光谱和分子对接方法研究曲克芦丁与DNA的相互作用

光谱和分子对接方法研究曲克芦丁与DNA的相互作用

曲克芦丁（TXER）是天然存在的生物类黄酮芦丁衍生物。它具有不同的生物活性。拥有的大部分药物所具有的生物活性主要是大分子目标。因此，在目前的研究中，我们通过使用各种光谱方法，等温滴定量热法（ITC）和分子对接研究审查TXER与小牛胸腺DNA（小牛胸腺DNA）的相互作用的机制。此外，DNA切割进行了研究，发现TXER的DNA保护活性。紫外吸收和发射光谱，通过沟结合呈低结合常数的值。圆二色性研究表明，TXER不修改，并且它保留了天然的B-构象。此外，通过沟结合观察TXER-DNA的相互作用用电化学分析发现TXER与DNA 的复合物缺乏有效的正电位峰后移。分子对接研究表明，基于胸腺嘧啶鸟嘌呤与对接得分-7.09千卡/摩尔的相互作用。这一结果进行了比较同ITC值。DNA裂解研究表明TXER不会导致任何DNA损伤以及TXER展示了DNA保护对抗羟基自由基引起的DNA损伤。从这项研究，我们得出结论，通过凹槽时尚TXER和DNA相互作用。

准备：

小牛胸腺DNA储备溶液在4度间歇搅拌24小时，在10mM的Tris-HCl缓冲液（pH7.4）中溶解小牛胸腺DNA（10毫克/毫升），以确保形成均匀的溶液。对CT-DNA 的储备溶液的最终浓度是使用摩尔消光系数ε260=6600厘米-1 M-1。分光光度法在260nm处。该TXER原液（1毫摩尔），制备超纯水。不同浓度的TXER溶液加入到小牛胸腺DNA（100 M +）的最终浓度，并通过涡旋充分混合。根据紫外 - 可见和荧光光谱研究，小牛胸腺DNA100 浓度溶液被用在连续不同浓度TXER的（10-100 M +）。圆二色谱法进行了研究，使用具有两种不同浓度TXER（0.05毫和0.1mM）与100？m恒定的CT-DNA的浓度。

紫外可见光方法：

单独的CT-DNA和TXER-DNA复合物的吸收光谱使用Shimadzu紫外可见分光光度计记录，（型号 - UV-1800）。石英比色皿1cm的路径长度被用于光谱测量。结合常数小牛胸腺DNA-TXER络合物进行了计算通过Kanakis等人的方法。这是假设只有一个类型的相互作用中产生的一种类型的复合物的形成水溶液药物和DNA之间发生。基于这一假设，方程。（1）和（2）成立。

DNA的切割

DNA的切割，通过琼脂糖凝胶电泳由Tabassum等人的改进方法进行了观察。

[27]。在该反应中超螺旋的pBR322圆形质粒DNA（250毫微克）与在存在和不存在的5微升芬顿试剂（30mM的H 2 O 2各种浓度TXER（25，50和100 M +）的治疗，50毫抗坏血酸，80mM的三氯化铁）和制成高达25的终体积微升用Tris-HCl 缓冲液，然后样品在37？C15分钟。孵育后凝胶上样缓冲液（6×），并将混合物进行电泳1小时，在80伏上在TAE缓冲液的2％琼脂糖凝胶。

荧光光度法：

荧光研究利用Fluorolog–fl3-11荧光分光光度计配备了氙气灯源进行。通过使用一个10毫米的路径长度的比色皿在10 mM Tris-HCl–HCl缓冲液在pH 7.4获得了所有的读数。在发射光谱的研究中，不同浓度（10–100米）的txer与固定100 M浓度的DNA中嵌入DNA染料溴化乙锭。纯DNA荧光强度很低的发射光谱。荧光染料，且检测药物–DNA复合物[ 5 ]作用机理。溴化乙锭是一个杰出的探针与DNA结合嵌入模式[ 21 ]，最大激发波长510 nm、绑定。在溴化乙锭竞争分析，对不同浓度与DNA和txer复合物的发射光谱在510–800 nm激发波

长在520 nm。所有的光谱读数在25?C进行样品的所有荧光强度在任意单位表示。最后，猝灭常数（KSV）的txer–DNA复杂的值可以用严厉的–Stern-Volmer方程【23】确定：F0 = 1 + KSV [问]，F0和F是在缺乏和存在的淬灭荧光强度（txer）、绑定在DNA分别和Q是猝灭剂的浓度（txer），KSV是严峻的–Stern-Volmer猝灭常数。因此，KSV值可以从f0/f ]和[ Q之间的线性关系的斜率计算[ 圆二色光谱测量

纯DNA和其TREX复合圆二色性（CD）光谱记录JASCO J-815 CD分光光度计[24]。所有的光谱测量远紫外范围（200-320纳米）。1毫米通道长度的石英比色皿中用于采样。三次扫描为50纳米的扫描速度/分钟进行平均。所有测试均在完成25？C。用Tris-HCl缓冲液中进行频谱的基校正在pH7.4，以获得单独的CT-DNA和TXER-DNA复合物的光谱。

分子对接的研究

对接研究DNA和TXER之间相互作用澄清用滑翔软件[26]，这是大师软件套件的一部分。小牛胸腺DNA序列12聚合物在PDB结构（CGCGAATTCGCG）2（PDB ID：1BNA）从蛋白质数据库检索使用蛋白制剂向导通过除去杂原子，并使用Imperf 最小化工具收敛重原子被提炼。同样配体如TXER结构从PubChem数据库数据库检索。配体结构为使用LigPrep应用在大师对接制备。然后配体的能源使用实现大师OPLS-2005力场最小化。制备受体和配体的文件后，对接工具被应用到生成TXER和CT-DNA和最后之间的相互作用，结合能以及结合复杂的姿势获得。

结论、

紫外

紫外吸收光谱是一种有效的技术，用于识别该结合能力和小分子与DNA的相互作用的模式。的单独的CT-DNA和具有各种浓度TXER的TXER-DNA复合体的吸收光谱示出

图。 TXER-DNA复合物的2的最大吸收峰分别为255纳米和350纳米。此外，观察到增色效应而没有任何明显的红移（红移）在TXER-DNA复合物的最大吸收的位置。所以没有红移紫外光谱分析表明，该装订模式不是插层结合[24,28]。从TXER-DNA复合物的紫外光谱的结果表明，TXER可通过沟结合模式DNA相互作用。此外，hyperchromism的效果可能是由于DNA螺旋[29]或静电的退绕结合[30]。然后结合TXER-DNA复合物的稳定性是通过用在材料和方法部分（第2.3节）中描述的公式计算结合常数确定。的TXER-DNA复合体的节目的双倒数作图为1 /之间的线性相关性（A - A 0）和1 / C（图3）。从图中，TXER-DNA复合物的结合常数值（K）为1.75×103 M-1。相比于类似的EtBr，与DNA吖啶橙互动学习强结合的化合物观察到的结果计算出这个结合常数值显示TXER与DNA的结合较弱。

图。的单独的CT-DNA和TXER-DNA复合物与各种2.紫外吸收光谱浓度TXER（0.01-0.1毫米）的。箭头表示TXER-DNA复合物增加吸光度：（？100μM的CT-DNA在10mM Tris-HCl缓冲液，pH 7.4中在25？C）（一）单独的CT-DNA; （二）的CT-DNA +0.01毫TXER; （三）CT-DNA+0.02毫米TXER; （四）CT-DNA+0.04毫米TXER; （五）CT-DNA+0.06毫米TXER; （六）CT-DNA+0.08毫米TXER; （G），CT-DNA+0.1毫米TXER

