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富有潜力的干细胞

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富有潜力的干细胞

浅谈干细胞的发展前景

浅谈干细胞的发展前景 二十世纪是生命科学发展最为迅猛的时代,它已成为自然科学中最为引人注目的领域。科学界现已广泛地认为干细胞研究是当前生命科学的最热点之一,是生命科学的最大成就之一。科学家成功分离人体胚胎干细胞的新闻轰动了世界。在1999年末的年度世界十大科学成果评选中,世界最权威的美国《科学》杂志将“干细胞研究的新发现”评为“1999年世界十大科学成就”之榜首,人类基因组测序和克隆技术“屈尊让贤”名列第二;2000年再度入选《科学》评选的当年10大科技成就。如果说基因研究正全力构筑生命科学基石的话,那么干细胞应用则将打开疾病治疗的“突破口”。干细胞研究具有不可估量的医学价值,将促使科学家们重新认识细胞生长、分化的基本生命原理。 要说干细胞的发展前景,首先就要了解什么是干细胞。 干细胞是一类是未充分分化,尚不成熟,具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞,医学界称之为“万用细胞”。干细胞有两种分类方法,一是根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。第二种分类方法是根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。胚胎干细胞的发育等级较高,是全能干细胞,而成体干细胞的发育等级较低,是多能或单能干细胞。 人胚胎干细胞提供了在细胞和分子水平上研究人体发育过程中的及早期时期的良好条件,这种研究不会引起与胚胎实验相关的伦理问题。采用基因芯片等技术,比较人胚胎干细胞以及不同发育阶段的干细胞和分化细胞的基因转录和表达,可以确定胚胎发育及细胞分化的分子机制,发现新的人类基因。结合基因打靶技术,可发现不同基因在生命活动中的功能等。该应用有利于新药的发现及筛选,人胚胎干细胞使新药的药理、药效、毒理及药代等研究达到了细胞水平,极大减少了药物实验所需的动物数量。目前药物实验使用的细胞系基本上来自其他的种属,其结果常不能真正代表正常的人体细胞对药物的反应。人胚胎干细胞

干细胞治疗的前景及展望

总结: 短短十几年时间,干细胞已成为了生命科学领域研究的热点前沿,1999 和2000 年,《Scienee》杂志连续2年将干细胞和人类基因组计划列为当年的10大科学突破之首。 从实验室基础性研究到小规模的临床研究再到部分干细胞产品的上市,干细胞研究正在以惊人的速度发展,无疑为社会效益和临床应用领域带来了巨大的想象空间。未来 2 年全球干细胞药物及政策有望获得突破性进展,预计到2020 年全球约有4 000亿美元市场。目前应用在: 细胞治疗 干细胞最重要的潜在用途是生产细胞和组织,并应用于细胞疗法。干细胞治疗技术应用时间最早,范围最广。骨髓移植技术是最早的干细胞治疗相关的临床应用,并已成为根治白血病等疾病的主要手段。目前有以下几种药品。 1)2008年,Osiris公司的干细胞产品Prochymal在美国上市,是一种异体骨髓来源的成体 干细胞产品,被设计来控制炎症、促进组织再生、防止瘢痕的形成。2012 年,获加拿 大药监局批准上市,被称为是世界首个干细胞治疗药物,用于治疗儿童移植物抗宿主 病。 2)韩国FDA批准了3种干细胞药物。2011年7月,韩国食品药品管理局宣布,准许由FCB-Pharmicell 公司开发的心脏病治疗药物Hearticellgram-AMI 自7 月 1 日起投放市场销售。Hearticellgram-AMI 用于治疗急性心肌梗死,主要的治疗方法是从患者自身骨髓中提取间质干细胞移植注入冠状动脉 3)2012 年1 月,韩国食品药品管理局表示,批准Medi-post 公司的软骨再生治疗药物Cartistem(脐血来源)和Anterogen公司的肛痿治疗药物Cuepistem(自体脂肪来源)等生产许可。CartiStem 是全球首创的异基因干细胞药物,来源于他人新生儿脐血干细胞,要治疗由退行性或反复性外伤引起的骨关节炎患者。Cuepistem 是一种从自体脂肪组织提取的干细胞药物,来源广泛、取材容易、不涉及伦理问题、便于自体移植、无免疫排斥反应,利用脂肪干细胞的多向分化潜能,诱导分化成所需的组织,用以修补缺损促进伤口愈合,能使患者从根本上解决疾病困扰。对于促进克罗恩病患者复杂肛痿的愈合,有明显的治疗优势。

