培养细胞形态分类
培养细胞形态分类
体外培养细胞大多培养在瓶皿等容器中，根据它们是否能贴附在支持物上生长的特性．可分为贴附型和悬浮型两大类。
1．贴附型
(图2一1) 这类细胞在培养时，能贴附在支持物表面生长。大多数培养细胞呈贴附型生长；只赖于贴附才能生长的细胞称贴附型细胞或锚着依存型细胞。关于细胞的贴附过程和机制将另加叙述。当单细胞贴附在支持物上后，易失去它们在体内时原有的特征，细胞分化现象常变得不显著。在形态上常表现单一化的现象，并常反映其胚层起源，呈现类似前述返祖现象。如来源于内、外胚层的细胞多呈上皮细胞型；来自中胚层的细胞则易呈成纤维细胞型(这种现象又与供体的年龄有密切的关系，原供体越幼稚则“返祖”越明显)；显然与细胞分化有关。由于上述原因，体外培养细胞形态常表现有一般化的倾向。因此在判定细胞形态时，很难再按体内细胞标准确定,仅能大致作如下分类。
(1)成纤维细胞型：本型细胞因形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名：细胞体呈梭形或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质向外伸出2—3个长短不同的突起。细胞在生长时多呈放射状、火焰状或漩涡状走行：除真正的成纤维细胞外．凡由中胚层间充质起源的组织．如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本类形态。另外在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称为成纤维细胞。因此组织培养中的成纤维细胞一词是一种习惯上的称法．此点与体内细胞不同。
(2)上皮细胞型：本型细胞具有扁平不规则多角形，中有圆形核．细胞紧密相连成单层膜：细胞增殖数量增多时，整块上皮膜随之移动；处于上皮膜边缘的细胞多与膜相连，很少脱离细胞群单独活动。起源于内、外胚层细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝、胰和肺泡上皮等组织培养时，皆呈上皮型形态。上皮型细胞生长时，尤其是外胚层起源的细胞．细胞之间常出现所谓拉网现象，即在构成上皮膜状生长的细胞群中一些细胞常相互分离卷曲，致使上皮细胞膜中形成网眼状空洞。拉网的形成可能与细胞分泌透明质酸酶有关。
(3)游走细胞型：本型细胞在支持物上散在生长．一般不连接成片。细胞质经常伸出伪足或突起，呈活跃的游走或变形运动．速度快而且不规则。此型细胞不很稳定，有时亦难和其他型细胞相区别。在一定条件下，由于细胞密度增大连接成片，可呈类似多角形，或因培养基化学性质变动等，也可能变成成纤维细胞形态。
(4)多形细胞型：除上述三型细胞外，还有一些组织和细胞，如神经组织的细胞等，难以确定它们规律的形态，可统归人多形型细胞。
2．悬浮型
有的细胞在培养时不贴附于支持物上，而呈悬浮状态生长。如某些癌细胞和血液白细胞可呈悬浮型。细胞悬浮生长时．胞体为圆形，观察时不如贴附型方便。其优点是细胞悬浮在培养液中生长。生存空间大．允许长时间生长．能繁殖大量细胞。便于做细胞代谢等研究。
对组织培养细胞形态的分类，主要根据细胞在培养中的表现以及描述上的方便而定。当细胞处于较好的培养条件时．形态上有相对的稳定性．在一定程度上能反映细胞的起源，正常和异常(恶性)也可能区别开来，故可作为判定细胞生物学性状的一个指标或依据。但必须意识到．培养细胞的一般形态．并不是一项很可靠的指标．原因是它可受很多因素的影响而发生改变，当培养条件发生变化．如反复开关培养箱．不但影响温度．使之波动，还能放出培养箱内的CO2，使培养基呈碱性。还有支原体污染、培养基pH改变等都可使细胞形态发生变化。如HeLa细胞原本属于上皮型，但在过酸或过碱的情况下可变成梭形，pH适宜时又可恢复。从细胞接种到细胞密度增大的一代生长过程中。细胞形态表现也有所不同，如上皮型细胞在刚接种后不久，因细胞数量较少，细胞可能呈星形或三角形。只有当细胞数量增多后，多角形态特点和上皮膜状结构才逐渐变得明显起来。另外贴附型和悬浮型细胞性质也不是绝对一成不变的；在一定条件下，悬浮型细胞可呈贴附状生长，贴附型细胞也可呈悬浮状生长。当细胞发生转化后，细胞形态变化更大；成纤维细胞转化后可变成上皮形态。另外在一些类型相同的细胞之间，如癌细胞等．也很难在形态上看出有什么明显区别。
由于培养细胞形态的易变性．在利用形态学指标判定细胞类型和其他一些性状时应持谨慎态度。不应仅仅依赖光学显微镜观察的结果．必要时须做超微结构和其他方法的分析，如电镜下观察到桥粒时，可确认为上皮型细胞，因桥粒是上皮细胞所特有的结构．但在光镜下不可见，只有在电子显微镜下才能观察到。因此电子显微镜所提供的形态学依据显然更为可靠。
给动物分类教学设计
《给动物分类》教学设计 嘉善县逸夫小学唐玉珍 【教材简析】 本课将尝试引导学生对前5课认识和研究的动物进行分类练习。分类是认识事物的基本方法，在认识和观察、研究了一定数量的动物后，对动物进行分类，既可以促使学生认识动物的多样性，还可以帮助学生更细致地观察动物的特征，加深对分类对象特征的认识。 按照鸟类、昆虫、鱼类等标准分类是3～4年级的学习目标，因此这节课的分类练习不是动物形态学上的分类，而是以前5课学习和认识的动物为研究对象，由学生自主确定分类标准，进行分类练习活动，重点在于培养学生的比较、辨别和归类能力。在分类的过程中，学生运用前面对动物形态观察时的发现，同时也是对动物特征的再一次观察、认识和提升。本课“单元总结”部分，需要学生回忆动植物的共同特点，初步感知动物和植物都是有生命的。教材提供了10种动物的图片，为体现动物的多样性，教师可适当增加一些学生熟悉的动物的图片。 【学生分析】 学习本单元前的一年级学生，已经能够在无提示的情况下，依据生存环境、食性、外部特征等对动物进行分类，但在昆虫、软体动物等生物学分类发展上，缺乏认知支撑。因此教师要清楚，教材并不是要求学生以动物分类学为标 准，学习和开展分类活动的。 学生要给动物分类，必须建立在了解分类对象特征的基础上。