科研论文格式与范文1

自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研究

发表时间：2009-6-5 14:45:50 浏览次数：174 来源：中国创新医学网推荐

蔡文君，谭长强，李玉瑾，黄和，李霜

南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科暨耳鼻咽喉科学研究室，江苏南京 210029；南京工业大学生物

化学中心，江苏南京 210009

【摘要】目的：研究以重组复制缺陷型腺病毒为载体的Fas配体（Fas Ligand，即FasL）基因和白细胞介素10（即IL 10）基因治疗实验性自身免疫性感音神经性聋。方法：采用同种内耳组织抗原加弗氏佐剂免疫豚鼠，造成自身免疫性感音神经性聋的动物模型28只，按配对设计将其分为4组，通过鼓阶微量注射的方式，A组注入携带FasL基因的腺病毒（Ad FasL），B组注入携带IL 10基因的腺病毒（Ad IL 10），C组单纯注入腺病毒（携带绿色荧光蛋白，即Ad GFP），D组注入等量的磷酸盐缓冲液。基因导入7 d后行听觉脑干诱发电位（ABR）测试，后取颞骨制作石蜡切片并行HE染色和光镜观察，每组各取两耳行螺旋韧带和基底膜透射电镜观察。每组各取3只（6耳）行免疫荧光和酶免疫组织化学试验，以检测基因产物表达和腺病毒转染情况。结果：免疫组织化学显示携带目的基因的腺病毒可以转染血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节、蜗轴小血管周围及其耳蜗的骨壁等部位的细胞，并产生相应的蛋白产物（IL 10和FasL）。ABRⅢ波阈值的均值对比结果显示，A组和B组明显低于C组和D组。内耳组织的免疫炎性反应亦明显较C组减轻。结论：重组复制缺陷型腺病毒可以携带目的基因转导入内耳，并在内耳表达基因产物，其抑制炎症反应的作用可有效地减轻自身免疫性感音神经性聋的内耳组织免疫炎性损伤和听觉功能障碍，有望成为治疗自身免疫性感音神经性聋新的方法和途径。

【关键词】基因治疗；自身免疫性感音神经性聋；豚鼠

1979年McCabe依据其临床发现，即18例听力障碍患者经过免疫抑制治疗后听力有明显改善，提出了自身免疫性感音神经性聋(autoimmune sensorineural hearing loss，ASNHL)的概念。之后的进一步研究发现，自身免疫性损害不仅可累及耳蜗，还可波及前庭，故又提出了自身免疫性内耳病（autoimmune inner ear disease，AIED）［1 2］概念。目前ASNHL的病因和发病机制尚不十分清楚，临床缺乏特异性诊断方法，对于ASNHL患者的治疗亦存在着一些问题，主要是采用皮质激素或免疫抑制剂治疗，虽然疗效较快、较好，但该类药物毒副作用多，而且还存在停药后复发率较高等问题。

近年来随着分子生物学研究的深入和基因工程技术的进展，基因治疗已成为许多相关疾病治疗研究方面的热点和新希望。基因治疗是根据特定的治疗目的基因将DNA导入到宿主细胞中并在其中表达。1996年Lalwani等［3 4］报道了将基因导入动物内耳，以后关于内耳的基因治疗成为一个热点，并在载体选择、导入方法和安全性评估等方面取得了很大的进步。基因工程技术已能构建特异性载体，可携带治疗基因导入动物耳内，在动物内耳获得高效表达［4］，产生具有高度生物活性的稳定的基因产物，并且不产生病毒相关的耳毒性反应，这为基因治疗感音神经性聋提供了生物学证据。

目前因为复制缺陷性腺病毒载体具有病毒滴度高、转染效率高（100%）、宿主细胞范围广、外源基因容量大、稳定和无插入突变危险等特点，已经成为基因转导研究中应用最多的载体之一。Yagi等［5］将腺病毒携带的GDNF基因从圆窗膜注射入鼓阶，GDNF基因在蜗内得到表达并发挥作用。

基于上述研究状况和现有研究工作基础，本项目组拟将利用基因治疗的独特性和内耳可行局部治疗的独特解剖特点，对自身免疫性感音神经性聋模型动物进行内耳免疫抑制或调节基因的试验性治疗研究，以探讨其治疗效果和可能发生的副反应情况。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康成熟豚鼠，白色红目，体重300 g左右，耳廓反应正常，耳镜检查排除中耳疾患，所有动物均由南京青龙山养殖场提供。

1.2 内耳组织粗制抗原（crude inner ear antigens，CIEAgs）制备豚鼠CIEAgs制取方法参考文

献［4］，主要步骤：将豚鼠清醒断头，取出颞骨，快速打开听泡，在解剖显微镜下分离全膜迷路，包括基底膜、螺旋韧带、膜半规管、椭圆囊和球囊（祛除耳石器），放入0.01 mol·L-1 pH 7.4 PBS中，经研磨、冻溶、超声粉碎、匀浆、离心（1 000 r·min-1，5 min）后取上清液，采用紫外分光光度计测定蛋白含量，分装后低温干燥制成CIEAgs干粉备用，保存于-80 ℃冰箱。

1.3 ASNHL动物模型制备

首次免疫每只动物采用CIEAgs 400 mg·（0.4 ml）-1，加等量完全弗氏佐剂，注射于右后足垫；2周后以CIEAgs 200 mg·（0.4 ml）-1加等量不完全弗氏佐剂，注射于背部多点皮下；间隔2周后，再同样强化免疫1次。依据听觉诱发电位Ⅲ波的阈值升高（超过免疫前全部动物均值加2倍标准差）和出现针对CIEAgs特异性抗体（ELISA法，波长490 nm时A值超过免疫前全部动物均值加2倍标准差），判断为ASNHL模型动物制备成功［6］。

1.4 实验设计

ASNHL模型动物共28只，按配对设计分为4组，每组7只：A、B和C组分别向鼓阶内注入携带FasL基因的重组腺病毒(Ad FasL)、携带IL 10基因的重组腺病毒(Ad IL 10)和携带绿色荧光蛋白的腺病毒

(Ad GFP)；D组(即对照组)用同样方法仅向鼓阶内注射磷酸盐缓冲液。

1.5 重组基因载体鼓阶内注射

末次免疫后2周进行。豚鼠用1%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（30 mg·kg-1）后，在耳廓后方作一长3～4 cm弧形切口，显露听泡，用微型电钻打开听泡，暴露耳蜗底转，用针尖轻轻磨薄耳蜗鼓阶侧壁的骨壁，钻一针尖大小的孔，用微推进器将小儿头皮针的针尖（针尖斜面已打磨变小）插入鼓阶，深度不超过1 mm，先抽取少量（约10 μl）的外淋巴液，再用微量注射机将重组腺病毒或腺病毒液缓慢（1 μl·min-1）注入鼓阶，A组给予Ad FASL（病毒滴度为2.5×10 10 pfu·ml-1）20 μl，B组给予Ad IL 10（病毒滴度为1.0×108 pfu·ml-1）20 μl，C组给予AD GFP（病毒滴度为1.0×109 pfu·ml-1）20 μl，D组给予等量的磷酸盐缓冲液,骨蜡封闭耳蜗底转，抗生素冲洗中耳腔3次，部分局部放置氧氟沙星明胶海绵预防感染。骨蜡封闭听泡骨孔，逐层缝合伤口。所有操作应严格遵守无菌原则。