大鼠的骨髓间充质干细胞提取

大鼠的骨髓间充质干细胞提取 第一步,SD大鼠麻醉处死,75%乙醇皮肤消毒,无菌条件下迅速剪开两侧后肢皮肤及肌肉,取股骨及胫骨,浸泡在PBS中。 心得体会:①鼠龄4周,重量在160-200g之间的雄性SD大鼠。老鼠太老了,骨髓都分化的太厉害,没有年幼老鼠的骨髓这么有活力。雌的也行,但是雌的比较厉害,咬人。Wistar 大鼠行不行,也行,但是就品种而言,SD的生存力更强大。 ②我个人认为引颈处死不人道。麻醉药品为氯胺酮、安定、阿托品各一支混到一起,腹腔麻醉,保证30秒老鼠躺倒,安乐死。如果你水平够高,可以直接用注射器抽取心脏内的血液,可以减少手术中老鼠出血较多而影响术野不清的问题。 ③老鼠的两支前肢取下来也行,但老鼠太小,前肢更小,如果你的确需要大量的细胞取下来也无妨。浸泡的15ml的一次性离心管中(也可以用培养皿),管中提前加好含有青链霉素的PBS 10ml就行了,青链霉素的浓度为500U/ml,这样是区别于生长液中青链霉素浓度,组织抑菌是200-500U/ml,生长液抑菌是20-100U/ml。就当初步的消毒吧! ④整个手术过程要快,一般控制在20分钟之内,时间长了,骨髓会凝,不利于后期的冲洗。老鼠浑身都是宝,可以叫上研究脂肪的,嗅鞘的,心肌的其他人员一起来,把剩下不要的老鼠尸体给别人,做实验要巧花钱。一般老鼠一条腿的一根股骨就够种在一个60mm的皿里了,具体根据个人经验而言。 第二步,⑴将装有骨头的离心管置于紫外线下消毒30分钟后移至超净台,倒掉PBS后,再用含青链霉素的PBS清洗骨头三遍。 ⑵去掉骨头两侧的骨骺端,暴露出骨髓腔,用5ml的一次性注射器吸取5.2ml的细胞生长液,用针头插到骨头的一端冲洗,然后换另一端接着冲。将骨髓冲出的细胞生长液至60mm培养皿中(皿最好倾斜45度),冲洗数次直至将绝大部分骨髓冲出。 ⑶换1ml注射器的针头,反复在培养皿中吹吸细胞悬液2-3次后再全部吸到无菌容器中,大约此时的细胞悬液为5ml。 心得体会: ①离心管中得骨头要用无菌的镊子夹取,放到一次性培养皿的皿盖上,皿是用来承装细胞悬液的,这样可以节省一个皿。 ②5.2ml的细胞生长液经过冲骨髓后或多或少都会有一些残留在骨髓中,所以到最后可能就剩下5ml细胞悬液了,甚至更少,如果不够5ml,可以加至5ml,这样是方便你计数用的。冲洗的过程中以骨腔颜色变白为标准,基本3-4次就差不多。培养皿倾斜45度是为了在冲洗和吹打过程让较大的杂质停留,方便去除的,相对保持细胞悬液的清晰度。 ③换用1ml的针头是为了能更好的打散细胞,当然这个过程要轻柔,避免用力破坏细胞。无菌容器最好是光滑的,因为在转移细胞悬液的时候会存在细胞的丢失,临床上经常使用的抗生素瓶子就非常好用,但是要经过严格的清洗和消毒。 ④以上的细胞生长液5ml具体配制为 DMEM(90%)+胎牛血清(10%)+L-VC(忽略不计)+青链霉素(忽略不计) 低糖DMEM液(含有glutamine的,Gibco公司的,500ml一瓶,大约60元)浓度90%,5ml 细胞生长液中大约需要4.5ml

干细胞治疗的前景及展望.docx

如对你有帮助,请购买下载打赏,谢谢!总结: 短短十几年时间,干细胞已成为了生命科学领域研究的热点前沿,1999和2000年,《Science》杂志连续2年将干细胞和人类基因组计划列为当年的10大科学突破之首。 从实验室基础性研究到小规模的临床研究再到部分干细胞产品的上市,干细胞研究正在以惊人的速度发展,无疑为社会效益和临床应用领域带来了巨大的想象空间。未来2年全球干细胞药物及政策有望获得突破性进展,预计到2020年全球约有4 000亿美元市场。 目前应用在: 细胞治疗 干细胞最重要的潜在用途是生产细胞和组织,并应用于细胞疗法。干细胞治疗技术应用时间最早,范围最广。骨髓移植技术是最早的干细胞治疗相关的临床应用,并已成为根治白血病等疾病的主要手段。目前有以下几种药品。 1)2008年,Osiris公司的干细胞产品Prochymal在美国上市,是一种异体骨髓来源的成体干细胞产品,被设计来控制炎症、促进组织再生、防止瘢痕的形成。2012年,获加拿大药监局批准上市,被称为是世界首个干细胞治疗药物,用于治疗儿童移植物抗宿主病。2)韩国FDA批准了3种干细胞药物。2011年7月,韩国食品药品管理局宣布,准许由FCB-Pharmicell公司开发的心脏病治疗药物Hearticellgram-AMI自7月1日起投放市场销售。Hearticellgram-AMI用于治疗急性心肌梗死,主要的治疗方法是从患者自身骨髓中提取间质干细胞移植注入冠状动脉 3)2012年1月,韩国食品药品管理局表示,批准Medi-post公司的软骨再生治疗药物Cartistem(脐血来源)和Anterogen公司的肛瘘治疗药物Cuepistem(自体脂肪来源)等生产许可。CartiStem是全球首创的异基因干细胞药物,来源于他人新生儿脐血干细胞,要治疗由退行性或反复性外伤引起的骨关节炎患者。Cuepistem是一种从自体脂肪组织提取的干细胞药物,来源广泛、取材容易、不涉及伦理问题、便于自体移植、无免疫排斥反应,利用脂肪干细胞的多向分化潜能,诱导分化成所需的组织,用以修补缺损促进伤口愈合,能使患者从根本上解决疾病困扰。对于促进克罗恩病患者复杂肛瘘的愈合,有明显的治疗优势。 图1.目前使用的干细胞药物1 图2.目前使用的干细胞药物2 药物筛选 为了提高药物研发产率,同时为了降低开发后期药物损耗的发生率,必须在药物开发项目初期尽早对该化合物的各种潜在毒性以及可能出现的其他不良反应进行全面评估,降低药物开发项目失败的风险。利用实验动物模型检测化合物不良反应方面在新药研发中发挥了十分重要的作用,但是利用动物模型存在几个问题:①动物模型建立困难,实验成本高昂;②动物模型与人类存在种属差异,所建立的疾病临床相关性尚待商榷;③使用动物模型涉及伦理道德问题,受各种相关政策法规的制约。利用多能干细胞建立的细胞模型或疾病模型进行药物筛选是最具有前景的应用之一。 由实验可以得出:使用基于患者的诱导多能干细胞的药物能够更快更好的开发出药物,比动物模型更为有效节省物力财力 图3常规药物开发过程与基于患者衍生的诱导多能干细胞的药物开发过程