通过前5课的学习，学生已经了解了一些动物的基本特征，并能通过观察、比较，说出动物的某些共同特征。本课分类教学再次让学生运用观察与思考的能力，并以此确定标准，进行分类活动。在分类活动的过程中，再次感受到地球上存在不同的动物，不同的动物具有不同的特征，动物具有多样性，从而促进学生学习和研究动物的热情。考虑到一年级学生的认知特点，他们还没有书写动物名字的能力，因此需要教师指导学生采用编序号的方法来进行分类。 【教学目标】 科学知识的目标 1．大自然中生活着许许多多动物，动物具有多样性。 2．动物之间有相同点和不同点，可以根据一定的标准进行分类。 3．知道按照不同的标准，可以得到不同的分类结果。 科学探究目标 1．能根据一定的标准给动物进行分类。在分类过程中，体会动物的异同，感受动物的多样性。 2．能与同学讨论并形成多种分类标准。 3．通过分类活动，不断完善自己对动物的认识。 ◆科学态度目标 1．愿意倾听并分享他人的分类依据和结果。 2．乐于表达、讲述自己的分类观点。
末梢血涂片白细胞形态变化及临床意义
末梢血涂片白细胞形态变化及临床意义 1. 中性粒细胞核左移 2. 外周血中性杆状粒细胞增高，并可见晚幼粒细胞、中幼粒细胞甚至早幼粒细胞时称为中性粒细胞核 左移。仅见杆状粒细胞>6%时，称为轻度核左移；杆状粒细胞>10%，伴少量晚幼粒细胞、中幼粒细胞时称为中度核左移；杆状粒细胞>25%，出现更幼稚的粒细胞如早幼粒细胞甚至原粒细胞时称为重度核左移。重度核左移又称为类白血病反应，此时中性粒细胞常伴有明显的中毒性病理改变。中性粒细胞核左移常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血等。骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血可见原始、幼稚粒细胞，并出现病态造血，如中性粒细胞核分叶不良等。 图-1 图-2
图-1视野可见中性分叶粒细胞、中性杆状粒细胞、中性晚幼和中幼粒细胞。中性粒细胞胞质中可见中毒颗粒。图-2可见中性分叶粒细胞、中性杆状粒细胞、中幼粒细胞和早幼粒细胞。中性粒细胞胞质中可见中 毒颗粒。 2. 中性粒细胞核右移 正常成熟中性粒细胞胞核以分三叶者为主，如血片中五叶核中性粒细胞>3%，则称为中性粒细胞核右移。核右移常伴有白细胞总数减低和中性粒细胞胞体增大，常见于巨幼细胞性贫血及恶性贫血等。其原因主要是由于缺乏叶酸、VitB12等造血物质，DNA合成减少，影响了细胞的正常分裂。在应用某些抗核酸代谢药 物及炎症恢复期等也可见核右移现象。 图-3 图-3视野中可见一巨大中性粒细胞，胞核分为10余叶。 3. 中性粒细胞中毒颗粒 中毒颗粒(toxic granulation) 中性粒细胞胞质中出现的粗大且分布不均的黑蓝色颗粒，称为中毒颗粒。中毒颗粒是细胞在生成特殊颗粒过程中受到某种阻力或发生颗粒变性所致。常见于严重的化脓菌感染及大 面积烧伤等患者中。
白细胞分类
白细胞分类 一、白细胞的形态、计数和分类 白细胞无色呈球形，有细胞核，体积比红细胞大，直径在7～20μm之间。正常人白细胞计数在4000～10000/mm3范围内，平均为7000/mm3。血涂片中白细胞，经复合染料染色后，可根据其形态差异和细胞质内有无特有的颗粒可分为两大类五种细胞。 1．粒细胞此类白细胞的细胞质内含有特殊着色颗粒。颗粒的着色性质不同又可分为①中性粒细胞；②嗜酸性粒细胞；③嗜碱性粒细胞。应当指出，这种划分并不表示细胞本身或其吞噬对象的酸性或碱性。 2．无粒细胞又可分为单核细胞与淋巴细胞。 此五种细胞各占的百分率称为白细胞分类计数。成年人各种白细胞的分类计数为：中性粒细胞60～70%，嗜酸性粒细胞1～4%，嗜碱性粒细胞0.5%～1%，单核细胞3%～8%，淋巴细胞20%～30%。它们的形态特征见表5-1及图5－4。 检查白细胞总数及各种细胞的分类计数对于临床诊断有一定意义。在新药开发中，为鉴别某种药物对机体有无亚急性和慢性毒性，也往往把它列为检测的项目。白细胞数超过10000/mm3称为白细胞增多症；少于4000/mm3称为白细胞减少症，均属于病理范围。此外，还要注意白细胞分类计数的变化。这些对于诊断机体的疾病有重要意义。 二、白细胞的功能 白细胞是机体防御系统的一个重要组成部分。它通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物。
1．吞噬作用吞噬作用是生物体最古老的，也是最基本的防卫机制之一。对于其要消灭的对象无特异性，在免疫学中称之为非特异性免疫作用。中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用很强，嗜酸性粒细胞虽然游走性很强，但吞噬能力较弱。 白细胞可以通过毛细血管的内皮间隙，从血管内渗出，在组织间隙中游走。它们吞噬侵入的细菌、病毒、寄生虫等病原体和一些坏死的组织碎片。一般认为，白细胞能向异物处聚集，并将其吞噬，这是因为白细胞有趋化性。由于细菌体或死亡的细胞所产生的化学刺激，诱发白细胞向该处移动。组织发炎时产生一种活性多肽，也是白细胞游动的诱发物质之一。 中性粒细胞内的颗粒为溶酶体，内含多种水解酶，能消化其所摄取的病原体或其他异物。一般一个白细胞处理5～25个细菌后，本身也就死亡。死亡的白细胞集团和细菌分解产物构成脓液。 单核细胞由骨髓生成，在血液内仅生活3～4天，即进入肝、脾、肺和淋巴等组织转变为巨噬细胞。变为巨噬细胞后，体积加大，溶酶体增多，吞噬和消化能力也增强。但其吞噬对象主要为进入细胞内的致病物，如病毒、疟原虫和细菌等。巨噬细胞还参与激活淋巴细胞的特异免疫功能。此外，它还具有识别和杀伤肿瘤细胞，清除衰老与损伤细胞的作用。 2．特异性免疫功能淋巴细胞也称免疫细胞，在机体特异性免疫过程中起主要作用。所谓特异性免疫，就是淋巴细胞针对某一种特异性抗原，产生与之相对应的抗体或进行局部性细胞反应，以杀灭特异性抗原。血液中淋巴细胞按其发生和功能的差异，分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两类。 （1）细胞免疫细胞免疫主要是由T细胞来实现的。这种细胞在血液中占淋巴细胞总数的80％～90％。T细胞受抗原刺激变成致敏细胞后，其免疫作用表现以下三个方面。直接接触并攻击具有特异抗原性的异物，如肿瘤细胞，异体移植细胞；分泌多种淋巴因子，破坏含有病原体的细胞或抑制病毒繁殖；B细胞与T细胞起协同作用，互相加强，来杀灭病原微生物。 （2）体液免疫体疫免疫主要是通过B细胞来实现的。当此细胞受到抗原刺激变成具有免疫活性的浆细胞后，产生并分泌多种抗体，即免疫球蛋白，以针对不同的抗原。B细胞内有丰富的粗面内质网，蛋白质合成旺盛。抗体通过与相应抗原发生免疫反应，抗体能中和、沉淀、凝集或溶解抗原，以消除其对抗体的有害作用。 3．嗜碱性和嗜酸性粒细胞的功能这两种细胞在血液中停留时间不长，主要在组织中发生作用。 （1）嗜碱性粒细胞这类细胞的颗粒内含有组织胺、肝素和过敏性慢反应物质等。肝素有抗凝血作用，组织胺可改变毛细血管的通透性。过敏性慢反应物质是一种脂类分子，能引起平滑肌收缩。机体发生过敏反应与这些物质有关。嗜碱性细胞在结缔组织和粘膜上皮内时，称肥大细胞，其结构和功能与嗜碱性细胞相似。
体外细胞培养
第一讲体外细胞培养的基本技术 ●体外细胞培养条件和基本技术 ●体外细胞培养 ●体外培养物的生长生物学 ●细胞系和细胞株 ●培养物的冷冻与复苏 ●培养物的污染、检测和排除 ●一、体外细胞培养条件和基本技术 体外细胞培养的优缺点 优点：简化细胞的生长环境，方便施加实验因素，便于观测实验结果，便于获得均一细胞群，能够进行大规模生物制品的生产。 体外细胞培养不足之处：培养对象脱离了机体的整体支配和调控，细胞间在一定程度上失去组织联系及相互作用。体外培养条件下的生长发育情况与在体时的情况存在一定差异，分析实验结果时必须考虑这种差异。 一、体外细胞培养条件 （一）、体外培养实验室 1. 准备室 2. 培养室：基本条件要求：清洁、无菌、干燥、不通风，并具有适宜的光线。空气调节用中央空调或分体式空调机。室顶安装紫外灯等消毒装置。 3. 缓冲室 4. 其他实验室 （二）、体外培养的设备和器具 设备：1. 超静工作台，生物安全柜，净化室 2. 培养箱：温度，湿度，pH值 3. 倒置显微镜 4. 水净化装置：去离子水净化装置，石英玻璃蒸馏器， 超纯水装置 5. 冰箱 6. 离心机7. 冷冻保存装置 8. 高压蒸汽消毒装置：电热干燥箱，pH计，天平 培养器具：1. 过滤除菌装置：Zeiss 滤器，抽滤式玻璃简易型滤器， 针头式加压塑料小滤器 2. 培养器皿：（1）溶液瓶（2）培养瓶（3）培养皿 （4）多孔培养板（5）离心管 3. 移液器 4.筛网：金属筛网（不锈钢网、铜网），尼龙筛网 （三）培养用液 ?水和平衡盐溶液（balanced salt solution, BSS) 水：离子交换水，蒸馏水 平衡盐溶液：主要成分：无机盐和葡萄糖 常用BSS: PBS ，Ringer Earle ，D-Hanks，Hanks ?培养液：1.天然培养液：1）血清：小牛血清,胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）,马血清，2）水解乳蛋白，3）胚胎渗出液 2.合成培养液：合成培养基的种类MEM，RPMI 1640，McCoy 5A，HAM F12等
人体八种白细胞类型
白细胞亦称白血球，它的功能是使机体免受病原体（细菌和病毒）、癌细胞、异物侵入，是人体的守卫者。白细胞来源于骨髓中的造血干细胞，在骨髓中发育后进入血液和淋巴液循环，也存在于血管和淋巴管外的组织中。 人体中白细胞有八种类型，具体细胞类型如下。 1 巨噬细胞 巨噬细胞是个头最大的白细胞。 巨噬细胞由单核细胞分化发育而来，单核细胞几乎存在于所有组织中。巨噬细胞对细胞残体和病原体进行吞噬和消化，这一过程称为吞噬作用。巨噬细胞内的溶酶体会释放溶菌酶破坏病原体。吞噬细胞还是参与适应性免疫的专职抗原提呈细胞。除了免疫功能外，吞噬细胞还扮演者促进生殖 细胞发育、性激素、骨组织的再吸收以及血络的形成。巨噬细胞如下图所示： 2 树突状细胞 类似于吞噬细胞，树突状细胞也是一种单核细胞。树突状细胞成熟时会伸出许多树突样或伪足样突起，与神经元的树突相似。树突状细胞通常存在于跟外界接触的皮膜(黏膜)部位，比如皮肤、内层的鼻子、肺、胃与肠的内层。树突状细胞通过摄取、加工处理和递呈抗原到淋巴结和淋巴器官 中的淋巴细胞帮助机体识别病原体，启动特异性免疫应答。树突状细胞如下图所示： 3 B淋巴细胞 B细胞是淋巴细胞的成分之一。B细胞受抗原刺激后，会增合成和分泌一种特殊的蛋白质——抗体对抗病原体，抗体与抗原结合帮助机体识别病原体，并使之成为靶细胞被其他免疫细胞清除。被称为记忆细胞的B细胞可以保持对病原菌生物分子标记物的记忆，使得同一种抗原再次进入机体 时免受感染。这使得机体保持针对特定病原体的长期免疫力。B淋巴细胞如下图所示： 4 T淋巴细胞 类似于B细胞，T细胞也是淋巴细胞之一。T淋巴细胞来源于骨髓，迁移到胸腺内分化成熟。T 细胞通过直接杀伤靶细胞和释放淋巴因子参与免疫反应。T细胞包括细胞毒性T细胞、辅助性T细胞、抑制性T细胞、自然杀伤T细胞和记忆T细胞。细胞毒性T细胞直接杀伤靶细胞，辅助性T细胞协助B细胞产生抗体，抑制性T细胞抑制B细胞和其他T细胞对抗原的免疫应答。 NKT细胞具有T细胞和NK细胞两重性质，但是NKT细胞不是NK细胞而是T细胞。T淋巴细胞 如下图所示： 5 自然杀伤细胞 自然杀伤细胞是分布于血液循环的淋巴细胞，它能识别被感染细胞和衰老细胞。NK细胞含有化学颗粒，NK细胞能够识别肿瘤或病毒感染的细胞，通过释放化学颗粒吞噬破坏病变细胞。这些化学颗粒能溶解病变细胞的细胞膜，促使细胞凋亡,最终杀伤靶细胞。 同时应该区分NK细胞和某些T细胞，比如NKT细胞，不要相互混淆。自然杀伤细胞如下图所 示： 6 嗜中性粒细胞
动物分类及图片
动物分类及图片标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]