1.6 特异性免疫反应测试

采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定特异性抗体。分别于免疫前和末次免疫后2周进行。心脏采血，分离血清。用100 μg·ml-1的CIEAgs溶液包被ELISA板，于4 ℃过夜并封闭，加入1∶10稀释的豚鼠血清37 ℃下孵育2 h，洗板4次，加入1∶2 000稀释的辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A HRP，SPA HRP）37 ℃下孵育1 h，洗板4次，以邻苯二胺 过氧化氢溶液为底物显色10 min后用H2SO4终止显色，在酶标仪下测定波长为490 nm的吸光度A值。

1.7 听觉脑干诱发电位（auditory brain stem response，ABR）测试分别于免疫前、末次免疫后2周和鼓阶内注射后（1周），采用听觉诱发电位测试系统，豚鼠头顶冠状缝与矢状缝交界处插入针形电极作为测试电极，参考电极置于耳廓后方靠近乳突尖，接地电极置于对测乳突，刺激声信号采用Click，重复频率为11次·min-1，叠加2 048次，记录时程10 ms，测定Ⅲ波的阈值、潜伏期和波幅。

1.8 内耳光镜观察

各组听觉测试后各取3只豚鼠，麻醉后断头，立即取出颞骨，打开听泡，放置于4%多聚甲醛固定液中，12 h后换EDTA脱钙7～10 d，修剪后流水冲洗1～2 h，常规脱水、透明、浸蜡、定向包埋。耳蜗中轴切片，片厚5 μm，漂片、捞片、粘片，常规HE染色，封片，光镜观察。

1.9 免疫组织化学试验

1.9.1 内耳石蜡包埋各组于听觉测试后各取豚鼠3只，麻醉、断头，迅速取颞骨，打开听泡，放置于4%多聚甲醛固定液中，用针挑开圆窗，在蜗尖钻一小孔，快速灌注数次，固定12 h，采用EDTA脱钙7～10 d，修剪后流水冲洗1～2 h，常规脱水、透明、浸蜡、定向包埋。

1.9.2 免疫荧光化学试验将C组2只动物的颞骨蜡块行耳蜗中轴切片，片厚5 μm，漂片、捞片、粘片后常规脱蜡至水，在倒置荧光显微镜下观察和摄片。

1.9.3 酶免疫组织化学试验按上述方法获得切片，用胰酶（0.2%）修复抗原，余具体步骤：正常山

羊血清封闭10 min,加PBS稀释的第一抗体（A组加入兔抗鼠FASL，B组加入兔抗鼠IL 10，C、D组加入兔抗鼠FASL和兔抗鼠IL 10两种抗体），4 ℃过夜，PBS洗5 min×3次，加入HRP标记的SPA作为二抗，37 ℃孵育30 min，PBS洗5 min×3次，DAB染色，封片剂封片，光学显微镜观察摄片。以上试剂均购买自武汉博士德生物工程有限公司。

1.10 内耳透射电镜观察

各组听觉试验后各取1只豚鼠，麻醉后断头，迅速取出颞骨，经固定后取出全内耳膜迷路（螺旋韧带、血管纹），后固定、脱水、浸透、树脂定向包埋，聚合后修整包埋块，超薄切片，染色后透射电镜观察摄片。

2 结果

2.1 特异性免疫反应试验结果

见表1。结果显示：与免疫前相比，各实验组和对照组免疫后抗体水平均明显升高，差异有显著性（配对t检验，P＜0.05）。免疫前和免疫后的各组间对比，未显示有显著性差异（配对t检验，P＞0.05）。表1 各组血清中针对CIEAgs特异性抗体水平

2.2 听觉功能

以ARB的Ⅲ波反应阈作为评定听力水平的指标，结果见表2。与免疫前相比，免疫后各组ABR平均阈值升高，差异均有显著性（t检验，P＜0.05）。与内耳抗原免疫后相比，A组和B组内耳局部基因治疗后ABR 平均阈值降低，差异亦均有显著性（t检验，P＜0.05）；A组平均阈值降低更为明显，但与B组相比差异无显著性（t检验，P﹥0.05）。C组和D组内耳局部给药前后对比，差异无显著性。各组内同期左右耳对比差异均无显著性（t检验，P﹥0.05）。A组和B组分别以其免疫后的ABR平均阈值减2倍标准差作为判断治疗后听觉功能改善标准，A组有3只（5耳）、B组有2只（3耳）经局部基因治疗后听觉功能明显提高，治疗有效率分别为35.71%（5耳/14耳）和23.08%（3耳/13耳），B组1耳并发感染不计。同样分别以C组和D组免疫后的ABR平均阈值减2倍标准差作为判断治疗后听觉功能改善标准，内耳局部给药后，未发现有明显听力功能提高耳。表2 各组ABR测试结果

2.3 内耳光镜观察结果

见图1。C组和D组出现较为显著的内耳组织炎症反应，包括：出现Rosenthal管中炎症细胞（以单个细胞为主）浸润，螺旋神经节细胞变少，耳蜗顶回骨壁内及血管纹有散在的黄色含铁血黄素颗粒，部分动物蜗管或鼓阶内可见絮状物沉积，蜗管内出现“漂浮细胞”。Corti器和血管纹未见明显异常。A组和B组的炎症反应明显较C组和D组为轻，尤其是听觉功能改善耳，仅在蜗轴血管周围有部分单个核细胞浸润，但螺旋神经节细胞数基本正常，Corti器和血管纹未见明显异常。鼓阶内见部分絮状物，但未见“漂浮细胞”。

2.4 免疫组织化学试验

2.4.1 免疫荧光试验见图2。结果显示：C组见明显荧光显示的部位主要分布于耳蜗骨壁、骨螺旋板的蜗管内唇部、螺旋韧带和血管纹等部位。

2.4.2 酶免疫组织化学见图3。结果显示：A组主要显色反应（即FASL表达）部位包括螺旋神经节、Corti器、血管纹、蜗轴小血管周围、耳蜗骨壁以及壶腹嵴等。B组主要显色反应（即IL 10表达）部位包括血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节以及耳蜗的骨壁。C组和D组仅在螺旋神经节和耳蜗骨壁有较弱的显色。