动物骨髓干细胞细胞分离液试验方法

动物骨髓干细胞细胞分离液试验方法 货号:P8600 规格:200mL 保存:常温保存,有效期2年。本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启 封后置常温保存。如4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。 产品内容: 名称规格 动物骨髓干细胞分离液200mL 匀浆冲洗液200mL 样本稀释液200mL 清洗液200mL 洗涤液200mL 无菌硅化离心管5支 实验前准备: 1、适用仪器 最大离心力可达1200g的水平转子离心机 骨髓单细胞悬液的制备: 1.以适当方式处死动物,剥离出股骨或胫骨,用剪刀剪断骨头两端,露出内腔。 2.用注射器吸取适量(根据动物大小)的匀浆冲洗液冲洗出内腔中的骨髓。 3.收集悬液到合适离心管中,反复吹打成单细胞悬液,以70μm细胞筛网(随试剂盒附赠5个)过滤。 4.450g,离心10min,弃上清。 5.用样本稀释液重悬细胞浓度为2×108-1×109/ml的单细胞悬液备用(以小鼠为例,一般使用1ml样本稀释液重悬骨髓细胞)。 检验方法: 全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。 1.取一支离心管,加入与骨髓单细胞悬液等量的分离液(注:分离液最少不得少于3ml)。

2.用吸管小心吸取骨髓单细胞悬液加于分离液液面上,400-550g,离心20-30min。(注:根据骨髓单细胞悬液量确定离心条件,骨髓单细胞悬液量越大,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到最佳分离效果)。 3.离心后,此时离心管中由上至下分为四层。第一层为稀释液层。第二层为环状乳白色目的细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。 4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色目的细胞层到另一15ml离心管中,向离心管中加入5-10ml洗涤液,混匀细胞。 5.400g,离心10min。 6.弃上清。 7.用吸管以5ml清洗液重悬所得细胞。 8.250g,离心10min。 9.重复7、8、9,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。 差异贴壁法纯化细胞: (1)用干细胞无血清培养基或干细胞完全培养基以1.5-3×106个/ml的密度重悬细胞,将细胞铺于一次性细胞板或细胞瓶中,放于37℃二氧化碳培养箱中进行贴壁培养。 (2)2-4小时内贴壁的为巨噬细胞前体(俗称为单核细胞)。 (3)10-24小时内贴壁的单个核细胞为内皮、内皮祖细胞、干细胞。 (4)不贴壁的为淋巴细胞。

中国干细胞存储行业市场前景研究报告

2017年中国干细胞存储行业市场前景研究报告 一、干细胞的定义及分类 干细胞(stemcells,SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。 根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞(totipotentstem cell,TSC)、多能干细胞(pluripotentstem cell)和单能干细胞(unipotent stem cell)(专能干细胞)。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称为“万用细胞”。 干细胞分类及特征 资料来源:中商产业研究院 随着基因工程、胚胎工程、细胞工程等各种生物技术的快速发展,按照一定的目的,在体外人工分离、培养干细胞已成为可能,利用干细胞构建各种细胞、组织、器官作为移植器官的来源,这将成为干细胞应用的主要方向。 二、我国干细胞存储现状分析 干细胞的产业化发展方向有上游的干细胞库、中游的干细胞扩增技术和质检技术,以及下游的干细胞产品,从而形成一条很大的产业链。干细胞产品又包括干细胞药物、干细胞移植技术、干细胞美容与抗衰老技术,以及组织工程中的种子细胞、基因治疗的细胞载体、基于干细胞的药物筛选模型等等。 中国干细胞完整产业链示意图 资料来源:中商产业研究院 根据以上产业链划分,干细胞治疗治疗领域已具备广阔的市场规模,形成了脐带血库、新药筛选和细胞治疗三大市场板块。其中,脐血储存(脐血库)是目前国内干细胞行业中最成熟也最重要的产业化项目。 目前,脐血库(全称叫“脐带血造血干细胞库”)是专门提取和保存脐带血造血干细胞并为患者提供查询的特殊医疗机构。国际上也称之为脐血银行或生命银行。中国的脐血库包括公共库和自体库。公共库奉行公益原则,接受公众脐带血捐赠,免费保存,以作日后提供给病患进行异体移植;而自体库,实行收费保存,脐带血也只用于保存者自体移植所用。

佛教慈济骨髓干细胞中心

壹、計畫說明 長期以來造血幹細胞捐贈的傳統觀念中,認為骨髓捐贈是「抽龍骨水」,以至於願意捐贈造血幹細胞的民眾並不多,然而,骨髓捐贈並非抽龍骨水,而現在更有一種新的捐贈方式-週邊血幹細胞捐贈,是多數民眾所不知。台灣每年仍有約300位血癌患者需要尋找非親屬捐贈者,在血液病患日漸增加的情況下,我們更需要持續不斷推廣捐贈造血幹細胞的正確認知,讓民眾在正確的認知下,重新思考捐贈造血幹細胞的意義。 為推動造血幹細胞捐贈,希望透過宣導進而達到提升捐贈率的效果,並藉此將辦理「因為有愛-微電影創意影片」之徵選活動,向民眾徵求創意,吸引更多人加入捐贈行列。 貳、報名資格 一、一般民眾、不限年齡。(歡迎學校及社團踴躍參加) 二、個人或組隊報名均可,一組最多五人。 三、為符合公平原則,已獲得國內外獎項之作品,均不得參賽,違者取消參賽 資格。 四、不拘任何表現方式,發揮創意用5分鐘以內影片投稿參賽。 五、參賽作品不得使用非法取得下載之音樂、影像或影片片段。參賽者若有抵 觸任何著作權之法律,一切法律責任由參賽者承擔。 六、參賽者之作品如涉及智慧財產權者,主辦機關取得全部權利。 七、本活動之參賽作品,無論入選與否,一經送件即視為同意本活動評審所有 規則,並同意授權主辦單位得自行運用相關業務範圍內,對所有參賽作品 之公開發表、公開展示、公開播放、影像及圖文宣導、攝影、重製、改作、 編輯、印製、散布、出版、網頁製作、下載傳輸等相關非商業行為之用途, 日後不得有異議。且不另支付稿費及版稅,參賽者無異議亦不另行索取費 用。