荧光光谱法是一种流行的技术，是研究生物大分子与小分子相互作用的一种高度敏感的方法。所以，通过荧光发射光谱测定DNA的TREX绑定机制。在这一点上的竞争性结合的研究进行了探讨txer与DNA的结合模式。在这项研究中，用溴化乙锭，因为它是一个普遍的与DNA结合的荧光。DNA的内源性荧光性能很低。但DNA的荧光是由于对DNA碱基对之间存在大量的插层、增加

荧光结合的DNA–txer复杂的发射光谱如图4所示。用溴化乙锭绑定ctDNA显示荧光发射峰在600 nm激发时，在520 nm txer不同浓度。荧光结合的DNA复合物的荧光强度略有降低，没有任何大的峰移而添加不同浓度的txer，它显示出DNA [ 5 ] txer槽结合特性。荧光强度的轻微下降可能是由于txer之间一些聚集andetbr绑定DNA复合物。此外，用严厉的–Volmer方程确定了荧光猝灭常数，材料和方法解释（2.4节）。Stern Volmer–动态猝灭常数的值（KSV）被确定为1.45×103米?1（图5），比强的DNA嵌入剂[ 33 ]低很多。因此，这种相互作用是较小的小分子如txer为intercalativebinding潜力。因此，目前的研究表明配体如txer与DNA的相互作用通过沟槽结合模式

圆二色性光谱研究

CD光谱检测生物大分子构象变化的可靠技术。一个人的DNA的CD谱有四条主带的位置在210 nm，220 nm，245 nm，275 nm和这些乐队是B-构型的DNA标记。阳性条带出现在275 nm由于碱基堆积和负带的形式在245 nm处由于DNA【34,35】螺旋。独自一人从B到A型DNA的过渡期间，210 nm峰强度降低，275牛米的峰值强度将带移位[ 36 ]增加。进一步vorlickova [ 37 ]报道，aconformation DNA 呈强阳性的CD带在263 nm处在212 nm和负带。在本研究中，两种不同浓度[摩尔比（R）= txer / DNA = 0.05毫米/ 0.1毫米，0.1毫米/ 0.1毫米]的txer–DNA 复合物进行CD光谱分析。对于一txer–CT-DNA DNA复合物的CD光谱的结果如图6所示。图中显示四峰，在210 nm的位置（负带），220 nm（阳性条带），245 nm（负带）和275 nm（正带）。从这样的观察，对txer–DNA复合物的CD 光谱显示不出B-构型DNA任何可察觉的变化。然而，适度的变化观察到在274 nm，210 nm和245 nm的位移和txer–DNA复合物由于在DNA [38 ] TREX聚集效应强度。总而言之，CD光谱结果表明DNA相互作用后以保留其B构象

分子对接

的发现和新的治疗药物评价的各种新兴疾病的治疗没有任何副作用，是现代医学界最重要的目标。从光谱和电化学方法得到的结果进行理解DNA–Trex公司复杂的模式支持。除此之外，分子对接，这是电子技术的一个强大的对作用机理进行澄清。分子对接分析txer–DNA复合物的结果如图9所示。这些参数表示txer 和DNA的复杂。的txer与脱氧鸟嘌呤16形成O和N 3.24 A?同样残基之间的氢键键长的相互作用，txer与deoxythiamine渣7形成的DNA与债券lengths2.95一?和3.23?分别txer CO基团的磷酸基团的氧原子之间的两H键相互作用。的txer还显示与脱氧胞嘧啶脱氧胸腺嘧啶残基的疏水性相互作用。因此，疏水性和氢键的建议txer与DNA之间的相互作用形成的。在与滑翔对接得分?7.097 kcal/mol对接自由能与实验ITC自由能的DNA大沟最终txer交互（G）是?4 kcal/mol从实验获得的自由能的变化值（ITC）和计算（分子对接结果发生）由

于诸多因素的影响。在实验技术，结合自由能包含的DNA与其他几个能像平动能，熵弹性，水合自由能，构象自由等能量，但分子对接计算绝对认为DNA作为一种刚性分子和小分子（药物）作为一个灵活的分子。此外，从国贸自由能也获得从缓冲溶液但分子对接不在交往过程中考虑反离子的反离子的影响

他txer DNA裂解性能用pBR322质粒DNA凝胶电泳分析。当环状质粒DNA进行电泳，超螺旋的形式（我–形式如图10所示）通常迁移的速度快。如果切口发生在onestrand（开环）超螺旋展开创造一个缓慢移动的开环形式（II型–图10所示）。当链裂解，线性表（表3–图10所示）生成之间的迁移形式I和II [ 56 ]。后用不同浓度的存在和芬顿试剂的txer孵化没有显示DNA的断裂研究的结果

图10。不同浓度的txer单独处理的质粒DNA（3条车道–5）没有表现出任何变化（表III）在DNA但DNA电泳带型：其他条件，

芬顿试剂预处理，描绘DNA迁移模式的重大变化。2分（5 L芬顿试剂单独）表示更大强度的线性形式的乐队（我）由于氧化切割DNA的芬顿试剂[ 57 ]。但在其他方面txer较高浓度（lane7：50米txer + 5 L fenton'sreagent，8车道：100米txer + 5 L芬顿试剂）减少羟自由基引起的DNA损伤（通过芬顿试剂生成）。但6车道（25米txer + 5 L芬顿试剂）表现出非常少的活动相比，高浓度。从这个观察，我们建议txer强烈保护免受氧化损伤以及DNA没有造成任何损伤。

pBR322质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳图谱

在存在和芬顿的摄政下txer（30 mM H2O2，50毫米抗坏血酸，80毫米FeCl3）。[ 1道：DNA单独；2道：芬顿试剂（5 L）+ DNA；3道：DNA + txer（25米）；4道：DNA + txer（50米）；5道：DNA + txer（100米）；6道：DNA + txer （25米）+芬顿试剂（5 L）；7道：DNA + txer（50米）+芬顿试剂（5 L）；8道：DNA + txer（100米）+芬顿试剂（5 L）]。

总结

在目前的研究中我们探讨了小分子配体分子如用不同的光谱对接技术与DNA的相互作用txer。结合研究的结果表明，txer结合DNA通过槽结合的方式。这种相互作用的存在得到以下结果。紫外吸收光谱表明，结合常数值1.75×103米?1这表明弱相互作用相比其他强大的粘合剂txer约束力弱。排放的研究也显示无拘束的KSV值1.45×103米?1的交互支持。此外，CD结果表明txer结合没有诱导的B型DNA的任何显着的构象变化。电化学的研究证实txer它是可视化通过对复杂的电位正移峰没有任何明显的沟槽。对txer–DNA的热力学分析表明，复杂的是熵驱动通过沟槽。此外，分子对接研究表明DNA的槽txer通过氢键和疏水相互作用与对接得分?7.09大卡/ Mo键的形成。最后，txer具有保护DNA 的活性对羟基自由基诱导的DNA损伤。本实验结果有助于了解txer互动机制DNA 可以很值得在新兴药物研究人员发展。

芦丁的提取分离和鉴定

综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定 芦丁简介: 芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophorajaponica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。 中药槐米（炒碳）味苦性凉、具清热凉血、止血之功。常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%，是主要的芦丁天然来源。槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。研究文献证明芦丁具有VitP（维生素P）样作用（VitP具有生物类黄酮的功能，可防止维生素C被氧化而受到破坏，增强维生素功效；增加毛细血管壁强度，防止瘀伤。有助于牙龈出血的预防和治疗，有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等）。而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等，在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。 芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与芸香糖（rutinose，一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖）脱水合成的苷，是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无结晶水时188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 补充知识:

曲克芦丁片微生物限度检查法验证

类别：验证文件编号： 部门：验证中心 曲克芦丁片 微生物限度检查法验证方案 起草人：年月日 审核人：年月日 批准日期：年月日 xxxx制药有限公司 实施日期：年月日

目录 一、目的 二、依据 三、范围 四、验证小组成员及分工 五、验证方式 六、验证步骤

一、目的： 建立微生物限度检查法验证方案，以确认所采用的方法是否适合于曲克芦丁片的检查。 二、依据： 国家药品监督管理局《药品生产质量管理规范》(2010年修订)、《中国药典》20xx年版二部药品质量分析方法验证指导原则。 三、范围： 适用于本公司微生物限度检查法对曲克芦丁片的适用性。 四、验证小组成员及分工： 五、验证方式：验证 六、验证步骤： （一）细菌、霉菌与酵母菌计数方法的验证 建立药品的微生物限度检查法，进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌及酵母菌数的测定。对各试验菌的回收率应注意进行验证。 1、验证用菌株大肠杆菌（Escherichia）[CMCC(B)44 102]，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26 003〕，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）

曲霉(Aspergillus niger) 〔CMCC(F)98 003〕。 2、菌液接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌新鲜培养物至营养肉 汤培养基或营养琼脂培养基中，培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物 至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中，培养24～48小时。上述培养物用0.9% 无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培 养物至改良马丁琼脂斜面培养基中培养5～7天，加入3～5ml0.9%无菌氯化钠溶液， 将孢子洗脱。然后，吸出孢子悬液（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能滤过菌丝 的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50～ 100cfu的孢子悬液。 3、验证方法验证试验分四组，至少应进行在3次独立的平行试验，并分别计 算供试品组和对照组试验的菌回收率。 ⑴试验组平皿法计数，取试验可能用的最低稀释级供试液1ml和50～100cfu 试验菌，分别注入平皿中，立即倾注琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿， 按菌落记数法测定其菌数。 ⑵菌液组取上述试验菌液,测定所加的试验菌数。 ⑶供试品对照组取最低稀释级供试液1ml，按菌落计数方法测定所含菌数。 ⑷稀释剂对照组为考察供试液制备过程中微生物受影响的程度，用相应的稀 释液替代供试品，加入试验菌，使最终浓度为每1ml供试液含50～100cfu试验菌， 按试验组的供试液制备方法和菌落计数方法测定其菌数。 试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数 试验组的菌回收率(%)=--------------------------------------×100%

曲克芦丁质量标准

曲克芦丁 本品为曲克芦丁（7,3',4'-三羟乙基芦丁）为主的羟乙基芦丁混合物。按无水物计算，含曲克芦丁（C33H42O19）不得少于80.0%（供注射用）和60.0%（供口服用）。 【性状】本品为黄色或黄绿色粉末；无臭；有引湿性。 本品在水中易溶，在甲醇中微溶，在乙醇中极微溶解，在三氯甲烷中不溶。 【鉴别】（1）取本品20mg，加水20ml、盐酸1 ml和锌粉少量，置水浴上加热，显持续的红色。 （2）取本品约20 mg，加水20 ml和三氯化铝少量，溶液呈亮黄色。 （3）取本品，加水制成每1 ml中含20μg的溶液，照分光光度法（中国药典2010年版二部附录Ⅳ A）测定，在254nm与347nm 的波长处有最大吸收，在283nm的波长处有最小吸收。 （4）在含量测定下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （5）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致（供注射用）（中国药典2010年版二部附录Ⅳ C）。 【检查】 pH值取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含50mg 的溶液，依法测定（中国药典2010年版二部附录Ⅵ H），PH值应为5.0～7.0。 溶液的澄清度取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中含50mg的溶液，溶液应澄清；如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2010年版二部附录Ⅸ B）比较，不得更浓（供注射用）。 其他组分取本品适量，加溶剂（流动相A-流动相B（80:20））溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液；取供试品适量，用溶剂稀释制成每1ml中含曲克芦丁10ug的溶液，作为预试

液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录V D）试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（推荐Venusil MP C18 250mm×4.6mm,5um柱或效能相当的色谱柱）；流动相A为磷酸盐缓冲液（0.1mol/L磷酸二氢钠溶液，用磷酸调节pH值至4.4），流动相B为乙腈；流速为每分钟0.5ml。按下表进行线性梯度洗脱，检测波长为254nm。取曲克芦丁系统适用性对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含50ug的溶液作为系统适用性溶液，取系统适用性溶液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，曲克芦丁峰保留时间约为18分钟，四羟乙基芦丁峰、一羟乙基芦丁峰、芦丁峰、曲克芦丁峰和二羟乙基芦丁峰的相对保留时间分别约为0.5、0.8、0.9、1.0和1.1，上述各峰之间的分离度均应符合要求。取预试液10ul，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使曲克芦丁色谱峰高约为满量程的20%。再取供试品试液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，按峰面积归一化法计算，除曲克芦丁峰外，单个最大组分峰面积不得大于总峰面积的10.0%，其他单个最大组分峰面积不得大于总峰面积的5.0%，各组分峰面积的和不得大于总峰面积的20.0%（供口服用）；一羟乙基芦丁峰、二羟乙基芦丁峰、和四羟乙基芦丁峰面积均不得大于总峰面积的5.0%，其他单个未知组分峰面积不得大于总峰面积的1.0%，未知组分峰面积的和不得大于总峰面积的 4.0%，各组分峰面积的和不得大于总峰面积的,12.0%（供注射用）。 时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%） 0 80 20 30 80 20 33 65 35 45 65 35 48 80 20 58 80 20 残留溶剂环氧乙烷与甲醇取本品1.0g精密称定，置顶空瓶中，

槐米中芦丁的提取

O HO O HO O OH OH O HO OH CH2 HO O OH OH HO O H3C 槐米中芦丁的提取、提纯和鉴定 一、实验目的 1．掌握芦丁提取和提纯的基本原理和方法。 2．掌握重结晶及过滤等基本操作。 3．学习芦丁及槲（hū）皮素的鉴定方法。 二、实验原理 芦丁（Rutin）亦称芸香苷，广泛存在于植物组织中，其中以槐花米和荞麦叶含量较高，槐米中含量高达12~16％，是提取芦丁的最佳原料。芦丁有减少毛细血管通透性的作用，临床上用作毛细血管止血药和高血压病的辅助治疗药物。近年来，芦丁及槲皮素作为抗癌药物的研究，取得了大量成果。芦丁属黄酮苷，其结构如下： 芦丁为淡黄色针状结晶，含有三分子结晶水（C27H36O16·3 H2O），熔点为177～178 ℃，无水物熔点为190~192 ℃，难溶于冷水，微溶于冷乙醇，可溶于热水和热乙醇中。此外，还难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚及石油醚等溶剂。易溶于碱性溶液中呈黄色，酸化后又析出。本实验利用芦丁在冷热水和冷热乙醇中溶解度的差异进行提取与精制。 芦丁在不同溶剂中的溶液度： 芦丁的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259mm，266nm sh，299nm sh，359nm。 槲皮素（Quercetin）是芦丁水解得到的黄酮苷元，是芦丁药用功能的主要部分，大多数黄酮类物质都具有较高的药用价值。 槲皮素为黄色结晶，含两分子结晶水（C15H10O7·2 H2O），熔点313~314 ℃，无水

