到中国,特别是常州近年来经济开始发展,使英语作为“世界通语”的重要性显得尤为突出。而作为“城市脸孔”的景点旅游资料英译是给所有到中国来的外国人士留下第一印象的中国的名片。有此而得旅游翻译的重要性也日益突显,旅游景点旅游资料英译亟待普及和提高。但是通过网络对中国大多数旅游景点的调查结果以及我们团队对常州各景点的实地考察,我们不难发现,在这些景点中,景点旅游资料英译存在着诸多问题,这些问题严重制约着中国旅游业的发展,同时也严重损害了中国在世界的形象。因此,景点旅游资料英译研究日显必要,其目的很明确,即在必要的场合能够指示、提示、警示、帮助在华的外国友人更加方便的学习、旅游和工作。因而旅游翻译的质量无疑直接影响着游客对旅游景点的认识和欣赏,具有重要意义。 二项目的研究目标与研究过程 1、研究目标 此项研究将以文化翻译理论为理论指导,对常州市主要旅游景点如:红梅公园、中华恐龙园、春秋淹城、常州博物馆等地的旅游资料英译进行调查,通过分析收集的语料,总结这些旅游资料英译中存在的问题并其提出改进意见。通过这次训练使参加的学生能够充分锻炼实验动手能力和理论应用能力,并且能够熟练使用计算机等先进行技术手段进行数据分析处理和撰写总结报告。 2、研究过程 第一个月召开项目小组第一次会议分配相关任务,并选举项目的小组负责人

定期向指导教师汇报进展情况。2012.11—2012.12 :搜集资料、实地考察;并定期召开项目会议了解各自进展情况,并对遇到的实际问题进行商讨以寻求最佳解决方案。在整个项目的实施过程中教师给学生以全程指导。2013.1—2013.4 :参考文献,分析资料,利用已学知识对调查得出的问题提出相应的修改意见和建议,并撰写相关论文。2013.6—2013.9 :对项目进行总结并撰写结题报告。2013.10—2013.12:进行结题的各项工作。 在进行常州公园公示语翻译现状调查过程中学生主要采用的方式为照片采集、归纳法和总结法。 三项目研究成果与分析 在对常州市区景点景点旅游资料英译研究进行调查,通过分析收集的语料,我们发现旅游资料英译中存在不少问题,对此我们进行了以下的总结。 一、景点旅游资料英译中存在或多或少的翻译错误 1 翻译中的Chinglish 因为不同国家的语言、风俗、兴趣等各有不同,在旅游翻译中应该细心甄别、求同化异、查漏补缺。就语言差异来说,忽视的后果就是产生Chinglish。我们在各个常州景区发现这个问题相当严重。例如溧阳天目湖山水园内“制茶表演”原译为“system tea performance ”。这里的“制”不是“制度”而是“制作”。我们认为应译做“Tea Making Performance ”。再如“小心有电”不能译作贻笑大方的“Carefully has there electricity! ”而可以译为“Caution! Electricity! ”通俗易懂。“小心路滑”有人译为“Notice: The roads are very slippery ”为符合英文的标语 习惯,可以改为“Slippery Road (Be Careful )!”。如果是室内,还可改为“Caution:Wet Floor!”文化上的差异和缺失也往往是翻译的难点,弄不好还会在无意中得

课题结题报告范本【三篇】(完整版)

报告编号:YT-FS-7170-25 课题结题报告范本【三 篇】(完整版) After Completing The T ask According To The Original Plan, A Report Will Be Formed T o Reflect The Basic Situation Encountered, Reveal The Existing Problems And Put Forward Future Ideas. 互惠互利共同繁荣 Mutual Benefit And Common Prosperity

课题结题报告范本【三篇】(完整 版) 备注:该报告书文本主要按照原定计划完成任务后形成报告,并反映遇到的基本情况、实际取得的成功和过程中取得的经验教训、揭露存在的问题以及提出今后设想。文档可根据实际情况进行修改和使用。 篇一 《儿童传统游戏的现代好处挖掘》课题结题报告 一、研究的缘由 《幼儿园教育指导纲要》指出,“玩是孩子的天性,要发现、保护和引导幼儿固有的天性。”“幼儿园以游戏为基本活动”。但在实际的幼儿园教育中,还存在重智育、轻游戏的倾向。家长也更关心孩子的智力发展,往往认为游戏就是“玩”,对孩子的成长没有多少用处。儿童游戏越来越少,孩子越来越孤独。而另一方面,民间游戏面临失传。那些以前给我们带来无限快乐的民间游戏踢毽子、跳房、投沙包------已不再为孩子们所熟悉。其实,民间游戏简单易学、趣味性强、材