2.5 透射电镜摄片结果

各组显示均未出现特殊的细胞和细胞内结构的病理变化，仅见C组的1耳血管纹上皮细胞内部分线粒体肿胀（图4）。

3 讨论

目前ASNHL的发病机制尚不完全清楚，但对许多自身免疫性疾病的发生和病理变化研究中发现，部分细胞因子起着重要作用。已有实验表明,IL 10等免疫调节分子在自身免疫性疾病的预防和类风湿性关节炎、多发性硬化、自身免疫性甲状腺炎及自身免疫性眼葡萄膜炎等动物模型的基因治疗中取得了良好的效果

［7 8］。我们已成功构建了ASNHL的动物模型［9］，本项实验研究采用豚鼠的同种内耳抗原免疫后，成功地造成部分实验动物出现感音神经性聋和血清特异性抗体水平升高，即制成了ASNHL动物模型。再将重组腺

病毒携带免疫调节分子基因（即抗炎症分子的基因Ad IL 10）和干扰自身免疫反应信号传递过程并可导致细胞程序性死亡的分子基因（即调控细胞凋亡分子的基因Ad FasL）采用鼓阶注射的方法导入豚鼠内耳，并于导入后7 d测试实验动物的听觉功能、内耳组织中病毒转染和导入基因产物的表达情况。结果显示ASNHL 实验动物经内耳局部注射携带免疫调节基因的重组腺病毒后，部分实验动物的听觉功能明显提高，即ABRⅢ波阈值降低，组间阈值的均值对比，均较对照组有显著性差异。耳蜗病理组织形态学观察发现两个实验组动物的内耳免疫炎性反应亦较对照组动物为轻，仅见部分实验动物出现蜗管内絮状物，未出现螺旋神经节细胞数量变化，Corti器和血管纹形态基本正常，从而提示内耳局部的免疫调节基因治疗具有较好的效果，即调节和抑制了由于自身免疫所造成的内耳炎性反应和损伤，进而逆转和提高了听觉功能。

内耳免疫组织化学试验结果显示，重组腺病毒可以成功转染豚鼠内耳，主要分布于耳蜗骨壁、骨螺旋板的蜗管内唇部、螺旋韧带和血管纹等部位。FasL基因表达产物主要分布于螺旋神经节、Corti器、血管纹、蜗轴小血管周围、耳蜗骨壁以及壶腹嵴等部位。IL 10基因产物主要分布于血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节以及耳蜗的骨壁。基因产物表达于壳子、耳蜗血管纹、螺旋韧带、Corti器、小血管周围。单一鼓阶内的一点注射可以较为广泛地分布于内耳各部位组织中，依据内耳解剖学和组织学特点，我们推测可能有3个途径使腺病毒从鼓阶分布到蜗管：（1）通过骨螺旋板下层中的小孔与鼓阶的外淋巴液相交通；（2）通过蜗神经纤维穿过的细孔与鼓阶的外淋巴液相交通；（3）鼓阶和前庭阶在顶回以蜗孔相交通，蜗管中的内淋巴液通过前庭膜与外淋巴液相交通。具体实际情况有待进一步研究和探明。

另一有趣的现象是两个实验治疗组的动物免疫组织化学试验结果显示，在耳蜗的骨壁均有显著的病毒转染和免疫调节基因产物的表达，具体机制尚不清楚。依据本组在以往实验研究中的发现，即同种内耳组织抗原免疫豚鼠后，部分实验动物的耳蜗骨壁内出现明显的炎性病灶［10］（与骨硬化症的病变极为相似，从而支持该病的自身免疫性病因学假说），此次基因治疗的方法对于自身免疫性耳硬化症是否能发挥一定的治疗效果，有待进一步研究证实。

此次实验研究中，我们对于一组ASNHL的实验动物鼓阶内单纯注射腺病毒后，结果显示听觉功能无显著变化，内耳病理形态学改变与内耳局部注射缓冲液的对照组相似，即提示腺病毒对于ASNHL治疗无显著效果，但亦未造成进一步损伤。

【参考文献】

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本论是论文的主体，包括研究内容与方法、实验材料、实验结果与分析(讨论)等。在本部分要运用各方面的研究方法和实验结果，分析问题，论证观点，尽量反映出自己的科研能力和学术水平。 结论是论文的收尾部分，是围绕本论所作的结束语。其基本的要点就是总结全文，加深题意。 6、谢辞：简述自己通过做论文的体会，并应对指导教师和协助完成论文的有关人员表示谢意。 7、参考文献：在论文末尾要列出在论文中参考过的专著、论文及其他资料，所列参考文献应按文中参考或引证的先后顺序排列。 8、注释：在论文写作过程中，有些问题需要在正文之外加以阐述和说明。 9、附录：对于一些不宜放在正文中，但有参考价值的内容，可编入附录中。 关于大学的论文范文 大学矛盾分析及大学治理 摘要：对大学的生存和发展而言，有三个层面的矛盾因素非常重要，一是基本矛盾，即大学的办学水平、能力与社会发展需求之间的矛盾;二是主要矛盾和关键矛盾，即在学校发展过程中某一阶段对学校发展有决定性影响的矛盾;三是临界矛盾，即学校发展的某一时间对学校全局发生巨大影响、突然性的矛盾。当前大学治理工作主要是认识矛盾、找准矛盾、正确地解决矛盾，在矛盾分析的基础上坚持做好以下几个方面的工作：加强战略管理、优化资源配置、调整组织结构、完善机制和制度、构建和

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本文部分内容来自网络，本司不为其真实性负责，如有异议请及时联系，本司将予以删除== 本文为word格式，下载后方便编辑修改，也可以直接使用== 学院科研工作总结范文-学院科研工作总结羽利小编精心推荐 学院科研工作总结范文整理如下，快随羽利小编一起来了解吧。 学院科研工作总结范文【一】 一、领导重视，机构健全学校领导班子重视教育科研工作。 领导的重视，是学校顺利开展科研工作的前提。我校党政领导班子一如既往地把教育科研工作列入学校工作的议事日程，还在时间、经费、教学设施等方面给予了保障，拨出专款作为科研经费，定期举办教育科研专题讲座，组织教师参加各种培训和学习，还请专家对学校教育科研工作做具体指导，使教师对科研的认识水平和知识水平不断提高。 学校领导走在科研的前列，以身作则。学校领导带头担任课题负责人，带动我校教职工搞课题研究。积极参与各类论文比赛活动，在各级论文评比中均获得好名次。詹漪君校长负责的省远程教育学会重点课题《高等教育大众化推进过程中电大青年教师队伍建设的思考》XX顺利结题，论文《县市电大在高等教育大众化中的定位与思考》荣获省电大首届科研论文评比一等奖;宋德清副校长和张彩娟副校长都主持过课题研究，并全部结题，论文在各级评比中获奖。 “科研兴校”已深入人心，学校科研机构是使整体科研工作和课题研究实验工作得以顺利进行的行政保证。我校在原来的基础上重新调整人员，根据教师不同的才能合理分工，XX年学校专门成立了科研信息处(原教学支持服务处)，由一名副校长主管，设有一名主任，由一批热衷于教育研究工作、积极肯干的教研组长和教学骨干成为学校科研机构的主要力量。学校科研信息处负责学校教育科研活动的开展及指导各级课题的操作等。今年在学校迁入新校园，学校规模不断扩大的形势下又增设了一名副主任。 二、创造良好的科研条件

