有机酸检测方法

甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苯乙酸、阿魏酸

甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、

仪器与设备

waters2695 Alliance SeparationsModule高效液相色谱仪;waters2996 PhatadiodeArray二极管阵列检测器;Heraeus离心机;HORIBApH计。

色谱分析

(1)混标配置。分别准确称取适量上述10种有机酸并用超纯水溶解或稀释,以孔径0. 45μm 的微孔滤膜过滤,转移至50mL容量瓶中,定容,配制浓度为100mg/L的储备液,保存于4℃冰箱中。

(2)标准曲线绘制。有机酸标准液的配置:根据紫外吸收灵敏度,将草酸、酒石酸、苹果酸、甲酸、丙二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸按照0. 2∶2. 5∶5∶5∶5∶2. 5∶5∶5∶5∶5的比例配制混标,逐级稀释,配制成A、B、C、D、E五个浓度级别的标准溶液,以绘制标准曲线。其中A级别标准溶液浓度为0. 2; 2. 5, 5, 5, 5, 2. 5, 5, 5, 5, 5(μg/mL);B、C、D分别为上一个级别浓度的5倍稀释,E级为D级的2倍稀释。并将这10中有机酸编号为:OA01-OA10。

(3)色谱条件。反相C18柱CAPCellPAK C18MG 4. 6mm×250mm, 5um, pH范围: 2~10,流动相: 0. 1%H3PO4的去离子水和乙腈(V/V)98∶2;检测器波长: 210nm;流速: 1mL/min;进样量: 20u;l柱温: 35℃;

(4)流动相配置。取1mLH3PO4用超纯水稀释至1000mL,经孔径为0. 45μm的微孔滤膜过滤,超声脱气后备用。乙腈(色谱纯)超声脱气备用。

阿魏酸

阿魏酸的测定:称取风干样品1.0000g置50ml量瓶中，加入乙酸乙酯约45ml，超声处理30min 并静置过夜，加乙酸乙酯到刻度，摇匀，过滤，吸取滤液25ml水浴蒸干，残渣加甲酸溶解并移入10ml容量瓶，定容之后用荧光分析仪测定。

实验仪器

KQ-360DE型数控超声波清洗器、玻璃仪器烘干器、TDI5-WS多管架自动离心机、电子天平、RF-540荧光分光光度计。

实验药品

乙醇、乙酸乙酯、1%碳酸氢钠、2%碳酸钠等试剂均为分析纯,水为亚沸高纯去离子水,阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号: 0773-9910)。

激发波长和发射波长的选择

精密称取阿魏酸对照品12. 00 mg,置100 mL容量瓶中,加2%碳酸钠溶解,室温下对不同浓度的阿魏酸对照溶液在200-600 nm波长范围内进行激发波长扫描,阿魏酸的最大激发波长(λex)为343 nm,固定该激发波长,扫描得发射谱图,得到其发射波长(λem)为463 nm,且随着阿魏酸浓度的增加其波长没有偏移,荧光强度随着阿魏酸浓度的增加而增大,因此,选择该最大激发波长和最大发射波长(即λex/λem为343 nm/463 nm)作为后继测定的工作条件。

标准曲线

精密量取适量的阿魏酸对照品溶液,分别稀释成浓度为0. 3、0. 6、1. 2、1. 8、2. 4、3μg/mL标准溶液,选定激发波长和发射波长条件下,测定其荧光强度,以阿魏酸对照品溶液的浓度为横标轴(x),以荧光强度为纵坐标轴(y),得回归方程为y=19.469x +4·805 8,r=0.997,结果表明进样量在0. 3-3μg/mL范围内线性关系良好。

样品测定

精密称取当归药材0. 5 g,置具塞三角瓶中,加1%碳酸氢钠25mL,超声提取30min,离心10min,取上清,加稀盐酸调pH值至2-3,用乙酸乙酯10 mL萃取3次,取上清液合并为30 mL 乙酸乙酯液,再加2%碳酸钠20 mL,萃取3次[4]。取下层溶液用2%碳酸钠定容至100 mL,微孔滤膜滤过液取1 mL,加2%碳酸钠溶液稀释至10 mL。即作为供试品溶液

高效液相色谱法测定阿魏酸的含量

潘成学贾欣申小静

郑州大学药学院郑州市450052

· 23 ·

摘要目的建立妇科调经片q-阿魏酸含量测定方法：方法采用HPLC法，使用C。柱，流动相为甲醇

一0．1％磷酸溶液(30：70)，流速1．0 ml／min，紫外检测波长313 nm。结果阿魏酸线性范围0．0388—

0．3104 tzg，平均回收率97．16％：结论所建立的方法稳定可靠、灵敏、准确、简便，可用于该制剂的质量控制。

关键词妇科调经片阿魏酸HPLC

中图分类号：11927．2 文献标识码：A 文章编号：1672．3422(2005)18-0023-02

Determination of Content of Ferulic Acid by HPLC

PAN Chengxue，JIA Xin。SHEN Xiaojing

School of Pharmacy，Zhengz hou Universit)’，Zhengzhou，450052，China ABSTRACT Objective To establish a RP—HPLC method for determinating content of ferulic

acid in Fuketiaojing tablet．Methods The content was determined by HPLC．The analysis was carried

on C 1 8 column，the mobile phase was consisted of methanol一0．1％phosphoric acid(30：70)with

the flow rate at 1．Oml／min and the UV detection wavelength was at 3 1 3 nm．Results The linear re．

gression for Fuketiaojing tablet was over the range of 0．0388～0．3104 Ixg(r=0．9999)．The average

recovery rate of Fuketiaojing tablet was 97．16％(RSD =0．17％．n：5)．Conclusion This method

was sensitive，accurate，reproducible and exclusive．

KEY WoRDS Fuketiaojing tablet：Ferulic acid：HPLC

已有文献’ 采用高效液相色谱法对妇科调经

颗粒中芍药苷的含量测定的报道；对于妇科调经

片，文献一采用HPLC方法对阿魏酸进行了含量测

定，但采用的流动相为甲醇一1％冰醋酸(30：70)。

我们采用高效液相色谱法，对妇科调经片及其中

的药材当归、川I芎中阿魏酸进行含量测定。

1 仪器与试药

1．1 仪器高效液相色谱仪(P200II，大连依利特科学仪器有限公司生产)，UV200 11紫外可见波长检测器，ODS C。色谱柱，Echrom98色谱工作站。

1．2 试药阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号：773—9202)；妇科调经片(河南仲景保健药业有限公司)；甲醇为色谱纯；水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件与系统适用性试验ODS C。色

1 河南省人口和计划生育科学技术研究院郑州市450002谱柱(4．6 mm ×250 mm，5 m)；流动相：甲醇一0．1％磷酸溶液(30：70)；流速1．0 ml／min，柱温40℃，检测波长313 nm；进样量10 l。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于8000。

