shRNA慢病毒转染串珠素对大鼠硬膜外瘢痕中成纤维细胞增殖能力的影响

shRNA慢病毒转染串珠素对大鼠硬膜外瘢痕中成纤维细胞

增殖能力的影响

马青跃;褚言琛;王进;候庆先;袁万青;杨慧英;邹云雯

【期刊名称】《中华创伤骨科杂志》

【年(卷),期】2013(015)003

【摘要】目的通过研究经shRNA慢病毒转染串珠素的大鼠硬膜外瘢痕组织成纤维细胞的增殖能力,探讨其对硬膜外瘢痕组织形成的影像. 方法30只Wistar 大鼠行椎板切除术,建立模型,于培养4周后提取硬膜外瘢痕组织.通过组织块贴壁法培养硬膜外瘢痕组织中的成纤维细胞并将细胞分为3组:未转染组(空白对照组)、荧光蛋白(GFP)慢病毒转染组(GFP组)和shRNA慢病毒转染组(shRNA 组,内含GFP).成纤维细胞转染成功后,分别通过Western-blot、荧光定量PCR 及MTT法检测3组的成纤维细胞的RNA、蛋白质表达及细胞增殖的差异. 结果Western-blot检测显示shRNA组串珠素蛋白明显低于空白对照组和GFP 组.荧光定量PCR检测显示shRNA组串珠素RNA表达低于空白对照组和GFP 组.MTT检测显示0h各组吸光度(A)值差异均无统计学意义(P＞0.05),24 ～96 hshRNA组吸光度值(A)低于空白对照组和GFP组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论经shRNA慢病毒转染串珠素能抑制大鼠硬膜外瘢痕组织成纤维细胞的增殖.%Objective To research the proliferation of fibroblasts in epidural scar transfected by perlecan shRNA lentiviral particles.Methods Experimental models were established in 30 Wistar mice which underwent laminectomy.The epidural scar tissue was harvested after culture for 4 days.The fibroblasts in the epidural scar tissue were