科研论文写作简介

科研论文写作简介 引导语：通过科学实践所获得的科研成果进行总结归纳后，按论点和论据所写成的论证性文章。一篇优秀论文既要求内容丰富、新颖、科学性强，又要富有理论性和实践性，且文字通顺，层次清楚，逻辑性强。 一、题目：文章最重要和最先看到的部分，应能吸引读者，并给人以最简明的提示。 1.应尽量做到简洁明了并紧扣文章的主题，要突出论文中特别有独创性、有特色的内容，使之起到画龙点睛，启迪读者兴趣的作用。 2.字数不应太多，一般不宜超过20个字。 3.应尽量避免使用化学结构式、数学公式或不太为同行所熟悉的符号、简称、缩写以及商品名称等。题目中尽量不要用标点符号。 4.必要时可用副标题来做补充说明，副标题应在正题下加括号或破折号另行书写。 5.若文章属于“资助课题”项目，可在题目的右上角加注释角号(如※、#等)，并在脚注处(该文左下角以横线分隔开)书写此角号及其加注内容。 6.为了便于对外交流，应附有英文题名，所有字母均用大写，放在中文摘要与关键词的下面。 二、作者署名：论文的必要组成部分，要能反映实际情况。 1.作者应是论文的撰写者，论文写作指导老师Q：1366273999，是指直接参与了全部或部分主要工作，对该项研究作出实质性贡献，并能对论文的内容和学术问题负责者。 2.研究工作主要由个别人设计完成的，署以个别人的姓名;合写论文的署名应按论文工作贡献的多少顺序排列;学生的毕业论文应注明指导老师的姓名和职称。作者的姓名应给出全名。 3.作者的下一行要写明所在的工作单位(应写全称)，并注上邮政编码。 4.为了便于了解与交流，论文的最后应附有通迅作者的详细通讯地址、电话、传真以及电子信箱地址。 三、摘要：科研论文主要内容的简短、扼要而连贯的重述，必须将论文本身新的、最具特色的内容表达出来(重点是结果和结论)。 1.具体写法有“结构式摘要”和“非结构式摘要”两种，前者一般分成目的、方法、结果和结论四个栏目，规定250字左右;后者不分栏目，规定不超过150个字，目前国内大多数的医学、药学期刊都采用“结构式摘要”。 2.摘要具有独立性和完整性，结果要求列出主要数据及统计学显著性。 3.一般以第三人称的语气写，避免用“本文”、“我们”、“本研究”等作为文摘的开头。 四、关键词：主要为了图书情报工作者编写索引，也为了读者通过关键词查阅需要的论文。 1.关键词是从论文中选出来用以表示全文主题内容的单词或术语，要求尽量使用《医学主题词表》(MeSH)中所列的规范性词(称叙词或主题词)。 2.关键词一般选取3～8个词，并标注与中文一一相对应的英文关键词。每个词之间应留有空格以区别之。 3.关键词通常位于摘要之后，引言之前。 五、引言：论文的开端，起纲领的作用，主要回答“为什么研究”这个课题。 1.引言的内容主要介绍论文的研究背景、目的、范围，简要说明研究课题的意义以及前人的主张和学术观点，已经取得的成果以及作者的意图与分析依据，包括论文拟解决的问题、研究范围和技术方案等。 2.引言应言简意赅，不要等同于文摘或成为文摘的注释。如果在正文中采用比较专业化的术语或缩写词时，最好先在引言中定义说明。 3.字数一般在300字以内。 六、正文：科研论文的主体，包括材料、方法、结果、讨论四部分内容，其中某些部

【科学论文格式范文】 论文的格式模板范文

科技论文在情报学中又称为原始论文或一次文献，是科学和技术进步的科学记录和历史性文件,是对我们进行科学研究基本功的训练。下面是为大家整理的科学论文格式范文，希望你们喜欢。 科学论文格式范文 1 题目是科技论文的中心和总纲。 要求准确恰当、简明扼要、醒目规范、便于检索。一篇论文题目不要超出20个字。用小2号黑体加粗，居中。 2 署名 署名表示论文作者声明对论文拥有著作权、愿意文责自负，同时便于读者与作者联系。署名包括工作单位及联系方式。工作单位应写全称并包括所在城市名称及邮政编码，有时为进行文献分析，要求作者提供性别、出生年月、职务职称、电话号码、e-mail等信息。 用小4号宋体 3 摘要 摘要是对论文的内容不加注释和评论的简短陈述，是文章内容的高度概括。主要内容包括 1)该项研究工作的内容、目的及其重要性。 2)所使用的实验方法。 3)总结研究成果，突出作者的新见解。 4)研究结论及其意义。 中文摘要200字左右，中文名称的“内容摘要”用小2号黑体加粗，居中，其内容另起一行用小4号宋体(5倍行距)，每段起首空两格，回行顶格。 英文“内容提要”项目名称规定为“Abstract”，用小2号Times New Roman字体加粗，居中，其内容另起一行用小4号Times New Roman 字体，标点符号用英文形式。 4 关键词 关键词是为了满足文献标引或检索工作的需要而从论文中萃取出的、表示全文主题内容信息条目的单词、词组或术语，一般列出3～8个。 有英文摘要的论文，应在英文摘要的下方著录与中文关键词相对应的英文关键词(key

words )。 中文名称的“关键词”另起一行用小4号黑体加粗，内容用小4号黑体，一般不超过8个词，词间空一格。 英文“关键词”另起一行，项目名称规定为“Key words”，用小4号Times New Roman 字体加粗，顶格，其内容接“Key words”后空一格，用小4号Times New Roman字体加粗，词间用分号“;”隔开。 5 引言 引言又称前言、导言、序言、绪论，它是一篇科技论文的开场白，由它引出文章，所以写在正文之前。引言也叫绪言、绪论。 引言的写作要求 (l)引言应言简意赅，内容不得繁琐，文字不可冗长，应能对读者产生吸引力。学术论文的引言根据论文篇幅的大小和内容的多少而定，一般为200～600字，短则可不足100字，长则可达1000字左右。 (2)比较短的论文可不单列“引言”一节，在论文正文前只写一小段文字即可起到引言的效用。 (3)引言不可与摘要雷同，不要写成摘要的注释。一般教科书中有的知识，在引言中不必赘述。 (4)学位论文为了需要反映出作者确已掌握了坚实的理论基础和系统的专门知识，具有开阔的科研视野，对研究方案作了充分论证，因此，有关于历史回顾和前人工作的综合评述，以及理论分析等，则可将引言单独写成一章，用足够的文字详细加以叙述。 (5)引言的目的应是向读者提供足够的背景知识，不要给读者悬念。作者在引言里不必对自己的研究工作或自己的能力过于表示谦意，但也不能自吹自擂，抬高自己，贬低别人。 引言的格式要求 项目名称用小2号黑体加粗，居中;内容另起一行用小4号宋体。每段起首空两格，回行顶格。 6正文 正文是科技论文的主体，是用论据经过论证证明论点而表述科研成果的核心部分。正义占论文的主要篇幅，可以包括以下部分或内容调查对象、基本原理、实验和观测方法、仪器设备、材料原料。实验和观测结果、计算方法和编程原理、数据资料、经过加工整理的图表、形成的论点和导出的结论等。

