禽流感疫苗的研究进展
禽流感疫苗的研究进展
摘要：近年来禽流感在一些国家和地区大规模暴发,不仅给养禽业造成了巨大的经济损失,而且还威胁到人类的生命健康,疫苗是防控禽流感的主要手段和措施。综述了目前世界上几种主要禽流感疫苗的研究现状，分析了其优缺点及禽流感疫苗研究的发展趋势。
关键词:禽流感病毒；疫苗；研究进展
禽流行性感冒(禽流感,AvianInfluenza,AI)是由正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒引起的、发生于各种家禽和野鸟的一种急性传染病。该病呈全球性分布,给养禽业造成巨大的经济损失。从19世纪以来,已出现四次全球性的禽流感大流行,最严重的一次（1918～1919年)全世界死于禽流感的人数超过20万。尤其是在2003年底至2004年初韩国、泰国、日本、越南和我国相继暴发禽流感,越南、泰国出现了禽流感病毒H5N1变异株感染人并致死的病例,因此引起了世界各国的高度重视[1]。由于禽流感病毒血清亚型众多,变异频繁,给疫苗的研制带来了极大困难。目前,商品化禽流感疫苗大都为灭活疫苗,该种疫苗具有制备工艺简单、免疫效果良好、免疫持续时间较长等特点,已被许多国家和地区在家禽中使用,并在预防和控制禽流感暴发中起到一定的积极作用。但灭活疫苗存在免疫效率低下、免疫剂量较大、监测中难于区分疫病的疫苗免疫与野度感染的缺陷,并且还存在散毒的危险等缺点。
防控AIV理想化的疫苗应具备以下特点:①价格低廉,易接种,对家禽具有高度的安全性。②任何日龄家禽接种1份剂量都有效,免疫后既能产生体液免疫应答,又能产生细胞免疫应答,并能迅速建立免疫性保护。③可以区分AIV自然感染禽和疫苗免疫禽。④疫苗生产时对工作人员和环境安全。⑤休药期短或无休药期[3]。但目前,还没有任何一种禽流感疫苗同时具备上述全部特性。因此,高效、安全的AIV新型疫苗的研制一直是科研人员关注的焦点。常见的禽流感疫苗有以下几类:
1全病毒灭活疫苗禽流感灭活疫苗一般是用甲醛灭活禽流感病毒鸡胚尿囊增殖液,辅以佐剂而成[2]。它具有制备工艺简单、免疫效果确实、安全性好、,免疫持续时间长且不会出现毒力返强和变异的优点,可保护同种亚型AIV的攻击,可有效避免禽流感的大暴发或大流行。历史上禽流感灭活疫苗曾经发挥过重要作用，如1987年美国科罗拉多州使用灭活苗成功地控制了H9N2亚型禽流感的流行。目前，我国H5、H7亚型禽流感灭活疫苗已经研制成功，并取得了良好的免疫保护效果。同时，对混合乳化法制备的联苗也有了研究[3]。
全病毒灭活疫苗具有制备工艺简单，免疫效果好，免疫持续期长等特点，已被许多国家作为商品化的禽流感疫苗在家禽中使用，有效的避免了禽流感的大暴发或大流行。但与此同时，全病毒灭活疫苗也存在一定的问题，如疫苗免疫效果是由灭活疫苗的注射剂量和疫苗中的抗原量决定的，因此灭活苗注射的病毒量要比活疫苗高出许多倍。且制备灭活苗还必须添加佐剂，其生产还需要大量的鸡胚，成本非常高，这在禽流感大流行的情况下，鸡胚的供应将会成为疫苗生产的一个限制因素。此外，由于接种灭活苗的机体也会产生针对病毒内部结构蛋白，如NP的特异性抗体，而这类抗体是在进行流行病学调查时的主要判定指标，因此灭活苗的应用将导致无法区分自然感染鸡和疫苗接种鸡，从而干扰AIV疫情的监测和流行病学的调查。
2减毒活疫苗减毒活疫苗是指将野毒株感染鸡胚，并在25～26℃下连续传代得到减毒毒株，即冷适应株，该病毒只能在25℃左右复制，不能在37℃下传代，之后使用该弱毒株免疫使机体产生特异性免疫。多项人体和动物研究证实，冷适应毒株生物学性质有很好的稳定性。弱毒流感疫苗与灭活疫苗的免疫后抗体阳转率都在50%～70%，能够有效控制流感的流行；对群体免疫的意义更加重大，对表面抗原发生转移的流行株病毒有一定的保护作用。但冷适应减毒活疫苗与其他流感病毒可能发生基因重配得到毒力恢复的重配株病毒，此外，冷适应减毒活疫苗在免疫缺陷患者中使用有致病的风险。
3基因工程亚单位疫苗亚单位疫苗是提取禽流感具有免疫原性的蛋白,加入佐剂而制成。这种疫苗安全性好,能刺激机体产生足够的免疫力,只是抗体持续时间短,且成本高。后来随着基因工程技术的不断发展,将免疫原性基因导入表达载体,经诱导可获得大量表达的免疫原性蛋白,提取所表达的特定多肽,加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗,这样可大大降低疫苗的成本。1994年Kodihalli等研制了火鸡H5N2病毒NP/HA和ISCOM的复合亚单位疫苗,用其免疫火鸡,21d可产生较高的抗体滴度,并且T、B淋巴细胞被激活,可以对同源和异源(H6N1)亚型病毒的攻击产生保护作用,在攻毒后3d,可清除火鸡肺部和泄殖腔的病毒。
4基因重组活载体疫苗利用遗传工程技术来分离血凝素基因（H5、H7、H9），并把它们插入另外的载体病毒，如痘病毒、痘苗病毒、杆状病毒和反转录病毒、构建表达HA的重组病毒，此病毒可在体内复制，表达HA蛋白，从而诱导机体产生针对AIV的免疫保护力[4]。早在1987年，FDA就批准美国的Micro-geneSys公司应用杆状病毒表达系统生产的艾滋病基因工程疫苗进入临床试用。同时，我国哈尔滨的乔传林等[5]在2003年构建了能同时表达H5N1亚型，HA基因和NA基因的重组禽痘病（fowlpoxvirus，FPV）毒重组疫苗，攻毒结果显示该疫苗具有良好的免疫保护性。该疫苗的优点:①对宿主安全;②与灭活苗相比,疫苗用量少,成本低;③既能引起体液免疫又能引起细胞免疫,免疫保护持续时间长;④免疫的家禽只产生针对HA蛋白的抗体,而不产生抗其他AIV核蛋白的抗体,不影响对HPAI的监测和流行病学调查;⑤既可预防AIV感染,又可预防载体(病毒)的感染,起到一针多防的目的。存在的问题:如果鸡体已接受过载体(病毒)的免疫接种,则该重组活载体疫苗免疫效力只能持续较短的时间。因此,对于已接种过载体(病毒)疫苗、感染过载体(病毒)的鸡群,其使用受到一定限制。活载体疫苗克服了常规活疫苗毒力返强的缺点，兼有死疫苗和活疫苗的优点，在免疫效力上也很有优势。但科研人员也认识到FPV载体系统本身的性质和对外源基因插入的非必须基因的选择仍存在很多问题，这也为以后的研究提出了新的方向。
核酸疫苗