物熔点为316 ℃。可溶于甲醇、乙酸、吡啶、丙酮、乙酸乙酯等溶剂，不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。在沸腾的无水乙醇中溶解度为4.4 ，在室温下乙醇中的溶解度为0.35 。可利用槲皮素在冷热乙醇中的溶解度差进行提纯。槲皮素的结构式如下： 槲皮素的紫外吸收波长（CH 3OH 溶液）：λmax = 259nm ，266nm ，299nm ，359nm 。 三、实验步骤 （一）芦丁的提取 取15 g 槐米研成粉状，置烧杯中，加水300 mL ，煮沸30分钟（注意适量加水，补充蒸发损失），趁热过滤，滤渣再提取两次（每次用水250 mL ，煮沸15分钟），过滤，合并滤液，放置24小时，使沉淀完全析出。过滤，粗产物用少量水洗涤，得芦丁粗品，烘干，称重，计算提取率。 （二）芦丁的精制 将芦丁粗品研细，倒入圆底烧瓶中，加入100 mL 95％ 乙醇，加热回流至芦丁完全溶解，再加少量活性炭回流10分钟，然后趁热过滤于另一圆底烧瓶中，得黄色澄清溶液。蒸馏滤液并回收乙醇，待溶液剩10～15 mL 时停止加热，将浓缩液倒入小烧杯中，用少量乙醇洗涤烧瓶，将洗涤液合并于小烧杯中，放置使结晶完全析出。过滤（滤液回收），得芦丁精品，烘干，称重，计算产率，测其熔点。 （三）芦丁水解制取槲皮素 取芦丁精品1.0 g 于烧杯中，研细，加30％乙醇水溶液150 mL ，再加浓盐酸4 mL ，加热煮沸30分钟（注意观察）。放置冷却，过滤，水洗至滤液呈中性，烘干，称重，计算产率。测其熔点（如质量不合格，可用75％乙醇重结晶），计算产率。 （四）性质试验 取芦丁及槲皮素精品少许，用95％乙醇溶解，作为样品溶液，进行下列试验，并比较两者试验结果的差异。 1．Molish 反应 取两试样各l mL ，各加入10％α—萘酚溶液10滴，充分摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入1 mL 浓硫酸，勿摇，观察溶液界面的颜色变化。 O OH HO OH OH O OH

芦丁的提取

实验从槐花米中提取芦丁P.198 【实验目的】 通过从槐花米中提取芦丁的实验,掌握用酸碱调节提取中药活性成分的方法. 【实验原理】 槐花米又名槐米,是槐花的花蕾.性凉,味苦,功能凉血,止血,主治肠风,痔血,便血等症.槐花米的主要活性成分是芦丁. 芦丁又名芸香苷,不仅存在于槐花米中(含量达10-20%),在荞麦叶等中,也有存在.结构式如下: 从结构式中不难看出,芦丁实际上是由黄酮与糖(葡萄糖和鼠李糖)形成的苷.由于含有黄酮结构,所以,呈黄色.黄酮部分连有许多酚-OH,故易溶于碱液,酸化复析出,这是本实验采用酸-碱调节法来提取芦丁的依据. 纯芦丁为淡黄色针状结晶,不溶于乙醇,氯仿等有机溶剂,熔点为188℃(理论值),带三个结晶水的熔点为174-178℃. 芦丁能增强毛细管的韧性,适用于毛细管脆弱的患者. 【实验步骤】 称取15g槐花米,用粉碎机研成粉状.置于250ml烧杯中,加入150ml饱和石灰水[1],于石棉网上加热至沸,并不断搅拌,煮沸15分钟后,抽滤[2].滤渣再用100ml饱和石灰水煮沸10分钟,抽滤. 合并两次滤液,用5%盐酸调节至pH3-4[3].放置1-2小时,使沉淀完全,抽滤,并用水洗涤2-3次,即得芦丁粗品. 将粗品置于250ml的烧杯中,加水150ml,在石棉网上加热至沸,不断搅拌,并慢慢加入约50ml 饱和石灰水,调节溶液pH值为8-9,待沉淀溶解后,趁热过滤.滤液置于250ml的烧杯中,用5%盐酸调节至pH4-5,静置30分钟.芦丁即以浅黄色结晶析出,抽滤,并用水洗涤1-2次,烘干,称重[4],测熔点. 【注解】 [1] 加入饱和石灰水既可达到用碱液提取芦丁的目的,同时,还可除去槐花米中的多糖粘液质. [2] 抽滤时,宜先小心倾出上层清液,再慢慢倒出带结晶的溶液,以防结晶过早堵住滤纸孔.后面的抽滤均需如此. [3] 注意小心滴加,约需7-8ml稀盐酸.如果滴加过多,pH值过低,芦丁(苷类)则易水解. [4] 产量约为1.5g. 【实验结果】 产品的外观性状 产量 【问题与讨论】 1 本实验中,开始用饱和石灰水提取,再用酸调节到pH3-4,这段pH值范围较宽;后来又用饱和石灰水调节到pH3-4,再用酸调节到pH4-5,这段pH值范围较窄.为什么要这样做如果反过来(先调窄后调宽)行不行 2 在一开始用酸调节pH值时,某生不小心,加入的稀盐酸过量,pH值小于3-4,请问对实验会产生什么后果为什么 3 根据这个实验,请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的适用条件及一般原理.

曲克芦丁片增加薄膜衣规格药物稳定性研究的试验资料及文献资料

药品补充申请—5、10 申报资料5-7 变更药品规格（增加薄膜衣片） 变更直接接触药品的包装材料或者容器（薄膜衣片增加铝塑泡罩包装） 药物稳定性研究的试验资料 及文献资料 xxxx制药有限公司 20xx年03月

药物稳定性研究的试验资料及文献资料 1、稳定性考察方法 1.1、试验仪器 高效液相色谱仪 XXX xxxx有限公司 分析天平 xxx 上海天平仪器厂 智能溶出试验仪 ZRS-8G 天津大学无线电厂 紫外可见分光光度仪上海分析仪器厂 1.2、药品 供试样品：曲克芦丁片（铝塑泡罩式包装及固体药用塑料瓶包装）自制批号为：xx0510 xx0511 xx0512 2、稳定性试验方法 2.1、加速试验 将曲克芦丁片(xx0510 xx0511 xx0512)（铝塑泡罩式包装及固体药用塑料瓶包装），在温度40±2℃，相对湿度75%±5%的条件下放置6个月，分别于1个月、2个月、3个月、6个月末取样一次，按稳定性重点考察项目（性状、其他羟乙基衍生物、溶出度、崩解时限、含量）检测。 2.2、长期试验 将曲克芦丁片(xx0510 xx0511 xx0512)（铝塑泡罩式包装、固体药用塑料瓶包装）在温度25±2℃，相对湿度60%±10%的条件下放置6个月。每3个月取样一次，分别于0个月、3个月、6个月、9个月取样，按稳定性重点考察项目（性状、其他羟乙基衍生物、溶出度、崩解时限、含量）进行检测。12个月以后，分别于18月、24月、36月取样进行检测。将结果与0月比较以确定药品的有效期。 3、检验项目及结果 3.1、加速试验 20xx年05月16日到20xx年11月20日对曲克芦丁片（铝塑泡罩式包装及固体药用塑料瓶包装）进行了加速试验，对性状、其他羟乙基衍生物、溶出度、崩解时限、含量等项目进行了检测，试验结果见表1、表2、表3、表4-1、表4。HPLC图谱见附件12、13、14、15。