2．2 线性关系考察精密取阿魏酸对照品，分别制成浓度为3．88 g／ml、7．761xg／ml、15．52txg／ml、23．28 g／ml、31．041xg／ml的样品，进样量101xl，测定阿魏酸峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标(Y)，阿魏酸的进样量(x)为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程，Y=0．03126255X一0．2889704：(r=0．9999，n =5)，表明阿魏酸在0．0388～0．31041xg之问呈良好的线性关系。

2．3 精密度试验精密吸取同一对照品溶液10 ，重复进样5次，测定其峰面积积分值，结果其色谱峰的相对标准差为0．72％，表明其精密度良好。

2．4 样品含量测定

2．4．1 对照品溶液制备取阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每12．5oe／ml的溶液，即得。

2．4．2 供试品溶液的制备取装量差异项下本品同批次(040428)10片，除去包衣，研细，

混匀，取约l g，精密称定，分别置5O ml具塞锥形瓶中，精密加甲醇l5 ml，密塞，称定重量，超声处理60 rain，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，续滤液用微孔滤膜滤过，即得。

2．4．3 阳性对照品溶液的制备依据处方中的比例，按供试品溶液的制备方法制备缺当归和川芎的阳性对照溶液。结果经进样证明阴性无干扰。

2．4．4 样品含量测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各l0 l，进样，由峰面积计算阿魏酸的含量，同法制备并测定l0批中试产品，计算阿魏酸的含量，测定结果见表l。

表1 样品含量测定结果

2．4．5 稳定性试验精密吸取对照品溶液lO l，注入液相色谱仪，按0、2、4、6、8 h各测定1次阿魏酸峰面积，并计算阿魏酸含量，RSD=0．50％。

2．4．6 重现性试验取批号为040428的样品，按供试品溶液制备方法制备5份供试液，测定分别测定阿魏酸含量，其RSD=0．46％。

2．4．7 回收率试验取批号为040428的样品(阿魏酸含量81．841．zg／片)20片，精密称定重量：医药论坛杂志2005年9月第26卷第18期

7．0346g，平均片重0．3517g／片，研细，取0．5g，精密称定，共取5份，分别加入阿魏酸对照品适量，进样量l0 l，测定阿魏酸峰面积，计算阿魏酸含量，计算回收率，测定结果见表2。

表2 回收率测定结果

取样量(g)样品中含量加入量测得值回收率平均回收率RSD(％)

【g ( g ( g) (％) (‘ )

0．498l ll5．9 l20．0 232．34 97 03

0．50Il l16．6 l20．0 233．26 97．22

0．5158 120．0 l20．0 236．80 97．33 97．16 0．17

0．499l 116．1 l20 0 232．44 96 95

0 4974 l l 5 7 l 20 0 2 2 44 97 ，R

3 讨论

因当归、川芎中均含有阿魏酸，为保证制剂质量，我们对药材中当归和川芎中的阿魏酸含量也进行了测定。根据测定结果，拟定本品当归中阿魏酸含量不少于0．050％，川芎中阿魏酸含量不少于0．020％。

茶叶中有机酸的测试方法概述

茶叶中有机酸的测试方法概述 谭和平，叶善蓉，陈 丽，邹燕 （中国测试技术研究院，四川成都610021） 摘 要：针对茶叶中有机酸测定前处理分析测试条件等不统一，导致测试结果无可比性的问题，该文在参阅1907 年以来国内外关于茶叶中有机酸分析的30余篇文献的基础上，对茶叶中有机酸的分析方法做了较系统的归纳阐述，并对目前常用的分析方法包括高效液相色谱法、离子色谱法以及毛细管电泳色谱法等进行了评述，提出了茶叶中有机酸测定应进行标准化，以确保测试结果的可比性。 关键词：茶叶；有机酸；分析；高效液相色谱法；离子色谱法中图分类号：TS272；TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1672-4984（2008）06-0077-04 Determination Overview of organic acids in tea TAN He-ping ，YE Shan-rong ，CHEN Li ，ZOU Yan （National Institute of Measurement and Testing Technology ，Chengdu 610021，China ） Abstract ：The measurement results of organic acids in tea were incomparable for the different pre-treatments and test conditions.More than 30literatures since 1907about the organic acid determinations in tea had been consulted.And these determination methods of organic acids in tea were introduced in detail.The most general methods at present such as high performance liquid chromatography ，ion chromatography ，capillary electrophoresis ，and so on were emphasized.Based on which ，the determination method of organic acids in tea should be standardized to improve the comparability of the measurement results.Key words ：Tea ；Organic acids ；Analysis ；HPLC ；IC 收稿日期：2008-05-18；收到修改稿日期：2008-07-25基金来源：国家科技基础条件平台（2004DEA71180）作者简介：谭和平（1957-），男，重庆市人，研究员，主要从事 茶树生理生化研究。 第34卷第6期2008年11月中国测试技术 CHINA MEASUREMENT &TESTING TECHNOLOGY Vol.34No.6Nov.2008 1引言 茶叶中有机酸的种类较多，含量为干物质总量的3%左右。茶叶中的有机酸是香气和滋味的主要成分之一，并且参与茶树的新陈代谢，在生化反应 中常为糖类分解的中间产物。此外， 某些有机酸对茶多酚激活α-淀粉酶、胰蛋白酶酶活性具有协同效应[1]。因此有机酸的定性与定量分析对茶叶品质开 发有重要意义，在茶叶生产管理过程中必不可少。 本文就目前应用于茶叶中有机酸分析的主要方法作一综述。 2茶叶中有机酸的组成 广义地说，凡含有羧基（-COOH ）的有机化合物 都可以叫做有机酸。然而从茶叶的化学成分和实际测定观点来说，某些有机酸已各有归属。例如氨基酸为蛋白质的基本组成而自成一类；抗坏血酸是一 种维生素；没食子酸和绿原酸可划归多酚类；而乙 酸、 丙酸、丁酸以及己烯酸则属于挥发性化合物。于是茶叶中所论有机酸，通常指以下两类：一是二元羧酸和羟基多元羧酸（在分子中含有两个或多个羧 基），如琥珀酸、 苹果酸、柠檬酸等；二是环状结构脂肪酸，如奎尼酸、 莽草酸等[2-3]。据文献报道，茶叶（汤）中经发现的有机酸有40余种。其中，茶汤中的有机酸有10余种，香气成分中的有机酸有30余 种。有些有机酸如亚油酸本身虽无香气， 但经氧化后可转化为香气成分；有些有机酸是香气成分的良好吸附剂，如棕榈酸等。 3茶叶中有机酸的分析方法 关于茶叶中有机酸分析的研究报道还不是很多， 已有报道的方法有滴定法、原子吸收法、气相色谱法、高效液相色谱法、离子色谱法、毛细管电泳法等。3.1滴定法 滴定法包括酸碱滴定法、电位滴定法等，常用于有机酸总量的测定。酸碱滴定法一般根据酸碱指

