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过氧化氢H2O2测定试剂盒

过氧化氢H2O2测定试剂盒
过氧化氢H2O2测定试剂盒

过氧化氢(H2O2)测定试剂盒

说明书修订日期:2018.07.31 Cat number:KGT018

Store at 4℃ for for 6 months

For Research Use Only(科研专用)

一、原理

过氧化氢H2O2可以与钼酸作用生成一种络合物在405 nm处测定其生成量可计算出H2O2的量。

二、试剂组成

组份KGT018(50 assays)储存条件

Buffer A 60.0 mL 4℃

Buffer B 60.0 mL 4℃

H2O2标准储备品 5 ml 4℃

163mmol/LH2O2标准品工作液的配制:用前按 H2O2标准储备液:蒸馏水= 1:9 比例稀释,现用现配。

三、操作方法

空白管标准管测定管Buffer A(ml)(37℃预温) 1 1 1 蒸馏水(ml)0.1

163mmol/L H2O2标准品工作液(ml)0.1

样本(ml)0.1

Buffer B(ml) 1 1 1

混匀,于405 nm处,1 cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度。

四、计算公式

(一)血清、血浆样本:

(二)组织样本:

准确称取组织重量,按照重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,10000 rpm/min离心10min,取上清10%匀浆待测。

五、备注

1 、Buffer A 使用前需 37℃预温 10 分钟。

2 、样本取样量要做预试,吸光度大于 0.8 以上则需将样本进行稀释。若吸光度小于 0.05 以下,则需

将取样量增加。(标准管中的标准品工作液及空白管中的蒸馏水均要同样量增加)

3 、本试剂盒检测范围为0.5-380 mmol/L。

4 、本试剂盒仅用于科研。

凯基相关产品(详见凯基网站https://www.wendangku.net/doc/2514866484.html,)细胞株、细胞提取物及细胞培养产品

人类肿瘤细胞株动物肿瘤细胞株正常细胞株肿瘤耐药细胞株

细胞提取物(RNA/DNA/蛋白)

细胞培养相关产品

细胞凋亡

一、细胞凋亡研究试剂盒

Annexin V-FITC/ EGFP/PE 细胞凋亡检测试剂盒

TUNEL 凋亡原位检测系列试剂盒

Caspase(2、3、6、8、9)系列细胞凋亡检测试剂盒

线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)

TRAP-PCR 端粒酶活性检测试剂盒

DNA Ladder 检测试剂盒

二、细胞凋亡相关抗体

三、凋亡诱导剂、抑制剂

四、氧化应激损伤检测试剂盒

五、细胞凋亡研究辅助试剂

细胞增殖/毒性/活力与细胞周期

凯基细胞周期检测试剂盒

MTT、XTT、WST-1、CCK-8 等系列细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

细胞染色产品

□活细胞/凋亡细胞/坏死细胞鉴别试剂盒(AO/EB法.荧光显微镜)

凯基细胞凋亡形态学检测试剂盒

罗丹明123、DAPI、PI、7-AAD、Hoechst 33258、EB、吖啶橙染色试剂盒

亚细胞组分制备

细胞核、线粒体制备试剂盒

细胞悬液制备试剂盒(组织消化试剂盒)

危险化学品档案51001过氧化氢

危险化学品档案51001:过氧化氢[20%≤含量≤60%]] (过氧化氢溶液,含水20%~60%;H2O2;双氧水) 危险化学品查询结果 1.物质的理化常数: 2.对环境的影响: 一、健康危害

侵入途径:吸入、食入。 健康危害:吸入本品蒸气或雾对呼吸道有强烈刺激性。眼直接接触液体可致不可逆损伤甚至失明。口服中毒出现腹痛、胸口痛、呼吸困难、呕吐、一时性运动和感觉障碍、体温升高等。个别病例出现视力障碍、癫痫样痉挛、轻瘫。 二、毒理学资料及环境行为 急性毒性:LD504060mg/kg(大鼠经皮);LC502000mg/m3,4小时(大鼠吸入) 致突变性:微生物致突变:鼠伤寒沙门氏菌10μL/皿;大肠杆菌5ppm。姊妹染色单体交换:仓鼠肺353μmol/L。 致癌性:IARC致癌性评论:动物可疑阳性。 危险特性:爆炸性强氧化剂。过氧化氢本身不燃,但能与可燃物反应放出大量热量和气氛而引起着火爆炸。过氧化氢在pH值为 3.5~4.5时最稳定,在碱性溶液中极易分解,在遇强光,特别是短波射线照射时也能发生分解。当加热到100℃以上时,开始急剧分解。它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物,在撞击、受热或电火花作用下能发生爆炸。过氧化氢与许多无机化合物或杂质接触后会迅速分解而导致爆炸,放出大量的热量、氧和水蒸气。大多数重金属(如锨、铜、银、铅、汞、锌、钴、镍、铬、锰等)及其氧化物和盐类都是活性催化剂,尘土、香烟灰、碳粉、铁锈等也能加速分解。浓度超过74%的过氧化氢,在具有适当的点火源或温度的密闭容器中,会产生气相爆炸。 燃烧(分解)产物:氧气、水。 3.现场应急监测方法: 便携式气体检测仪 4.实验室监测方法:

植物组织过氧化氢含量的测定

植物组织过氧化氢含量 的测定 Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

配制100ml 、100umol/L 的过氧化氢溶液需要多少30%的过氧化氢原液请写出计算过程。答:首先计算其摩尔浓度: 若30%为其质量百分数 双氧水30%浓度的试剂(上海国药集团出品),室温时实测密度为:1,122g/L,所以,1L 30%含量的双氧水中过氧化氢含量为:1122g/L ×1L×30%=337g 又H2O2的分子量为,那么1L 30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为:337/= mol/L. 100ml×10-3×100umol/L×10-6=mol/L×V V=10-6L=1 ul 若30%为体积分数 100% H2O2密度是1,440 g/L, 30 ml H2O2的质量为1440 g/L ×30 ml×10-3=,30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为:= mol/L. 100ml×10-3×100umol/L×10-6=mol/L×V V=×10-7L= ul 植物组织中过氧化氢含量测定 植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。 【原理】 H2O2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被H2SO4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。

过氧化氢酶活力的测定实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除过氧化氢酶活力的测定实验报告 篇一:实验35过氧化氢酶的活性测定 植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使h2o2发生累积。h2o2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除h2o2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中h2o2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。 一、过氧化氢含量的测定 【原理】 h2o2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被h2so4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与h2o2浓度呈线性关系。 【仪器和用具】 研钵;移液管0.2ml×2支,5ml×1支;容量瓶10ml×

7个,离心管5ml×8支;离心机;分光光度计。 【试剂】 100μmol/Lh2o2丙酮试剂:取30%分析纯h2o257μl,溶于100ml,再稀释100倍;2mol/L硫酸;5%(w/V)硫酸钛;丙酮;浓氨水。【方法】 1.制作标准曲线:取10ml离心管7支,顺序编号,并按表40-1加入试剂。 待沉淀完全溶解后,将其小心转入10ml容量瓶中,并用蒸馏水少量多次冲洗离心管,将洗涤液合并后定容至10ml 刻度,415nm波长下比色。 2.样品提取和测定:(1)称取新鲜植物组织2~5g(视h2o2含量多少而定),按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后,转入离心管 3000r/min下离心10min,弃去残渣,上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液1ml,按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水,待沉淀形成后3000rpm/min离心10min,弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤3~5次,直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol硫酸5ml,待完全溶解后,与标准曲线同样的方法定容并比色。3.结果计算:植物组织中h2o2含量(μmol/gFw)= 式中c—标准曲线上查得样品中h2o2浓度(μmol);Vt —样品提取液总体积(ml);V1—测定时用样品提取液体积

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号:BC0200规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体100μL×3瓶,4℃保存。产品说明: CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H 2O 2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。 H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解H 2O 2,使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。试验中所需的仪器和试剂: 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:一、粗酶液提取: 1、细菌、细胞或组织样品的制备 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(功率20%或200w,超声3秒,间隔10秒。重复30次);8000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样品:直接检测。

二、CAT 测定操作 1、分光光度计预热30min 以上,调节波长至240nm 处,蒸馏水调零。 2、CAT 检测工作液的配置:用时在每瓶试剂二(100μL)中加入20ml 试剂一,充分混匀,作为工作液; 用不完的试剂4℃保存一周。 3、测定前将CAT 检测工作液37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)水浴10min。 4、取1mLCAT 检测工作液于1mL 石英比色皿中,再加入35μL 样本,混匀5s;室温下立即测定240nm 下的 初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。计算ΔA=A1-A2。三、CAT 活性计算: 1、血清(浆)CAT 活力的计算: 单位的定义:每毫升血清(浆)在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷V 样÷T=678×ΔA 2、组织、细菌或细胞中CAT 活力计算:(1)按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷(V 样×Cpr)÷T=678×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算: 单位的定义:每g 组织在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷(W×V 样÷V 样总)÷T=678×ΔA÷W 3、按细菌或细胞中CAT 活力计算: 单位的定义:每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)÷T=1.356×ΔA V 反总:反应体系总体积,1.035×10-3L;ε:H 2O 2摩尔吸光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm; V 样:加入样本体积,0.035mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,1min。 W:样本鲜重,g; Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL;