5DNA疫苗核酸疫苗，又称DNA疫苗，是利用重组DNA技术[6]将保护性抗原蛋白的基因克隆到真核表达载体上，在被直接导入到动物体内后，保护性抗原蛋白基因表达的抗原蛋白经过内源性呈给免疫系统，诱导机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫反应，流感病毒是最早用于基因免疫研究的模型。与传统疫苗相比，DNA疫苗具有许多优点。首先，DNA疫苗可诱导长期或终生免疫；其次，其抗原合成和递呈过程与病原体的自然感染很相似，抗原蛋白经内源性合成后转运到细胞表面，再通过MHC-I和MHC-II类分子直接递呈给免疫系统，特别是特异性CD8＋T淋巴细胞CTL的免疫反应，这些是一般疫苗不可相比拟的DNA疫苗可提高免疫原性和保护性，然而，核酸疫苗的研制和开发才刚刚起步，还有很多的关键性问题急待解决。第一，所用载体多带有抗生素基因，导致被免疫机体可能对相应的抗生素产生抗体，给一些常见的细菌性疾病的预防和治疗带来困难。第二，核酸疫苗体内表达效率不够高，免疫保护力不强，降低了核酸疫苗的免疫效果[7]。
6RNA复制子疫苗RNA复制子疫苗利用源自病毒的能够自主复制的RNA，其结构蛋白基因由外源抗原基因取代，保留了非结构蛋白(RNA复制酶)基因。RNA复制酶可使RNA载体在细胞质中高水平复制，并实现外源抗原基因的高水平表达，可同时诱导细胞免疫和体液免疫应答。大量双链RNA可诱导被感染细胞凋亡，宿主细胞的凋亡有利于免疫系统识别外源抗原。RNA复制子疫苗克服了传统疫苗和普通DNA疫苗存在的缺点，具有抗原表达效率高、安全性好、应用范围广等优点，因而被视为一种具有良好发展前景的疫苗形式。
7具有交叉保护性的通用流感疫苗一种理想的禽流感疫苗应是无论在禽流感大流行期间，还是过渡阶段，对各种亚型的流感病毒都有效。A型流感病毒蛋白中较为保守的蛋白为NP和M，是诱导具有交叉保护性CTL反应的特定多肽，因此从理论上讲，研究交叉保护性疫苗有2条途径。Neirynck等尝试将保守M2蛋白的膜外区域(M2e)融合到B型肝炎病毒的核心蛋白上,在大
肠杆菌中表达来构建一种通用疫苗，结果发现，腹腔内或肌肉注射纯化的M2HBc蛋白到小鼠体内能提供90%、100%的保护，其产生的中和抗体具有广谱性，对抗A型流感病毒感染的持续时间长等特点。但如此小的表面抗原是否能对机体对流感病毒的感染提供足够的保护，还有待进一步和更大规模的验证[8]。Park等用甲醛灭活的流感全病毒疫苗经鼻腔免疫小鼠发现，该疫苗能抵御8种不同亚型流感病毒的攻击，表现出免疫效力的广谱性；研究结果还显示，交叉保护是由于NP基因刺激产生的CTL反应引起的。李永清等用研制的M2基因重组马立克氏病病毒(MDV1)免疫1日龄SPF鸡后,从第14天起免疫鸡开始产生抗体,到第21天时,83%的鸡已
产生了抗体,为禽流感交叉保护型疫苗的研究提供了依据[9]。
8 转基因植物疫苗转基因植物疫苗是借助植物遗传转化载体将抗原基因导入植物,使其在植物中表达,生产出能使机体获得特异抗病能力的疫苗。植物遗传转化的受体系统、载体系统和遗传转化方法，是转基因植物基因工程疫苗生产技术的关键。转基因植物疫苗具有以下优势:表达产物具有较好的免疫原性及生物活性；口服植物疫苗能诱导黏膜免疫反应；植物细胞的细胞壁可起到生物胶囊的作用，更好地刺激机体产生特异性免疫反应；生产简便、成本低廉，不需要冷藏和低温运输；安全性好，无外源性病原污染等。宋长征等利用转基因马铃薯表达AIV的HA蛋白，结果显示，用转基因马铃薯生产口服AIV疫苗具有较好前景[10]。
9 面临的挑战与展望在过去的时间里，禽流感疫情在世界范围内出现越多禽流感暴发，人传人发生的可能性就越大。全球传染病和公共健康专家们最担忧的是，高致病性禽流感病毒一旦突破人群免疫防线，演变为极易在人群中传播的流感病毒，将造成大量的感染和可能造成数百万甚至上千万的死亡进行有效的疫苗接种是迅速建立人群免疫屏障，阻断流感大流行的蔓延，减少和降低其危害的有效手段。为此，世界各国纷纷加入到研制禽流感疫苗的战斗之中，科学家们为这场抗禽流感战斗付出了不懈努力。但是新型禽流感病毒变异速度过快这也是向各国禽流感疫苗的研发者发起了挑战，未来能否研发出永久有效的疫苗，我们还需拭目以待。
参考文献
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使用禽流感疫苗应注意的几个问题资料
目前，用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-5+Re-4株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗。不论是活疫苗还是灭活苗，影响禽流感免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。 1、禽流感疫苗使用前的准备工作 1.1制定合理的免疫程序一般在制订禽流感免疫程序时应考虑以下几方面的因素：①当地禽流感疫病的流行情况；②雏鸡的母源抗体水平；③免疫间隔时间；④鸡的免疫应答能力；疫苗的种类；免疫接种的方法；⑤免疫对鸡健康及生产性能的影响等。 鸡禽流感疫苗首免日龄在12~15d，如果日龄太小，鸡免疫系统尚未完全建立，会造成免疫系统损伤，影响免疫效果。另一方面，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。最好通过实验室检测禽流感母源抗体水平来确定首免日龄。说明书中禽流感油乳剂灭活苗免疫保护期为4个月，这是在实验室条件下采用SPF鸡检测得出的数据，而实际生产中影响禽流感疫苗免疫效果的因素很多，如饲养管理、营养水平、日龄大小、健康状况等，导致疫苗的保护期长短不一。所以，不能机械地照搬说明书中的保护期来推测免疫时间，有条件的，应根据HI抗体检测结果来指导何时免疫。 1.2了解禽流感疫苗要选择合适的疫苗对鸡群免疫接种，由于禽流感病毒血清型众多，不同亚型之间不能完全保护。在生产实践中应针对当前和本地流行的疫情来选择血清型、病毒株相同的疫苗。如果疫苗毒株的抗原性与感染病原的差异较大，很难取得良好的防疫效果。疫苗要妥善保存，禽流感疫苗是生物制品，对温度要求很严格，切忌随便存放，否则对疫苗有直接影响。灭活疫苗要保存在低温、干燥、阴暗的地方，适宜温度为2~8℃，活疫苗为冻干苗，则在冰箱冷冻室-15℃以下保存，切忌反复冻融。 有些养殖户将禽流感疫苗随意丢放，甚至被太阳暴晒，这样会使疫苗效价下降，有的还可能失效。 疫苗使用前例行检查，仔细核对禽流感疫苗抗原亚型、毒株、生产厂家、生产日期、失效期，有出现包装破损、活疫苗瓶非真空、油苗破乳分层、颜色改变等现象的疫苗，严禁使用。疫苗的用量不能随便降低或超剂量使用，剂量太低，机体不能产生足够的抗体；剂量过大，可能产生免疫麻痹或副反应。稀释液的选择与用量要掌握好，注射、点眼、滴鼻免疫接种时，可选用蒸馏水、生理盐水。饮水免疫时，最好用凉开水，其次是干净新鲜的深井水，不能用含消毒药物的水。稀释的浓度要根据实际情况配制，浓度不准确，免疫效果也会大打折扣。灭活苗使用前应预温在25℃左右，预温可使油乳剂苗粘度降低、稀薄、易注射、吸收好，否则注射的局部易出现游离肿块。 1.3其他参加免疫操作的人员必须经验丰富，能熟练掌握疫苗的配制、免疫操作方法，确保每只鸡有 足够的疫苗用量，同时疫苗较快地用完。禽流感疫苗注射前，应核对连续注射器刻度容量和实际容量之间的误差，以免与实际注射量偏差太大，对注射器可能出现的故障能及时维修。注射活疫苗用的针头为7号，油苗用9号针头，针头太细，注射时费力，注射器也容易损坏；针头太粗，注射后疫苗会从针孔溢出。同一鸡舍的鸡群，每注射1000羽至少换针头一枚，针头使用前严格消毒，防止疫情传播。鸡群健康是禽流感免疫的基础，只有健康的鸡群才能产生良好的免疫应答，鸡群不健康时接种会造成免疫失败。 2、免疫操作 2.1滴入免疫法滴入免疫法是指滴鼻、点眼、经上呼吸道或眼结膜进行免疫的一种方法。500头份的疫苗用25ml稀释液稀释，把鸡头颈提起，呈水平位置，用手堵住一侧鼻孔，然后将疫苗滴入眼、鼻各一滴，待疫苗吸入和在眼内扩散后才可将鸡轻轻放回，谨防漏滴、重