參、徵件期間: 一、報名收件日期:即日起至6月30日止。以郵戳為憑,逾期恕不受理。 二、初審結果公佈:102年7月15日(一) 三、網路投票期間:102年8月1日~8月31日 請上「骨髓幹細胞中心Facebook粉絲團」投票 四、決審:102年9月 五、公布優勝結果:102年9月 六、頒獎典禮:102年本中心週年慶活動(預計9月) 七、成績公佈:公布於活動網站及慈濟骨髓幹細胞中心網站 肆、創作主題 須與造血幹細胞捐贈方式緊密連結,且畫面上需呈現自行設計的標語。 伍、作品規格: 一、類型:不限(劇情片、紀錄片、動畫短片皆可) 二、相關規格: 1.片長:嚴格規範5分鐘以內(包含片頭與片尾) 2.拍攝工具:不限 3.影片格式:像素至少720(W)x480(H)的avi/mov/mpg格式。 4.輸出格式:mpeg格式 5.參賽影片畫面大小至少720x480,最大不得超過1,920x1,080。 6.請將原始影片格式及輸出之mpeg格式,以數位檔案存於隨身碟中或以 CD/DVD-R片燒錄轉檔成之作品繳交。 7.提交作品不予退還,未符合作品競賽規格者不另行通知與退件。

干细胞治疗工作流程

干细胞治疗工作流程 脐带血临床采集流程 干细胞是一种未分化的细胞,具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能。 脐带血广泛的应用前景备受关注,脐带血本属于废弃物,但是医学技术的进步使得它的价值得到了空前的提升。1989年,法国的鲁克罗曼教授用HLA 相合的同胞脐带血干细胞进行移植,成功地治疗了一例遗传性疾病—可尼贫血症,之后短短的15年的时间,医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善了多种疾病,包括:血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等。现在在儿童的干细胞移植方面,由于可以存在1-2个HLA位点的不配型,免疫排斥反应小等原因,脐带血干细胞已成为治疗一些重大疾病的有效手段。同时,干细胞的进一步开发,还可用于抗衰老、器官修复、美容等保健领域。干细胞技术和临床应用的飞速发展,给人类的健康带来了新的希望和保障。但是作为采集脐带血最主要的工作人员,我们所需要的操作是非常简单的,但是对于术中操作之外,我们还是会遇到以下的问题。解决这些问题,我们才能放心的采集,存储,备用。但是真正合法,安全,便捷的让脐带血的干细胞移植到有需要的患者体,需要按以下流程操作: 脐带血采集条件: 以初产妇、年龄在45岁以或35岁以经产妇,身体健康者为宜。 脐带血安全流程

1、传染病检查:孕妇在产前要做好身体检查。这些检查包括:肝功能是否正常,有无梅毒螺旋体,艾滋病病毒(HIV )、乙型肝炎病毒(HBV )、丙型肝炎病毒(HCV)等病原体检测。如果其中有一样是阳性的话,就不要再进行采集了。 2、采集和储存的无菌观念:在自然分娩的情况下,一定要注意消毒。被厌氧菌和需氧菌污染,检测为阳性时都不能储存和使用。在脐血被采集后,应该尽快保存在2-8℃的恒温箱中,并远离辐射源,不要让X射线照到。这样的脐带血经科学实验证实,放置24小时或在-23℃以下48小时,其中的干细胞的活性是没有明显影响的,但最长不应该超过72小时。 采集流程 何种方法采集脐带血更好些呢?Solves[5]等证实了剖宫产情况下,以下两种采集方法体采集法对得到的脐带血除血细胞比容及血小板外,其他各项没有明显不同。 体采集法:产妇施行常规的子宫横切术,将胎儿取出后,立即用两把止血钳夹住脐带,将其与胎儿分离,然后用碘酒和70%酒精消毒脐带,做脐静脉穿刺后,脐带血通过重力的作用流人含抗凝剂的无菌采集袋,采集完将其放入4℃冰箱中保存。 体外采集法:同样对产妇行子宫横切术,待胎盘自然或人工剥离后,立即将其置于采集区,胎盘取出与进行采集之间时间尽可能缩短,将胎盘放在一个中间有孔的可供脐带自然垂下的采集台上,对脐带进行严格消毒后行脐静脉穿刺,血液在重力的作用下流人采集袋中,将其放人4℃冰箱保存。 脐带血贮存

造血干细胞移植技术临床应用质量控制指标2017版

附件2 造血干细胞移植技术临床应用 质量控制指标 (2017年版) 一、造血干细胞移植适应证符合率 定义:造血干细胞移植术适应证选择正确的例数占同期造血干细胞移植术总例数的比例。 计算公式: 造血干细胞移植适应证符合率 =造血干细胞移植术适应证选择正确的例数同期造血干细胞移植术总例数×100% 意义:体现医疗机构开展造血干细胞移植技术时,严格掌握适应证的程度,是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 二、异基因造血干细胞移植植入率 定义:异基因造血干细胞移植术后100天内,实现造血重建(患者外周血中性粒细胞>0.5×109/L 与血小板>20×109/L )的患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式: 异基因造血干细胞移植植入率 =异基因造血干细胞移植术后100天内实现造血重建的患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义:反映医疗机构造血干细胞移植技术水平的重要指标之一。 三、重度(Ⅲ-Ⅳ度)急性移植物抗宿主病发生率 定义:急性移植物抗宿主病(aGVHD ),是指造血干细胞移植术后100天内,由于移植物抗宿主反应而引起的免疫性疾病,主要表现为皮疹、腹泻和黄疸,是异基因造血干细胞移植的主要并发症和主要死亡原因。重度(Ⅲ-Ⅳ度)急性移植物抗宿主病发生率,是指异基因造血干细胞移植术后发生重度(Ⅲ-Ⅳ度)急性移植物抗宿主病患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。