动物的分类 爬行类动物、飞禽类动物、哺乳类动物、昆虫类动物、家禽类动物、鱼类动物、食肉类 动物。 爬行类动物: 蛇蜥蜴 蛇蜥蜴壁虎、龟、鳖、鳄鱼等属于脊椎动物亚门。它们的身体构造和生理机能比两栖类更能适应陆地生活环境。身体已明显分为头、颈、躯干、四肢和尾部。颈部较发达，可以灵活转动，增加了捕食能力，能更充分发挥头部眼等感觉器官的功能。骨骼发达，对于支持身体、保护内脏和增强运动能力都提供了条件。用肺呼吸，心脏由两心耳和分隔不完全的两心室构成，逐步向把动脉血和静脉血分隔开的方向进化。大脑结构比两栖类有了进一步发展，感觉器官也增加了复杂程度，功能增强。在爬行动物的生殖发育过程中，卵的结构和胚胎发育也出现一些变化，卵外包着坚硬的石灰质外壳，能防止卵内水分的蒸发，同时是体内受精，摆脱了生殖发育中受精时对水的依赖；胚胎发育中出现羊膜和羊水，胚胎可以在羊水中发育，既可防止干燥，又能避免机械损伤。爬行动物在中生代很繁盛，几乎遍布全球，恐龙就是当时的代表。以后由于气候和地壳的变动，绝大多数种类灭绝。现存种类约5000多种，常见的有蜥蜴、蛇、龟、鳖、鳄鱼等。爬行纲是体被角质鳞或硬甲、在陆地繁殖的变温羊膜动物（Amniota）。是一支从古两栖类在古生代石炭纪末期分化出来产的类群，它们不但继承了两栖动物初步登陆的特性，而且在防止体内水分蒸发，以及适应陆地生活和繁殖等方面，获得了进一步发展。爬行类是真正的陆栖脊椎动物，同时古爬行类还是鸟、兽等更高等的恒温羊膜动物的演化原祖，因此，本纲动物在脊椎动物进化中具有承上启下、继往开来的重要意义。爬行纲在地质史的中生代曾盛极一时，种类和数量极其繁多，在中生代的末期出现衰退。现存种类只包括鳄、龟、蜥蜴和蛇等动物。其中个体最大的是产于亚洲东南部的网蟒（Python reticulatus），全长可达9．9m，而最小的蜥蜴为斑点圆趾虎（Sphaeroda ctylus argus），全长却只有36mm。除南极地区外，分布几乎遍及全球而尤以南半球的种类更为繁多，能栖息于平原、山地、森林、草原、荒漠。海洋和内陆水域等各种生活环境，少数几种蜥蜴（西藏沙蜥 Phrynocephalus theobaldi、红尾沙蜥 P. erythruru s）的最高垂直分布点可达海拔五千多米的青藏高原寒漠地带。爬行动物真正脱离水环境的特点爬行动物是体被鳞片或硬甲、在陆地繁殖的变温羊膜动物。爬行动物由石炭纪末期的古代两栖类进化而来，是真正适应陆栖生活的最高等的变温脊椎动物。 飞禽类动物：
白细胞五分类原理和散点图特征
血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征2008-12-14来源:检验世界网浏览:5747次转发至：我要评论【字号：大中小】 核心提示：本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章。赞 北京协和医院检验科张时民检验地带网 血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。 本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。 目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较着名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex 和NihonKohdon。在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。 检验地带网 一简要发展史 1974年，一种名为HEMALOGD的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。Technicon公司1985年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的TechniconH1型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987年开发研制其经典VCS技术，并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM型。 1990年前后，欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪，其在白细胞分类技术上原理各不相同，分析测定项目略有不同，且形式多样，结构复杂，试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品（试剂）价格的增加。 检验地带网 二仪器原理和散点图特点 1体积、电导和激光散射原理 这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血
动物分类及特征
动物分类及特征 动物系统经历了由简单到复杂，由低级到高级的进化历程，生活在今天地球上的动物大约有150万种。一般将动物界分为34个门，在此我们仅介绍主要的、在进化上占主线的门类。 一、原生动物门（Protozoa） 原生动物是最原始和最低等的动物类群。它们多数是单细胞生物，极少数是由几个或多个细胞构成群体。原生动物的细胞是真核细胞，具有细胞的结构特征，如细胞膜、细胞质、细胞核及其他细胞器。原生动物的细胞又是一个完整的生命体，具有多细胞生物表现出的生命功能，如从环境种吸取营养、呼吸、排泄、生殖，能够对外界的刺激产生反应等。这些功能是细胞或由细胞特化而成的细胞器来完成的。 二、腔肠动物门（Coelenterata） 腔肠动物是真正的二胚层多细胞后生动物，如水螅（Hydra）。 ⒈腔肠动物的主要特征 第一，辐射对称。第二，有两胚层。第三，有组织分化。 ⒉腔肠动物的生殖方式包括无性生殖和有性生殖。无性生殖最普遍的是出芽生殖。有性生殖在其生殖期产生精巢和卵巢，雌雄同体。薮枝螅有明显的世代交替，这是动物中少有的特征。 三、扁形动物门（Platyhelminthes） 扁形动物包括涡虫、日本血吸虫、牛绦虫等。 ⒈扁形动物的进化特征 第一，两侧对称。