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杂，费用高，实验室要求高，耗时费力，周期长，检测时间需1～3 周，大面积应用推广受到较大限制。 1 .2电镜检测技术 用电镜技术或免疫电镜技术诊断禽流感病毒，可以在电子显微镜下清楚观察到粒子形态，确定病毒的有无。[3]、[4]电镜技术快速、准确，但检验结果与样品制备技术、取病材料的部位和时间有关，且本方法不能用于亚型及致病性的测定。 2.免疫学检测 2 .1血凝(HA )和血凝抑制(HI)试验 HA 和HI 简单、快速、特异性好，但是操作繁琐费时，不能用已知HA亚型的抗血清检出禽流感新的HA亚型。HI试验是WHO进行全球流感监测所采用的普及方法。[5]一般先将可疑病料接种适龄鸡胚或细胞进行病毒分离，然后用HA试验检测出培养物是否具血凝素活性，再用已知阳性血清进行HI试验来验证。[6] 2 .2琼脂扩散试验(AGP) AGP试验是用来检测A型流感病毒群特异性血清抗体，适用于鉴定所有A型流感病毒。AGP试验操作简单，既可以定性又可以定量。但敏感性差，易有有假阳性。现已在AIV快速定型双扩散法[7]基础上建立了AGP诊断试剂盒。AGP试验可以用敏感性、准确性良好的尿素- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法作为补充或辅助诊断手段。 [8] 2 . 3乳胶凝集试验(LAT)
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肿瘤疫苗研究进展介绍 摘要：肿瘤疫苗，即含肿瘤抗原基因或肿瘤抗原肽的疫苗，是近年的研究热点之一。与传统疫苗防止疾病的作用不同，癌症疫苗通过促使自身免疫系统攻击已经生成的肿瘤达到治疗效果。现在已取得一定研究进展的肿瘤疫苗有宫颈癌HPV疫苗、黑色素瘤疫苗、淋巴瘤疫苗、白血病DNA疫苗、前列腺癌疫苗、肺癌疫苗等，本文对上述疫苗一一进行了介绍。此外，本文还对肿瘤疫苗研究过程中几个重大的突破进行了介绍，如MUC1蛋白与肿瘤疫苗的关系、DC疫苗的原理及应用等。 关键词：肿瘤疫苗宫颈癌HPV疫苗黑色素瘤疫苗淋巴瘤疫苗白血病DNA疫苗前列腺癌疫苗肺癌疫苗 MUC1蛋白 DC疫苗 Abstract：The tumor vaccine，which contains tumor associated antigen encoding gene or tumor associated antigen(peptide), has become one of the research hotspots in recent years. Unlike the function of the traditional vaccine, the tumor vaccine treat a tumor through making the immune system attack the tumor. Up to now，three are several tumor vaccines has made progress，including the cervical cancer HPV vaccine ，melanoma vaccine，lymphoma vaccine，leukemia DNA vaccine，prostate cancer vaccine，lung cancer vaccine, which is also talked about in this article. Besides, several breakthroughs will be included in this article, which contains the MUC1 and the dc vaccine. Key words：tumor vaccine，cervical cancer HPV vaccine ，melanoma vaccine，lymphoma vaccine，leukemia DNA vaccine，prostate cancer vaccine，lung cancer vaccine, MUC1，dc vaccine （一）肿瘤疫苗的定义及分类 肿瘤疫苗，即含肿瘤抗原基因或肿瘤抗原肽的疫苗，是近年的研究热点之一。其原理是通过激活患者自身免疫系统，利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫反应，增强机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的。它来源于自体或异体肿瘤细胞或其粗提取物，带有肿瘤特异性抗原(tumor specific antigen，TSA)或肿瘤相关抗原(tumor associated antigen，TAA)。可通过激发特异性免疫功能来攻击肿瘤细胞，克服肿瘤产物所引起的免疫抑制状态，增强TAA的免疫原性，提高自身免疫力来消灭肿瘤。其中，TSA的免疫治疗在肿瘤综合治疗中占有重要地位，因为它可以启动以肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte，CTL)反应为主的抗肿瘤效应，有效打击肿瘤，防止转移、复发且不伤及无关组织。它既可以独立地治疗肿瘤，又可与手术及放、化疔结合，具有疗效高、特异性强、不良反应小等优点，尤其对于中晚期已经发生转移的恶性肿瘤而言，具有独到的治疗作用。（1） 根据肿瘤疫苗的用途不同，可以把它分为两种：预防性疫苗和治疗性疫苗。其中，预防性疫苗是用与某些特殊肿瘤发生有关的基因制备的疫苗，可接种于具有遗传易感性的健康人群，进而控制肿瘤的发生；而治疗性疫苗是以肿瘤相关抗原为基础，主要用于化疗后的辅助治疗的。 而根据它的来源，又可以把它分为肿瘤细胞疫苗、基因疫苗、多肽疫苗、树突状细胞疫苗、CTL表位肽疫苗等。其中，肿瘤细胞疫苗是从机体肿瘤组织中提取肿瘤细胞，经灭活处理后使瘤细胞丧失致瘤性，但仍保持其免疫原性，然后对机体进行主动免疫。但由于肿瘤细胞肿瘤抗原抗原TSA表达低下，并缺乏一些免疫辅助因