过氧化氢含量的测定_实验报告

实验一过氧化氢含量的测定(高锰酸钾法) 一、实验目的 (1)掌握高锰酸钾法测定过氧化氢含量的原理、滴定条件和操作步骤; (2)掌握移液管及容量瓶的正确使用方法,熟悉液体样品的取样和稀释操作。 二、实验原理 (1)由于在酸性溶液中,KMnO 4的氧化性比H 2 O 2 的氧化性强,所以,测定H 2 O 2 的 含量时,常采用在稀硫酸溶液中,室温条件下用高锰酸钾法测定。其反应为: 5H 2O 2 +2MnO 4 -+6H+=2Mn2++8H 2 O+5O 2 % 100 01701 .0 % 2 2 ? ? ? = M V C O H 实验室用Na 2C 2 O 4 标定KMnO 4 溶液, KMnO4溶液在热得酸性溶液中进行,反应如下: 2KMnO 4?+5H 2 C 2 O 4 +6H+=2Mn2++10CO 2 +8H2O C(KMnO 4)=2m(Na 2 C 2 O 4 )/5M(KMnO 4 )V(KMnO 4 ) 开始反应缓慢,第1滴溶液滴入后不易褪色,待产生Mn2+后,由于Mn2+的催化作用,加快了反应速率,故滴定速度也应加快,直至溶液呈微红色且半分钟内不退色,即为终点。根据高锰酸钾浓度和滴定中消耗KMnO 4 的体积,按下式计算过氧化氢的含量: 式中p(H 2O 2 )——稀释后的H 2 O 2 质量浓度,g/L。 三、仪器与试剂 仪器:移液管(25ml),吸量管(10ml),洗耳球,容量瓶(250ml),酸式滴定管(50ml). 试剂:工业H 2O 2 样品,KMnO 4 L)标准溶液,H 2 SO 4 (3mol/L)溶液。 四、实验步骤 的KMnO 4 标准溶液的配置及标定 (1)LKMnO 4 标准溶液的配制 ~固体,置于500ml烧杯中,加入400ml蒸馏水→表面皿,煮沸20~30min→→冷却后倒入棕色瓶,加水稀释至500ml,摇匀,静置7~10d→→→上清液砂芯漏斗过滤→洗净试剂瓶,滤液倒进试剂瓶,贴上标签,待标定 KMnO 4 标准溶液的标定 (2)准确称取~基准物Na 2C 2 O 4, 置于250ml锥形瓶中→→→→ 40ml蒸馏水,15ml H 2SO 4 (3mol/L),水浴至蒸汽冒出→ 趁热标定,开始速度慢点,随后可适当加快但不能使溶液连续流下,紫红色快褪 去时速度再次减慢→→ 最后加半滴KMnO 4 标准溶液,在摇匀后30s内保持红色不退去,表明到达终点。记 下KMnO 4 标准溶液的体积。 平行滴定三次 2.H 2O 2 的含量测定 用吸量管吸取10mlH 2O 2 样品(约为3%),置于250ml容量瓶中,加水稀释至标 线,混合物均匀。用移液管准确移取过氧化氢稀释液三份,分别置于三个250ml 锥形瓶中,各加5mlH 2SO 4 (3mol/L),用高锰酸钾标准溶液滴定。开始反应缓慢, 待第一滴高锰酸钾溶液完全褪色后,再加入第二滴,随着反应速度的加快,可逐渐增加滴定速度,直到溶液呈为微红色且半分钟内不退色,即为终点。计算未经稀释样品中的含量。 五、实验记录与处理

全项目多功能食品安全检测仪

随着现在物价水平的提高,大家对食品安全的意识越来越高。食品安全问题自始至终遭到大家的高度重视。现在随着网络信息科技的发展使食品安全方面的新闻被曝露出去。现如今为了保障食品的安全性,增加食品卫生安全监管检验幅度,全项目多功能食品安全检测仪及技术专业测量仪器设备具有关键的作用。 利用全项目多功能食品安全检测仪对食品安全检测可以迅速使大家发现不好的,有质量问题食品,并防止这类有食品问题的食品在市场销售上商品流通企业和进入顾客家里,从而严重威胁顾客身体健康。如今有关质量监督单位、农贸批发市场、商场、生产基地等进行食品安全检验都采用食品安全检验仪,可免去繁杂的前处理方式,回应降低检测时间,为科学研究点评食品卫生安全出示关键支撑点。 产品用途: 为集成化食品安全快速检测分析设备,广泛应用于食药监局、卫生部门、高教院校、科研院所、农业部门、养殖场、屠宰场、食品肉产品深加工企业、检验检疫部门等单位使用。 应用范围: 可现场快速检测非食用化学物质、滥用食品添加剂、农药残留、兽药残留、重金属、抗生素类残留、激素类残留、毒素类残留、化学类残留等200多项目的快速定性定量检测。如农药残留总含量(有机磷、氨基甲酸酯类)、克百威、百菌清、多菌灵、甲萘威、毒死蜱、甲基异柳磷、氟虫腈、百草枯、啶虫脒、三唑磷、异丙威、水胺硫磷、杀螟硫磷、甲氰菊酯、联苯菊酯、甲醛、二氧化硫、吊白块、过氧化氢、

亚硝酸盐、蛋白质、蜂蜜果糖和葡萄糖、蜂蜜中蔗糖、过氧化值、酸价、白酒中的杂醇油、铅、汞砷、锡、镉、硼砂、食盐中亚铁氰化钾、食盐中碘、过氧化苯甲酰、红色色素(胭脂红、苋菜红)、黄色色素(柠檬黄、日落黄)、蓝色色素(亮蓝)、食醋的总酸、酱油的总酸、苯甲酸钠、甜蜜素、木耳中硫酸镁、芝麻油纯度、油脂丙二醛、溴酸钾、余氯、谷氨酸钠、挥发性盐基氮、山梨酸、糖精钠、饮料中维C、酱油氨基酸态氮、肉制品酸价、水中氰化物、水发产品中组胺、蜂蜜定粉酶、蜂蜜酸度、罗丹明B、三聚氰胺、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、四环素类、硝基呋喃类、磺胺类、沙星类、氯霉素、孔雀石绿磺胺类、猪蓝耳病毒、猪瘟病毒、黄曲霉毒素B1、猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病毒gE蛋白、猪口蹄疫3ABC蛋白、猪口蹄疫病毒IgG、猪细小病毒、鸡禽流感等快速检测。 产品性能: 一体化主机,包含食品安全检测模块、多通道农药残留检测模块、胶体金免疫层析检测模块。 一体化便携式快检设备,满足现场及流动检测使用需求,能够在同一软件下实现所有检测项目的检测,并可通过同一窗口直观显示检测结果。 胶体金模块检测方式:轨道式自动传输扫描,检测完成后自动退出试纸。 CT线自动识别,无需手动调整。 样品处理简单省力,整体操作快速、安全、便捷。