曲克芦丁脑蛋白水解物注射液(详细参考)

核准日期：2011年01月26日 药品名称： 【通用名称】曲克芦丁脑蛋白水解物注射液 【商标名称】源之久 【英文名称】Troxerutin and Cerebroprotein Hydrolysate Injection 【汉语拼音】Qu Ke Lu Ding Nao Dan Bai Shui Jie Wu Zhu She Ye 成份： 本品为复方制剂，为曲克芦丁与猪脑提取物制成的灭菌水溶液。其组份为曲克芦丁 (C33H42O19)。活性多肽、多种氨基酸、核酸等。每1ml含曲克芦丁(C33H42O19)应为40mg，含总氮应为0.50mg，含多肽应为1.91mg，含核酸应不低于0.8mg。辅料：聚山梨酯80、注射用水。 性状： 本品为黄色或浅棕黄色的澄明液体。 适应症： 用于治疗脑血栓、脑栓塞、脑痉挛等急慢性脑血管疾病，以及颅脑外伤及脑外伤及脑血管疾病(脑供血不全、脑梗塞)所引起的脑功能障碍等后遗症；闭塞性周围血管疾病、血栓性静脉炎、毛细血管出血以及血管通透性升高引起的水肿。 规格： 2ml 用法用量： 肌内注射。一次2～4ml，一日2次，或遵医嘱。 静脉滴注，一次10ml，一日1次，稀释于250～500ml0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液中使用。20日为一个疗程，可用1～3个疗程，每疗程间隔3～7天，或遵医嘱。 不良反应： 偶可发生寒颤、轻度发热等反应。个别病例可引起过敏性皮疹。调慢滴速或停药后症状可自行消失。 禁忌： 对本品过敏进禁用。 严重肾功能不全者禁用。 癫痫持续状态或癫痫大发作患者禁用。 注意事项： 过敏体质者慎用。 本品不能与平衡氨基酸注射液在同一瓶中输注，当同时使用氨基酸输液时，应注意可能出现氨基酸不平衡。 孕妇及哺乳期妇女用药： 目前尚无有关妊娠妇女使用本品的临床研究，尚不足以对妇女妊娠期间应用的安全性进行评价。

曲克芦丁注射液

曲克芦丁注射液 药品名称： 【通用名称】?曲克芦丁注射液 【商标名称】?维诺 【英文名称】?Troxerutin Injection 【汉语拼音】?Qu Ke Lu Ding Zhu She Ye 成份： 本品主要成份：为曲克芦丁 其化学名称为：3＇，4＇，7-三[0-(2-羟乙基)-5羟基黄酮-3]-芸香苷。 结构式：? 分子式：C33H42O19? 分子量： 所属类别： >>?>>? >>?>>?>>? 性状： 本品为黄色或浅棕黄色的澄明液体。 适应症： 用于闭塞性综合征、血栓性静脉炎、毛细血管出血等。 规格： 10ml：300mg 用法用量： 肌内注射。一次60～150mg，一日2次。20日为1疗程，可用1～3个疗程，每疗程间隔3～7天。 静脉滴注。一次240～360mg，一日1次。用5～10%葡萄糖注射液或低分子右旋糖酐注射液稀释后滴注。 不良反应： 尚未见有关不良反应报道。 禁忌：

对本品过敏者禁用。 注意事项： 1．用药期间避免阳光直射、高温及过久站立。 2．当药品性状发生改变时禁止使用。 孕妇及哺乳期妇女用药： 尚不明确。 药物相互作用： 0. 尚不明确。 药理毒理： 本品能抑制血小板的聚集，有防止血栓形成的作用。同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水肿。药代动力学： 血浆蛋白结合率为30%左右，消除相半衰期(t1/2β)10～25小时，可能存在肠肝循环，代谢产物70%随粪便排出体外。 贮藏： 遮光，密闭，在阴凉处保存。 包装： 安瓿装。5支/盒。 有效期： 暂定二年。 批准文号： 国药准字H

芦丁提取

实验一槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定 [目的要求] 1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。 2．掌握槲皮素的制备原理及操作。 3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用 4．通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。 [实验原理] 芦丁（rutin）：C27H30O16·3H2O，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三 分子水）；188℃（无水物）。难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。 槲皮素（quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶，mp313～314℃（2分 子结晶水），316℃（无水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23）， 可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。 +鼠李糖+葡萄糖 芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉 淀析出，可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及 葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的 鉴定。 [实验内容] 一、芦丁的提取分离及精制 方法⑴ 槐米粗粉（50g） 置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加热，并维持pH8～9 煮沸20分钟，趁热滤过

滤液药渣 用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8～9 趁热滤过 滤液药渣（×） 合并 在60℃～70℃下用浓HCl调pH至4 ～5 静置，抽滤 沉淀 低温（80℃）干燥，称重。按1：200的比例加水， 加热使溶解，趁热滤过 滤液 静置，抽滤，减压干燥，计算收率 芦丁精制品 方法⑵利用芦丁在冷热溶剂中的溶解度不同进行提取分离。 槐米粗粉 沸水煮沸5～10分钟，反复2次 趁热滤过 水提取液药渣 放冷 沉淀析出（粗芦丁） 热水重结晶 或乙醇重结晶 芦丁结晶 二、槲皮素的制备 称取精品芦丁1g 置250ml烧瓶中 加2%H2SO4200ml 加热回流1小时 放冷，静置，抽滤 酸性滤液沉淀

实验槐米中芦丁的提取分离和鉴定

实验一槐米中芦丁的提取、分离和鉴定 一、概述 槐米系豆科植物槐树（Sophora japonica L.）的花蕾（槐米）。具有清热、凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风热目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。近年来被用作治疗高血压的辅助药物。 药理实验证明，槐花米具有调节毛细血管的渗透作用，抗炎作用，解痉、抗渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。槐花米中主要含有黄酮苷，皂苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁(Rutin)含量最高，达12～20%。 主要化学成分的结构及理化性质： 芦丁（rutin）：C 27H 30 O 16 ·3H 2 O，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子 水）；188℃（无水物）。难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。 槲皮素（quercetin）：C 15H 10 O 7 ·2H 2 O，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结 晶水），316℃（无水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。 二、实验部分 （一）实验目的 1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。 2、掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。 3、掌握芦丁与槲皮素的鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使用方法。 （二）实验原理 1、芦丁的提取原理：芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性，故用碱提酸沉法。 2、芦丁的分离原理：芦丁在沸水中溶解，在冷水中析出。 3、芦丁的鉴定原理：芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用Molish反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析，Rf值也应不同。 （三）实验药材、仪器与试剂 1、药材：槐米50g(每组)。

曲克芦丁片微生物限度验证报告

类别：验证文件编号：V-TM-xxx 部门：验证中心 曲克芦丁片 微生物限度检查验证报告 起草人：年月日 审核人：年月日批准日期：年月日 xxxx制药有限公司 实施日期：年月日

目录 一、验证方案及参考资料目录 二、验证内容 三、验证评价 四、验证小结及结论 五、验证报告的审核 六、验证报告的批准 七、验证合格证书的发放 一、验证方案及参考资料目录 1、验证方案（见附件1） 2、参考资料目录《中国药典》20xx年版二部 二、验证内容 品名：曲克芦丁片