科研个人年终总结范文3篇

科研个人年终总结范文3篇 作为科研员，为本年度的工作做一个年终总结，本文是科研个人的年终总结范文，仅供参考。 科研个人年终总结范文一： 我根据学校的工作计划和教研工作要求，结合自己的实际，为进一步搞好教育教学工作，提高教育教学质量，而积极参加各项教研活动，认真开展教研工作，具体工作总结如下： 一、加强理论学习，注重课堂实践。 1、认真学习《新课程标准》，钻研教材，精讲每一节课。 2、在课堂教学中，积极倡导自主、合作、探究的学习方式，与学生建立民主平等和谐的师生关系，营造和谐轻松的学习环境，促进学生自主发展，努力形成自己的教学风格。 3、积极参与校本教研，按时参加学校组织的教研学习、听课、评课、等活动。活动中，集思广益，博采众长，深入反思自己的教学行为，以先进的课改理念矫正自己的教学行为，提高自己的教研能力。本学期共听课30节，评课30节，学校教学比武成绩显著，课堂教学位于前列，每学期做会诊课中心发言人2次，上公开课2节，促进了自身的成长。 二、勤于教研，提升素质。 1、按时参加数学方面的学习，并经常向优秀教师虚心请教，不断提高自己的理论修养和业务素质。利用课余时间，学习、阅

读相关的教育教学文章、书籍，做好学习笔记，本学期我阅读了《新课程下的创新教学设计》、《现代教学理论》等书籍，撰写了近一万字的学习笔记，为顺利完成各项工作奠定了理论基矗 2、能积极、主动地参加各种理念培训学习，今年8月参加了骨干教师培训。通过培训学习，切实转变观念，夯实了自己的理论基矗拓宽了视野，了解教学改革的最新动态。 三、加强教改与教学科研，努力出成果。 在教学教研实践中，及时进行教学反思，总结教学中的得失，积极撰写论文，取得了点滴成果。 1、20xx年长春市小学数学“数学广角”教学研讨课二等奖。 2、获得了长春市数学学科骨干教师荣誉称号。 3、教学教研之余，我还鼓励和指导学生参加各类竞赛，取得一定的成绩。获国家级学生读写大赛一等奖。 4、20xx年论文《渗透数学思想，培养学生数学素养》获吉林省基础教育校本科研一等奖。 在忙忙碌碌的工作中，我的教学、理论水平和教研能力各方面有了一定的收获和提高，但是也有不足和困惑，如教研的开展不够深入，效果不明显等问题。在今后的工作中，我将脚踏实地，争取更大的进步和提高。 科研个人年终总结范文二：

毕业论文开题报告模板以及范文

毕业论文开题报告模板范文 [1]毕业论文开题报告 开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。这是一种新的应用写作文体，这种文字体裁是随着现代科学研究活动计划性的增强和科研选题程序化管理的需要应运而生的。开题报告一般为表格式，它把要报告的每一项内容转换成相应的栏目，这样做，既便于开题报告按目填写，避免遗漏；又便于评审者一目了然，把握要点。 开题报告包括综述、关键技术、可行性分析和时间安排等四个方面。 开题报告作为毕业论文答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。 由于开题报告是用文字体现的论文总构想,因而篇幅不必过大,但要把计划研究的课题、如何研究、理论适用等主要问题。 开题报告的总述部分应首先提出选题,并简明扼要地说明该选题的目的、目前相关课题研究情况、理论适用、研究方法。 开题报告是由选题者把自己所选的课题的概况(即"开题报告内容")，向有关专家、学者、科技人员进行陈述。然后由他们对科研课题进行评议。亦可采用"德尔菲法"评分；再由科研管理部门综合评议的意见，确定是否批准这一选题。开题报告的内容大致如下：课题名称、承担单位、课题负责人、起止年限、报名提纲。报名提纲包括： (1)课题的目的、意义、国内外研究概况和有关文献资料的主要观点与结论； (2)研究对象、研究内容、各项有关指标、主要研究方法(包括是否已进行试验性研究)； (3)大致的进度安排； (4)准备工作的情况和目前已具备的条件(包括人员、仪器、设备等)； (5)尚需增添的主要设备和仪器(用途、名称、规格、型号、数量、价格等)； (6)经费概算； (7)预期研究结果； (8)承担单位和主要协作单位、及人员分工等。 同行评议，着重是从选题的依据、意义和技术可行性上做出判断。即从科学技术本身为决策提供必要的依据。 [2]如何撰写毕业论文开题报告 开题报告的基本内容及其顺序：论文的目的与意义；国内外研究概况；论文拟研究解决的主要问题；论文拟撰写的主要内容（提纲）；论文计划进度；其它。 其中的核心内容是“论文拟研究解决的主要问题”。在撰写时可以先写这一部分，以此为基础撰写其他部分。具体要求如下： 1．论文拟研究解决的问题 明确提出论文所要解决的具体学术问题，也就是论文拟定的创新点。 明确指出国内外文献就这一问题已经提出的观点、结论、解决方法、阶段性成果、……。 评述上述文献研究成果的不足。 提出你的论文准备论证的观点或解决方法，简述初步理由。 你的观点或方法正是需要通过论文研究撰写所要论证的核心内容，提出和论证它是论文的目的和任务，因而并不是定论，研究中可能推翻，也可能得不出结果。开题报告的目的就是要请专家帮助判断你所提出的问题是否值得研究，你准备论证的观点方法是否能够研究出来。 一般提出3或4个问题，可以是一个大问题下的几个子问题，也可以是几个并行的相关问题。

科研成果论文

创设情境识字，促进能力发展 ——浅谈低年级的识字教学 识字是阅读和习作的基础，也是低年级语文教学的一个重点。在识字教学中，若让学生被动地死记，机械地抄写，不仅会使他们学得乏味，更谈不上帮助他们形成能力。因此，在低年级识字教学中可以创设多种情境，激发孩子们识字的兴趣，进行有意义地识字，同时促进各种能力的发展。在平时的教学过程中，我主要采用以下几种识字方式，促进学生语文能力的提高：竞赛识字，培养实践能力；猜谜识字，促进思维能力；阅读识字，提高阅读能力；对话识字，提高交际能力。 在平时的教学中，我发觉无论是优等生还是学有困难的学生，都有一个现象：对字的认读比较容易，但是在具体的说话和写话中运用的比较少。这就导致我们的孩子对生字的永久记忆比较浅。针对自己班里孩子进行了一些分析：家长的文化程度不高，小学毕业的居多，高中毕业的是寥寥几个；家长从事的职业复杂，三分之一的家长是在菜场卖菜的，三分之一的家长是在厂里上班的，还有一些是开黄鱼车，自己开小店的等。从家长方面来看，我们的家长几乎没有时间和精力辅导孩子，引导孩子如何学习。班里80%的孩子是外来民工子女，绝大多数孩子是没有课外书的。可见，我们的孩子课外阅读之少。针对这些现象，如何要让我们的孩子喜欢识字，并且在识字的同时也能促进其他能力的发展呢？我的做法主要是创设一些情境，让孩子们在情境中识字。

