实验2 细胞
1 实验目的
1.1 掌握细胞的基本结构;
1.2 在光镜下识别不同大小、形态的细胞。
2 实验内容
2.1 卵细胞
切片:猫、猪或羊的卵巢切片,Bouin氏液固定,石蜡包埋,HE染色。
卵细胞是动物体内的大型细胞,观察其形态结构较为方便。
先用低倍镜观察,在靠近卵巢周边处,可见到成群存在(猫)或散在分布(猪、羊)的大型圆形卵细胞,在卵细胞周围还有一层扁平的细胞围绕,共同组成原始卵泡,此时的卵细胞系初级卵母细胞,外周的扁平细胞叫卵泡细胞。
选择一个结构清楚的原始卵泡移到视野中央,转换成高倍镜观察,重点观察卵细胞的结构。
细胞膜:位于细胞的表面,在固定染色的切片上为一薄膜。
细胞质:在本切片中,只能看到细胞质内有红染的小颗粒(卵黄颗粒),其它的细胞器和内含物在制片过程中或被溶剂溶解或未染出。
细胞核:呈圆形,位于细胞的中央或稍偏的位置,染成蓝紫色,核膜明显,染色质呈深染的团块或颗粒状,有1-2个核仁。
2.2 神经细胞
切片:牛或兔切片,HE染色(或镀银染色)。
低倍镜下观察,可见到一些大型带突起的蓝染细胞——脊髓腹角运动神经细胞。这种神经细胞有很多突起,但由于切片关系,只能看到其中的数个突起。胞质内有染色呈深蓝紫色的块状或颗粒状物质,称尼氏体,在电镜下为粗面内质网。胞核着色较淡,多位于细胞中央,内含少量染色质,核膜明显,有一个大而圆的核仁。
2.3 肝细胞
切片:猪肝切片,HE染色。
低倍镜下找到呈多边形的肝小叶,选择一个肝小叶换高倍镜观察,可见到呈索状排列的肝细胞,呈多边形,有1-2个圆形细胞核,核仁明显,核膜清楚,核内染色质稀疏,染色较浅。
2.4 观察细胞器与内含物
细胞器与内含物的种类很多,实验课仅观察几种主要的细胞器和内含物在光镜下的形态和位置。各种细胞器和内含物,在一般的HE染色的切片上看不到,须用特殊方法染色显示。
线粒体——示教:3号片
小狗胰脏,Regaud氏液固定,石蜡切片,铁苏木素染色。
线粒体用铁苏木素染色呈黑色,分布于核周围的细胞质中,线粒体在高倍镜下呈粒状、线状或短棒状,或直或曲,轮廓鲜明。
胰脏的分泌细胞呈锥形,核大而圆,位于细胞中央,细胞游离端聚集有许多大而圆的黑色颗粒为分泌颗粒。
高尔基复合体——示教:2号片
狗或猪的脊神经节,Golgi氏亚砷酸硝酸银法镀染。
在切片上有大小不一的圆形脊神经节细胞,胞核不着色,但能看到淡黄色的核仁。核周围的细胞质中有镀染成黑色的网状或颗粒状物,即光镜下的高尔基复合体。
糖原——示教:6号片
猪肝,冷Carnoy氏液固定,PAS反应法显示糖原,苏木素复染胞核。
在高倍镜下,肝细胞中可见到大量紫红色的糖原颗粒或小块,在很多肝细胞中,糖原偏于细胞一侧,此系制片过程造成,生活状态时分布较均匀。
3 作业
3.1 高倍镜下绘图:示卵细胞构造。
注解:细胞膜、细胞质、卵黄颗粒、细胞核、核膜与核仁。
3.2 高倍镜下绘图:示神经细胞的构造。
注解:胞体、胞突、胞核、尼氏体、核仁。