(完整word版)过氧化氢的测定

Fenton体系下过氧化氢的测定 一、反应体系中双氧水测定方法的建立 体系中双氧水的测定主要采用高锰酸钾法和碘量法,碘量法检出限较高、操作繁琐,高锰酸钾法是较常规的分析方法,操作简单且准确性高,但在Fenton氧化体系中,由于可被高锰酸钾氧化的亚铁离子和有机物的存在,测定结果往往偏高。因此,本实验采用了已有报道的钛盐光度法测定Fenton体系氧化过程中的过氧化氢含量。 钛盐光度法测定过氧化氢的原理是过氧化氢与钛离子在酸性溶液中形成稳定橙色络合物—过钛酸(pertitanic acid),此络合物颜色的深浅与样品中过氧化氢的含量成正比。姜成春等在蒸馏水体系、含有机物体系及Fenton高级氧化体系中,对高锰酸钾法、碘量法和钛盐光度法测定过氧化氢的结果进行对比分析,得出可见钛盐光度法测定过氧化氢具有较高的灵敏度,而且检测限较低,有利于低浓度过氧化氢的测定,避免了氧化还原法测定低浓度过氧化氢通过终点颜色判断所带来的误差。 二、钛盐光度法测定过氧化氢方法的建立: 仪器及实验药品: 1、DR2800;哈希管; 2、药品:100mg/l过氧化氢;3mol/l硫酸溶液;0.05mol/l 草酸钛钾溶液; 三、测定波长为400nm 四、标准曲线的测定:

分别取已配置好的双氧水标准溶液(100mg/L)已用高锰酸钾法标定,取0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2ml于哈希管中,分别加入0.5ml 的3.0mol/l硫酸溶液和0.05mol/l草酸钛钾溶液,再加入适量纯水至5ml。放置10min,在400nm波长下,以试剂空白作参比,测定其吸光度。 Fenton氧化体系中双氧水的测定:将反应结束后的一定量的待测溶液加入哈希管中,分别加入0.5ml的3.0mol/L硫酸溶液和0.05mol /L草酸钛钾溶液,定量至5ml并摇匀后放置10min,在400nm波长下,以试剂空白作参比,测定其吸光度。根据所测吸光度于标准曲线上查的双氧水的含量。 五、条件的确定 在做标线之前分别考虑了硫酸和草酸钛钾用量的影响,通过做的结果发现,在过氧化氢量一定的条件下,3mol/l硫酸和0.05mol/l草酸钛钾用量都在0.5ml时测定吸光度最大,用量低于0.5ml和高于0.5ml,其吸光度都相对降低,在0.5ml时,其吸光度是最大的。所以对于本实验硫酸和草酸钛钾用量都是0.5ml。 六、过氧化氢100mg/l的标线如下: 过氧化氢浓度(mg/l) 4 8 12 16 20 24 吸光度0.154 0.31 0.456 0.61 0.776 0.927

植物过氧化物酶检测试剂盒(愈创木酚比色法)

植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚比色法) 简介: 过氧化物酶(peroxisome ,POD)是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶,主要存在于细胞的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。该酶属于细胞木质素合成途径中间的关键酶,研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理,为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。 Leagene 植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚比色法)检测原理是以愈创木酚(又称2-甲氧基酚)作为底物,在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法,于分光光度计检测吸光度,以吸光度变化所需酶量进行计算。该试剂盒主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的过氧化物酶活性,尤其适用于检测水果中过氧化物酶活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 自备材料: 1、 蒸馏水 2、 研钵或匀浆器 3、 离心管或试管 4、 低温离心机 5、 水浴锅或恒温箱 6、 比色杯 7、 分光光度计 操作步骤(仅供参考): 1、 准备样品: ①植物样品:取2g 植物组织或水果中层果肉加入4ml 预冷的POD Lysis buffer 研磨或匀 编号 名称 TE0425 50T Storage 试剂(A): POD Lysis buffer 250ml 4℃ 试剂(B): POD Assay buffer 100ml 4℃ 避光 试剂(C): POD 氧化剂 4ml RT 使用说明书 1份

浆离心,留取上清液,冻存,用于过氧化物酶的检测。 ②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,冻存,用于过氧化物酶的检测。 ③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用POD Lysis buffer进行适当匀浆,离心,取上清液,冻存,用于过氧化物酶的检测。 ④高活性样品:如果样品中含有较高活性的过氧化物酶,可以使用POD Lysis buffer进行恰当的稀释。 2、配制POD Assay buffer工作液:取适量POD氧化剂和POD Assay buffer,POD氧 化剂:POD Assay buffer按一定比例混合,即为POD Assay buffer工作液,即配即用,不宜久置。 3、加样:按照下表设置对照管、测定管,注意:对照管、测定管中为同一待测样品,但对 照管中为提前加热煮沸的样品。溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的POD活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行管,求平均值。 加入物(ml) 对照管测定管 待测样品0.05 0.05 POD Lysis buffer 1.45 1.45 POD Assay buffer工作液 1 1 4、POD检测:立即以分光光度计,比色杯光径1.0cm,以对照管为对照,测定测定管的 吸光度(A测定0)。准确孵育后,立即加入POD终止液终止反应(备选方案),以分光光度计,比色杯光径1.0cm,以对照管为对照,测定测定管的吸光度(A测定1)。注意:加入POD终止液终止反应不是必须步骤,可准确孵育后直接以分光光度计,比色杯光径 1.0cm,以对照管为对照,测定测定管的吸光度(A测定1)。 计算: POD活性单位的定义:在该实验条件下,每1min吸光度变化0.01所需酶量为一个活性单位。 组织样本POD(U)={(A测定1-A测定0)×V T}/(W×V S×0.01×t) 式中:A测定1=孵育3min后测定管的吸光度值 A测定0=加入POD Assay buffer工作液后立即测定的测定管吸光度值 W=组织样本的重量(g) V T=提取酶液的总体积(ml) V S=测定时所用酶液体积(ml)