分析化学 实验二 有机酸含量的测定

实验二有机酸含量的测定 重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定。 难点：滴定终点的判断及掌握。 一、实验目的 1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择 2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择 二、实验原理 1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。根据NaOH标准溶液的浓度c和消耗的体积V计算该有机酸的含量： 2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下： 反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。 邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。 三、仪器和试剂 邻苯二甲酸氢钾（KHP）分析纯；酚酞2g·L-1乙醇溶液；NaOH分析纯；有机酸试样。 电子天平；细口试剂瓶；容量瓶（100mL）；移液管（25mL）；碱式滴定管；锥形瓶（250mL）。 四、实验内容 1. 0.1mol/L NaOH溶液的配制 在台秤上取约2g固体NaOH(用小烧杯称取),另用大量筒量取500mL去离子水，倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。 2. 0.1mol/L NaOH溶液的标定： 准确称取三份0.5-0.6g邻苯二甲酸氢钾分别于250mL的锥形瓶中，加20-30mL水溶解，加2滴酚酞指示剂，用NaOH溶液滴定至淡粉色即为终点。平行滴定3次，计算NaOH溶液的浓度。 3.有机酸试样的测定： 准确称取有机酸样品3.0-4.0g，置于小烧杯中，加入适量水溶解。然后定量地转入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 用移液管取有机酸溶液25.00mL, 加酚酞指示剂1-2滴，用NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色，即为终点。记下NaOH用量，平行测定三份，计算有机酸试样的含量。 五、数据记录及处理

有机酸检测方法

甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苯乙酸、阿魏酸 甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、 仪器与设备 waters2695 Alliance SeparationsModule高效液相色谱仪;waters2996 PhatadiodeArray二极管阵列检测器;Heraeus离心机;HORIBApH计。 色谱分析 (1)混标配置。分别准确称取适量上述10种有机酸并用超纯水溶解或稀释,以孔径0. 45μm 的微孔滤膜过滤,转移至50mL容量瓶中,定容,配制浓度为100mg/L的储备液,保存于4℃冰箱中。 (2)标准曲线绘制。有机酸标准液的配置:根据紫外吸收灵敏度,将草酸、酒石酸、苹果酸、甲酸、丙二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸按照0. 2∶2. 5∶5∶5∶5∶2. 5∶5∶5∶5∶5的比例配制混标,逐级稀释,配制成A、B、C、D、E五个浓度级别的标准溶液,以绘制标准曲线。其中A级别标准溶液浓度为0. 2; 2. 5, 5, 5, 5, 2. 5, 5, 5, 5, 5(μg/mL);B、C、D分别为上一个级别浓度的5倍稀释,E级为D级的2倍稀释。并将这10中有机酸编号为:OA01-OA10。 (3)色谱条件。反相C18柱CAPCellPAK C18MG 4. 6mm×250mm, 5um, pH范围: 2~10,流动相: 0. 1%H3PO4的去离子水和乙腈(V/V)98∶2;检测器波长: 210nm;流速: 1mL/min;进样量: 20u;l柱温: 35℃; (4)流动相配置。取1mLH3PO4用超纯水稀释至1000mL,经孔径为0. 45μm的微孔滤膜过滤,超声脱气后备用。乙腈(色谱纯)超声脱气备用。

实验四柠檬酸含量的测定

实验四 柠檬酸含量的测定 实验目的 1．掌握配制和标定NaOH 标准溶液的方法。 2．进一步熟练滴定管的操作方法。 3．掌握柠檬酸含量测定的原理和方法。 主要试剂和仪器 仪器：4F 滴定管；锥形瓶；容量瓶；移液管（25mL ）；烧杯；洗瓶。 试剂：邻苯二甲酸氢钾（基准物质，100-1250C 干燥1小时，然后放入干燥器内冷却后备用）；NaOH 固体；柠檬酸试样；%酚酞乙醇溶液。 实验原理 大多数有机酸是固体弱酸，如果有机酸能溶于水，且解离常数Ka ≥10-7，可称取一定量的试样，溶于水后用NaOH 标准溶液滴定，滴定突跃在弱碱性范围内，常选用酚酞为指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即为终点。根据NaOH 标准溶液的浓度c 和滴定时所消耗的体积V 及称取有机酸的质量，计算有机酸的含量。 n n 1 (H A) (H A)100% 1000 c V M n m ω??=??样 有机酸试样通常有柠檬酸，草酸, 酒石酸, 乙酰水杨酸, 苯甲酸等。滴定产物是强碱弱酸盐,滴定突跃在碱性范围内,可选用酚酞为指示剂。用NaOH 标准溶液滴定至溶液呈粉红色(30s 不褪色)为终点。 实验步骤 1． mol ·L -1 NaOH 溶液的配制及标定

mol·L-1 NaOH溶液的配制同实验一。 准确称取 g邻苯二甲酸氢钾，置于250 mL 锥形瓶中，加入20-30 mL水，微热使其完全溶解。待溶液冷却后，加入2-3 滴%酚酞指示剂，用待标定的NaOH 溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟内不褪色，即为终点（如果较长时间微红色慢慢褪去，是由于溶液吸收了空气中的二氧化碳所致），记录所消耗NaOH溶液的体积。平行测定3次。 2.柠檬酸试样含量的测定 用分析天平采用差减法准确称取柠檬酸试样约，置于小烧杯中，加入适量水溶解，定量转入250mL容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀。 用25mL移液管移取上述试液于250mL锥形瓶中，加入酚酞指示剂1～2滴，用NaOH标准溶液滴至溶液呈微红色，保持30秒不褪色，即为终点。记下所消耗NaOH溶液体积，计算柠檬酸质量分数。如此平行测定3次，相关数据填入表2中。 实验数据记录及处理 写出有关公式，将实验数据和计算结果填入表1和2。根据记录的实验数据分别计算出NaOH溶液的准确浓度和柠檬酸的质量分数，并计算三次测定结果的相对标准偏差。对标定结果要求相对标准偏差小于%，对测定结果要求相对标准偏差小于%。 表1 邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠

NaOH的标定 有机酸摩尔质量的测定

第六周实验（第二次） 班级：姓名：学号：实验时间： 一、NaOH的标定 一、实验目的 （1）进一步练习滴定操作。 （2）学习酸碱标准溶液浓度的标定方法。 二、简要原理 NaOH标准溶液是采用间接法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。NaOH标准溶液的标定用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4简写为KHP）为基准物质，酚酞作指示剂。 三、仪器与试剂 0.1mol/L NaOH标准溶液邻苯二甲酸氢钾酚酞指示剂 四、实验步骤 在分析天平上用差减法准确称取邻苯二甲酸氢钾0.4-0.6g三份，分别置于三个已编号的250mL锥形瓶中，加入50mL去离子水，摇动使之溶解。加入2滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液滴定，溶液由无色至微红色半分钟不褪，即为终点。 五、数据记录及处理

