实验一 粪便标本的细菌学检验

课程名称：微生物学检验技术
授课专业：医学检验
学时：4学时
实验一 粪便标本的细菌学检验
一、实验目的
⒈熟悉粪便标本的采集方法与注意事项。
⒉掌握粪便标本的细菌学鉴定方法。
二、试验器材
粪便 培养基 接种环 酒精灯 显微镜 抗血清等
三、实验内容
㈠标本的采集：
多见于急性腹泻及用药前采用自然排便法采集，也可用直肠拭子法采集。
⒈自然排便法：取新鲜的粪便2-3克放无菌容器内立即送检，挑取脓血粘液便，液体粪便取絮状物。
⒉直肠拭子法：排便困难患者或幼儿，将拭子前端用无菌生理盐水或甘油湿润，然后插入肛门约4-5厘米（幼儿2-3厘米），轻轻在直肠内旋转，取其粘液放于无菌试管中送检。
⒊注意事项：
⑴在用药前采集
⑵注意无菌操作，防止杂菌污染，用无菌的广口瓶或洁净的容器装
⑶及时送检和接种
⑷标本用完后及时进行消毒处理，防止实验室污染。
㈡检验程序
粪便或肛拭子
↓
分离培养 SS MAC
↓35℃ 24小时
观察细菌生长情况 Gs染色镜检
纯培养 （ KIA ） 药敏试验
↓35℃24小时

需氧培养 厌氧培养
KIA.MIU 初步生化反应查编码 氧化酶
↓
血清学鉴定
↓
报告结果
四、实验安排
制作培养基
第一台SS平板16个， 葡萄糖蛋白胨水 32支
第二台MAC 16个， 尿素16支 枸橼酸盐16支
第三台双糖铁16支， 蛋白胨水16支 半固体16支
五、实验准备
无菌中号试管 32支／班
无菌小号试管 16支*5／班
无菌中号平板 32／班
SS 32*20毫升／班
MAC 32*20毫升／班
KIA 16支*3毫升／班
枸橼酸盐 16支*3毫升／班
蛋白胨水 16支*2毫升／班
葡胨水 16支*2*2毫升／班
尿素培养基 16支*2毫升／班
半固体 16支*2毫升／班
20%葡萄糖 1瓶/教室
0.4%酚红 1瓶/教室
50%尿素 1瓶/教室
无菌5ml吸管 2筒
无菌1ml吸管 2筒