过氧化氢的检测方法(适用范围、分析步骤)

化妆品中过氧化氢的检测方法 1、适用范围 本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中过氧化氢(CAS:7722-84-1)含量的方法。 本方法适用于染发剂、膏状面膜中过氧化氢含量的测定。 2、方法提要 试样采用水浸提,部分上清液与三苯基膦衍生反应,衍生溶液经滤膜过滤,用液相色谱分离,紫外检测器检测,峰面积定量,以标准曲线法计算含量,得到样品中过氧化氢的含量。本方法对过氧化氢的检出限为0.0012μg,定量下限为0.004μg。若取0.2g样品,过氧化氢的最低检出浓度为60μg/g,最低定量浓度为200μg/g。 3、试剂和溶液 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为一级实验用水。 3.1乙腈,色谱纯。 3.2三苯基膦溶液,称取三苯基膦1.3g,用乙腈(3.1)溶解,定容至25mL,浓度为0.2mol/L,现用现配。 3.3氧化三苯基膦溶液,称取氧化三苯基膦0.0003g,用乙腈(3.1)溶解,定容至100mL,浓度为0.00001mol/L。 3.4过氧化氢,浓度为3%,使用前需要进行标定,标定方法见附录。 3.5过氧化氢标准储备液:称取标定过的过氧化氢对照品(3.4)1.5g,精确到0.0001g,置于25mL棕色容量瓶中,用水定容,摇匀,配制成质量浓度为1.8mg/mL的标准储备溶液。 3.6过氧化氢标准工作液:配制浓度分别为3.6mg/L、9.0mg/L、18mg/L、36mg/L、54mg/L、90mg/L、180mg/L的标准工作液。 4、仪器和设备 4.1高效液相色谱仪:具有二极管阵列检测器。 4.2涡旋振荡器。 4.3分析天平:感量0.0001g。 4.4分析天平:感量0.001g。 5、分析步骤 5.1样液的制备 5.1.1样品前处理 称取样品约0.05g~0.2g(精确至0.001g),含过氧化氢3%以下称取0.2g,含过氧化氢3%~6%称取0.1g,含过氧化氢6%~12%称取0.05g,置于100mL容量瓶中,加入约50mL 水,振摇至样品完全溶解,用水定容,摇匀备用。面膜等半固体样品可以称取样品于50mL 烧杯,加入约20mL,用玻璃棒将样品搅碎,用水转移至100mL容量瓶中,定容,摇匀备用。 5.1.2衍生化反应 分别移取过氧化氢标准工作液(3.6)和样液(5.1.1)各1mL于10mL棕色容量瓶中,加入1mL三苯基膦乙腈溶液(3.2),振摇,继续加入5mL乙腈(3.1),振摇,用水定容,摇匀。置于暗处室温反应30min。 5.2测定

过氧化氢含量的测定

过氧化氢含量的测定 随着新版GMD的实施和推广,对无菌药品的生产也提高了相应的要求,而灭菌一直以来都是无菌产品的关键环节,为了提高产品的质量,选择合适的灭菌方式就显得尤为重要。 在各种灭菌技术当中,气态过氧化氢(H?O?)灭菌技术被公认为理想的灭菌方式。过氧化氢蒸气(VHP)消毒技术正迅速成为制药、生物技术和医疗卫生行业生物净化方法的选择,对与高压锅相同的生物指示剂-嗜热脂肪芽抱杆菌达到6-log的杀灭率。这种灭菌方式目前已广泛应用于制药、生物科技生物医学、卫生保健、生物、食品和环境保护等诸多方面。 双氧水消毒剂 双氧水消毒液是一种临床常用的消毒剂,对大多数细菌繁殖体有较好的杀灭效果。双氧水消毒液为无色透明液体, 有效成分为过氧化氢,工业品的有效含量在40%左右,一般用水稀释使用。有研究表面,用浓度为32.3%双氧水消毒液原液作用1min,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌杀灭率为99.99%;作用30min 对白色念珠菌的杀灭率为99.41% ;作用90min对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率为99.92% 以上。 实验方法 掌握以Na?C?O?,为基准物质标定KMnO?,标准溶液的原理和方法

掌握用高锰酸钾法测定过氧化氢含量的原理和方法 实验原理 H?O?于其氧化还原性,广泛应用于漂白、消毒、杀菌医药等工业,因此常需要测定它的含量。 H?O?分子中含有一个过氧键-O-O-,既可在一定条件下作为氧化剂,又可在一定条件下作为还原剂。在稀硫酸介质中,在室温条件下KMnO?可将其定量氧化,因此可用高锰酸钾法测定过氧化氢含量,其反应式为: 滴定在酸性溶液中进行,反应时锰的氧化数由+7变到+2。开始时反应速度慢,滴入的KMnO?溶液褪色缓慢,待有Mn2?生成后,由于Mn2?的催化作用,反应速度加快,故能顺利滴定,当滴定至溶液中有稍过量的滴定剂MnO?—(2*10-6 mol/L)时,溶液呈现微红色,显示终点。根据KMnO?溶液的浓度和滴定消耗的体积,即可计算H?O?的含量。 试剂及仪器