一、竞赛识字，培养实践能力 情境识字，要从兴趣开始，因为兴趣是一切学习的原动力。教育心理学认为，兴趣是激发学习动机的最现实、最活跃的因素。儿童有了饱满的学习兴趣，便会对学习产生强烈的需要，积极、主动地投入学习，不再感到学习是一种负担。孩子都比较好胜，在识字教学中，可抓住这一特性，开展各种竞赛，引导孩子们主动识字，激发他们识字的兴趣。 儿童刚入学，需进行一个多月的拼音教学。通常在这个阶段，学生与汉字基本不接触。事实上，这个阶段可以适当渗透汉字的识得教学。我的做法：以全班学生的姓名作为这一阶段识字的主要内容，进行识字大王的考级。 拼音阶段：每学到能拼读某个学生姓名的拼音，就出示一张用拼音书写的该学生姓名的卡片，带领全班小朋友认读，比一比谁拼得准、读得快。 识字阶段：首先，我将学生的姓名打印出来，贴在桌角，供同学课余一张一张地拼读，互相加深认识。这一阶段，孩子们已经无意识地在识字了。当自己能够认10个字了，就可以到我这里来进行考级，认10个字是一级，认20个字是二级，以此类推。其次，在学生们基本熟悉了全班同学的姓名的前提下，我让学生以小组、大组为单位轮流发本子比赛。 在这样的竞赛中，孩子们识字的兴趣可浓了。进行这样的竞赛，重要目的不仅是孩子们认识了多少字，而且可以激发孩子们主动识字

科研方法与论文写作_合格

单选题：只有唯一一个选项正确 1. 在英语中，问题一般有两种表达方式：question和problem；科学研究要解决的问题是（ B） (A) question (B) problem (C) question和problem (D) 都不是 [分值： 2. 留意最新的研究报道，及时查询报道性文章，从中可以了解最新的研究动态，获取新的原理、 新技术等有价值、可利用的科研信息，属于期刊论文的（ C） (A) 综述性文章 (B) 专栏性文章 (C) 报道性文章 (D) 专题性文章

[分值： 3. 查找同一主题文献资料检索途径是（ D） (A) 著者途径 (B) 引文途径 (C) 序号途径 (D) 主题途径 [分值： 4. 期刊论文中（ A ）篇幅最长。 (A) 综述性文章 (B) 专栏性文章 (C) 报道性文章D专题性文章

[分值： 5. 下列不属于文献检索常用的检索工具是（ A ） (A) 期刊 (B) 书目 (C) 索引 (D) 文摘 [分值： 6. 知识产权法的基本原则（ ? ） (A) 鼓励和保护智力创造活动 (B) 促进知识产品的传播、应用和社会进步 (C) 加强知识产权的国际保护和国际交流 (D) 以上都正确

[分值： 7. 前苏联学者巴甫洛夫用一条狗作为研究对象，通过可控的灯光、声音等无关刺激引起了狗分泌 唾液，从而发现了条件反射现象，这个研究是（） (A) 测验性个案研究 (B) 实验性个案研究 (C) 调查性个案研究 (D) 观察性个案研究 [分值： 8. “目录”属于文献等级中的（ B） (A) 一次文献 (B) 二次文献 (C) 三次文献 (D) 四次文献

科技论文的格式范文

科技论文的格式范文 1题目 题目是科技论文的必要组成部分。它要求用简洁、恰当的词组反映文章的特定内容，论文的主题明白无误地告诉读者，并且使之具 有画龙点睛，启迪读者兴趣的功能。一般情况下，题目中应包括文 章的主要关键词。题名像一条标签，切忌用较长的主、谓、宾语结 构的完整语句逐点描述论文的内容，以保证达到“简洁”的要求;而“恰当”的要求应反映在用词的中肯、醒目、好读好记上。当然， 也要避免过分笼统或哗众取宠的所谓简洁，缺乏可检索性，以至于 名实不符或无法反映出每篇文章应有的特色。题名应简短，不应很长，一般不宜超过20个汉字。 2署名 著者署名是科技论文的必要组成部分。著者系指在论文主题内容的构思、具体研究工作的执行及撰稿执笔等方面的全部或局部上作 出的主要贡献的人员，能够对论文的主要内容负责答辩的人员，是 论文的法定权人和责任者。署名人数不该太多，对论文涉及的部分 内容作过咨询、给过某种帮助或参与常规劳务的人员不宜按著者身 份署名，但可以注明他们曾参与了哪一部分具体工作，或通过文末 致谢的方式对他们的贡献和劳动表示谢意。合写论文的著者应按论 文工作贡献的多少顺序排列。著者的姓名应给全名，一般用真实姓名。同时还应给出著者完成研究工作的单位或著者所在的工作单位 或通信地址。 3文摘 文摘是现代科技论文的必要附加部分，只有极短的文章才能省略。文摘是以提供文献内容梗概为目的，不加评论和补充解释，简明确 切地记述文献重要内容的短文，应包括目的、方法、结果、结论。 文摘有两种写法:报道性文摘—指明一次文献的主题范围及内容梗概 的简明文摘也称简介;指示性文摘—指示一次文献的陈述主题及取得