抗结核药物的研究进展和发展趋势
综 述 文章编号:100128689(2005)0420250204 抗结核药物的研究进展和发展趋势 Trends and advances i n an tituberculosis agen ts 陆宇 段连山 L u Yu and D uan L ian 2shan (北京市结核病胸部肿瘤研究所, 北京101149) (Beijing T uberculo sis and T ho racic T umo r R esearch Institute , Beijing 101149) 摘要: 结核病是除A I D S 外引起死亡最高的感染性疾病,严峻的结核病回升形势要求加速新型抗结核药物的研究开发。缩短疗程,提高M DR 2TB 疗效及对结核潜伏感染(L TB I )提供更有效的治疗是开发新抗结核药物要实现的目标。口恶唑烷酮类、硝基咪唑并吡喃类等药物是近年发现的新药,利用功能基因组学,蛋白质组学等加速药物筛选、有效传递药物至靶位的药物载体、联合抗结核药物的免疫辅助治疗剂等也是抗结核病药物的发展趋势。 关键词: 结核; 抗结核药物; 药物筛选; 载体中图分类号:R 978.3 文献标识码:A 收稿日期:2004207227 作者简介:陆宇,女,生于1971年,博士,助理研究员。主要从事抗结核药物药理学研究。 结核病是除A I D S 外引起死亡最高的感染性疾 病,是严重的全球性健康问题。抗结核药物是结核病化学治疗的基础,结核病的化学治疗是人类控制结核病的主要手段。结核病化疗的出现使结核病的控制有了划时代的改变,以异烟肼、利福平、吡嗪酰胺为核心的短程化疗曾取得令人瞩目的成就。人类迈入新世纪的今天,现有的抗结核治疗方案还远远不够理想,严峻的结核病回升形势要求加速新型抗结核药物的研究开发。目前,结核病治疗的两大难题在于结核分枝杆菌的持留性和耐药性,人们对结核分枝杆菌本质认识的逐步深入及新兴技术的发展,为抗结核药物的研究提供条件。现将抗结核药物的研究和发展情况介绍如下。1 开发新抗结核药物要实现的目标[1]1.1 缩短疗程 结核病是结核分枝杆菌引起的感染性疾病,在感染性疾病中结核病的治疗的一大特点是疗程过长。标准短程化疗的前2个月的强化期使患者的菌负荷量大大降低,转为非传染状态,4～6个月的巩固期主要是消除持留状态的细菌以减少复发的危险,至少6～8个月的疗程使患者的依从性难以保证,进而易导致耐药性的发生。在现有抗结核药物基础上进行超短化研究难以达到满意的治愈率和复发率。如果高效的抗菌剂和 或灭菌剂能将疗程缩短到2个月或更短,将大大有利于提高患者的依从性,当然,一种能缩短总疗程并减 少服药次数,服药数量的化合物将是最好的选择。1.2 提高多耐药结核病(M DR 2TB )的疗效 M DR 2TB 的发生率在全球呈上升趋势,M DR 2TB 患者的治疗药物选择受到极大的关注。但是,抗结核新药开发跟不上M DR 2TB 发生速度。目前M DR 2TB 患者的治疗只能应用异烟肼、利福平以外的价格昂贵、不良反应多的二线药物。改进M DR 2TB 的治疗急需新的药物。 1.3 对结核潜伏感染(L TB I )提供更有效的治疗 估计全世界约有20亿的人口感染结核菌,1000～2000万人在一生中发展成活动性结核病。在北美及一些L TB I 发生率低的地区,异烟肼是预防L TB I 的药物,异烟肼也是W HO 推荐的结核病和H I V 双重感染人群的有效药物,但却存在严重的限制性,L TB I 的治疗有待开发新的药物,以利显著降低结核病的发病率。2 抗结核药物开发的困难 在过去的20年,有1200种新药批准上市,但在发展中国家发现用于抗感染的不足1%,至于结核病,在制药工业中的积极性更是与需要不成比例[2]。在美国、欧洲和日本的实验室,对抗结核新药的研究,已从过去的基本静止状态发展到一个活力相当大的时期,但是自利福平问世至今的30年没有一个新型化合物用于抗结核治疗。除缺少商业利益外,开发有活性的新化合物并发展为临床有希望的抗结核药物还有困难。
禽流感疫苗研究进展
禽流感疫苗研究进展 摘要对禽流感的预防，必须在采取严格的生物安全措施的同时，加强必要的免疫措施。对不同类型禽流感疫苗的研究现状、优越性与局限性进行了综述。 关键词禽流感；疫苗；研究进展 最近，亚洲一些国家不断暴发的禽流感（Avian influenza，AI）事件引起了人们对全球一系列动物和公众健康问题的极大关注，最近的联合国粮农组织（FAO）罗马提交会议指出[1]，当面临AI大流行威胁时，采取大规模扑杀感染动物的措施会丧失很大一部分食物来源，使地方养禽业遭受严重打击，显得不太合理。对禽流感的预防，必须努力集中在采取严格的生物安全措施的同时，加强必要的免疫措施。免疫能减轻临床症状，降低死亡率，减少病毒的扩散和提高群体对感染的抵抗力，从而控制禽流感病毒（Avian influenza vinus，AIV）的广泛传播[2]。然而，如果疫苗的使用和管理不当，不仅达不到预期的效果，还会污染环境，威胁公众健康。因此，研制安全、高效的AIV疫苗是专家们为之不懈努力的目标。 理想的疫苗应具有高的生物保护容量，同时消除环境污
染和易感动物感染的可能性。总的来说，对于AIV疫苗的发展，以下几种设计思路均已被采用或尝试。 1全病毒灭活疫苗 由于AIV基因组的抗原漂移，AIV疫苗仅能提供70%的保护力。针对这种特点，AIV灭活疫苗通常制备成针对几种不同亚型AIV的多价疫苗，己证明1种灭活疫苗可以至少包括4种不同的AIV亚型。同只含单一亚型的疫苗比，多价疫苗并没有减弱对同一种HA亚型AIV攻击的有效保护[3]，而且各亚型抗原之间不产生免疫干扰。AIV灭活疫苗能使免疫鸡群在感染AIV野毒时有效地减轻损失，并显著减少可能存在于鸡群和环境中的病毒数量，缩短其存活时间，是AI 防治的主动措施、关键环节和最后防线。而且灭活疫苗具有制备工艺简单、免疫效果确实、免疫持续期长等特点，许多国家已将其作为商品化的AIV疫苗应用于家禽中。我国己研制成功不同亚型的AIV疫苗，且证明具有良好的免疫保护作用。但灭活苗本身存在一些缺陷[4]，主要是：影响疫情监测；存在散播病毒的风险；免疫剂量较大，制备成本高。其最突出的缺点是不能诱导产生有效的粘膜免疫抗体和细胞免疫 应答，因而无法有效地抑制呼吸道中AIV的复制。近年来，人们试图从技术上突破此缺点，筛选并利用同亚型弱毒疫苗