五、思考题 1、如何计算称取基准物质邻苯二甲酸氢钾的质量范围？ 答：根据消耗的标准溶液的体积在20---30mL，来计算基准物质的质量范围。的大多，一方面浪费，另一方面,称的太多，消耗的标准溶液的将会超过滴定管的最大体积, 造成误差；消耗的标准溶液的体积太少,测量误差太大。 2、标定NaOH溶液浓度时称量KHC8H4O4需不需要十分准确？溶解时加水量要不要十分准确？为什么？ 答：标定溶液浓度时称量不需要准确测量KHC8H4O4的质量，因为公式中KHC8H4O4的质量是实际称得的质量，称量在0.5000±0.0500范围内都是允许的。 溶解时加水量也不需要十分准确，因为计算需要的是它的质量，与溶解时的加水量无关，所以加水量不需十分准确。 3、用KHP标定NaOH溶液时为什么用酚酞而不用甲基橙作指示剂？ 答：邻苯二甲酸氢钾相当于弱酸，与氢氧化钠反应后生成的产物是邻本二甲酸二钾，若正好中合，则弱酸强碱盐溶液呈碱性；而甲基橙的变色范围是3.1-4.4，变色发生在酸性溶液中，无法指示碱性溶液，也就是无法指示反应的终点。 4、如果用NaOH标准溶液在保存过程中吸收了空气中的CO2,用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为,对结果有什么影响? 答：1.吸收二氧化碳,溶液中有碳酸钠，果以甲基橙为指示剂,刚开始的颜色是红色,终点是橙色,ph在3.1-4.4之间,盐酸稍过量.这种情况下碳酸钠也会被反应成氯化钠,应该没有影响.如果以酚酞为指示剂,刚开始无色,终点红色,ph在8-10之间,碱过量.这种情况下,碳酸钠会被反应成碳酸氢钠,相当于有一部分氢氧化钠没有参与反应,消耗的氢氧化钠体积变大,结果偏大.首先,从理论上来讲,吸收了空气中的CO2会生成碳酸钠,用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为指示剂,对结果没有什么影响.因为氢氧化钠之前吸收了二氧化碳,与盐酸反应后又完全释放出来,所以摩尔比是一样的.但是,如果用酚酞作指示剂,结果还是有影响的,结果应该偏高.因为吸性的二氧化碳相当于是吸收了碳酸,在滴定盐酸时,滴到酚酞变色时,二氧化碳不能完全释放出来,碳酸钠只生成了碳酸氢钠,而不会生成氯化钠,所以会造成结果的偏差.而从实际上来讲,如果装氢氧化钠瓶子的密封性很好,氢氧化钠最多也只吸收了瓶内空隙那微量的二氧化碳,对分析结果的影响可以忽略不计了,但如果吸收了外面的二氧化碳,那可想而知,和外面空气接触时,氢氧化钠标液中的水份也不知道挥发了多少,这样一来,结果的准确度就不好说了.

挥发性有机酸测定方法oc

网友推荐答案 挥发性脂肪酸（VFA）的测定 挥发性脂肪酸是厌氧消化过程的重要中间产物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。但CO 2和H 2生成也经过高分子有机物形成VFA的中间过程。由此看来，形成甲烷的过程离不开VFA的形成，但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA（例如乙酸）浓度对甲烷菌有抑制作用。因此在反应器运行中，出水VFA用作重要的控制指标。 在VFA测定中，常进行VFA总量测定，其单位异mmol/L或换算为按乙酸计，以单位mg/L表示。 VFA包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸以及它们的异构体。在运转良好的高速厌氧反应器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但是当反应器运行状态不好时，丙，丁酸浓度会上升。 滴定法分析 1．原理：将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH溶液滴定馏出液。废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。 2．药品 1) 10% NaOH 溶液； 2) NAOH标准溶液，0.1000mol/L; 3) 10%磷酸溶液，取70ml密度1.7g/cm3的磷酸用水稀释至1L; 酚酞指示剂，1%的乙醇溶液。 3．测定步骤 蒸馏瓶中放入50ml待测废水，其VFA含量不超过30mmol.放入几滴酚酞指示剂。 加入10% NaOH溶液，使溶解呈碱性，并使NaOH略过量。 蒸馏至蒸馏瓶中剩余液体为50~60ml为止。 用蒸馏水将蒸馏瓶中的剩余液体稀释至原来体积，用10ml 10%的磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸馏水并使接收瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入接收瓶的液面以下。蒸馏至瓶中液体为15~20ml为止。待蒸馏瓶冷却以后，加入50ml蒸馏水再次蒸馏，至10~20ml液体为止。 加入10滴酚酞，用NaOH标准溶液滴定至淡粉色不消失为止。 4．计算 挥发性脂肪酸含量计算如下： VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L) 式中：V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积，ml; c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度，mol/L; Vs--------被测废水水样的体积，ml.

果蔬中有机酸的测定

实验水果、蔬菜中总酸的测定 （学号：030212011031，030212011026 李欣钰和郎琳） 【实验目的】 1、利用标准液滴定水果蔬菜，测定不同水果蔬菜中总酸度 2、练习利用滴定管滴定溶液 3、练习移液管的使用 4、练习pH计的使用 【实验原理】 1、水果和蔬菜中含有各种不同的有机酸，主要为苹果酸，柠檬酸，酒石酸，草酸等。果树的种类不同，含有机酸的种类和数量也不同。果汁或菜汁的酸性取决于游离态的酸或酸式盐的存在数量。这些算都是有机弱酸，所以在测定时，有氢氧化钠标准溶液滴定就能测出酸度。这样测得的数据是总酸度，包含了未离解酸和已离解酸的浓度。用下式计算： 总酸度（%）=（V 样/W 样 ）x（V NaOH xc NaOH x折算系数/V取样）x100 式子中V样为样品稀释总体积；V取样为滴定时取样体积；W样为样品的质量。折算系数为不同有机酸的毫摩尔质量 2、食品中的总算度往往根据算韩算的不同，而取其中某种主要有机酸计量。食品中常见的有机酸及其毫摩尔质量折算系数如下 苹果酸——0.067（苹果，梨，西红柿） 酒石酸——0.075(葡萄) 柠檬酸——0.090(柑橘类) 【仪器试剂】 烧杯（100ml）(3-5只)，洗耳球，移液管（25ml）,容量瓶（250ml）（3只），滤纸，铁架台，滴定管夹，碱式滴定管，玻璃棒，胶头滴管，电子天平，研钵，酚酞指示剂，NaOH标准溶液（约为0.2mol/l），西红柿，葡萄，橘子（自备），塑料袋若干（自备），小刀（自备） 【实验内容】 1．准确称取混合均匀磨碎的样品10g 2.转移到250ml容量瓶中，加纯水至刻度线，摇匀 3.吸取50ml溶液于锥形瓶中，加入两滴酚酞试剂 4.用NaOH标准溶液滴定溶液至淡红色，并且在30s内不退色，即到达终点。 5.记下所用的NaOH体积。重复测定三次取平均值。 6.利用同样的方法测定剩余的两种水果或蔬菜。并记录实验数据 7.用pH计测出样品稀释液的pH 8.处理实验数据，比较所测的西红柿，葡萄，橘子的总酸度的不同 实验数据处理表