第二，三胚层出现。第三，器官系统分化。 ⒉扁形动物分类 扁形动物约有7000种，分3个纲：涡虫纲（Turbellaria）、吸虫纲（Trematoda）和绦虫纲（Cestoioda）。 四、线形动物门（Nemathelminthes） 线形动物是一大类群，在动物系统进化上，出现了一个进步性的特征，即假体腔（primarycoelom），如人蛔虫（Ascaris lumbricoides）。人蛔虫营肠内寄生，身体表面覆盖着角质层，体内器官退化，生殖器官特别发达，雌雄异体。 五、环节动物门（Annelida） 环节动物包括各种蚯蚓、沙蚕、蚂蟥等。环节动物在动物系统进化上具有重要意义。 ⒈环节动物的进化特征 第一，身体出现分节现象（metamerism），这是高等无脊椎动物的一个重要标志。然而环节动物的分节，仍属原始分节现象。 第二，环节动物出现了真体腔（coelom），真体腔是由中胚层分化出来的，由壁体腔膜和脏体腔膜围绕而成，因而体壁和肠壁都有发达的肌肉。 第三，环节动物器官系统较完善 ⒉环节动物分类 多毛纲（Polychaeta），如沙蚕，海产，有发达的头部和疣足，雌雄异体，发育经过担轮幼虫期。 寡毛纲（Oligochaeta），如环毛蚓，无疣足而有刚毛，有生殖带，雌雄同体，发育经过担轮幼虫期。 蛭纲（Hirudinca），如蛭，亦叫蚂蟥，无疣足无刚毛，体节数目固定，身体前后端有吸盘，营寄生或半寄生生活。
如何认识血常规中白细胞和分类值的意义
如何认识血常规中白细胞和分类值的意义 全网发布：2012-07-24 23:00 发表者：陈贤楠(访问人次：33653) 血常规中的白细胞总数和分类是临床医生诊断和治疗疾病重要的参考资料，尤其在儿科急性发热、感染性疾病诊治中，血常规检查常是区别细菌性感染或病毒感染以及感染严重度必不可少的手段。但我在日常工作中也经常发现，某些家长或医生由于对白细胞总数和分类分析的片面性，导致抗生素滥用或疾病严重度判断的偏移。在此作简短讨论并提出自己的看法：北京儿童医院感染内科陈贤楠 一、必须牢记以下的基本概念： 1、白细胞总数(WBC)和分类(包括绝对值和相对百分数)值反映的是炎症指标，换言之，感染性炎症和非感染性炎症均可以引起上述参数的变化。 2、在儿科发热的患儿，白细胞和分类值常反映感染性炎症，也常作为鉴别细菌性或非细菌性感染的指标。即：细菌性感染常表现为白细胞总数和中性粒细胞绝对值和百分数升高。 3、但是在复杂性慢性、反复性发作的疾病（如哮喘、过敏咳嗽、过敏肠病等）和重症感染又伴有全身炎症反应（如各种病原体引起的重症感染、感染性休克）时，上述数值的判断必须慎重，因为它既受感染性炎症，又受非感染炎症的影响。 4、病毒感染时通常白细胞正常或减少，分类中淋巴细胞比例增加，但某些特殊病毒或病毒感染综合征时白细胞总数和中性粒细胞可增高。 5、白细胞总数和分类，作为血常规三项重要信息之一(其他二项是红细胞和血小板计数)，也是血液病和骨髓功能重要指标。如白白血病、白细胞减少症等。 二、当前儿科门诊对血常规白细胞总数分析的常见偏移和误区有： 1、以成人的白细胞和分类正常值来判断小儿的化验值。小儿各年龄段血常规中白细胞级分类有很大的不同（见下表）；白细胞主要分粒细胞(包括嗜中性、嗜酸性和嗜碱性)和淋巴细胞(单核细胞)。白细胞的分类中以粒细胞和淋巴细胞的变化比较突出：生后4～6天至～4～6岁期间以淋巴细胞（lymphocyte,L）占优势约占60%为主，中性粒细胞(neutrophil,N)约为30%；而在出生后4～6天前和4～6岁后直至成人则以中性粒细胞为优势，约占65%。 白细胞值正常范围在国内外不同教科书中有所不同的，但各年龄组的变化趋势是一致的。而目前个医院包括儿童医院化验单上均以成人正常值为标准，不少儿科医生也以此标准值去判断不同年龄患儿，这是一个很大的误区，也是抗生素滥用的重要原因。 2、白细胞和分类值增高作为感染疾病未愈的指标、作为继续应用抗生素的证据。许多家长因为化验白细胞高而不敢停用抗生素。事实上对只咳嗽不发热，没有明显感染病灶的孩子轻度的白细胞增加没有太大意义，更不能区分是细菌或病毒感染。因为有多种因素可以引起血常规中白细胞总数增高，如精神紧张、哭闹、运动或活动、预防接种，疼痛刺激等等。一天中的不同时间，服药、食物等也可使白细胞值改变。有人观察到：在12～24小时内，没有任何干预情况下，血常规中的白细胞计数可以由15.0~20.0×109/L下降至10.0×109/L（即从每立方毫米1.5万～2万降至1万以下）。 3、过度解读白细胞总数和分类，如机械、简单地用来判断感染病原体、抗生素选择的指标。 三、白细胞生成、循环和清除过程--有利于纠正上述误区 以上已提及：白细胞主要由粒细胞和淋巴细胞组成。以白细胞中占优势的中性粒细胞为例：
简单实用动物分类表
简单实用动物分类表 （大连理工大学王栋整理） 2013年11月5日 按照动物的外在形态和内在结构相似相亲的原则进行分类。思考一下，这表是怎么做出来的？向动物学家表示致敬和感谢。 共性个性由此表再一次想一想分类的事情，看来由个性总结共性是个有难度的事情
按照大概的历史发生顺序的路线进行分类表达，注意分类特征的共性和个性之间的依据和联系。 （分类的所属，不同学者观点也不尽相同，故不同的资料对物种的所属常常不同，经常会发生归属的调整变化，目前动物分类比植物分类困难，可能是动物的变异很急速多样，组织器官研究困难，生理机能复杂等因素造成的吧？即使如此，我们也很感谢那些动物分类的人们。动物分类的一个好处是起码可让我们吃得更明白些。到动物园游览得更快乐些） I. 原生动物门 一个细胞构成 1.鞭毛虫纲：动鞭亚纲、植鞭亚纲 2.肉足虫纲：变形虫，痢疾 3.孢子虫纲 II 海绵动物门 1.普通海绵纲： III 腔肠动物门 在进化上居重要地位，首先出现了胚层分化。身体辐射对称，有简单的组织分化，其中上皮组织占优势。基本形态有水螅型和水母型。 1.水螅纲：桃花水母 2.钵水母纲：海蜇 3.珊瑚虫纲：红珊瑚、海葵 IV.原腔动物门 1.线虫纲：蛔虫、线虫 2.轮虫纲：轮虫 V环节动物门 1.多毛纲：沙蚕 2.寡毛纲：蚯蚓 3.蛭纲：蚂蝗 VI 软体动物门 物种类繁多，生活范围极广，海水、淡水和陆地均有产。已记载130000多种，仅次于节肢动物，为动物界的第二大门。 1.无板纲：蛏子 2.单板纲：绝大多数为化石，鲍鱼 3.多板纲： 4.掘足纲：角贝 5.双壳纲：河蚌、牡蛎、贻贝 6.腹足纲：蜗牛、田螺 7.头足纲：乌贼、章鱼 VII 节肢动物门（外骨内肉） 1.甲壳纲：（分类很复杂，用途很广泛，研究利益大） 1.1软甲亚纲 1.1.1等足目：卷甲虫