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书 微量法

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC0205规格:100T/96S 产品内容: 提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体125μL×1瓶,4℃保存。产品说明: CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H 2O 2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。 H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解H 2O 2,使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔(UV 板)、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:一、粗酶液提取: 1、细菌、细胞或组织样品的制备 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样品:直接检测。二、测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。 2、CAT 检测工作液的配制:用时在试剂二中加入25mL 试剂一,充分混匀,作为工作液。 3、测定前将CAT 检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min 以上。 4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL 样本和190μL 工作液,立即混匀并计时,记录240nm 下初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。计算ΔA=A1-A2。三、CAT 活性计算: a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、血清(浆)CAT 活力的计算: 单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷V 样÷T=459×ΔA 2、组织、细菌或细胞中CAT 活力计算:(1)按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每mg 组织蛋白每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 样)÷T=459×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算: 单位的定义:每g 组织每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样÷V 样总×W)÷T=459×ΔA÷W (3)按细菌或细胞数量计算: 单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样÷V 样总×500)÷T =0.917×ΔA V 反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:H 2O 2摩尔消光系数,4.36×104 L/mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.01mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,1min;W:样本鲜重,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;500:细胞或细菌总数,500万;109:单位换算系数,1mol=109nmol。b.用96孔板测定的计算公式如下1、血清(浆)CAT 活力的计算:

过氧化氢H2O2探头

过氧化氢H2O2检测仪 过氧化氢H2O2检测仪特点: ★是款内置微型气体泵的安全便携装置 ★整机体积小,重量轻,防水,防爆,防震设计. ★高精度,高分辨率,响应迅速快. ★采用大容量可充电锂电池,可长时间连续工作. ★数字LCD背光显示,声光、振动报警功能. ★上、下限报警值可任意设定,自带零点和目标点校准功能,内置 温度补偿,维护方便. ★宽量程,最大数值可显示到50000ppm、100.00%Vol、100%LEL. ★数据恢复功能,免去误操作引起的后顾之忧. ★显示值放大倍数可以设置,重启恢复正常. ★外壳采用特殊材质及工艺,不易磨损,易清洁,长时间使用光亮如新. 过氧化氢H2O2检测仪产品特性: ★是款内置微型气体泵的高精度的手式安全便携装备; ★进口电化学传感器具有良好的抗干扰性能,使用寿命长达3年; ★采用先进微处理器技术,响应速度快,测量精度高,稳定性和重复性好; ★检测现场具有现场声光报警功能,气体浓度超标即时报警,是危险现场作业的安全保障; ★现场带背光大屏幕LCD显示,直观显示气体浓度/类型/单位/工作状态等; ★全量程范围温度数字自动跟踪补偿,保证测量准确性; ★半导体纳米工艺超低功耗32位微处量器; ★全软件自动校准,传感器多达6级目标点校准功能,保证测量的准确性和线性,并且具有数据恢复功能;★全中文/英文操作菜单,简单实用,带温度补偿功能; ★防高浓度气体冲击的自动保护功能; 过氧化氢H2O2检测仪技术参数: 检测气体:空气中的过氧化氢H2O2气体

检测范围:0-100ppm、500ppm、1000ppm、5000ppm、0-100%LEL 分辨率:0.1ppm、0.1%LEL 显示方式:液晶显示 温湿度:选配件,温度检测范围:-40~120℃,湿度检测范围:0-100%RH 检测方式:扩散式、流通式、泵吸式可选安装方式:壁挂式、管道式检测精度:≤±3%线性误差:≤±1% 响应时间:≤20秒(T90)零点漂移:≤±1%(F.S/年)恢复时间:≤20秒重复性:≤±1% 信号输出:①4-20mA信号:标准的16位精度4-20mA输出芯片,传输距离1Km ②RS485信号:采用标准MODBUS RTU协议,传输距离2Km ③电压信号:0-5V、0-10V输出,可自行设置 ④脉冲信号:又称频率信号,频率范围可调(选配) ⑤开关量信号:标配2组继电器,可选第三组继电器,继电器无源触点,容量220VAC3A/24VDC3A 传输方式:①电缆传输:3芯、4芯电缆线,远距离传输(1-2公里) ②GPRS传输:可内置GPRS模块,实时远程传输数据,不受距离限制(选配) 接收设备:用户电脑、控制报警器、PLC、DCS、等 报警方式:现场声光报警、外置报警器、远程控制器报警、电脑数据采集软件报警等 报警设置:标准配置两级报警,可选三级报警;可设置报警方式:常规高低报警、区间控制报警 电器接口:3/4″NPT内螺纹、1/2″NPT内螺纹,同时支持2种电器连接方式 防爆标志:ExdII CT6(隔爆型)壳体材料:压铸铝+喷砂氧化/氟碳漆,防爆防腐蚀 防护等级:IP66工作温度:-30~60℃ 工作电源:24VDC(12~30VDC)工作湿度:≤95%RH,无冷凝 尺寸重量:183×143×107mm(L×W×H)1.5Kg(仪 器净重) 工作压力:0~100Kpa 标准配件:说明书、合格证质保期:一年 过氧化氢H2O2检测仪简单介绍: 丙酮气体检测仪报警器高精度、高分辨率,响应快速,超大容量锂电充电电池,采样距离远,LCD背光显示,声光报警功能,上、下限报警值可任意设定,可进行零点和任意目标点校准,操作简单,具 有误操作数据恢复功能.