计算公式: 重度(Ⅲ?Ⅳ度)急性移植物 抗宿主病发生率=重度 Ⅲ?Ⅳ度 异基因造血干细胞移植术后 发生急性移植物抗宿主病患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义:体现医疗机构对不同移植方式造血干细胞移植术后aGVHD 预防水平,是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 四、慢性移植物抗宿主病发生率 定义:慢性移植物抗宿主病(cGVHD ),是指造血干细胞移植术100天后,由于移植物抗宿主反应而引起的慢性免疫性疾病。慢性移植物抗宿主病发生率,是指异基因造血干细胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式: 慢性移植物 抗宿主病发生率=异基因造血干细胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义:体现医疗机构对造血干细胞移植术后cGVHD 预防水平,是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 五、异基因造血干细胞移植相关死亡率 定义:异基因造血干细胞移植术后100天内非复发死亡患者数占同期异基因造血干细胞移植患者总数的比例。 计算公式: 异基因造血干细胞移植相关死亡率 =异基因造血干细胞移植术后100天内非复发死亡患者数同期异基因造血干细胞移植患者总数×100% 意义:体现医疗机构对造血干细胞移植术后患者的综合管理水平,是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要结果指标之一。 六、异基因造血干细胞移植总体生存率 定义:异基因造血干细胞移植后1年和3年随访(失访者按未存活患者统计)尚存活的患者数占同期异基因造血干细胞移植患者总数的比例。 计算公式:

骨髓干细胞的临床应用研究新进展

在20世纪末和21世纪初干细胞的研究取得了突破性进展,主要进展包括两个方面:一是成功建立了可以分化为人体任何组织类型的成熟细胞的人类胚胎干细胞(embryonicstemcells,ES)系,这是干细胞研究的重大里程碑和生命科学的重大技术突破[1];二是发现成人各种组织中均有未分化成熟的干细胞分布,这类干细胞的基本功能是在生理条件下更新正常衰老死亡的细胞,维护组织或器官的结构完整和正常功能,而在组织损伤等病理条件下可动员、增殖和分化为成熟的功能细胞,修复损伤[2]。传统认为,特定组织中的干细胞只能向它所存在组织类型的成熟细胞分化,而这一观点目前受到挑战。许多研究结果证明,一种组织中的干细胞不但可以分化为它所在组织类型的成熟细胞,而且在特定的条件下或移植到其他组织中,还可以被诱导分化为其它无关组织类型的成熟细胞,有的还可打破胚层限制,分化为不同胚层的成熟细胞[3,4]。比如骨髓组织中的干细胞不但可分化为各种血液细胞,还可分化为脑神经细胞,脑组织中的干细胞可以分化为神经细胞,移植到受致死量放射线照射的小鼠骨髓组织中,也可以重建造血免疫功能。最近还有人从骨髓、神经等组织获得具有与ES细胞特性相似的成体干细胞,这类细胞可以在特定条件下分化为三个胚层的多种类型的成熟细胞。成人体内的干细胞虽然数量稀少,但由于其可塑性强,取材容易,可实现自体化治疗,避免了ES细胞或异体细胞治疗的免疫排斥、伦理和未知病源感染等问题。干细胞的研究进展极大地促进了生命科学研究和生物技术产业的发展,同时也预示着一些目前难以治愈的疾病可能由于干细胞的研究与应用而得到有效治疗,因此在最近几年受到相关研究者和社会各阶层的广泛重视。 1干细胞研究技术的新进展 干细胞是一类未分化的细胞或原始细胞,是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定的条件下,干细胞可以分化成机体内的多种功能细胞,形成任何类型的组织和器官,以实现机体内部建构和自我康复能力。根据细胞的发育阶段,干细胞可分为来源于早期胚胎的胚胎干细胞(embryonicstemcell,ESCs)和存在于成人各组织中的成体干细胞(adultstemcell,ASCs)。人类ESCs可来源于桑椹球细胞、囊胚内细胞团或拟胚体细胞等[5,6],还有发现从流产胎儿生殖脊分离获得的生殖原基细胞(embryonicgermcell,EGCs)和从畸胎瘤组织分离获得的多能干细胞也具有与ESCs类似的生物学特性,即具备分化为成人所有组织类型的成熟细胞的潜能[7,8]。1998年,美国科学家从人囊胚内细胞群分离培养胚胎干细胞(embryonicStemCells)并建立细胞系,与此同时,美国的另一研究小组从妊娠5~9周的胎儿生殖脊组织中也分离获得胚胎干细胞样细胞,此后,科学家从畸胎瘤组织、成人骨髓、胎盘,甚至外周血中均分离获得胚胎干细胞样细胞,这些进展为人类认识和利用干细胞前进了一大步[9,10]。当受精卵分裂发育成囊胚时,将内细胞团(innercellmass)分离出来进行培养,在一定条件下,这些细胞可在体外“无限期”地增殖传代,同时还保持其全能性,因此被称为胚胎干细胞。胚胎干细胞在培养条件下,若加入白血病抑制因子LIF(leukaemiainhibitoryfactor),则能保持在未分化状态,若去掉LIF,胚胎干细胞迅速分化,最终产生多种细胞系,如肌肉细胞、血细胞、神经细胞或发育成“胚胎体”。 1997年,英国科学家利用核移植技术已发育成熟的体细胞移植到去核卵母细胞中,在体外条件下成功将成体细胞的发育时钟拨回到最原始状态,然后启动其发育和分化机制,再历经了像天然受精卵发育那样的胚胎干细胞的发育和分化,胚胎形成和组织器官的发育,最终诞生一个新的生命体,表明成体细胞在合适的条件下可以返老还童,关键在于如何创造这种适于细胞返老还童的条件和土壤。依据上述原理,科学家怀疑成人组织细胞的更新与修复可能源于其中存在具有多向分化潜能的干细胞或逆向分化机制,于是对成体干细胞进行了深入研究。1999年,美国科学家MargarelGoodell发现小鼠肌肉组织干细胞可以“横向分化”(transdifferentiation,转分化)成血液细胞,这一发现很快被世界各地的科学家证实,并且发现其他组织来源的人成体干细胞同样具有“横向分化”的功能[11,12]。现在已证明人的骨髓干细胞可以分化为肝脏细胞、肌肉细胞、神经细胞等。这种横向分化具有相当的普遍性,