分光光度法测定水溶液中的有机酸含量_图文(精)

第27卷第3期 2010年3月 应用化学 CHINESE JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY V01.27No.3 Mar.2010 分光光度法测定水溶液中的有机酸含量 牛金刚刈梁晓静钆6刘霞4.蒋生祥” (“中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室兰州730000;6中国科学院研究生院北京 摘要利用水溶液中的有机酸在高氯酸羟胺(HAP和Ⅳ,∥一二环己基碳酰亚胺(DCC存在的条件下生成的羟肟酸,以及羟肟酸在酸性高氯酸铁溶液中显色的性质,建立了一种分光光度测定水中有机酸含量的方法。对显色剂的酸度、浓度、加入体积、HAP和DCC的浓度、加入体积以及显色反应的温度、反应时间对吸光度的影响进行了考察。结果表明,该显色反应在反应条件:0.0687mol/L HAP 1.0mL、0.6mol/-L DCC 0.5mL、震荡均匀后室温下放置反应。15min、0.02mol/L酸性高氯酸铁溶液(高氯酸浓度o.3mol/L显色条件下具有最大的吸光度;并对正丁酸、正戊酸、苯甲酸进行了线性关系考察。结果表明,该检测方法具有仪器简单、操作方便、线性范围较宽、准确度高等优点,可用于那些不易从水溶液中萃取的有机酸的测定,也可用于液相色谱洗脱液中有机酸的测定。 关键词有机酸,.7、r,Ⅳ,一二环己基碳酰亚胺,高氯酸羟胺,羟肟酸,羟肟酸铁络合物,分光光度法 中图分类号:0655文献标识码:A 文章编号:1000-0518(201003-0342-05 DOI:10.3724/SP.J.1095.2010.90183

羟肟酸铁分光光度法测定水溶液中的酯类化合物已有较多报道¨“o,该方法是利用酯和羟胺反应生成羟肟酸,然后与三价铁反应得羟肟酸铁显色。在该方法的基础上,先将羧酸转化为相应的酯或酰氯,然后再按上述方法显色可测定无水溶液中的有机酸含量,由于该反应必须在无水条件下进行,并且反应步骤较多,操作繁琐,影响测定的准确度。Cetin等∞’利用水溶液中羧酸可以在羟胺和DCC‘的存在下一步反应生成羟肟酸,并和过量高氯酸铁反应生成紫红色的羟肟酸铁络合物的现象,采用分光光度法测定了药片中赖诺普利的含量,Kostic等∞3利用相同的原理测定了人造果汁中柠檬酸的含量。本文利用该方法原理,采用分光光度法测定水溶液中的有机酸含量,详细考察了不同的反应条件对吸光度的影响,给出了比色反应的最佳条件,并对不同种类的羧酸进行了线性考察。结果表明,该方法具有仪器简单、操作方便、线性范围较宽准确度高等优点,可以作为水溶液中有机酸检测方法。 1实验部分 1.1试剂和仪器 Ⅳ,Ⅳ’.二环己基碳酰亚胺(DCC购于国药集团化学试剂有限公司;高氯酸铁购于Alfa Aesar公司; 高氯酸羟胺(HAP自制"],以盐酸羟胺和高氯酸钠为原料,甲醇为反应介质60℃反应24h,取上层清液蒸干可得到白色晶体状的HAP。其它试剂均为分析纯试剂,实验用水为二次蒸馏水。721型可见分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司;Lambda 35型紫外可见分光光度计(德国柏琴公司。 1.2实验方法 o.02mol/L酸性高氯酸铁溶液(其中高氯酸的浓度为0.3mol/L。羧酸标准溶液:分别称取 0.125g正丁酸、正戊酸和苯甲酸用蒸馏水定容至25mL,得到浓度为 500mg/L的羧酸标准溶液。在 5mL容量瓶中准确移入0.5mL羧酸标准溶液或蒸馏水,依次加入0.0687mol/L HAP的甲醇溶液 1.0mL、0.6mol/L DCC的乙醇溶液 0.5mL震荡摇匀后,于室温下(25℃反应15min,最后加入 0.02mol/L酸性高氯酸铁溶液2mL,用乙醇定容至5.0mL,震荡摇匀后,用l CI'II比色皿以未加羧酸的溶液为参比溶液,于520nnl波长处测定吸光度值。

实验三 有机酸摩尔质量的测定

实验三有机酸摩尔质量的测定 一、实验目的与要求 1.掌握用基准物标定 NaOH 溶液浓度的方法。 2.了解有机酸摩尔质量测定的原理和方法。 二、实验原理 绝大多数有机酸为弱酸，它们和 NaOH 溶液的反应为： nNaOH + H n A = Na n A + nH2O 当有机酸的各级离解常数与浓度的乘积均大于 10-8时，有机酸中的氢均能被准确滴定。用酸碱滴定法，可以测得有机酸的摩尔质量。测定时，n值须已知。由于滴定产物是强碱弱酸盐，滴定突跃在碱性范围内，因此可选用酚酞作指示剂。 NaOH 不符合基准物的条件，必须用近似法配制，然后用基准物标定。本实验采用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）为基准物，酚酞为指示剂标定 NaOH 溶液的浓度，其反应式为： OH- + HC8H4O4- = C8H4O42- + H2O 三、仪器与试剂 NaOH、邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）、有机酸试样乙酰水杨酸（C9H8O4）、酚酞指示剂（0.2％乙醇溶液）、量筒(10mL)、烧杯、试剂瓶、滴定管(50mL)、锥形瓶(250mL)、移液管、容量瓶。 四、实验步骤 1. 0.10mol/L NaOH的配制 用直接称量法在台秤上称取2g NaOH于小烧杯中，溶解后，置于500ml戴橡皮塞的试剂瓶中稀至500ml摇匀。（需要定量吗？） 2. 0.10mol/L NaOH的标定 在称量瓶中用差减法平行称量邻苯二甲酸氢钾7份，每份约 0.4～0.6 g ，（分子式约204）分别倒入250 mL 锥形瓶中，加入 40～50 mL 水使之溶解，加入 1～2 滴酚酞指示荆，

用待标定的 NaOH 溶液滴定至呈现微红色，保持 30 秒内不褪色，即为终点。平行测定 3 次，计算 NaOH 溶液的浓度和相对平均偏差。

有机酸含量的测定 (2)