肿瘤基因疫苗研究进展
肿瘤基因疫苗研究进展 基因疫苗是指将编码外源抗原的基因与质粒重组，构建出真核表达载体，导入人或动物细胞后，利用宿主细胞的蛋白质合成系统合成外源抗原蛋白，并诱导机体产生对该抗原的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。[1]肿瘤的治疗目前仍是世界性的难题, 随着免疫学和分子生物学的发展, 肿瘤疫苗的发展经历了肿瘤细胞疫苗、重组蛋白疫苗和基因疫苗三个阶段。 肿瘤基因疫苗也称DNA疫苗, 是目前研究的热点, 主要包括与肿瘤相关抗原(Tumor Associated Antigen，TAAs)有关的全长、表位、独特型(Idiotype，Id)和融合脱氧核糖核酸（Deaxyribonucleic Acid，DNA）疫苗, 能够自主复制的核糖核酸（Ribonucleic Acid，RNA）疫苗，与树突细胞（Dendric Cell，DC）相关的肿瘤基因疫苗等。 近年来, 肿瘤基因疫苗在动物基础研究和临床前研究, 甚至I期及II期临床 试验中取得了可喜的成果, 显示出广阔的应用前景。1990年Wolff等[2]首次发现将编码报告基因的DNA质粒直接肌肉注射, 能在肌细胞内获得较持久的蛋白表达。1992年Tang等[3]将表达人生长激素基因的质粒DNA导入小鼠细胞后, 诱导小鼠产 生了特异的抗人生长激素的抗体, 从而提出了基因免疫的概念。1993 年，Ulmer[4]等将可表达甲型流行性感冒（流感）病毒核蛋（Nucleoprotein，NP）的质粒DNA 注射小鼠，发现可有效地保护小鼠抗不同亚型、分离时间相隔34年的流感病毒的攻击。随后的大量动物实验都说明，在合适的条件下，DNA接种后既能产生细胞免疫又能引起体液免疫。于是，核酸疫苗技术应运而生。随后的几年其在肿瘤综合治疗中显示出很好的应用前景，从而使基因免疫的研究更加深入。 1 肿瘤基因疫苗的免疫学机制 肿瘤基因疫苗诱导的抗肿瘤免疫反应机理可能是DNA疫苗转染至宿主细胞后, 将其编码的抗原蛋白提呈给免疫系统,诱导MHC-I限制性CD8+ 的CTL和MHC-II限制性的TH以及抗体产生,引起广泛的免疫应答。质粒DNA进入组织后,通过胞饮方式被摄入宿主细胞,在细胞内表达产生抗原蛋白, 细胞将表达蛋白转运至近的抗原提呈细胞(APC), 然后蛋白被多蛋白酶体系降解成为有不同抗原表位的短肽进入内质网腔内, 与MHC-I类分子结合,形成MHC-I肽复合物,递呈给并激活CD8+T细胞, 诱导产生细胞免疫反应。辅助性T细胞( HTL)则诱导和维持CTL效应。动物实验证明了抗原特异性的HTL在CTL清除肿瘤过程中所起的重要作用[2]。而另一些短肽则与MHC-I结合, 形成MHC-II肽复合物, 提呈给CD4+ T细胞使其激活,刺激抗原特异性的B细胞分泌抗体, 产生体液免疫。[5] 2 肿瘤核酸疫苗的构建 核酸疫苗的构建方法是将编码保护性抗原的目的基因片段重组到真核表达载体上，主要包括真核表达载体的选择、外源抗原基因的选择与分析、抗原基因与表达载体的连接与鉴定几个方面。 2.1 载体的选择 构建核酸疫苗的载体主要有重组质粒型载体和病毒载体（包括逆转录病毒），尤以前者较多。质粒载体必须是能在大肠杆菌中高拷贝地扩增，而在动物细胞内则能高效表达，但不复制，也不含有向宿主细胞基因组内整合的序列，一般以PBR322 或PUC 质粒为基本骨架，带有细菌复制子，真核生物的启动子（有的含
新型抗结核药物的研究进展
新型抗结核药物的研究进展 作者：李林泉 作者单位：辽宁省朝阳市中心医院药剂科,辽宁朝阳,122000 刊名： 中外医疗 英文刊名：CHINA FOREIGN MEDICAL TREATMENT 年，卷(期)：2008,27(30) 被引用次数：1次 参考文献(8条) 1.Barry CE 3rd Preclinical candidates and targets for tuberculosis therapy 2001(02) 2.Payne DJ;Warren PV;Holmes DJ Bacterial fatty acid biosynthesis:a genomics-driven target for drug discovery[外文期刊] 2001(10) 3.白景荣复治性肺结核病例产生的原因及对策[期刊论文]-中国医药导报 2006(29) 4.张敦熔现代结核病学 2000 5.Bates JH Tuberculosis chemotherapy.The need for not antituberculosis drags is urgent 1995(04) 6.Fung-Tome J;Minassian B;Kolek B In vitro antibacterial spectrum of a new broad-spectrum 8-methoxy fluoroquinolone,gatifloxacin[外文期刊] 2000(04) 7.方红抗结核药物的研究进展[期刊论文]-国外医学(药学分册) 2002(05) 8.史钟慧结核分枝杆菌对新喹诺酮类药物耐药情况分析[期刊论文]-中国现代医生 2007(15) 本文读者也读过(10条) 1.郁俊德抗结核药物的研究进展[期刊论文]-中国中医药咨讯2010,02(32) 2.宋辉燕.焦德丽抗结核药物的发展及合理应用[期刊论文]-大家健康（中旬版）2010(6) 3.朱珊梅抗结核药物的合理应用及研究进展[期刊论文]-海峡药学2010,22(2) 4.陆宇.段连山.Lu Yu.Duan Lian-shan抗结核药物的研究进展和发展趋势[期刊论文]-中国抗生素杂志 2005,30(4) 5.张慧.岳枫.ZHANG Hui.YUE Feng抗结核药物的历史与研究进展[期刊论文]-实用医技杂志2007,14(26) 6.汪铭抗结核药物的研究进展[期刊论文]-当代医学2010,16(28) 7.崔新颖.孔祥雨.CUI Xin-ying.KONG Xiang-yu抗结核药物及其应用研究[期刊论文]-北华大学学报（自然科学版）2009,10(3) 8.刘伟.司书毅.肖春玲新型抗结核药物的研究进展[期刊论文]-国外医药（抗生素分册）2006,27(2) 9.康晓宇.高永清临床开发中的新型抗结核药物[期刊论文]-国际药学研究杂志2009,36(3) 10.潘珏.Pan Yu新型抗结核药物的研究进展[期刊论文]-医药导报2000,19(1) 引证文献(1条) 1.郑苏抗结核病药的研究进展[期刊论文]-求医问药（学术版） 2011(6) 本文链接：https://www.wendangku.net/doc/268822059.html,/Periodical_hgzy200830020.aspx