造血干细胞移植医院基本标准

非血缘造血干细胞采集技术管理规范 为规范非血缘造血干细胞采集技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,制定本规范。本规范适用于非血缘外周血造血干细胞(以下简称造血干细胞)的采集。 一、医疗机构基本要求 采集造血干细胞的医疗机构应当保证造血干细胞来源合法。 (一)有卫生行政部门核准登记的血液内科专业诊疗科目。 (二)三级甲等医院或者血液专科医院。 (三)采集条件 1、采集室:有20m2以上的造血干细胞采集工作区;有相应的造血干细胞采集设备,采集床/椅等。 2、有动员剂注射室。 3、能为捐献者提供常规体检服务。 4、应急处理区:有相应的抢救设备,能够进行急症处理。 5、有资料保存与传输设备。 6、临床实验室有流式细胞仪检测CD34+;能够进行有核细胞计数。有质量控制和质量评价措施,相关检验项目参加卫生部指定的室间质量评价机构的室间质量评价并合格。

(四)有2名以上符合造血干细胞采集技术人员要求的执业医师,并有满足工作需要的其他相关专业技术人员。 二、人员基本要求 (一)医师 1、取得《医师执业证书》,执业范围为内科。 2、有主治医师以上专业技术职务任职资格。 3、有3年以上血液内科工作经验和造血干细胞采集经验。 负责造血干细胞采集工作的医师有副主任医师以上专业技术职务任职资格,有5年以上血液内科工作经验和造血干细胞采集经验。 (二)其他相关专业技术人员 能够胜任造血干细胞采集相关工作,能熟练掌握血细胞分离机的操作、相关仪器设备使用和电脑操作。 三、技术基本要求 (一)严格遵守相关技术操作规范和诊疗指南。 (二)采集部位:浅静脉,必要时深静脉。 (三)外周血动员剂用量:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)5μg/kg/日,4—6天。 (四)采集方式:细胞分离机采集。 (五)采集量:造血干细胞悬液50—200ml/人/次,采集次数不超过2次,每次循环处理血量不多于15000ml。当

骨髓干细胞治疗心脏病的研究与进展

?382?.,ollmdzofClinicalandExperirnentatMedicineVd.9,No.5Mar.2010骨髓干细胞治疗心脏病的研究与进展 龚怡综述雷长城’审校(南华大学附属第二医院湖南衡阳421000)【关键词】骨髓干细胞心血管疾病移植 各种心脏病发展到晚期大多导致心力衰竭,心力衰竭严重影响着心脏病患者的预后及生活质量。而常规治疗手段效果有限,骨髓干细胞的临床研究越来越多。现就骨髓干细胞的分类、作用机制、途径、存在的问题及前景等作简要介绍。 1研究背景及现状 冠状动脉粥样硬化性心脏病、风湿性心脏病、扩张型心肌病等各种原因所致的心肌损伤发展到晚期大多伴有心腔扩大和舒缩能力下降,虽然成熟的心肌细胞不是终末分化细胞,但由于其增殖、分裂能力有限,新生成的心肌细胞远远无法修复坏死的心肌,具有完整舒缩功能的心肌细胞数量相对或绝对减少,受损心肌细胞由纤维组织瘢痕修复,未受损的心肌细胞代偿肥大,造成心肌功能收缩功能下降,最终导致心力衰竭。目前常规的治疗手段只能缓解心衰症状,不能修复死亡或濒死的心肌。心肌细胞在出生后已失去增殖能力或增殖能力极低,因此增加具有完整舒缩功能的心肌细胞数目,是改善心功能的关键。细胞移植是一个切实可行的增加成体心肌细胞的方法,骨髓干细胞在体外有良好增殖能力,能在心肌内环境下分化为损伤组织所需要的心肌细胞,且无移植后的免疫排斥反应,因此在心肌损伤的治疗中备受关注。Soonpaa等¨1首先尝试了心肌细胞移植,初步证实了心肌细胞移植的可行性。他们将小鼠胚胎心肌细胞移植到正常小鼠心脏中,发现移植的心肌细胞能够存活并与受体心肌细胞产生闰盘连接。随后,各种干细胞用于心脏病治疗。干细胞移植成为心力衰竭治疗的一种新尝试。德国和香港两个研究小组曾利用心肌梗死患者自身骨髓干细胞修复其受损伤的心脏取得成功。另据报道,美国、德国、中国研究人员利用骨髓干细胞、或自体骨髓干细胞治疗心脏病或心肌梗死患者均取得重要进展。与此同时,在巴西有利用心脏病患者自体骨髓十细胞或血液干细胞注射到患者右心室,能促使新心肌和血管的形成,使患者得到治愈。 2干细胞概况 干细胞(bonemB_rrowstemcell,BMSC)是一类具有多向分化潜能的细胞,主要分为胚胎干细胞(ESC)和成体干细胞两大类。干细胞具有以下几点主要的细胞生物学特性:①具有自我更新及自我维持的能力。②具有多项分化的潜能,可以分化成心肌细胞、脂肪细胞和软骨细胞等。③干细胞的分裂能力可维持相当长的时间, ?通讯作者有的可持续终生。④具有生理性的更新能力。⑤干细胞的自我更新和分化需要特定的微环境,这个微环境能够提供一些因子维持干细胞的未分化状态,并能将诱导干细胞分化的因子排斥在外。 2.1胚胎干细胞胚胎干细胞是~种源于早期胚胎组织(4~5d)并能被诱导生成机体各种类型的细胞,具有自我更新能力的多能干细胞。有研究表明,将胚胎干细胞移植到梗死心肌后,7一12周可形成稳定的心肌结构,明显改善血液动力学,促使梗死区新生血管生成∞1但胚胎干细胞移植应用于临床还存在很多问题,比如胚胎干细胞免疫原性引起的免疫反应,移植带来的社会、伦理、法律、道德等问题。 2.2成体干细胞成体干细胞是未分化的细胞出现在已分化的特定组织中,能够自我更新产生由其来源的所有特定组织。目前用于移植的成体干细胞主要是骨髓干细胞(BMSC)。骨髓干细胞包括造血干细胞(HSCs)、间质干细胞(MSCs)和血管内皮祖细胞(EPCs)三大类细胞群。不同于胚胎干细胞,患者可将自身的骨髓干细胞用于移植治疗,从而避免了伦理方面的问题,由于它属于自身组织,也降低了免疫排斥反应的可能性。2.2.1造血干细胞造血干细胞是骨髓中发现最早的干细胞群。早在上个世纪50年代,临床就用骨髓移植的方法来治疗血液系统疾病。在此后相当长的时间里,人们一直认为造血干细胞只能分化成血细胞,但近几年的研究结果显示并非如此。Lagasse等Ho发现纯化后的造血干细胞在体内可分化为肝上皮实质细胞。Orlie等【51发现包含肝星状细胞(HSC)的¨n—e—kit+细胞群在大鼠体内可以转化成心肌细胞,而不含HSC的Lin—e—kit+细胞群则不能形成新生的心肌组织。这一结果表明骨髓造血干细胞可分化成心肌细胞。 2.2.2骨髓间充质干细胞1968年Friedenstein等在分离大鼠骨髓成骨细胞时,首次从骨髓基质中鉴定出一种非造血系成体多能干细胞,并证实这类细胞在体外能分化成各种间质细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞等,甚至能横向分化为神经细胞和神经胶质细胞,因此称之为MSCsoMSCs是中胚层来源的具有多向分化能力的干细胞,能实现自我更新和诱导分化。体外培养细胞呈贴壁生长特性;典型细胞集落呈放射状排列。免疫学检查MSCs不表达CD34、CD45、CDl4等造血细胞的标记;而表达为CD29、CD73、CDgO、CDl05、CDl66等。骨髓中MSCs含量很低,一般为0.00l%一 万方数据