(一)细菌、霉菌与酵母菌计数方法的验证 1、验证用菌株大肠埃希菌（Escherichia）[CMCC(B)44 102]，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26 003〕，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC(B) 63 501〕，白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F) 98 001〕，黑曲霉(Aspergillus niger) 〔CMCC(F)98 003〕。 2、菌液制备接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，35℃培养24小时,接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，27℃培养24小时。取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液,做活菌计数用。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基,27℃培养5～7天，加入3～5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出孢子悬液（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能滤过菌丝的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含孢子数50～100cfu的孢子悬液,做活菌计数用。 3、供试液的制备取供试品10g,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1∶10的供试液。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释成1∶100的供试液。 4、验证方法验证试验分四组，至少应进行在3次独立的平行试验，并分别计算供试品组和对照组试验的菌回收率。 ⑴试验组取1ml 1:10供试液和1ml 含菌数为50～100cfu菌悬液，分别注入2个平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，待凝固后倒置培养。细菌：35℃培养48小时；霉菌和酵母菌数：27℃培养72小时。 ⑵菌液组取上述试验菌液各1ml,分别注入2个平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，待凝固后倒置培养。细菌：35℃培养48小时；霉菌和酵母菌数：27℃培养72小时。 ⑶供试品对照组取1：10供试液1ml，分别注入2个平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，待凝固后倒置培养。细菌：35℃培养48小时；霉菌和酵母菌数：27℃培养72小时。 ⑷稀释剂对照组为考察供试液制备过程中微生物受影响的程度，用相应的稀释液替代供试品，加入试验菌，使最终浓度为每1ml供试液含50～100cfu 试验菌，按试验组的供试液制备方法和菌落计数方法测定其菌数。 5、计算公式： 试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数 试验组的菌回收率（%）=------------------------------------------×100% 菌液组平均菌落数 稀释剂对照组平均菌落数 稀释剂对照组的菌回收（%）=------------------------×100%

血塞通与曲克芦丁治疗90例脑梗塞的临床效果对比分析

血塞通与曲克芦丁治疗90例脑梗塞的临床效果对比分析 【摘要】目的：本文研究的是血塞通与曲克芦丁治疗脑梗塞的临床效果。方法：本文选择了我院在2016-2017年接收的90例脑梗塞患者，将其分为了血塞通治疗组与曲克芦丁治疗组两组，每组各有45例患者，血塞通治疗组患者应用的是血塞通治疗方式，曲克芦丁治疗组应用的是曲克芦丁治疗方式，随后对比两组患者的治疗有效率和不良反应发生率。结果：相对于曲克芦丁治疗组患者而言，血塞通治疗组患者的治疗有效率较高，且不良反应发生率较低。 P<0.05，认为差异具有统计学意义。结论：相对于曲克芦丁治疗方式而言，血塞通治疗脑梗塞的临床效果更加良好。 【关键词】血塞通；曲克芦丁；脑梗塞；临床效果 【中图分类号】R944 【文献标志码】A 【文章编号】1005-0019（2018）05-240-01 脑梗塞属于一种危险性较强且发病较为迅速的疾病，具有极高的致残率和致死率，这给患者的健康程度和生活质量造成了严重影响，为此，医护人员需要选择安全性和针对性较强的药物，实现对脑梗塞患者的良好治疗[1]。本文选择了我院在2016-2017年接收的90例脑梗塞患者，研究了血塞通

与曲克芦丁治疗脑梗塞的临床效果。 1 资料及方法 1.1 一般资料本文选择了我院在2016-2017年接收的90例脑梗塞患者，将其分为了血塞通治疗组与曲克芦丁治疗组两组，每组各有45例患者。其中，血塞通治疗组有男性患者25例，女性患者20例，患者患病病程均在 2.5-14.1月之间；曲克芦丁治疗组有男性患者24例，女性患者21例，患者患病病程均在2.3-14.2月之间。两组患者在病程和性别之间的一般资料不存在显著差异。 1.2 实验方法血塞通治疗组患者应用的是血塞通治疗方式，曲克芦丁治疗组应用的是曲克芦丁治疗方式，具体如下。 两组患者共同应用的是脑康复和甘露醇治疗，不同的是，血塞通治疗组患者在此基础上应用了600mg血塞通混合250ml的生理盐水治疗，静脉注射频率为每天一次；曲克芦丁治疗组在此基础上应用了250mg曲克芦丁治疗，静脉注射频率为每天一次[2]。两组患者的治疗周期均为两周，此外，在实际的治疗过程中，一户人员需要结合患者的实际情况和治疗效果来变化治疗药物剂量。 1.3 观察指标本次实验选择两组患者的治疗有效率和不良反应发生率为观察指标。其中，治疗有效率统计分为了显效（患者肌肉力量提高了两级，且生理功能基本恢复）、

医院药品处方集

药品处方集 一．抗微生物药 （一）青霉素类 青霉素注射剂 氨苄西林舒巴坦钠注射剂 阿莫西林口服常释剂型 阿莫西林克拉维酸钾口服常释剂型 氨苄西林钠注射剂 （二）头孢菌素类 头孢唑林注射剂 头孢氨苄口服常释剂 头孢呋辛口服常释剂型 注射剂头孢哌酮注射剂 头孢曲松注射剂 头孢噻肟注射剂 头孢哌酮舒巴坦钠注射剂 头孢克肟注射剂 口服常释剂型头孢克洛颗粒口服常释剂型（三）氨基糖苷类 阿米卡星注射剂 庆大霉素注射剂 （四）大环内酯类 红霉素口服常释剂型 注射剂 软膏剂阿奇霉素口服常释剂型 颗粒剂罗红霉素胶囊口服常用剂型 阿奇霉素片口服常用剂型（五）其他抗生素 林可霉素注射剂 克拉霉素注射剂 （六）喹若酮类 氧氟沙星注射剂 诺氟沙星口服常释剂型 加替沙星注射剂 左氧氟沙星口服常释剂型 注射剂 （七）抗结核病药 异烟肼口服常释剂型

（八）抗真菌药 氟康唑口服常释剂型 制霉素口服常释剂型 达克宁外用乳膏剂型（九）抗病毒药 阿昔洛韦口服常释剂型 炎琥宁注射剂 利巴韦林口服常释剂型 颗粒剂、注射剂 含片 （十）硝基咪唑类 牙周康口服常用剂型 替硝唑注射剂 二．抗寄生虫病药 （一）阿米巴病药及抗滴虫病药 甲硝唑口服常释剂型 注射剂 （二）驱肠虫药 阿苯达唑口服常释剂型三．麻醉药 （一）局部麻醉药 盐酸利多卡因注射剂四．镇痛、解热、抗炎、抗风湿、抗痛风药 （一）镇痛药 去痛片口服常释剂型（二）镇痛、抗炎、抗风湿药 氨咖黄敏胶囊口服常释剂型 对乙酰氨基酚口服常释剂型 阿司匹林口服常释剂型 布洛芬缓释胶囊口服常释剂型 去痛片口服常用剂型 快克口服常用剂型 感康口服常用剂型 连花清瘟胶囊口服常释剂型（三）解热药、 复方氨林巴比妥注射剂 清开灵注射液注射剂 五．神经系统药 （一）脑血管病用药及降颅压药 银杏叶提取物注射剂 口服常释剂型银杏达莫（金纳多）注射剂 奥扎格雷钠注射剂 舒血宁注射剂