料方便、不受场地人数限制,具有很强的可操作性和潜在发展空间,正适合我们县城的幼儿园,我们何不把民间游戏介绍给孩子们,让他们也体验传统游戏的快乐呢?为此,我们幼儿园选取了董旭花教授的“学前儿童游戏的多元价值开发”子课题——“民间游戏的现代好处挖掘”,期望在课题引领下认真了解、解读民间游戏,让它在幼儿幼儿园教育中发挥巨大作用,让孩子们体会民间游戏的乐趣,促进孩子们健康快乐成长。同时也期望,在课题引领下,教师的专业素质得到进一步提高。 二、研究目标 1、以课题活动为契机,提高老师的专业素质,重点提高教师的教育科研潜力。[由*整理] 2、研究民间游戏所蕴含的教育价值,了解游戏对幼儿社会性交往潜力、情感、智力发展的作用。 三、研究资料 1、各年龄班如何选取适宜的民间游戏,如何对传统民间游戏进行改变和创新。

转录组RNAseq术语解释

RNA-Seq名词解释 1.index 测序的标签,用于测定混合样本,通过每个样本添加的不同标签进行数据区分,鉴别测序样品。 2.碱基质量值 (Quality Score或Q-score)是碱基识别(Base Calling)出错的概率的整数映射。碱基质量值越高 表明碱基识别越可靠,碱基测错的可能性越小。 3.Q30 碱基质量值为Q30代表碱基的精确度在99.9%。 4.FPKM(Fragments Per Kilobase of transcript per Million fragments mapped) 每1百万个map上的reads中map到外显子的每1K个碱基上的fragment个数。计算公式为 公式中,cDNA Fragments 表示比对到某一转录本上的片段数目,即双端Reads数目;Mapped Reads(Millions)表示Mapped Reads总数, 以10为单位;Transcript Length(kb):转录本长度,以kb个碱基为单位。 5.FC(Fold Change) 即差异表达倍数。 6.FDR(False Discovery Rate) 即错误发现率,定义为在多重假设检验过程中,错误拒绝(拒绝真的原(零)假设)的个数占所有被拒绝 的原假设个数的比例的期望值。通过控制FDR来决定P值的阈值。 7.P值(P-value) 即概率,反映某一事件发生的可能性大小。统计学根据显著性检验方法所得到的P 值,一般以P<0.05 为显著,P<0.01为非常显著,其含义是样本间的差异由抽样误差所致的概率小于0.05或0.01。 8.可变剪接(Alternative splicing)

课题研究结题报告范文

《新课程背景下小学语文课堂教学设计有效性的研究》 结题报告(范文) ****小学**** 一、研究背景 (一)问题的提出 “教学质量是教育的生命。”语文课堂教学效率的高低,直接关系到语文教学质量的高低。新一轮课程改革的不断深入,引起了课堂教学的变革,但无论教学思想如何更新,教学内容如何变化,教学方式如何改进,其最终目的都必须指向教学的有效性,对语文课堂有效性的研究,成了广大语文教师的当务之急。 新教材实施至今已有一段时间,听了许多课,本人发现我们常态下的语文课堂教学存在着不少问题: (1)三维目标割裂,不明确,不符合学生实际。 (2)教学内容单薄,结构松散,零敲碎打,置语文内容的整体性于不顾。 (3)过分注重朗读与感悟,弱化语文的“工具性”,训练不扎实,不到位。 (4)为体现学生的主体,刻意追求课堂的热闹,花里胡哨,却只留于形式。 (5)过分张扬语文的“人文性”,东拉西扯,与其他学科的内容过度整合,非语文的东西“越俎代庖”,削弱了学科特点。 我想这些正是造成当下小学语文教学效率不太高的主因。因此,

在全面推进素质教育的今天,在新一轮基础教育课程改革进行之时,研究、掌握课堂教学有效性的策略成为摆在我们面前的一个难题,也是我们迫切要解决的问题。 (二)课题界定和理论依据 所谓课堂教学设计的有效性是指在准确把握教材的编写意图与特点,在课程目标的引领下,根据学生的年龄特点和知识水平,设计更加科学、有效的实施程序,包括教学目标、教学重难点、教学策略、教学准备等,引导学生进行有效学习的课堂教学设计。学生在课堂学习中有无进步或发展(包括知识、智力、情感、创造力、思维与实践能力等方面),是教学有没有效益的唯一指标。 生本教育理论 生本教育理论认为,教师需要为学生设计一种以学生好学为中心的教育体系,要以一切为了学生、高度尊重学生、全面依靠学生为教育的宗旨。 据此,本人确立了“新课程背景下小学语文课堂教学设计有效性的研究”这一课题。所谓课堂教学设计的有效性是指在准确把握教材的编写意图与特点,在课程目标的引领下,根据学生的年龄特点和知识水平,设计更加科学、有效的实施程序,包括教学目标、教学重难点、教学策略、教学准备等,引导学生进行有效学习的课堂教学设计。学生在课堂学习中有无进步或发展(包括知识、智力、情感、创造力、思维与实践能力等方面),是教学有没有效益的唯一指标。 此外,还有巴班斯基的最优化理论、教学方法论都是本课题立项

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