骨髓基质干细胞及其应用的研究进展(一)

骨髓基质干细胞及其应用的研究进展(一) 【摘要】骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),又称骨髓基质干细胞,是骨髓中非造血实质细胞的干细胞,具有高度的自我复制能力和多向分化潜能,可分化成多种细胞。【关键词】骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),又称骨髓基质干细胞,是骨髓中非造血实质细胞的干细胞,具有高度的自我复制能力和多向分化潜能,可分化成多种细胞。近来研究表明它可以向三个胚层的多种组织分化,如来源于外胚层的神经元、神经胶质细胞等,MSCs移植为脑缺血患者开辟了一种新的治疗方法。本文对MSCs移植治疗脑缺血的研究综述。 1骨髓基质细胞的生物学特性 1.1目前发现至少存在3种形态的MSCs。Colter等从培养的人骨髓细胞中分离出MSCs后,发现来自单细胞的克隆中除了含有小的梭形和大的扁平MSCs外,还有一种非常小的圆形细胞,这种小圆形细胞有更强的折光性,它们比大的MSCs能更快分裂、增殖,并且有更强的多向分化潜能,当将MSCs放在不同的微环境内时,它们可相应地分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞或成肌细胞等1-3]。MSCs具有多向分化的潜能,MSCs经静脉途径或局部注射移植到不同的组织时,MSCs即可在相应的组织内分化形成该类组织细胞3,4]。 1.2MSCs的易粘附、易贴壁生长,易增殖特性使得它们经过数次换液和传代后得到分离、纯化3]。 2骨髓基质细胞在体外诱导分化为神经元和胶质细胞 最近研究发现,在特定的实验条件下可将人、大鼠及小鼠等的MSCs在体外诱导分化为神经元样和胶质细胞样细胞,SanchozRamos等发现,表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)或脑源性营养因子(brain-derivedneuotroficfactor,BDNF)可诱导人及小鼠的少数MSCs分化为神经元样及胶质细胞样细胞,它们表达神经前体细胞的标志物巢素蛋白(nestin)及其RNA、神经元标记物神经元特异性核蛋白(neuronspecificnuclearprotein,NeuN)、星形胶质细胞标记物胶质原纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)。将人或小鼠的MSCs与胚胎大鼠中脑或纹状体神经元共培养时,部分MSCs分化为NeuN阳性的神经元样细胞及GFAP阳性的星形胶质细胞样细胞,因此,除了可能通过营养因子和细胞因子传递信号外,细胞与细胞的直接接触还可能在MSCs的分化中发挥重要作用5]。 3MSCS移植治疗局灶性脑缺血的可行性及原理 3.1供体与受体 MSCs移植治疗脑缺血多为同种异体移植,如Brazelton等6]采用的供体鼠为成熟转基因大鼠,鼠龄8~10w,受体鼠为致死量放疗后的相同鼠龄的大鼠,移植的为新鲜未经培养的MSCs。有些学者将供体鼠化疗(5-氟尿嘧啶,150mg/kg,腹部注射)2d后取其骨髓进行体外培养3代,移植前72h加BrdU进行标记,受体鼠亦为相同鼠龄相同体重的同种鼠7]。Zhao等8]的研究中,hMSCs来自于10~35岁的健康志愿者,hMSCs转染了增强的绿色荧光蛋白基因,经26代培养后移植入成熟雄鼠体重(230~250g),结果未出现免疫排斥反应,说明MSCs具有相当大的免疫反应调节能力。上述研究中,或是供体经化疗或是受体经放疗或是MSCs经多次传代培养以降低免疫活性,从而减少移植物抗宿主反应的发生。 3.2MSCs在脑内有迁移能力 Kopen等将小鼠MSCs注入新生小鼠侧脑室后12d,发现MSCs已迁移至前脑、小脑,而且不破坏脑组织结构,其迁移方式与出生后早期的神经发育过程相同,提示MSCs的行为类似神经前体细胞9]。 3.3目前MSCs移植治疗局灶性脑缺血的途径有3种:脑立体定向移植,经颈内动脉注射移植及经静脉注射移植