最新 人脂肪间充质干细胞体外分离培养方法-精品
人脂肪间充质干细胞体外分离培养方法 间充质干细胞属于成体干细胞，广泛存在于骨髓、脂肪和脐带等组织，下面是小编搜集整理的一篇探究干细胞体外分离培养方法的，供大家阅读查看。 大面积皮肤缺损、重度烧伤的传统修复方法-自体或异体皮肤移植，因存在免疫排斥和供区不足等缺陷而限制了广泛临床应用。近年来，干细胞相关机制及应用的研究为皮肤创伤的治疗带来了新突破。研究显示，间充质干细胞能维持皮肤稳态和促进皮肤创面修复，其机制包括促进细胞分化、免疫调节和分泌生长因子来促进创面再上皮化和血管形成[1-2].人脂肪间充质干细胞(humanadipose-derivedmesenchymalstemcells,hAD-SCs)是由Zuk等[3]首次从抽脂术脂肪中分离出的一类具有多向分化能力的细胞群，因其具有来源丰富、容易获取和扩增快等优点，是组织工程的理想种子细胞。本实验旨在提供一种有效的hADSCs体外分离培养方法，为以后临床细胞移植提供实验基础。 1材料与方法 1.1材料成人腹部大网膜脂肪组织7例取自江苏大学附属医院产科剖宫产手术患者，年龄17~33岁，平均为26岁，健康状况良好，无系统性疾病。低/高糖DMEM、Ⅰ型胶原酶(Gibco公司),胎牛血清(Hyclone公司),鼠抗人单克隆抗体CD29-FITC、CD44-FITC、CD45-FITC、CD73-FITC、CD90-PE、CD105-PE、CD166-PE、HLA-DR-PE及其相应同型对照(eBio-sciences公司),地塞米松、抗坏血酸磷酸盐、β-甘油磷酸钠、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、胰岛素(Sigma公司). 1.2方法 1.2.1hADSCs细胞分离培养产科无菌条件下取出腹部大网膜脂肪组织约 10ml,PBS清洗，剪碎，0.1%Ⅰ型胶原酶37℃消化45min,10%胎牛血清终止消化，离心，沉淀重悬，200目细胞筛过滤，再离心。加入完全培养液(含10%胎牛血清、1×双抗的低糖DMEM)重悬，以5×104/ml接种于6孔板，置于37℃,5%CO2培养箱中培养，48h后首次换液，之后每周换液2次，待细胞生长至80%融合时，0.25%胰酶-0.02%EDTA消化传代。实验时用第3~9代细胞。 1.2.2细胞免疫表型检测取消化消化贴壁的第3代hADSCs,1000r/min离心5min,用PBS重悬分装于1.5ml的EP管中，每管100μl,细胞密度为105/ml,加入鼠抗人CD29、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD166E、HLA-DR等单克隆抗体及其同型对照。4℃避光孵育30min,PBS洗2次，加PBS300μl重悬后流式细胞仪检测细胞表面抗原。 1.2.3细胞生长曲线和倍增时间取处于对数生长期的第3、6和9代细胞，消化贴壁细胞，将细胞按5×103/孔接种于24孔板，分7组，每组3孔，置培养箱培养。每24h用台盼蓝计数一次，每次计3孔，取其平均数;连续计数7d,
白细胞分类计数的临床意义
白细胞分类计数的临床意义 人体内白细胞总数和种类白细胞的百分比是相对稳定的。正常人每立方毫米的血液时白细胞为止5000～10000个。各种白细胞的百分比为：中性粒细胞50～70％；嗜酸性粒细胞1～4％；嗜好碱性粒细胞0～1％；淋巴细胞20～40％；单核细胞为1～7％。机体发生炎症或其他疾病都可引起白细胞总数及各种白细胞的百分比发生变化，因此检查白细胞总数及白细胞分类计数成为辅助诊断的一种重要方法。 粪便中的白细胞当肠道有炎症时增多其数量多少与炎症轻重及部位有关偑晩鄌回閳呀。小肠炎症时白细胞数量不多丂毡鞔蹑雉鞙，均匀混合于粪便内且因细胞部分被消化而不易辨认。佯爬癋觝韏亨鳅结肠炎症如菌痢时亢曣蛡钆醰蜇，白细胞大量出现甚至满视野仼托磺醠闍韫嫊媳，并可见到退化的白细胞，还可见到边缘已不完整或已破碎核不清楚、成堆的脓细胞。过敏性肠炎肠道寄生虫病（如阿米巴痢疾或钩虫病）时粪便中有时还伴有夏科-雷登伇気销详銄僀 （Charcot-Leyden）両松铵鐂鎥结晶，如用瑞氏染液染色可见到嗜酸性粒细胞。 流行病学及临床研究发现，白细胞与脑血管病的发生和预后有关。文献报道，对10000余人两年的观察研究表明，白细胞增高是脑梗死的先兆之一；而中性粒细胞增高的相关性最大，尤其小于65岁组最明显。血中白细胞数越高，发生脑梗死的危险性越大。梗死组织周围有白细胞浸润，且梗死灶周围的毛细血管存在白细胞聚集现象。对脑血管病患者白细胞的流变性研究，亦发现白细胞在脑血管病的病理生理过程中起着重要作用。 白细胞计数（WBC） 白细胞计数（WBC）介绍： 白细胞计数是指计数单位体积血液中所含的白细胞数目。旧称白血球，是机体防御系统的重要组成部分 白细胞计数（WBC）原理： 用白细胞计数稀释液（多用稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，滴入庆数盘中，在显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。 白细胞计数（WBC）正常值： 成人（4.0～10.0）×109／L； 儿童（5.0～12.0 ）×109／L；
胚胎干细胞体外培养