有机酸含量的测定 原理：有机酸大多系固体弱酸,如果它易溶于水,且符合弱酸的滴定条件(cK a ≥10-8），则可在水溶液中用标准碱溶液滴定，测得其含量.由于反应产物为弱酸的共轭碱，滴定突跃在弱碱性范围内，故常选用酚酞作指示剂。以草酸为例,滴定反应方程如下： Ｈ２C ２O 4＋2N ａOH=Na ２C 2O 4+2H2O 步骤: 1。 0.1 ｍｏｌ·Ｌ-1Na ＯH 溶液的配制 台秤称取ＮaOH 1.0g →２50mL 烧杯，加少量水搅动→溶解→加水稀释至200mL →试剂瓶，摇匀。 2。 0。1 m ｏl ·L —1ＮａO Ｈ浓度的标定 准确称取0.4～０.6g 邻苯二甲酸氢钾(ＫHC ８H 4O ４)3份→锥形瓶→加20~30ｍL 水→溶解→加1~2滴0。2%酚酞→NaO Ｈ滴定→微红色（半分钟不褪色）→终点。 记录数据： 浓度:844NaOH 844KHC H O KHC H O NaOH c M V = ＭKH Ｃ8H4O4=204.2ｇ·mol -1

相对平均偏差：NaOH 100%r d d c =?，而3 NaOH NaOH 113i d c c ==-∑ ３。 有机酸含量的测定 （1)准确称取草酸０。6~0。8ｇ→100ｍL 烧杯→加适量水溶解→定量转入１00mL 容量瓶,→用水稀释至刻度，摇匀． (2。）准确移取上述溶液２5.0０mL(３份)→锥形瓶→加酚酞1~2滴→NaO Ｈ滴定→微红色（半分钟不褪色)→终点。 含量:224 224 NaOH NaOH H C O H C O 100%25.0021000 100.0 c V M w m =??? M Ｈ2Ｃ２O4=９0。03ｇ·ｍol —1 相对平均偏差:224 H C O 100%r d d w = ?,而2242243 H C O H C O 1 13i d w w ==-∑

有机酸摩尔质量的测定

有机酸摩尔质量的测定 伍登磴 一、实验目的 1 . 学习有机酸摩尔质量的测定方法； 2 . 熟悉微量滴定操作； 3 . 了解基准物质KHP性质及应用。 二、实验原理 1 . 大多数有机酸是弱酸，在水中有一定溶解性； 2 . 若浓度0.1mol/L左右且cKa≥10-8，可用烧碱液滴定，滴定突跃范围弱碱性，选用酚酞指示剂，滴定终点为溶液显微红色； 3 . 多元酸应根据每级能否准确滴定及相邻两级能否分级滴定判别式判断计量关系； 4 . KHP纯度高、稳定、不吸水、摩尔质量大，干燥温度过高会脱水，可作为基准物质标定烧碱液。 三、试剂仪器 1 . 约0.1mol/L烧碱液； 2 . 100~125℃干燥后KHP； 3 . 2g/L酚酞乙醇溶液； 4 . 有机酸试剂； 5 . 常量滴定用仪器（50.00mL滴定管、25.00mL移液管、250mL容量瓶、250mL锥形瓶）； 6 . 微型滴定用仪器（3.000mL滴定管、2.00mL移液管、50.00mL容量瓶、25mL锥形瓶）。 四、实验步骤 1 . NaOH溶液的标定（常量法） 差减法称取KHP于250mL锥形瓶，加约50mL水溶解，加入2滴酚酞，用烧碱液滴定至溶液显微红色且30s不退色，记录所用KHP质量及烧碱液体积。 2 . 有机酸摩尔质量的测定（常量法） 准确称取有机酸样品于干燥小烧杯加水溶解，定量转入250mL容量瓶，定容。用25.00mL 移液管平行移取三份，分别放入250mL锥形瓶，加2滴酚酞，用烧碱液滴定至溶液刚好变粉红色且30s不退色，记录所用有机酸及烧碱液体积。 3 . NaOH溶液的标定（微型滴定） 准确称取KHP于干燥烧杯加水溶解，定量转入50mL容量瓶，定容。用2.00mL移液管平行移取三份，分别放入25mL锥形瓶，加1滴酚酞，用烧碱液滴定至溶液显微红色且30s 不退色，记录所用KHP质量及烧碱液体积。 4 . 有机酸摩尔质量的测定（微型滴定） 准确称取有机酸样品于干燥小烧杯加水溶解，定量转入50mL容量瓶，定容。用2.00mL 移液管平行移取三份，分别放入25mL锥形瓶，加1滴酚酞，用烧碱液滴定至溶液刚好变粉红色且30s不退色，记录所用有机酸及烧碱液体积。 五、数据记录

有机肥料中有机质含量的测定

有机肥料中有机质含量的测定——重铬酸钾容量法（NY-525-2002） 1、方法原理 用定量的重铬酸钾—硫酸溶液，在加热条件下，使有机肥料中的有机碳氧化，多余的重铬酸钾用硫酸亚铁溶液滴定，同时以二氧化硅为添加物作空白试验。根据氧化前后氧化剂消耗量，计算有机碳含量，乘以系数 1 . 7 2 4 ，为有机质含量。 2、试剂 （1）二氧化硅：粉末状。 （2）浓硫酸( p 4 ) 。 （3）重铬酸钾( K 2Cr 2 7 ) 标准溶液：c [ 1/6 (K 2 Cr 2 7 ) ] =1 mo l / L。 称取经过130℃烘3—4 h的重铬酸钾( 分析纯) ) 4 3 1 g , 溶解于400 mL 水中，必要时可加热溶解，冷却后，稀释定容至1升，摇匀备用。 （4）硫酸亚铁( FeSO 4) 标准溶液：c ( FeS0 4 ) = mo l / L 称取( F e S 0 4 · 7 H 2 0) (分析纯) ，加水和C( 1/2 H 2 S0 4 , ) =6mo l / L的硫酸30mL溶解，稀释定容到1L, 摇匀备用。此溶液的准确浓度以 /L 重铬酸钾标准溶液标定，现用现标定。 c ( FeS0 4 ) = mol/L标准溶液的标定：吸取重铬酸钾标准溶液20. 00mL 加人150mL三角瓶中，加浓硫酸3mL—5mL和2滴—3 滴邻啡哆琳指示剂，用硫酸亚铁标准溶液滴定。根据硫酸亚铁标准溶液滴定时的消耗量按式( ( 1 ) 计算其准确浓度： 式中: C1—重铬酸钾标准溶液的浓度，单位为摩尔每升( mo l / L ) ; V1—吸取重铬酸钾标准溶液的体积，单位为毫升( mL) ; V2—滴定时消耗硫酸亚铁标准溶液的体积，单位为毫升( m L)； （5）邻啡呷琳指示剂：称取硫酸亚铁和邻啡哆琳l. 4 85 g溶于100mL 水中，摇匀备用。 3、测定步骤

