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D实验

红霉素和克林霉素可用于治疗葡萄球菌引起的感染,葡萄球菌中的erm基因编码一种改变了的核糖体结构(23SrRNA的甲基化)可导致对大环内酯类(如红霉素)和林可霉素类(如克林霉素)耐药。有些情况下,erm基因需要诱导才能使克林霉素耐药性得以表达,而红霉素就具有这种诱导作用。体外药敏实验表现为红霉素耐药,克林霉素敏感,但D实验阳性。如果不进行D-试验检测,克林霉素很可能被报告为敏感而误导临床用药!

说明分解葡萄糖产酸。产酸后上下指示剂都应该变黄,但斜面的酸与空气接触,又被氧化成碱性而变红。K表示碱性,A表示酸性,/表示斜面,K/A就是斜面上是红的,底部是黄的

因为大肠杆菌发酵乳糖产酸(还产气),使管子中指示剂变黄,三糖铁琼脂里边乳糖含量很多(乳糖:葡萄糖10:1),所产生的酸也多,斜面上的酸不易被完全氧化,所以斜面、底面仍为黄色

们讲的无菌和你讲的无菌应该不是一个概念,他们讲的是无菌操作,可是肺泡灌洗所用的管子是从鼻腔或者口腔插进去的,所以灌洗液培养是有菌,也是可以定量的,临床以大于10的4次方cfu/ml为具有临床意义

健康人群肺泡灌洗液是无菌的,但是像COPD病人,因引流不畅,另一方面有抽烟史及肺部慢性疾患史,白细胞低下、免疫功能底下、营养障碍及有关呼吸器械的应用,易造成细菌定植在下呼吸道而获得肺部感染。对一些处于稳定期COPD患者的下呼吸道分泌物进行定量培养,仍可分离到高浓度的细菌,包括潜在致病微生物(potentially pathogenic microorganisms,PPMs)和非潜在致病性微生物(non potentially pathogenic microorganisms,non PPMs)。PPMs指存在或不存在口咽部,可引起呼吸道感染症状的细菌,包括G-杆菌(如绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌)、G+球菌(如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌)和G-球菌(如卡它莫拉菌),non PPMs为存在于口咽部的正常菌群(如微球菌),不引起呼吸道感染症状。为了排除口咽部细菌污染的干扰作用,确定以上细菌是否为下呼吸道定植菌有一定的标准,即定量细菌培养后痰液内分离的细菌大于或等于107 CFU/ml时,或者保护性毛刷(PSB)刷取液分离的细菌大于或等于103 CFU/ml时,或者肺泡灌洗液(BAL)分离的细菌大于或等于104 CFU/ml(或105 CFU/ml)时认为存在下呼吸道细菌定植。

保护性毛刷采集的标本应该是无菌的,即使如此,也应该进行菌落计数。

2. 培养之前应该进行涂片镜检,SEC<1%为合格标本。

3. 国内的气管镜都没有做到双层套刷。

4. 标准请参考Manual of Clinical Microbiology或者clinical microbiology procedures handbook。前者为临床微生物界的“圣经”。

5. 行业内通用判断标准:SEC<1%时标本合格,接种后保护性套管刷液>10^3cfu/ml,灌洗液>10^4cfu/ml为致病菌。

6. 即便如此,有文献报道该判断标准的敏感性和特异性基本不到90%。Am J Respir Crit Care Med 1995;152:231-240