干细胞治疗的现状及发展前景

关于干细胞治疗的现状及发展前景 之前看了一个视频,关于干细胞用于治疗有身体残疾的人使病人获得活动的能力,于是就对干细胞的治疗产生了兴趣,作为一个讨论的课题拓展了一下关于干细胞治疗现状及发展前景的报告。 干细胞的概述: 关于干细胞治疗,那什么是干细胞?干细胞干细胞作为一类未分化的细胞或原始细胞,是具有自我复制能力、能够分化成为至少一种功能细胞的早期未分化细胞;在一定条件下,干细胞可以定向分化成机体内的功能细胞,形成任何类型的组织和器官。 干细胞分三大类:全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。 1.全能干细胞是指具有无限分化潜能,能分化成所有组织和器官的干细胞。换句话说,也就是具有形成完整个体分化潜能。胚胎干细胞就属于这一种。 2.多能干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能,但失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定的限制。骨髓多能造血干细胞是典型的例子,它可分化出至少十二种血细胞,但不能分化出造血系统以外的其它细胞。 3.多能干细胞进一步分化成专能干细胞,专能干细胞只能分化成某一类型的细胞。。比如神经干细胞,可以分化成各类神经细胞;造血干细胞,可以分化成红细胞、白细胞等各类血细胞。 干细胞治疗的原理及方法: 原理:疾病发生的原理是细胞或组织变性、死亡,功能减弱或丧失,从而出现疾病。干细胞具有能够分裂增殖和向多种细胞分化的生物学特性及能力。所以,通过干细胞移植来替代、修复患者损失的细胞,恢复细胞组织功能,达到治疗疾病的目标。 干细胞可以分化成各种细胞,具有“可塑性”,因此又被称为“源泉细胞”、“万能细胞”。利用神经干细胞,可以治疗帕金森氏症、老年性痴呆、脊髓侧索硬化及外伤所致的脊髓损伤、中枢神经系统肿瘤等;胰腺干细胞,可以治疗糖尿病;肝脏干细胞,可以治疗慢性肝炎;角膜干细胞,可以重建眼表甚至再造角膜等。通常认为,干细胞最适合治疗的疾病主要是组织坏死性疾病,如缺血引起的心肌坏死、退行性病变如帕金森氏症,自体免疫性疾病如胰岛素依赖型糖尿病等。 方法:常用的有六种途径:介入途径、局部种植、静脉途径、腰穿途径、头部立体定向颅内干细胞移植、CT 引导下脊髓内干细胞移植。干细胞治疗疾病每个疗程治疗4-6次,每次治疗间隔5-7天,原则上每个疗程间隔的时间是3-6个月,疗效明显可视病情连续做2-3个疗程。(本段资料来自百度百科) 干细胞治疗的现状: 既然干细胞有如此强大的医疗功效,那发展现状是如何的呢?就拿中国来说,中国干细胞的研究仍在发展阶段,虽发展时间较短,由于其他国家的政策控制,中国的治疗手段还是相对其他国家成熟,也使用干细胞为不少患者带来了福音,而且多家机构已投入治疗和使用。国内首家自体脐血干细胞库于2001年在天津建立,从此第一个干细胞的应用试验田开始了,其实对于干细胞用于治疗,早在20世纪50年代就开始了,当时医生已经开始在临床治疗中应用干细胞了,这就是人们所熟知的利用骨髓移植来治疗血液系统疾病,其主要成分就是干细胞大家族中的一分子——造血干细胞。

骨髓和造血干细胞区别

骨髓和造血干细胞区别 文章目录*一、骨髓和造血干细胞区别*二、造血干细胞的采集方式*三、造血干细胞移植适应证 骨髓和造血干细胞区别1、骨髓和造血干细胞区别 骨髓是人体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年人的 骨髓分为红骨髓和黄骨髓。人出生时,红骨髓充满全身骨髓腔, 随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最 后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。 红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些 淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。 造血干细胞,是血液系统中的成体干细胞,是一个异质性的 群体,具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞,对研究各类干 细胞,包括肿瘤干细胞,具有重要指导意义。 临床治疗中,造血干细胞移植广泛应用于血液系统疾病以及 自身免疫疾病,在其它实体瘤的治疗中,比如淋巴瘤,生殖细胞瘤,乳腺癌,小细胞肺癌,主要应用于常规治疗失败或复发难治以及 具有不良预后因素的患者。

2、骨髓的配型成功机率 如果在骨髓库中要找到合适的骨髓配型,几率非常低,只有 几万分之一,甚至更低,然而,如果能够找到患者的亲生父母或兄弟姐妹,那么,配型成功的几率最少有四分之一,甚至二分之一。 在选择适合的供体时,首先从在兄弟姐妹中选择供髓者;如 不成,则在近亲及血缘无关的自愿者中寻找供髓者。 3、骨髓配型过程 抽静脉血(在手臂)4ml,同是抽患者的静脉血4ml,送到可以做DNA检查的实验室,提取你和患者血液中白细胞的DNA,进行扩增电泳,比较你的DNA和患者的DNA有多少是相同的,相同的越多,配型越合。 目前不做所有的基因比较,只检测6个基因。分别是 HLA-A,B,C,DR,DQ,DP位点。 如果你找到和自己匹配的骨髓配型,那已经是很幸运的了。作为白血病患者,我们要让自己的情绪保持稳定,最忌出现悲观 消极的情绪,这样对于手术是极为不利的。 造血干细胞的采集方式造血干细胞的采集方式有两种: 一是抽取骨髓造血干细胞,即以前大家比较熟悉的捐献骨髓,方法是对捐献者进行局麻或全身麻醉,通过骨髓穿刺从捐献者的髂骨上抽取骨髓液数百毫升,然后如同输血一样,以点滴的方式

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