总酸的测定

总酸度的测定（滴定法） 一、原理 食品中的有机酸（弱酸）用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。用酚酞作指示剂，当滴定到终点（pH=8.2,指示剂显红色）时，根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总酸的含量。其反应式如下：RCOOH + NaOH→RCOONa +H2O 二、样品的处理与制备 1.固体样品 将样品适度粉碎过筛，混合均匀，取适量的样品，加入少量无二氧化碳的蒸馏水，将样品溶解到250ml容量瓶中，在75-80℃水浴上加热0.5小时（若是果脯类，则在沸水中加热1小时），冷却、定容，用干燥滤纸过滤，弃去初液，收集滤液备用。 2.含二氧化碳的饮料、酒类 将样品于45℃水浴上加热30min，除去二氧化碳，冷却后备用。3.调味品及不含二氧化碳饮料、酒类 将样品混合均匀后直接取样，必要时也可加适量水稀释，若混浊则需过滤。 4.咖啡样品 将样品粉碎经40目筛，取10g样于三角瓶，加75ml 80％乙醇，加塞放置16小时，并不时的摇动，过滤。 5.固体饮料 称取5g样品于研钵中，加入少量无CO2蒸馏水，研磨成糊状，用无

CO2蒸馏水移入250ml容量瓶中定容，摇匀后过滤。 三.样品滴定 准确吸取制备的滤液50ml，加入酚酞指示剂2-3滴，用0.1mol/L标准碱液滴定至微红色30秒不褪色，记录用量，同时做空白实验。以下式计算样品含酸量。 总酸度（%）=C×（V1－V2）×K ×V3×100 m V4 式中： C---标准氢氧化钠溶液的浓度mol/L V1---滴定所消耗标准碱液的体积ml V2 ---空白所消耗标准碱液的体积ml V3 ---样品稀释液总体积ml V4---滴定时吸取的样液的体积ml M---样品质量或体积（g或ml） K---换算为适当酸的系数，即1mol氢氧化钠相当于主要酸的克数因为食品中含有多种有机酸，总酸度测定结果通常以样品含量最多的那种酸表示。例如一般分析葡萄及其制品时，用酒石酸表示，其K=0.075；测柑橘类果实及其制品时，用柠檬酸表示，其K=0.064；分析苹果及其制品时，用苹果酸表示，其K =0.067；分析乳品、肉类、水产品及其制品时，用乳酸表示，其K=0.090；分析酒类、调味品，用乙酸表示，K=0.060。 四、注意事项： 1.样品浸泡，稀释用的蒸馏水中不含CO2，因为它溶于水生成酸性的

果蔬有机酸含量测定

果蔬有机酸含量的测定 植物材料中含有丰富的有机酸，如苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸等。利用酸碱滴定法测定果蔬中的可滴定酸含量，可以从风味及营养的角度衡量其品质。 重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定。 难点：滴定终点的判断及掌握。 一、实验目的 1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择。 2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择。 二、实验原理 1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。 2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下： 反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。 3. 在一定温度下，用蒸馏水或乙醇将植物材料中的有机酸浸提出来，用碱溶液滴定浸出液，即可计算出样品的可滴定酸含量。果实中的有机酸含量如柑橘类可换算成柠檬酸、葡萄可换算成酒石酸，苹果类可换算成苹果酸表示。 二、仪器设备 1. 天平 2. 250 mL三角瓶 3. 匀浆机（或研钵） 4. 恒温水浴锅 5. 低速离心机 （或漏斗） 6. 50mL离心管（或定性滤纸）7. 碱式滴定管8. 100 mL容量瓶9. 25mL移液管 三、试剂 1. 0.05 mol·L–1NaOH标准溶液：在天平上取约0.5g固体NaOH（可用干燥小烧杯称取），另用大量筒量取250mL去离子水（无CO2），倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。 以邻苯二甲酸氢钾（分析纯）标定其浓度：用万分之一的天平称取干燥过的邻苯二甲酸氢钾0.1250 g ~0.1500 g 3份，分别置250 mL 三角瓶中，用80 mL 无CO2水溶解，加酚酞指示剂2~3滴，用所配NaOH标准溶液滴定至微红色（大约15mL左右）。依下式计算NaOH 的准确浓度，求3份样品的平均值，结果保留至小数点后4位。 M = W V*0.2043 式中M ——NaOH标准溶液的浓度（mol·L–1）； W ——邻苯二甲酸氢钾的重量（g）； V ——滴定时所消耗NaOH溶液的体积（mL）； 0.2043 ——每毫摩尔邻苯二甲酸氢钾的重量（g）。 2. 1%酚酞指示剂：称取1 g 酚酞，溶解于100 m L 70%~90%乙醇中。 四、实验内容 1.将新鲜组织用匀浆机匀浆，称取匀浆5g于50mL离心管中，将35mL左右蒸馏水加入50mL离心管，于80℃恒温水浴中浸提30 min，其间不断摇匀。

有机酸测定

反相液相色法谱测定 10 种有机酸
马淑伟 郭亦如 杨定忠
（Agela Technologies 天津 300457）
摘要： 本文建立了一种利用高效液相色谱同时分析 10 种有机酸的方法， Venusil MP C18 (5μm 4.6 在
mm x 250 mm ) 色谱柱上,0.1mol/L K2HPO4(pH2.05 )溶液和乙腈做梯度洗脱,流速为 1.0mL/min,柱温为
30 ℃,紫外检测波长为 210nm 时,可以很较好地分离常见的 10 种有机酸。 关键词：反相液相色谱 有机酸
1
实验部分
1. 1 仪器与试剂
高效液相色谱系统:岛津LC-10A XMTG-8000 型柱温箱 酸度计(PHS-25) 分析纯磷酸、磷酸氢二钾(天津市化学试剂三厂)
1. 2 色谱条件
色谱柱: Venusil MP C18 (5μm,4.6mmi.d. ×250mm) 流 速:1.0mL/min
进样量:20μL 波 柱 长:210nm 温:30 ℃
流动相: 缓冲盐：13.6 克磷酸氢二甲溶解到 1000ml 水中，用磷酸调 pH=2.05，过滤； 梯度条件： 时间（min） 0 18 30 乙腈（%） 0 0 20 缓冲盐（%） 100 100 80
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2 结果与讨论 2. 1 检测波长的选定
用200～350nm (紫外) 光对10种有机酸的标准溶液进行扫描,结果表明10种有机酸均在210nm附近 有较大的吸收,重复性好,不受流动相中其他物质的干扰,故以下实验均采用210nm 波长进行检测。
2. 2 流动相浓度的选择
将流动相分别配成0.05 、0.10 、0.15 和0.20mol/L 的K2HPO4 溶液(用H3PO4 调pH 值为2.05 ) ,对 各有机酸进行分离。结果表明: 逐步增加流动相中磷酸盐的浓度,有机酸均能得到分离,且不影响分离效 果，但考虑到色谱柱的使用寿命，最终选定0.10 mol/L.
2. 3 流动相pH 值的选择
以不同pH 值(用H3PO4 调节)的0.10mol/L的K2HPO4溶液作流动相,测定各有机酸的保留时间,结果 显示流动相pH值对有机酸的分离影响很大。 综合考虑各有机酸间的分离度和色谱柱的pH范围， 选定2.05.
2. 4 分离条件的优化
以分离的影响因素流动相pH值、乙腈含量、流速和柱温做正交试验对分离条件进行优化，最终得 到优化条件：（1）由于丁酸保留太强所以选用梯度洗脱；（2）流速选用1.0ml/min；（3）柱温为30℃；
图1
10 种有机酸图谱
1 甲酸 2 丙酮酸 3 苹果酸 4 乳酸 5 乙酸 6 柠檬酸 7 琥珀酸 8 延胡索酸 9 丙酸 10 丁酸
2. 5 检测限、标准曲线、回收率
取同一果汁样品2 份,其中一份作本底,另一份添加一定量的10种有机酸标品溶液后测定各成分含量, 每份样品进行5 次平行测定,考察方法的回收率和精密度,以峰高A (mV) 对质量浓度C(mg/L) 求得线性 回归方程,以3 倍信噪比( S/ N ) 计算最小检测出限。
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有机酸含量的测定讲课稿