槐米中芦丁的提取

槐米中芦丁的提取、提纯和鉴定 一、实验目的 1．掌握芦丁提取和提纯的基本原理和方法。 2．掌握重结晶及过滤等基本操作。 3．学习芦丁及槲（hū）皮素的鉴定方法。 二、实验原理 芦丁（Rutin）亦称芸香苷，广泛存在于植物组织中，其中以槐花米和荞麦叶含量 较高，槐米中含量高达12~16％，是提取芦丁的最佳原料。芦丁有减少毛细血管通透性的作用，临床上用作毛细血管止血药和高血压病的辅助治疗药物。近年来，芦 丁及槲皮素作为抗癌药物的研究，取得了大量成果。芦丁属黄酮苷，其结构如 下： 芦丁为淡黄色针状结晶，含有三分子结晶水（C27H36O16· 3 H2O），熔点为177～178 ℃，无水物熔点为190~192 ℃，难溶于冷水，微溶于冷乙醇，可溶于热水和热乙醇中。此外，还难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚及石油 醚等溶剂。易溶于碱性溶液中呈黄色，酸化后又析出。本实验利用芦丁在冷热水和 冷热乙醇中溶解度的差异进行提取与精制。 芦丁在不同溶剂中的溶液度： 水CH3OH CH3CH2OH 吡啶

冷0.0013 l.0 0.36 8.5 热0.55 11.2 3.5 易溶 芦丁的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259mm，266nm sh，299nm sh，359nm。 槲皮素（Quercetin）是芦丁水解得到的黄酮苷元，是芦丁药用功能的主要部分，大多数黄酮类物质都具有较高的药用价值。 槲皮素为黄色结晶，含两分子结晶水（C15H10O7·2 H2O），熔点 313~314 ℃，无水物熔点为316 ℃。可溶于甲醇、乙酸、吡啶、丙酮、乙酸乙酯 等溶剂，不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。在沸腾的无水乙醇中溶解度为 4.4 ，在室温下乙醇中的溶解度为0.35 。可利用槲皮素在冷热乙醇中的溶解度差进行提纯。槲皮素的结构式如下： 槲皮素的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259nm，266nm，299nm ， 359nm。 三、实验步骤 （一）芦丁的提取 取15 g槐米研成粉状，置烧杯中，加水300 mL，煮沸30分钟（注意适量加水，补充蒸发损失），趁热过滤，滤渣再提取两次（每次用水250 mL，煮沸15分钟），过滤，合并滤液，放置24小时，使沉淀完全析出。过滤，粗产物用少量水 洗涤，得芦丁粗品，烘干，称重，计算提取率。

曲克芦丁片说明书

符瑞曲克芦丁颗粒主要成分是3—羟乙基芦丁，是我国首次从“符瑞草”当中提取出来的单一成份，主要功能是修复静脉瓣膜，用与静脉曲张，国家2000版药典首次收集。3-羟乙基芦丁是上海医药工业研究院，1985年根据国外经验，采用当时世界顶级的“小分子切割技术”从植物当中提取专攻静脉血管的3-羟乙基芦丁，并且相继在上海医科大学附属医院，上海第三人民医院，成都市第一人民医院，成都市第三人民医院等四家医院对静脉曲张（慢性静脉功能功能不全）进行临床观察，效果确切。并报请当时的国家药品管理局，经过严格审查，被授予正规批准文号“国药准字20056225”主治：慢性静脉功能不全所致的静脉曲张（正规批件原文内容）。是我国第一个被批准专治静脉曲张的专业药品。在此之前，在所有的医院和药房没有一种药物明确标明治疗“静脉曲张”。不少医生甚至专家都认为静脉曲张必须手术，药物很难起到作用。现在符瑞曲克芦丁颗粒的问世，使患上静脉曲张的患者，可以提前进行药物治疗，不用无奈的等待发展到最后的地步，再去手术治疗。 【通用名称】 曲克芦丁颗粒 【商品名称】符瑞颗粒 【拼音名】 Qukeluding Keli 【英文名】 Troxerutin Granules 【成份】 3-羟乙基芦丁(C33H42O19)应为标示量的90.0%～110.0%。 【性状】 本品为黄色可溶性颗粒；有橘子香味；味略甜。 【适应症】 适用于慢性静脉功能不全所致的静脉曲张。 【用法用量】 口服：饭后服用；一日1次，一次1袋。 【不良反应】偶有胃肠反应，饭后服用即可 【禁忌】：冷水冲击病区 【注意事项】：服药期间避免阳光直射、高温及过久站立。 【关联疾病】以静脉功能不全为主包括：静脉血栓，静脉瓣膜合闭不严 先天性静脉畸形肢体肥大综合征，眼眶内静脉曲张，单纯性下肢静脉曲张 【孕妇及哺乳期妇女用药】：尚不明确。 【儿童用药】遵从医嘱适量减半。

【医疗药品管理】西药药名大全

西药药名大全 苄星青霉素（长效青霉素,苄星青霉素）氨咖黄敏胶囊（伤风胶囊） 阿莫西林（羟氨苄青霉素）氯芬黄敏片（感冒通） 氨苄西林（安比西林,必仙素）甲硝唑芬布芬（牙周康） 氨苄西林钠（氨苄青霉素钠、舒他西林）人工牛黄甲硝唑（牙痛安） 哌拉西林钠（氧哌嗪青霉素）糠甾醇（牙周宁） 氧氟沙（氟嗪酸）乙酰半胱氨酸（痰易净、易咳净） 诺氟沙星（氟哌酸、FPA）克仑特罗（咳喘素） 依诺沙星（氟啶酸）地喹氯铵含片（克菌定） 阿米卡星（丁胺卡那、丁卡）二羟丙茶碱（喘定） 环丙沙星（环丙氟哌酸、丙氟哌酸）二氧丙嗪（克咳敏） 头孢噻吩（先锋Ⅰ、头孢霉素钠）复方胆氨（喘安） 头孢噻肟钠（头孢氨噻肟、先锋噻肟）枸橼酸喷托维林（咳必清） 头孢唑林钠（先锋V、先锋啉）硫酸沙丁胺醇（舒喘灵、喘乐宁） 头孢氨苄（苯甘孢霉素、头孢力新、先锋霉素IV）异丙肾上腺素（治喘灵、喘息定）头孢氨苄甲氧苄啶（复方头孢氨苄）苯丙哌林（咳快好） 头孢呋辛（头孢呋肟、头孢呋新）羧甲司坦片（化痰片） 头孢克洛（头孢克罗、头孢氯氨苄）麻黄碱苯海拉明（百喘朋） 头孢拉定（先锋VI、头孢环已烯）复方鲜竹沥（去痰灵） 头孢哌酮钠（先锋必、头孢菌素钠）溴己新（必嗽平） 头孢羟氨苄（羟氨苄头孢菌素）苯定那敏片（止咳定喘片） 头孢曲松钠（头孢三嗪、菌必治）茶碱麻黄碱片（息喘灵） 盐酸大观霉素（淋泌治、奇霉素、壮观霉素）愈酚甲麻那敏糖浆（息可宁糖浆） 妥布霉素（妥布拉霉素、托普霉素、托霉素） 复方愈创木酚磺酸钾口服溶液（伤风止咳糖浆、非那根糖浆） 吉他霉素（柱晶白霉素）溴丙胺太林（普鲁本辛） 土霉素（地霉素、氧四环素）盐酸麻黄碱（盐酸麻黄素） 乙酰螺旋霉素（醋酸螺旋霉素）天蚕镇痛片（头痛片） 多西环素（强力霉素长效土霉素）对乙酰氨基酚（扑热息痛） 依托红霉素（无味红霉素）阿咖酚散（头痛粉） 交沙霉素（角沙霉素） 吲哚美辛（消炎痛） 克拉霉素（甲红霉素、充红霉素） 阿斯林（复方克拉维酸） 棒酸（苯丙氨酯.强筋松） 克林霉素（氯洁霉素、氯林可霉素） 氨酚咖匹林片（正痛片） 林可霉素（洁霉素） 奈福泮（平痛新） 麦迪霉素（美地霉素） 萘普生（消痛灵） 吡哌酸片（PPA） 吡罗昔康片（炎痛喜康）