胚胎干细胞体外培养 (一)胚胎干细胞的来源 目前胚胎干细胞的主要来源有：①囊胚的ICM及受精卵发育至桑葚胚之前的早期胚胎细胞；②从胚胎生殖嵴及肠系膜中分离原始生殖细胞PGCs后培养建系的胚胎生殖细胞(embryonic germ cells，EG细胞)，也具有ESCs的特性，可以分化为各种类型的成熟细胞；③体细胞核转移(somatic cell nuclear transplantation，SCNT)至去核卵母细胞后培育出来的全能细胞。其中囊胚的ICM最为常用。 (二)胚胎干细胞的分离 1.分离获取ESCs的时间：以既保证ESCs的全能性又要有足够的细胞数量为原则来确定ESCs分离获取的最佳时间。以ICM为ESCs来源时：小鼠取3～5天囊胚；猪取9～10天囊胚；羊取7～8天囊胚；牛取6～7天桑葚胚或早期囊胚；人取7～10天囊胚。以PGCs取ES细胞时：小鼠取1 2.5天胎儿生殖嵴；大鼠可取10.5天尿囊、中胚层组织块、12.5天背肠系膜或1 3.5～1 4.5天生殖嵴；牛取29～35天胎儿生殖嵴；人取35～63天的生殖嵴。 2.分离获取ESCs的方法：从PGCs分离ESCs的方法常为机械剪切与消化相结合法，即把采取的胚胎组织充分剪碎，采用EDTA、EDTA/胰酶消化。 从囊胚分离ICM的方法主要有三种： (1)免疫外科学方法：体外培养的小鼠胚泡去除透明带后，经兔抗JCR小鼠脾脏细胞抗血清(抗H-26)作用30分钟，移至1∶6稀释的新鲜豚鼠血清中作用30分钟，Hank’s液冲洗，此时胚泡的滋养外胚层呈空泡状，用眼科手术刀挑去死了的滋养层细胞，留存ICM 细胞用于培养。这种方法利用囊胚腔对抗体的不通透性，通过抗体、补体结合对细胞的毒性杀伤作用，去除滋养层细胞，保留ICM细胞进行培养。 (2)组织培养法：在小鼠受精2.5天后切除卵巢，给予外源激素，使胚胎继续发育，但延缓着床，4～6天后，由子宫冲取胚泡进行培养。结果滋养层细胞生长并推开饲养层细胞，在培养皿底壁上铺展；而ICM细胞增殖，垂直向上生长，形成卵圆柱状结构，在显微镜下用细玻璃针挑出这种柱状结构，消化传代。Evans和Kaufman采用这种方法第一个建立了小鼠ESCs系。 (3)显微外科学方法：小鼠受精后3～4天，由子宫冲取胚泡，利用显微操作系统直接从胚泡中吸出ICM细胞进行培养。 由于免疫外科学方法需要特殊的试剂去除透明带和滋养层，易对内细胞群造成损伤，而显微外科学方法需要专门的仪器设备，且对人员的技术水平要求较高，均难以推广应用。组织培养法将胚泡接种在饲养层上，模拟体内胚泡的着床，更接近自然发育过程，内细胞群增殖旺盛，较易获得胚胎干细胞样集落。 (三)胚胎干细胞的培养和建系 ESCs的分离培养和建系是其得以应用的前提。ESCs建系的原理是：将分离获取的ICM 或PGCs与饲养层共同培养，使之增殖而又保持其未分化状态，这样代代相传从而使ESCs
动物分类及图片
动物的分类 爬行类动物、飞禽类动物、哺乳类动物、昆虫类动物、家禽类动物、鱼类动物、食肉类动物。爬行类动物: 蛇蜥蜴 蛇蜥蜴壁虎、龟、鳖、鳄鱼等属于脊椎动物亚门。它们的身体构造和生理机能比两栖类更能适应陆地生活环境。身体已明显分为头、颈、躯干、四肢和尾部。颈部较发达，可以灵活转动，增加了捕食能力，能更充分发挥头部眼等感觉器官的功能。骨骼发达，对于支持身体、保护内脏和增强运动能力都提供了条件。用肺呼吸，心脏由两心耳和分隔不完全的两心室构成，逐步向把动脉血和静脉血分隔开的方向进化。大脑结构比两栖类有了进一步发展，感觉器官也增加了复杂程度，功能增强。在爬行动物的生殖发育过程中，卵的结构和胚胎发育也出现一些变化，卵外包着坚硬的石灰质外壳，能防止卵内水分的蒸发，同时是体内受精，摆脱了生殖发育中受精时对水的依赖；胚胎发育中出现羊膜和羊水，胚胎可以在羊水中发育，既可防止干燥，又能避免机械损伤。爬行动物在中生代很繁盛，几乎遍布全球，恐龙就是当时的代表。以后由于气候和地壳的变动，绝大多数种类灭绝。现存种类约5000多种，常见的有蜥蜴、蛇、龟、鳖、鳄鱼等。爬行纲是体被角质鳞或硬甲、在陆地繁殖的变温羊膜动物（Amniota）。是一支从古两栖类在古生代石炭纪末期分化出来产羊膜卵的类群，它们不但继承了两栖动物初步登陆的特性，而且在防止体内水分蒸发，以及适应陆地生活和繁殖等方面，获得了进一步发展。爬行类是真正的陆栖脊椎动物，同时古爬行类还是鸟、兽等更高等的恒温羊膜动物的演化原祖，因此，本纲动物在脊椎动物进化中具有承上启下、继往开来的重要意义。爬行纲在地质史的中生代曾盛极一时，种类和数量极其繁多，在中生代的末期出现衰退。现存种类只包括鳄、龟、蜥蜴和蛇等动物。其中个体最大的是产于亚洲东南部的网蟒（Python reticulatus），全长可达9．9m，而最小的蜥蜴为斑点圆趾虎（Spha erodactylus argus），全长却只有36mm。除南极地区外，分布几乎遍及全球而尤以南半球的种类更为繁多，能栖息于平原、山地、森林、草原、荒漠。海洋和内陆水域等各种生活环境，少数几种蜥蜴（西藏沙蜥Phrynocephalus theobaldi、红尾沙蜥P. erythrurus）的最高垂
人脂肪干细胞(ADSCs)体外培养的研究及应用进展
龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/2e19097458.html, 人脂肪干细胞（ADSCs）体外培养的研究及应用进展 作者：徐巧瑜等 来源：《中国美容医学》2012年第13期 干细胞是一类具有自我更新与增殖能力的细胞，按其分化阶段不同分为胚胎干细胞与成体干细胞，目前对成体干细胞的研究较为广泛。人的脂肪干细胞（adipase derived stem cells，ADSCs）是来源于脂肪组织的干细胞，具有自我更新及多向分化的能力，在适宜诱导条件下可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。自从2001年ZUK[1]首次通过吸脂术抽取脂肪组织悬液培养出多能干细胞，ADSCs因其取材方便，一次取材获取的细胞数量大，对供体创伤 小等优点已成为近年来种子细胞的研究热点。 1 ADSCs的获取 脂肪组织是人体中含量最丰富的组织，占正常体重的10%～29%[2]。它的存在主要有两种形式：棕色脂肪组织及白色脂肪组织。