禽流感的流行状况与研究进展
?综 述?禽流感的流行状况与研究进展 余 滨 【中图分类号】R512.99 【文献标识码】A 【文章编号】1006-2483(2004)03-0029-04 禽流感(A vian Influenza,A I)是严重危害畜牧业和人类健康的一种烈性传染病,多年来在许多国家和地区发生过该病的流行或暴发流行,严重地打击了一些国家的养殖业,经济损失巨大。在1997年之后陆续有感染人的报道,因此,禽流感已成为突发公共卫生事件。高致病性禽流感(Hig hly Pat ho genic A vian Influenza HPA I)已被国际兽医局动物流行病组织(O IE)列为甲类传染病,并被列入国际生物武器公约动物传染病名单,列为反生物恐怖主要内容之一,被我国农业部《家禽家畜防疫条例》列为甲类监测传染病。同时流感也被我国卫生部列为“十?五”规划重点防治传染病之列。1 流行状况 1.1 禽间禽流感流行状况 禽流感自1878年首次报道于意大利,以后在欧洲、美洲、非洲、亚洲均有发生。特别是从上世纪90年代后期起,禽流感在欧亚大陆的暴发日趋频繁。这种病毒的肆虐不但给许多国家的家禽养殖业带来了沉重打击,同时也向全人类的健康提出了新的严峻挑战。H5和H7两亚型毒株一直断断续续的在世界各地鸡或火鸡中造成禽流感暴发或流行。较大的流行有:1978年,美国明尼苏达洲,140多个火鸡群发生流感流行,造成400多万美元损失。1983～1984年,美国宾夕法尼亚洲,鸡群中发生了H5N2毒株引起的流感流行,损失了1700多万只鸡,当地全部鸡场倒闭,经济损失6100万美元。2003年3月,荷兰暴发了H7N7型禽流感。为了防止疫情向欧洲其他国家蔓延,欧盟宣布全面禁止荷兰活禽及其蛋品出口。禽流感给世界上最大的家禽出口国之一的荷兰带来沉重打击。在短短几周内,共有约900个农场内的1400万只家禽被隔离,1800多万只病鸡被宰杀。而更为严峻的是,在疫情暴发期间,共有80人感染了禽流感病毒,其中一名57岁的荷兰兽医在对病鸡进行检验时感染病毒,并死于禽流感引起的肺炎并发症。此后,H7N7型禽流感在整个欧洲蔓延开来,与荷兰毗邻的比利时和德国均出现了禽流感病毒感染病例。这也是目前报道的世界上禽流感传播范围最广的一次。 禽流感在中国的流行状况。自1994年以来,中国内地鸡群中断断续续发生了H9N2流感暴发,虽然其所引起的病死率不及H5和H7亚型,但能使母鸡产蛋量明显下降,肉鸡生长速度明显减缓。 1997年,中国香港特区新界,三个鸡场发生了H5N1亚作者单位:430022 武汉市疾病预防控制中心型毒株引起的流感暴发,造成三个鸡场倒闭,处死150万只家禽,损失上亿港元。更为严重的是,发生了全球首起人感染禽流感病毒的病例,震惊了世界。 1989～1990年,中国黑龙江和吉林两省的马群中发生了禽H3N8亚型毒株引起的流感流行,造成数万匹马属动物发病,数百匹死亡,严重影响了当地的经济发展。 2003年底至2004年2月,H5N1毒株相继在韩国、越南、日本、泰国、中国、美国等地的禽中引起流感流行,造成上百万只家禽死亡,严重打击了这些国家的家禽养殖业发展,并在越南、泰国、香港等地发现人感染禽流感病毒并出现死亡。到2004年2月,我国内地共有49个疫点的疫情被确诊为H5N1,3月17日宣布全部解除封锁,疫情得到有效控制。没有发现人感染禽流感病毒病例。 1.2 人间禽流感病流行状况 1.2.1 中国的流行状况 人类第一例禽流感病例1997年报道于中国香港。1997年8月,香港一名3岁的男童因感染禽流感病毒而死亡。这也是全球首宗人类感染H5N1的个案,这是首次发现禽流感病毒直接从鸟传染给人。这次暴发有18个人住院,其中6人死亡。其中男性8例,女性10例。年龄1～60岁(平均17岁左右),10岁以下9例。12例康复者中,9例<12岁,其余3例为14～37岁,8例临床表现轻微且无肺部病变。6例死亡者中,除1例3岁外,其余5例均在12岁以上,发病至死亡的平均病程为16天。 1999年在香港,2个孩子被确认患A禽流感病(H9N2)。两个患者都恢复了健康,未证实有更多病例发生。证据显示家禽是感染源,而且传染的主要模式是从鸟到人。然而,从人到人传染的可能性尚未排除。 1998～1999年间,有人感染H9N2的数个病例在中国大陆报告。 2003年2月到中国内地旅行的一香港家庭的2个成员发生A禽流感(H5N1)感染。一人恢复,另一人死亡。 2003年12月中旬一个儿童在香港被证实感染H9N2,住院治疗后恢复了健康。 1.2.2 人间禽流感病在世界的流行 2003年,在荷兰家禽暴发禽流感期间,家禽工作人员和其家庭成员被证实感染A 禽流感病毒(H7N7)。据报告有80多个H7N7病例(症状大多集中表现在眼睛的感染,有一些呼吸症状),1个患者死亡(57岁的兽医,曾去感染的农场出诊)。2003年12月至2004年3月,越南、泰国共有100多例疑似病人被做健康调查,34人被确诊患禽流感病(H5N1),22人被WHO确诊死于
肿瘤疫苗的研究进展
１９８８，１２（１）：１８－２６． ［４］Ｘｕ ＡＭ，Ｃｈｅｎｇ ＨＹ，Ｊｉａｎｇ ＷＢ，ｅｔ ａｌ．Ｍｕｌｔｉ－ｓｌｉｃｅ ｔｈｒｅｅ ｄｉ－ｍｅｎｓｉｏｎａｌ ｓｐｉｒａｌ ＣＴ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ：ａ ｎｅｗ ｔｅｃｈｎ ｉｑｕｅ ｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｂｉｌｉａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ Ｐａｎｃｒｅａｔ Ｄｉｓ Ｉｎｔ，２００２，１（４）：５９５－６０３． ［５］Ｚａｎｄｒｉｎｏ Ｆ，Ｃｕｒｏｎｅ Ｐ，Ｂｅｎｚｉ Ｌ，ｅｔ ａｌ．ＭＲ ｖｅｒｓｕｓ ｍｕｌｔｉｓｌｉｃｅＣＴ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ ｉｎ ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｂｉｌｉａｒｙ ｔｒａｃｔ．Ａｂｄｏｍ Ｉｍａｇｉｎｇ，２００５，３０（１）：７７－８５．［６］Ａｈｍｅｔｏｇｌｕ Ａ，Ｋｏｓｕｃｕ Ｐ，Ｋｕｌ Ｓ，ｅｔ ａｌ．