2010版药典标准提高-曲克芦丁氯化钠注射液

曲克芦丁氯化钠注射液 Qukeluding Lühuana Zhusheye Troxerutin and Sodium Chloride Injection 本品为曲克芦丁与氯化钠的灭菌水溶液。含曲克芦丁（C 33H 42O 19）应为标示量的90.0%~110.0%；含氯化钠（NaCl ）应为标示量的95.0%~105.0%。 【性状】本品为淡黄色至黄色或淡黄绿色至黄绿色的澄明液体。 【鉴别】（1）取本品适量，用水稀释制成每1ml 中约含曲克芦丁15μg 的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录Ⅳ A ）测定，在254nm 与347nm 的波长处有最大吸收，在283nm 的波长处有最小吸收。 （2）在曲克芦丁含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （3）本品显钠盐的鉴别（1）与氯化物的鉴别（1）反应（中国药典2010年版二部附录Ⅲ）。 【检查】pH 值 应为5.5~7.0（中国药典2010年版二部附录Ⅵ H ）. 其他组分 取本品适量，用含量测定项下流动相稀释制成每1ml 中约含曲克芦丁1mg 的溶液，作为供试品溶液；照曲克芦丁其他组分项下的方法测定，按峰面积归一化法计算，除曲克芦丁峰外，一羟乙基芦丁峰、二羟乙基芦丁峰和四羟乙基芦丁峰面积均不得大于总峰面积的5.0%，其他单个未知组分峰面积不得大于总峰面积的1.0%，未知组分峰面积的和不得大于总峰面积的4.0%，各组分峰面积的和不得大于总峰面积的12.0%。 渗透压摩尔浓度 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录 Ⅸ G ），渗透压摩尔浓度应为285～310mOsmol/kg 。 异常毒性 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ C ） ，按静脉注射法给药，应符合规定。 细菌内毒素 取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ E ），每1ml 中含内毒素的量应小于0.50EU 。 无菌 取本品，用薄膜过滤法处理后，选用金黄色葡萄球菌作为阳性对照菌，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ H ），应符合规定。 其他 应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版二部附录Ⅰ B ）。 【含量测定】 曲克芦丁 照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录Ⅴ D ） 征 求 意 见 稿

复习指导：曲克芦丁使用方法

复习指导：曲克芦丁使用方法 药理： 能抑制血小板的凝集，有防止血栓形成的作用。同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水肿。对急性缺血性脑损伤有显著的保护作用。 [药理作用]本品系芦丁经羟乙基化制成的半合成黄酮化合物，具有抑制红细胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同时能增加血中氧的含量，改善微循环，促进新血管生成以增进侧支循环。它对内皮细胞有保护作用，能对抗5-羟色胺和缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管的抵抗力，降低毛细血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水肿的作用，并有抗放射性损伤、抗炎症、抗过敏、抗溃疡等作用。 药动学 口服吸收良好，口服本品300mg后，达峰时间为2～9h，与血浆蛋白结合率小于30％。主要由胆汁排出，尿中排泄量仅占3％～6％。 适应症：

适用于脑血栓形成和脑栓塞所致的偏瘫、失语以及心肌梗塞前综合征、动脉硬化、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、静脉曲张、血管通透性升高引起的水肿等。 适用于脑血栓形成所致的偏瘫、失语、动脉硬化、梗死前综合征、血栓性静脉炎、静脉曲张、慢性静脉功能不全、中心性视网膜炎、糖尿病性视网膜炎及血管通透性升高引起的 水肿等。本品经临床应用表明，应用范围广，疗效好，尤其对治疗闭塞性脑血管病较好。 用法用量： 口服，每次0.3g，一日2-3次；肌注，每次0.1-0.2g，一日2次，20日为一疗程，可用1-3疗程，每疗程隔3-7天。静滴，每天一次0.4g，用5-10%葡萄糖液稀释。 [用法及用量]口服，每次0.2～0.3g，每日3次。肌肉注射，每次0.1～0.2g，每日2次。静脉滴注，每次0.4g，每日1次，用5％～10％葡萄糖注射液稀释。30日为一个疗程，可用1～3个疗程，每个疗程间隔3～7日。儿童用量酌减。 一旦有过敏反应出现，应立即停药。 密闭，阴凉、干燥处保存。（考试大网站整理） [剂型与规格]片剂：100mg／片。注射剂：100mg/2ml。

实验一至三芦丁提取纯化及分析2014修正终版

实验名称指导教师 实验1 芦丁的提取及水解制备槲皮素周延 实验2 高效液相色谱法芦丁及槲皮素标准曲线的测定周延 实验3 芦丁的大孔吸附树脂纯化梁浩 13-4人一组，每批9组（4个班学委自己协调分批，如有事，可与其他班同学调换。数据汇总到药1学委处，下周五7月4日前药1学委把每批的名单发我）以小组为单位进行实验。 2实验二分为2部分，实验二-1为标准曲线制作，实验二-2为样品测定。两次实验必须使用同一台色谱仪，否则实验结果无效。 3每组带洗净的250ml空饮料瓶1个。 4工艺实验教师起辅助作用，同学根据参考资料自己完成实验。提前预习关键点，设计实验记录表格，会检查预习笔记。实验1的条件为建议条件，可根据查阅文献，进行条件修改（报告中需说明理由和文献依据）。 5实验后原始记录需进行登记，收拾好老师检查后方可离开。 1 / 16

63个实验分别写报告，每个人的三份订在一起。完成实验后一起以班为单位尽早上交。最迟请于7月19日上午9点前交到制药工程办公室科西310。 实验一芦丁的提取及水解制备槲皮素 一、实验目的和要求 通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。 通过测定芦丁和槲皮素含量巩固色谱仪使用方法。 2 / 16

二、实验原理 （一）概述 芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。芦丁有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。 芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。芦丁在酸性条件下可水解得到槲皮素。 利用芦丁易溶于碱性水，难溶于酸性水，可用碱性水提取，再调至酸性，黄酮苷（芦丁）即可沉淀析出。提取过程中为了防止芦丁氧化可加入焦亚硫酸钠抗氧化，并加入硼砂保护邻二酚羟基不被破坏。得到粗芦丁后利用其可溶于热水、难溶于冷水的性质重结晶进行精制。 三、仪器和试剂 1实验设备与仪器 烧瓶，温度计，布氏漏斗，抽滤瓶，循环真空泵，恒温加热及磁力搅拌装置，试管，量筒，烧杯，干燥箱，冷凝管，HPLC 2实验材料与试剂 槐花米，硼砂，焦亚硫酸钠，氧化钙，无水乙醇，甲醇，硫酸，盐酸，精确pH试纸， 四、实验内容 1 芦丁的提取 （1）将80g槐米，500mL（pH8-9）澄清石灰水，1.2g硼砂，2.4g焦亚硫酸钠一起置于1000mL圆底烧瓶中，65℃搅拌提取55min，注意添加蒸馏水及烧瓶中颜色的变化（深棕黄色），趁热过滤。 （2）滤下的槐米再次加入400mL澄清石灰水，0.9g硼砂和1.8g焦亚硫酸钠，65℃搅拌提取50min，趁热过滤。 （3）合并两次滤液，用浓HCl调pH至4，置于冰箱中。 2 芦丁的精制 3 / 16