分析化学实验过氧化氢含量的测定实验报告

姓名:班级:同组人: 项目过氧化氢含量的测定课程:分析化学学号: 一、实验目的 1. 了解高锰酸钾标准溶液的配制方法和保存条件。 2. 掌握以N単C2O4为基准物标定高锰酸钾溶液浓度的方法原理及滴定条 件。 3. 掌握用高锰酸钾法测定过氧化氢含量的原理和方法。 二、实验原理 标定高锰酸钾溶液的基准物质有H2C2O4 ? 2H2O、Na2C2O4、FeSC4 ? 7H2O、(NH4)2SO4?6H2O、AS2O3和纯铁丝等。由于前两者较易纯化,所以在标定高锰酸钾时经常采用。 本实验采用Na2C2O4标定预先配好的浓度近0.02mol/L的高锰酸钾溶液,两者反应方程式如下:2KMn O4+5Na2C2O4+8H2SO4===2 Mn SO4+8H2O+10CO2 T +5Na2SO4+K2SO4 H2O2是一种常用的消毒剂,在医药上使用较为广泛。在酸性条件下,可用KMnO4标准溶液直接测定H2O2,其反应如下:2MnO4一+5H2O2+6H+= 2Mn2 ++5O2+8H2O 此反应可在室温下进行。开始时反应速度较慢,随着Mn 2+的产生反应速度会逐渐加快。因为H2O2不稳定,反应不能加热,滴定时的速度仍不能太快。测定时,移取一定体积H2O2的稀释液,用KMnO 4标准溶液滴定至终点,根据KMnO 4溶液的浓度和所消耗的体积,计算H2O2的含量。 注:1?用KMnO4溶液滴定H2O2时,不能用HNO3或HCI来控制溶液酸度。 2. H2O2样品若系工业产品,常加入少量乙酰苯胺等稳定剂,这时会造成误差,可改用碘量法测定。 三、仪器和药品 仪器:电子天平、称量瓶、50mL酸式滴定管、10、25、50mL移液管、 50mL量筒、电炉、2mL刻度吸管、250mL容量瓶 试剂:3mol L-1H2SO4、0.02mol L--1KMnO4标准溶液、Na2C2O4、 过氧化氢样品(质量分数约为30%) 四、内容及步骤 1、0.02mo L-1KMnO4溶液的配制 用台秤称取约1.7gKMnO4溶于500mL水中,盖上表面皿,加热煮沸1h,煮时及时补充水。静置一周后,用玻璃砂芯漏斗过滤,保存于棕色瓶中待标 2、K MnO4溶液浓度的标定

(YL1D)DPD余氯总氯检测仪

报价单 日期: 2015年01月11日 本数据表仅供参考,如有更改恕不通知。我司保留本参数单的权利,未经授权不得转载。 一、交货期:收到需方货款后3个工作日交货。 二、交货地点:需方物流公司。 三、运输及费用承担:汽运,运费由需方承担。 河北润联科技开发有限公司 SD90715氨氮测定仪 用途概述Summaryoffunctions 本仪器采用光电子比色检测原理取代传统的目视比色法。消除了人为误差,因此测量分辨率大大提高。测量时,当被测水样放入特定试剂时,水样会迅速显色。然后将此水样放入光电比色座内,仪器会通过比较颜色深浅从而得到离子浓度值。

本仪器可适用于大、中、小型水厂及工矿企业、游泳池等地的生活或工业用水中的离子浓度检测,以便控制水的各项参数达到规定的水质标准要求。 产品特点ProductCharacteristics 1.微电脑,触摸式键盘,带背光LCD液晶显示屏,采用最新的微处理技术和高可靠性集成电路。 2.具有数据非线性处理及数据平滑功能,快速自动多点校正,自诊断信息提示 3.具备自定义曲线校准功能,预存高精度全数学模拟工作曲线,确保直读浓度值的准确性 4.可靠的定位结构及特制高强度长寿命光源,无需维护,确保仪器能长时间稳定工作 5.融合多项自主设计专利成果,技术先进,符合国标GB/T5750-2006生活饮用水卫生标准 技 术指标Specifications

LH-C01余氯检测仪 类型:便携式水质分析仪型号:LH-C01 适用行业:水厂化验室,疾控中心,水产养殖业,医院,游泳 馆 测量精 度: 0.01 检测项目:余氯品牌: LH- C01 加工定制:是 测量范 围: 0- 3ppm 产品名称:便携式余氯检测仪余氯比色计余氯分析仪余氯测定仪 1.产品简介: 便携式比色计用于单波长比色测定。这一款比色计是专门用于测定水样中的余氯和总氯的浓度,其浓度变 化范围为0~3.00mg/L。液晶显示屏以mg/L来直接显示余氯或总氯的浓度。本仪器采用一节9V电池供电,由于本仪器软件中设置了省电状态,所以一节电池可用40小时以上。完成测量过程后,请按“开/关”键,切断电源。仪器配有两个专用的比色皿,可供测定100次的余氯和100次的总氯两种测定试剂,一节9V 电池,一本仪器使用手册,一张擦布,2只专用比色皿,一只取样瓶,吸管,均放在塑料箱内。 此仪器常应用于游泳池、医院、学校、社区卫生站等单位对于游离余氯的准确检测。 2.另注: 余氯根据形式和消毒活性分为游离余氯和化合余氯。