有机酸含量的测定

有机酸含量的测定 原理：有机酸大多系固体弱酸，如果它易溶于水，且符合弱酸的滴定条件（ CK a > 10-8），则可在水溶液中用标准碱溶液滴定，测得其含量。由于反应产物为弱 酸的共轭碱，滴定突跃在弱碱性范围内，故常选用酚酞作指示剂。以草酸为例，滴定反应方程如下: H2C2O4+2NaOH=Na2C2O4+2H2O 步骤: 1. 0.1 mol L-1NaOH溶液的配制 台秤称取NaOH I.Og-250mL烧杯，加少量水搅动-溶解-加水稀释至200mL T 试剂瓶，摇匀。 2. 0.1 mol L-1NaOH浓度的标定 准确称取0.4~0.6g邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）3份-锥形瓶-加20?30mL 水-溶解-加1~2滴0.2%酚酞-NaOH滴定-微红色（半分钟不褪色） 记录数据: 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2

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仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除 谢谢3 浓度：C NaOH m KHC g Hd 1000 M KHC 8H 4O 4V NaOH 1 M KHC8H4O4=204.2g mo 「 — d 相对平均偏差：d r — 100% , C NaOH C NaOH Ci NaOH 3.有机酸含量的测定 (1)准确称取草酸0.6~0.8尸100mL 烧杯-加适量水溶解-定量转入 100mL 容量瓶，-用水稀释至刻度，摇匀. (2.)准确移取上述溶液25.00mL (3份)-锥形瓶-加酚酞1~2滴-NaOH 滴定-微红色(半分钟不褪色)-终点。 记录数据: H 2C 2O 4 含量：w i C NaOH V NaOH M H 2C 2O 4 2m 25.00 100% 100.0 1000 1 M H2C2O4=90.03gmol 相对平均偏差：d r W H 2C 2O 4 100%, W H 2C 2O 4 W H 2C 2O 4

气相色谱法测定己酸菌发酵液中的己酸等有机酸含量

酿酒科技2018年第3期（总第285期）·LIQUOR -MAKING SCIENCE &TECHNOLOGY 2018No .3(Tol .285)DOI ：10.13746/j.njkj.2017166 基金项目：四川省科技计划项目《丢糟资源化利用技术开发与集成示范(重点)》（2017JY0110）。 收稿日期：2017-06-11作者简介：袁华伟(1967-)，男，四川安岳人，高级工程师，博士，主要研究方向为白酒微生物发酵，发表论文数篇。 通讯作者：胡永奇（1970-），男，四川阆中人，工程师，经济师，硕士，主要研究方向为白酒酿造，发表论文数篇。 优先数字出版时间：2018-01-11；地址：https://www.wendangku.net/doc/2111704810.html,/kcms/detail/52.1051.TS.20180111.1319.009.html 。气相色谱法测定己酸菌发酵液 中的己酸等有机酸含量 袁华伟1，2，3，杨泽刚1，兰著玺1，游玲1，刘光钱2，胡永奇2，3，王松涛2，3，沈才洪2， 3（1.宜宾学院生命科学与食品工程学院，四川宜宾644000； 2.泸州老窖股份有限公司，四川泸州646000； 3.国家固态酿造工程技术研究中心，四川泸州646000） 摘要：对气相色谱法测定己酸菌发酵液中己酸等有机酸含量的预处理方法进行了研究，优化了色谱 条件，建立了一种快速测定己酸菌发酵液中己酸、丁酸、乙酸等有机酸的方法。己酸菌发酵液经2M 硫 酸酸化至pH2后经高速冷冻离心，再经微孔滤膜过滤，利用Pure -WAX 毛细管色谱柱、以2-乙基丁酸为 内标、直接进样气相色谱法定量测定。色谱分析条件为：检测器温度260℃，汽化温度250℃，柱温 150℃，分流比50∶1，采样时间10min 。研究结果表明，应用该法测定己酸菌发酵液中的己酸、丁酸、乙 酸等有机酸含量，RSD 为2.22%～2.54%，加标回收率在96.83%～103.71%之间。该方法具有快速方 便、定量准确等特点，适合己酸菌发酵液中己酸、丁酸、乙酸等有机酸的检测。 关键词：己酸菌发酵液；己酸；气相色谱法；检测 中图分类号：TS262.3；TS261.7；TS261.4文献标识码：A 文章编号：1001-9286（2018）03-0102-04 Determination of Caproic Acid and Other Organic Acids in Fermented Liquid of Caproic Acid Bacteria by GC YUAN Huawei 1,2,3,YANG Zegang 1,LAN Zhuxi 1,YOU Ling 1,LIU Guangqian 2, HU Yongqi 2,3,WANG Songtao 2,3and SHEN Caihong 2,3 (1.College of Life Science and Food Engineering,Yibin University,Yibin,Sichuan 644000;2.Luzhou Laojiao Co.Ltd.,Luzhou,Sichuan 646000;3.National Engineering Technology Research Center of Solid-state Brewing,Luzhou,Sichuan 646000,China)Abstract :The pretreatment for measuring the content of caproic acid and other organic acids in fermented liquid of caproic acid bac-teria was studied.Firstly,the fermented liquid underwent 2M sulfuric acid acidification till pH=2,then through high-speed freeze cen-trifugation and micropore filtration,direct sampling GC using Pure-WAX capillary-column and 2-ethyl butyric acid as internal stan-dard was performed.The chromatographic conditions were as follows:the detector temperature was at 260℃,the vaporization tem-perature was at 250℃,the column temperature was at 150℃,the split ratio was 50∶1and the sampling time was 10min.The results showed that the content of caproic acid,butyric acid,acetic acid and other organic acids could be measured by such method,RSD was 2.22%to 2.54%,and standard addition recovery was 96.83%to 103.71%.This method had the advantages such as convenient,fast and accurate determination. Key words :caproic acid bacteria fermented liquid;caproic acid;gas chromatography;determination 白酒中的有机酸可以调节口味使酒体醇和爽 口，更主要的是酸类物质是形成相对应的乙酯类香 味成分的前体物质。不同的有机酸与醇在微生物酶的催化作用下，生成不同的酯，没有有机酸就没102