其中棕色脂肪组织仅在婴儿期发挥作用，而白色脂肪组织在人体起到储存及释放能量的调节器作用，主要分布在腹腔内的网膜、肠、肾周及臀部、大腿、腹部的皮下区域[3]。因此研究重点集中在白色脂肪组织。目前，ADSCs主要通过局部脂肪切除术及抽脂术后的脂肪组织中获取，但Vallee等[4]发现由抽脂术获得的脂肪有更好的成 脂潜力、重建三维脂肪替代物能力。供者的年龄也是影响ADSCs的因素。一般来说供者的年龄越小，细胞增生能力越好，反之亦然。然而，AustL等[5]却认为ADSCs的衰老与供体的体质指数呈负相关，而与年龄无关。取材部位不同，ADSCs数量凋亡倾向也不同。Schipper等[6]发现人前臂脂肪组织中含有更多的脂肪干细胞，而腹部的ADSCs不容易凋亡；腹部似乎比臀部或大腿更有利于获取ADSCs[7]。 2 ADSCs分离培养 2.1分离：目前常用的是酶消化法，将脂肪组织剪碎后采用胶原酶或胰酶消化、过滤离心后，使用含血清的培养基将沉淀重悬后接种于培养瓶中。沉淀物是多种细胞的混合物，又称为血管基质成分（Stromal vascular fraction，SVF），其中含有内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞、前脂肪细胞、间充质干细胞及血液来源的细胞，常需传代来纯化。 2.2 培养：体外培养需要合适的生长条件，培养基的选择很重要。常用的培养基有DMEM、a-MEM、RPMI1640。Lee等[8]报道L-DMEM比a-MEM更适合培养ADSCs。Mischen等[9]研究表明低糖更有利于维持ADSC的多分化潜能，而培养液中的抗生素对ADSC 的细胞表型和分化能力无影响。Bunnell等[10]认为25%血清浓度可能使ADSC向脂肪细胞分化，而低氧低血清可增加ADSC凋亡。对于最优的糖浓度及血清浓度尚不明确。为了消除动物血清的使用带来的不良影响，部分文献开始介绍低人血清培养基或无血清培养基的使用。
细胞体外培养时为什么会贴到培养皿壁上
生物学通报２００７年第４２卷第９期细胞体外培养时为什么会贴到培养皿壁上 刘梅芳徐国恒‘（北京大学医学都生理系北京１０００８３） 北京市第２２中学的生物学教师陈珊问：动物细胞培养时为什么会出现贴壁现象？ 答：第１。绝大部分细胞在机体内的环境下是与其他细胞或者细胞外基质结合的，不是孤立存在的。第２，细胞与细胞或者细胞外基质结合的物质基础以及在体外培养中贴壁的物质基础是什么。 在体内，大部分细胞不是孤立存在的（血液中的细胞除外）。一般一种细胞具有一种特定的功能．不同种细胞有机组合在一起就构成能够完成较为完整的一项功能的器官。细胞之问，细胞与细胞外基质之间结合在一起，这使得每一部分组织或者器官具有一定的外形及特定的功能。血液在体内是起运输作用的，不停地流动，要通过只有几个“ｍ的毛细血管，所以血液中的细胞是单个存在的。否则就会发生血管阻塞。但是它们受到刺激．其表面与黏附有关的蛋白会被激活然后与其他细胞或细胞外基质结合．如血小板接触到破损内皮下的胶原被激活而黏附在局部，从而发挥止血的功能；如巨噬细胞可以将衰老的红细胞、血液中凋亡的中性粒细胞结合并将其吞噬，这些都应该是属于细胞之间的结合。另外有些研究表明细胞必须与其他的细胞发生联系才能够生存．如果没有其他细胞或者细胞外基质与之结合．此细胞就会发生凋亡，称为失巢凋亡。 细胞在体外培养的条件下的贴壁，首先并不是所有的细胞在体外培养的情况下都会贴壁，但大部分来自实体组织器官的细胞都会贴壁。贴壁的过程可能是这样的。细胞首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（培养瓶，培养皿的底面），然后细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。所以细胞贴壁与否与细胞本身分泌细胞外基质的能力以及细胞本身表达的黏附分子的数量有关，也与培养皿壁的表面结构有关。 细胞贴壁的过程使形态发生很大变化．细胞变形运动是细胞内骨架本身和细胞外基质共同作用的结果。细胞为什么要贴壁，可以想象一下．密度大于培养基的细胞（绝大部分细胞）会沉在底面上，那么细胞要生存必定改善这个环境。分泌细胞外基质，然后很自然就贴附在底面上了，而悬浮细胞．如淋巴细胞由于重力原因沉在培养瓶的底面，但是并不贴附，这可能与细胞表面的黏附分子少，以及分泌的细胞外基质过少有关．有人研究用细胞外基质处理培养器皿的底面．即增加细胞外基质，可以使悬浮的淋巴细胞贴壁。另外悬浮生长的细胞系ＴＨＰ一１受到某些药物刺激之后也可以贴壁．这可能与细胞本身分泌的细胞外基质以及细胞表面的黏附分子表达增多有关。密度小于水的细胞，如脂肪细胞，漂浮在液面上。所以不可能贴在底面上．但是如果将培养液加满，那么细胞能够与培养瓶上面的壁接触同样可以贴壁。因此可以说，细胞贴壁是适应环境的一种反应。 （Ｅ—ＩＩｌａｉｌ：ｘｕｇ＠ｂｊｗＬＩ．ｅｄｕ．ｃｎ） （ＢＨ） 欢迎订阅２００８年《生物学教学》杂志 《生物学教学）杂志是由华东师范大学主办，向国内外正式发行的全国教育类核心期刊。国内统一刊号：ｃＮ３１一Ｉ００９，ｃ４．国际标准刊号：１００４—７５４９。读者对象以中学生物学教师为主，兼顾高校和其他生物学工作者。主要栏目有：生物科学综述、国家课程标准与实验教材、现代教育论坛、教育教学研究、课堂教学设计与实践、信息技术、国外教育动态、考试与命题、实验教学、科技活动、教学参考、生物学科技信息、科学技术与社会、读者之窗等。另外，封面、封底刊登生物照片。 《生物学教学》杂志为８０页，月刊，国际标准１６Ｋ，２００８年定价：７．００元，全年８４元。国内订购：全国各地邮局，代号４—４５０。国外订购：中国国际图书贸易公司（北京３９９信箱，邮编：１０００４４），代号：Ｍ５１０５。如果错过了邮局订购时间，可以与杂志社联系邮购。杂志社地址：华东师范大学《生物学教学》杂志社，邮编：２０００６２．电话０２ｌ一６２２３２２２５。电子信箱：ｓｗｘｉｗ＠ｂｉｏ．ｅｃｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。