双氧水中过氧化氢含量的测定_高锰酸钾法

双氧水中过氧化氢含量的测定_高锰酸钾法实验十四过氧化氢含量的测定—高锰酸钾法 【目的要求】 1.掌握高锰酸钾标准溶液的配制和标定方法。 2.学习高锰酸钾法测定过氧化氢含量的方法。 【实验原理】 HO是医药、卫生行业上广泛使用的消毒剂,它在酸性溶液中能被KMnO定量氧化而224生成氧气和水,其反应如下: +2+-5HO+2MnO+6H=2Mn+8HO+5O22422 滴定在酸性溶液中进行,反应时锰的氧化数由+7变到+2。开始时反应速度慢,滴入的2+2+KMnO溶液褪色缓慢,待Mn生成后,由于Mn的催化作用加快了反应速度。 4 生物化学中,也常利用此法间接测定过氧化氢酶的活性。在血液中加入一定量的HO,22由于过氧化氢酶能使过氧化氢分解,作用完后,在酸性条件下用标准KMnO溶液滴定剩余4的HO,就可以了解酶的活性。 22 【仪器试剂】 3台秤(0.1g)、天平(0.1mg),试剂瓶(棕色),酸式滴定管(棕色,50cm),锥形瓶333-3(250cm),移液管(10cm、25cm);HSO(3 mol?dm), KMnO(s), NaCO(s,AR.),244224双氧水样品(工业)。 【实验步骤】 -31. KMnO溶液(0.02 mol?dm)的配制 43称取1.7g 左右的KMnO放入烧杯中,加水500cm,使其溶解后,转入棕色试剂瓶中。4 放置7-10天后,用玻璃砂芯漏斗过滤。残渣和沉淀则倒掉。把试剂瓶洗净,将滤液倒回瓶内,待标定。

2. KMnO溶液的标定 43精确称取0.15~0.20g预先干燥过的NaCO三份,分别置于250cm锥形瓶中,各加入22433-340cm蒸馏水和10cm3 mol?dm HSO,水浴上加热直约75-85?。趁热用待标定的KMnO244溶液进行滴定,开始时,滴定速度宜慢,在第一滴KMnO溶液滴入后,不断摇动溶液,当42+紫红色退去后再滴入第二滴。溶液中有Mn产生后,滴定速度可适当加快,近终点时,紫红色褪去很慢,应减慢滴定速度,同时充分摇动溶液。当溶液呈现微红色并在半分钟不褪色,即为终点。计算KMnO溶液的浓度。滴定过程要保持温度不低于60?。 4 3. HO含量的测定: 2233用移液管吸取5.00cm 双氧水样品(HO含量约5%),置于250cm容量瓶中,加水稀22 释至标线,混合均匀。 333-3吸取25cm上述稀释液三份,分别置于三个 250cm锥形瓶中,各加入5cm3 mol?dm HSO,用KMnO标准溶液滴定之。计算样品中HO的含量。 24422 四、实验记录与数据处理 KMnO标准溶液浓度(mol/L) 4 混合液体积(ml) 2.00 2.00 2.00 滴定初始读数(ml) 第一终点读数(ml) V(ml) 平均V(ml) C(g/L) H2O2 【思考题】 1. 用KMnO滴定法测定双氧水中HO的含量,为什么要在酸性条件下进行?能否用HNO4223或HCl代替HSO调节溶液的酸度? 24 2. 用KMnO溶液滴定双氧水时,溶液能否加热?为什么? 4

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书 一、测定原理: 过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止,剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物,在405nm 处测定其变化量,可计算出CAT 的活力。试剂一(ml) 二、试剂组成与配制: 试剂一:液体100 ml×1瓶,4℃保存6个月。 试剂二:底物液体10 ml×1瓶,4℃保存6个月。 试剂三:显色粉剂×1瓶,4℃保存6个月。加双蒸水至100 ml 溶解,4℃保存1个月。(如果底部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果) 试剂四:液体10 ml×1瓶,4℃保存6个月。天冷时会凝固,临用前37℃水浴至透明方可使用。 三、组织样本的检测 1、组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清,再用生理盐水稀释成最佳取样浓度,待测(最佳取样浓度摸索减附录)。 混匀,波长405nm ,光径0.5cm ,双蒸水调零,测定各管吸光度值。 注:一般样本没有高脂等导致显著差异情况,对照管的样本更换成双蒸水,做1-2管对照即可。如需做样本自身对照,则试剂盒所测定样本数量减至48样。 3.组织中CAT 活力的计算: (1)定义:每毫克组织蛋白每秒种分解1umol 的H2O2的量为一个活力单位。 (2)计算公式: )ml /mgprot (601271)OD -OD ()mgprot /U (CAT *待测样本蛋白浓度取样量 值测定值对照活力组织匀浆中 ÷???=注:*271为斜率的倒数 (3)计算举例: 取10%水稻叶片匀浆0.05ml 做CAT 检测,测得对照管吸光度为0.605,测定管吸光度为0.332,同时测得10%水稻叶片匀浆蛋白浓度为3.1303 mgprot/ml 。则计算结果为: ()/mgprot U 7351.101303.305 .0601271332.0704.0)mgprot /U (CAT =÷???-=活力组织匀浆中

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