科研文献综述正文范例

法学院本科生毕业论文全面 《文献综述》写作规范（试行） 一、写作文献综述的总体要求 文献综述是针对某一研究领域或专题搜集大量文献资料的基础上，就国内外在该领域或专题的主要研究成果、最新进展、研究动态、前沿问题等进行综合分析而写成的、能比较全面地反映相关领域或专题历史背景、前人工作、争论焦点、研究现状和发展前景等内容的综述性文章。 法学院本科生在毕业论文选题确定后，除传统研究论文写作形式外，可以围绕毕业论文选题查找相关文献资料，以文献综述的形式提交研究成果代替传统研究论文，文献综述（论文）的答辩稿和终稿应当包括封面、目录、正文和参考文献、致谢词等几部分，各部分的排版格式与法学院规定的普通论文排版格式一样，正文字数8000字以上。 二、文献综述的正文结构内容 文献综述主要用以介绍与主题有关的详细资料、研究动态、研究进展、发展方向以及对以上方面的评述。一般都包含以下四部分：即前言、主体和总结。 前言部分。主要是说明写作的目的，即立题依据和综述目的；介绍有关的概念及定义以及综述的范围，扼要说明有关主题的现状或争论焦点，使读者对全文要叙述的问题有一个初步的轮廓。引言不宜过长，文句要简练、重点突出。 主体部分。文献综述的主体写法多样，没有固定的格式。可按年代顺序综述，也可按不同的问题进行综述，还可按不同的观点进行比较综述，不管用那一种格式综述，都要将所搜集到的文献资料归纳、整理及分析比较，阐明有关主题的历史背景、现状和发展方向，以及对这些问题的评述，主题部分应特别注意代表性强、具有科学性和创造性的文献引用和评述。 总结部分。是对全文主题的简明扼要的总结，包括对学术界的研究现状进行必要的评述，可以提出自己的见解，并对进一步的发展方向做出预测。 三、撰写文献综述的注意事项 1、文献综述的论文标题一般采用“主题词+文献研究综述”或“主题词+理论研究综述”等形式命题。

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[科技论文的标准格式]论文格式模板范文 写科技论文要有系统地掌握和运用专业知识，还要有较宽的知识面并有一定的逻辑思维能力和写作功底。下面是小编为大家整理的科技论文的标准格式，希望你们喜欢。 科技论文的标准格式 1 题目是科技论文的中心和总纲。 要求准确恰当、简明扼要、醒目规范、便于检索。一篇论文题目不要超出20个字。用小2号黑体加粗，居中。 2 署名 署名表示论文作者声明对论文拥有著作权、愿意文责自负，同时便于读者与作者联系。署名包括工作单位及联系方式。工作单位应写全称并包括所在城市名称及邮政编码，有时为进行文献分析，要求作者提供性别、出生年月、职务职称、电话号码、e-mail等信息。 用小4号宋体 3 摘要 摘要是对论文的内容不加注释和评论的简短陈述，是文章内容的高度概括。主要内容包括： 1)该项研究工作的内容、目的及其重要性。 2)所使用的实验方法。 3)总结研究成果，突出作者的新见解。 4)研究结论及其意义。

中文摘要200字左右，中文名称的内容摘要用小2号黑体加粗，居中，其内容另起一行用小4号宋体(1.5倍行距)，每段起首空两格，回行顶格。 英文内容提要项目名称规定为Abstract，用小2号Times New Roman字体加粗，居中，其内容另起一行用小4号Times New Roman 字体，标点符号用英文形式。 4 关键词 关键词是为了满足文献标引或检索工作的需要而从论文中萃取出的、表示全文主题内容信息条目的单词、词组或术语，一般列出3～8个。 有英文摘要的论文，应在英文摘要的下方著录与中文关键词相对应的英文关键词(key words )。 中文名称的关键词另起一行用小4号黑体加粗，内容用小4号黑体，一般不超过8个词，词间空一格。 英文关键词另起一行，项目名称规定为Key words，用小4号Times New Roman 字体加粗，顶格，其内容接Key words后空一格，用小4号Times New Roman字体加粗，词间用分号;隔开。 5 引言 引言又称前言、导言、序言、绪论，它是一篇科技论文的开场白，由它引出文章，所以写在正文之前。引言也叫绪言、绪论。 引言的写作要求 (l)引言应言简意赅，内容不得繁琐，文字不可冗长，应能对读者产生吸引力。学术论文的引言根据论文篇幅的大小和内容的多少而定，一般为200～600字，短则可不足100字，长则可达1000字左右。

科研论文及写作方法

科研论文及写作方法 一、论文格式 1、论文内容要紧扣主题，有针对性、前瞻性、可行性。 2、用Word软件编排，纸质件和电子版各交一份。其中，纸质 件用A4标准纸（210*297mm）打印，版芯（即文字和空格等所占 的范围）居中，版芯大小为38行*40字（5号字）。 3、论文书写顺序为：标题，作者姓名，工作单位，邮政编码，中文摘要，关键词，正文，参考文献，作者简介。 二、撰写体例 1、文章标题：一般不超过20个汉字，必要时加副标题（需加破折号），并译成英文（实用技术报告文章可以不用）。居中，2号 黑体字。 3、中文摘要：在正文前，用第三人称写法，不以“本文”，“作者”等作主语，150-300字为宜。小5号黑体。 4、关键词：在摘要下方，限3-8个。小5号黑体。 5、正文标题：内容应简洁明了，层次不宜过多（一般不超过4 个层次），各级标题一律顶格并使用阿拉伯数字连 续编号。一级标题用3号黑体字，序号为1，2，3??；二级标题用4号黑体字，序号为1.1，1.2??2.1，2.2??用点号分开；三级标题用4号宋体字，序号为1.1.1，1.1.2?? 1.2.1，1.2.2??用两个下圆点分开。 6、正文文字：用小5号宋体字。 7、文中公式、算式和方程式均应编排序号。计量单位和符号，缩略词应使用国家标准和国际通用符号。数字用法执行GB/T15835-1995《出版物上数字用法的规定》，凡公元纪年、年代、年、月、

日、时刻、各种记数与计量等均采用阿拉伯数字；夏历、清代及其 以前纪年、星期几、数字作为语素构成的定型词、词组、惯用语、 缩略语、临近两数字并列连用的概略语等用汉字数字。外文字符须 分清大小写、正斜体、上下角，对易混淆之处请注明。 8、图表：文中尽量少用图表，必须使用时，应简洁，明了，少 占篇幅，建议累计不超过5幅。图表均采用黑色线条，分别用阿拉 伯数字顺序编号（如表1、图1），应有简明表题（放表上），图题（放图下），表中数字应注明资料来源。文中表格取消表头左上角 斜线，一律使用三线表，提供图片，照片必须清晰。图表中的文字，数字使用小5号宋体。 9、注释：是对文章某一特定内容的解释或说明，其序号为 ①②③??，注释文字与标点应与正文一致，注释置于文尾，参考文 献之前。 10、参考文献：是对引文作者、作品、出处、版本等情况的说明。必须为公开出版物，引用文献应在文章中的引用处右上角加注序号（如[1]，[2]??），详细引文情况按顺序排列文尾，用6号宋体字。 引用文献超过200字就应该列参考文献。 以单字母方式标识以下各种参考文献类型：普通图书[M]、会议 论文[C]、报纸文章[N]、期刊文章[J]、学位论文[D]、报告[R]、标准[S]、专利〔P〕、汇编[G]、档案[B]、古籍[O]、参考工具[K]。格式 与示例如下： （1）图书类格式：[序号]主要责任者。文献题名：其他题名信 息（任选）[文献类型标识]。其他责任者（任选）。出版地：出版者，出版年：起止页码。 示例：[2]辛希孟。信息技术与信息服务国际研讨会论文集：A集[C]。北京：中国社会科学出版社，1994：58-61。示例：[3]吕启祥，林东海。红楼梦研究稀见资料汇编 [G]。北京：人民文学出版社，2001：22-27。