ＭＤＣＴ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｇｒａ－ｐｈｙ ｗｉｔｈ ｖｏｌｕｍｅ ｒｅｎｄｅｒｉｎｇ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ ｂｉｌｉａｒｙ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎ．ＡＪＲ Ａｍ Ｊ Ｒｏｅｎｔｇｅｎｏｌ，２００４，１８３ （５）：１３２７－１３３２． ［７］杨连海，韩悦，应援宁，等．肝门部胆管癌的ＭＲＣＰ表现．天津医药，２００４，３２（６）：３４２－３４４． ［８］Ｃｌａｒｙ Ｂ，ＪａｒｎｉｇａｎＷ，Ｐｉｔｔ Ｈ，ｅｔ ａｌ．Ｈｉｌａｒｃｈｏｌａｎｇ ｉｏｃａｒｃｉｎｏ－ｍａ．Ｊ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｓｕｒｇ，２００４，８（３）：２９８－３０２． ［９］Ｐａｔｅｌ ＡＨ，Ｈａｒｎｏｉｓ ＤＭ，Ｋｌｅｅ ＧＧ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆＣＡ１９－９ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｅｓ ｏｆ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｌｅｒｏｓｉｎｇ ｃｈｏｌａｎｇｉｔｉｓ．Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０００，９５（１）：２０４－２０７． ［１０］Ｓｉｎｇｈａｌ Ｄ，ｖａｎ Ｇｕｌｉｋ ＴＭ，Ｇｏｕｍａ ＤＪ．Ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆ ｈｉｌａｒ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｓｕｒｇ Ｏｎｃｏｌ，２００５，１４（２）：５９－７４．［１１］万紫微，李松岗，杨勇，等．肝门部胆管癌外科手术治疗进展．肝胆外科杂志，２００９，１５（６）：４６９－４７１． ［１２］肖梅，周宁新，黄志强，等．联合肝叶切除治疗肝门部胆管癌（附７４例报告）．中国实用外科杂志，２００６，２６（１）：４２．［１３］Ｙｏｓｈｉｄａ Ｔ，Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ Ｔ，Ｓａｓａｋｉ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｌｙｍｐｈａｔｉｃｓｐｒｅａｄ ｄｉｆｆｅｒｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｕｍｏｒ ｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｅｘｔｒａｈｅｐａｔｉｃ ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｈｅｐａｔｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００３，５０（４９）：１７－２０．［１４］Ｍａｋｕｕｃｈｉ Ｍ，Ｔｈａｉ ＢＬ，Ｔａｋａｙａｓｕ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｐｏｒ－ｔａｌ ｅｍｂｏｌｉｚａｔｉｏｎ ｔｏ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｈｅｐａｔｅｃｔｏｍｙ ｆｏｒｈｉｌａｒ ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｒｅｐｏｒｔ．Ｓｕｒｇｅｒｙ，１９９０，１０７（５）：５２１－５２７． ［１５］Ｇａｚｚａｎｉｇａ ＧＭ，Ｆｉｌａｕｒｏ Ｍ，Ｂａｇａｒｏｌｏ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｓｕｒｇｅｒｙ ｆｏｒ ｈｉ－ｌａｒ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａｎ Ｉｔａｌｉａｎ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ．Ｊ Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉ－ａｒｙ Ｐａｎｃｒｅａｔ Ｓｕｒｇ，２０００，７（２）：１２２－１２７． ［１６］Ｒｏｂｌｅｓ Ｒ，Ｆｉｇｕｅｒａｓ Ｊ，Ｔｕｒｒｉｏｎ ＶＳ，ｅｔ ａｌ．Ｓｐａｎｉｓｈ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｉｌａｒ ａｎｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉ－ ｎｏｍａ．Ａｎｎ Ｓｕｒｇ，２００４，２３９（２）：２６５－２７１． ［１７］Ｒｅａ ＤＪ，Ｈｅｉｍｂａｃｈ ＪＫ，Ｒｏｓｅｎ ＣＢ，ｅｔ ａｌ．Ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａ－ｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｎｅｏａｄｊｕｖａｎｔ ｃｈｅｍｏｒａｄｉａｔｉｏｎ ｉｓ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｔｈａｎｒｅｓｅｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｉｌａｒ ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ａｎｎ Ｓｕｒｇ，２００５，２４２ （３）：４５１－４６１． ［１８］欧迪鹏，杨连粤．肝门部胆管癌的外科治疗问题．腹部外科，２００８，２１（２）：７１－７２． ［１９］许庆华，刘鹏飞，项斌，等．胆道金属支架治疗恶性梗阻性黄疸的预后因素分析．南京医科大学学报（自然科学版），２００９，２９（８）：１１８５－１１８７． ［２０］陈大朝，袁亚维，陈龙华．胆管支架联合３Ｄ－ＣＲＴ治疗晚期肝门部胆管癌的疗效评价．临床肿瘤学杂志，２００８，１３（３）：２５１－２５３． （收稿日期：２０１２－０９－２６）作者简介：薛源，男，１９８２年６月生，医师，西山煤电集团职工总医院，０３００５３ 肿瘤疫苗的研究进展 河北省秦皇岛市第二医院（０６６６００） 孔丽清 肿瘤疫苗作为预防肿瘤患者术后复发和转移的有力手段，近年来已得到广泛的研究和应用［１］。目前，已有多种疫苗进入临床试验阶段。但是由于肿瘤免疫反应的复杂性，肿瘤疫苗距成为治疗型疫苗并真正走向临床实际应用尚有距离。目前的肿瘤疫苗主要有以细胞为载体的肿瘤疫苗、肿瘤抗原疫苗、单克隆抗体（ｍＡｂ）肿瘤疫苗、树突状细胞型疫苗等。 １ 肿瘤细胞疫苗 肿瘤细胞经放射线灭活后能诱导机体产生抗肿瘤免疫，称为肿瘤细胞疫苗。激活人体特异性免疫需要３类信号：①抗原－ＭＨＣ分子复合物（第１信号）；②免疫共刺激分子（第２信号）如Ｂ７等；③刺激淋巴细胞扩增的因子（第３信号），如白细胞介素（ＩＬ）－２、干扰素（ＩＦＮ）等。灭活的肿瘤细胞在体内、体外均丧失增殖能力，在经历短时间细胞周期停滞后走向凋亡。接种灭活的肿瘤细胞后，真皮内的树突状细胞摄取正在凋亡的肿瘤细胞，使之在内质网内与人类白细胞抗原（ＨＬＡ）Ⅰ类分子相结合，然后递呈于细胞表面，激发ＣＤ８＋ＣＴＬ细胞，产生抗肿瘤免疫。与异体肿瘤细胞疫苗相比，自体肿瘤细胞疫苗（ＡＴＶ）拥有个体特异的肿瘤抗原和ＨＬＡ分子，比异体肿瘤细胞疫苗安全、有效。但自体肿瘤细胞的免疫原性弱，故常在制备自体肿瘤细胞疫苗时加入免疫佐剂，如弗氏佐剂、病毒、细菌、细胞因子等，也可用分子克隆的策略将上述３类信号分子转染肿瘤细胞。Ｄｒａｎｏｆｆ［２］首次将粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）作为黑色素瘤疫苗免疫佐剂，发现相对于其他细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－６等），ＧＭ－ＣＳＦ可以更持久、更有效地增强肿瘤疫苗的免疫效果。 ２ 肿瘤抗原疫苗 肿瘤能够刺激机体产生特异性免疫反应的现象引发了对肿瘤抗原的研究，目前将肿瘤抗原分为肿瘤特异性抗原（ＴＳＡ）和肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）。ＴＳＡ是指只存在于肿瘤细胞，而ＴＡＡ并非肿瘤细胞特有的抗原，只是在发生肿瘤时此类抗原的表达明显上调。Ｔａｂｉ和Ｍａｎ［３］认为，肿瘤抗原必须在全部或大多数患有相同肿瘤患者的大部分肿瘤细胞中呈普遍的高表达状态，将肿瘤抗原分为５类：①突变抗原，突变抗原是肿瘤特异性的，正常组织中不存在；包括 · ０ ６ １ ·山西医药杂志２０１３年２月第４２卷第２期下半月 Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄ Ｊ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１３，Ｖｏｌ．４２，Ｎｏ．２ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ
禽流感疫苗的研究进展
禽流感疫苗的研究进展 摘要：近年来禽流感在一些国家和地区大规模暴发,不仅给养禽业造成了巨大的经济损失,而且还威胁到人类的生命健康,疫苗是防控禽流感的主要手段和措施。综述了目前世界上几种主要禽流感疫苗的研究现状，分析了其优缺点及禽流感疫苗研究的发展趋势。 关键词:禽流感病毒；疫苗；研究进展 禽流行性感冒(禽流感,AvianInfluenza,AI)是由正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒引起的、发生于各种家禽和野鸟的一种急性传染病。该病呈全球性分布,给养禽业造成巨大的经济损失。从19世纪以来,已出现四次全球性的禽流感大流行,最严重的一次（1918～1919年)全世界死于禽流感的人数超过20万。尤其是在2003年底至2004年初韩国、泰国、日本、越南和我国相继暴发禽流感,越南、泰国出现了禽流感病毒H5N1变异株感染人并致死的病例,因此引起了世界各国的高度重视[1]。由于禽流感病毒血清亚型众多,变异频繁,给疫苗的研制带来了极大困难。目前,商品化禽流感疫苗大都为灭活疫苗,该种疫苗具有制备工艺简单、免疫效果良好、免疫持续时间较长等特点,已被许多国家和地区在家禽中使用,并在预防和控制禽流感暴发中起到一定的积极作用。但灭活疫苗存在免疫效率低下、免疫剂量较大、监测中难于区分疫病的疫苗免疫与野度感染的缺陷,并且还存在散毒的危险等缺点。 防控AIV理想化的疫苗应具备以下特点:①价格低廉,易接种,对家禽具有高度的安全性。②任何日龄家禽接种1份剂量都有效,免疫后既能产生体液免疫应答,又能产生细胞免疫应答,并能迅速建立免疫性保护。③可以区分AIV自然感染禽和疫苗免疫禽。④疫苗生产时对工作人员和环境安全。⑤休药期短或无休药期[3]。但目前,还没有任何一种禽流感疫苗同时具备上述全部特性。因此,高效、安全的AIV新型疫苗的研制一直是科研人员关注的焦点。常见的禽流感疫苗有以下几类: 1全病毒灭活疫苗禽流感灭活疫苗一般是用甲醛灭活禽流感病毒鸡胚尿囊增殖液,辅以佐剂而成[2]。它具有制备工艺简单、免疫效果确实、安全性好、,免疫持续时间长且不会出现毒力返强和变异的优点,可保护同种亚型AIV的攻击,可有效避免禽流感的大暴发或大流行。历史上禽流感灭活疫苗曾经发挥过重要作用，如1987年美国科罗拉多州使用灭活苗成功地控制了H9N2亚型禽流感的流行。目前，我国H5、H7亚型禽流感灭活疫苗已经研制成功，并取得了良好的免疫保护效果。同时，对混合乳化法制备的联苗也有了研究[3]。 全病毒灭活疫苗具有制备工艺简单，免疫效果好，免疫持续期长等特点，已被许多国家作为商品化的禽流感疫苗在家禽中使用，有效的避免了禽流感的大暴发或大流行。但与此同时，全病毒灭活疫苗也存在一定的问题，如疫苗免疫效果是由灭活疫苗的注射剂量和疫苗中的抗原量决定的，因此灭活苗注射的病毒量要比活疫苗高出许多倍。且制备灭活苗还必须添加佐剂，其生产还需要大量的鸡胚，成本非常高，这在禽流感大流行的情况下，鸡胚的供应将会成为疫苗生产的一个限制因素。此外，由于接种灭活苗的机体也会产生针对病毒内部结构蛋白，如NP的特异性抗体，而这类抗体是在进行流行病学调查时的主要判定指标，因此灭活苗的应用将导致无法区分自然感染鸡和疫苗接种鸡，从而干扰AIV疫情的监测和流行病学的调查。 2减毒活疫苗减毒活疫苗是指将野毒株感染鸡胚，并在25～26℃下连续传代得到减毒毒株，即冷适应株，该病毒只能在25℃左右复制，不能在37℃下传代，之后使用该弱毒株免疫使机体产生特异性免疫。多项人体和动物研究证实，冷适应毒株生物学性质有很好的稳定性。弱毒流感疫苗与灭活疫苗的免疫后抗体阳转率都在50%～70%，能够有效控制流感的流行；对群体免疫的意义更加重大，对表面抗原发生转移的流行株病毒有一定的保护作用。但冷适应减毒活疫苗与其他流感病毒可能发生基因重配得到毒力恢复的重配株病毒，此外，冷适应减毒活疫苗在免疫缺陷患者中使用有致病的风险。