科研论文格式与范文1

自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研究 发表时间：2009-6-5 14:45:50 浏览次数：174 来源：中国创新医学网推荐 蔡文君，谭长强，李玉瑾，黄和，李霜 南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科暨耳鼻咽喉科学研究室，江苏南京 210029；南京工业大学生物 化学中心，江苏南京 210009 【摘要】目的：研究以重组复制缺陷型腺病毒为载体的Fas配体（Fas Ligand，即FasL）基因和白细胞介素10（即IL 10）基因治疗实验性自身免疫性感音神经性聋。方法：采用同种内耳组织抗原加弗氏佐剂免疫豚鼠，造成自身免疫性感音神经性聋的动物模型28只，按配对设计将其分为4组，通过鼓阶微量注射的方式，A组注入携带FasL基因的腺病毒（Ad FasL），B组注入携带IL 10基因的腺病毒（Ad IL 10），C组单纯注入腺病毒（携带绿色荧光蛋白，即Ad GFP），D组注入等量的磷酸盐缓冲液。基因导入7 d后行听觉脑干诱发电位（ABR）测试，后取颞骨制作石蜡切片并行HE染色和光镜观察，每组各取两耳行螺旋韧带和基底膜透射电镜观察。每组各取3只（6耳）行免疫荧光和酶免疫组织化学试验，以检测基因产物表达和腺病毒转染情况。结果：免疫组织化学显示携带目的基因的腺病毒可以转染血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节、蜗轴小血管周围及其耳蜗的骨壁等部位的细胞，并产生相应的蛋白产物（IL 10和FasL）。ABRⅢ波阈值的均值对比结果显示，A组和B组明显低于C组和D组。内耳组织的免疫炎性反应亦明显较C组减轻。结论：重组复制缺陷型腺病毒可以携带目的基因转导入内耳，并在内耳表达基因产物，其抑制炎症反应的作用可有效地减轻自身免疫性感音神经性聋的内耳组织免疫炎性损伤和听觉功能障碍，有望成为治疗自身免疫性感音神经性聋新的方法和途径。 【关键词】基因治疗；自身免疫性感音神经性聋；豚鼠 1979年McCabe依据其临床发现，即18例听力障碍患者经过免疫抑制治疗后听力有明显改善，提出了自身免疫性感音神经性聋(autoimmune sensorineural hearing loss，ASNHL)的概念。之后的进一步研究发现，自身免疫性损害不仅可累及耳蜗，还可波及前庭，故又提出了自身免疫性内耳病（autoimmune inner ear disease，AIED）［1 2］概念。目前ASNHL的病因和发病机制尚不十分清楚，临床缺乏特异性诊断方法，对于ASNHL患者的治疗亦存在着一些问题，主要是采用皮质激素或免疫抑制剂治疗，虽然疗效较快、较好，但该类药物毒副作用多，而且还存在停药后复发率较高等问题。 近年来随着分子生物学研究的深入和基因工程技术的进展，基因治疗已成为许多相关疾病治疗研究方面的热点和新希望。基因治疗是根据特定的治疗目的基因将DNA导入到宿主细胞中并在其中表达。1996年Lalwani等［3 4］报道了将基因导入动物内耳，以后关于内耳的基因治疗成为一个热点，并在载体选择、导入方法和安全性评估等方面取得了很大的进步。基因工程技术已能构建特异性载体，可携带治疗基因导入动物耳内，在动物内耳获得高效表达［4］，产生具有高度生物活性的稳定的基因产物，并且不产生病毒相关的耳毒性反应，这为基因治疗感音神经性聋提供了生物学证据。 目前因为复制缺陷性腺病毒载体具有病毒滴度高、转染效率高（100%）、宿主细胞范围广、外源基因容量大、稳定和无插入突变危险等特点，已经成为基因转导研究中应用最多的载体之一。Yagi等［5］将腺病毒携带的GDNF基因从圆窗膜注射入鼓阶，GDNF基因在蜗内得到表达并发挥作用。 基于上述研究状况和现有研究工作基础，本项目组拟将利用基因治疗的独特性和内耳可行局部治疗的独特解剖特点，对自身免疫性感音神经性聋模型动物进行内耳免疫抑制或调节基因的试验性治疗研究，以探讨其治疗效果和可能发生的副反应情况。 1 材料和方法 1.1 实验动物 健康成熟豚鼠，白色红目，体重300 g左右，耳廓反应正常，耳镜检查排除中耳疾患，所有动物均由南京青龙山养殖场提供。 1.2 内耳组织粗制抗原（crude inner ear antigens，CIEAgs）制备豚鼠CIEAgs制取方法参考文

科研方法与论文写作考试题目及答案

一、单选题(每题1分,共15题) 15 1、现代物理学的开创者和奠基人是： A、爱因斯坦 B、牛顿 C、诺贝尔 答案：A 2、衡量国家科技领先的标志之一是： A、获诺贝尔奖的人数 B、国民经济总产值 C、人口数量 答案：A 3、衡量一个人的技术水平的高低之一是： A、论文 B、家产 C、经历 答案：A 4、理论要不要经过实验验证： A、一切理论都要 B、有些理论不一定要 答案：B 5、检验理论正确的实验是必须能够重演的： A、是 B、不一定 C、不是 答案：A 6、称赞你的论文的人都是： A、坚持真理的人 B、认同你的观点的人 C、奉承你的人 答案：B 7、一篇论文其关键词可以选择几个： A、两个 B、3～8个 C、9个以上 答案：B 8、论文引言就是： A、前言 B、绪论 C、引论 答案：C 9、参考文献的编号一律用什么括号括起： A、大括号 B、中括号 C、小括号

答案：B 10、参考文献号一律用： A、阿拉伯数字 B、汉字 C、英文 答案：A 11、论文中对重要的公式： A、应编号 B、不应编号 答案：A 12、论文中使用别人公开发表的结论，并注明出处的属于： A、引用 B、抄袭 C、剽窃 答案：A 13、论文是如何写出的： A、研究后写出的 B、编写出的 C、从书上抄来的 答案：A 14、博士学位论文至少应有： A、创新点 B、新理论 答案：A 15、论文中对表的题目要求为： A、表的题目在表上部 B、表的题目在表下部 C、随便什么位置 答案：B 二、案例分析题(每题5分,共5题) 25.01 16、 在一篇题目为《目标运动分析新论》论文中，论文摘要是： “在我的《TMA理论》那本书中，介绍了TMA的经典方法，在本论文里，主要叙述目标运动分析的几种新的方法，它们是：1）识别-滤波-控制原理；2）交互多模型方法；3）多站信息融合的方法。” (1)、上述摘要犯了那几方面的毛病？ A、使用“我的”第一人称 B、使用了缩略语TMA C、前两句是过去研究信息，应删掉 D、没有交代成果与结论 E、以上全部是 答案：E